艾滋病实验室检查 PPT
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HIV实验室检测ppt课件
0.04(NEG )
/
P24 (不确定)
134 P24 0.01(NEG HIV RNA 02 2011/12/1 / 4.49(POS) (不确定 ) (NEG) 2 Combi 试剂2次均出现阳性结果，P24抗原也均出现条带，但 ) • 罗氏HIV HIV-RNA分析病毒为阴性，最终报告为阴性，该患者实为淋巴瘤，分析 时注意干扰因素
WB P24 (不确定)
01
/
p24,p31 105 ，p51, 302.7(POS 11.09 1.8X105 02 2012/05/2 / p66, ) (POS) (POS) 5 gp120， gp160 • 该患者第1次检测罗氏HIV Combi PT和HIV Combi均为阳性、 ELISA为阴性、 HIVAg检测阳性，患者不同意做确证实验，在105天后第2次采血，罗氏HIV Combi PT 和国产ELISA法检出阳性，WB分析检出较多抗原亚类，实验室作HIV- RNA高精分析
•
淋巴瘤患者、孕妇、肿瘤病人、透析患者4种病人都可能出现HIV初筛阳
性，需特别对待
23
Case分享
• 华西案例分析 CASE 2 HIV Combi (COI) 2.59 (POS) ELISA (S/CO) 0.04 (NEG) HIV RNA （高精分析 ）
WUXX Men Days since HIV Combi 30 Y first bleed PT (COI) 0 2012/02/1 0 51.15 (POS)
7
HIV实验室指标
初筛试验+确证试验 备注
筛查试验：ELISA, CIA, ECLIA 确证试验：WB, RIBA 仅测抗体 早期灵敏度更高
血清学检测
艾滋病实验室检测(妇保)ppt课件
复检试验
使用原有试剂和另外一种不同原理或另外两 种不同原理（或厂家）的试剂进行复检。如两种 均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性（-）；如 均呈阳性反应，或一阴一阳，需进行确证试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复 检必须包括一种抗原抗体联合试剂。如果抗原抗 体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为 阴性反应，则应考虑进行HIV-1 p24抗原或核酸 检测，必要时进行随访。
1、艾滋病检测的医学目的
✓个体：诊断感染状态，感染者知道自
己的感染情况，减少传播，及时寻求 治疗。
✓传染病管理：疾控机构及时的发现传
染源、配偶（固定性伴）的检测、随 访和干预，发现管理感染者、提供关 怀服务。
✓医疗机构：及时的医疗服务和医源性
感染的预防
1.1HIV相关检测方法
A 常用HIV病原学检测方法: 核酸检测（ 定性、定量）、P24抗原检 测、病毒培养分离
艾滋病实验室检测(妇 保)
内容提要：
1.艾滋病实验室检测目的、方法。 2.艾滋病检测样本的采集和处理。 3.HIV抗体检测方法目的要点和流程。 4.HIV抗体快速检测方法原理应用评价。 5.艾滋病抗体检测结果的处理及应用。 6.HIV-1抗原检测 7.HIV核酸检测 8.HIV-1耐药检测 9.CD4/CD8+T淋巴细胞检测
3.5艾滋病检测实验室检测信息上报
• 各级艾滋病检测实验室所在机构每月应填写
《HIV抗体检测数及阳性人数统计报表》（附表 6），并于每月10日前完成网络直报。未开展网 络直报的单位，由县级疾病预防控制机构收集信 息后统一上报。
4、艾滋病快速检测试验（RT）
• 是ELISA发展起来的一种检测技术，它用胶
血斑样品。
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析PPT演示课件
核酸检测
病毒载量检测
检测血液中病毒核酸，用于感染后1-2周的 早期诊断。适用于高度怀疑感染或窗口期 不确定的情况。
检测血液中病毒数量，用于病情评估、疗 效监测和预测疾病进展。适用于治疗过程 中的监测。
05
艾滋病实验室检测的未来展 望
新检测技术的发展和应用
下一代测序技术
利用高通量测序技术，对病毒基 因组进行全面检测，提高检测灵
艾滋病的症状和体征
01
02
03
急性期
发热、头痛、咽痛、肌肉 关节痛、皮疹、淋巴结肿 大等类似感冒症状。
无症状期
无明显症状，部分人可出 现持续性淋巴结肿大。
艾滋病期
体重下降、发热、腹泻、 疲劳、咳嗽等症状，以及 各种机会性感染和恶性肿 瘤的出现。
02
艾滋病常用实验室检测方法
抗体检测
抗体检测是艾滋病诊断的金标准， 通过检测血液中的艾滋病抗体， 可以确定是否感染了HIV病毒。
抗原检测的缺点是操作复杂、 价格昂贵，且可能出现假阳性 结果。
病毒载量检测
病毒载量检测是通过检测血液中病毒的数量，以评估病情和治疗反应。
病毒载量检测的优点是能够反映病毒复制水平和病情进展，有助于指导治疗方案的 选择。
病毒载量检测的缺点是操作复杂、价格昂贵，且不同试剂和方法学之间存在差异。
CD4+ T细胞计数
艾滋病常用实验室检测及临 床意义分析ppt演示课件
目录
• 艾滋病概述 • 艾滋病常用实验室检测方法 • 艾滋病实验室检测的临床意义 • 艾滋病实验室检测的局限性 • 艾滋病实验室检测的未来展望 • 结论
01
艾滋病概述
定义与特性
定义
艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒 （HIV）引起的传染病，主要攻击 人体免疫系统，导致免疫功能缺陷 或丧失。
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析演示课件
传播途径
艾滋病的主要传播途径包括性传播、血液传播和垂直传播（母婴传播）。
症状和治疗
艾滋病的早期症状类似感冒，进展后可导致免疫系统衰竭。目前尚无治愈艾滋病的方法，但 通过抗病毒治疗可以控制病情。
艾滋病实验室检测
HIV抗体检测
通过ELISA和Western Blot等技术检测人体中是否存 在艾滋病病毒的抗体。
பைடு நூலகம்
病毒载量检测
采用PCR和LCR等技术检测艾滋病病毒的数量，评估 病情和疗效。
艾滋病实验室检测结果解读
1 阳性结果
阳性结果表明个体体内存在艾滋病病毒抗体，需要进一步确认和处理。
2 阴性结果
阴性结果表明个体体内未检测到艾滋病病毒抗体，但需注意病毒潜伏期和检测时机。
3 假阳性结果
假阳性结果可能由于多种原因引起，如感染其他病毒或使用药物等。
艾滋病检测临床意义
1
感染防控
2
艾滋病检测结果可指导感染防控工作，
减少艾滋病传播。
3
患者诊断
艾滋病实验室检测可确认患者是否感染 病毒，帮助临床医生进行诊断。
治疗方案制定
知晓艾滋病患者的病毒载量和耐药情况， 可为制定个体化治疗方案提供依据。
总结
艾滋病检测常识
艾滋病实验室检测是诊断和 防控艾滋病的重要手段，但 结果需要综合其他临床和流 行病学信息进行解读。
艾滋病检测的临床应用
艾滋病实验室检测结果对患 者诊断、治疗和预后评估具 有重要意义。
艾滋病防控措施建议
艾滋病的预防包括正确使用 避孕措施、避免与有HIV感 染风险的人发生性关系等。
艾滋病常用实验室检测及 临床意义分析
本PPT演示课件将介绍艾滋病的基本知识、实验室检测以及临床意义分析。通 过本课件，您将更深入了解艾滋病的检测过程和结果解读，以及它对患者诊 断、感染防控和治疗方案制定的重要性。
艾滋病的主要传播途径包括性传播、血液传播和垂直传播（母婴传播）。
症状和治疗
艾滋病的早期症状类似感冒，进展后可导致免疫系统衰竭。目前尚无治愈艾滋病的方法，但 通过抗病毒治疗可以控制病情。
艾滋病实验室检测
HIV抗体检测
通过ELISA和Western Blot等技术检测人体中是否存 在艾滋病病毒的抗体。
பைடு நூலகம்
病毒载量检测
采用PCR和LCR等技术检测艾滋病病毒的数量，评估 病情和疗效。
艾滋病实验室检测结果解读
1 阳性结果
阳性结果表明个体体内存在艾滋病病毒抗体，需要进一步确认和处理。
2 阴性结果
阴性结果表明个体体内未检测到艾滋病病毒抗体，但需注意病毒潜伏期和检测时机。
3 假阳性结果
假阳性结果可能由于多种原因引起，如感染其他病毒或使用药物等。
艾滋病检测临床意义
1
感染防控
2
艾滋病检测结果可指导感染防控工作，
减少艾滋病传播。
3
患者诊断
艾滋病实验室检测可确认患者是否感染 病毒，帮助临床医生进行诊断。
治疗方案制定
知晓艾滋病患者的病毒载量和耐药情况， 可为制定个体化治疗方案提供依据。
总结
艾滋病检测常识
艾滋病实验室检测是诊断和 防控艾滋病的重要手段，但 结果需要综合其他临床和流 行病学信息进行解读。
艾滋病检测的临床应用
艾滋病实验室检测结果对患 者诊断、治疗和预后评估具 有重要意义。
艾滋病防控措施建议
艾滋病的预防包括正确使用 避孕措施、避免与有HIV感 染风险的人发生性关系等。
艾滋病常用实验室检测及 临床意义分析
本PPT演示课件将介绍艾滋病的基本知识、实验室检测以及临床意义分析。通 过本课件，您将更深入了解艾滋病的检测过程和结果解读，以及它对患者诊 断、感染防控和治疗方案制定的重要性。
艾滋病实验室检查ppt课件
16
预后 17
影响预后的因素
感染的HIV型别及亚型： HIV-1较HIV-2临床进展快
并发的机会性感染： 同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并
丙型肝炎者预后差 抗逆转录病毒治疗：
治疗改变了艾滋病进程
18
HIV感染未治疗者的结局 典型 (70%～80%)：5～10年进展为艾滋病 快速进展型(10%～15%)：2～3年 长期无进展型 (<5%)：HIV感染超过10年CD4+细胞>500/mm3， 病毒载量<103拷贝/ml 长期存活型 (极少)：进展到艾滋病期后能稳定较长一段时间
19
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
20
谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
Learning Is To Achieve A Certain Goal And Work Hard, Is A Process To Overcome Various Difficulties For A Goal
12
诊断标准 急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性 无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性 ★仅实验室检查HIV抗体阳性
13
诊断标准
艾滋病期 ★ 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列一项或以上
： 1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻超过4周 ；3.持续或间歇发热超过4周；4.全身淋巴结肿大；5.反复带状 疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮 炎；8.反复发生的败血症；9.深Ⅰ部真菌感染，马尔尼非青霉菌 ；10.肺孢子虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑 病。13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病 ；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；15. 卡波西肉瘤或淋巴瘤。
预后 17
影响预后的因素
感染的HIV型别及亚型： HIV-1较HIV-2临床进展快
并发的机会性感染： 同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并
丙型肝炎者预后差 抗逆转录病毒治疗：
治疗改变了艾滋病进程
18
HIV感染未治疗者的结局 典型 (70%～80%)：5～10年进展为艾滋病 快速进展型(10%～15%)：2～3年 长期无进展型 (<5%)：HIV感染超过10年CD4+细胞>500/mm3， 病毒载量<103拷贝/ml 长期存活型 (极少)：进展到艾滋病期后能稳定较长一段时间
19
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
20
谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
Learning Is To Achieve A Certain Goal And Work Hard, Is A Process To Overcome Various Difficulties For A Goal
12
诊断标准 急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性 无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性 ★仅实验室检查HIV抗体阳性
13
诊断标准
艾滋病期 ★ 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列一项或以上
： 1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻超过4周 ；3.持续或间歇发热超过4周；4.全身淋巴结肿大；5.反复带状 疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮 炎；8.反复发生的败血症；9.深Ⅰ部真菌感染，马尔尼非青霉菌 ；10.肺孢子虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑 病。13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病 ；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；15. 卡波西肉瘤或淋巴瘤。
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析PPT课件
免疫调节治疗
通过增强机体的免疫功能，提高对HIV病毒的抵抗力。常用的免疫调节药物包括白细胞介 素-2、粒细胞集落刺激因子等。
手术治疗
对于某些特定类型的艾滋病相关肿瘤，手术切除是有效的治疗手段。
新型药物研发进展
新型抗逆转录病毒药物的研发
01
针对HIV病毒的不同作用机制，研究开发更高效、更安全的抗逆
转录病毒药物。
抗体检测
抗体检测是艾滋病诊断的金标准，通 过检测血液中是否存在艾滋病抗体来 判断是否感染了艾滋病病毒。
抗体检测的窗口期较长，通常为3个 月左右，因此对于高危人群，需要在 窗口期后进行检测。
抗体检测通常采用酶联免疫法 （ELISA）或化学发光法（CLIA）， 具有较高的灵敏度和特异性。
抗体检测可用于常规体检、献血员筛 查以及疑似感染者的初步筛查。
病情监测意义
1 2
病毒载量变化
定期监测病毒载量可以了解艾滋病病毒在体内的 复制情况，评估治疗效果和病情进展。
CD4+T淋巴细胞计数监测
定期监测CD4+T淋巴细胞计数可以了解免疫系 统的状况，判断疾病进展和感染并发症的风险。
3
耐药性监测
对于接受抗病毒治疗的患者，耐药性监测有助于 发现耐药变异株，指导治疗方案调整。
02
HIV通过破坏CD4+T淋巴细胞， 使人体丧失免疫能力，易感染各 种疾病，最终导致死亡。
艾滋病传播途径
01
02
03
性传播
通过性接触传播是艾滋病 最主要的传播途径。
血液传播
输入感染HIV的血液或血 液制品、静脉药瘾者共用 注射器或针头、共用未经 严格消毒的医疗器械等。
母婴传播
感染HIV的母亲通过胎盘、 哺乳等方式将病毒传给婴 儿。
通过增强机体的免疫功能，提高对HIV病毒的抵抗力。常用的免疫调节药物包括白细胞介 素-2、粒细胞集落刺激因子等。
手术治疗
对于某些特定类型的艾滋病相关肿瘤，手术切除是有效的治疗手段。
新型药物研发进展
新型抗逆转录病毒药物的研发
01
针对HIV病毒的不同作用机制，研究开发更高效、更安全的抗逆
转录病毒药物。
抗体检测
抗体检测是艾滋病诊断的金标准，通 过检测血液中是否存在艾滋病抗体来 判断是否感染了艾滋病病毒。
抗体检测的窗口期较长，通常为3个 月左右，因此对于高危人群，需要在 窗口期后进行检测。
抗体检测通常采用酶联免疫法 （ELISA）或化学发光法（CLIA）， 具有较高的灵敏度和特异性。
抗体检测可用于常规体检、献血员筛 查以及疑似感染者的初步筛查。
病情监测意义
1 2
病毒载量变化
定期监测病毒载量可以了解艾滋病病毒在体内的 复制情况，评估治疗效果和病情进展。
CD4+T淋巴细胞计数监测
定期监测CD4+T淋巴细胞计数可以了解免疫系 统的状况，判断疾病进展和感染并发症的风险。
3
耐药性监测
对于接受抗病毒治疗的患者，耐药性监测有助于 发现耐药变异株，指导治疗方案调整。
02
HIV通过破坏CD4+T淋巴细胞， 使人体丧失免疫能力，易感染各 种疾病，最终导致死亡。
艾滋病传播途径
01
02
03
性传播
通过性接触传播是艾滋病 最主要的传播途径。
血液传播
输入感染HIV的血液或血 液制品、静脉药瘾者共用 注射器或针头、共用未经 严格消毒的医疗器械等。
母婴传播
感染HIV的母亲通过胎盘、 哺乳等方式将病毒传给婴 儿。
HIV检测技术 ppt课件
复检试验
对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一 种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包 括一种抗原抗体联合试剂。
艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品， 确证实验室可以直接进行确证试验。
原有试剂＋另一 种原理初筛试剂
（3）快速检测（RT）及其它检测试验
优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急 诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在 10～30分钟内得出结果。
缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保 存。
快速诊断试剂
（1）明胶颗粒凝集试验（PA） 将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作
用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有 HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗 原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判 读结果。
加样 温育 洗板 显色
标准化操作及流程
试剂准备、标本收集、测定方法和仪器操 作写出正确的“标准操作程序”(SOP)，所有 的实验技术人员在进行相关测定时，必须严格 按相应的SOP进行操作。
ELISA法结果判断
临界值概念: 将检测的阳性和（或）阴性对照的 OD值代入计算公式计算出来的判断阳性和阴性 结果的界值
吸附－穿入－脱壳－生物合成－组装成熟和释放
HIV-1通过gp120与靶细胞表面CD4分子和趋化因子受体结合
HIV感染后的血清学改变
HIV抗体检测目的
诊断：确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检 测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体 检等。
监测：了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检 测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。
对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一 种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包 括一种抗原抗体联合试剂。
艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品， 确证实验室可以直接进行确证试验。
原有试剂＋另一 种原理初筛试剂
（3）快速检测（RT）及其它检测试验
优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急 诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在 10～30分钟内得出结果。
缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保 存。
快速诊断试剂
（1）明胶颗粒凝集试验（PA） 将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作
用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有 HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗 原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判 读结果。
加样 温育 洗板 显色
标准化操作及流程
试剂准备、标本收集、测定方法和仪器操 作写出正确的“标准操作程序”(SOP)，所有 的实验技术人员在进行相关测定时，必须严格 按相应的SOP进行操作。
ELISA法结果判断
临界值概念: 将检测的阳性和（或）阴性对照的 OD值代入计算公式计算出来的判断阳性和阴性 结果的界值
吸附－穿入－脱壳－生物合成－组装成熟和释放
HIV-1通过gp120与靶细胞表面CD4分子和趋化因子受体结合
HIV感染后的血清学改变
HIV抗体检测目的
诊断：确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检 测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体 检等。
监测：了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检 测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。
HIV感染的实验室检测(共36张PPT)
• （3）实验结果
• ①阴性对照（NC），HIV-1阳性对照（PC1），HIV-2阳性对照 （PC2）
NC 必须＜0.25方可用，排除NC≥0.25的值，计算NC平均 值。
NC界限范围：0.6倍NC均值＜NC＜1.4倍NC均值。
• 竞争法、捕获包被法等 4、严格遵守实验室标准操作规程（SOP）。
为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的，比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV感染 （4）艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶 免疫间接法。 监测(为了知晓人群流行状况) Introduction to HIV Testing ⑥在2h内置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。 常用HIV抗体检测方法: 加受检标本，保温反应。 （1）明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后 保温（一般为室温）。
ELISA的原理
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗 体复合物与液体中的其他物质分开。再 加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应 而结合在固相载体上。此时固相上的酶 量与标本中受检物质的量呈一定的比例 。
ELISA的原理
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有 色产物，产物的量与标本中受检物质的量 直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性 或定量分析。由于酶的催化效率很高，间 接地放大了免疫反应的结果，使测定方法 达到很高的敏感度。
ELISA
酶联免疫吸附试验 + ve
HIV
包被了HIV 抗
原的检测板
患者的抗体
艾滋病实验室检查课件
艾滋病实验室检查课件一、教学内容本课件主要基于《医学微生物学》第十二章关于艾滋病病毒检测的内容。
详细内容包括：艾滋病病毒的基本结构及生命周期，实验室检查艾滋病病毒的方法与技术，常用的检测手段如ELISA、Western blot、PCR等，以及它们的原理、操作步骤和结果判读。
二、教学目标1. 理解艾滋病病毒的基本结构、生命周期，以及实验室检查艾滋病病毒的重要性。
2. 掌握常用的艾滋病病毒检测方法及操作步骤，学会判读检测结果。
3. 能够运用所学知识，分析实验室检查结果，为临床诊断和治疗提供依据。
三、教学难点与重点教学难点：艾滋病病毒实验室检查方法的技术细节，以及结果判读。
教学重点：常用的艾滋病病毒检测方法及操作步骤，实验室检查结果的临床意义。
四、教具与学具准备1. 教具：多媒体课件、黑板、粉笔。
五、教学过程1. 实践情景引入：展示一份实验室检查报告单，让学生分析其中艾滋病病毒检测的结果。
2. 讲解艾滋病病毒的基本结构、生命周期，引导学生了解实验室检查的必要性。
3. 详细介绍ELISA、Western blot、PCR等检测方法的原理、操作步骤和结果判读。
4. 例题讲解：以具体病例为例，讲解如何根据实验室检查结果诊断艾滋病。
5. 随堂练习：让学生分析实验室检查报告单，判断检测结果是否为艾滋病病毒感染。
六、板书设计1. 艾滋病病毒基本结构、生命周期2. 常用实验室检查方法：ELISA、Western blot、PCR原理操作步骤结果判读3. 检查结果的临床意义七、作业设计1. 作业题目：（1）简述艾滋病病毒的基本结构和生命周期。
（2）比较ELISA、Western blot、PCR三种检测方法的优缺点。
2. 答案：（1）艾滋病病毒的基本结构包括：核心蛋白、膜蛋白、包膜糖蛋白等。
生命周期包括：吸附、融合、逆转录、整合、复制、组装、释放等。
（2）ELISA：操作简便，适用于大量样本检测；Western blot：灵敏度和特异性较高，但操作复杂；PCR：灵敏度高，可检测病毒核酸，但易受污染。
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6
分子生物学检测（1）
HIV RNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应）
核酸定量技术原理
PCR：高温变性(94℃)→低温退火 (55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30 个循环，成倍数扩增
荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚 核苷酸探针（带一个荧光发光分子 和一个荧光淬灭分子）
应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR 查血浆中的病毒RNA
治疗改变了艾滋病进程
19
一项或以上：
1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻 超过4周；3.持续或间歇发 热超过4周；4.全身淋巴结
肿大；5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口
咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮炎；8.反复发生的败血
症；9.深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.肺孢子
虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑病。
继发性CD4+淋巴细胞减少
肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免 疫抑制治疗后。
17
预后
18
影响预后的因素
➢ 感染的HIV型别及亚型：
HIV-1较HIV-2临床进展快
➢ 并发的机会性感染：
同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高； 合并丙型肝炎者预后差
➢ 抗逆转录病毒治疗：
原理：核酸扩增时，核苷酸在 某一固定点开始，随机在某一 特定的碱基处终止，产生A、T、 C、G四组不同长度的一系列核 苷酸，通过在尿素变性的PAGE 胶上电泳，获得DNA序列
10
病毒检测
血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂，主要用于科研
11
诊
断
12
诊断原则
➢ 流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活
7
•大家有疑问的，可以询问和交流
•可以互相讨论下，但要小声点
分子生物学检测（2）
淋巴细胞HIV RNA检测——
Northern印迹杂交(Northern blot)
原理： RNA片段经电泳分 离，从凝胶中转移到硝酸 纤维素滤膜，再用探针杂 交
9
分子生物学检测（3）
HIV变异株检测——Sanger测序法
史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳 性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。
➢ 临床表现：
高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现， 颈、腋及 枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。
无症状期、艾滋病期临床表现。
➢ 实 验 室 检 查 ： ① HIV 抗 体 阳 性 ， 并 经 确 证 试 验 确 认 。 ②
13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性
结核病；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、
青年痴呆症；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。
15
诊断标准
★HIV抗体阳性
CD4+T淋巴细胞数<200/mm3 无上述表现或症状
16
鉴别诊断
原发性CD4+淋巴细胞减少症
无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。
CD4+有助于早期诊断新生儿的HIV感染。
13
诊断标准
急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳 性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性
无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性 14
诊断标准
艾滋病期
★ 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列
•艾滋病实验室检查
实验室检查
2
免疫学检测
R2
M1
流式细胞仪测定
3
血清学检测（１）
HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免
疫试验）
4
血清学检测（２）
HIV抗体的确证试验——Western blot （免疫印迹
试验）
5
血清学检测（３）
HIV抗原检测——ELISA夹心法
测定p24抗原 敏感性很高（7～10 pg/ml） 特异性稍差（可有假阳性）
分子生物学检测（1）
HIV RNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应）
核酸定量技术原理
PCR：高温变性(94℃)→低温退火 (55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30 个循环，成倍数扩增
荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚 核苷酸探针（带一个荧光发光分子 和一个荧光淬灭分子）
应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR 查血浆中的病毒RNA
治疗改变了艾滋病进程
19
一项或以上：
1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻 超过4周；3.持续或间歇发 热超过4周；4.全身淋巴结
肿大；5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口
咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮炎；8.反复发生的败血
症；9.深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.肺孢子
虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑病。
继发性CD4+淋巴细胞减少
肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免 疫抑制治疗后。
17
预后
18
影响预后的因素
➢ 感染的HIV型别及亚型：
HIV-1较HIV-2临床进展快
➢ 并发的机会性感染：
同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高； 合并丙型肝炎者预后差
➢ 抗逆转录病毒治疗：
原理：核酸扩增时，核苷酸在 某一固定点开始，随机在某一 特定的碱基处终止，产生A、T、 C、G四组不同长度的一系列核 苷酸，通过在尿素变性的PAGE 胶上电泳，获得DNA序列
10
病毒检测
血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂，主要用于科研
11
诊
断
12
诊断原则
➢ 流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活
7
•大家有疑问的，可以询问和交流
•可以互相讨论下，但要小声点
分子生物学检测（2）
淋巴细胞HIV RNA检测——
Northern印迹杂交(Northern blot)
原理： RNA片段经电泳分 离，从凝胶中转移到硝酸 纤维素滤膜，再用探针杂 交
9
分子生物学检测（3）
HIV变异株检测——Sanger测序法
史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳 性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。
➢ 临床表现：
高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现， 颈、腋及 枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。
无症状期、艾滋病期临床表现。
➢ 实 验 室 检 查 ： ① HIV 抗 体 阳 性 ， 并 经 确 证 试 验 确 认 。 ②
13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性
结核病；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、
青年痴呆症；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。
15
诊断标准
★HIV抗体阳性
CD4+T淋巴细胞数<200/mm3 无上述表现或症状
16
鉴别诊断
原发性CD4+淋巴细胞减少症
无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。
CD4+有助于早期诊断新生儿的HIV感染。
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诊断标准
急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳 性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性
无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性 14
诊断标准
艾滋病期
★ 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列
•艾滋病实验室检查
实验室检查
2
免疫学检测
R2
M1
流式细胞仪测定
3
血清学检测（１）
HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免
疫试验）
4
血清学检测（２）
HIV抗体的确证试验——Western blot （免疫印迹
试验）
5
血清学检测（３）
HIV抗原检测——ELISA夹心法
测定p24抗原 敏感性很高（7～10 pg/ml） 特异性稍差（可有假阳性）