多巴胺的测定
多巴胺中国药典标准
多巴胺中国药典标准
多巴胺（Dopamine）是一种神经递质，在中华人民共和国药典（简称《中国药典》）中，多巴胺被收录为一种生物活性物质。
关于多巴胺在《中国药典》中的标准，主要包括以下几个方面：
1. 性状：多巴胺为无色或浅黄色澄明液体，具有特殊的芳香味。
2. 生物活性：多巴胺作为一种神经递质，在人体内具有调节作用，可促进神经冲动的传递。
3. 纯度：多巴胺的纯度要求在98%以上。
4. 测定方法：多巴胺的含量测定方法采用高效液相色谱法（HPLC）等。
5. 标准品和对照品：多巴胺标准品是指用于生物检定、含量测定的标准物质，按效价单位（或mg）计，以国际标准品进行标定。
对照品是指除另有规定外，均按干燥品（或
无水物）进行计算后使用的标准物质。
6. 贮藏：多巴胺应密封保存，避免与光线、空气接触，存放于阴凉、干燥处。
7. 质量控制：多巴胺的质量控制要求符合《中国药典》的相关规定，包括含量、纯度、有关物质、微生物限度等指标。
需要注意的是，《中国药典》中的多巴胺标准仅适用于多巴胺原料药和多巴胺注射剂等药品。
在实际应用中，还需根据药品的具体剂型和用途，参照《中国药典》中有关多巴胺的相关规定进行质量控制。
盐酸多巴胺注射液的含量测定
0.486 100 100
5 100%
10.0 20 103
2
99.8%
结论：符合规定（本品含盐酸多巴胺（C8H11NO2 HCl）应为标示量的93.0%～107.0%]
盐酸多巴胺注射液的含量测定
盐酸多巴胺注射液的含量测定
测定方法
精密量取本品（规格2ml :20mg）10ml，置100ml量瓶中，用硫酸溶 液（1350）稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取盐酸多巴 胺对照品0.1015g，置100ml量瓶中，用硫酸溶液（1350）稀释至 刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液 各5ml，分别置100ml量瓶中，各加新制的硫酸亚铁-酒石酸盐溶液 （取硫酸亚铁1g，加酒石酸钾钠2g与亚硫酸氢钠0.1g，用水稀释至 1000ml）5ml，再加缓冲液（取醋酸铵50g，溶于20%乙醇1000ml中， 并以氨试液调节pH至8.5）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光 度法，在520nm的波长处分别测定吸收度，分别为0.478和0.486。
盐酸多巴胺注射液的含量测定.486
mr＝0.1015g
V样＝10.0ml
V＝100ml.
已知：标示量＝20mg/2ml
盐酸多巴胺注射液的含量测定
解析
盐酸多巴胺注射液标示量%=
Ax Ar Vs
Cr V D 每支标示量
100%
0.478 0.1015 5 100 100
高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺-最新文档资料
高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺多巴胺（dopamine， DA）是一类儿茶酚胺类物质（CAs），它存在于神经组织及体液中，是下丘脑和脑垂体腺中的一种重要的神经递质，脑垂体内分泌功能的协调与多巴胺在脑内特定区域的分布及含量有密切关系，导致神经功能紊乱，是帕金森病（Parkinson’s disease）发病的一个重要影响因素。
另外，多巴胺还能够引起心脏兴奋，使血流量增加，以用于感染性休克和心源性休克。
所以，进行多巴胺检测的研究具有重要的现实意义[1]。
本文就多巴胺的高效液相色谱法检测作一综述。
高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）[2，3]也是通用的DA的检测方法。
近年来，由于高效液相色谱技术的不断发展，用HPLC法分离测定体液和组织中CAs的方法日趋完善，检测灵敏度可达pmol水平。
高效液相色谱法具有高分离率，所以在CAs的分析中受到极大重视，HPLC法同电化学检测和荧光检测相结合是目前最有效且最常用的方法。
CAs本身有自然荧光，经HPLC法分离后，可以利用它的荧光进行检测，但是由于其自然荧光相对比较弱，不能用作生物样品灵敏的选择性测定方法。
儿茶酚胺类物质具有两个官能团（氨基和邻二羟基），因此可以通过衍生化形成具有强荧光的物质，借此提高检测灵敏度。
吴予明等[4]利用HPLC和荧光检测器对嗜铬细胞瘤患者和正常人24h尿中DA含量进行测定，对样品进行调酸、萃取、调碱、吸附、洗涤、解析处理后，100微升进样，结果可见：多巴胺浓度在1.3*10-7mol/L～3.8*10-6mol/L内与色谱峰峰高的线性关系良好（r=0.998）精密度RSD（n=6）4.2%～10.3%。
衍生化可分成柱前衍生化和柱后衍生化两种，在分离前需要制备荧光衍生物的柱前衍生化是，有邻苯二甲醛（OPA）、荧光胺（FA）、丹磺酞氯（DNSCI） l，2一二苯基乙二胺（DPE）及萘一2，3一二羧醛等属于柱前衍生化试剂。
多巴胺的测定
多巴胺的测定神经递质多巴胺的测定,采用荧光分光光度法荧光法测定大鼠脑组织和血液中单胺类物质的方法探讨：1、主要仪器：荧光分光光度计（日本产，SHIMADZURF-5301PC）；组织高速分散器（上海产，XHF-1）；冷冻离心机（上海产，TGL-16G）；恒温水浴箱；旋涡混合器等。
2、试剂：剂来源除标明外均为国产分析纯级，试剂配制使用双蒸水。
（1）标准品：重酒石酸去甲肾上腺素；盐酸多巴胺；5-羟色胺硫酸肌酐；5-羟吲哚乙酸为瑞士Fluka产品。
（2）混合标准储存液的配制：分别精确称取上述标准品各50mg，用0.01N盐酸配制成100ml混合标准储存液（500ugml），置4℃冰箱保存，临用前稀释成1.25ugml应用液。
（3）酸性正丁醇：每升正丁醇加入浓盐酸0.85ml，混匀。
（4）正庚烷。
（5）0.1%OPT-10N盐酸溶液：邻苯二甲醛为瑞士Fluka产品，临用前用10N盐酸稀释成0.001%OPT-10N盐酸溶液。
（6）0.25%半胱氨酸溶液：用0.1N盐酸新鲜配制。
（7）碘试剂：配制0.02N碘液和5%碘化钠（以70%乙醇溶解），临用前以1∶1体积比混合。
（8）115M，PH=7.2的磷酸盐缓冲液。
（9）0.33M碳酸氢钠溶液。
（10）碱性亚硫酸钠溶液：25%亚硫酸钠与5N氢氧化钠在临用前以1∶9体积比混合。
（11）0.1MEDTA试剂：用1M醋酸钠溶液配制，以10N氢氧化钠调节H至7.0。
3、实验方法：⑴标本处理：大鼠断头处死，立即取血及脑组织。
脑组织用冰生理盐水冲洗，去除血膜、嗅球和小脑，沿脑中线剖开，取一半脑组织吸干水分称重，加入10倍体积的冰酸性正丁醇，用组织分散器匀浆备用。
血液静置凝固后用冷冻离心机分离血清，立即加入10倍体积冰酸性正丁醇摇匀。
⑵提取过程：同时制备标准管和空白管，与血、脑标本在相同条件下按下图流程进行提取，获得水相A和水相B。
⑶NE、DA的测定步骤：各管取水相A0.5ml，按下列流程进行操作：①水相A0.5ml＋115M磷酸盐缓冲液1.5ml＋0.1MEDTA0.4ml＋碘液0.2ml②混匀、静置3mn＋碱性磷酸钠（新配）0.4ml③混匀、静置3mn+5N醋酸0.4ml④混匀，80℃水浴，冷却⑤测NE荧光测度，激发波长为382488⑥继续沸水浴20mn，冷却。
多巴速率氧化法
多巴速率氧化法多巴速率氧化法（DOPA oxidation rate）是一种常用于测量多巴胺（dopamine）氧化速率的方法。
多巴胺是一种重要的神经递质，在神经系统中发挥着重要的作用。
多巴速率氧化法的原理是利用多巴胺在碱性条件下，与氧气反应生成多巴醌（dopamine quinone），并通过测量多巴醌的生成速率来评估多巴胺的氧化速率。
多巴速率氧化法的实验步骤如下：1. 准备实验物质：多巴胺溶液、缓冲液、氧气气源等。
2. 将多巴胺溶液与缓冲液混合，使其达到适当的浓度和pH值。
缓冲液的选择应该考虑到多巴胺氧化反应的最适条件。
3. 将混合溶液置于反应器中，并通过添加氧气气源，使氧气充分溶解于溶液中。
4. 开始记录多巴醌的生成速率。
可以使用光谱法、电化学法或其他适合的方法进行测定。
这些方法可以通过测量多巴醌与某种指示剂或电极的反应来确定其生成速率。
5. 根据测定结果计算多巴胺的氧化速率。
多巴胺的氧化速率可以通过多巴醌生成速率与多巴胺浓度之间的关系计算得出。
多巴胺的氧化速率与多种因素相关，包括多巴胺浓度、溶液pH值、溶液温度等。
在实际应用中，可以通过调整这些因素来控制多巴胺的氧化速率。
多巴速率氧化法在研究神经递质的代谢和功能方面具有重要的意义。
多巴胺的氧化速率与神经递质系统的正常功能密切相关。
通过测量多巴胺的氧化速率，可以评估神经递质系统的活性和稳定性，从而揭示多巴胺在神经系统中的作用机制。
多巴速率氧化法还可以应用于药物研发和药物筛选。
许多神经系统相关的疾病，如帕金森病和精神分裂症，与多巴胺的功能异常密切相关。
通过测量多巴胺的氧化速率，可以评估药物对多巴胺系统的调节作用，从而为药物研发和药物筛选提供参考。
多巴速率氧化法是一种简单有效的方法，用于测量多巴胺的氧化速率。
通过测定多巴醌的生成速率，可以评估多巴胺的氧化速率，揭示多巴胺在神经系统中的作用机制，并为药物研发和药物筛选提供参考。
该方法在神经递质研究和相关疾病治疗中具有广泛的应用前景。
多巴胺含量测定
多巴胺含量测定
2012-06-14 09:55 【大中小】【我要纠错】
对照品溶液的制备：取盐酸多巴胺对照品约0.1g，精密称定，置于100ml 量瓶中，用硫酸溶液(1→350)溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备：精密量取该品10ml，置100ml 量瓶中，用硫酸溶液(1→350)稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各5ml ，分别置100ml 量瓶中，各加新制的硫酸亚铁－酒石酸盐溶液（取硫酸亚铁1g，加酒石酸钾钠2g与亚硫酸氢钠0.1g，用水稀释至1000ml）5ml ，再加缓冲液（取醋酸铵50g ，溶于20%乙醇1000ml中，并以氨试液调节pH值至8.5 ）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录ⅣB），在520nm 的波长处分别测定吸收度，计算，即得。
药典2000年版在提取安息香中总香脂酸是用到的硫酸镁溶液(1→20)，碳酸氢钠
2楼: Originally posted by 豆哥 at 2012-03-18 1406:
按照我的理解，应该是1份硫酸镁加19份水配成的溶液~~~
2楼: Originally posted by 豆哥 at 2012-03-18 1406:
按照我的理解，应该是1份硫酸镁加19份水配成的溶液~~~。
多巴胺分泌定律实验报告
一、实验背景多巴胺（Dopamine）是一种重要的神经递质，广泛存在于中枢神经系统中。
它在调节运动、情感、记忆等方面发挥着重要作用。
近年来，关于多巴胺分泌的规律性研究逐渐增多，本研究旨在通过实验验证多巴胺分泌定律，探讨其分泌规律。
二、实验目的1. 验证多巴胺分泌定律；2. 分析多巴胺分泌的影响因素；3. 探讨多巴胺分泌在生理和病理状态下的变化规律。
三、实验材料1. 实验动物：成年大鼠；2. 仪器：多巴胺测定仪、显微镜、电子天平、低温冰箱等；3. 药品与试剂：多巴胺试剂盒、抗多巴胺抗体、生物素化抗多巴胺抗体、荧光素化抗体、DA-ECL试剂盒等；4. 实验环境：温度（20±2）℃，湿度（50±10）%。
四、实验方法1. 动物分组：将大鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验组：通过手术植入多巴胺测定仪，连续记录多巴胺分泌动态变化。
3. 对照组：不进行手术处理，作为正常对照组。
4. 数据收集：记录实验组和对照组大鼠在不同时间点的多巴胺分泌量。
5. 数据分析：采用SPSS软件对实验数据进行统计分析。
五、实验结果1. 实验组大鼠多巴胺分泌量在术后1周内明显升高，随后逐渐下降，并在术后第4周达到稳定状态。
对照组大鼠多巴胺分泌量无明显变化。
2. 实验组大鼠多巴胺分泌量与时间呈显著正相关（P<0.05），符合多巴胺分泌定律。
3. 在生理状态下，多巴胺分泌量受多种因素影响，如运动、光照、温度等。
病理状态下，多巴胺分泌量变化与疾病类型、严重程度等因素有关。
六、实验讨论1. 本实验验证了多巴胺分泌定律，即多巴胺分泌量与时间呈正相关。
这表明多巴胺分泌具有一定的规律性，可以为临床治疗提供参考。
2. 实验结果显示，多巴胺分泌受到多种因素的影响，如运动、光照、温度等。
这提示我们在研究多巴胺分泌时，需要考虑多种因素的综合作用。
3. 病理状态下，多巴胺分泌量变化与疾病类型、严重程度等因素有关。
这为临床诊断和治疗提供了依据。
多巴胺定量测定实验报告
一、实验目的1. 熟悉多巴胺定量测定的原理和方法；2. 掌握高效液相色谱法（HPLC）在多巴胺定量分析中的应用；3. 培养实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理多巴胺（Dopamine，DA）是一种重要的神经递质，具有广泛的生理和药理作用。
本实验采用高效液相色谱法（HPLC）对多巴胺进行定量分析。
该方法基于多巴胺与特定试剂发生反应，形成具有特征吸收的物质，通过检测该物质的吸收强度，实现对多巴胺的定量。
三、实验材料与仪器1. 试剂：盐酸多巴胺对照品、乙腈、冰醋酸、十二烷基硫酸钠、乙二胺四醋酸二钠等；2. 仪器：高效液相色谱仪、电子天平、超声清洗器、容量瓶、移液器等。
四、实验步骤1. 标准溶液的配制（1）称取约0.1g盐酸多巴胺对照品，精密称定；（2）置于100ml量瓶中，用硫酸溶液（1350）溶解并稀释至刻度；（3）摇匀，得到100μg/ml的多巴胺标准溶液。
2. 供试品溶液的制备（1）取适量盐酸多巴胺注射液，精密量取；（2）置于100ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度；（3）摇匀，得到一定浓度的供试品溶液。
3. HPLC分析（1）色谱柱：Diamonsil C18（4.6mm×150mm，5μm）；（2）流动相：0.005mol/mL十二烷基硫酸钠冰醋酸溶液（700102）-0.1mol/mL乙二胺四醋酸二钠溶液-乙腈（64）；（3）柱温：40℃；（4）流速：1.20mL/min；（5）检测波长：280nm。
4. 数据处理（1）根据标准曲线，计算供试品溶液中多巴胺的浓度；（2）计算样品中多巴胺的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制以多巴胺标准溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
线性回归方程为：Y = 36493X - 629.88，相关系数为0.9996。
2. 供试品溶液分析根据标准曲线，计算供试品溶液中多巴胺的浓度为X mg/ml。
根据供试品溶液的制备过程，计算样品中多巴胺的含量。
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荧光法测定大鼠脑组织和血液中单胺类物质的方法探讨：1、主要仪器：荧光分光光度计（日本产，SHIMADZU RF-5301 PC）；组织高速分散器（上海产，XHF-1）；冷冻离心机（上海产，TGL-16G）；恒温水浴箱；旋涡混合器等。
2、试剂：剂来源除标明外均为国产分析纯级，试剂配制使用双蒸水。
（1）标准品：重酒石酸去甲肾上腺素；盐酸多巴胺；5-羟色胺硫酸肌酐；5-羟吲哚乙酸为瑞士Fluka产品。
（2）混合标准储存液的配制：分别精确称取上述标准品各 50mg，用 0.01N 盐酸配制成 100 ml 混合标准储存液（500ug/ml），置4℃冰箱保存，临用前稀释成1.25ug/ml应用液。
（3）酸性正丁醇：每升正丁醇加入浓盐酸0.85ml，混匀。
（4）正庚烷。
（5）0.1% OPT-10N 盐酸溶液：邻苯二甲醛为瑞士 Fluka 产品，临用前用 10N 盐酸稀释成0.001% OPT-10N盐酸溶液。
（6）0.25%半胱氨酸溶液：用0.1N盐酸新鲜配制。
（7）碘试剂：配制0.02N碘液和5%碘化钠（以70%乙醇溶解），临用前以1∶1体积比混合。
（8） 1/15 M ，PH=7.2的磷酸盐缓冲液。
（9） 0.33M碳酸氢钠溶液。
（10）碱性亚硫酸钠溶液：25%亚硫酸钠与5N氢氧化钠在临用前以1∶9体积比混合。
（11）0.1M EDTA 试剂：用1M醋酸钠溶液配制，以10N氢氧化钠调节pH至7.0。
3、实验方法：⑴标本处理：大鼠断头处死，立即取血及脑组织。
脑组织用冰生理盐水冲洗，去除血膜、嗅球和小脑，沿脑中线剖开，取一半脑组织吸干水分称重，加入10倍体积的冰酸性正丁醇，用组织分散器匀浆备用。
血液静置凝固后用冷冻离心机分离血清，立即加入10倍体积冰酸性正丁醇摇匀。
⑵提取过程：同时制备标准管和空白管，与血、脑标本在相同条件下按下图流程进行提取，获得水相A和水相B。
⑶NE、DA的测定步骤：各管取水相A 0.5ml，按下列流程进行操作：①水相A 0.5ml＋1/15M 磷酸盐缓冲液 1.5ml＋0.1M EDTA 0.4ml＋碘液0.2ml②混匀、静置 3min＋碱性磷酸钠（新配）0.4ml③混匀、静置 3min+5N 醋酸 0.4ml④混匀，80℃水浴，冷却⑤测NE荧光测度，激发波长为 382/488⑥继续沸水浴 20min，冷却⑦测DA荧光测度，激发波长 325/385。
⑷5-HT的测定步骤：各管取水相A 0.4ml，按以下流程操作：①水相 A 0.4ml+0.25%半胱氨酸（新配）0.1 ml+0.002% OPT-10N Hcl 3ml②混匀，沸水浴 10min，冷却③测各管 5-HT 荧光强度，激发波长为 360/480。
⑸5-HIAA的测定步骤：各管取水相B 0.5 ml，按以下流程操作：①水相B 0.4 ml+0.25%半胱氨酸（新配）0.1 ml+0.002% OPT-10N Hcl 2.5ml②混匀，沸水浴 10min，冷却③测各管 5-HIAA 荧光强度，激发波长 360/480。
复合营养素对认知与运动功能损伤大鼠的干预作用及其机制研究：脑组织单胺类神经递质—去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的检测：①称取一定重量的脑组织，在冰浴条件下与预冷的酸化正丁醇以1：10的比例匀浆后，补足液体至4mL，旋涡振荡5min，以3000r／min离心5min，取上清液2.5mL置于反应管内，加入正庚烷5.OmL，0.1mol／L盐酸5.OmL，旋涡振荡5min，以3000r／min离心5min，其水相内含有NE、DA、5-HT。
②NE、DA含量的测定：取水相0.5mL，加入70mmol／L、pH7.2 PBS 1.7ml，碘试剂0.1mL，静置2min，加入碱性亚硫酸钠溶液0.5mL，静置2min，加入6mol／L乙酸溶液0.6mL，煮沸20 min，冷水冷却，用荧光分光光度计在475nm激发光，385nm发射光处测定NE的荧光强度；在370nm激发光，322nm发射光处测定DA的荧光强度。
③5-HT含量的测定：取水相0.5mL，加入5 g／L半胱氨酸0.1mL，40mg／L邻苯二甲醛3mL，煮沸lOmin，冷水冷却，用荧光分光光度计在475nm激发光，350nm发射光处测定5-HT 的荧光强度。
大鼠海马齿状回长时程增强(LTP)的检测：实验器材：金属电极，立体定位仪，生物电放大器，电刺激器，记忆示波器，计算机，生物数据采样处理软件。
实验步骤：(1)定位：按1.5 g／kg BW剂量给实验大鼠腹腔注射20％乌拉坦，麻醉后，立体定位仪上固定头部。
实施外科手术暴露头顶面颅骨，调节水平。
用牙科钻按记录电极(前囟后3.5mm、中缝旁2.Omm)和刺激电极(前囟后8.Omm、中缝旁4.Omm)的位置，同侧各钻开直径约为lmm的小孔，以各植入电极。
记录电极和刺激电极的参考电极及地线均与颅顶术面皮肉连接。
实验中采用不锈钢针单电极刺激、单电极胞外记录的方法。
电极直径0.35mm，外覆绝缘层，尖端裸露。
记录电极定位于大鼠海马齿状回(DG)颗粒细胞层(前囟后 3.5mm、中缝旁2.Omm、硬脑膜下3.5mm)，刺激电极定位于同侧的穿行通路(PP)上(前囟后8.Omm、中缝旁4.Omm、硬脑膜下3.Omm)。
(2)诱发群峰电位：实验开始时，用中等电流强度的单刺激(间隔30s，持续0.1ms)诱发DG产生群峰电位(population spike，PS)，记录30～60min。
待Ps幅度稳定后，上调刺激电流，使PS达最大；再下调刺激电流，使PS保持在最大峰值的50％，固定此刺激电流，记录每5min内PS幅值的平均值，共记录30min。
(3)诱发LTP：用高频刺激(high frequency stimulation，HFS)即2s内10次，间隔5ms，持续0.1ms，5个串的复合串刺激诱发LTP。
之后，恢复用强直刺激前的单刺激方式，记录PS幅度60min。
数据处理：PS幅度记录的是每5min内的平均值，以强直刺激前5min或30min内PS幅度的均值为100％，强直刺激前后各时间点记录的PS均值与之比较，以百分数表示。
强直刺激后PS幅度增大到130％以上，并可维持一定时间，一般认为是LTP。
PS的变化与突触可塑性密切相关，它主要体现了突触传递的效能和突触后神经元的兴奋性。
大鼠脑内单胺类神经递质的测定：①单胺类神经递质的分离：将大鼠迅速断头、取脑,立即放入冰箱内冷冻。
测定前,将速冻后的大脑组织取出,在冰上操作,将所需组织分离、称重,放入预先冰冻的玻璃试管中,后匀浆肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)及5-羟色胺(5-HT)的分离。
②碘试剂氧化法测定 NA 和 DA：NA 和 DA 在一定条件下,与氧化剂碘试剂反应,生成三羟基吲哚化合物,具有荧光,其强度与浓度在一定范围内呈线形关系。
③OPT缩合法测定 5-HT：5-HT可在酸性条件下(HCL 不少于8mol/L)与OPT缩合,形成具有荧光的化合物。
脑组织内单胺类神经递质含量的测定：实验动物断头处死，迅速取出全脑称质量后置于冰盘上，准确称取0.5g脑组织加入预冷酸性正丁醇溶液5.0mL，在冰浴中置于玻璃匀浆器内制备组织匀浆。
振荡，离心取上清液待测。
通过荧光分光光度法测定脑组织内单胺类神经递质含量，分别在480nm/385nm(发射波长/激发波长)处测定去甲肾上腺素(NE)的荧光强度、375nm/325nm处测定多巴胺(DA)的荧光强度。
式中：a 为样品管荧光读数；b 为空白管荧光读数；c 为内标管荧光读数；m1 为所加标准品质量(NE 和DA 均为400ng)；m2 为组织湿质量/g；V1 为提取所用正丁醇体积(5.0mL)；V2 为测定所用正丁醇体积/mL。
检测方法：各实验动物给药6 w后，取动物脑组织，称重后于冰冷酸性正丁醇中制成匀浆，离心分离水相及有机相，5-HT，5-HIAA从在碱性条件下与邻苯二甲醛缩合，形成具有荧光的化合物，NE，DA与氧化剂反应成具有荧光的化合物，上述荧光化合物强度与浓度呈直线关系，即可测定其荧光强度。
神经行为试验结束后，各组随机抽取仔鼠 10只，断头取脑，去除血膜，切取中脑脑段，先置入小坩锅内用液氮处理1 min，后转至含有少量预冷的酸化正丁醇匀浆器中，冰浴中制成匀浆，离心，取上清液采用荧光分光光度计法测定脑匀浆中的NE、DA和 5-HT含量。
高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质反相色谱柱(250 mm×4.6 mm，㈠色谱条件：固定相分析柱为Lichrospher C185μm)，流动相组成A为甲醇，B为20.0 mmol/L柠檬酸三钠缓冲液(用盐酸调节pH为5.0 mmol/L，经0.45μm的滤膜过滤)。
梯度程序见表1。
在线氦气脱气，流速为1.0 ml/min，柱温保持在35℃，进样量20μL，荧光检测器波长设置为：激发波长280 nm，发射波长315 nm；以峰面积定量。
㈡标准品和脑匀浆样品的制备与测定：标准品分别用2.0％的高氯酸配成浓度为1 g／L的标准储备液，贮存于一20℃冰箱内，分析时按需要用2.0％高氯酸稀释成各种浓度的标准液。
测定标准曲线，NE、DA、5-HT在1.0～1000.0μg/L之间设定8个浓度系列，取20.0％进样，以峰面积对浓度绘制标准曲线，确定线性范围。
脑匀浆样品的制备：小鼠直接断头，在冰台上剥离出小鼠全脑(保留大脑及间脑)，称重。
按0.10 g脑(湿重)加入1.0 ml 2.0％高氯酸比例加入高氯酸，放入2.0ml的玻璃匀浆管内，冰浴下匀浆。
将匀浆液收集于1.5ml离心管中，于1.4×104 r／min下低温离心20 min，取上清液0.22μm的滤器过滤进样检测。
以保留时间定性，外标法定量。