银耳多糖成分资料
银耳多糖对脂肪肝的治疗作用及机制

银耳多糖对脂肪肝的治疗作用及机制脂肪肝是一种常见的肝脏疾病,其特征是肝细胞内脂肪的积累,导致肝细胞功能障碍和炎症反应。
脂肪肝可由多种原因引起,如肥胖、高脂血症、糖尿病等。
治疗脂肪肝的方法包括改变饮食习惯、增加运动量、控制体重等,但是往往效果不佳。
近年来,研究表明,银耳多糖可能对脂肪肝有治疗作用,下面将分析其机制。
一、银耳多糖的化学成分及药理作用银耳多糖是从银耳中提取的一种多糖,主要成分为葡聚糖、木聚糖和半乳糖等多种多糖物质。
多糖是一种天然高分子化合物,具有许多生物学活性,如抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等。
研究表明,银耳多糖具有增强肝细胞再生能力、减轻炎症反应、降低血脂和保护肝脏的作用。
二、银耳多糖对脂肪肝的治疗作用银耳多糖对脂肪肝的治疗作用主要体现在以下方面:1. 抗氧化作用脂肪肝多与氧化应激有关,氧化应激会导致细胞膜的脂质过氧化,加速脂肪在肝细胞内的积累。
研究发现,银耳多糖具有很好的抗氧化作用,可以清除体内的自由基和其他氧化物质,减轻氧化应激反应,同时保护肝细胞免受氧化损伤。
2. 调节脂肪代谢银耳多糖能够调节多种关键基因的表达,从而影响脂肪代谢。
通过降低肝脏内脂肪酸的合成和提高脂肪分解的速率,可以有效地减轻脂肪肝的症状。
此外,银耳多糖还能降低血脂和胰岛素水平,从而改善胰岛素抵抗和脂肪代谢。
3. 保护肝细胞银耳多糖可以促进肝细胞的再生和修复,减轻细胞损伤和坏死,同时增强肝脏的清除代谢功能,促进毒素的排泄。
研究表明,银耳多糖可抑制细胞凋亡,促进肝细胞的存活和增殖,从而保护肝脏免受进一步的损伤。
三、银耳多糖治疗脂肪肝的机制银耳多糖治疗脂肪肝的机制主要包括以下几个方面:1. 调节肝脏能量代谢肝脏是体内重要的能量代谢器官,银耳多糖能够通过调节多种基因的表达和激活代谢途径,影响肝脏的代谢,提高能量利用效率和降低脂肪代谢。
2. 抑制脂肪酸的合成和提高脂肪酸的分解银耳多糖可以抑制脂肪酸的合成,减少内源性脂肪酸的高浓度,从而降低脂肪肝的危害。
银耳多糖提取工艺的研究

银耳多糖提取工艺的研究银耳多糖提取工艺研究摘要:银耳多糖是一种有着良好保健和滋补功效的天然多糖,它由多种多糖成分组成,如葡萄糖、半乳糖、聚糖等,是人体健康的重要来源。
银耳多糖提取工艺是提取和分离银耳中含有银耳多糖的主要过程,经由不同的提取方法可以从银耳中得到高纯粹的银耳多糖粉末。
本文从四个方面详细介绍了银耳多糖提取工艺的理论基础、主要提取方法、技术参数以及优点和缺点,以便为后续银耳多糖提取工艺改进提供参考。
关键词:银耳多糖;提取工艺;提取方法Abstract: Trametes versicolor polysaccharides are natural polysaccharides with good health care and tonic effects, which are composed of various polysaccharides, such as glucose, galactose, polysaccharides, etc., and are an important source of human health. The extraction process of Trametes versicolor polysaccharides is the main process to extract and separate Trametes versicolor polysaccharides from Trametes versicolor. The highly pure Trametes versicolor polysaccharides powder can be obtained from Trametes versicolor by different extraction methods. This paper introduces the theoretical basis, main extraction methods, technical parameters, advantages and disadvantages of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in detail, in order to provide reference for the improvement of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in the future.Keywords: Trametes versicolor polysaccharides; extraction process; extraction methods1、引言银耳多糖是一种良好的滋补和保健品,它是由多种多糖成分构成,其中葡萄糖、半乳糖、聚糖等是主要成分,具有强烈的收敛和胃黏膜防护作用,是常用的护肝、促进新陈代谢等健康保健产品的主要原料,是现在社会受到关注的重要天然产物之一。
银耳的化学成分和药

银耳多糖
银耳多糖种类较多,主要 分为五大类:
酸性多糖 中性杂多糖 酸性低聚糖 胞壁多糖 胞外多糖
银耳的药理作用
银耳的化 学成分
银耳所含化学成分较为复杂,初步分析证明,银耳含蛋白质 6.7%一10%,碳水化合物65%一71.2%、脂肪0.6%一 12.5%,粗纤维 2.4%一2.75%,无机盐4.0%一5.4%,水分 15.2%一18.76%及少量维生素B类。 银耳的蛋白质中含 有亮氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、脯氨 酸等71种氨基酸,其中含量最大的是脯氨酸,无机盐中主 要含硫、铁、镁、钙、钾等离子。
银耳制剂虽对造血细胞数及其对辐 射的敏感性无影响,但它可显着升 高血清集落刺激因子水平。
银耳的药理 作用
抗肿瘤作用:
有报道称,银耳多糖ip给药能显著抑制癌细胞 DNA合成速率。体外给药时 ,银耳多糖不抑制癌细 胞 D N A 的合成。 推测该多糖对癌细胞不具有直 接的抑制或杀伤作用,可能是通过增强机体的抗原 刺激下产生特异性免疫等途径实现其作用。
银耳的药理 作用
其它作用:
银耳多糖对炎症的渗出和水肿有明显 拮抗作用。对大鼠应激型溃疡均有明 显抑制作用,可减少大鼠醋酸型溃疡 面积。 对红细胞有一定保护作用,可 降低某些药物引起溶血率。
一.调节免疫作用 二.抗放射与促进骨髓
造血机能和升高白 血糖与降血脂作
用
六.延长凝血时间与杭 血栓作用
七.其它作用
银耳的药理作用
调节免疫作用
一.增强单核巨噬细胞系统的功能 : 银耳多糖和银耳孢子多糖能激活小鼠 腹腔巨噬细胞,增加其吞噬能力。
银耳多糖的制备与分析[整理]
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银耳多糖的制备与分析一、实验目的1、了解银耳多糖制备的基本原理。
2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。
二、实验原理银耳是真菌的一种,是我国传统的珍贵药材之一,具有滋阴润肺、益胃生津等功效。
常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。
银耳多糖是银耳的主要药效成分,银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能,抗炎症和抗放射等作用。
1、制备(提取)原理:银耳多糖易溶于水,但不溶于乙醇。
因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。
然后再进行定性分析。
2、分析(鉴定)原理:Molish反应多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下,脱水形成糠醛及其衍生物,其与α-萘酚反应,作用生成紫色的化合物。
原理是羰基与酚类进行了缩合,这样,糖与浓酸作用后,再与α-萘酚反应,就能生成紫色的化合物。
因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。
斐林试剂质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。
氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
三、实验试剂和器材1、银耳子实体2、乙醇3、乙醚4、丙酮5、Ssvag试剂:氯仿:正丁醇=6、Molish试剂:取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL,临用前配置,棕色瓶保存。
7、斐林试剂:甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液临用时临时配置,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。
仪器和器材烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平四、实验步骤(一)制备步骤1、取银耳子实体10g加水300mL,直火提取1h,提取过程中不断用玻棒搅拌。
银耳多糖提取实验报告

一、实验目的1. 学习银耳多糖的提取方法;2. 掌握银耳多糖的纯化技术;3. 分析银耳多糖的溶液性质。
二、实验原理银耳多糖是一种具有多种生物活性的大分子物质,具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化衰老、降血糖血脂、抗凝血血栓、抗溃疡、促进蛋白质合成、抗病毒、促进神经细胞生长及改善记忆力等多方面的活性。
银耳多糖的提取主要是利用银耳中的多糖类物质,通过物理或化学方法将其从银耳中分离出来。
三、实验材料与仪器1. 材料:椴木银耳、2%的氢氧化钠、1%活性碳、5%的苯酚溶液、标准葡萄糖溶液、硫酸、乙醇、丙酮、乙醚、DEAE-C52、Sevage试剂、0.5mol·L-1盐酸、2mol·L-1 NaCl溶液。
2. 仪器:双重蒸馏水蒸馏器、超级恒温水浴、旋转蒸发仪RE52型、紫外可见分光光度计752N、低速大容量多管离心机LXJ-B型、透析袋、铝锅、搅拌器、天平、精密电子天平、电炉等。
四、实验方法1. 银耳多糖的提取(1)将椴木银耳洗净,浸泡于水中,使其充分吸水膨胀;(2)将膨胀后的银耳煮沸30分钟,以破坏细胞结构,释放出银耳多糖;(3)将煮沸后的银耳过滤,收集滤液;(4)向滤液中加入2%的氢氧化钠,调节pH值至7.0;(5)加入1%活性碳,搅拌30分钟,以去除杂质;(6)过滤,收集滤液;(7)向滤液中加入5%的苯酚溶液,以沉淀银耳多糖;(8)将沉淀物离心,收集沉淀物;(9)将沉淀物用乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂洗涤,去除杂质;(10)将洗涤后的沉淀物在60℃下烘干,得到银耳多糖。
2. 银耳多糖的纯化(1)将银耳多糖溶解于水中,配成一定浓度的溶液;(2)将溶液通过DEAE-C52层析柱,以去除杂质;(3)收集层析柱流出液,加入Sevage试剂,以去除杂质;(4)将流出液离心,收集沉淀物;(5)将沉淀物用乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂洗涤,去除杂质;(6)将洗涤后的沉淀物在60℃下烘干,得到纯化的银耳多糖。
银耳多糖 分子式

银耳多糖分子式银耳多糖是一种具有广泛应用价值的生物活性物质,被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
它是从银耳中提取的一种多糖类化合物,其分子式为C6H10O5。
本文将探讨银耳多糖的结构、性质和应用,以及其在食品、医药和化妆品中的作用。
1.银耳多糖的结构和性质银耳多糖是一种多糖类化合物,主要由葡萄糖和木糖组成。
它具有无色结晶体的外观,可溶于水和一些有机溶剂,具有一定的稳定性和保湿性。
银耳多糖具有极强的抗氧化性,可以清除自由基,对细胞具有保护作用。
此外,它还具有调节免疫功能、抗肿瘤和抗衰老等多种生物活性。
2.银耳多糖在食品中的应用银耳多糖可以作为食品添加剂,用于增加食品的营养价值和口感。
它具有较高的颜值和口感,能够增加食品的质感和口感,提高人们对食物的满足感。
此外,银耳多糖还可以作为功能性食品添加剂,具有降血脂、调节血糖、抗疲劳等多种保健功能。
3.银耳多糖在医药中的应用银耳多糖具有多种药理活性,被广泛应用于医药领域。
它可以增强人体免疫功能,提高机体抵抗力,对抗病毒和细菌感染。
此外,银耳多糖还具有抗肿瘤和抗肿瘤转移的作用,在肿瘤治疗中具有重要的应用价值。
它还可以调节血糖、降血压、降血脂等,对心血管疾病具有一定的治疗和预防作用。
4.银耳多糖在化妆品中的应用银耳多糖具有良好的保湿性和抗氧化性,被广泛应用于化妆品中。
它可以提供水分,增加皮肤的湿润程度,改善肌肤的干燥和粗糙。
此外,银耳多糖还可以清除自由基,减缓皮肤老化的过程,具有抗衰老的功效。
因此,在护肤品中添加银耳多糖可以改善肌肤状况,保持肌肤的健康和年轻。
综上所述,银耳多糖是一种具有广泛应用价值的生物活性物质。
它具有多种生物活性,可以应用于食品、医药和化妆品等领域。
在食品中,银耳多糖可以增加食品的营养和口感;在医药中,它具有调节免疫功能、抗肿瘤和抗血脂等多种作用;在化妆品中,它能够提供保湿和抗衰老的效果。
随着对其研究的深入,相信银耳多糖将在更多领域发挥其重要作用。
银耳多糖制备实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握银耳多糖的提取和分离纯化方法。
2. 了解银耳多糖的理化性质和生物活性。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理银耳多糖(Tremella fuciformis polysaccharide,TFP)是一种具有多种生物活性的天然高分子化合物,主要存在于银耳子实体中。
银耳多糖具有提高免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等生理活性,在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用前景。
本实验采用水提醇沉法提取银耳多糖,该方法操作简便、成本低、提取效率较高。
首先,将银耳子实体粉碎,用热水提取其中的多糖成分;然后,通过加入乙醇使多糖沉淀,再进行离心分离和洗涤,最后得到银耳多糖粗品。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 银耳子实体:市售优质银耳- 试剂:95%乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、氯化钠、苯酚、硫酸、活性炭等- 仪器:粉碎机、恒温水浴锅、旋转蒸发仪、离心机、分析天平、紫外可见分光光度计等2. 实验步骤(1)银耳子实体粉碎:将银耳子实体洗净、干燥、粉碎,过60目筛,备用。
(2)提取:取粉碎后的银耳子实体10g,加入100mL蒸馏水,于80℃恒温水浴锅中提取2小时。
(3)醇沉:将提取液冷却至室温,加入95%乙醇,使溶液中乙醇浓度达到70%,静置过夜。
(4)离心分离:将醇沉后的溶液以3000r/min离心15分钟,取沉淀。
(5)洗涤:用95%乙醇和蒸馏水分别洗涤沉淀3次,每次30分钟。
(6)干燥:将洗涤后的沉淀置于50℃真空干燥箱中干燥,得到银耳多糖粗品。
(7)银耳多糖含量测定:采用苯酚-硫酸法测定银耳多糖含量。
四、实验结果与分析1. 银耳多糖提取率根据苯酚-硫酸法测定,银耳多糖提取率为4.5%。
2. 银耳多糖的理化性质(1)外观:银耳多糖粗品为白色粉末,无异味。
(2)溶解性:银耳多糖在水中溶解度较好,在乙醇、丙酮等有机溶剂中不溶。
(3)分子量:通过凝胶渗透色谱(GPC)测定,银耳多糖分子量约为10万。
实训 银耳多糖制备及鉴定

实训银耳多糖制备及鉴定[任务描述]银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌。
银耳多糖主要成分为酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖及酸性低聚糖五类,不含核酸、蛋白质类物质。
银耳多糖具有明显提高机体免疫功能、抑制肿瘤转移、抗炎症、抗放射、抗血栓、降血糖等作用,是一种滋补强壮、扶正固本的保健食品和药物。
本次实训利用酶浸提法,银耳子实体经水浸泡捣碎,酶浸提,乙醇沉析分离可制得银耳多糖粗品,再用CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)络合法进一步精制得银耳多糖纯品并进行多糖的鉴定。
[任务实施]一、准备工作1.建立工作小组,制定工作计划,确定具体任务,任务分工到个人,并记录到工作表。
2.收集银耳多糖制备及鉴定工作中必须信息,掌握相关知识及操作要点,与指导教师共同确定出一种最佳的工作方案。
3.完成任务单中实际操作前的各项准备工作。
(1)材料准备银耳子实体干品20g(2)试剂2mol/L的氢氧化钠溶液、2mol/L氯化钠溶液、2mol/L盐酸溶液、无水乙醇、95%乙醇、浓氨水、乙醚、浓硫酸、α-萘酚、0.5%甲苯胺乙醇溶液、5%三氯乙酸-正丁醇溶液、复合酶制剂(含果胶酶、纤维素酶和中性蛋白酶食品级复合酶)、活性炭、硅藻土、2%十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、蒽酮、正丁醇、吡啶、冰醋酸、苯胺、邻苯二甲酸、葡萄糖标准品。
(3)仪器布氏漏斗、抽滤瓶、分液漏斗、量筒、DEAE-C薄板、离心机、水浴锅、透析袋、滤纸、薄层展开缸、组织捣碎机、分光光度计、不锈钢锅。
二、操作过程(一)操作流程见图1。
(二)操作过程1.银耳预处理选无杂质银耳子实体干品20g放入不锈钢锅中,加水1600mL,于20℃~25℃浸泡30min,置高速组织捣碎机中充分捣碎,制成银耳浆液。
2.酶浸提将银耳浆液用2mol/L盐酸溶液调pH至6.3,加入1%复合酶制剂,50℃下酶促反应40min,迅速升温至80℃灭酶,并保温浸提约1.5h,浸提液于80℃水浴浓缩至糖浆状。
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文献:银耳孢糖的化学结构初步研究及其免疫活性112 分离纯化银耳孢糖1 kg ,加水配成5 %的溶液,充分搅拌,离心(3 000 r·min - 1 ) ,除去色素等杂质,离心(1 000 r·min - 1) ,离心液搅拌下加乙醇至60 % ,离心,离心液加乙醇至醇浓度为80 % ,离心,收集沉淀,干燥,即得粗多糖100 g。
取粗多糖10 g ,加水溶解,经DEAE2Sephadex2A 50 离子交换柱,依次用蒸馏水、012 mol·L - 1 、014 mol·L - 1 、018 mol·L - 1 、2 mol·L - 1 NaCL 溶液洗脱,分别收集各洗脱液,透析,干燥。
将012 mol·L - 1部分称为TSP22。
对TSP22 经Sephadex G2150 进一步纯化,分别得到TSP22a~TSP22c 。
11211 纯度鉴定及分子量测定采用标准葡聚糖Dextran T 系列在下述色谱条件下制作标准曲线,然后测定TSP22a~TSP22c 在相同色谱条件下的色谱图及保留时间,从标准曲线上求出各多糖的分子量,此过程由GPC 软件完成。
流动相为017 %的硫酸钠,流速为015 mL·min - 1 ,柱温30 ±011 ℃。
11212 理化性质及组成糖分析[2 ]1121211 理化性质测定总糖含量以酚- 硫酸法测定,糖醛酸以间羟基联苯方法测定,蛋白质含量以lowry 法测定。
1121212 组成糖分析取TSP22a~TSP22c 各10mg ,加2 mol ·L - 1 三氟乙酸1 mL ,溶解,密封,于121 ℃烘箱中水解115 h ,吹干,残渣加1 mL 甲醇吹干,反复3 次,加水015 mL 溶解,加硼氢化钠20mg ,室温放置115 h ,不时振荡,滴加醋酸至无气泡产生,吹干。
残渣加10 %醋酸甲醇溶液1 mL ,吹干,反复3 次,残渣置五氧化二磷真空干燥器中过夜。
残渣加吡啶015 mL , 醋酐1 mL , 密封, 置121 ℃烘箱中3 h ,放至室温,吹干。
加3 mL 水使溶解,用氯仿萃取3 次,氯仿层吹干,作为中性糖供试品溶液, 进行GC 检测。
酸性糖的还原, 将TSP22a~TSP22c 水解后吹干,置真空干燥箱80 ℃减压干燥2 h ,置五氧化二磷真空干燥器中过夜使成内酯后,再加硼氢化钠还原,以下操作同中性糖部分。
样品进行GC 检测,与标准糖醇衍生物对比,确定单糖的种类。
11213 甲基化分析取TSP22a~TSP22c 各20 mg ,第一部分甲基化按文献[3 ] 进行,衍生物通过GC2MS 检测。
第二部分取少量第一部分甲基化样品,加氘代四氢铝锂还原液[4 ] ,充氮气,密封,80 ℃水浴回流16 h ,放至室温,滴加稀盐酸至无气泡,反应液充氮气离心,取上清液吹干,按组成糖分析方法制备乙酰化衍生物,通过GC2MS 检测,确定糖苷键连接位置。
11214 放射免疫法定量细胞因子放射免疫试管一套,每份设3 副平行管,第一天,每支试管中加入100μl 不同浓度的标准细胞因子和TSP22、TSP22a~TSP22c ,并加入100μl 细胞因子抗体,最后加入300μl 013 %正常家兔血清,振荡。
第二天每支试管加入100μl 125 I 标记的细胞因子。
第三天每支试管中加入700μl 含6 % PEG和2 %放射免疫缓冲液,待反应完全后,离心,弃去上清,放置过夜。
测定沉淀物的放射性, 从标准曲线上查出TSP22 和TSP22a~TSP22c 的细胞因子含量。
2 结果与讨论银耳孢糖经离子交换、凝胶色谱法分离纯化得到TSP22a~TSP22c ,并对其进行纯度分析及分子量测定。
Sepharose CL26B 柱层析表明, TSP22a ~TSP22c 均为单峰;HPGPC 分析的结果表明,TSP22a~TSP22c 均为单一对称峰,表明他们为均一多糖。
用标准葡聚糖Dextran T 系列制作校正曲线。
测得TSP22a~TSP22c 分子量分别为1 100 kD、500 kD、400 kD。
IR 光谱中,3 组分在1733 cm- 1处的肩峰为C = O 的伸缩振动产生的吸收峰,提示可能都含有糖醛酸。
并在810 及870 cm- 1处均出现甘露糖的特征吸收峰,表明含有甘露糖。
组成糖分析结果表明,TSP22a~TSP22c 是由岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖4 种糖组成。
还原后的TSP22a~TSP22c 重新进行组成糖分析,结果表明,还原后的TSP22a~TSP22c 组成糖没有变化,但各单糖残基的摩尔比发生了变化,其中葡萄糖的含量明显增加,结合GC 及IR 光谱分析,TSP22a~TSP22c 中应含有葡萄糖醛酸。
其还原前后的摩尔百分比见表1。
3 种均一多糖的总糖、糖醛酸、蛋白质的含量见表2。
甲基化分两部分进行,第一部分确定中性糖部分糖苷键的连接方式。
第二部分确定糖醛酸的连接方式。
TSP22a~TSP22c 经2 次甲基化后, IR谱检测,300023600cm21处的羟基峰基本消失,相反2 900 cm- 1处的甲基特征吸收峰显著增大,表明甲基化已完全。
第一部分取少量完全甲基化样品,经水解、还原、乙酰化制备成部分甲基化部分乙酰化衍生物,GC2MS 分析以确定中性糖部分糖苷键的连接方式,结果见表3。
3 种多糖均以(1 →3)2D2Man 为主链, 部分Man 以非还原形式处于末端(terminal) 。
并含有大量的分枝,主要在22O2 , 42O2 ,2 ,42di2O2分枝。
在TSP22a~TSP22c 中,Fuc (p)及部分Xyl (p) 以非还原形式存在于terminal 。
第二部分取完全甲基化以后剩余的样品经还原液(氘代四氢铝锂) 还原糖醛酸后借助IR 光谱分析,结果显示在1 728 cm- 1处的C = O 吸收峰消失,说明糖醛酸的羧基已被还原,经水解、还原、乙酰化制备成部分甲基化部分乙酰化衍生物。
还原后的TSP22a~TSP22c 在MS 的碎片峰出现氘代的特征碎片101、117、129、161、191、235。
此结果应是1 ,5 ,62三乙酰基2 ,3 ,42三甲基葡萄糖26 ,62d2的峰,此峰在还原前的GC2MS 图中没有出现,进一步证明了葡萄糖醛酸位于非还原末端。
结果见表3。
TSP22、TSP22a~TSP22c 对细胞因子的影响结果见表4 ,各组分在不同程度上都能刺激人外周单核细胞产生IL21α、IL26 和IL28 的数量增加,且呈剂量依赖性,与阳性对照LPS 相比,TSP22 和TSP22a~TSP22c 高剂量组的刺激作用要明显高于LPS。
表明它们均可不同程度地促进细胞因子分泌,并显示出活性的强弱与分子量大小无关。
文献:银耳多糖的提取及其清除自由基作用银耳多糖的精制将以上得到的银耳粗多糖加水溶解成接近饱和状态, 以8000 转/分离心30 分钟去除少量不溶物. 再次醇析, 可提高多糖的纯度. 也可分级加入乙醇, 既可纯化多糖又可使不同分子量和性质的多糖达到进一步分离目的. 去除杂蛋白、色素按表1步骤操作.将去除杂蛋白、色素的多糖溶液装入预先处理好的透析袋, 先用自来水透析24 小时, 再用蒸馏水透析12小时, 然后醇析, 干燥备用.文献:银耳多糖结构与生物活性研究进展1 银耳多糖结构特征银耳多糖是以α-(1 → 3)-D- 甘露糖为主链的杂多糖,在子实体、孢子、发酵液和细胞壁中都有存在,其组成单糖有葡萄糖、甘露糖、果糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖和葡萄糖醛酸,目前研究较多的是子实体和孢子多糖,且主要侧重于单糖组成、相对分子质量和支链等方面的研究。
1.1 子实体多糖1.1.1 子实体酸性杂多糖酸性杂多糖中含有特征性葡萄糖醛酸残基,多种单糖以不同物质的量比存在,多糖相对分子质量大小不一,支链与主链甘露糖的C2、C4 或C6 相连。
首先从银耳子实体的水提取物中分离到3 种具有抗肿瘤作用的酸性杂多糖A 、B 、C ,主要由木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸组成,含有少量的葡萄糖、微量岩藻糖。
A 、B 均含有O- 乙酰基结构,多糖B 相对分子质量为4.7 ×10 5,木糖、葡萄糖醛酸、甘露糖(含少量葡萄糖)物质的量比为1.5:1:3.7[2]。
后来,Ukai 等[3]在证明子实体中酸性杂多糖AC、BC 结构的过程中,用硫酸水解法得到3 种均质的酸性低聚糖(H-1、H-2 和H-3)。
20 世纪80 年代,中国学者夏尔宁等[4]从银耳子实体中提取一种相对分子质量为1.15 ×105 的多糖,是由岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸组成,其物质的量比为0.92:0.49:0.18:1.00:1.15:0.57,其中总糖含量为75.7%,葡萄糖醛酸含量14.7%。
Gao等[5-7]从银耳子实体中提取多种酸性多糖T1a-T1c、T2a-T2d、T3a-T3d,相对分子质量大小不等,均是以(1 →3 ) - 甘露糖为主链,葡萄糖、甘露糖、果糖、木糖和葡萄糖醛酸组成的支链通过O-2、O-4 或O-6 连接在主链上。
银耳子实体酸性多糖高级结构也有研究,Yui 等[8]提取的多糖一级结构是以α-D- 甘露糖为主链,β-D- 木糖、β-D- 葡萄糖酸、β-D- 木二糖与主链甘露糖的C2连接的,主链具有左旋三重螺旋对称结构,6 个甘露糖残基及3 个侧链基团沿中心轴2.42nm 形成一个重复单位。
1.1.2 子实体中性杂多糖从银耳子实体中分离出的一种碱溶性中性杂多糖为无色粉末,其相对分子质量为8000,聚合度46,主要由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,物质的量比大约为2:4:5:35[9]。
1.2 孢子多糖银耳孢子可以通过固体培养或深层液体发酵培养获得,孢子多糖结构特点与子实体多糖极其相似。
1.2.1 孢子酸性杂多糖从固体培养法获得的中国福建产银耳孢子中提取、分离得到3 种均一体多糖,分别命名为TF-A、TF-B、TF-C,相对分子质量分别为7 . 6 × 1 0 4、7 . 6 × 1 0 4、7.0 × 104。
TF-A 由L- 岩藻糖、L- 阿拉伯糖、D- 木糖、D- 甘露糖、D- 半乳糖和D- 葡萄糖组成,其物质的量比是0.29:0.037:0.33:1.0:0.75:1.06。
TF-B 和TF-C 由L- 岩藻糖、L- 阿拉伯糖、D- 木糖、D- 甘露糖、D- 葡萄糖和葡萄糖醛酸组成,物质的量比为0.73:0.036:0.28:1.0:0.16:0.19和0.75:0.058:0.37:1.0:0.086:0.37[10]。