不同激素不同外植体对苜蓿品种再生的影响
植物激素对2个紫花苜蓿品种再生体系的影响
诱 导 生根 的培养基 为 １ ２Ｍｓ ／ ＋ＮＡＡ０ ５ｍｇ Ｉ ． ／ 。
关键 词 ：紫花 苜蓿 ； 伤 组织 ； 生体 系 ； 愈 再 植物 激素 中图分 类号 ： ４ Ｑ ９ ４ Ｓ５ ； ４ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：１ ０ — ５ ０ ２ １ ） ５０ １－４ ０ ９５ ０ （０ ０ ０ －０ ５０
Ｅ ｍａｌａ ｎ ａ ６ ７ ｓｎ ． ｏ — ｉ：ｍｉｔ０ ２ ＠ ｉａ ｃ ｒ ｎ
菌 种子 萌发 ７ ｄ的下 胚 轴 为 外 植 体 材 料 ， 行 不 同浓 进
度 ２ ４Ｄ和不 同 ２ ４Ｄ、 ，－ ，一 ＫＴ 浓度 配 比的愈 伤组 织诱 导 试 验 。每个 处 理 ３个 重 复 ， 个 重 复 ３ 每 Ｏ块 外 植 体 。
率 的统 计 ， 究 不 同外 植 体 类 型对 愈 伤 组 织诱 导 的影 研
响。
１ ２ １ 无菌苗 的培 养 ． ．
收稿 日期 ： ０ ００ — ３ 修 回 日期 ： ０ ００ — ６ ２ １ — ３２ ； ２ １ — ４２
１ ２ ３ 下 胚 轴 的 愈 伤 组 织 诱 导 选 取 ２个 品 种 的 无 ． ．
甘肃 兰州 ７０ ７ ） ３ ０ ０
摘 要 ： 用 ＭＳ为基本 培 养基 ， 采 附加 不 同浓度 的 ２ ４Ｄ、 Ｔ 和 ＮＡＡ， “ ，一 Ｋ 对 盛世 ” “ 和 甘农 ４号” ２个 紫 花 苜蓿品种 进行 了组 织培 养再 生体 系的研 究。结 果表 明 ： 下胚轴 是愈 伤组 织 诱 导的 最佳 外植 体 材 料 ； ， ２ ４Ｄ浓 度增加 对“ 一 甘农 ４号” 紫花 苜蓿 出愈 率影 响不 明显 ， “ 但 盛世 ” 紫花 苜蓿 的 出愈 率 随着 ２ ４Ｄ 浓度 的 ，一
紫花苜蓿高频组培再生体系影响因素研究
第 ４期
草 原 与 草 坪 ２１ ０ ０年
５ ５
紫 花 苜蓿 高频 组培 再 生体 系影 响 因素研 究
徐 春 波 王 勇 ， 海 霞 ， 赵 ，李 兴 酉
（ ．中国农业科 学 院草原研 究所 ， １ 内蒙古 呼和 浩特 ２ ．内蒙古 农业 大学 生态 环境学 院 ， 内蒙古 呼和浩 特 ００ １ ； １ ０ ０ ０ ０１ １ ０ ８）
于进 一步研 究解决 。
１ ２ ２ 培养基 ．．
愈伤 诱导 培养基 ：
Ａ．ＭＳ １ ０ ｍｇ Ｌ ２，－ ＋ ． ／ ４Ｄ Ｂ ．ＭＳ— ． ／ ， － 卜１ ５ ｍｇ Ｌ ２ ４ Ｄ Ｃ ＭＳ＋ ２ ｍｇ Ｌ ２， － ． ．０ ／ ４ Ｄ＋ ０ ５ ｍｇ Ｌ ＫＴ ＋ ．２ ／
２０ ０ｍｇ Ｌ水解 酪蛋 白 ０ ／
收稿 日期 ： ０ ９１－１ 修 回 日期 ： ０ ００ －６ ２ ０ －２２ ； ２ １－５２ 基金 项 目 ：中 央级 公 益 性 科 研 院 所 基 本 科 研 业 务 费 专 项 资 金 （ 国 农 业 科 学 院 草 原 研 究 所 ） 目 资 助 中 项
１ ２ １ 无 菌苗培 养 ． ．
选 择饱满 、 种皮 完整 无破 损 的优
良苜蓿 种子 ， 自来水 冲洗 种子 ３ ｎ ７ 的酒精 消毒 ０ｍｉ ，０ １ｍｉ ， ｎ 无菌水 漂洗 ３ ， ０ｓ然后 转入 ５ 的次氯 酸钠 中消 毒 １ ｎ 再用无 菌 水 冲洗 ５次 。用 灭 菌 滤纸 吸 干 种 ０ｍｉ ， 子表 面 的液体 后接种 到无激 素 的 １ ２ＭＳ培养 基上 。 ／
关键词 ：紫花 苜蓿 ； 因型 ； 基 外植体 ； 养基 ； 培 脱分化 ； 分化
中 图分 类号 ： ４ Ｓ ３ ５ Ｓ ５ ； ３ 文献标 识码 ： Ａ 文 章编号 ：１ ０ —５ ０ ２ １ ） ４０ ５ —５ ０ ９５ Ｏ （ Ｏ Ｏ Ｏ —０ ５０
苜蓿的遗传改良和品种选育
苜蓿的遗传改良和品种选育简介：苜蓿是一种重要的多年生豆科植物，具有高产、优质、广适应性和良好的草坪和饲料价值。
为了满足不同地区和不同需求的种植者的要求，对于苜蓿的遗传改良和品种选育显得至关重要。
遗传改良可以通过引入外源基因和育种方法来改善苜蓿的抗病性、适应性、产量和品质等特性。
品种选育则强调选择适应不同生态条件和用途的苜蓿品种，以满足不同农业和草地管理的需求。
一、苜蓿的遗传改良苜蓿的遗传改良主要通过引入外源基因和采用育种方法来提高苜蓿的抗病性、抗逆性、产量和品质等重要农艺性状。
以下是几种常见的遗传改良方法：1. 杂交育种方法：杂交育种是利用两个不同亲本的优点结合，通过选配和杂交后代的筛选，选取具有优良特性的杂交后代作为新品种的一种方法。
对于苜蓿而言，通过杂交可以提高产量、抗逆性和品质等性状。
这种方法在苜蓿的品种选育中得到了广泛应用。
2. 细胞遗传学方法：细胞遗传学方法主要包括细胞培养、愈伤组织诱导和植株再生等步骤，可以通过转化、突变或选择优势细胞株来获得具有特殊性状的苜蓿植株。
这些方法可以加快苜蓿的遗传改良过程，提高选育效率。
3. 基因工程技术：基因工程技术可以通过转基因技术引入外源基因或抑制内源基因来改善苜蓿的性状。
例如，研究人员已经成功地将拟南芥中的抗逆性相关基因导入苜蓿，提高了苜蓿的抗逆性能力。
然而，基因工程技术在苜蓿的遗传改良中的应用仍然存在一些争议和风险，需要进一步深入研究和评估。
二、苜蓿的品种选育苜蓿的品种选育是根据不同的地理环境、栽培要求和用途的不同，选择具有适应性和高产性的苜蓿品种。
以下是几种常见的品种选育方法：1. 渐进选择法：渐进选择法是根据目标性状的选择，逐代选择具有目标特性的个体作为下一代的亲本，以获得更好的后代。
这种方法可以在保持其他优良性状的同时，逐步改良目标性状，提高苜蓿的产量、品质和抗逆性等特性。
2. 优良种质的选取：优良种质的选取是指在苜蓿的品种选育中选择具有抗逆性、高产量和良好品质等优良性状的种质作为亲本。
三叶草基因工程研究进展
三叶草基因工程研究进展摘要 三叶草作为优良的牧草，具有营养丰富、品质优良、适口性好等特点。
现代生物技术的不断发展为三叶草育种和种质创新提供了新的技术手段，笔者从三叶草再生和遗传转化体系，转基因三叶草在品质改良、抗病性、抗虫性、抗逆性及作为植物反应器等方面的研究进展进行了全面综述，分析了三叶草基因工程研究中存在的主要问题，并对其应用前景和研究方向进行了展望。
关键词 三叶草 再生体系 转化体系 转基因中图分类号前言三叶草属，也称车轴草属，全球约250余种，原产亚洲南部和欧洲东南部。
野生种分布于温带及亚热带地区，为栽培历史较悠久的牧草之一，现已遍布世界各国，其中栽培面积最大的是西欧、北美、大洋洲和原苏联地区。
三叶草主要用作反刍动物的饲草饲料。
是一种世界性分布与栽培的优良豆科牧草。
该属在农业上有经济价值的有25种，其中最重要的约10种。
我国是世界上第2草地大国，三叶草在我国广泛种植，常见的野生种有白三叶、红三叶、草莓三叶草和野火球4种；引自国外的有杂三叶、绛三叶、地三叶和埃及三叶4种；目前栽培研究较多的是白三叶、红三叶及地三叶[1]。
三叶草具有生态适宜性强、侵占性强、耐践踏、利用年限长、营养丰富、产量高、耐粗放栽培管理、抗病虫危害和种植利用成本费用低等优点。
作为我国最重要的豆科牧草之一,三叶草不仅是重要的饲料作物,还在土壤改良、水土保持以及生态环境保护方面发挥着积极的作用。
但是,三叶草缺乏含硫氨基酸、较不耐旱、抗虫性差、易感染苜蓿花叶病毒等问题,常规育种难以解决,通过基因工程方法将目的基因导入三叶草是改良三叶草品质,增强其抗病、抗虫、抗逆能力的有效手段.近年来随着植物基因工程研究的进展,越来越多的转基因成功的报道也不断出现。
三叶草通过生物技术研究,可实现高蛋白基因、固氮基因、病虫害基因及抗逆性基因等转移,培育造福人类的牧草新品种，而必将会极大地促进畜牧业发展，促进地被覆盖和生态建设，对当地人民生活水平和生活环境的提高和改善具有重要的实践意义。
肇东苜蓿与三种国外引进苜蓿品种间杂交的初步研究
肇东苜蓿与三种国外引进苜蓿品种间杂交的初步研究紫花苜蓿（Medicago sativaL-）是世界上分布范围最广的豆科牧草，也是我国种植面积最大的人工牧草口]。
黑龙江省地处高寒地区，种植紫花苜蓿既要考虑当年的产草量，又要兼顾苜蓿品种能否安全越冬，因此在选育品种和引种驯化过程中，品种的抗寒性是考虑的重要因素之一[2]，苜蓿生产中低温越冬问题是制约苜蓿生长和利用的关键。
国外苜蓿种植的主要国家有选择地培育苜蓿品种的工作始于2 0世纪初期，育种的主要目标是提高品种的耐寒性。
杂种优势育种是作物育种中富有成效的一种方法，我国已通过审定登记的苜蓿育成品种中，通过杂交育种方法育成的新品种共7个，占育成新品种数的30.43%，它们获得了双亲的优良性状，比原亲本具有更高的增产潜力及更好的越冬性能。
杂交育种在苜蓿育种中将发挥越来越重要的作用。
目前肇东苜蓿(Medicago sativaI。
.cv. Zhaodong)越冬性好，但是产量低，在黑龙江地区引进的国外品种丰产性好，但是稳定性弱、越冬性差，一般超过3 a就死掉90%，因此为了获得抗寒、高产、稳定的苜蓿新品种，利用在黑龙江地区越冬性较好的地方品种肇东苜蓿和国外引进的3种高产苜蓿：美国苜蓿W L323、保加利亚苜蓿Pleven6、俄罗斯苜蓿Beza87分别进行正反种间杂交，对杂交亲本的花粉活性进行检测及杂交结荚率等数据进行统计分析，为苜蓿杂交育种亲本选配提供理论支撑，同时为获得杂交苜蓿新种质奠定了基础。
1材料与方法1.1试验地概况试验在黑龙江省农业科学院草业研究所试验地进行，地处N45.2。
，E122.6。
；海拔169 m,最高气温38℃，最低气温--30℃，无霜期139 d左右，年平均风速3.3 m.S_1，年平均降水量569.1 mm，属中温带大陆性季风气候，年平均日照时数2670 h，年总辐射量111.55 kcal-cm-2，≥10℃年活动积温2887℃，土壤为黑土。
不同物理条件对南方紫花苜蓿原生质体游离的影响
紫花 苜蓿 （ ｄ ａｏｓｔａＬ ） 年生 豆科 植 Ｍｅｉｇ ｉ ．多 ｃ ａｖ 物 【 ． 花苜 蓿 生 物技 术 的研 究 ， １紫 Ｊ 国际 上 始 于 上 世纪 ７ ０年代 ， 国则 始 于 ８ 代 初Ｉ ． 国紫 我 ０年 ２我 ｊ 花 苜蓿 的生物 技术研 究起 步较 晚 ， 多集 中在 北 且
本实验所有外植体 由 Ｘ Ｎ一１ 型紫花苜蓿种
子得 到 ． 将紫 花 苜 蓿 的种 子 用 自来 水 冲 洗 ５ ｉ， ｍｎ 滤纸 吸干 种子表 面 的水 分后 ， ７ ％酒精 浸 ４ｓ 用 ５ ０， ０１ ．％升汞 溶液 消毒 １ １ｍｎ 无菌 水 冲洗 ４次 ２ ５ ｉ， 后 ， 种子 接种 在不 含 激 素 的 １２ Ｓ培 养 基 上 ． 将 ／Ｍ 接种 ３天后种 子萌发 ， 待无 菌苗 的叶片 出现 ４～５
件、 不同的渗透压稳定剂 ， 以及质膜稳定剂等 ， 以 期对南方紫花苜蓿的生物技术推广提供理论依 据 和实践 指导 ．
液溶解＿（ ５ 见表 １ ， ５８抽滤灭菌． ）ｐ Ｈ＝ ．，
１ 材 料 与 方 法
１１ 实验 材料 及外 植体 的获得 ．
表 １ Ｃ Ｗ 溶 液 组 成 （ ｇＬ Ｐ ｍ ／）
王 海 波
（ 曲靖师范学院 生物资源与环境科 学学院， 云南 曲靖 ６５ １） ５０ １
摘 要 ： 以选育 的 Ｘ Ｎ一１型紫花苜蓿种子发育 ５～ ７天的无菌苗 叶片为材 料， 究 了不 同的材料预 研 处理技术 、 渗透压稳定剂 、 质膜稳定剂等 因子对其原 生质体 游离的影响 ， 结果表 明： 以在 Ｃ Ｗ１ｇＬ液 中 Ｐ ３／ 预质壁分 离 １ ｈ最为有效， 明显提高原生质体 的完整性 ， 可 完整产 率达 到 １ ． ４０ 个／； ２×ｌ ｇ 渗透压稳定剂
苜蓿子叶节离体再生体系的建立
关键词 ： 苜蓿 ； 子叶节 ； 丛生芽 ； 再生体系 中图分类号 ： Ｓ ５ ４ １ ． １ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ －０ ０ ０ ９ （ ２ ０ １ ３ ） １ ４ —０ １ ０ ４ 一Ｏ ３
的影 响 。
１ … ２ ３ 不定芽 的诱导培养
选择在种 子萌发 培养基上
生长 ７ ～８ ｄ的无菌苗 子叶节为外植体 ， 子 叶节的切取方 式是采用不分开 ２片子 叶 ， 去 除 ２片子 叶的 ２ ／ ３并保 留
２ ｒ ／ ｌ ｌ ｎ 下胚轴 的方法 ， 将 切取好 的子 叶节外 植体 以下胚 轴 的形态学下端竖直 向下 插入 到分 别添加 不 同浓 度 的 ６ － Ｂ Ａ（ ０ ． ５ 、 １ ． ０ 、 １ ． ５ 、 ２ ． Ｏ ａｇ ｒ ／ Ｌ ） 的 ＭＳ培养基 中 ， 每种浓 度设 １ ０次重复， 每次重复接种 １ Ｏ 个外植 体 ， 预培养进行 芽启动 ７ ～ｌ Ｏ ｄ 诱导不定芽。１ ０ ｄ 后统计不定芽诱导率。 １ ． ２ ． ４ 不定芽 的伸长培养 在不定芽诱 导培 养基上培 养１ ５ ｄ 左右后 ， 子 叶节部位 有大量丛 生芽 出现 ， 将 在不
摘
要： 以苜蓿子 叶节为外植体 ， 以 ＭＳ为基本培养基 ， 研 究了不 同浓度激素 对苜蓿离体再 生
体 系中子叶节外植体分化 、 不定芽诱 导、 不定 芽伸 长及 生根 的 影响 ， 以期建 立 高效 的苜蓿子 叶节
离体再生体 系。结果表 明 ： 苜蓿子 叶 节再 生 最佳 萌发培 养 基 为 ＭＳ ； 最佳 诱 导培 养基 为 ＭＳ ＋ １ ． ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ６ － Ｂ Ａ， 诱导时间为 ７ ～１ Ｏ ｄ ； 不定 芽伸长的最佳培养基 为 ＭＳ ＋０ ． ５ ａｇ ｒ ／ Ｉ ６ 一 Ｂ Ａ； 最佳 生
苜蓿组织培养和再生体系研究
纱布 包 好 ， 入 ４ ℃ 水 浴 中 泡 种 １～２ 。０ １ 升 汞 放 ５ ｈ ．％ （ ｇ １ 溶液 消毒 ３～ ｍｎ Ｈ Ｃ： ） ４ ｉ。无 菌水 冲洗 ５次 ， 无菌 滤 纸 吸干 ， 种于不 含任 何激 素 的 固体 Ｍ 基 本 培 养基 （ 加 接 Ｓ 添
３ ％蔗糖 、． ％琼脂 ，Ｈ＝５ ８ 中。 ０８ ｐ ．） 培养 条 件 ： ５ ±Ｉ 光 照 强 度 ４ ０ １， 暗 周 期 ２ Ｃ Ｅ， ０ ０ｘ 光／
织， 并通过外植体直接再 生途 径和胚性 愈伤 组 织再 生途 径 获得 再 生 芽。在含 有 ＩＡ的 １２ Ｂ ／ ＭＳ培 养基 诱导再 生 苗
生根 。
关键词 ： 苜蓿 ； 外植体 ； 愈伤组织 ； 胚性愈伤 组织； 组织培养
中图 分 类 号 ￥６ ．３ ５ ７２ 文 献标 识 码 Ａ 文章 编 号 １０ ７ ３ （００ Ｏ ４ ０ ０ ７— ７ １ ２ １ ）７— ６— ２
合 的诱 导生 根培养基 （ ２ 中 ， 导生根 培养。 表 ） 诱
表 ２ 根诱 导 培 养 基成 分
发 芽培养获得无 菌苗 ， 以无 菌苗 的叶 片 、 茎段 为 组织 培养 的外植 体材料 。
１２ 试 验 方 法 ．
１２ １ 无菌苗培 养 ．．
取 粒大饱 满 的苜蓿种 子 ７ ， ０粒 双层 １２４ 数据 统计 ．． 采用下 列公式计 算 ：
１ ６卷 ０ ７期
张明娟等
苜蓿组织培养和再生体 系研究
４ ７
２１ 无菌 苗出芽 率 ．
农 菁一 号 的 出苗率 为 ２．％ ， 东 ５７ 肇
数天 分化 出再 生芽 ， 幼芽生 长状态 良好 （ ｌ） ５ 统 计 图 ｅ 。２ｄ
紫花苜蓿品种‘德宝’不同外植体愈伤组织诱导研究
ｅ ｐａ ｔ ，． ／ ，一 ＋ ＭＳｍｅ ｉｍ ａ ｅｂ ｓ ｅｆｃｉｅ ｅｓ ｎｃｌ ｓ ｎ ｕ ｉｇａ ｎ ｙ ｅ ｆ ｘ ｘ ｌｎｓ １ ５ｍｇ Ｌ ２ ４Ｄ ｄｕ ｈ ｄｔ ｅｔ ｆ ｔ ｎ ｓ ａｌ ｄ ｃｎ ｍｏ ｇ４ｔｐ ｓｏ — ｈ ｅ ｖ ｉ ｕｉ ｅ
ｓ ｅ Ｉ ｄ ｉｉ ｎ ２ ４ Ｄ ｆ ｄ ｆｅ ｅ ｔ ｃ ｎ ｅ ｔ ａ ｉｎ ａ ｉ ｎ ｆ ａ ｔ ｅ ｆ ｃ ｓ ｏ ａ ｌ ｓ ｉ ｄ ｃ ｉ ｎ ｏ ｉ ｅ ｅ ｔ ｔ ｍ． ｎ ａ ｄ ｔ ， ， 一 ｏ ｉ ｒ ｎ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｓ ｈ ｄ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｆｅ ｔ ｎ ｃ ｌ ｎ ｕ ｔ ｆ ｄ ｆ ｒ ｎ ｏ ｆ ｏ ｉ ｕ ｏ ｆ
张勃 秦 或 ， ， 王黎 明 ， 方强恩
（． １ 甘肃农业 大学草业学 院， 草业生态系统教 育部 重点 实验室 ， 甘肃省 草业工程实验室 ， 美草地 中一 畜牧业可持续 发展研究 中心 ， 甘肃 兰州 ７ ０ ７ ；． ３ ０ ０ ２ 中国科学 院寒 区旱 区环境和工程研究所 ， 甘肃 兰州 ７ ００ ；． ３ ０ ０ ３ 冰冻圈科 学国家重点实验室 ， 甘肃 兰州 ７Ｏ０） ３ ００
愈 伤组 织 诱 导 培 养． ，一 ２ ４Ｄ浓 度 设 ３个 水 平 ：． 、 １５ ２０ ２５ｍｇ Ｉ 各 处理接 种 ６瓶 ， 瓶接 ３ ． 、． ／ ． 每 ～５个 外 植体 ． 接种 后第 ２ｄ开 始观 察 和 记 录不 同外 植 体 愈
苜蓿遗传转化体系的优化与AtPCS1基因表达载体的构建
ｄ ｆｅ ｅ ｔａ ｅ ｃ ａ ｌ ｒ ａ ｄ ｈ ｄ ｍｏ ｅ ｒ ｇ ｎ ｒ ｔ ｎ ｂ ｄ ｈ ｎ ｏ ｈ ｒ ． ｅ ｉ ｉｒ ｅ ｅ ｅ ａ ｅ ｌ ｎ ｓ ｉ ｒ ｎ ｉ ｔ ｄ ｍｕ ｈ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｅ ｅ ｅ ａ ｉ ｕ ｓ ｔ ａ ｔ ｅ ｓ Ｔｈ ｎ ｖ ｔ ｏ ｒ ｇ ｎ ｒ ｔ ｄ ｐ ａ ｔ ｆ ｅ ｏ
ｒ ｇ ｎｅ ａ ｉｎ ｂｉ ｔ ｆ ｔ ｅ ｅ ｇｅ ｏ ｙｐ ｓ ａ ｈ ｃ ｔｖａ ｅ ｃ ｅ ｅ ｒ ｔｏ ａ ｌ ｙ ｏ ｈ ｓ ｎ ｔ ｅ ， ｎｄ ｔ ｅ ｕｌｉ ｒ Ｍ ｄｉａｇｏ ｓ ｉ ａ ‘ ｎ ｎｇ ｉ ａｔｖ Ｇａ ｎｏ Ｎｏ ．１’ ｈ ｓ ｈ ｔ ｔ ａ ｔ ａ ｈｅ ｈｉ ｅ ｔｒ ｇ ｎ ｒ ｔｏｎ ａ ｉｉｙ ｇｈ ｓ ｅ ｅ ｅ ａ ｉ ｂ ｌ ．Ｔｈｅ ｈｅｃ ｌｕ ｎ ｃ ｉ ｎ ａ ｄ ｐ ａ ｔｒ ｇ ｎｅ ａ ｉ ｎ ａ ｉｉｙ ｏ ｆｅ ｅ ｔｅ ｐ ａ ｓａ ｔ ｎ ｔ ａ ｌ ｓ ｉ ｄｕ ｔｏ ｎ ｌ ｎ ｅ ｅ ｒ ｔｏ ｂ ｌｔ ｆｄｉｆ ｒ ｎ ｘ ｌ ｎｔ ｓ ｌａ ， ｙｐ ｃ ｔ ｌ ｎｄ ｃ ｔ ｌ ｄ ｎｎ ｎｇ Ｎｏ．１ｗｅ ｅ ｓ ｕｄ ｅ ａ ｄ ｆ ｎｄ ｔ ａ ｈｅ ｃ ｌｕ ｅ ｏ ｎ ｒ ｅ ｆ ｈ ｏ ｏ ｙ ｓ ａ ｏ ｙ ｅ ｏｎ ｏｆＧａ ｏ ｒ ｔ ｉｄ， ｎ ｏｕ ｈ ｔｔ ａ ｌ ｓ ｓｃ ｍｉ ｇ ｆｏｍ ｅ ｆ ｌａ
甘
肃
农
业
大
学
学
报
第 ４２卷 ～ ２
Ｊ ＯＵ ＲＮＡＬ ＯＦ ＧＡＮＳＵ ＡＧＲＩ Ｕ Ｌ Ｃ ＴＵ ＲＡＬ ＵＮＩ ＶＥＲＳ ＴＹ Ｉ
苜 蓿 遗传 转化 体 系 的优 化 与 Ａｔ Ｓ ＰＣ １
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试验方法 ( 1 无菌苗的获得。 ) 将各首楷品种的种子在超净工作 台中用75%酒精浸没0 5一1~ ， . 取出后用0.1%Hg 1 C 2消 毒1 Inln， 0 然后用无菌水冲洗3一 5次， 接种到1甩MS 中， 7天后种子萌发、 子叶展开。 (2) 不同诱导愈伤培养基比较试验。 以无菌子叶和下 胚轴为外植体， 在MS基本培养基的基础上， 分别附加不 同浓度的生长素2斗D (0.1一 8 书 L) 、 0. 1 留 细胞分裂素吞 BA 12
表1 不同外植ห้องสมุดไป่ตู้、 浓度培养基对首蓓愈伤组织 不同
形成的影响
品种 不同培养基配方 (mg l )
2，一 O.8 + KT Z 4 D 2，一 O.4 + KT I .5 4 D
子叶愈伤率 下胚轴愈伤率 (%)
10 0 .0 9 6 .6 5 8 .3 82 ， 5 10 0 .0 94 .1 75 .1 7 6 .8 10 0 .0 6 8 .8 6 0 .0
土壤盐渍化是影响农业生产和生态环境的严重问题， 在盐胁迫下， 植物生长缓慢， 代谢受抑制， 严重时出现盐 斑、 叶子萎蔫， 甚至死亡。目 全世界的盐渍地约占陆 前， 地面积的3 %， 0 而中国的盐渍地比例明显高于世界平均水 平， 天津东部滨海平原区土壤盐渍化尤其严重。 另外， 日 光温室的大面积生产使士壤盐渍化的问 题也越来越明显‘ ] 1。 首蓓， 豆科首楷属， 是一种较抗盐的作物1 ， ] 2 其分布 遍及五大洲， 在美国畜牧种植业的7 %是首蓓， 0 首楷中蛋 白质含量可达8 %， 0 营养价值丰富， 而且再生性强， 是改 良 土壤的绿肥1 ， ] 3 ， 2 因而被称为 “ 牧草之王” 如果能在盐 。 碱地上种植首楷， 既可以起到绿化作用， 又可创造经济价 值， 还可以改良土壤， 兼顾社会效益， 经济效益， 生态效 益。 本试验通过研究不同首楷品种、 不同外植体及不同培 养基激素改变对愈伤组织形成和芽分化的影响， 以期建立 首猎的高频快繁再生体系和高效转化体系。 1
W L 32 3
一 s e
2， D O.2 + KT I 4一
2， D O.1 + KT O.5 4一 2， D O.8 + KT Z 4一
钾 . 1
0 0 0 0
硕 研 生研 方 为 物 术 E一l :r i a t a l21 @ l loo.c m.c 。 士 究 ，究 向 生 技 。 ma u j n i n 4 ya o n u * 通讯作者: 杨静慧， 教授， 博士， Tel: 022一 23751517。 E一 mail:
4 0 .0
一 . 1
(%) 0 0 0 0
n n UU C n Ut j 八n 曰U
材料与方法
游客
2， D O.2 + KT I 4一 2， D O. 1 + KT O.5 4一
供试首楷品种WL32 、 3 劳博来源于中国农科院畜牧研 究所; 游客来源于北京百绿有限公司; 龙牧80 来源于黑 1 龙江畜牧研究所。
摘 要: 试验以4 种首着的子叶和下胚轴为外植体， 采用了1 种愈伤诱导培养基， 种分化培养基， 1 0 1 研究
了 不同品种、 不同激素处理和不同外植体对首着愈伤和芽分化的影响。 结果表明， 不同品种荀着、 外 不同
植体均容易 形成愈伤组织 2，D是首着愈伤组织形成的主要因 ; 在0.s nlg/ 2，D + 2 11 ; 4一 素 L 4一 19几KT的 作用 下， 下胚轴和子叶愈伤诱导率最高为10 %; 在4 mg几6一 的作用下， 0 BA 子叶再生芽率最高为43. %; 在 9 KT 浓 度为l mg/ 时子叶芽的再生率最高为3 .3%。 L 3 关键词: 首着; 组织 培养; 愈伤组织; 再生
品种芽的分化只用细胞分裂素即可。
同 浓度的 分裂素6 BA (1一 L)、 (1一 细胞 4m留 K T 4m吵 )
和生长素IAA (0 2一 5 In目 ) ， . 0. 1 2%蔗糖。 每种培养 基处
理3瓶， 每瓶接种 1 块愈伤组织。 0 培养3 天后进行数据 0
jingh山 yangZ@ h ￡ ya no
劳博
2， D O.4 + KT I .5 4一 2， D O.2 + KT I 4一
2，一 O. 1 + KT O.5 4 D
创新研究
南
方
农
业
第1卷第3期
V ol . I N o .3
2007年5 月
M ay .2007
S o u t h C h il a
Agriculture
(1一 m留 KI， 5一 nl目 ， 4 L)、 (0 2 L) 3%蔗糖。 . 每种培养基处 理5瓶， 每瓶接种r 个外植体。 o 培养巧天后进行数据统计。 (3 不同分化培养基比较试验。 ) 将在愈伤组织阶段生 长了10天左右的子叶和下胚轴的愈伤组织， 转人分化培养 基中进行培养。 在MS基本培养基的基础上， 分别附加不
南
方
农
业
第1卷第3期
V ol . I N o .3
2007 年5 月
Ma y . 20 07
South China Agriculture
不同激素不同外植体对首楷品种再生的影响
田瑞娟‘ ， 刘艳军2， 杨静慧2*， 邱苗苗‘ ， 梁国鲁‘
l ( 西南大学园艺园林学院，重庆4007 6; 2 天津农学院园艺系， 8 4 1 3003 )
基 金项目 天 : 津市自 学 项目(0 361 1 1， YFJMJ 1 。)， 然科 基金 2 42 0 5 C 4 。 天 津市农业 科技成果转化与 推广项目 (05040 8 。 1)
作者简介: 田瑞娟 ( 198 一) ， 1 女，山西太原人， 西南大学园艺园林学院
2， D O.8 + KT Z 4一 2， D 0 4 + KT I .5 4一
再生率可达到4 . %; 在培养基中加入KYI ~ 4 In留 时， 3 9 L 其再生率随Kl ， 浓度的升高而降低， 为I nlg L 时， T K I 再 生率为3 3 %; 在吞 Z 1 或KT Zm目 培养基中 3 BA nl目 L 加人
IAA(0 2一 s mgL) 均使芽的 . . 0 I 再生率降低。 上述 表明 首稽