生态毒理学_6 实验六
毒理学实验报告
化学化工学院环境毒理学实验报告专业：环境科学班级：09级02班姓名：学号：二〇一一年六月莱茵河污染事件（以DDT为例分析）1、污染事件发生原因及过程：1986年11月1日深夜，瑞士巴富尔市桑多斯化学公司仓库意外起火，装有1250吨剧毒农药的钢罐爆炸，硫、磷、汞等毒物随着百余吨灭火剂进入下水道，排入莱茵河。
警报传向下游瑞士、德国、法国、荷兰四国835公里沿岸城市。
剧毒物质构成70公里长的微红色飘带，以每小时4公里速度向下游流去，流经地区鱼类死亡，沿河自来水厂全部关闭，改用汽车向居民送水，接近海口的荷兰，全国与莱茵河相通的河闸全部关闭。
翌日，化工厂有毒物质继续流入莱茵河，后来用塑料塞堵下水道。
8天后，塞子在水的压力下脱落，几十吨含有汞的物质流入莱茵河，造成又一次污染。
11月21日，德国巴登市的苯胺和苏打化学公司冷却系统故障，又使2吨农药流入莱茵河，使河水含毒量超标准200倍。
这次污染使莱茵河的生态受到了严重破坏。
2、直接影响及经济损失：事故造成约160公里范围内多数鱼类死亡, 约480公里范围内的井水受到污染影响不能饮用。
污染事故警报传向下游瑞士、德国、法国、荷兰四国沿岸城市, 沿河自来水厂全部关闭, 改用汽车向居民定量供水。
由于莱茵河在德国境内长达865公里, 是德国最重要的河流, 因而遭受损失最大。
事故使德国几十年为治理莱茵河投资的210亿美元付诸东流。
接近海口的荷兰, 将与莱茵河相通的河闸全部关闭。
法国和前西德的一些报纸将这次事件与印度博帕尔毒气泄漏事件、前苏联的切尔诺贝利核电站爆炸事件相提并论。
《科普知识》总结了世纪世界上发生的最闻名的污染事故, 莱茵河水污染事故被列为“六大污染事故”之六。
3、毒理学相应原理：污染事故中，被迫排入河流的污染物多为有机农药，如：有机氯农药、有机磷农药、氨基钾酸酯类农药、拟除虫菊酯类农药等。
这里选择其中有机氯农药中具有代表性的一种——DDT，为例分析农药类污染物进入环境后会对环境产生怎样的影响。
环境毒理学(董国日)05-1环境毒理学常用实验方法
皮肤接触
将受试物涂抹在动物皮肤 上，观察其对皮肤的影响 。
吸入暴露
使动物吸入受试物，模拟 人类在环境中的暴露方式 。
实验结果评价
观察临床症状
观察动物的行为、生理和生化指标的变化， 判断受试物对动物的毒性作用。
体重和生长速率
监测动物体重和生长速率的变化，评估受试 物对动物生长的影响。
脏器重量和病理学检查
如激素水平、酶活性等，用于评估 生理功能。
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生长发育指标
如体重、身长、器官发育等，用于 评估发育状况。
行为学指标
如学习记忆、运动能力等，用于评 估行为表现。
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CATALOGUE
致突变和致癌实验
实验动物选择
哺乳动物
如小鼠、大鼠、豚鼠等，是研究致突变和致癌作用 的主要动物模型。
鸟类
如鸡、鸭等，常用于研究环境致癌物的致癌作用。
昆虫
如果蝇、蚕等，常用于研究致突变作用。
实验方法选择
体内实验
通过将受试物直接或间接给予动物，观察其致突变和致癌作 用。
体外实验
利用离体细胞或组织进行实验，如细胞培养、染色体畸变分 析等。
实验结果评价
观察指标
包括突变率、肿瘤发生率、病理学改变等。
数据处理
对实验数据进行统计分析，比较不同组之间的差 异。
实验方法选择
母体-胎盘暴露法
通过给母体注射或喂食有毒物质，观察对胎 儿发育的影响。
全身暴露法
将动物暴露于有毒物质的环境中，观察其对 生殖和发育的影响。
胚胎暴露法
将胚胎直接暴露于有毒物质中，观察对胚胎 发育的影响。
实验结果评价
01
生殖能力指标
生态毒理学实验设计
姓名：刘金鑫学号：201428006037073 培养单位：地理所生态毒理学实验设计一.【实验题目】：砷对两种淡水藻类的毒性作用。
二.【实验设计思想】：砷在环境中是一种普遍存在的污染物，它来源于人为源和自然源的释放，通过一定的途径进入地表、土壤和饮用水体中。
通过目前的研究已经发现进入水体的砷对水中的生物存在影响，我们有必要研究水体中砷对水生生物的毒性作用，在这些研究中要数藻类的研究较多。
我准备通过使用72小时生长速率——一种抑制生物检测方法，来判定五价砷和三价砷对两种在无外来干扰的热带的淡水藻类（绿藻和单针藻）的毒性。
这个实验的意义在于，看砷对藻类的毒害作用是否很强，如果藻类对于砷的耐性较强，可以指导后面的藻类用于砷污染水体修复的研究。
三.【实验目的】：1、掌握藻类的室内无菌培养。
2、学会藻类生长速率测定的方法。
3、掌握72小时生长速率的检测方法。
4、判定砷对两种藻类的毒害作用。
四.【实验原理】：1、藻类的选取：由于不同种类的藻对砷毒性的反应不同，有的藻对砷比较敏感，而有的对砷的耐性较好，所以我选择了一种敏感性的单针藻和一种耐性较好的绿藻。
2、培养液的选择：为了排除自然水体和纯净水体的影响，我用人工合成的软水（内部成分以及含量都是已知的）来进行实验。
3、培养瓶的选择：为了防止砷在普通瓶体上的吸附，我选择250ml 的硼硅酸盐的锥形瓶。
4、检测前处理：将处于指数生长阶段（5-6天）的细胞通过离心（2500rpm，7min），超纯水洗涤三次确保培养液除去后，再用于生物检测。
5、培养条件：将培养瓶放在培养架上进行培养。
培养架周围的环境条件：27±1℃、12：12h的光照和无光、每天用手摇晃两次锥形瓶使其进行充分的气体交换。
6、通过多功能计数仪测定结果。
7、数据分析：通过线性插值法计算72hIC50。
8、藻对砷和磷的吸收具有竞争性。
五.【实验材料】：绿藻、单针藻、玻璃烧杯、天平、硼硅酸盐锥形瓶、镊子、酒精灯、量筒、真空过滤器、滤膜、试管、无菌操作台、吸管、多功能计数器、移液枪、PH试纸（PH5.4—9）、牛角匙、牛皮纸、棉花、纱绳、高压蒸汽灭菌锅、培养架、温度计、恒温室、冷光源、NaHCO3、CaSO4·2H2O、MgSO4、KCl、CaCO3、10%HNO3、超纯水、Na2AsO4·7H2O、NaAsO2、NaNO3、KH2PO4等。
生态毒理学报告_7 实验七
实验八 UV-B对小球藻过氧化氢酶（CAT）活性的影响UV-B对小球藻过氧化氢酶（CAT）活性的影响一、实验目的1、掌握酶提取及活性测定的方法。
2、了解UV-B辐射对CAT活性的影响。
二、实验原理过氧化氢酶(CAT)又称为触酶，主要分布在植物细胞的过氧化物酶体、乙醛酸循环体和细胞质中，线粒体内也有少数分布。
CAT作为活性氧自由基的重要清除剂，是清除H2O2的主要酶类，在植物的抗氧化胁迫作用中扮演重要的角色。
UV-B是一种环境污染因子，低强度的UV-B 辐射处理会使小球藻CAT 活性增强，且其活性基本是随着UV-B 辐射时间的延长而增强。
这是因为UV-B胁迫产生了活性氧自由基，抗氧化酶活性升高及时清除体内过剩的自由基，保护细胞膜系统免受伤害，但当胁迫超出了生物体的承受能力后，酶自身也会受到破坏。
本实验的紫外辐射强度为10µW/cm2且处理时间为60分钟，其胁迫超出了生物体的承受能力后，酶自身也会受到破坏。
其原理为UV-B可与CAT的硫基或其他活性基团相互作用，从而改变酶的活性，并产生毒性效应。
过氧化氢在240nm波长下有强烈的吸收能力，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度随反应时间而降低。
根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。
通过实验组和对照组所测的过氧化氢酶活性大小的比较就可得出高强度的UV-B对过氧化氢酶的活性的影响。
三、实验材料与仪器1.实验材料：小球藻，石英砂，磷酸缓冲液，H2O2。
2.实验仪器：研钵、分光光度计、低温高速离心机、培养箱、UV-B辐射箱、擦镜纸、10mL 离心管，1mL、10μL移液枪等。
四、实验步骤1.小球藻培养：培养液采用f/2营养盐配方,在指数生长期接种。
2.接种密度为5×104个•mL-1，培养温度（20±1）℃。
培养3天后小球藻正处于对数期，且密度为1×105个•mL-1。
3..UV-B辐射处理：设有两组，实验组的辐射强度控制在10µW/cm2，处理时间为60分钟，并设有对照组，正常日光灯管照射。
环境毒理学实验教案
青海大学生态环境工程学院环境毒理学实验报告科目：环境毒理学姓名：田成龙学号：1200602036实验一动物试验的一般操作技术一、目的与要求毒理学的许多试验研究，主要通过动物实验来进行。
而实验过程中技术及生物材料的收集是否恰当，直接影响实验结果的质量。
因此，毒理学实验工作者必须正确地掌握动物实验中的一般操作技术，这是保证试验工作成功的基本条件之一。
本实验要求掌握动物的捉拿、固定、麻醉、编号、采血、处死方法和解剖检查。
二、实验内容和方法（一）实验动物的捉拿和固定方法1、小鼠：捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。
取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。
2、大鼠：大鼠抓取方法基本同小鼠，抓大鼠时若操作者不熟练，或者大鼠特别凶猛，操作者最好戴上防护手套(帆布或硬皮质均可)。
如若是灌胃、腹腔注射、肌肉和皮下注射时，可采用与小鼠相同的手法，即拇、食指捏住鼠的耳朵及头颈皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心中，调整大鼠在手中的姿势后即可操作。
3、豚鼠：豚鼠性情温和，胆小易惊，一般不易伤人，抓取时，先用手掌扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，拇、食指环握颈部，另一只手托住臀部。
如果在实验时豚鼠频繁挣扎，不宜采用此方法，因为操作者的拇、食指会随动物的挣扎越抓越紧而引起豚鼠窒息。
另外，有时可用纱布将豚鼠头部轻轻盖住，操作人员轻扶住其背部或者让其头部钻到实验人员的臂下，然后进行实验操作。
4、家兔：一手抓住兔颈部的被毛与皮肤，另一手托其臀部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。
(二)实验动物的编号、标记和去毛方法1、编号和标记方法：在动物实验中，为了使实验动物个体间或组间区别开来，便于对每个实验动物的反应情况进行观察，必须对实验动物进行编号、标记。
生态毒理学智慧树知到答案章节测试2023年山西大学
第一章测试1.生态毒理学是研究有毒有害因子，特别是环境污染物对动物、植物、微生物及其生态系统的损害作用与防护的科学。
A:错B:对答案:B2.生态毒理学与环境毒理学是同一个学科。
A:对B:错答案:B3.生态毒理学是环境科学的分支学科。
A:错B:对答案:B4.1848年英国生物学家对桦尺蛾发生的工业黑化现象的报道是环境污染对动物种群影响的最早报道。
A:对B:错答案:A5.生态毒理学研究的主要对象是（）。
A:野外生物B:植物C:家禽D:家畜答案:A6.大型工程建设项目实施前必须进行（）。
A:环境生物监测B:生态风险评价C:环境化学监测D:生物标志物筛选答案:B7.研究环境污染物在生物种群、群落和生态系统水平上的生态效应的一种试验方法是（）。
A:分子毒理学试验B:整体毒性试验C:微宇宙生态系统毒性试验D:离体毒性试验答案:C8.生态毒理学所研究的对象属于生物范畴是（）。
A:动物B:微生物C:植物D:环境污染物答案:ABC9.生物标志物可用于评估或研究环境污染物（）。
A:生物体的吸收水平B:在环境中的浓度C:对机体损伤的机制D:物理性质答案:ABC10.从学科知识结构来看，生态毒理学分支学科可分为（）。
A:应用生态毒理学B:理论生态毒理学C:生态系统生态毒理学D:实验生态毒理学答案:ABD第二章测试1.进入体内的环境污染物在不同生物酶的催化下经过一系列生物化学变化而发生结构和性质改变并形成其衍生物的过程称为生物转化。
A:对B:错答案:A2.氧化、还原和水解反应统称为环境污染物的第二相反应。
A:对B:错答案:B3.内剂量是指吸收进入体内的外源化学物的数量。
A:错B:对答案:B4.半数致死剂量是指群体中有50个个体死亡所需的剂量。
A:错B:对答案:A5.结合反应中占有最重要地位的是（）。
A:谷胱甘肽结合B:硫酸结合C:乙酰结合D:葡萄糖醛酸结合答案:D6.被动转运主要包括简单扩散和（）。
A:易化扩散B:主动转运C:滤过作用D:特殊转运答案:C7.根据外源化学物存在的状况，可把剂量进一步分为外剂量、内剂量和（）。
环境毒理学绪论培训课件
环境毒理学绪论
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三、生态毒理学de基本框架
五. 生态毒理学de分支学科
•理论生态毒理学 •实验生态毒理学 •应用生态毒理学
•工业生态毒理学 •农业生态毒理学 •矿区生态毒理学 •城镇生态毒理学
生态 毒理学
•大气生态毒理学 •水生生态毒理学 •陆生生态毒理学
环境毒理学绪论
•植物生态毒理学 •动物生态毒理学 •微生物生态毒理学 •分子生态毒理学
环境毒理学绪论
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四、生态（环境）毒理学de社会学领域
二. 管理:
❖ 对环境退化de一般性认识始于二零世纪六零年代,并在七零 年代得到较快发展,环境问题受到公众de关注,很大程度源于环 境运动de成功,它作为一种破坏形式与人类de经济行为联系在 了一起.（区域性管理） ❖ 到二零世纪八零年代,许多局部污染源和点源都已被发现并得 到控制.随着人们对污染成因和影响de深入理解,以及其带动de 工程和分析化学技术de提高,许多污染严重de点源向大气和水 体中de排放已经受到相关法规、法令和排污许可等de制约. （国家层面管理） ❖ 在过去de二、三十年中,国与国之间缔结关于环境保护方面 de友好条约已经成为一种趋势.（国际化管理）
三.一 呼吸、皮肤接触 三.二 饮水 三.三 饮食、食物链转移
环境毒理学绪论
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几种污染物de人体健康效应
环境毒理学绪论
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三、生态毒理学de基本框架
❖ 一. 基本框架
人体健康核心 论
个体生态毒 性为中心
生态
?
毒理学
?
生态健康核心 论
系统生态毒 性为重点
环境毒理学绪论Leabharlann 11三、生态毒理学de基本框架
❖ 二. 基本内涵
六六六
六六六六六六，可以写作666，成分是六氯环己烷，是环己烷每个碳原子上的一个氢原子被氯原子取代形成的饱和化合物。
英文简称BHC。
分子式C6H6Cl6 。
结构式因分子中含碳、氢、氯原子各6个，可以看作是苯的六个氯原子加成产物。
白色晶体，有8种同分异构体。
666对昆虫有触杀、熏杀和胃毒作用，其中γ异构体杀虫效力最高，a 异构体次之，δ异构体又次之，β异构体效率极低。
六氯化苯对酸稳定，在碱性溶液中或锌、铁、锡等存在下易分解，长期受潮或日晒会失效。
666在工业上是由苯与氯气在紫外线照射下合成。
过去主要用于防治蝗虫、稻螟虫、小麦吸浆虫和蚊、蝇、臭虫等。
由于对人、畜都有一定毒性，20世纪60年代末停止生产或禁止使用。
健康危害人体中毒时，对神经系统主要表现为头痛、头晕、多汗、无力、震颤、上下肢呈癫痫状抽搐、站立不稳、运动失调、意识迟钝、甚至昏迷、并可因呼吸中枢抑制而民生呼吸衰竭。
对消化系统会产生流涎、恶心、呕吐、上腹不适疼痛及腹泻等症状。
呼吸及循环系统可以造成咽、喉、鼻粘膜因吸入农药而充血，喉部有异物感，吐出泡沫痰、带血丝、呼吸困难、肺部有水肿，脸色苍白，血压下降，体温上升，心律不齐，心动过速甚至心室颤动。
对皮肤、眼部刺激症状，有皮肤潮红、产生丘疹、水疱、皮炎、甚至糜烂有渗出、发生过敏性皮炎；眼部有流泪，眼睑痉挛和剧烈疼痛。
六六六的一般毒性作用为神经及实质脏器毒物，大剂量可造成中枢神经及某些实质脏器，特别是肝脏与肾脏的严重损害。
六六六可通过胃肠道、呼吸道和皮肤吸收而进入机体。
毒理学资料及环境行为六六六急性毒性较小，各异构体毒性比较，以γ-六六六最大。
六六六进入机体后主要蓄积于中枢神经和脂肪组织中，刺激大脑运动及小脑，还能通过皮层影响植物神经系统及周围神经，在脏器中影响细胞氧化磷酸化作用，使脏器营养失调，发生变性坏死。
能诱导肝细胞微粒体氧化酶，影响内分泌活动，抑制ATP酶。
急性毒性：LD50180mg/kg，1次，儿童经口，发现的最低致死剂量；50mg/kg，1次，兔经皮；60mg/kg，1次，兔经口；88mg/kg，1次，大鼠经口；500mg/kg，1次，大鼠经皮。
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实验六硫氰酸钠对斑马鱼的蓄积毒性实验
一、实验目的
1、了解蓄积毒性实验方法
2、评价硫氰酸钠对斑马鱼的蓄积作用强度。
二、实验原理
蓄积毒性作用(cumulative coefficient action)是当低于中毒剂量的环境毒物或外来化合物反复多次的与生物体持续接触，经一定时间后使生物体出现明显的中毒表现。
蓄积毒性实验分为：蓄积系数法、20天蓄积试验法和受试物生物半衰期测定法。
蓄积系数法(cumulative coefficient method)是一种常用来评价环境污染物蓄积作用的方法。
1、蓄积系数法
蓄积系数法是一种用来评估毒物和污染物蓄积作用的方法。
蓄积系数(comulativecoefficient,K)，是分次给予受试物后引起50％受试动物出现某种毒效应的总剂量(以ED 50(n))表示)，与一次给予受试物后引起50％受试动物出现同一毒效应的剂量(以ED 50(1)表示)的比值，即K＝ED 50(n)/ED 50(1)
若以死亡为毒效应指标，上式为K越小，受试化合物的蓄积毒性越大。
测定方法：
固定剂量每天连续染毒法
剂量定期递增染毒法
（1）固定计量法
固定每天染毒剂量为1/20—1/5 LD50，连续染毒，直至实验动物半数死亡。
如果染毒剂量累计已达5个LD50动物死亡仍末达半数，实验均可告结束，计算蓄积系数，作出评价。
（2）递增剂量法
先测定LC50，然后对另一组动物每天染毒，以4天为一期，开始给予0.1LC50。
以后每期按1.5倍递增剂量，直至动物半数死亡，或实验已达20天，可结束实验，计算系数。
染毒时间/天每日染毒剂量
/mg/L
每四天染毒总剂量
/mg/L
累计染毒总剂量
/mg/L
1-4 0.10 0.40 0.40
注：表中的递增染毒剂量为ED50或LD50
2、20天蓄积试验法
按LD 50的1/20、1/10、1/5、1/2及0（溶剂对照）随机分成5组。
每天对动物进行染毒，连续20 d，各组总剂量分别为1LD 50、2LD 50、4LD 50、10LD 50。
观察停药后7d内的死亡情况：
各剂量组均无死亡,蓄积不明显；
如1/20 LD50组无死亡，各剂量组死亡也无剂量-反应关系，可认为无明显蓄积毒性；
如1/20 LD50组无死亡，但各剂量组死亡呈剂量-反应关系，表明有中等蓄积毒性；
如1/20 LD50组已出现死亡，且各剂量组动物死亡呈剂量-反应关系，则受试动物有强蓄积毒性。
3、受试物生物半衰期测定法
生物半衰期(T1/2)是指一种外来化合物在体内消除到原有浓度的50％所需要的时间。
生物半衰期越长的物质，表示越不易由生物体内消除，其蓄积作用的可能性就越大。
因测定生物半衰期过程较为复杂，实际观测中常常以间接测定受试物在血液、尿液或器官组织中原有浓度降低一半所需要的时间，以代表受试物的生物半衰期。
其方法是生物体接触受试物后，在一定间隔时间内分别测定血液或尿液、器官组织中受试物的浓度，依据所得结果，按下式求出它的生物半衰期。
T1/2=(t1-t2)log2／(logy1-logy2)
y1和y2分别为t1和t2时间测得生物体内受试物的浓度或量。
根据测得的生物半衰期的长短，可以判定受试物质的蓄积作用。
越长，蓄积作用越大，反之则越小。
三、实验材料与仪器
斑马鱼、硫氰酸钠、鱼缸、渔具、鱼食、加热泵、加氧泵、温度计等
四、实验步骤
1、正式试验前将斑马鱼在与试验相同的环境条件下驯养7~14 d，驯养期间斑马鱼死亡率<5%。
驯养时每天喂食1次，曝气充氧，正式试验前24h停止喂食。
实验开始时，每4天喂食一次。
2、采用固定剂量每天连续染毒法，按LD50的1/20、1/10、1/5、1/2及0(溶剂对照)随机分成5组，每天对动物进行染毒，连续20 d 。
本次采用20天蓄积试验法，LD50=380mg/L
表1：硫氰酸钠每天染毒剂量
五、实验结果
1、实验结果
表2：三点半组实验结果组别
对照组1/20 LD501/10 LD501/10 LD501/5 LD501/2 LD50
天数
第一天0 0 0 0 0 0 第二天0 0 0 0 0 0 第三天 1 0 0 0 0 1 第四天0 0 0 0 0 1 第五天0 0 0 0 0 4
总和 1 0 0 0 0 6
在1/2 LD50组死亡斑马鱼数目达到本组实验鱼数目一半时，对照组以及其他4个实验组实验剂量均未达到1LD50，对斑马鱼不会造成死亡影响。
所以，只对两组1/2LD50数据进行进一步分析。
表3：两个1/2 LD50组别斑马鱼死亡率硫氰酸钠浓度（mg/L）190 380 570 760 950
1点半组斑马鱼死亡率（％）0 0 20 30 80
3点半组斑马鱼死亡率（％）0 0 10 20 60
平均斑马鱼死亡率（％）0 0 15 25 70
2、评价硫氰酸钠对斑马鱼的蓄积作用强度。
由y = 0.0002x2 - 0.1049x + 15（R2 = 0.9725）得
当y=50％时，x=872.857mg/L
K= LD 50（n）/ LD 50（1）
= 872.857mg/L/380mg/L
=2.30
所以，硫氰酸钠的蓄积毒性为明显蓄积。
六、实验分析
1.硫氰酸钠对斑马鱼造成影响实验结果分析
运用同一采购的斑马鱼进行此次的蓄积毒性的检验，可以看出斑马鱼死亡较快，对照组以及其他三个实验组硫氰酸钠添加量均未达到1LD50。
将1点半组1/2 LD50实验结果和3点半组1/2 LD50实验结果去平均后进行分析，可以得出结论，硫氰酸钠对斑马鱼的影响为低毒性。
在进行硫氰酸钠对斑马鱼急性毒性实验中，实验结果表明LD50=380mg/L，而此次进行的20天蓄积毒性的监测中，硫氰酸钠对斑马鱼的影响为低毒性的。
可能是硫氰酸钠对斑马鱼的存活的影响在一定浓度之间达到急增的效果，而此次实验的浓度设置范围较为宽，并且自身的学识水平没有达到，没有办法准确的推测出硫氰酸钠对斑马鱼造成影响的机理。
2.实验结果误差分析
（1）本实验采用的是20天蓄积实验法对斑马鱼进行染毒，在计算硫氰酸钠添加量时虽争议较大，但最后得出合理的药品添加量。
对实验本身涞水，能够较好的反应出硫氰酸钠对斑马鱼的蓄积毒性效应。
但由于投放毒物量的称取、喂食的量、环境温度湿度的不同，会造成一定的实验误差。
（2）每天的投毒工作由不同的同学完成，剂量添加上有误差无法很好避免。
（3）1点半组和3点半组两组斑马鱼不同，1点半组斑马鱼生长环境未添加硫氰酸钠，而3点半组斑马鱼为实验后存余。
实验对象本身会对实验结果造成实验误差。
3.硫氰酸钠对斑马鱼造成死亡的原因
硫氰酸钠通过影响线粒体内膜上含有的大量ATPase,间接激活细胞膜上Na+-Ca2+交换蛋白，从而导致过多的Ca2+进入细胞。
谢文平等人(2009)认为,线粒体是易受损伤的敏感细胞器,与鱼的疾病、衰老、细胞凋亡均密切相关。
而线粒体内膜上含有大量的ATPase,它的活性对细胞内Ca2+转运起重要作用。
Na+/K+-ATP酶、钙ATP酶活性的降低,必然导致细胞内Na+、Ca2+超载。
同时,因Na+/K+-ATP酶活性下降会引起胞内Na+超载,后者又会激活细胞膜上Na+- Ca2+交换蛋白,而使过多的Ca2+进入胞内。
并且,从亚细胞的角度看,Na+超载还会引起线粒体中Ca2+释放,最终导致胞内Ca2+超载。
而Ca2+不仅是神经冲动的必要物质,同时也是细胞信号转导的重要物质。
根据实验结果可知,当处理浓度高于安全浓度(1/10 LC50)后,脑组织内Na+/K+-ATP酶的活性升高,可能导致细胞胞浆内Ca2+浓度降低。
硫氰酸钠通过影响斑马鱼体内的线粒体的活动，导致斑马鱼的死亡。
4.硫氰酸钠的毒性分析及其检测
是一种有毒化工原料，国家禁止在食品加工中添加和使用硫氰酸钠。
不法商贩将其添加于乳及乳制品中保鲜。
硫氰酸盐中毒是以神经精神、消化系统和皮肤损害为主的全身性疾病。
该毒物无特殊解毒剂，以对症支持治疗为主。
硫氰酸盐中毒的临床表现为：多见于老人、肾功能不全或需要长期（超过3天）较大剂量给药，可能出现神经系统抑制、代谢性酸中毒及心血管系统不稳定等情况。
目前常用的检测和净化方法有：离子色谱-电导检测法、分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法等。