湖北毒理实验步骤
湖北掌叶覆盆子叶的毒理试验研究
ｗ ｓｆ ｎ ，ａ ｕ ｇ ｙｍ ｕｅｂ ｎ ａ ｏ ｅ ｃｏｕｌ ｓｔ ｔＡ ｓｔ ｔａｄ ｍ ｕｅｓｅ ｂ ｏｍ ｌｙ ｔ ｔ ｎ ｔ ａ ｏ ｄ ｓ ｊｄｅ ｂ ｏ ｓ ｏｅ ｍ ｌ ｗ ｃｌ ｍ ｒ ｃ ｕ ｅ ，ｍｅ ｅ ｏｓ ｐｒ ａ ｎｒ ａ ｔ ｅ ．Ｉ ｈ ｕ ｄ Ｔ ｌｉ ｎ ｅ ｓ ｓｎ ｍ ｉ ｓ ｅ
田 辉 ／ 文祥 ／ 杨 马 弋／ 樊柏 林／ 家发 刘
（ 湖北省疾病预防控制 中心 ， 湖北 武汉 ４０ ７ ） ３ ０９
【 摘要】背景与目的：掌叶覆 盆子 叶是在湖北省 内新发现的一种植物资源 ， 有降糖、 降脂作用 ， 为开发这种资源 ， 对其食用安全性进
行评价。 材料与方法：对湖北掌 叶覆盆子 叶进行小 鼠急性 毒性试验 （ 最大耐受量法 ）遗传毒性试验和 ９ 喂养试验。 结果：湖北掌 、 ０ｄ 叶覆盆子叶对昆明种小鼠急性经 Ｅ毒性试验为无毒级。遗传 毒性试验 （ ｌ 小鼠骨髓 细胞微核试验 ， ｍ ｓ Ａ ｅ 试验和精子畸形试验） 结果均为
阴性。按 ２ ５５ ０ １ ． ／ｓ对 Ｗｉａ 大鼠连续 经 Ｅ灌 胃给予 ９ ， ． 、 ．、００ ｇｋ ｓｒ ｔ ｌ ０ ｄ 动物未见明显的中毒症状和死亡 ， 剂量组大 鼠体重 、 各 进食量 、 食 物利用率 、 血象 、 血液 生化 、 脏器重量 、 体 比值以及病理 组织学等指标与 阴性对照组 比较 ， 脏／ 差异 均无统计学意义 （ Ｐ＞０ ０ ） 结论： ．５ 。 在本实验条件下 ， 未发现湖北 掌叶覆盆子叶有 明显 的毒性作用 。 【 关键词】湖北 掌叶覆盆子叶 ；甜茶甙 ；安全性评价
ｈ ｓ ｅ ｎ ｓ ｔ ｐｅ ｅ ｔ ｎ ｈ ｌ ｔ ａ ｈ ｐ ｒｌ ｃ ｍｉ ａ ｄ ｙ ｅ ｌ ｉ ｅ ａ ｏ ｈ ｎ ｒ ｄ ｏ ｅ ｒ ｂ ｌｃ ｐ ｏ ｌ ａ ｂ ｅ ｕ ｅ ｏ ｒｖ ｎ ａ ｄ ｅｐ ｒ ｔ ｙ ｅｇｙ ｅ ａ ｎ ｈ ｐ ｒ ｐ ｄ ｍ ｆｒ ｕ ｄ ｅ ｓ ｆ ｙ ａ ｓ ｙ ｏ ａ ｅ ｐｅ． ｄ ｅ ｉ ｉ ｌ Ｒｕ ｕ ｏ ｉ ｅ ｉ ｔ ｏ ｇ ｔ ｔ ｅ ｉ ｐ ｃａ ｎ ｒｄ ｅ ｔ Ｉ ｒ ｅ ｏ ｄ ｖ ｌｐ ａ ｄ ｕ ｉ ｚ ｈ ｓ ｎ ｗ ｒ ｓ １ ｅ ｏ ｉｏｏ ｙ ｔｓ ｆ ｂ ｓ ｄ ｓ ｈ ｕ ｈ ｏ ｂ ｔ ｓ ｅ ｉ ｉ ｇｅ ｉｎ ． ｎ ｏｄ ｒ ｔ ｅ ｅｏ ｔ ｉ ｔ ｉ ｅ ｅ ｏｕ ，ｔｘｃ ｌｇ ｅ ｔ ｏ ｓ ｓ ｌ ｎ ｌｅ ． ￣ ｓ ｈ ｓ ｅ ｔ ｉ ｎ ｗ ｈ ｒ ｗ ｒ ｃ ｎ ｕ ｔ ． Ｍ Ｔ Ｒ Ａ ￣ Ａ Ｄ ｅ ｂ ｅ ｅ ｏ ｄ ｃｅ ｄ Ａ Ｅ ＩＩ Ｎ ＭＥ Ｈ Ｄ ： Ｔ ｅ ａ ｅ ｏ Ｈ ｂ ｉ Ｒ． ｃ ｉｇ ｉ Ｔ Ｏ Ｓ ｈ ｓｆ ｔ ｆ ｕ ｅ ｙ ｈｎ ｉ Ｈｕ ｗ ｓ ｅ ａｕ ｔｄ ａ ｖ ａｅ ｌ
毒理学实验技术总结
毒理学实验技术总结毒理学是一门研究外源化学物、物理因素和生物因素对生物体产生有害作用的科学。
而毒理学实验技术则是研究这些有害作用的重要手段。
通过一系列的实验操作和观察，我们能够评估物质的毒性、确定安全剂量范围，为保护人类健康和环境安全提供科学依据。
接下来，让我们详细了解一下毒理学实验技术。
一、急性毒性实验急性毒性实验是毒理学中最常见的实验之一，其目的是测定化学物质在短时间内（通常为 24 小时至 14 天）对生物体造成的损害。
实验通常采用两种方法：经口急性毒性实验和经皮急性毒性实验。
经口急性毒性实验是将化学物质以特定的剂量灌胃给予实验动物，然后观察动物在短期内出现的中毒症状和死亡情况。
通过计算半数致死剂量（LD50）来评估物质的毒性强度。
LD50 越小，说明物质的毒性越强。
经皮急性毒性实验则是将化学物质涂抹在动物的皮肤上，观察其对皮肤的刺激性以及可能产生的全身性毒性反应。
在进行急性毒性实验时，需要严格控制实验条件，包括实验动物的种类、年龄、体重、性别等，以及化学物质的给予方式和剂量。
同时，要对实验动物进行密切观察，记录其症状出现的时间、严重程度和持续时间等。
二、亚慢性和慢性毒性实验与急性毒性实验不同，亚慢性和慢性毒性实验的观察周期较长。
亚慢性毒性实验的观察期通常为 90 天左右，而慢性毒性实验则可能持续一年甚至更长时间。
这些实验旨在评估化学物质在长期低剂量暴露下对生物体产生的潜在危害，如对器官功能的影响、致癌性、致畸性等。
实验过程中，需要定期监测实验动物的体重、饮食、行为、血液生化指标等，并在实验结束时对动物进行解剖，检查各个器官的病理变化。
三、遗传毒性实验遗传毒性实验用于检测化学物质对生物体遗传物质的损害作用，包括基因突变、染色体畸变和 DNA 损伤等。
常见的遗传毒性实验方法有：1、细菌回复突变实验（Ames 实验）：通过检测化学物质对细菌基因突变的诱导作用，来评估其遗传毒性。
2、微核实验：观察细胞中微核的形成，以判断化学物质是否导致染色体损伤。
禁毒学(4.2.1)--毒品检验程序及方法
（四）分离与净化 （五）定性、定量分析 （六）分析鉴定结论
二、毒品检验方法
（一）化学法 （二）物理方法 （三）仪器分析方法 1 、色谱法 2 、原子光谱法 3 、分子光谱法 4 、质普法
三、 常见毒品检验技术
（一）化学法 1 、概念 化学法是利用化学试剂 与毒品检材发生显色、沉 淀、结晶 等化学反应来鉴 定毒品的种类。
凝胶色谱：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分 阻滞作用的不同。
4 、色谱法的特点 （ 1 ）分离效率高：一次可分离数百个组分的混合 物。 （ 2 ）灵敏度高：可检出 10—E11—10—E15 克数 量级的痕量物质。 （ 3 ）样品用量少：一般为微克级。 （ 4 ）分析速度快：对于复杂样品分析时间一般只 需几分钟到几十分钟即可完成。 （ 5 ）应有范围广：几乎能发现所有化学物质。
薄层色谱是将硅胶、氧化铝等吸附剂 均匀地铺在玻璃上，形成薄层，把欲分 离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶 剂展开，使混合物得以分离的方法。由 于层析在薄层上进行故而得名。
1.2 基本原理
当待分离的混合物随流动相通过固定相时 , 由于 各组份的理化性质存在差异 , 与两相发生吸附、 溶解、结合等相互作用的能力不同，在两相中的 分配（含量对比）不同。与固定相相互作用力越 弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小 , 向前移动的速度快。反之越小 , 从而达到将各组 份分离的目的。
1.3 薄层色谱的优点
设备简单 ; 操作方便，快速 ; 分析时 间短。
薄层色谱是毒品检验中应用较广定性 方法之一。大多数毒品可用此法进行定 性分析。
1.4 操作步骤
选择适合的薄层板：
根据检材的特性选择适合的薄 层板。薄层板是在玻璃板上铺 一层吸附剂（或者吸干了固定 相的载体）而形成的层析板。 其大小可根据样品量、组分种 类和数目、展开方式来确定。
毒理学及微生物实验
实验一、毒理学实验方法[实验目的] 通过实验，掌握实验动物的一般操作技术。
[实验材料]实验动物：昆明种小鼠实验器材：灌胃器、手术剪等。
[操作方法]1.实验动物物种的选择选择的基本原则是：选择对受试物在代谢、生物化学等与人最接近；自然寿命不太长；易于饲养和操作；经济易获得。
2. 实验动物的被毛去除方法(1)拔毛法将动物固定后，将所需部位的被毛拔去即可。
(2)剪毛法将动物固定后，用手术剪紧贴动物皮肤将所需部位的被毛剪去。
3. 实验动物的处死方法颈椎脱臼法：一只手用力住下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾，用颈稍向后上方一拉，使之颈椎脱曰动物立即死亡。
空气拴塞法；急性大失血法和吸入法致死。
实验二动物染毒方法[实验目的] 通过实验，掌握实验动物的一般染毒方法。
[实验材料]实验动物：昆明种小鼠实验器材：灌胃器、注射器、手术剪等。
三、实验方法1 灌胃：将受试物配制成溶液或混悬液，以注射器经导管注入胃内。
经口多次染毒，一般不禁食，但应每日定时染毒。
2 口服法染毒：将受试物掺入动物饲料或饮水中供实验动物自行摄入。
实验动物以食物消耗量计算其实际染毒剂量。
3 经呼吸道染毒I 静式吸入染毒：将一定数量的啮齿类动物放在密闭的染毒柜中，加入易挥发的液态受试物或气态受试物使成一定浓度。
受试物浓度，以mg/m3表示。
II 动式吸入染毒：由染毒柜、机械通风系统和配气系统三部分构成动式吸入染毒柜中受试物的浓度应实际监测。
4 经皮肤染毒经皮肤染毒的目的有两种。
一种是经皮染毒毒性试验，如经皮LD50测定常用大鼠。
另一种是皮肤刺激和致敏试验。
试验前用机械法或化学法脱毛。
于脱毛后24小时涂抹一定量受试物，盖上一层塑料薄膜，接触规定的时间。
4. 注射染毒注射用药品，应以注射途径染毒，对大小鼠可用静脉注射，对非啮齿类可模拟临床用药途径，如狗可用后肢隐静脉注射，而啮齿类的尾静脉和肌肉注射难以多次染毒，必要时可改为皮下注射。
注射染毒，应调整受试物的pH及渗透压，pH应5～8，最好是等渗溶液，动物对高渗的耐受力比低渗强。
湖北省检测实施管理细则
湖北省检测实施管理细则
一、总则
（二）本细则适用于湖北省的放射性、化学性、物理性和慢性毒物污
染等环境监测。
（三）湖北省环境保护厅负责本细则的解释。
二、定义
（一）环境监测：指从环境物质、物理性质等方面对环境的实际状况
进行检测评价的活动。
（二）放射性、化学性、物理性和慢性毒物污染：指放射性、化学性、物理性和慢性毒物，如重金属、有机污染物等，对环境空气、水质、土壤
等造成的污染。
（三）放射性污染：指放射性物质污染的一种，包括放射性物质在环
境中的各种形态，如粒子污染、气溶胶污染和折射污染等。
三、监测方法
（一）放射性监测：对放射性物质污染的监测主要采用放射性检测方法，如尘埃中放射性核素的检测、空气中放射性核素的活度分析、饮用水
中放射性核素检测等；
（二）化学污染监测：主要采用化学分析、毒理学试验、生物毒理学
实验等方法。
毒理学实验操作规程
毒理学实验操作规程一、实验目的毒理学实验的目的是评估化学物质、生物制剂、物理因素等对生物体的潜在有害影响，为制定安全标准、环境保护政策、药物研发和风险评估提供科学依据。
二、实验准备（一）实验动物的选择根据实验目的和研究对象的特点，选择合适的动物种类、品系、年龄、性别和体重。
常用的实验动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子等。
实验动物应来自具有资质的供应商，并经过检疫和适应性饲养。
（二）实验动物的饲养环境提供适宜的饲养条件，包括温度、湿度、光照周期、通风和清洁卫生。
动物笼具应定期清洗和消毒，给予充足的饮水和营养均衡的饲料。
（三）实验试剂和仪器准备所需的化学试剂、药品、标准品等，确保其质量和纯度符合实验要求。
同时，检查和校准实验所需的仪器设备，如移液器、离心机、分光光度计、显微镜等。
（四）实验人员的培训实验人员应接受毒理学相关知识和实验操作技能的培训，熟悉实验流程、安全注意事项和应急预案。
三、实验设计（一）剂量设计根据预实验结果或相关文献资料，确定合适的剂量范围和剂量组。
通常包括低剂量组、中剂量组和高剂量组，有时还设置对照组。
（二）给药途径根据研究对象的性质和实际应用情况，选择合适的给药途径，如口服、腹腔注射、静脉注射、吸入、皮肤涂抹等。
（三）观察指标确定全面、敏感和特异性的观察指标，包括动物的一般状况（如外观、行为、饮食、体重等）、生理指标（如体温、血压、心率等）、生化指标（如肝肾功能、血液学指标等）、组织病理学检查等。
（四）实验周期根据实验目的和观察指标的变化特点，确定合理的实验周期。
急性毒性实验一般为数小时至数天，亚慢性和慢性毒性实验则可持续数周、数月甚至数年。
四、实验操作流程（一）动物分组和标记将实验动物随机分组，每组动物数量应根据实验要求和统计学原则确定。
采用适当的标记方法对动物进行个体标识，如耳标、染色、纹身等。
（二）给药操作按照预定的给药途径和剂量，准确地给予实验动物受试物。
给药过程中应注意操作的规范性和准确性，避免药物损失和交叉污染。
食品毒理学实验方案
食品毒理学实验方案实验一操作技术学习毒理学试验中有关动物试验的基本操作技术，掌握实验动物的选择，性别鉴定，抓取方法，标记方法，染毒方法，生物材料采集和实验动物处死等技术。
苦味酸酒精饱和溶液、美蓝溶液托盘天平、电子天平、棉签、1mL注射器、烧杯、管、玻璃毛细管鼠笼小鼠操作方法实验动物的选择毒理学研究中，无论应用何种种属品系的实验动物，都必须是健康动物。
动物的选择，重点检查下述项目。
体形丰满，被毛浓密光顺，行动敏捷，反应灵活。
眼睛明亮，瞳孔清晰，双侧等圆，眼内无分泌物，眼睑无肿胀、发红。
耳耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮、糜烂。
鼻无喷嚏，无浆性黏液分泌物。
皮肤无创伤、脓疮、疥癣、湿疹。
头颈部姿势端正。
颈项歪斜提示可能存在内耳疾患，不能用于实验。
消化道无呕吐、便秘、腹泻，粪便成形，肛门附近被毛洁净。
神经系统无震颤、麻痹、运动失调，如有转圈运动或倒提时呈圆圈摆动，不能用于实验。
四肢及尾四肢、趾及尾无红肿溃疡。
食欲及营养良好实验动物的性别鉴定大鼠、小鼠主要观察肛门与生殖孔的间距，雄性间距大，而雌性间距小；雄鼠夏天或卧位可见睾丸，雌鼠腹部有明显乳头，大鼠6对，小鼠5对。
实验动物的称重、编号和标记一般同一组内，同性别动物体重差异应小于平均体重的10％，组间同性别动物体重均值应小于5％。
编号和标记染色法一般采用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位的被毛染色，表示不同号码，此法适用于大鼠、小鼠和豚鼠。
常用的染料有苦味酸酒精饱和液（黄色）、美蓝溶液（蓝色）或甲基紫酒精饱和液、0.5％中性红或品红溶液（红色）等。
具体方法为：按右、右肋、右后肢、尾跟、左后肢左肋、左前肢、；部位涂染另一种颜色染料表示十位，两种颜色可编1~99号。
实验动物的染毒途径和方法灌胃将毒物不经口腔和食道，直接灌入胃内。
急性毒性试验多用此法。
用带有灌胃器的适当容积注射器吸取所需的受试液（溶液、混悬液、乳液）备用。
①小鼠保定，一手紧抓住耳后、颈部皮肤，用无名指、小指和大鱼际肌压紧尾根部将动物固定成垂直体位，腹部面向操作者，使上消化道固定呈一直线。
食品毒理学实验
实验一动物的一般操作技术1. 实验目的和要求*毒理学研究需要用实验动物来进行各种实脸，通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量-反应关系、毒作用机制等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。
通过本次学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。
2. 实验原理做毒理学实验，首先要了解实验动物选择的要求，实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。
3. 实验仪器设备:小鼠若干，手套15副，苦味酸酒精饱和液，0.5%中性红或品红溶液，棉签，解剖剪刀10把，感应量为0.1g的天平一台。
4. 实验内容步骚:(一) 健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验，均要求选择健康的实验动物。
健康动物检查时要求达到：外观体型丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。
选择时重点检查以下几项：1. 眼睛明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物2. 耳耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮3. 鼻无喷嚏，无浆性粘液分泌物4. 皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。
5. 颈部要求颈端端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患，不应选作实验动物。
6. 消化道无呕吐、腹泄，粪便成形，肛门附近被毛洁净。
7. 神经系统无震颤、麻痹。
若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动，应放弃该动物。
8. 四波及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。
(二) 实验动物的性别鉴定小鼠主要依据肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄鼠，小者为雌性。
成年雄鼠卧位可见睾丸，雌性在腹部可见乳头。
(三) 抓取方法正确地抓取固定动物，是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下，确保实验顺利进行。
小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上向后位，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
湖北毒理实验步骤
一、背景介绍
湖北毒理实验是一项重要的化学实验，旨在测试不同化学物质对生物体的毒性和安全性。
该实验通常在化学课程中进行，以帮助学生了解化学物质对人类和环境的影响。
二、实验材料
1. 不同浓度的化学物质（例如盐酸、氢氧化钠等）
2. 实验动物（例如小白鼠或小鸟）
3. 实验设备（例如试管、滴定管、显微镜等）
三、实验步骤
1. 准备实验动物：将小白鼠或小鸟放入适当大小的笼子中，并给予足够的食物和水。
2. 准备实验样品：制备不同浓度的化学物质溶液，通常使用盐酸和氢氧化钠作为测试样品。
3. 给动物注射样品：将不同浓度的样品注射到动物体内。
每个组应包括至少三个动物，以确保结果准确可靠。
4. 观察动物反应：观察动物在注射后是否出现异常反应，如呕吐、疲惫等。
如果有异常反应，则必须立即停止实验并给予治疗。
5. 收集数据：记录每个组的动物的反应，并计算出每个组的平均反应
时间和死亡率。
6. 分析数据：根据收集到的数据，分析不同浓度的化学物质对动物的
毒性和安全性。
四、实验注意事项
1. 实验过程中必须佩戴适当的防护设备，如手套、护目镜等。
2. 操作化学品时必须小心谨慎，避免溅出或吸入有害气体。
3. 实验动物必须得到妥善照顾，确保其健康和福利。
4. 实验结束后，必须正确处理化学废弃物和实验动物遗体。
五、实验结果分析
1. 根据收集到的数据，可以绘制出不同浓度样品对动物反应时间和死
亡率的图表。
2. 通过分析图表，可以确定不同浓度样品对动物毒性和安全性的影响。
例如，在低浓度下，样品可能只会引起轻微反应；而在高浓度下，则
可能导致严重伤害或死亡。
六、实验意义
湖北毒理实验是一项重要的化学实验，可以帮助人们了解化学物质对
生物体的毒性和安全性。
通过该实验，人们可以更好地理解化学品的
使用和处理方法，以确保人类和环境的健康和安全。