灵芝多糖的研究及其提取工艺

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灵芝多糖的提取纯论文制作PPT

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2、实验内容
紫外分光光度计
1）多糖含量的测定
根据《中国药典》（2010版）一部灵芝项下规定，制定标准曲线，得出线性回归方程： y=17.751x+0.0326，R2=0.9991，n=6，线性关系良好，如下图：
1.2
1 0.8 吸光度A 0.6 0.4 0.2 0 0 0.01 0.02 0.03 多糖浓度mg/ml 0.04 0.05 0.06 0.07 y = 17.75x + 0.032 R² = 0.999
灵芝多糖的提取纯化工艺研究
研究背景
灵芝味甘，性平，归心、肺、肝、肾经。《中国药典》（2010版）记载灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体，有补气安神，止咳平喘的功效，用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食等。药理试验证明，灵芝多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免疫力、抗氧自由基、抗衰老等生物活性。随着生活节奏的加快、生活压力的不断攀升，人们的健康越来越受到威胁，心脑血管、癌症等疾病的病发率逐年上升，使得具有提高免疫力、抗肿瘤等功效的灵芝多糖深受重视。
整体框架
1、前言灵芝多糖的来源与分类灵芝多糖的主要成分灵芝多糖的结构分析灵芝多糖的提取方法灵芝多糖的纯化方法灵芝多糖的测定方法
2、实验内容
1）多糖含量的测定
单因素试验 2）提取工艺研究
正交试验设计 3）纯化工艺研究：正交试验设计 3、讨论 4、结论
提取时间提取温度提取次数
1、前言
我国已发现灵芝的品种有90多种，包括赤芝、黄芝、紫芝、黑芝等，多分布于云、贵、冀、吉、苏等省。灵芝的化学成分复杂，现已发现灵芝含有灵芝多糖、三萜类化合物、核苷、甾醇、生物碱、氨基酸、微量元素等多种化学成分。

灵芝多糖实验报告

一、实验目的本研究旨在通过实验方法提取和鉴定灵芝中的多糖成分，探究灵芝多糖的提取工艺，并对提取得到的灵芝多糖进行初步的生物活性分析。

二、实验材料与仪器1. 实验材料：- 灵芝子实体（赤芝或紫芝）- 乙醇、水、硫酸、蒽酮等化学试剂- 蒸馏水、无水乙醇、丙酮等溶剂- 蛋白酶、DNase等酶类- 小鼠、细胞等实验动物和细胞系2. 实验仪器：- 电子天平- 超声波清洗器- 烘箱- 离心机- 恒温水浴锅- 分光光度计- 高效液相色谱仪- 荧光显微镜等三、实验方法1. 灵芝多糖的提取：- 将灵芝子实体洗净、晾干，粉碎成粉末。

- 采用乙醇提取法，将灵芝粉末与95%乙醇按一定比例混合，在超声波清洗器中提取2小时。

- 将提取液过滤，滤液在烘箱中浓缩至一定浓度。

- 将浓缩液用无水乙醇沉淀，离心分离，收集沉淀物。

2. 灵芝多糖的鉴定：- 采用硫酸-蒽酮法对提取得到的沉淀物进行含量测定。

- 采用高效液相色谱法对提取得到的灵芝多糖进行结构分析。

3. 灵芝多糖的生物活性分析：- 采用小鼠腹腔巨细胞吞噬实验，检测灵芝多糖的免疫调节活性。

- 采用细胞实验，检测灵芝多糖对肿瘤细胞的抑制作用。

四、实验结果1. 灵芝多糖的提取：- 采用乙醇提取法，从灵芝子实体中提取得到多糖含量为10%左右。

2. 灵芝多糖的鉴定：- 硫酸-蒽酮法检测结果显示，提取得到的灵芝多糖含量较高。

- 高效液相色谱法分析结果显示，提取得到的灵芝多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等单糖组成。

3. 灵芝多糖的生物活性分析：- 小鼠腹腔巨细胞吞噬实验结果显示，灵芝多糖能够显著提高小鼠腹腔巨细胞的吞噬功能。

- 细胞实验结果显示，灵芝多糖对肿瘤细胞具有抑制作用。

五、实验讨论1. 灵芝多糖的提取工艺：- 本实验采用乙醇提取法，结果表明该方法能够有效地提取灵芝中的多糖成分。

- 在实验过程中，提取溶剂的浓度、提取时间、料液比等因素对提取率有显著影响，需要进一步优化。

灵芝粗多糖的提取工艺

灵芝粗多糖的提取工艺
灵芝多糖的提取工艺主要包括以下几个步骤：
1. 材料准备：选择新鲜的灵芝或者灵芝干燥品作为原料，将其进行切碎或研磨，以增加提取效果。

2. 提取溶剂的选择：常用的提取溶剂有水、乙醇、甲醇等。

具体选择溶剂需要根据灵芝多糖的性质和应用需求来确定。

3. 提取方法：常用的提取方法有水煮提取法、连续提取法、酸提取法、超声波提取法等。

不同的提取方法对灵芝多糖的提取效果有所差异。

4. 温度和时间控制：提取温度和时间对灵芝多糖的提取效果也有影响。

一般来说，较高的温度和较长的提取时间可提高灵芝多糖的提取率，但同时也可能损失一部分活性成分。

5. 过滤和浓缩：将提取好的液体进行过滤去杂质，然后使用浓缩设备，如旋转蒸发器、真空浓缩器等，将溶剂去除或浓缩。

6. 干燥和粉碎：将浓缩后的灵芝多糖进行干燥，使其转化为粉末或颗粒状。

7. 质量控制：对提取得到的灵芝多糖进行质量检测，包括测定灵芝多糖的含量、
分子量、结构等。

需要注意的是，提取灵芝多糖的工艺可以根据具体需要进行调整和改进。

不同的提取工艺可能会有不同的影响，因此在实际操作过程中，需要根据实际情况来选择适合的提取工艺。

多糖提取工艺流程

第一部分：野生灵芝菌种的分离、扶壮、保藏和培养前言采集吉林长白山野生灵芝，经过菌种分离，鉴定为GANODERMA（英文名称）多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst．的菌种。

经过纯化扶壮培养，成为一支优良的灵芝菌种，为灵芝菌丝体发酵培养和灵芝多糖的提取奠定了基础。

实验室流程：（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（恒温培养箱）菌种培养扶壮（恒温恒湿冷藏柜）优良菌种保藏（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（摇床）发酵菌种摇瓶培养（用于接种菌种罐）第二部分：灵芝菌丝体液体发酵培养前言液体发酵培养不同于灵芝子实体栽培，周期短，产量高，无污染，灵芝多糖含量高，节省木材和耕地。

是一种灵芝多糖理想的工厂化现代科技生产方式。

经过摇瓶培养的灵芝菌种接种于种子罐，待生长良好，在接种于扩大的发酵罐中，通过通气恒温培养，长成成年灵芝菌丝体，生长完全后，进行离心分离喷雾干燥，就得到相当于灵芝子实体的灵芝菌丝体粉，多糖含量达到15%左右。

进一步提取加工得到高含量的灵芝多糖。

灵芝菌丝体发酵工艺流程:（配料罐）培养液的配制（菌种罐）菌种的发酵培养（发酵罐）灵芝菌丝体发酵培养（离心机）灵芝菌丝体固液分离（浓缩液配制罐)灵芝菌丝体配制成浓缩液（喷雾干燥塔）浓缩液喷雾干燥，得到灵芝菌丝体粉第三部分：灵芝菌丝体多糖的提取分离前言灵芝菌丝体粉，是大部分不溶解于水，食用以后象灵芝子实体一样，只有少部分成分被吸收，通过现代提取手段，将灵芝菌丝体经过提取罐的水提取，经过真空浓缩，在经过醇沉工艺，加工成可以全部被人体吸收，灵芝多糖含量提高到30-40%灵芝菌丝体提取物。

极大的提高了功效，减少了服用量。

灵芝多糖提取工艺流程：(提取罐）灵芝菌丝体粉水提取（外循环真空浓缩罐）提取液真空浓缩（醇沉罐）浓缩液乙醇沉淀多糖（离心机）沉淀多糖分离(浓缩液储罐）沉淀物配制成多糖浓缩液（喷雾干燥塔）灵芝多糖喷雾干燥（粉碎机）灵芝多糖粉碎到100目（混合机）灵芝多糖粉批量混合（真空包装机）食品塑袋真空包装。

灵芝中有效成分提取方法

灵芝中有效成分提取方法灵芝（Ganoderma lucidum）是一种珍贵的中药材，被认为具有多种生物活性成分，如多糖、蛋白质、三萜类及其衍生物等。

其中，多糖是灵芝中最为活性的成分之一，被广泛研究并应用于治疗多种疾病。

因此，有效提取灵芝多糖成分成为目前研究的热点之一。

灵芝多糖是一种大分子水溶性多糖，其化学结构较为复杂。

因此，灵芝多糖的提取方法需要考虑多种因素，如提取剂种类、浸提时间、浸提温度、提取pH值等。

以下将介绍几种常见的灵芝多糖提取方法。

1. 热水浸提法热水浸提法是目前最为常见的灵芝多糖提取方法之一。

该方法需要将干燥的灵芝粉末放入锅中，加入水（一般为灵芝粉末重量的10倍），加热至沸腾，然后继续煮沸2~3小时。

提取过程中可以根据需要调整pH值。

接下来，将提取液过滤并浓缩，随后加入适量的乙醇，混合后反复沉淀，干燥即可得到灵芝多糖。

酸性水提法是利用酸性水溶解灵芝中多糖，并进一步提取的方法。

先将灵芝粉末放入锅中，加入酸性水（如2%的HCl），在40~60摄氏度下回流约2~3小时，再过滤获得提取液，使用乙醇或丙酮沉淀得到灵芝多糖。

4. 超声波提取法超声波提取法是一种无机溶剂、无紧密块质量平衡的物质传递技术，可以提高灵芝多糖的提取率和产量。

该方法需要将灵芝粉末与提取剂（一般为水或酒精）混合，放入超声波提取器中，以适当频率、功率和时间进行超声波处理，进而将多糖分子破坏释放。

提取后用纸滤掉残渣，浸提液中加上酒精反复沉淀、洗涤，最后干燥即可得到灵芝多糖。

总之，不同的提取方法对灵芝多糖的提取效率和产量具有影响，需要根据研究目的和设备条件合理选择。

灵芝中有效成分提取方法

灵芝中有效成分提取方法
灵芝是一种珍贵的中草药，在传统中医药和现代药物领域都有重要的应用价值。

灵芝
中的有效成分主要包括多糖、三萜类化合物和蛋白质等。

提取这些有效成分可以增强灵芝
的药用价值，下面将介绍一些灵芝中有效成分的提取方法。

一、多糖的提取方法：
1. 热水提取法：将灵芝切碎，加入适量的开水，水温保持在80-100℃之间，连续浸
泡2-3小时。

之后，过滤得到提取液，再用醇沉淀得到多糖。

2. 酶解法：将灵芝粉末加入含有酶的溶液中，温度保持在50℃左右，酶解2-3小时。

之后通过离心或过滤，得到多糖的提取液。

二、三萜类化合物的提取方法：
1. 乙醇提取法：将灵芝切碎，加入适量的乙醇中，浸泡12-24小时。

之后，过滤得到提取液，再用乙醇沉淀得到三萜类化合物。

2. 超临界流体萃取法：利用超临界二氧化碳作为溶剂，将灵芝粉末加入超临界流体
萃取设备中，进行高温高压的提取。

之后通过减压，得到三萜类化合物的提取物。

需要注意的是，在提取灵芝中有效成分的过程中，应根据具体成分的性质和目的选择
合适的提取方法。

提取过程中也需要控制温度、时间、浓度等条件，以保证提取效果和成
分的纯度。

为了确保提取物的质量和安全性，提取过程中还要注意卫生和消毒，以防止细
菌和其他有害物质的污染。

灵芝中有效成分的提取方法多种多样，选择合适的提取方法可以充分发挥灵芝药用价值。

在提取过程中要严格控制条件，确保提取物的纯度和质量。

提取物的应用还需要进一
步研究和开发，以发挥其在医药和保健品领域的作用。

灵芝多糖超声提取工艺流程

灵芝多糖超声提取工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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西藏灵芝多糖的提取工艺研究

ｕｉｄｉｎｔｈｅｌｅａｃｈｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｓｉｎｇｌｅ — ｆａｃｔｏｒｔｅｓｔａｎｄｏａｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｗａｓＩＯ０￣Ｃ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｉｍｅｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｗａｓ２ｔｉｍｅｓ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｉｍｅｗａｓ２ｈａｎｄｒａｔｉｏｏｆｍａ－ｔｅｒｉａｌｔｏｌｉｑｕｉｄｗａｓ１：３０ｏｆＧａｎｏｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓａｒｅ
ｓｔａｂｌｅａｎｄｉｔｉｓｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｗｈｉｃｈｃａｎｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｏｒｆｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｆｒｏｍＧａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍｏｆＴｉｂｅｔ．
ｏｄｓＡｎｔｈｒｏｎｅ－ｓｕｌｐｈｕｒｉｃａｃｉｄｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｃｔｅｃｔｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａ — ｒｉｄｅｓｗａｓｔｏｏｋａｓｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎｉｎｄｉｃａｔｏｒ，ｆｏｕｒｆａｃｔｏｒｓｓｕｃｈａｓｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｔｉｍｅ，ｎｕｍｂｅｒｏｆｔｉｍｅｓａｎｄｒａｔｉｏｏｆｍａｔｅｉａｒｌｔｏｌｉｑ —

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灵芝多糖提取工艺
1、灵芝多糖简介
灵芝多糖是一种从灵芝孢子粉或灵芝中提取的物质。

不溶于高浓度的酒精 , 微溶于低浓度的酒精及冷水 , 在热水中能全部溶解。

目前已分离到的有200多种，其中大部分为β–葡聚糖，少数为α–葡聚糖，多糖链由三股单糖链构成，是一种螺旋状立体构形物，其立体构形和DNA、RNA相似，螺旋层之间主要以氢键固定，分子量从数百到数十万，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高浓度酒精，在热水中溶解，大多存在于灵芝细胞内壁。

灵芝多糖都存在于灵芝的细胞壁内壁。

灵芝多糖中除含有葡萄糖外 , 大多还含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、鼠李糖等单糖 , 但含量较少。

单糖间糖苷键连接有1,3、 1,4 和 1, 6 数种。

大多为β型结构 , 少数为α- 型结构。

α-型多糖没有药理活性 ( 药效 ) 。

多数多糖链有分枝 , 部分多糖链含有小分子肤链。

多糖链分枝密度高或含有肤链的其药理活性也高。

灵芝多糖在水溶液中多糖链一般由三股糖链组成 , 在 o. 1 摩 / 升氢氧化纳溶液中时多糖链的三股糖链离解为单股单糖链。

多糖的药理活性与单糖间糖苷键的结合形式有关。

单糖间以β- 1 , 3 、 1, 6 或β-1,4 、 1, 6-糖苷键连接是有效的即具有药理活性 , 而纯β_-1 ,4- 糖背键连接的则没有药理活性。

此外 , 多糖的药理活性还与其立体构形有关 , 若螺旋形立体结构被破坏 , 其活性则大大下降。

淀粉、纤维素、糊精也是多糖 , 但其构形与灵芝多糖 ( 或其他真菌多糖 ) 不同。

淀粉、纤维素等多糖没有螺旋形立体结构 , 单糖间的连接全是β- 1,4-连接。

纤维素是β-型多糖 , 淀粉、糊精是α-型多糖。

由于其构形不同 , 所以淀粉、糊精、纤维素都没有药理活性。

灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一 ,已分离到的灵芝多糖有 200 多种 , 其中有数十种的结构已被搞清 , 分子量已被测定。

现知灵芝多糖有广泛的药理活性，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿瘤、抗辐射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白
质能力，延长寿命，灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。

多糖分子量大于1×104时显示强抑制肿瘤活性，活性强弱还与多糖链分叉的程度及支链上羟基的数量有关。

灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。

2、灵芝多糖提取工艺
2．1、灵芝菌丝体多糖的提取及含量检测
2.2.1、灵芝菌丝体多糖的提取
取适量的灵芝湿菌体，用乙醇等有机溶剂进行处理，以除去湿菌体中的脂类物质，同时使糖苷酶失去活性，防止多糖的降解。

用热水提取多糖。

取上面经预处理的灵芝湿菌体，放人1：20的热水（95℃）中浸提，一次3小时，连续浸提3次，合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积，再用3倍体积的95%乙醇混合，静置10－12小时，再离心，最后加入75%的乙醇反复洗涤，以沉淀多糖。

此沉淀物为粗多糖，其中混杂有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质，一般要经过纯化。

多糖的纯化，去蛋白质和deae纤维素柱层析。

去蛋白质一般采用sevag法：加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止，且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。

多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法：取脱蛋白后的多糖，分别以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂，0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱，然后用0.2%恿铜硫酸液比色测定吸收度，收集有多糖的洗脱液，再浓缩脱盐即得所需的多糖。

2.2.2、多糖纯度的鉴定
可用电泳法进行鉴定，如果存在单一带，说明为纯多糖。

2.3.3、多糖与多糖中蛋白质含量的测定
取一定量菌丝体粗多糖，加水煮沸溶解，用sevag方法脱去蛋白考马斯亮兰法测其粗多糖中蛋白质和多糖的含量。

一般菌丝体中粗多糖含17.01%、多糖含5.43%、蛋白质含量2.16%。

2.2、灵芝子实体多糖的提取及含量检测
2.2.1、灵芝子实体多糖的提取
取适量的灵芝子实体，捣碎成粉末，用80目筛过筛，然后用热水提取法进行提取。

具体操作同菌丝体多糖的提取。

提取出的粗多糖含有色素、蛋白质等小分子杂质，也须除去。

子实体粗多糖去除蛋白质也采用se阴法。

去除色素，目前尚未发现很理想的方法。

一般用乙醇进行反复冲洗，但效果不很理想。

2.2.2、多糖纯度的鉴定
同菌丝体多糖纯度的鉴定。

2.2.3、子实体粗多糖、多糖及蛋白质含量的测定。

具体方法同菌丝体多糖及蛋白质含量的测定。

测得子实体中粗多糖7.5%、多糖1.5%，蛋白质0.6%，其含量均低于菌丝体中的含量。

可见菌丝体阶段就形成了灵芝多糖的有效成分，为灵芝液体深层发酵生产菌丝体提供了科学依据。