蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
神经干动作电位、兴奋传导速度和不应期测定实验报告
神经干动作电位、兴奋传导速度和不应期测定实验报告神经干动作电位、兴奋传导速度和不应期测定实验报告课程:机能实验基础医学院系临床班姓名学号组员：【实验目的】1.了解电生理仪器的使用。
2.观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形；学习神经干动作电位的记录方法以及潜伏期、幅值、时程的测量；3.学习神经干动作电位传导速度的测定方法。
加深理解神经兴奋传导的概念及意义。
4.了解神经干兴奋后兴奋性的改变。
学习测定不应期的方法。
【实验动物】牛蛙【实验结果】图一神经干动作电位观察到一个先升后降的双相动作电位波形（有刺激伪迹）。
时程为4ms，潜伏期为，最大幅度为，（当刺激强度为时）。
图二神经干兴奋传导速度测定每个电极间距25mm，时间约为，速度测定为s图三神经的不应期测定（按时间顺序，从上到下、从左到右排列）【实验讨论】神经动作电位的观察神经细胞产生兴奋的客观标志是神经细胞的动作电位。
当神经纤维未受刺激时，膜外与电极所接触的两点之间没有电位差，所以两电极之间也无电位差存在，扫描线为一水平基线。
处于兴奋部位的膜外电位低于静息部位，当动作电位通过后，兴奋部位的膜外电位又恢复到静息水平，用电生理学方法可以引导并记录到此电位变化过程。
将一对引导电极置于神经干表面，当神经冲动通过时，两电极之间将产生一短暂的电位变化过程，即为神经干动作电位。
神经干动作电位是复合动作电位，可沿细胞膜做不衰减的传导，它的幅度在一定范围内与刺激强度成正比。
由于引导方式不同，记录到的神经干动作电位有双相和单相之分，假如在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断其兴奋传导能力，此时可以记录到单相动作电位。
在神经干左端给与电刺激后，则产生一个向右传导的冲动（负电位），当冲动传导1电极（负电极）下方时，此处电位较2处低，产生了电位差，扫描线向上偏转，记录出一个向上的波形（在电生理实验中，规定负波向上）。
随后，冲动继续向右侧传导，离开1电极传向2电极处。
随后，冲动继续向右侧传导，离开1电极传向2电极处。
神经实验2 神经干动作电位 传导速度和不应期测定
实验2 神经干动作电位的引导神经干动作电位的传导速度和不应期测定一、实验目的1、学习蟾蜍坐骨神经标本的制备方法2、观察神经干动作电位的波形，学习神经兴奋传导速度的测定方法，观察神经干在一次兴奋后兴奋性的变化。
3、学习生物信号采集分析系统。
二、实验原理可兴奋组织如神经纤维在受刺激而兴奋时，细胞膜电位将发生一系列短暂的变化。
由安静状态下的膜外正膜内负的静息电位变为兴奋状态下的膜外负膜内正的去极化状态。
因此，在膜外兴奋区相对于未兴奋区来说电位为负。
这种电位差所产生的局部电流又引起邻近未兴奋区的去极化，使兴奋沿细胞膜传向整个细胞，而原来的兴奋区的膜电位又恢复到膜外正膜内负的静息水平。
这种可传播的、短暂的膜电位变化称之为动作电位。
可兴奋组织在一次兴奋之后，其兴奋性要经历一个规律的时相变化，依次是绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后才恢复到正常的兴奋性水平。
本实验旨在观察动作电位的基本波形、潜伏期、幅值及时程，观察不同刺激强度对神经干动作电位波形的影响。
了解神经兴奋传导速度测定的基本原理和方法，以及神经兴奋后兴奋性变化的规律。
三、实验器材蟾蜍常用手术器械、蛙板、铜锌弓电极、毁髓针、玻璃解剖针、神经屏蔽盒、电极、蛙钉、任氏液、烧杯、培养皿、生物信号采集分析系统。
四、实验步骤1、坐骨神经干的制备双毁髓，制备下肢标本，制备坐骨神经标本。
2、连接实验装置将分离好的坐骨神经干标本放在神经屏蔽盒内的电极上，中枢端置于刺激电极，末梢端置于引导电极。
3、实验项目打开生物信号采集分析系统，进入实验模块：依次选择“神经干动作电位的引导”、“神经干兴奋传导速度的测定”、“神经干兴奋不应期测定”。
选择适当参数，进行实验。
（1）阈刺激和最大刺激先将刺激强度设为零，再逐渐增大，直至出现动作电位时（此时的刺激强度即为阈强度）；逐渐增大至动作电位幅度达到最大值为止，该强度的刺激为最大刺激（记下该强度值）。
（2）测定传导速度测量两记录电极之间的距离s（mm）和传导所用时间t （ms），然后，根据公式v=s/t，（3）观察不应期给神经干最大刺激强度使之出现两个大小相等的动作电位，改变刺激间隔的时间，逐渐缩短两刺激间隔时间至第2个动作电位刚好变小，此时的刺激间隔时间即为动作电位的恢复周期。
神经干动作电位、传导速度以及不应期的测定
不应期
S1
S2
t t1
t2
方法和步骤
➢ 急性动物实验制备蟾蜍 坐骨神经干标本 ▪ 分离坐骨神经干标本， 任氏液保持标本湿润
观察项目
• 记录随刺激强度增强而改变的双向复合动作电位。 • 测量动作电位的传导速度。 • 交换神经干两端的方向，观察复合动作电位变化，原理？ • 夹伤神经干观察复合动作电位变化。 • 不应期观测。
区域测量 刺激伪迹
观察项目：动作电位传导的双向性
• 将神经干标本放置方向倒换 • 记录数据 ：双相动作电位波形有无变化
双相动作电位幅度有无变化
观察项目：动作电位传导的速度
最大刺 激强度
观察项目：不应期
• 刺激器参数设置 • 细电压 • 双刺激 • 间隔减小 • 程控
实验目的
❖分离蟾蜍的坐骨神经，细胞外记录坐骨神 经干的单相和双相复合动作电位；
❖测定动作电位在神经干上的传导速度 ❖不应期的观察
实验原理－1
❖ 神经细胞（纤维）受到有效刺激（阈刺激，阈上刺激） 后，产生了动作电位，即兴奋，它是“全或无”的；
❖ 神经干由许多不同的神经细胞组成，众多神经细胞动作 电位的组合即形成复合动作电位；
• 动作电位传导速度=（ r1-r2 ）/ （t2 - t1）
0
实验原理－3
• 在两记录电极间夹伤神经干，双相动作电位变单相动作电 位；在两记录电极前夹伤神经干，动作电位消失；
0
实验原理——4
• 神经干动作电位不应期的观察 • 条件刺激（S1）：引起神经兴奋。 • 测试刺激（S2）：在前一兴奋过程的不同时相
❖ 复合动作电位能在神经干表面传导，顺序通过两根引导 电极，被记录到双向复合动作电位。
神经干复合动作电位以及其传导速度和兴奋不应期的测定
神经干复合动作电位以及其传导速度和兴奋不应期的测定一目的要求1. 观察蛙坐骨神经复合动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理2. 学习测定蛙离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理3. 学习测定神经兴奋不应期的基本原理和方法二基本原理神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干的一段施加刺激，从另一端引导传来的神兴奋冲动，可以记录出双相电位，加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相电位。
神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的。
但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。
即可按照公式v=m/s来计算出兴奋的传导速度。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为3-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维，传导速度在正常室温下为35-40 m/s。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性的变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激，用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度，以判定神经兴奋性的变化。
三实验材料蛙，常用手术器械，PC机，信号采集处理系统，电子刺激器，神经屏蔽盒，任氏液四实验步骤1反射时和反射弧的测定(1) 制备脊蛙(2) 悬挂支架测定反射时2神经干动作电位的测定(1) 坐骨神经标本的制作(2) 连接poewrlab通道，神经屏蔽盒(3) 打开scope软件设置(4) 刺激记录双相动作电位(5) 损伤神经测定单相动作电位五实验结果与分析(一) 反应时测定(单位:秒)(二) 反射弧分析(三) 神经干动作电位记录图 ?双相电位untitled : Page 24SmVVmsDelay:180ms Ch3Dural:20ms Range:2mv Ampl:6.00vCh2 Range:2vTime Base 200HZ Sample:256Time:1S ?单相电位untitled : Page 25S21mV-1-2210V-1-2msDelay:180ms Ch3Dural:20ms Range:2mvAmpl:6.00v Ch2Range:2vTime Base 200HZSample:256Time:1S神经干是由许多粗细不同的神经纤维组成。
蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
实验二蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。
熟悉仪器设备的操作。
实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离s，v=s/t。
2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。
实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。
2.连接仪器，引导动作电位波形。
3.剪裁编辑图形，计算传导速度。
实验结果：1.（见图）2.计算S=10mm,t=0.33ms,v=10mm/0.33ms=33m/s分析讨论：1.我们通过对潜伏期法和潜峰法测定结果的比较，结合神经干的特性进行分析：动作电位的起点本质是神经干中传导速度最快的一类神经纤维传导兴奋到达记录点引起的，潜伏期法测量的速度本质是此类神经纤维的传导速度。
而潜峰法的形成本质是各种神经纤维兴奋相互叠加后最强的部分。
如果采用潜峰法测量，由于“迁延效应”代表的时间不够准确，不能代表神经干的传导速度，故应该采用潜伏期测量才更准确。
2,.兴奋以局部电流的方式沿着神经干表面传导,兴奋传播过程中造成引导电极下电位改变,故可记录到双相动作电位.通过两对引导电极可观察到兴奋由一对引导电极下传至另一对引导电极下所需时间,根据兴奋传播的距离和所需时间即可计算出传导速度.实验结论：本实验中测出神经干动作电位的传导速度为33m/s。
由实验可知，神经纤维在静息状态下受到有效刺激可产生动作电位，同一条神经干中不同的神经纤维兴奋性不完全相同，且在一次兴奋后兴奋性发生改变，兴奋以一定的速度在神经干表面传导，神经兴奋的传导依赖于神经纤维的完整性。
二、兴奋性不应期的测定实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。
实验三动作电位传导速度和不应期测定
浙江大学实验报告课程名称：生理学实验实验项目：实验三蛙类坐骨神经动作电位传导速度和不应期的测定实验日期：2016年10月日（周）姓名学号班级：第组，同组者：实验地点：紫金港生物实验中心311[目的]1、测定蛙类坐骨神经的绝对不应期和相对不应期，并了解其测定原理。
2、测定蛙类坐骨神经兴奋的传导速度并了解其原理。
[原理]1、神经在一次兴奋的过程中，其兴奋性也发生一个周期性的变化，而后才恢复正常。
兴奋性的周期变化，依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。
为了测定坐骨神经在—次兴奋后兴奋性的周期变化，首先要给神经施加一个条件刺激(S1)引起神经兴奋，然后再用一个测试性刺激(S2)，在前一兴奋过程的不同时相给以刺激，用以检查神经的兴奋阈值以及所引起的动作电位的幅值，以判定神经兴奋性的变化。
当刺激间隔时间长于25 ms时，S1和S2分别所引起动作电位的幅值大小基本相同。
随着S2距离S1逐渐接近，发现S2所引起的第二个动作电位幅值开始减小时即为落入相对不应期。
再逐渐使S2向S1靠近，第二个动作电位的幅值则继续减小。
最后可因S2落在第一个动作电位的绝对不应期内而完全消失。
2、神经干受到有效刺激兴奋以后，产生的动作电位以脉冲的形式按一定的速度向远处扩布传导。
不同类型的神经纤维其传导兴奋的速度是各不相同的。
总体说来，直径粗的纤维传导速度快，直径相同的纤维有髓纤维比无髓纤维传导快。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为3--29um，其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维，传导速度在正常室温下大约为35--40 m/s。
测定神经纤维上兴奋的传导速度(v)时，在远离刺激点的不同距离处分别引导其动作电位，两引导点之间的距离为s，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为t。
再按照下面的公式来计算其传导速度：v=s/t。
[实验材料]蛙常用手术器械蛙板任氏液培养皿烧杯神经屏蔽盒Medlab生物信号采集系统[实验流程]剥制神经干标本→调试仪器设置实验参数→神经干动作电位传导速度的测定→神经干兴奋不应期的测定[实验步骤]一、蛙坐骨神经干标本制备1．毁蛙脑脊髓，去躯干上部及内脏和皮肤。
生物实验报告-神经传导速度测定
生物实验报告姓名：班级：日期：同组者：实验序号：实验题目：神经干动作电位及其速度测定坐骨神经干不应期测定实验目的：1.学习神经干标本的制备。
2.观察坐骨神经干的单相、双相动作电位、双向性传导并测定其传导速度。
3.观察机械损伤对神经兴奋和传导的影响4.学习绝对不应期和相对不应期的测定方法5.了解蛙类坐骨神经干产生动作电位后其兴奋性的规律性变化实验原理：神经或肌肉发生兴奋时，兴奋部位发生电位变化，这种可扩布性的电位变化即为动作电位。
可通过引导电极在仪器上进行记录。
用电刺激神经，在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化，当去极化达到阈电位，膜上产生一次可传导的快速电位反转，即动作电位。
神经干由许多神经纤维组成。
其动作电位是以膜外记录方式记录到的复合动作电位。
如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称双相动作电位。
通常实验室常用的是方波电刺激，固定波宽，即刺激持续时间与强度/时间变化率二个参数不变，只改变刺激强度，观察不同刺激强度作用于组织时，组织的反应。
在安静状态下神经干中的神经纤维处于膜外为正，膜内为负的极化状态。
当神经纤维受刺激兴奋时，受刺激部位的膜去极化产生动作电位，与邻近未兴奋部位的膜形成局部电流，并以局部电流的方式传导。
当局部电流传到电极4时，电极4处的膜去极化（膜内变为正，膜外变为负），而电极5处的膜尚未兴奋，故电极5处电位相对于电极4处高，此电位变化过程即形成双向动作电位波形的AB 段。
当兴奋传至电极5处时，该处的膜去极化，膜外电位相对于电极4处逐渐降为0，此电位变化过程即双向动作电位波形的BC段。
当电极5尚处于去极化状态，而电极4处膜逐渐复极化时，电极5处膜电位相对于电极4处的膜电位逐渐降低为负值，此电位变化过程即双向动作电位波形的CD段。
当电极5处的膜复极化时，电极5处的膜电位逐渐恢复至电极4处电位水平，此电位变化过程即双向动作电位波形的DE段。
动物生理实验报告
实验名称：蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的测定实验目的：1. 确定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的临界值和最大值。
2. 测定蟾蜍坐骨神经干CAP的传导速度。
3. 确定蟾蜍坐骨神经干CAP的不应期（相对不应期和绝对不应期）。
实验材料：1. 实验动物：蟾蜍（Bufo bufo gargarizans）2. 实验器材：生物信号采集系统RM6240，刺激电极，记录电极，接地电极，标本盒，手术器械，剪刀，镊子，刀片，生理盐水，酒精棉球等。
实验方法：1. 蟾蜍坐骨神经标本的制作：- 双毁髓处死蟾蜍后，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经。
- 游离大腿肌肉之间的坐骨神经干及其下行到小腿的两个分支：胫神经和腓神经。
- 三段结扎，剪去无关分支后离体。
- 注意保持神经湿润。
2. 神经标本的连接：- 将神经搭于标本盒内，保证神经与电极充分接触。
- 中枢端接触刺激电极S1和S2，外周端接触记录电极R1-R2，之间接触接地电极。
3. 刺激输出线的连接：- 刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极S1和S2。
- 插头接生物信号采集系统RM6240的刺激输出插口。
4. 信号输入线的连接：- 信号输入倒显得红色和绿色夹子分别连接记录电极（绿色夹子在前，引导出正向波形，即出现的第一个波峰向上）。
- 黑色夹子连接接地电极，插头接通道1。
5. 实验步骤：- 设置刺激参数：刺激频率、刺激强度、时间间隔等。
- 记录蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的波形。
- 逐渐增加刺激强度，观察CAP波形的变化。
- 确定CAP的临界值和最大值。
- 逐渐增加刺激强度，观察CAP传导速度的变化。
- 确定CAP的传导速度。
- 逐渐增加刺激强度，观察CAP不应期的变化。
- 确定CAP的相对不应期和绝对不应期。
实验结果：1. CAP临界值和最大值：- 当刺激强度为1.0 mA时，CAP的临界值为0.6 mV。
- 当刺激强度为1.5 mA时，CAP的最大值为1.2 mV。
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神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定
组员：陈良鹏肖瑶伍思静袁果曼罗冰清
实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。
实验对象：蟾蜍
实验药品和器材:蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。
实验原理：1、神经动作电位是神经兴奋的客观标志。
当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息电位；当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。
神经干兴奋过程所发生的膜电位变化称神经复合动作电位。
如果将两个引导电极置于神经干表面时（双极引导），动作电位将先后通过两个引导电极处，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位。
2、神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。
测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度。
3、神经与肌肉等可兴奋组织兴奋性在一次兴奋过程中可发生系列变化，即绝对不应期相对不应期超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。
为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可先给一个条件刺激以引起神经兴奋，然后再用另一检验性刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作电位（AP)幅度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。
在本次实验中，主要观察的是不应期的变化，而非整个兴奋性的周期性变化。
实验对象：蟾蜍
实验步骤及方法:
1.坐骨神经—腓神经标本的制备。
2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。
3.仪器连接。
4.BL-410的操作。
实验内容：
1、刺激坐骨神经时诱发产生的动作电位
由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.32ms，时程t1为 1.92ms ，波幅为11.08mV。
2、潜峰法测量速度
通过测量两个通道的动作电位波峰间的时间差，为（t1-t2）,测量并输入两对引导电极间的距离为（s2-s1），由传导速度和用公式计算传导速度：v2=(s2-s1)/(t1-t2)=v20.02m/0.00080s=25.00m/s
3、绝对不应期和相对不应期的测定
3、
由上图可知当刺激间隔为9.00mS时，第二个刺激引起的动作电位幅度刚好开始降低，的第二个刺激已经落入第一次兴奋的相对不应期，当刺激间隔为 1.85mS 时,第二个动作电位完全消失，几次是第二个刺激落入第一个刺激的绝对不应期期。
相对不应期=总不应期-绝对不应期=9.00ms-1.85ms=7.15ms
实验讨论：
1、为什么在一定范围内，用电刺激神经，动作电位随刺激强度增大而增大，并没有出现“全或无”的现象？
答：一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作电位不随着刺激强度增大而增大，但是坐骨神经干是有许多神经纤维组成的，在受到阈值以上刺激时，由于引起不同数目神经纤维产生动作电位，但是每个神经对刺激的兴奋性，随着刺激强度增大，神经纤维产生动作电位的数目也越多，动作电位的幅度也就越大，当全部神经纤维都产生动作电位时，动作电位的幅度就不会增大了．故在一定范围内,坐骨神经干动作电位的幅度为何随着刺激强度增大而增大．
2、为什么兴奋上神经上出现单向传导？
答：因为在一个神经纤维细胞上，当某点受到刺激时，形成产生动作电位，形成局部电流，双向传导，当电流传导到两个神经纤维细胞相接触的部位，即神经突触时，但是兴奋只能从突触前膜穿到突触后膜，所以兴奋上神经上是单向传导的。
讨论与分析：
1.神经干不能太干也不能太湿，剥离完整后在任氏液体中稳定15分钟左右，取出用滤纸吸干周围的任氏液。
2.2.神经干放置在引导电极上时，尽量拉直，不能使它下垂或斜向放置，以免影响神经干长度测量准确性。
3.3.神经干要尽可能长，两个引导电极之间的距离越远，测量的传导速度就越准确。