高中生物选修一教案：课题3 血红蛋白的提取和分离
高中生物选修1学案6：5.3 血红蛋白的提取和分离
课题3 血红蛋白的提取和分离一、学习目标：本课题尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法，电泳法等分离生物大分子的基本原理，二、重点：凝胶色谱法的原理和方法三、难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。
[基础梳理]一、凝胶色谱法1、概念：也称做；是根据分离蛋白质的有效方法。
2、原理（1）由构成的凝胶，内部有许多贯穿的的。
（2）当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程，移动速度，而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度，从而使不同的蛋白质分子得以分离。
二、缓冲溶液1、作用：在一定范围内，抵制的对溶液pH的影响，维持pH 。
2、配制：由种缓冲剂溶解于中配制而成，通过调节缓冲剂的就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
三、电泳1、概念：指在电厂的作用下发生的过程。
2、原理：在一定的下，、等生物大分子的可解离基团会带上或，在的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。
3、作用：电泳利用了待分离样品中各种分子的差异及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中的分离。
4、方法：常用的电泳方法有和。
测定蛋白质分子量时通常使用。
四、实验操作1、样品处理:通过、、等操作收集血红蛋白溶液。
(1)红细胞的洗涤：目的是。
分离时采取，直至上清液中没有，表明红细胞已洗涤干净。
(2)血红蛋白的释放：在和的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。
(3)分离血红蛋白溶液：把离心后，将试管中的液体用过滤、除去，于中静置片刻后，分离出下层的。
2、粗分离：即透析(1)方法：将血红蛋白溶液装入，将放入一定量适宜浓度的中，透析。
(2)目的：将的杂质除去。
(3)原理：透析袋能使小分子自由进出，而将大分子物质保留在袋内。
3、纯化:通过凝胶色谱柱将相对分子质量较大的杂质蛋白除去。
操作如下：(1)凝胶色谱柱的制作。
人教版生物选修一：5.3《血红蛋白的提取和分离》学案要点分析教学反思设计案例教案学案说课稿
人教版生物选修一：5.3《血红蛋白的提取和分离》学案要点分析教学反思设计案例教案学案说课稿课题3 血红蛋白的提取和分离1．尝试对血液中血红蛋白的提取和分离。
2．体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法。
3．了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的原理。
蛋白质的各种特性的差异如分子的______和______、所带________________、溶解度、________和对其他分子的亲和力，等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。
一、凝胶色谱法1．概念：凝胶色谱法也称做__________，是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。
2．原理：大多数凝胶是由________化合物构成的小球体，内部有许多贯穿的通道，当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量____的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程______，移动速度______；而相对分子质量______的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在________移动，路程______，移动速度______。
相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
3．凝胶材料：______性，______类化合物，如葡聚糖或________。
4．具体过程：（1）________混合物上柱。
（2）洗脱开始，______________的蛋白质______进入凝胶颗粒内；相对分子质量______的蛋白质则被排阻于凝胶颗粒之外。
（3）________________的蛋白质被滞留；__________________的蛋白质向下移动。
（4）相对分子质量不同的分子完全分开。
（5）____________的蛋白质行程较短，已从________中洗脱出来，________________的蛋白质还在行进中。
提示：洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
二、缓冲溶液1．作用：在________内，能够抵制外界的________对溶液____的影响，维持____基本不变。
人教版高二生物选修一专题五课题3《血红蛋白的提取和分离》教学设计(共1课时)
- 题型：请描述血红蛋白的提取和分离实验操作步骤。
- 答案：血红蛋白的提取和分离实验操作步骤包括动物组织的研磨、离心、层析等。首先将动物组织研磨成匀浆，然后通过离心将细胞成分分离，最后通过层析进一步分离血红蛋白和其他蛋白。
3. 血红蛋白的提取和分离实验结果分析
- 题型：请分析血红蛋白的提取和分离实验结果。
5. 实践情景：血红蛋白的模拟与设计
- 引导学生了解血红蛋白的模拟与设计在材料科学领域的应用，如血红蛋白纳米材料、血红蛋白生物材料等。
6. 实践情景：血红蛋白的抗氧化作用
- 引导学生了解血红蛋白的抗氧化作用在生物医学领域的应用，如抗氧化药物的制备、抗氧化保健品的研究等。
7. 实践情景：血红蛋白的环保应用
教学目标
教学目标：
1. 理解血红蛋白的提取和分离的实验原理，如离心、层析等。
2. 掌握血红蛋白的提取和分离的实验操作步骤，例如，如何进行动物组织的研磨、如何进行离心等。
3. 能够运用血红蛋白的提取和分离的实验结果来分析血红蛋白的功能和性质，例如，如何通过实验结果来分析血红蛋白的氧结合能力。
4. 培养学生的实验探究力和科学素养，例如，如何设计实验、如何分析实验结果等。
- 引导学生了解血红蛋白的环保应用在环境科学领域的应用，如重金属离子检测、环境污染治理等。
8. 实践情景：血红蛋白的能源应用
- 引导学生了解血红蛋白的能源应用在能源领域的应用，如燃料电池、光合作用模拟等。
9. 实践情景：血红蛋白的生物信息学
- 引导学生了解血红蛋白的生物信息学在生物信息学领域的应用，如蛋白质结构预测、基因序列分析等。
10. 实践情景：血红蛋白的生物工程
- 引导学生了解血红蛋白的生物工程在生物工程领域的应用，如组织工程、细胞工程等。
《专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离》学历案-高中生物人教版选修1
《血红蛋白的提取和分离》学历案（第一课时）一、学习主题本节课的学习主题为“血红蛋白的提取和分离”。
通过本课题的学习，学生将了解血红蛋白的基本性质、提取过程和分离方法，进而培养实践能力和科学研究兴趣。
本课时为第一讲，将聚焦于血红蛋白的概念和背景介绍。
二、学习目标1. 理解血红蛋白的概念、结构及其在生物体内的功能。
2. 掌握血红蛋白提取的基本原理和方法。
3. 学会使用离心机等实验器材，并了解实验操作注意事项。
4. 培养学生对生物化学实验的兴趣和实验操作能力。
三、评价任务1. 理解评价：通过课堂提问和小组讨论，评价学生对血红蛋白概念及功能的理解程度。
2. 操作评价：观察学生在实验操作中的表现，包括离心机操作、实验器材使用等，评价其操作能力。
3. 实验报告评价：学生完成实验报告后，根据报告的完整性、准确性和分析深度进行评价。
四、学习过程（一）导入新课通过展示人体血液的图片，引导学生思考血液中成分的种类和功能，引出血红蛋白的话题。
（二）新课讲解1. 血红蛋白的概念及结构讲解。
2. 血红蛋白在生物体内的功能介绍。
3. 血红蛋白提取的原理和方法简述。
（三）实验操作演示教师演示离心机的使用方法及注意事项，并指导学生进行实际操作。
（四）学生实验操作学生分组进行血红蛋白的提取实验，记录实验过程和结果。
（五）课堂小结总结本课学习的重点内容，强调实验操作注意事项。
五、检测与作业1. 完成课后习题，巩固本课学习的知识点。
2. 撰写实验报告，包括实验目的、材料与方法、实验过程与结果分析等。
3. 准备下一课时的相关知识预习，为后续学习做好准备。
六、学后反思1. 学生对血红蛋白的提取和分离有了初步的认识，对实验操作有了基本的掌握。
2. 在实验过程中，部分学生在使用离心机时存在操作不当的情况，需要加强操作技能的训练。
3. 学生在实验报告的撰写上，部分同学对实验结果的分析不够深入，需要在今后的学习中加强分析和解决问题的能力。
4. 本课时的学习为后续的学习打下了基础，学生对于生物化学实验的兴趣得到了激发，需要继续保持和加强。
人教版高二生物选修一《课题3血红蛋白的提取和分离》说课稿
人教版高二生物选修一《课题3血红蛋白的提取和分离》说课稿一、课题背景和意义《课题3血红蛋白的提取和分离》是人教版高二生物选修一的教材内容之一。
通过本课题的学习，学生将了解血红蛋白的结构和功能，掌握血红蛋白的提取和分离方法，并通过实验观察、分析和总结来提高科学实验的能力和科学素养。
血红蛋白是人体内重要的生物分子之一，它作为氧气的载体，参与了身体各个器官和组织细胞的呼吸过程。
因此，对血红蛋白的研究对于了解人体的生理和病理过程具有重要意义。
二、教学目标1.知识目标：–掌握血红蛋白的结构及其功能。
–了解血红蛋白的提取和分离方法。
2.能力目标：–学会使用实验仪器和设备进行实验操作。
–培养观察、分析和总结实验结果的能力。
3.情感目标：–培养学生对科学实验的兴趣和热爱。
–培养学生的合作意识和团队精神。
三、教学重点和难点教学重点： - 血红蛋白的结构和功能。
- 血红蛋白的提取和分离方法。
教学难点： - 血红蛋白的分离方法的操作和技巧。
四、教学内容与过程1. 血红蛋白的结构和功能血红蛋白是由四个亚基（两个α链和两个β链）组成的复合蛋白，每个亚基中存在着一个带有铁元素的血红素分子。
血红蛋白的主要功能是运输氧气到身体各组织。
2. 血红蛋白的提取和分离方法血红蛋白的提取和分离可以使用离心、色谱层析等方法。
2.1 离心法离心法是一种将混合物中的不同成分分离的常用方法之一。
在此实验中，我们使用离心机将血液样品进行离心，以将血红蛋白与其他成分分离。
2.2 色谱层析法色谱层析法是一种将混合物中的不同成分通过吸附和洗脱分离的方法。
在此实验中，我们使用色谱层析纸将血红蛋白分离。
3. 实验操作步骤步骤一：准备血液样本•取一小量新鲜血液，放入离心管中。
步骤二：使用离心机分离血红蛋白•将离心管放入离心机中进行离心，分离血红蛋白。
步骤三：制备色谱层析纸•将色谱层析纸剪成适当大小的条状。
步骤四：将分离的血红蛋白样品滴于色谱层析纸上•使用滴管将离心分离的血红蛋白样品滴于色谱层析纸上。
【人教版】生物选修一：5.3《血红蛋白的提取和分离》教案设计
专题5 DNA与蛋白质技术课题5.3 血红蛋白的提取和分离一、【课题目标】（一）知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理（二）过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤（三）情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神二、【课题重点】凝胶色谱法的原理和方法三、【课题难点】样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化和物。
对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。
所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。
怎样提取蛋白质呢？（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。
1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（图5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。
（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。
（3）分离过程：（图5－13b）混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。
（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。
1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。
（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。
2023高中生物人教版血红蛋白的提取和分离实验教案
2023高中生物人教版血红蛋白的提取和分离实验教案实验目的：通过提取和分离血红蛋白，加深对生物分离技术的理解，并掌握实验操作技能。
实验材料：1. 牛血液样品2. 细胞裂解液3. 盐溶液4. 酒精5. 去离子水6. 脱色剂实验步骤：一、制备细胞裂解液1. 取适量的牛血液样品，置于无菌试管中。
2. 加入等体积的生理盐水，轻轻混匀。
3. 用离心机将血液样品离心，分离血细胞沉淀。
4. 将血细胞沉淀取出，加入等体积的细胞裂解液，轻轻混匀。
5. 将混合液放置于冰箱中，静置30分钟，使细胞裂解液充分与血细胞反应。
二、提取血红蛋白1. 从冰箱取出上一步制备的混合液，放置于室温下10分钟。
2. 用移液管将混合液转移至离心管中。
3. 用离心机将离心管中的液体进行离心，使得血细胞沉淀。
4. 将离心管中的上清液倒出，将血细胞沉淀取出。
5. 加入适量的去离子水，轻轻混匀，使血细胞完全溶解。
6. 用滤纸滤除混合液中的杂质。
三、分离血红蛋白1. 将滤掉杂质的混合液均匀地倒入试管中。
2. 用移液管向试管中滴加脱色剂，混匀后放置10分钟。
3. 用离心机将试管中的液体进行离心，使得血红蛋白沉淀。
4. 用滴管将上清液吸尽，只保留沉淀。
实验注意事项：1. 实验过程中需注意无菌操作，以避免污染样品。
2. 实验仪器需提前清洗干净，确保实验结果的准确性。
3. 操作时需严格按照实验操作步骤进行，确保实验顺利进行。
4. 实验结束后，及时清理实验场地，并归还使用的实验器材。
实验结果与讨论：通过以上步骤，我们成功提取和分离了血红蛋白。
血红蛋白是一种重要的蛋白质，在血液中起着携氧和传递氧的功能。
通过本实验，我们学习到了血红蛋白提取和分离的基本原理和方法，并且掌握了相应的实验操作技能。
总结：本实验通过提取和分离血红蛋白，加深了对生物分离技术的理解，并学习到了相关的实验操作技能。
血红蛋白作为一种重要的蛋白质，在人体的氧气传递过程中发挥着重要的作用。
通过本实验的学习，我们不仅提高了实验技能，还深入了解了血红蛋白的结构和功能。
血红蛋白的提取和分离教案
血红蛋白的提取和分离教案教案一: 血红蛋白的提取和分离教学目标:- 理解血红蛋白的结构和功能。
- 学习血红蛋白的提取和分离方法。
- 掌握实验室中分离血红蛋白的步骤和操作技巧。
教学步骤:引入活动:在开始实验之前，首先向学生介绍血红蛋白的结构和功能，以及为什么需要提取和分离血红蛋白。
1. 血红蛋白的提取:a. 实验材料准备:- 鲜血样本- 磷酸缓冲溶液（pH 7.4）- 离心管- 离心机- 冷藏器b. 实验步骤:1) 将鲜血样本取出，用磷酸缓冲溶液稀释。
2) 将稀释后的样本置于离心管中，离心10分钟。
3) 将离心后的上清液转移至新的离心管中，置于冷藏器中。
2. 血红蛋白的分离:a. 实验材料准备:- 血红蛋白样本- 离心管- pH 4.7缓冲溶液- pH 5.2缓冲溶液- pH 6.0缓冲溶液- pH 7.0缓冲溶液b. 实验步骤:1) 将血红蛋白样本转移到离心管中。
2) 分别加入pH 4.7、pH 5.2、pH 6.0和pH 7.0缓冲溶液，使其达到不同的酸碱度。
3) 转动离心管，使其充分混合。
4) 将混合溶液置于冰箱中冷藏一段时间。
5) 通过离心，收集上层液体，然后分别加入酸、碱溶液，使其达到酸碱中和。
6) 重复以上步骤，直到获得纯净的血红蛋白。
实验注意事项:- 实验过程中要注意安全，佩戴实验室衣物和手套。
- 实验器材要严密封闭，避免反应物外泄。
- 实验后要彻底清理实验场地。
教学总结:通过本次实验，学生可以了解血红蛋白的结构和功能，并掌握了提取和分离血红蛋白的方法。
同时，学生也了解了实验室实验的注意事项和操作技巧。
新人教版生物选修1课题3《血红蛋白的提取和分离》优秀教案(重点资料).doc
课题：血红蛋白的提取和分离教学目标：1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理教学重点：凝胶色谱法的原理和方法教学难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填教学过程：（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化合物。
对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。
所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。
怎样提取蛋白质呢？（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。
1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（见课件图）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。
（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。
[（3）分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC －NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。
（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。
1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同［思考］阅读投影补充材料后，填写下表：（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。
（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质－SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。
2．实验设计2.1蛋白质的提取和分离一般分为哪些基本步骤？样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。
高中生物选修一教案：课题3 血红蛋白的提取和分离
课题3 血红蛋白的提取和分离教材内容解读要点1如何分离不同种类的蛋白质根据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质。
如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。
要点2凝胶色谱柱（1）定义凝胶色谱法也称作分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
（2）凝胶所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。
（3）分离原理在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分于质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
要点3缓冲溶液（1）缓冲溶液的缓冲作用在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。
调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。
（2）缓冲溶液的意义生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，为了能够在实验室条件下准确模拟生物体内的过程，就必须保持体外的pH与体内的基本一致。
要点4电泳（1）定义电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
（2）电泳原理许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
电泳利用了待分离样品中各种分于带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
（3）电泳过程中影响粒子运动快慢的因素①粒子带电荷的多少。
粒子带电荷越多在电场中运动越快。
②粒子的质量。
粒子质量越小在电场中运动越快。
③粒子的形状。
呈球形或近球形的粒子比链状粒子运动快。
（4）荷质比粒子在电泳时运动的快慢主要取决于电荷与质量比，简称荷质比。
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课题3 血红蛋白的提取和分离
教材内容解读
要点1 如何分离不同种类的蛋白质
根据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质。
如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。
要点2 凝胶色谱柱
（1）定义
凝胶色谱法也称作分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
（2）凝胶
所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。
（3）分离原理
在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分于质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
要点3 缓冲溶液
（1）缓冲溶液的缓冲作用
在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。
调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。
（2）缓冲溶液的意义
生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，为了能够在实验室条件下准确模拟生物体内的过程，就必须保持体外的pH与体内的基本一致。
要点4 电泳
（1）定义
电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
（2）电泳原理
许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
电泳利用了待分离样品中各种分于带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
（3）电泳过程中影响粒子运动快慢的因素
①粒子带电荷的多少。
粒子带电荷越多在电场中运动越快。
②粒子的质量。
粒子质量越小在电场中运动越快。
③粒子的形状。
呈球形或近球形的粒子比链状粒子运动快。
（4）荷质比
粒子在电泳时运动的快慢主要取决于电荷与质量比，简称荷质比。
荷质比值越大的粒子电泳时运动越快。
要点5 实验操作
蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
血液由血浆和各种血细胞组成，其中红细胞最多。
在红细胞的组成中，约90%是血红蛋白。
血红蛋白由四个肽链组成，包括两个-肽链和两个-肽链
（1）样品处理
①红细胞的洗涤
洗涤红细胞的目的：去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。
采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用低速短时间离心，如500r／min离心2min，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。
洗涤次数、离心速度与离心时间十分重要。
洗涤次数过少，无法除去血浆蛋白；离心速度过高和时间过长会使白细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。
②血红蛋白的释放
将洗涤好的红细胞倒人烧杯中，加蒸馏水到原血液的体积，再加40%体积的甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌10min。
蒸馏水和甲苯作用：使红细胞破裂释放出血红蛋白。
③分离血红蛋白溶液
将搅拌好的混合液转移到离心管中，以2000r／min的速度离心10min后，可以明显看到试管中的液体分为4层。
第1层为无色透明的甲苯层，第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质的沉淀层，第3层是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。
将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。
④透析
取lmL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋故人盛有300mL的物质的量浓度为20mmol／L的磷酸缓冲液中(pH为7.0)，透析12h。
(2)凝胶色谱操作
①凝胶色谱柱的制作
②凝胶色谱柱的装填将色谱柱垂直固定在支架上。
计算所用凝胶量，并称量。
凝胶用
蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，在与色谱柱下端连接的尼龙臂打开的情况下，一次性缓慢倒入色谱柱内，装填时可轻轻敲动色谱柱，使凝胶装填均匀。
色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装。
装填完后，立即连接缓冲液洗脱瓶，在约50cm高的操作压下，用300ml的物质的量浓度为20mmol／L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12h，使凝胶装填紧密。