骨髓间充质干细胞不同时期移植对心肌梗死大鼠心功能的影响(一)

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静脉移植骨髓间充质干细胞对心衰大鼠心肌细胞cx-43表达的影响

植后４周，用超声测量心功能及心室重塑，脏切片行病理免疫组织化学了解移植细胞在受体心脏的存活及Ｃ４采心Ｘ一３表达情况。
结果体外培养的第三代ＭＳｓ流式细胞仪鉴定结果显示：Ｄ４阳性细胞数占（９７．），ＣＣ４９． ±０９・细胞移植组心肌组织中可以衰见５溴一 ’ 一２脱氧尿苷标记的骨髓间充质干细胞（Ｃ）巢并表达ｃ一４ＭＳｓ归ｘ３阳性；室射血分数细胞移植心衰组、照组与正常对照左对
的生理盐水。进行体外分离，纯化，殖骨髓闻充质干细胞（Ｃ）用含有１胎牛血清的Ｄ增ＭＳｓ并２ＭＥ培养基培养，用流式细胞仪Ｍ采对体外培养的ＭＳｓ表型Ｃ４ＣＤ４进行鉴定。取第三代ＭＳｓ进行移植，Ｃ移植前用５一２脱氧尿苷（ｒＵ）行标记。末次阿霉素溴一 ’ Ｂｄ进注射后１周，５Ｏ将 ×１个ＭＳｓＣ通过鼠尾静脉注射的方法移植到心衰细胞移植组大鼠。移植对照组大鼠注射等量培养基。细胞移
ｃｘ一４３。
关键词：充质干细胞；力衰竭；胞缝隙连接蛋白一４间心细３
中图分类号：５１６Ｒ８．Ｒ４．２５５
文献标识码：Ａ
文章编号：６２３９２０）１０５０１７～１４（０９０ — ００— ２

骨髓间充质干细胞移植对梗死心脏窦性心率震荡的影响

ＣｒｓｏｄｎｕｈｒＣＯＫ－ａｇｏｒｐｎｉｇａｔｏ：Ａｅｊｎｅｉ
［ｓｒｃ］ＯｂｅｔｅＴｖｓｇｔｔｅｅｅｔｆｅｅｃｙａｓｍｃｌＭＳｓｒｓｌｔｏｔｆｃｅｗｎＡｂｔａｔｊｃｉｏｉｅｔａｆｃｏｓｎｈｍｌｔｅｓ（Ｃ）ｔｎｐａｅｉｐｓｎａｔｄｓｉｅｖｎｉｅｈｆｍｅｌａｎｄｎｉｒ
中图分类号Ｒ４．２Ｒ４．１５２２５０４文献标识码Ａ文章编号１０２５（０７Ｏ０５００７— ６９２０）２— １４— ４
Ｅｅｔｆｍｅｅｃｙｌｓｅｃｌｔａｓｌｎａｏｎｈａｔｒｔｕｂｌｎｅｏｏｔｎａｃｅｗｉｅｈａｎｓｕｆｃｓｏｓｎｈｍａｔｍｅｌｒｎｐａｔｆｎｏｅｒａｅｔｒｕａｃｆｐｓｉｆｒｔｄｓｎｅｒｉｉｓｉｔｎ
维普资讯
・
１４・５
中国心脏起搏与心电生理杂志２００７年第２１卷第２期
骨髓间充质干细胞移植对梗死心脏窦性心率震荡的影响
丁曷东曹克将金艳单其俊邹建刚陈明龙
除正常对照组
ｒｙｈＤＮｈｎｄｎ，ＣＯＫ－ａｇＩａ，ＳＡｉｕ，ＺＵＪｎｇｎ，ＣＥｎ－ｎ．ｅａｍｎｆｈｔｍ．ＩＧＣａ－ｏｇＡｅｊｎ，ＪＮＹｎＨＮＱ－ｎＯｉ —ａｇＨＮＭｉｌｇＤｐｒｅｔｉｊａｇｏｔｏＣｒｉｌｙｔｉｔｆｌｔｏｐｔｌｆａｊｇＭｅｉａＵｉｒｔ，Ｎｎｉｇ２０２Ｃｉａａｄｏｇ，ｈＦｒｆｉｅＨｓｉｎｉｄｃｌｎｖｓｙａｊ１０９，ｈｎｏｅｓＡｉａｄａｏＮｎｅｉｎ

NKX2.5基因修饰骨髓间充质干细胞对心肌梗死大鼠心功能的影响

３．医药学院附属医院呼吸内科，吉林吉林吉林
１２１３０３
【要】摘目的：ＮＸ．融合绿色荧光蛋白基因（Ｋ２一ＥＦ）以Ｋ２５ＮＸ．ｐＧＰ质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞（Ｓｓ，基因５ＭＣ）将修饰后ＭＣ移植入大鼠心肌梗死模型中，价其对心功能的影响。方法：外分离培养大鼠ＭＳｓ构建ＮＸ．Ｓｓ评体Ｃ，Ｋ２一５ｐＧＰ基因质粒，以ｌｏ００将质粒转染入ＭＳｓＥＦｉ２０ｐＣ。将基因修饰后ＭＳｓ入心肌梗死后１Ｃ植０ｄ的大鼠心肌梗死区
『键词１Ｘ２５基因；髓间充质干细胞；肌梗死；功能关ＮＫ．骨心心

【中图分类号１５１４Ｒ
【文献标识码１Ａ
ｆ章编号】１７ — ２１（０１１（一１ — ３文６３７０２１）１ｂ）０８０
ｔｒｎｖｔｏｕｅｉｉ．ＮＫＸ２５一ＥＧＦｐａｍｉｓｃｎｔｕｔｄａｄｔｎｆｃｅｎｏＭＳ．ＴｈｅｅｍｏｉｅＣｓｔａｓｒ．ｐＰｌｓｄｗａｏｓｒｃｅｎｒｓｅｔｄｉｔＣｓａｅｇｎｄｆｄＭＳｓｗａｒｎ — ｉ
４周后，Ｃ组大鼠ＬＶ［７￣）较ＤＭＥ组『４ ± ）显著提高（＜．１，Ｃ组大鼠Ｆ『４￣）较ＤＭＥＭＳｓＥＦ（９４％］Ｍ（７３％１ＰＯＯ）ＭＳｓＳ（８９％】Ｍ组『２ ± ）显著提高（ｌ．１。结论：（５６％］Ｐ０Ｏ）＜移植ＮＸ２５基因修饰后的ＭＳｓＫ．Ｃ能够改善心肌梗死大鼠心功能。

骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死中血管内皮功能及心功能的影响

骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死中血管内皮功能及心功能的影响张凌云【摘要】Objective To investigate the safety and effectivity of bone marrow mesenchymal stem cells ( BMMSC ) transplantation in the treatment of acute myocardial infarction , and to provide theoretical basis for its clinical application . Methods The clinical data of 40 patients with acute myocardial infarction were collected ,which were divided into BMMSC transplantation group and percutaneous coronary intervention (PCI) group,at the same time,20 healthy subjects were used as control group.The levels of ISCAM-1,SVCAM-1, SE-selection were detected by ELISA before BMMSC transplantation and at 24h,1month,3 months,6 months after BMMSC transplantation in BMMSC transplantationgroup ,which were also detected in the other two groups to evaluate endothelial function ,moreover,the patient’s cardiac function was examined by color Doppler ultrasound and 6min walking test.Results Each factor( SICAM-1, SVCAM1-, SE-selection) level in Transplantation group and PCI group was significantly higher than that of the control group (P<0.05).After 6 months,each factor's level in transplantation group was obviously lower than that in PCI group (P <0.05),and all of them in 2 groups were decreased comparing with pre-operation( P <0.05)while higher than that of the control group (P <0.05).EF and the 6 min walking test in Transplantation group were higher than that in PCI group after 6months ( P <0.05),and were lower than in the control group( P<0.05 ).Conclusion The recovery effect of bone marrow mesenchymal stem cells transplantation on cardiac function of patients with myocardial infarction is satisfactory ,which suggests that BMMSC transplantation can promote ventricular remodeling of patients with acute myocardial infarction ,moreover,which is superior to PCI.%目的：探讨骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的安全性和有效性，为临床应用提供些理论依据。

骨髓间充质干细胞移植对梗死心脏血流动力学及心肌重塑的影响

ｕｅｓｏｌｏｔｌＣｎｒｒｕ）３ｓｉｅｗｔｐｒｓｄａｕｏａｄａｉａｃｏ（ＭＤｒｃｉｅｓｄａｒｎｏ（ｏｔｌｏｐ，２ｗｎｉｒｅｕｅｃｔｍｙｃｒｉｒｔｎＡｅｅｄｎｍａｃｒｓｏｇｈｅｆｅｌｎｉｆｖｉｔｃｍａｕｉｆｅｈｒＭＳｏｔｎＭＣｇｏｐｎａｏｎｒｉｓｎｏｉｅＣｓｕｉ（Ｓｒｕ，ｎ＝１）ｏ．％ｓｄｕｃｌｉｅｓｌｉ（ｒｙｎｏｔｆｌｏ３ｒ９０ｏｉｍｈｒｏｔｎＭＩｏｄｕｏ
（）Ｉ３Ｍ组和ＭＣ组非梗死区心肌组织ＡｇＩ胶原含量和Ｉ Ⅲ型胶原比例同Ｃｎｏ组相比Ｓｓｎ１、／ｏｔｌｒ均有显著
升高（Ｐ分别＜．１，ＭＳｓ００）但Ｃ组心肌组织Ａｇ、ｎ１胶原含量和Ｉ Ⅲ型胶原比例同Ｍ组相比均有不同／Ｉ程度下降（Ｐ分别＜．５００和００）００、．１．１。结论ＭＳｓＣ移植能显著增加梗死区毛细血管网重建，改善血流动力学状况，减轻心肌重塑程度，有助于减少室性心律失常的基质形成。
丁曷东，曹克将，金艳，单其俊，邹建刚，明龙陈
【摘要】目的血流动力学异常和心肌重塑是心肌梗死（Ｉ后室性心律失常形成的基础，Ｍ）本研
究拟调查猪骨髓间充质干细胞（Ｃ）ＭＳｓ移植对梗死心脏血流动力学和心肌重塑的影响。方法除正常对照组（ｏｔｌ），Ｃ移植组（Ｃ组）ＭＩＣｎｒ组外ＭＳｓｏＭＳｓ和模型组（组）ＭＩ在完成Ｍ动物模型制作时分别经Ｉ

GATA4基因修饰骨髓间充质干细胞对心肌梗死大鼠心功能的影响

第３８卷第３期２０１２年５月
吉林大学学报（医学版））ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎｙ（
Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．３Ｍａ０１２２ｙ
１２３ＺＨＡＯＤｏｎｈａｉＵＯＳｈｕｌｉＩＤａｅｎ－，Ｌ－，Ｌ－ｐｇｇ
（，Ｊ，Ｊ；１．ＤｅａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｉｌｉｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｅｉｌｉｎ１３２０１３，Ｃｈｉｎａｐｇｙｇ，Ｃ，Ｃ；２．ＤｅａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｈｏｒａｃｉｃＳｕｒｅｒｈａｎｃｈｕｎＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｉｔａｌｈａｎｃｈｕｎ１３００５１，Ｃｈｉｎａｐｇｙｇｐｇ，Ａ，Ｊ，Ｊ）３．ＤｅａｒｔｍｅｎｔｏｆＲｅｓｉｒａｔｏｒＭｅｄｉｃｉｎｅｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｉｔａｌｉｌｉｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｅｉｌｉｎ１３２０１３，Ｃｈｉｎａｐｐｙｐｇ

［）摘要］基因修饰骨髓间充质干细胞（对心肌梗死大鼠心功能的影ＧＡＴＡ４）ＭＳＣｓ目的：研究锌指转录因子（，利用脂质响，为进一步探讨其机制提供依据。方法：构建ＧＡＴＡ４ＳＣｓＥＧＦＰ基因质粒，体外分离培养大鼠Ｍ－ｐ。４体将质粒转染入ＭＳＣｓ０只ＳＤ大鼠制备大鼠心肌梗死模型，于术后１０ｄ测定心功能指标。将模型鼠随机分为ＭＳＣｓ组和ＤＭＥＭ组，每组各２０只。ＭＳＣｓ组将ＧＡＴＡ４ＥＧＦＰ基因修饰的ＭＳＣｓ植入心肌梗死后１０ｄ大鼠－ｐ心肌梗死区，ＤＭＥＭ组同时注射等体积无血清ＤＭＥＭ于心肌梗死区。移植注射后４周，检测左心室射血分数（）。结果：体外分离培养的Ｍ和左室缩短分数（ＬＥＶＦ）ＦＳＳＣｓ呈梭形或条形，贴壁生长。ＧＡＴＡ４ＥＧＦＰ重组基－ｐ因质粒转染Ｍ明显ＳＣｓ２周后，可见细胞中有绿色荧光蛋白表达。移植４周后，ＭＳＣｓ组大鼠ＬＥＶＦ（８５％±７％）（；Ｍ（高于ＤＭＥＭ组（明显高于ＤＭＥＭ组（４７％ ±４％）Ｐ＜０．０１）ＳＣｓ组大鼠ＦＳ（５２％ ±６％）３５％ ±８％）Ｐ＜）。结论：０．０１ＧＡＴＡ４基因修饰的ＭＳＣｓ移植能够改善心肌梗死大鼠心功能。［关键词］ＴＡ４基因；骨髓间充质干细胞；心肌梗死；心功能ＧＡ［中图分类号］文献标志码］２６；Ｒ３６１．３［ＱＡ

骨髓干细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学指标和心脏功能的影响

骨髓干细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学指标和心脏功能的影响周跃发;赵翠萍;赵敏;王召军【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2007(011)046【摘要】目的:心肌梗死所致的细胞缺失和瘢痕形成是心力衰竭乃至死亡的病理基础,目前药物治疗、介入治疗和外科手术均不能替代坏死心肌和彻底改善心脏功能.观察骨髓干细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学指标和心功能的影响.方法:实验于2005-03/2006-10在哈尔滨医科大学附属第一医院细胞移植中心完成.①实验动物:SD雄性大鼠60只作为细胞移植的受体,随机数字表法分成假手术组、心肌梗死组、细胞移植组,20只/组.另取SD雄性幼鼠10只作为骨髓干细胞的供体.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.②实验方法:取幼鼠股骨骨髓,Percoll分离后收取细胞层,加入含体积分数为0.1的胎牛血清、100 IU/mL青霉素、100 g/mL 链霉素的DMEM营养液,差速贴壁法分离骨髓干细胞,达80%～90%融合时采用胰酶+乙二胺四乙酸消化传代.向含有第3代骨髓干细胞的培养液中加入5-氮杂胞嘧啶核苷进行诱导,3周后行BrdU标记,离心后配制成1×1012 L-1的细胞悬液用于移植.心肌梗死组、细胞移植组大鼠建立心肌梗死模型,假手术组未结扎冠状动脉.细胞移植组吸取0.2 mL骨髓干细胞悬液注射到瘢痕组织中,心肌梗死组注入等量干细胞培养液基质,假手术组不予任何移植处理.③实验评估:术后4周,利用导管和心动超声技术检测各组大鼠左室舒张末期内压、左室收缩末期内压、左室压力最大变化值、左室压力最小变化值、等容时间常数和心率.结果:术后4周,与假手术组比较,心肌梗死组左室收缩末期内压、左室压力最大变化值、左室压力最小变化值均明显降低(P＜0.01),左室舒张末期内压、等容时间常数均明显增高(P＜0.01);与心肌梗死组比较,细胞移植组以上各项指标均明显好转(P＜0.01).结论:骨髓干细胞移植到瘢痕心肌组织中,能改善心肌梗死后大鼠的血流动力学参数和心脏功能.【总页数】3页(P9313-9315)【作者】周跃发;赵翠萍;赵敏;王召军【作者单位】哈尔滨工程大学力学研究系,黑龙江省哈尔滨市,150001;哈尔滨医科大学附属第一医院心内科,黑龙江省哈尔滨市,150001;哈尔滨医科大学附属第一医院心内科,黑龙江省哈尔滨市,150001;哈尔滨医科大学附属第一医院心内科,黑龙江省哈尔滨市,150001【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.丹参通络解毒汤对骨髓干细胞移植急性心肌梗死模型大鼠NF-κB介导的炎症反应影响 [J], 李鑫辉;李雅婧;黄淼鑫;许福丽;肖青;郭晨鹤2.丹参通络解毒汤对骨髓干细胞移植急性心肌梗死模型大鼠炎症反应的影响 [J], 李鑫辉;李雅婧;黄淼鑫;杜建芳;许福丽;肖青;郭晨鹤3.复心片对寒凝型心肌梗死大鼠血流动力学指标的影响 [J], 李伟;于秀华4.当归补血汤对骨髓干细胞移植急性心肌梗死模型大鼠NF-κB介导的炎症反应影响 [J], 彭丹;江倩;张丹;覃松柏5.人脐血CD34^+细胞静脉移植对急性心肌梗死大鼠血流动力学指标和超声心动图指标的影响 [J], 赵林;王雷;贾三庆;李贵华;李虹伟;顾复生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓间充质干细胞不同移植方法对急性心肌梗死心功能的改善作用比较

骨髓间充质干细胞不同移植方法对急性心肌梗死心功能的改善作用比较贾敏;卢沛琦;冯若;张艳【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2007(011)011【摘要】目的:观察不同方法移植骨髓间充质干细胞对心功能的影响,分析移植方法与心功能改善的关系.方法:实验于2004-02/2005-10在郑州大学医学院干细胞中心和机能中心完成.体外获取、培养大鼠骨髓间充质干细胞.结扎左冠状动脉前降支制备大鼠急性心肌梗死模型,结扎后观察前壁心肌颜色变苍白、收缩力减弱、心电图相应导联ST段弓背向上抬高,确定心肌梗死模型建立.将建模成功的大鼠分成4组,每组10只,2周后进行细胞移植.静脉对照组:尾静脉注射L-DMEM0.6 mL;静脉移植组:尾静脉注射5溴脱氧尿嘧啶标记骨髓间充质干细胞悬液0.6 mL;心外膜对照组:在大鼠心肌梗死区分8点注射L-DMEM 0.6 mL;心外膜移植组:在大鼠心肌梗死区分8点注射5溴脱氧尿嘧啶标记的骨髓间充质干细胞悬液0.6 mL.移植4周后检测大鼠左室射血分数、短轴缩短率、血流动力学指标评价心功能,采用免疫组织化学检测大鼠心肌组织中骨髓间充质干细胞对心肌肌钙蛋白T的表达.结果:40只大鼠均进入结果分析.①与移植前比较,静脉对照组与心外膜对照组心脏功能逐渐恶化,左室射血分数及短轴缩短率降低.静脉移植组与心外膜移植组左室射血分数及短轴缩短率均较移植前升高,并且心外膜移植组高于静脉移植组[移植前:左室射血分数:(27.09±2.46)%,(26.62±2.31)%,短轴缩短率:(24.09±3.13)%,(24.52±3.01)%;移植后:左室射血分数:(35.12±2.68)%,(46.31±3.15)%,短轴缩短率:(28.32±3.68)%,(32.38±2.35)%,P＜0.05].与静脉移植组相比,心外膜移植组左心室收缩压、左室压力变化最大上升速率、左室压力变化最大下降速率升高、左室舒张末期压降低[静脉移植组:(105.27±5.56)mm Hg,(18.02±3.63)mmHg,(4595±389)mm Hg/s,(3768±525)mm Hg/s;心外膜移植组:(123.89±9.64)mm Hg,(13.79±3.92)mm Hg,(4988±513)mmHg/s,(4193±563)mm Hg/s,P＜0.05].②心外膜移植组和静脉移植组梗死心肌内均可见5溴脱氧尿嘧啶阳性移植细胞,对心肌肌钙蛋白T呈阳性表达.结论:心外膜移植细胞和静脉移植细胞对急性心肌梗死心功能均有改善作用,并且心外膜途径移植对急性心肌梗死心功能改善程度强于静脉移植途径.【总页数】4页(P2068-2071)【作者】贾敏;卢沛琦;冯若;张艳【作者单位】郑州大学基础医学院,河南省郑州市,450052;郑州大学基础医学院,河南省郑州市,450052;郑州大学基础医学院,河南省郑州市,450052;郑州大学基础医学院,河南省郑州市,450052【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.Livin 基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗对急性心肌梗死大鼠心功能的影响[J], 邹兵;谢军平;吴清华;陈受琳;肖鲁闽;苏海;洪葵;吴延庆;程晓曙2.自体骨髓单个核细胞移植对急性心肌梗死患者心功能的改善作用及其安全性荟萃分析 [J], 罗承锋;陈敏生;刘世明;田娟3.自体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死后心功能不全家兔基质金属蛋白酶-9的影响 [J], 李树仁;王天红;刘东霞;张素巧;乔建晶;胡炜;荀丽颖;郝清卿;苑可心4.骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死中血管内皮功能及心功能的影响 [J], 张凌云5.不同时间点移植自体骨髓间充质干细胞对心肌梗死后心功能改善的MRI研究 [J], 刘永浩;郭亮;陈剑华;郭世强;虞桂平;沈振亚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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骨髓间充质干细胞不同时期移植对心肌梗死大鼠心功能的影响(一)
作者：侯志峰，龚卫琴，张珊红，王莹，王跃民，李源
【关键词】骨髓间充质干细胞；心肌梗死；静脉移植；心功能Effectsofbonemarrowstemcelltransplantationatdifferenttimeonheartfunctionofratswithmyocardia linfarction
【Abstract】AIM:Toinvestigatetheoptimaltimeforbonemarrowmesenchymalstemcells(MSCs)transplantationaft ermyocardialinfarction(MI).METHODS:MIwasinducedbyoccludingtheleftanteriordescendingartery (LAD)inSDrats.MSCswereisolatedfromtherats,purified,proliferatedandthey(1mL)weretransfusedth roughcaudalveinintotransplantationgroups(n=10/group)at1d,1,2,and4weeksafterMI;thesamecult uremedium(1mL)wastransfusedintothecontrolgroup(n=10).Fourweekslater,theheartfunctionand myocardialischemicsizeandinfarctsizewereevaluated.RESULTS:Theheartfunctionandmyocardialisc hemicsizeandinfarctsizeof1daygroupafterMIhadnodifferencefromthoseofthecontrolgroup(P＞0.05).Theimprovementofheartfunctionin1,2,and4weekgroupsweremoredistinctthanthatof1daygr oup(P0.05);myocardialischemicsizeandinfarctsizewerealsosmallerthanthoseof1daygroup(P0.05).A mongthetransplantationgroups,thetreatmenteffectof2weeksgroupwasthebest.CONCLUSION:Suba cutestage(1-2weeksafterMI)mightbetheoptimaltimeforMSCstransplantation.
【Keywords】bornmarrowmesenchymalstemcells；myocardialinfarction；intravenoustransplantation;heartfunction
【摘要】目的：探讨心肌梗死后骨髓间充质干细胞(MSCs)移植的最佳时间.方法：结扎大鼠左冠状动脉制备心肌梗死模型，将分离培养的大鼠MSCs经尾静脉分别移植到1d,1,2,4wk移植组体内（各组n=10）,对照组则注入等量培养液（n=10）.4wk后测定左心功能指标和心肌缺血梗死面积.结果:心肌梗死后1d移植组左心功能和心肌缺血梗死面积与对照组无明显差别（P＞0.05），而1,2,4wk移植组与1d移植组对比左心功能明显改善（P0.05），心肌缺血梗死面积显著减小（P0.05），其中2wk移植组效果优于1wk移植组和4wk移植组（P0.05）.结论：心肌梗死后1～2wk亚急性期进行细胞移植效果最好.
【关键词】骨髓间充质干细胞；心肌梗死；静脉移植；心功能
0引言
传统观点认为心肌细胞属于不可再生细胞，一旦损害将无法修复，死亡的心肌细胞被成纤维细胞所代替，引起心脏结构的改变，心力衰竭的发生.现有的内外科治疗手段并不能很好地解决功能心肌细胞的丧失问题.随着国内外干细胞试验研究的深入，干细胞移植治疗心肌梗死以及晚期心功能不全正日益成为一种新的治疗方法〔1-2〕.骨髓间充质干细胞(MSCs)由于能够自我复制，具有分化的多功能性，并且无免疫排斥反应，因而在临床中具有广泛的应用前景〔3-4〕.但是骨髓间充质干细胞移植在什么时候进行才能使机体获益最大？这个问题一直是细胞移植领域备受关注的课题.本实验我们探讨在心肌梗死后不同时间静脉移植MSCs 对心肌梗死大鼠心功能的影响，为MSCs移植的临床应用提供实验依据.
1材料和方法
1.1材料低糖DMEM培养基（购于GIBCO公司）；胎牛血清（FCS，购于杭州四季青公司）；伊文氏蓝和红四氮唑（TTC，购于上海化学试剂采购站）.清洁SD大鼠10只，雄性，100～150g，作为MSCs供体.另取清洁SD大鼠50只，雄性，200～250g，随机等分为五组：心肌梗死后1d移植组及1,2,4wk移植组，对照组心肌梗死后1d注射等量培养基.所有动物均购于第四军医大学实验动物中心.
1.2方法
1.2.1大鼠MSCs的分离、培养和扩增雄性SD大鼠脱颈处死，用750mL/L的乙醇浸泡15min.
无菌条件下分离股骨和胫骨，用含体积分数150mL/LFCS的LDMEM培养基反复冲洗骨髓腔，得到的细胞悬液接种到培养瓶，置于37℃，50mL/LCO2孵箱中培养，72h首次换液去除未贴壁细胞，以后每2d换液1次.待细胞覆盖到瓶底的80%时，用胰酶消化传代.
1.2.2大鼠心肌梗死模型的建立采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死模型.30g/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（1.5mL/kg）大鼠，颈、胸部术区消毒，气管插管，连接呼吸机，在心电监护下，左前第3～4肋间隙开胸，打开心包，暴露心脏，于左心耳下方3mm 处用7/0号无损伤丝线连同一小束心肌一起结扎左冠状动脉前降支，结扎后左室壁变苍白，心电监护可见R波振幅升高，ST段抬高，证明结扎成功.术后逐层关胸，观察大鼠呼吸情况，平稳后拔除气管插管，术后给予抗生素预防感染，放入动物笼喂养.
1.2.3干细胞移植分别在模型制备成功后1d，1,2和4wk时，将1mL细胞悬液通过尾静脉注射到各不同干细胞移植组大鼠体内，对照组则在模型制作成功1d后注射1mL无血清DMEM 培养液.饲养4wk后，行左心功能测定.
1.2.4左心室功能测定30g/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（1.5mL/kg）大鼠，分离右侧颈总动脉，显微镜下插入内充肝素生理盐水的塑料管至左心室腔，用多道生理记录仪记录左心室收缩舒张压差（LVSEDP）和左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)以反映左心室收缩与舒张功能.所有电信号均用计算机软件分析处理.
1.2.5心肌缺血和梗死面积的测量〔5〕测定左心功能后，从左心室导管推注伊文氏蓝2mL，5min后迅速剪下心脏，冻存于-20℃.用心脏切片器垂直于心脏长轴切成1mm厚的薄片，置于含TTC的培养皿中，37℃孵育15min.用数码相机拍照并输入计算机.采用单盲法分别将伊文氏蓝染色区（蓝染，非缺血区）、TTC染色区（缺血但仍存活组织）以及非TTC染色区（苍白色，梗死心肌）用SigmaScan面积测算软件进行计算处理.缺血范围以每一心脏总梗死面积（INF）占总缺血面积的（AAR）的百分比表示.
统计学处理：试验数据用x±s表示；多组比较采用单因素方差分析，用LSDt检验做多重比较，所有数据均用SPSS软件处理,检验水准设为0.05（双侧）.。