AKTA蛋白纯化仪

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常用层析方法
凝胶过滤：根据分子大小和形状进行分离。分子量较 凝胶过滤 大的先出峰，小的后出峰。 离子交换色谱： 离子交换色谱：由于静电相互作用而使样品结合到凝 胶上，再采用盐浓度梯度或者更换缓冲液的PH值进 行洗脱。对于等电点小于5.0的酸性蛋白质，推荐使 用阴离子交换，对于等电点大于7.0的碱性蛋白质， 推荐使用阳离子交换。 疏水作用色谱： 疏水作用色谱：利用蛋白质、多肽在高盐存在下，可 以结合疏水凝胶，而在盐浓度降低时又可以解脱的原 理实现分离。 亲和层析色谱： 亲和层析色谱：利用蛋白质、多肽与某些配基的特异 性相互作用而进行分离。例如：酶-底物，酶-抑制剂， 糖蛋白-凝集素，抗原-抗体等。
快速蛋白液相色谱系统 AKTA FPLC(明道楼811)
林彦 2009.4.16
仪器组成
FRAC-920 fraction collector UPC-900 detector
P-920 pump
主要技术指标
全自动双泵系统，流速精度高，梯度重复性高，可完成 自动缓冲液配置。宽广的流速范围同时满足实验室研究及中试制备应 用。 ①流速范围：0.05-20mL/min（梯度） ②压力范围：0-5 MPa，50 bar, 725 psi ③压力传感器： 0-5Mpa, Offset error: < 0.05 Mpa, Scale error: < ±2% ④压力监控：由UNICORN 软件在线监控 ⑤梯度生成：高压梯度混合提高了分辨率，准确性和重复性，带压力 传感器和过压报警功能 ⑥梯度精度：reproducibility: < 1%B at 300 ±50 nl/min ⑦延迟体积：< 600 &micro;l/module
功能/应用范围 功能 应用范围Fra Baidu bibliotek
可以快速的检测、分离、纯化多种生 物样品（蛋白质、多糖、生物酸、生物碱 以及天然小分子等），能够有效地针对各 种样品：植物、动物、人类生物体，纯化、 分离特异性生物小分子。适合实验室摸索 等小规模生产。
基本原理
溶于流动相中的各组分经过固 定相时，由于与固定相发生作用 的大小、强弱不同，在固定相中 滞留时间不同，从而先后从固定 相中流出，进而达到分离的效果。
泵系统
UV检测器 UV检测器
①UV检测波长：254nm，280nm ②线性：254nm时高至2AU为小于3％，280nm时高至1AU为小于5％ ③基线调整：全范围0-100%可调 ④噪音：40 × 10-6 AU ⑤漂移：<100 × 10-4 AU
电导检测
①流动池死体积：200nL， ②电导范围：1 mS/cm to 999.9 mS/cm， ③精确性：0.1 mS/cm， ④重复性：Max. ±3% or ±15 mS/cm，