高效液相色谱检测技术及其研究现状
高效液相色谱研究进展
内容摘要
引言：硅胶基质高效液相色谱填料是一种以硅胶为基质的高效液相色谱填料。 它具有优良的理化性质和分离性能，已被广泛应用于生物医药、环境科学、食品 科学等领域。然而，目前硅胶基质高效液相色谱填料仍存在一些问题，如分离效 果不佳、使用寿命短等。这些问题限制了硅胶基质高效液相色谱填料的广泛应用。 因此，本次演示旨在研究一种新的硅胶基质高效液相色谱填料制备方法，以提高 其分离效果和使用寿命。
结论与展望
结论与展望
高效液相色谱法作为一种常用的分析方法，已经在各领域的研究中得到了广 泛的应用。虽然HPLC已经取得了很大的进展，但仍存在一些问题和局限性，如样 品前处理的复杂性、分析成本的较高以及难以对弱电性化合物进行分析等。因此， 未来的研究方向应包括改进样品前处理方法、降低分析成本、发展新型固定相和 检测器等。
结论与展望
此外，随着科技的不断发展，高效液相色谱与其他技术的联用已成为未来的 发展趋势。如将高效液相色谱与质谱（LC-MS）联用，可以实现复杂样品的高效 分离和准确鉴定。这种联用技术的不断发展将为科研人员提供更全面、更准确的 分析工具，从而更好地解决科学问题。
参考内容
内容摘要
摘要：高效液相色谱法是一种常用的分离和分析方法，具有高效、快速、灵 敏等特点。硅胶基质高效液相色谱填料因其具有优良的理化性质和分离性能，已 成为高效液相色谱领域的研究热点。然而，目前硅胶基质高效液相色谱填料仍存 在一些问题，如分离效果不佳、使用寿命短等。针对这些问题，本次演示提出了 一种新的基于硅胶基质的液相色谱填料制备方法，并通过实验验证了该方法的可 行性和优越性。
内容摘要
结论与展望：本次演示提出了一种新的基于硅胶基质的液相色谱填料制备方 法，并通过实验验证了该方法的可行性和优越性。实验结果表明，所提出的填料 具有更好的分离效果和更长的使用寿命，能够满足高效液相色谱仪的制备需求。 然而，目前该研究仍存在一些问题，如制备过程的优化、性能的进一步提升等， 需要未来进一步研究。
高效液相色谱技术的研究进展
高效液相色谱技术的研究进展高效液相色谱技术（High performance liquid chromatography, HPLC）是一种现代化的、高效的分离技术。
它利用分离样品中的化学成分的物理或化学属性，通过在流动相和固定相之间相互传递的过程中实现化学成分的分离。
近年来，高效液相色谱技术不断在技术细节、数据分析、纯化和检测灵敏度等方面得到了进一步的发展。
本文将从以下四个方面探讨高效液相色谱技术的研究进展：一、液相色谱柱的发展液相色谱柱是HPLC技术的核心部分，HPLC的分离效果和方法的可靠性很大程度上取决于色谱柱的品质。
因为使样品在流动相和固定相之间相互传递所需的时间取决于柱内的分离效果。
近年来，新技术和新材料的涌现使得液相色谱柱质量得到了显著的提高。
例如，阴离子交换柱有了更好的抗污染性，表面经处理的柱材料也能够更好地避免有机污染物的吸附。
二、柱外引道注射技术柱外引道注射技术是提高色谱分析速度、提高灵敏度以及降低流动相损耗的最重要的技术之一。
此技术是基于待分析物质的性质选择可以产生极高的浓度梯度的引道。
现在，多种柱外引道注射技术已被广泛的使用，如微量分析技术（MEMS）和尖峰式带型变形的色谱方法（systmic-sieve effect chromatograph），这两个技术都在注射控制的同步性方面做出了大量的工作。
最近，由微型气泡引导的无毒注射技术也被用于蛋白和DNA的定性分析。
三、离线（离线联机）联用技术联用有助于更有效、安全、高分辨率的分析。
离线联用就是离线上分离了化学组分，然后用在线方法来定性或定量分析化合物（当需要在线定量分析液相中的某些组分时则是在线联用）。
在离线联用的模型中，分离过的化合物必须被固定在收集器中，只有当样品收集完成时才可重新溶解。
虽然离线联用总体上是一种昂贵的技术，但是它在处理复杂的样品时可极大地提高精度，它还可在一定程度上避免流量下降或光度漂移等还是有很多缺陷的在线方法所出现的问题。
超高效液相色谱法在中药分析领域中的应用现状及展望
超高效液相色谱法在中药分析领域中的应用现状及展望一、本文概述随着科技的不断进步和人们对中药认识的深入，中药分析领域正面临着前所未有的发展机遇。
超高效液相色谱法（UPLC）作为一种先进的色谱分析技术，以其高分辨率、高灵敏度、高分离效能和快速分析等特点，在中药分析领域中的应用日益广泛。
本文旨在综述超高效液相色谱法在中药分析领域的应用现状，探讨其发展前景，为中药的现代化和国际化提供技术支持。
本文将首先介绍超高效液相色谱法的基本原理和优势，阐述其在中药成分分析、质量控制、药物代谢等方面的应用案例。
然后，我们将重点分析超高效液相色谱法在中药分析领域中的优势和挑战，包括其对于复杂中药体系的处理能力、对于痕量成分的检测能力以及在实际应用中可能遇到的问题。
我们将展望超高效液相色谱法在中药分析领域的未来发展，包括技术创新、方法优化、多技术联用等方面，以期推动中药分析技术的不断进步和发展。
二、超高效液相色谱法在中药分析领域的应用现状超高效液相色谱法（UPLC）作为一种先进的色谱分析技术，近年来在中药分析领域得到了广泛应用。
其高效的分离能力和高灵敏度，使得UPLC成为中药复杂成分分析的有力工具。
在中药指纹图谱的构建中，UPLC发挥了关键作用。
通过优化色谱条件和选择适当的检测器，UPLC能够实现对中药中多种成分的快速、准确分离和检测。
这不仅有助于中药质量控制，还可以为中药的药效物质基础研究和质量控制提供科学依据。
UPLC在中药有效成分的分析中也表现出色。
通过精确测量中药中有效成分的保留时间和峰面积，可以实现对中药中有效成分的定量分析。
这为中药的质量评价、药效研究以及新药开发提供了有力支持。
同时，UPLC在中药代谢产物的分析中也有着重要应用。
通过分析中药在体内的代谢产物，可以深入了解中药的药效机制和药代动力学过程。
这对于中药的临床应用和新药研发具有重要意义。
然而，尽管UPLC在中药分析领域的应用取得了显著进展，但仍面临一些挑战。
高性能液相色谱技术的进展和应用前景
高性能液相色谱技术的进展和应用前景随着科学技术的不断发展，高性能液相色谱技术（HPLC）已逐渐成为化学领域中应用最广泛的分离和分析技术之一。
在过去的几十年里，HPLC技术经历了数次重要的发展和突破，为科学家们提供了更多的分析能力和研究工具。
首先，近年来HPLC技术在分析领域取得了显著的进展。
传统的色谱技术往往只能进行样品的基本分离，而HPLC技术可以实现高效率、高灵敏度的定量和定性分析。
通过使用高分辨率、高效能的填料材料，HPLC可以在较短的时间内分离许多复杂的混合物，同时提供更高的分离效率和分析速度。
这使得科学家们可以更快地获取准确的结果，并且可以在更短的时间内完成更多的分析任务。
其次，HPLC技术在生物医学领域的应用前景也十分广阔。
随着生物技术和药物研发的快速发展，对于药物和生物样品的高效分析和纯化变得越来越重要。
HPLC技术可以实现对生物样品的高效、高灵敏度的分析，提供更准确的检测和评估结果。
例如，在药物研发中，HPLC技术可以用于分析药物的纯度、溶解度和稳定性，以及评估药物的代谢和药效学特性。
此外，HPLC技术还可以应用于生物样品的分离和纯化，包括对蛋白质、多肽和核酸等生物大分子的高效分离。
此外，HPLC技术在环境监测和食品安全领域的应用也是其重要的应用方向之一。
随着环境污染和食品质量安全问题的日益严重，对于环境中有害物质和食品中农药、重金属等残留物的检测需求越来越高。
HPLC技术可以实现对于环境和食品中微量有害物质的高灵敏度和高选择性的分析，提供准确可靠的数据支持。
例如，HPLC技术可以用于监测水体中的有机物和无机物污染物，以及食品中的农药残留和毒素。
此外，HPLC技术还可以与其他分析技术相结合，形成更强大的分析平台。
例如，与质谱联用技术（LC-MS）相结合，可以实现对复杂样品的高灵敏度分析和物质结构的鉴定。
与核磁共振技术（NMR）相结合，可以实现对溶液中化合物结构的直接研究。
这些技术的相互结合和发展，将进一步扩展HPLC技术在不同领域的应用范围，并提供更多的分析和研究工具。
高效液相色谱分析技术的改进与应用研究
高效液相色谱分析技术的改进与应用研究近年来，高效液相色谱（HPLC）分析技术在科学研究和工业应用中得到广泛应用。
本文将讨论该技术的改进与应用研究，重点关注高效液相色谱在物质分析中的优势和近年来的技术改进。
本文还将介绍一些与HPLC相关的应用领域，并探讨未来该技术的发展方向。
一、高效液相色谱分析技术的基本原理高效液相色谱是一种将待测物质通过溶液态流动相进行分离和分析的技术。
它采用固定填充物作为固定相，通过调整流动相的组成和流速，实现对待测物质的分离和定量分析。
高效液相色谱分析技术相比传统的色谱分析方法具有以下优势：1. 分离效果好：高效液相色谱能够实现对复杂混合物中各组分的高效分离，提高分析的准确性和灵敏度。
2. 分析速度快：通过改进仪器设备和优化分析参数，高效液相色谱分析速度得到了大幅提升，可以在较短的时间内完成大量样品的分析。
3. 分析范围广：高效液相色谱分析技术在生物学、医药、环境科学等领域都有广泛的应用，可以分析各种有机化合物、生物大分子、药物等。
二、高效液相色谱分析技术的改进随着科技的发展，高效液相色谱分析技术也在不断改进和创新。
以下是近年来的主要改进方向：1. 填料材料的改进：填充物是高效液相色谱分析技术中的核心组成部分，影响着分析的分离效果和分析速度。
近年来，研究人员通过开发新的填料材料，如亲水液相、离子液相、超临界液相等，改善了色谱柱的分离性能。
2. 液相流动性的改进：流动相是高效液相色谱分析过程中的另一个关键因素。
研究人员通过优化流动相的组成和流速，提高了分析速度和分离效果。
同时，引入微流控技术，实现对流动相的精确控制，进一步提高了分析的准确性和稳定性。
3. 检测器技术的改进：高效液相色谱分析的结果主要依靠检测器进行信号检测和分析。
随着科学仪器技术的进步，各种新型检测器不断涌现，如光电二极管阵列检测器、质谱联用技术等，大幅提高了分析的分辨率和灵敏度。
三、高效液相色谱分析技术的应用研究高效液相色谱分析技术在各个领域都有广泛的应用。
2024年高效液相色谱仪市场发展现状
2024年高效液相色谱仪市场发展现状1. 背景介绍高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分析仪器，广泛应用于制药、食品、环境监测、化学分析等领域。
它通过溶液在液相载体中的流动和分配行为，将样品中的化学组分分离并测量。
随着科学技术的不断进步，高效液相色谱仪在精准分析、高效率分离、自动化程度等方面有着显著优势。
2. 市场规模及发展趋势据市场调研机构的统计数据显示，高效液相色谱仪市场在过去几年中保持着稳定增长的态势。
2019年，全球高效液相色谱仪市场规模达到了X亿元。
预计到2025年，市场规模将增长至Y亿元，年复合增长率为Z%。
这一数据显示，高效液相色谱仪市场有着巨大的增长潜力。
3. 市场驱动因素高效液相色谱仪市场的快速发展受到多个因素的驱动：3.1 技术进步随着科技的进步和仪器制造技术的创新，高效液相色谱仪的分析性能不断提高。
新型的液相色谱柱、检测器、色谱柱包装材料等的研发和应用，使得高效液相色谱仪具备更高的分辨力、更低的检测限、更快的分析速度等优势，满足了用户对分析仪器的需求。
3.2 市场需求在制药、食品安全、环境监测等领域，对于化学成分的准确检测和分析要求日益严格。
高效液相色谱仪作为一种可靠、灵敏、广泛适用的分析仪器，能够满足这些行业的分析需求，并且具备自动化、高通量分析的能力，大大提高了生产效率。
3.3 法规要求许多行业需要遵守严格的法规和标准，以确保产品质量和安全性。
高效液相色谱仪因其准确性和可靠性被广泛应用于质量控制、药物监测、食品检测等领域，成为行业标准。
4. 市场竞争格局目前，高效液相色谱仪市场竞争激烈，主要厂商包括Agilent Technologies、Waters、Shimadzu Corporation等。
这些厂商在技术研发、产品质量、服务支持等方面具备竞争优势。
此外，市场还存在一些新兴企业，它们通过研发创新产品和提供个性化解决方案来增强竞争力。
高效液相色谱分析法在各领域的应用及发展前景
高效液相色谱分析法在各领域的应用及发展前景摘要：高效液相色谱分析是一种高效、快速、准确的分离分析方法，在石油化工、生命科学、环境、医药及食品安全等领域有着广泛的应用。
本文旨在简要介绍液相色谱分析法在不同领域的应用情况，并从使用频度、应用范围、检测效率、检测准确度及在本领域分析方法中的重要性等角度进行阐述。
关键词：高效液相色谱仪；石油化工；食品安全中图分类号： O657.7+2 文献标识码：A高效液相色谱在20世纪70年代获得迅猛的发展，是一种常规的分离技术色品分析仪的应用最广是在化学领域上，食品与环境的领域上也出现多方面的应用。
其中，化合物的分析就包括高分子化合物，离子型化合物，热不稳定化合物以及生活性的化合物等都可以用不同的方式进行离子交换色谱和离子色谱，体积排除法，亲和色谱法等，进行离子分析。
一、高液相色谱分析仪发展现状随着高效液相色谱分析仪的转换，高效液相色谱仪器成为国际分析化学界发展较快的学科，高效液相色谱是由液相系统组成，分别是检测器，色谱柱，记录仪等三个方面的部分组成，为了取得更好的效果，科研工作者需要提升准确度以及精确度和灵敏度显示科研工作的重要性。
经常采用薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(OC)进行含量测定，而液相色谱法(LC)只是用于对组分标样的测定和分离的可能性研究。
色谱法是一种分类和混合的开发技术，是在1913年由俄国植物学家在实验中发现并且命名的技术，将植物的叶色素和石油醚，通过装有白色的碳酸钠颗粒的玻璃管，再用石油醚进行全面的冲洗，玻璃管的内壁出现不同颜色的色带，随着冲洗剂的不断转变，色带以不同的颜色进行冲洗，不同的色带以不同的速度向下移动并且分离，色谱法由此得名。
二、色谱分析仪的使用及工作原理色谱柱通称为不锈钢柱，内装填充剂，常用的是硅胶作为填料，用于正相色谱，化学键固定相，根据色谱化学键的固定相，可以用来作为反相或者是反高的要求。
输液系统要为 HPLC仪器提供流量恒定、准确、无脉冲的流动相，同时还要提供精度好、准确度高的多元溶剂梯度。
高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新
高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新概述高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种重要的分离与检测技术，已经在广泛的科学领域中得到了广泛的应用。
本文将对高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新进行综述，并探讨其在不同领域中的应用。
一、高效液相色谱的基本原理高效液相色谱是以液相作为固定相的分离技术。
其基本原理是将样品溶解在流动相中，通过与固定相之间的相互作用来实现样品的分离。
高效液相色谱的固定相种类繁多，不同种类的固定相可以实现对不同性质样品的选择性分离。
二、高效液相色谱的发展与创新1. 色谱柱技术的发展：随着材料科学与合成化学的不断进步，新型的色谱柱材料如亲水性、疏水性、离子交换、手性等材料相继出现。
这些材料可以提供更高的分离效率和选择性。
2. 检测器技术的创新：传统的高效液相色谱检测器主要有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
随着科学技术的发展，新型的检测器如质量分析检测器（Mass Spectrometry, MS）和电喷雾检测器（Electrospray Ionization, ESI）等被引入到高效液相色谱中，提高了检测灵敏度和选择性。
3. 色谱分离模式的创新：除了传统的反相色谱分离模式，还出现了离子交换色谱、手性色谱、亲水色谱等新的分离模式。
这些分离模式可以对特定问题提供更好的解决方案。
三、高效液相色谱在不同领域中的应用1. 制药工业：高效液相色谱在制药工业中起着至关重要的作用。
它可以用于药物分析、药物代谢物分析和质量控制，以确保药物的质量和安全性。
2. 环境监测：高效液相色谱在环境监测领域中广泛应用，例如水质监测、土壤污染分析和空气污染物检测等。
它可以快速、准确地测定各种环境污染物。
3. 农业食品安全：高效液相色谱在农业食品安全领域中也发挥着重要作用。
它可以用于农药残留分析、食品添加剂检测和农产品质量控制等方面。
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吉林农业大学植物化学技术进展课程论文题目名称: 高效液相色谱检测技术及其研究现状学生姓名：黄磊院系：食品科学与工程学院专业年级： 2016级农产品加工及贮藏工程指导教师：张晶职称：教授2016年 12 月 18 日高效液相色谱检测技术及其研究现状黄磊(吉林农业大学，吉林省，长春市，邮编2888号)摘要：高效液相色谱具有高选择性、准确的特点，使用起来简洁方便。
本文主要介绍了高效液相色谱的使用原理，使用方法，应用范围以及研究进展。
关键词：高效液相色谱；应用范围；研究进展High performance liquid chromatography and its research statusHuang Lei(Jilin Agricultural University, Jilin Province, Changchun City, zip code No. 2888)Abstract:high performance liquid chromatography (HPLC) has high selectivity and accuracy. This paper mainly introduces the principle, usage, application scope and research progress of HPLC.Key words: high performance liquid chromatography; application scope; research progress高效液相色谱(Highperformanceliquidchromatography,HPLC)也叫高压液相色,是在经典液相色谱法和气相色谱法的基础上发展起来的新型分离分析技术。
鉴于其简便、快速、灵敏、准确的特点,至今,已在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测、石油化工等领域获得广泛的应用。
1.基本理论人们对色谱基础理论进行不懈的研究,提出了众多的理论。
其中比较著名的有: 1.塔板理论。
在1941年由Martin和Synge[1]提出,该理论将色谱过程比拟为蒸馏过程,把色谱柱看成是由一系列平衡单元—理论塔板所组成。
在每一个塔板高度内,组分在流动相和固定相之间的分配平衡能瞬间达成;2平衡色谱理论。
在1940年由Wilson[2]提出,该理论认为在整个色谱过程中,组分在流动相和固定相之间的分配平衡能瞬间达成; 3.双膜理论。
Funk[3]等人把流动相和固定相看成是两块相互紧密接触的平面薄膜,整个传质阻力为流动相膜的传质阻力和固定相膜的传质阻力所构成,组分在界面接触处达到分配平衡。
4.速率理论。
该理论认为组分在流动相和固定相之间有限的传质速率是影响色谱区域谱带扩张的主要因素,而轴向扩散的影响可以忽略;5.纵向扩散理论。
由Amundson[4]等人通过大量实验提出,该理论认为在色谱过程中,组分在流动相的轴向扩散是影响色谱区域谱带扩张的主要因素,而有限的传质速率对区域谱带扩张没有影响;制备分离的色谱模型和分析分离的模型相似,但在具体操作中两者的指导思想却有着本质的不同。
在制备分离中,人们总是希望在尽可能短的时间里得到尽可能多的纯组分。
欲得到负载必须以分离效果为代价,即在保持最低分辨率的前提下,使柱子超载以得到最大的物料通过量。
而分析分离中在最短时间里得到最大的分离效率则是人们希望得到的[5]。
制备分离选择的是高柱效、高柱容量的色谱柱,而且使色谱柱在超载状态下工作。
所谓超载,通常将理论塔板数下降10%时柱容量[6]。
较为理想的制备条件的选择包括上柱量,容量因子,选择性以及柱效[7]。
2. HPLC影响因素的选择2.1 固定相的选择液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相(或在惰性载体表面涂上一层液膜)、离子交换树脂或多孔性凝胶。
固定相的选择应符合:颗粒细且均匀;传质快;机械强度高,能耐高压;化学稳定性好,不与流动相发生化学反应。
固定相以承受高压能力来分类,可分为刚性固体和硬胶两类[8]。
刚性固体以二氧化硅为基质,可承受7.0× 108 Pa～ 1.0× 109 Pa的高压,可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。
如果在二氧化硅表面键合各种官能团,可扩大应用范围,它是目前最广泛使用的一种固定相。
硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中,它由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。
可承受压力上限为3.5×108 Pa。
固定相按孔隙深度分类,可分为表面多孔型和全多孔型固定相。
表面多孔型固定相的多孔层厚度小、孔浅,相对死体积小,出峰迅速、柱效亦高;颗粒较大,渗透性好,装柱容易,梯度淋洗时能迅速达到平衡,适合进行常规分析,但由于多孔层厚度薄,最大允许量受到限制。
全多孔型固定相由直径为10 nm的硅胶微粒凝聚而成。
由于颗粒很细(5～ 10μm),孔仍然较浅,传质速率快,易实现高效、高速。
适合复杂混合物分离及痕量分析。
2.2 流动相在液相色谱中,当固定相选定时,流动相的种类、配比能显著地影响分离效果[9],因此流动相的选择非常重要。
2.2.1 流动相的性质要求第一、在选择流动相时,一般采用色谱纯试剂,必要时需进一步纯化,以除去有干扰的杂质。
因为在色谱柱整个试用期间,流过色谱柱的溶剂是大量的,如溶剂不纯,则长期积累杂质而导致检测器噪声增加[10]。
第二、流动相应不改变填料的任何性质。
低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。
碱性流动相不能用于硅胶柱系统。
酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统[11]。
第三、流动相必须与检测器匹配。
使用UV检测器时,所用流动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。
当使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。
第四、流动相粘度要低(应< 2 cp)。
高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质,降低柱效,还会使柱压降增加,使分离时间延长。
最好选择沸点在100℃以下的流动相[12-15]。
第五、流动相对样品的溶解度要适宜。
如果溶解度欠佳,样品会在柱头沉淀,不但影响了纯化分离,且会使柱子恶化。
2.2.2 流动相的pH采用反相色谱法分离弱酸(3≤ pKa≤ 7)或弱碱(7≤ pKa≤ 8)样品时,通过调节流动相的pH,来抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形。
分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol L磷酸盐缓冲液和30 mmol L三乙胺溶液。
流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用,减轻或消除峰拖尾现象。
2.2.3 流动相的选择正相色谱的流动相通常采用低极性溶剂如正己烷、苯、氯仿等加适量极性调整剂,如醚、酯、酮、醇和酸等。
反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂,如甲醇、乙腈、二氧六环、四氢呋喃等。
极性调整剂的性质及其所占比例对溶质的保留值和分离选择性有显著影响。
一般情况下,甲醇-水系统已能满足多数样品的分离要求,且流动相粘度小、价格低,是反相色谱最常用的流动相。
但与甲醇相比,乙腈的溶剂强度较高且粘度较小,并可满足在紫外185～ 205 nm处检测的要求,因此,乙腈-水系统要优于甲醇-水系统。
2.3 柱温的选择柱温是最重要的色谱操作条件,它直接影响色谱柱的选择性、色谱峰区域展宽和分析速度。
柱温不能高于固定相的最高使用温度,否则会造成固定相的大量挥发流失;柱温也不能低于固定相的熔点,以免影响其分配作用提高柱温,柱温的选择,要依据具体情况而定:若分离是关键,则应采用较低的柱温;若主要研究的是分析速度,则应采用较高的柱温;若既要获得较高的分离度,又要缩短分析时间,一般采用较低的柱温与较低的固定液配比相配合的方法。
液相色谱中,一般在室温条件下进行分离分析,适当提高柱温有利于改善传质和提高分析速度。
2.4 监测器的选择检测器是液相色谱仪的关键部件之一。
一个理想的检测器应具有灵敏度高、重复性好、响应块、线性范围宽、适用范围广、对流动相温度和流量的变化不敏感、死体积小等特点。
在液相色谱中,有两种类型的监测器,一类是溶质性监测器,如紫外、荧光、电化学检测器等,它仅对被分离组分的物理或物理化学特性有响应。
紫外检测器具有很高的灵敏度,即使是那些对紫外光吸收较弱的物质也可用来检测。
此外紫外检测器对温度和流速不敏感,可用于梯度洗提,但不适用于对紫外光完全不吸收的试样。
荧光检测器比紫外光检测器的灵敏度要高2个数量级,许多物质,特别是具有对称共轭结构的有机芳环分子受紫外光激发后,能辐射出比紫外光波长较长的荧光,例如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物等,许多生化物质包括某些代谢产物、药物、氨基酸、胺类、甾族化合物都可用荧光检测器检测[16]。
另一类是总体监测器,如示差折光检测器,它对试样和洗脱液总的物理和化学性质响应。
几乎每种物质都有各自不同的折射率,因此都可用差示折光检测器来检测,它是一种通用型的浓度检测器,但是对温度变化很敏感,不能用于梯度洗脱。
3.HPLC的研究现状3.1HPLC在食品农药、兽药残留的检测李海飞等运用HPLC柱后衍生荧光检测法,测定苹果、梨、桃、葡萄、香蕉和芒果等水果样品中涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、三羟基克百威、涕灭威、克百威和甲萘威7种氨基甲酸酯类农药的残留量,结果7种农药3种不同浓度平均添加回收率在72.5%～ 116.2%,最低检出限为0.003 7～0.007 4mg/kg[17]。
陈辉华等建立了同时检测水产品中四环素类和氟喹诺酮类兽药多残留的HPLC法。
样品经固相萃取小柱净化,以甲醇-丙二酸+氯化镁水溶液梯度洗脱,紫外检测器检测。
对样品前处理和色谱分析条件进行了优化,8种抗生素(土霉素、四环素、金霉素、沙拉沙星、恩诺沙星、达氟沙星、环丙沙星、单诺沙星)在0.1～ 10.0mg/L范围内与峰面积线性关系良好,最低检出限(S/N= 3)为0.011～0.051mg/kg,定量下限(S/N= 10)为0.035～ 0.170mg/kg,平均加标回收率为81.0%～ 96.0%[18]。
此外,西维因、多菌灵和狄氏剂等150多种农药都可以用HPLC法进行分离或分析,在啤酒中时有发现的致癌性很强的亚硝胺类化合物,利用Warters公司开发的SppakSilica小柱净化、浓缩样品、反相色谱法也能快速、准确地检测[19]。
3.2HPLC在环境监测中的应用张梅凤[20]应用高效液相色谱技术对生物样品农药残留进行了分析研究。
色谱条件:色谱柱:416x25mmC18柱,柱温:30,C,流动相:乙腊:水(35:65),流速Zloml/min,检测器:紫外检测器,灵敏度0101AUFS,根据各组分设定合适的波长时间程序.称取5109试样于soml离心管中,加入苯loml,无水硫酸钠6g,匀浆3min。