不同提取方法对人参皂苷收率的影响_信小娟
不同方法对人参皂苷Re提取效果的影响_孙雨薇
中 图 分 类 号 ：TS201.1
文 献 标 识 码 ：B
文 章 编 号：1002-0306（2014）14-0301-04
doi：10.13386/j.issn1002-0306.2014.14.058
西洋参（Panax quinquefolium L.）系五加科人参 属多年生草本植物。我国自20世纪80年代大面积成 功引种西洋参以来，已发展成为继美国、加拿大后世 界第三大西洋参生产国和世界第一大消费国。西洋 参味苦，性凉，入心、肺、肾经，功能以补益为主，可滋 阴降火、益气生津[1]。药理研究表明，西洋参生药活性 成分为皂苷类成分[2]，为主要次生代谢产物，按其皂 苷元的不同分为：达玛烷型四环三萜类皂苷、齐墩果 酸型五环三萜皂苷、奥克梯隆型皂苷及其他类型皂 苷，目前为止，从西洋参中已发现60多种人参皂苷[3]。
Abstract：In this experiment，six conventional methods were used to extract panax quinquefolium saponin from
leaves，and HPLC-UV method was used to detect the content of six kinds of method for extracting monomer
目前，国内外对西洋参根中人参皂苷含量及生 理活性的研究很多[4-10]，但对西洋参叶中皂苷含量及 提取方法的研究甚少。本文采用六种不同的常规提 取方法提取西洋参叶中的皂苷成分，并利用HPLC-UV 法测定六种提取方法下单体皂苷Re的含量，系统考 察不同提取方法提取西洋参叶皂苷效果的差异，从 而确定最佳西洋参叶中皂苷的提取方法，为西洋参
表1 梯度洗脱程序 Table 1 The program of gradient elution
人参蛋白质不同提取方法及含量的比较
人参蛋白质不同提取方法及含量的比较
任雨贺;刘淑莹;万茜淋
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2018(046)011
【摘要】[目的]优选人参蛋白质提取的最佳方法,并比较不同生长年份对人参蛋白质含量的影响.[方法]比较丙酮沉淀法、聚乙二醇6000沉淀法、聚乙二醇20000沉淀法、酚提取法、Trizol提取法5种人参蛋白质的提取方法,及不同生长年份的人参蛋白质,采用Bradford方法测定蛋白质含量,SDS-PAGE电泳鉴定蛋白.[结果]丙酮提取法得到的蛋白质纯度最高,电泳条带最清晰完整,且人参蛋白质的含量随生长年份增加而升高.[结论]丙酮沉淀法是一种较好的适用于人参蛋白质提取的方法,5年生人参蛋白质含量最高.
【总页数】4页(P1-3,9)
【作者】任雨贺;刘淑莹;万茜淋
【作者单位】长春中医药大学,吉林省人参科学研究院,吉林长春130117;长春中医药大学,吉林省人参科学研究院,吉林长春130117;中国科学院长春应用化学研究所,吉林长春130022;长春中医药大学,吉林省人参科学研究院,吉林长春130117【正文语种】中文
【中图分类】S-3
【相关文献】
1.不同产地人参中8种人参单体皂苷含量比较 [J], 林红梅;张永刚;李岳桦;韩忠明;杨利民
2.不同提取方法对西洋参中人参皂苷含量的影响 [J], 焉石;王英平;许世泉;刘继永;王艳艳
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人参皂苷常规水提取法和新提取方法的比较研究
(7199% )大高于常规水提取法 ( 6108% ) ,有极显著
差异 ( P < 01001) 。 (2)从单体皂苷收率角度看 ,与常规水提法相
比 ,碱水提取法有大幅度的提高 ,经 t检验证明有极
显著差异 , 其中人参 皂苷 2Rb1、2Rb2 、2Rc、2Rd、2Re、 2Rg1增幅较大 ,均约为 2%以上 。综上可以看出碱 水提取法均优于常规水提取法 。
关键词 人参皂苷 ;提取 ;新方法 中图分类号 : R28411 文献标识码 : A 文章编号 : ห้องสมุดไป่ตู้00124454 (2006) 1021040203
人 参 为 五 加 科 植 物 人 参 Panax g inseng C1A1M ey的干燥根 。其主要活性成分为人参皂苷 ( ginsenoside) ,目前为止已分得的单体皂苷有 40多 种 ,其中主要为人参皂苷 Ra1 、Ra2 、Ra3 、Rb1 、Rb2 、 Rb3 、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1 、Rg2、Rg3 、Rh1 等 。人参须 根中人参皂苷以 Rb1 、Rc、Rd和 Re居多 ,含量约占 8%左右 。人参总皂苷提取方法较多 ,如浸渍法 、回 流提取法 、超声波提取法 、超临界萃取法和微波法 等〔1〕,其中超声波法提取时间短 、收率高 、温度低 , 是目前应用较广泛的方法 。提取所用溶剂有水 、甲 醇 、乙醇和正丁醇等 ,目前多以甲醇 、乙醇为主〔2〕, 但甲醇对各种物质都有较高的溶解度 ,使得提取液 中杂质较多 ,特别是脂溶性色素较多 ,导致所制备的 总皂苷纯度低 ,外观颜色深 ,而且甲醇和乙醇等中等 级性的溶剂对丙二酰基系列的人参皂苷 (极性较 大 )的提取率较低 ,用两者作溶剂 ,因会损失一部分 皂苷 (丙二酰基类皂苷 )而使总皂苷产率降低 。用 水作溶剂 ,丙二酰基类皂苷可以充分提取 ,但水溶性 杂质较多 ,而且难于过滤 ,易发霉变质 。为了解决以
人参皂苷提取工艺的研究
人参皂苷提取工艺的研究【摘要】为提高人参皂苷的提取率和纯度，本文以人参皂苷re和rb1为指标，比较了回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法3种不同方法提取人参皂苷的优劣。
结果表明：回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷re提取率分别为83.38％、90.23％、96.78％；人参皂苷rb1提取率分别为73.34％、80.11％、90.71％。
综合分析，说明湿法粉碎提取法艺效果最佳，超声水提法次之，回流提取法效果最差。
本研究为工业化提取人参皂苷提供了新途径。
【关键词】人参皂苷re、rb1；回流提取法；超声水提法；湿法粉碎提取法人参为五加科植物人参(panaxginsengc.a.mey)的干燥根，别名山参、鬼盖、棒槌、土精、神草、棒槌等。
是多年生草本植物，喜阴凉、湿润的气候。
人参被人们称为“百草之王”，是闻名遐迩的“东北三宝”之一，历来是我国中医的名贵药材。
味甘、微苦、微温，可补气、生津安神、增强免疫力。
其主要活性成分为人参皂苷，目前为止共分离出30余种，其中主要为人参皂苷ra1、ra2、ra3、rb1、rb2、rb3、rc、rd、re、rf、rgl、rg2、rg3、rhl等。
人参皂苷提取方法较多，如浸渍法［1］、回流提取法［2］、超声波提取法［3-4］、醇-吸附树脂法［5］和微波法［6］等。
本文对回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法进行了比较。
1实验材料与仪器日本岛津lc-2010aht型高效液相色谱仪；天孚牌电子计数天平由金羊天平仪器公司生产；3l超声波提取器(上海超声波仪器厂)；高速组织捣碎机(上海标本模型厂)；101-3c型烘箱(上海实验仪器厂)；人参购于吉林市药材站；人参皂苷re和人参皂苷rb1标准对照由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。
2实验方法2．1人参皂苷的提取方法2．1．1超声水提法参照文献［7］的方法，称取人参粉末40g，加定量水浸泡过夜，常温超声提取3次，超声时间每次40min，抽滤，合并滤液，上d101大孔吸附树脂柱，去除杂质，水洗脱至流出液为无色，再用80％乙醇洗脱至洗脱液tlc检查无皂苷反应为止，乙醇洗脱液减压回收至干，残渣即为人参皂苷粗品，定容至200ml量瓶中，摇匀备用。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
人参皂苷的提取分离方法研究进展作者：杨雨等来源：《江苏农业科学》2014年第05期摘要：人参皂苷是人参中的主要有效成分之一，具有多种重要的药理活性，目前已成为一些特效药的主要成分。
人参皂苷的有效提取分离是其进一步研究和利用的关键前提，科学高效地提取分离人参皂苷是当前人参研究面临的一个重要课题。
本文综述了国内外人参皂苷提取分离方法的研究进展，包括经典的传统提取分离方法和近代发展起来的提取分离方法，以期为人参皂苷的提取与分离提供参考。
关键词：人参皂苷；提取；分离；研究进展中图分类号： R914；R284.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）05-0214-04人参（Panax ginseng C. A. Meyer）是五加科人参属多年生草本植物，为传统名贵中药，具有补气生血、扶正祛邪等功效。
人参皂苷是人参的主要有效成分之一，约占人参总质量的4%，具有增强人体免疫、抗衰老、抗疲劳、治疗心血管疾病等作用，目前已成为一些特效药的主要成分。
要实现人参中人参皂苷的高效提取浓缩，并且尽可能地去除无效杂质以纯化制剂，提取分离技术至关重要。
本文对已报道的人参皂苷的提取分离方法进行综述，以期为人参皂苷的提取与分离提供参考。
1人参皂苷的提取方法1.1传统的提取方法1.1.1煎煮法煎煮法主要是以水作为提取溶剂，将药物加热煮沸一定的时间而得到煎煮液，需要重复进行多次，主要用来提取中草药中水溶性较好的组分，适用于有效成分能溶于水且对加热不敏感的药材，是中草药组分提取中最早最常用的提取方法之一。
陈阿丽等以人参皂苷Rb1、Re、Rg1的提取率为考察指标，采用正交试验法优选人参的煎煮提取条件，结果表明：以人参质量8倍量的水煎煮2次，每次1h的提取方法，人参皂苷提取率最高[1]。
1.1.2浸渍法浸渍法是在常温或加热的条件下，依照相似相溶原理，用溶剂浸泡药材而使药材中的有效成分浸出，达到提取的目的。
张春红等采用提取温度60 ℃、浸提时间2 h、溶剂量为浸提物10倍量的浸渍法提取人参皂苷，总皂苷的最高得率达8.33%[2]。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
四、未来研究方向和发展趋势探 讨
1、展望人参皂苷提取分离的前 景
随着科学技术的发展，未来人参皂苷的提取分离将更加注重环保、高效、节能 等方面的研究。新型的提取技术和分离方法将不断涌现，进一步提高人参皂苷 的提取效率和分离纯度。
2、探讨新的提取方法和分离技 术
未来研究将致力于开发新型的提取技术和分离方法，如超临界流体萃取、分子 蒸馏技术等，以实现人参皂苷的高效、环保、节能提取分离。此外，联合使用 多种分离技术也将成为未来的一个研究方向。
三、现有研究方法的优缺点分析
1、现有提取方法的优点和不足
现有的提取方法如溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法和酶辅助 提取法等，能够不同程度地提高人参皂苷的提取效率。但这些方法仍存在一定 的局限性，如提取效率不高、有机溶剂使用量大、设备成本较高等。
2、分析分离技术的优缺点
高速逆流色谱、高效液相色谱和分子排阻色谱等分离技术都能够实现人参皂苷 的高效分离。但这些技术也存在一定的优缺点，如分离效率、分辨率、制备能 力、使用流动相的数量和纯度等因素的影响。
引言
人参皂苷是一种由人参中提取的天然化合物，具有广泛的药理作用和生物活性。 随着人们对人参皂苷药理作用的不断发现，其提取分离方法也成为了研究的热 点。本次演示将对近年来人参皂苷的提取分离方法进行综述，旨在为相关研究 提供参考和借鉴。
提取分离方法的研究进展
传统方法
传统的人参皂苷提取分离方法主要包括溶剂萃取、沉淀、柱色谱等。这些方法 操作简单，适用于大规模生产，但分离效率较低，纯度不高，且有机溶剂的使 用对环境造成了污染。
3、人参皂苷的分离和制备技术
分离和制备是人参皂苷提取过程中的重要环节。常见的分离技术包括高速逆流 色谱、高效液相色谱、分子排阻色谱等。高速逆流色谱具有高的分离效率和制 备能力，但需要使用大量的流动相。高效液相色谱具有高分辨率和分离速度， 但样品制备过程较为繁琐。分子排阻色谱能够根据分子大小分离化合物，但不 适用于极性较强的人参皂苷分离。
用不同提取法提取人参中有效成分的效果对比
用不同提取法提取人参中有效成分的效果对比
谢薇;刘广超
【期刊名称】《当代医药论丛》
【年(卷),期】2014(000)019
【摘要】目的：对比分析用不同提取法提取人参中有效成分的效果。
方法：用湿
法粉碎提取法、超声提取法和加热回流提取法分别提取人参中人参多糖和人参皂苷，并对提取结果进行对比。
结果：与用超声提取法和加热回流提取法相比，用湿法粉碎提取法提取人参中有效成分的时间大大缩短，人参多糖的提取率较高。
结论：用湿法粉碎提取法提取人参的有效成分操作简便，用时较短，此法可用于人参有效成分的提取。
【总页数】2页(P141-141,142)
【作者】谢薇;刘广超
【作者单位】河南中医学院第一附属医院药学部河南郑州 450008;河南中医学院第一附属医院药学部河南郑州 450008
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.川芎中有效成分的不同提取法方法及评价 [J], 葛莉;王小荣
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治昊;杨德俊
3.磁珠提取法和离心柱提取法在实时荧光定量聚合酶链反应中幽门螺杆菌核酸提取效果的对比研究 [J], 彭贤慧;周丽雅;何利华;宋志强;张建中
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不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究
时间 ( h) T ime ( h)
1
0. 5
24
6
表 1 不同提取方法的比较结果 Compareofdifferentextractfonmethod
溶剂 Solven t
温度 (e) T emper atu re (e)
浸膏含量
同法纯化后
皂苷含量( % )
皂苷颜色
(%)
S apon inscon tent
称 取 人 参 须 根 粗 粉 5. 00g, 放 入 150mL 三 角 瓶 中, 分 别 用 50% 的 乙 醇 60mL 、50mL、40mL 于微波炉中低火提取 8 分( 中火, 中高火, 高火易沸腾溢出三角 瓶) , 用抽滤漏斗过滤, 合并滤液, 回收乙醇 蒸干, 用水溶 解, 将 水溶液分 成 3 份, 1/ 3 用正丁醇萃取法纯化后进行含量测定, 1/ 3 用大孔树脂纯化后进 行含量测定, 另 1/ 3 进行浸膏量测定。 1. 2. 5 超声波提取法
Ext ract ion
S ap oni ns
(%)
color
content 萃取法 大孔树脂法 (%)
水
20
淡黄色粉末
37
8. 68
8. 23
H2O
L ightyellow
pow d er
50% 乙醇
70
棕红色块状
25
7. 40
7. 30
50% Ethanol
Palm red
pi eces hap e
提取液纯 化后, 残渣用甲 醇定容, 用 722 分光光度计, 依照标准 曲线项下方法 测定, 测定吸光度, 并用回归方程计算得出 皂苷含量。 1. 4 各种提取方法中人参皂苷薄层比较
中药提取工艺及其对生物活性成分的影响分析
中药提取工艺及其对生物活性成分的影响分析中药作为中国传统文化的瑰宝，不仅在中医领域发挥着重要作用，同时也因其独特的化学成分而备受关注。
中药的许多成分具有显著的生物活性，如鞣酸、黄酮类化合物等，这些成分不仅可以治疗疾病，还可以防止疾病的发生。
因此，对中药的提取工艺及其对生物活性成分的影响分析显得十分必要。
本文将从提取工艺、生物活性成分及其影响等方面进行探讨。
一、中药提取工艺中药的提取是指将中药中的活性成分通过适当的方法提取出来，并以一定的形式保存、应用。
中药提取过程中，常见的方法包括水提法、浸提法、加压穿透法、微波提取法、超声波提取法等。
1.水提法水是常规的提取剂，长期以来被广泛应用于中药的提取中。
水提法是指将中药材用水浸泡，进而提取其中的有效成分。
水提法适用于一些药材如柴胡、枸杞等，这些药材中主要成分在水中易溶。
但是，在水提取时，不同药材对水的要求不同，也会影响中药提取的效果。
2.浸提法浸提法是指将中药材浸泡在有机溶剂中，进而使溶剂中的有效成分进行溶解。
由于有机溶剂可以溶解许多药材中的脂类化合物及其他有机物，所以浸提法常用于提取脂溶性物质的中药。
浸提法操作方便，提取效率高，但其缺点在于有机溶剂的使用会带来环境污染及健康风险，因此应用还有一定的局限性。
3.加压穿透法加压穿透法是指通过施加一定的压力，使中药有效成分在介质中进行穿透与分子交换，进而达到提取药物的效果。
加压穿透法具有有效成分高、提取速度快的优点，常应用于高黏度及含有大分子物质的药材提取。
4.微波提取法微波提取法是指将中药材用溶剂浸泡，在微波磁场作用下，产生电磁波作用于中药材体内，并且增加药物的温度，增加介质内的物质扩散和运动速度使有效成分溶解。
微波提取法具有提取效率快、提取率高等优点，但其对中药成分的稳定性与活性，对微波器的要求都较高，这也是微波提取法在中药制药中的普及受到限制的原因之一。
5.超声波提取法超声波提取是指将中药材用特定的溶剂浸泡，在超声作用下，增加溶剂与中药材的接触面积，提高中药材中有效成分的释放，加快溶解度。
人参皂苷超声水提取法的改进
第45卷第2期吉林大学学报(理学版)Vo.l45No.2 2007年3月J O URNAL OF JILI N UN I VERSIT Y(SC IE NCE ED I TIO N)M ar2007研究简报人参皂苷超声水提取法的改进张春红,李向高,张连学,郜玉钢,张爱华(吉林农业大学中药材学院,长春130118)摘要:以人参总皂苷、人参皂苷2Rb1,2Rb2,2Rb3,2Rc,2Rd,2Re,2R,f2Rg1和2Rg2等9种主要单体皂苷的收率为指标,利用超声波提取器提取,大孔吸附树脂法去除杂质,高效液相色谱法测定含量,比较稀醋酸提取法和常规超声水提取法的优劣.结果表明,稀醋酸提取法所得总皂苷和各单体皂苷收率均比常规超声水提法明显提高,t检验证明两种提取方法有显著的差异(P<0.001).稀醋酸提取法对常规超声水提法进行改进,此法收率高、纯度大、操作简便,适合工业化生产.关键词:人参皂苷;提取法;新方法中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:167125489(2007)022*******I mprovie d M ethod of Conve n tiona lU ltra s on icW aterExtraction of G insenosi desZ HANG Chun2hong,LI X iang2gao,Z HA NG Lian2xue,GAO Yu2gang,Z HANG A i2hua(Acade my o f Chinese Traditiona lM e d icine,J ilin Agricult ura l Uni ver sity,Chang c hun130118,China)Ab strac:t W e estab lished a d iluted acetic acid extraction method and co mpared the yields of tota l ginsenosides and n i n e monoginsenosides(ginsenoside2Rb1,2Rb2,2Rb3,2R c,2Rd,2Re,2R,f2Rg1and2Rg2)via our m ethod w it h those via the conventional u ltrason ic water extracti o n m et h od,after tota l gi n senosides and nine monogin2 senosi d eswere m easured w ith H PLC after purified by the macr oporous resi n method.The results show the dil u ted acetic aci d extracti o n method is better t h an the conventi o na l ultrasonic water extracti o n method,the tota l gi n senosi d es and monogi n senosi d es yi e l d s via the d il u ted acetic ac i d extracti o n m et h od were sign ifi c antly i n creased co mpared w it h those via the conventi o na l u ltrasonic water extracti o n(P<0.001).The d iluted acetic acid extraction method is a i m proved method of t h e conventi o na l ultrasonic water extraction of gi n senosi d es and a ne w method,wh i c h has a h i g h extraction yield and t h e operation is si m p le,and mee ts the need of industrialized manuf acture.Ke y wo r ds:gi n senoside;extracti o n m et h od;ne w method人参为五加科(A ra li a ceae)植物人参P anax ginseng C.A.M e y的干燥根.其主要活性成分为人参皂苷(gi n senosi d e),到目前为止已分得的单体皂苷有40多种,其中主要为人参皂苷2Ra1,2R a2,2Ra3, 2Rb1,2Rb2,2Rb3,2Rc,2Rd,2Re,2R,f2Rg1,2Rg2,2Rg3,2Rh1等.人参须根中人参皂苷以2Rb1,2Rc,2Rd和2Re居多,含量约为8%.人参总皂苷提取方法较多,如浸渍法、回流提取法、超声波提取法、超临界萃收稿日期:2006205217.作者简介:张春红(1975~),女,满族,博士研究生,讲师,从事中药活性成分的研究,E2m ai:l zch l hh@s i na.co m.联系人:张连学(1955~),男,汉族,教授,博士生导师,从事中药活性成分的研究,E2m ai:l zl xbook s ea@163.co m.基金项目:国家自然科学基金(批准号:30370159).取法和微波法等[1~5],其中超声波法提取时间短、收率高,温度低,目前应用较广泛.提取所用的溶剂有水、甲醇、乙醇和正丁醇等,目前多以甲醇、乙醇为主[1,4,6,7],但二者对各种物质都有较高的溶解度,使得提取液中杂质较多,导致所制备的总皂苷纯度低,外观颜色深.此外甲醇和乙醇等虽为极性溶剂,但对丙二酰基系列的人参皂苷(极性较大)的提取率较低,用两者作溶剂,会损失一部分皂苷(丙二酰基类皂苷),从而使总皂苷产率降低.用水作溶剂,丙二酰基类皂苷可以充分提取,但水溶性杂质较多,而且难于过滤,易发霉变质,另外在用大孔吸附树脂法除去水溶性杂质时易损失丙二酰基类皂苷.为了解决以上问题,本文尝试新的提取方法:稀醋酸提取法来提取人参皂苷.1材料、试剂与仪器111材料与试剂人参须根由抚顺第一参厂提供;人参皂苷标准品2Rb1,2Rb2,2Rb3,2R c,2Rd,2Re, 2R,f2Rg1,2Rg2购于吉林省药品检验所.色谱用甲醇、乙腈为色谱纯,其他试剂正丁醇、无水乙醇、95%乙醇、冰醋酸、乙酸乙酯、氯仿等均为分析纯.薄层层析硅胶G为化学纯,青岛海洋化工有限公司产品.D1012大孔吸附树脂(苯乙烯型共聚体)为天津市海光化工有限公司产品.112仪器HPL C色谱仪(日本岛津),天孚牌电子计数天平(500g/01001g,310g/0101g)为金羊天平仪器公司产品,超声波清洗器(K Q2250B)为昆山仪器厂产品,旋转蒸发器(RE252A)为上海亚荣生化仪器厂产品.2方法2.12种人参总皂苷的提取方法21111常规超声水提法参照文献[2,7]的方法,称取人参须根粗粉50g,加定量水浸泡过夜,常温超声提取3次(溶剂量依次为500,400,300mL,超声时间每次30m in),抽滤,合并滤液,上D1012大孔吸附树脂柱,水洗脱至流出液为无色,再用80%乙醇洗脱至洗脱液TLC检查无皂苷反应为止,乙醇洗脱液减压回收至干,残渣即为人参皂苷粗品.将粗品用95%乙醇精制(粗品用20倍的95%乙醇超声溶解,抽滤,滤液减压回收至干,残渣即为精制的人参皂苷),称重、计算收率,并且精制人参皂苷用比色法测定纯度.此方法重复3次,结果见表1.21112稀醋酸提取法称取人参须根粗粉50g,加水浸泡过夜(加冰醋酸调pH值为3~4),超声提取3次(溶剂量依次为500,400,300mL,超声时间每次30m in,其间保持提取液p H值为3~4),抽滤,合并滤液,上大孔吸附树脂柱(D1012大孔吸附树脂300g,柱:5c m@50c m),先用水洗至洗脱液无色且溶液为中性,再用80%乙醇洗脱至TLC检查流出液无皂苷反应为止,将乙醇洗脱液减压回收至干,残渣即为人参皂苷粗品,称重并计算收率.将人参皂苷粗品用95%乙醇精制(粗品用20倍的95%乙醇超声溶解,抽滤,滤液减压回收至干,残渣即为精制的人参皂苷),称重、计算收率,将精制的人参皂苷用比色法测定纯度.此方法重复3次,结果见表1.Tab le1C o m pa r ison of tota l ginsenosi de yie l ds vi a the two d iffer en t m ethod s(X?S,n=3)Extrac ti on m ethods Conventio na l u ltrasonicwater extractio n m et hodD iluted acetic acidextracti on m etho dSa mp le we i ght/g5*******Tota l crude gi nsenosi des yield(%)91231?01523210106?011592*Tota l purified gi nsenosi des yi e l d(%)61082?01164491053?014623**Purity of purified gi nsenos i des(%)7618286117Co m pa red w ith the conventi onal ultrason i c water extractio n me t hod*P<0105,**P<01001.2.2比色法测定精制人参总皂苷的纯度21211标准曲线的制备精密称定人参皂苷Re标准品3010mg,用甲醇定容至100mL容量瓶中摇匀备用,分别取上述溶液010(空白对照管),011,0.2,013,014,015mL于6只10mL刻度试管内,分别加甲醇015,014,013,012,011,0mL混匀,在冰水浴中加入8%香草醛乙醇液015mL,77%的硫酸5mL 摇匀,于60e水浴中加热10m in,立即置于冰水浴中冷却15m in,以第一只试管(空白对照管)溶液为空白对照,在554nm处测定其余5只试管的吸光度(A),以人参皂苷R e浓度为横坐标,吸光度A为纵坐标,得标准曲线为:Y=21225X-010109,r=019995.312吉林大学学报(理学版)第45卷21212 纯度测定 精密称取待测样品3010mg ,用甲醇定容到100mL 容量瓶中,精密量取013mL 于10mL 刻度试管中,加012mL 甲醇,另取一10mL 刻度试管,加入015mL 甲醇(空白对照管),在冰水浴中向两只试管中同时加入8%香草醛乙醇液015mL ,77%的硫酸5mL 摇匀,60e 水浴中加热10m in ,冰水浴中冷却15m i n ,在554nm 处测定吸光度A ,将所得A 带入标准曲线计算含量,结果见表1.2.3 H PLC 法测定各提取物中单体皂苷的含量21311 色谱条件 色谱柱:Nucleosil C18(416mm @150mm,5L m );柱温:40e ;检测波长:203nm;流速:115mL /m i n ;流动相:乙腈2水连续洗脱,A :乙腈,B :水;连续洗脱程序为:0~4211m in :18%A y 29%A ,4211~59m in :29%A y 35%A ,59~66m i n :35%A y 100%A ,66~70m i n :100%A y 18%A ,所有组分均在70m i n 内出完.分析时间:80m i n ;进样量:供试品溶液与对照品溶液各20L L .21312 标准曲线的制备 分别称取人参皂苷2Rb 1,2Rb 2,2Rb 3,2Rc ,2Rd ,2Re ,2Rg 1和2Rg 2各5mg ,2R f 1mg 置于5mL 容量瓶中,用色谱甲醇溶解,定容,摇匀作为母液备用.分别称取母液01080,0116,0132,0164,1128mL ,均用甲醇定容至2mL ,摇匀,得到系列浓度的对照品混合溶液.分别进样3针,每次20L L ,记录色谱图,以对照品的浓度(g /L)为横坐标(X ),对照品的峰面积为纵坐标(Y ),进行线性回归计算,得到回归方程分别为:人参皂苷2Rg 1:Y =52654221673X +601612865(r =0199967);人参皂苷2Re :Y =42777481447X -231716925(r =0199995);人参皂苷2R:f Y =49832991744X +722318228(r =0199995);人参皂苷2Rg 2:Y =47537851452X +68215875(r =0199998);人参皂苷2Rb 1:Y =41785171418X -481316773(r =0199998);人参皂苷2Rc :Y =39096731688X -848713476(r =0199997);人参皂苷2Rb 2:Y =37458271676X -101013230(r =0199999);人参皂苷2Rb 3:Y =44431301553X +289316789(r =0199998);人参皂苷2Rd :Y =41600411162X -331511568(r =0199999).21313 各单体皂苷的含量测定 取常规超声水提法和稀醋酸提取法的精制皂苷010196g 和010206g 分别置于10mL 容量瓶中用甲醇定容,过0145L m 滤膜,即为样品液.在与标准曲线同一液相条件下进样20L L ,记录色谱图,将峰面积值代入相应的回归方程中,计算含量,结果见表2和图1.Ta ble 2 C o m pa r ison of the m onoginsenosides con ten ts of tota l pur ified gi n senosi d es ( X ?S,n =3)vi a gi n senoside extr ac ti on m e thodsM onogi nsenosi deConventi onal ultrason i c wa ter extracti on m etho d(%)D il uted aceti c ac i d extractio n m ethod G i nsenoside 2R b 171783?01256210181?015035** G i nsenoside 2R b 251881?01189381231?013492** G i nsenoside 2R b 3018542?010********?010372** G i nsenoside 2R c51624?01147271824?013421** G i nsenoside 2R d41855?01129161602?015631** G i nsenoside 2R f11464?010********?010021** G i nsenoside 2R e61122?010********?010881** G i nsenoside 2R g 121571?010********?010162** G i nsenoside 2R g 211004?010********?010112*Co m pa red w ith conventi onal ultraso n ic water extractio n m ethod *P <0105,**P <01001.3 结果与分析比较粗总皂苷收率,常规超声水提法(9123%)与稀醋酸提取法(10105%)有显著性差别(P <0105);对于精制皂苷收率,稀醋酸提取法收率(9105%)高于常规超声水提法(6108%),两者间有显313 第2期 张春红,等:人参皂苷超声水提取法的改进F ig .1 C o m par ison conventiona l u ltr ason ic w a ter extr a ction m e thod and d iluted a cetic a cid extr a ction m ethod著差异(P <01001),而且稀醋酸提取法所得精制皂苷纯度更高.综上可以看出,稀醋酸提取法明显优于常规超声水提法.从各单体皂苷收率角度看,与常规超声水提法相比,稀醋酸提取法均有大幅度的提高,经t 检验证明有极显著差异,其中人参皂苷2Rb 1,2Rb 2,2R c ,2Rd ,2Re ,2Rg 1增幅较大,均约为2%以上(常规超声水提法和稀醋酸提取法分别为:人参皂苷2Rb 17178%,10181%;2Rb 25188%,8123%;2Rc 5162%,7182%;2Rd 4185%,6160%;2Re 6112%,7109%;2Rg 12157%,3129%).综上可以得出稀醋酸提取法优于常规超声水提法.4 讨 论(1)稀醋酸提取法对人参皂苷的提取率优于常规超声水提法的主要原因是由于人参须根中含有大量丙二酰基系列的人参皂苷(丙二酰基人参皂苷2Rb 1,2Rb 2,2Rb 3,2R e 等),其在弱酸环境中能脱去酰基,使其变成相应的人参皂苷,极性变小,易被大孔吸附树脂吸附(丙二酰基类人参皂苷极性过大不易被大孔树脂吸附,常常被当作水溶性杂质而除去),使人参皂苷提取率大大增加.(2)常规超声水提法提取人参皂苷时,提取液非常容易发霉变质,稀醋酸提取法因提取液为酸性,不宜发霉变质.参考文献[1] Z HANG Ji ng ,C HEN Quan 2cheng ,Z H EN G Y i 2nan ,e t a.l E ffect of D ifferen ttM e t hods on Extrac ti ng R ati os of G i nsen 2osi des [J].Jo urna l of Jili n Agr i culture Un i versity ,2003,25(1):71272.(张 晶,陈全成,郑毅男,等.不同提取方法对人参皂苷提取率的影响[J].吉林农业大学学报,2003,25(1):71272.)[2] Z HANG Chong 2x,i Z HENG You 2lan ,Z HA NG Chun 2hong ,et a.l Study o n Extracti ve Technology for Tota l Saponins andR eb irth with M acroreticu l a r R esi n [J].Chin P harm J ,2003,38(9):6612664.(张崇禧,郑友兰,张春红,等.大孔树脂吸附人参总皂苷工艺及再生使用的研究[J].中国药学杂志,2003,38(9):6612664.)[3] Z HANG Chong 2x,i Z HANG Chun 2ho ng ,L UO W e i 2ying ,et a.l Study on Extracti ve Technol ogy for Tota l Sapo n i ns fro mP anax G i nseng [J].Journal of Jili n Agricu lture Un i vers it y ,2002,24(5):72274.(张崇禧,张春红,罗维莹,等.人参总皂苷提取分离工艺的优选[J].吉林农业大学学报,2002,24(5):72274.)[4] Z HANG Chun 2ho ng ,Z HANG Chong 2x,i Z HENG You 2lan ,et a.l Study on t he Opti m u m Ext moti on P rocess of G i nsen 2osi des w it h Soak M othod [J].Journal of Jili n Agricu lture University ,2003,25(1):73274.(张春红,张崇禧,郑友兰,等.浸渍法提取人参皂苷最佳工艺的研究[J].吉林农业大学学报,2003,25(1):73274.)[5] Z HENG You 2l an ,Z HANG Chong 2x,i Z HAN G Chun 2ho ng ,et a.l E ffect of D 2101M acro R eticu l a r R esi n on Adsorpti veCapacity of G i nsenoside [J].Journa l of Jili n Agr i culture Un i versity ,2002,24(6):47249.(郑友兰,张崇禧,张春红,等.D 2101大孔吸附树脂对人参皂苷吸附容量的影响[J].吉林农业大学学报,2002,24(6):47249.)[6] WU Zho ng 2zheng ,Z HO U Guo 2m i ng ,Y UAN Yu 2qi ong .Study on 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第 １期（ 总第 １ ３ ４期） ２ ０ １ ５年２月
中 国 林 副 特 产 Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ Ｂ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ａ ｎ ｄ Ｓ ｅ ｃ ｉ ａ ｌ ｉ ｔ ｉ ｎ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ －Ｐ ｙ ｐ ｙ
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） 购买于中国食品药品检定研究院 。 ２ １ ０ ７ ５ ４ ０ １ ３ ２ ４ １ － ； 索氏提取器 （ 郑州兴华玻璃仪器设备直销店） ； 广 东 格 兰 仕 集 团） ７ ０ Ｄ ２ ０ Ｔ Ｌ Ｄ ４ Ｐ －型 微 波 炉 （ 昆山市超声仪器有限公 ２ ５ ０ Ｂ ＫＱ － 型超声波清 洗 器 （ ； 司） 上海圣科仪器设备有限公 ５ ５ ７ － 型分光光 度 计 （ ； ； 电 司） 日本岛津公司） ２ ２ ０ ＡＵＹ － 型电子分 析 天 平 （ 。 子恒温水浴锅 （ 长春通州科技仪器厂 ） ２ 方法 １． ２． １ 人参皂苷的提取 １． 将人参进行粉碎处理后 过 ４ 精密称取９ ０ 目 筛， ， 份， 每份 １ 中性滤纸包好作为供试 品 ； 分别进行如 ｇ （ ） 取 ３ 份供试品 ， 下操作 ： 分别置于索氏提取器中 ， １ 挥干三氯 加入 ８ 加热回流提取８ ０ ｍ Ｌ 三氯 甲 烷 ， ｈ；
表 １ 不同提取方法对人参皂苷得率的影响
提取方法 索氏提取法 超声提取法 微波提取法 供试品中人参皂苷含量／％ ６． ６ ８ ４ ９ ７． ８． ５ ４ 供试品中人参皂苷收率／％ ８． ３ ４ ９． ３ ６ ８． ７ ６
３ 讨论
超声提取法是利用超声波在液体介质中传播时 ， 不断产生无数个内部压力达到 产生的 “ 空化效应 ” 上千个大气压的空 气 穴 ， 而空气穴不断爆破产生微 观上的强大冲击波 ， 不断的轰击人参粉末 ， 使其含有 的人参皂苷更容易 溢 出 ， 从而加大了人参皂苷的得 率 。 微波提取法同 样 具 有 提 取 时 间 短 、 操作简便的 优点 ， 但是相对于超声提取法而言 ， 其人参皂苷得率 略低 ， 且操作过程中容易发生危险 ， 并不适合大规模 生产 。 超声提取法 与 微 波 提 取 法 的 提 取 时 间 较 短 、 能源消耗少 ， 而索氏提取法不但耗时 、 耗能而且还产 生大量的废液 ， 从工厂生产的角度考量 ， 超声提取法 更适合应用于大规模的人参皂苷提取 。 参 考 文 献
： ／ ｏ ｉ ． １ ０． １ ３ ２ ６ ８ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｆ ｂ ｓ ｉ ｃ ． ２ ０ １ ５． ０ １． ０ １ ３ ｄ ｊ
不同提取方法对人参皂苷收率的影响
陈旸 ， 丛建华 信小娟 ，
２ （ ） 。 ＝０． Ｒ ９ ９ ８ ３
以相同提取 试 剂 — 甲 醇 提 取 人 参 皂 苷 ， ３种不同提 取方法对人参皂苷收率的影响见表 １ 所示 。 在相同 除 杂 处 理 的 条 件 下， ３组人参皂苷收率分别为 ． ３ ４％ 、 ８． ７ ６％ 、 ９． ３ ６％ 。 结果表明同样以甲醇作为 ８ 提取试剂 ， 相同的除杂处理 ， 超声提取法提取人参皂 苷的收率更高 。
Ｃ． Ｐ ｉ ａ ｎ ａ ｘ ｎ ｓ ｅ ｎ 人 参 为 五 加 科 人 参 属 植 物 （ ｇ ｇ ） 的干燥根和根茎 ， 具有安神益智 、 大补元 Ａ．Ｍ ｅ ｅ ｒ ｙ 气、 生津养血 、 补脾 益 肺 的 功 效 ， 人参中的主要活性 成分为人参皂苷 用
］ ［ ６ ３ － ［ ］ １ ２ －
１ 材料与方法
１． １ 材料 由大兴安岭地区农业林业 ５ 年生干燥 人 参 根 ， 批 号： 科学 研 究 院 提 供 ；人 参 皂 苷 对 照 品 Ｒ ｅ（
收稿日期 ： ０ １ ４－０ ９－１ ８ ２
４ ３ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
２ ０ １ ５年
信小娟等 ： 比较不同提取方法对人参皂苷收率的影响
第１期
甲烷后加入 ６ 弃掉滤 加热回流提取６ ０ ｍ Ｌ 甲 醇， ｈ； 纸包 ， 挥干甲醇 ， 加入 ２ ０ ｍ Ｌ 蒸馏水溶解后转移至分 液漏斗中 ； 分别加入 等 体 积 的 乙 酸 乙 酯 和 水 饱 和 正 丁醇溶液进行除杂 处 理 ； 挥干水饱和正丁醇溶液后 取 ３ 份 供 试 品， 加入 １ 待 测 。（ 分 ０ ｍ Ｌ 甲醇 复 溶 ， ２） 加入２ 别置 于 ５ ０ ｍ Ｌ 三 角 瓶 中， ０ ｍ Ｌ 甲醇进行超声 ； 弃 掉 滤 纸 包， 处理 １ 挥 干 甲 醇， 加入２ ０ ｍ ｉ ｎ ０ ｍ Ｌ蒸 馏水溶解后转移至 分 液 漏 斗 中 ； 分别加入等体积的 乙酸乙酯和水饱和 正 丁 醇 溶 液 进 行 除 杂 处 理 ； 挥干 水饱和正 丁 醇 溶 液 后 加 入 １ 待 测。 ０ ｍ Ｌ 甲 醇 复 溶， （ ） 取 ３ 份 供 试 品， 分别置于５ 加入 ０ ｍ Ｌ 烧 杯 中， ３ ； 弃掉滤纸包 ， 低火微波 ５ 次 ， 每次 ２ ０ ｍ Ｌ 甲醇 ， ｍ ｉ ｎ ２ 挥干甲醇 ， 加入 ２ ０ ｍ Ｌ 蒸馏水溶解后转移至分液漏 斗中 ； 分别加入等体 积 的 乙 酸 乙 酯 和 水 饱 和 正 丁 醇 溶液进行除杂处理 ； 挥干水饱和正丁醇溶液后加入 待测 。 ０ ｍ Ｌ 甲醇复溶 ， １ ２． ２ 人参皂苷标准曲线的绘制 １． 精密 称 取 人 参 皂 苷－Ｒ 甲醇溶解 ｅ标 准 品 适 量， ／ 后制备成 ２ 分别吸取人参皂 ｍ ｍ Ｌ 的标准品 溶 液 ； ｇ 苷－Ｒ ｅ标准 品 溶 液 １ ０、 ２ ０、 ３ ０、 ４ ０、 ５ ０ Ｌ 置于具塞试 μ 管中 ， 向试管中分别加入 ９ ０、 ８ ０、 ７ ０、 ６ ０、 ５ ０ Ｌ 的甲 μ 醇， 另备一支具塞试管加入１ ０ ０ Ｌ 甲醇作空白处 μ 理； 分别向具塞试管中加入 ０． ５ ｍ Ｌ 的 ０． ５％ 香草醛－ 乙醇溶液和 ５ 振荡混匀 ； ｍ Ｌ 的７ ４％ 硫 酸 ， ０℃ 恒 温 ６ 调节紫外 －可 水浴 ２ ０ ｍ ｉ ｎ 后冰水浴 １ ０ ｍ ｉ ｎ 终止反应 ； 见分光光度计至 ５ 以人参皂 ４ ４ ｎ ｍ 处进行比色测定 ； ／ 为 横 坐 标， 苷－Ｒ 吸光 ｅ标准品的进样量 （ Ｌ） Ｘ， ｍ ｍ ｇ 为纵坐标 ， 度（ 绘制出人参皂苷－Ｒ Ｄ ｅ 的标准 Ｙ， Ｏ ５ ４ ４） 曲线 ， 得 到 线 性 回 归 方 程： Ｙ ＝０． Ｘ ＋０． １ ７ ９ ８ ０ １ ０ ８