前列腺癌与雄激素受体基因_CAG_n重复多态性的关系
雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系
雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系雄激素是男性体内的主要性激素之一，其作用通过与雄激素受体结合实现。
而雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与多种人类疾病的发生密切相关，其中包括肺癌。
本文将着重探讨雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系。
首先，从理论上分析，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌发生的关系具有一定的可行性。
因为，雄激素受体与雄激素的作用被认为能影响许多癌症的发生和进展，尤其是那些与雄激素相关的癌症，如前列腺癌、乳腺癌等。
而在雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列的存在下，作为雄激素受体的表达会受到调控，这个序列的长度变化会导致雄激素受体功能的不同，从而可能对肺癌的发生产生一定的影响。
然后，从实验数据的角度来看，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系得到了验证。
多项研究表明，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列的长度与肺癌的发病和恶性程度呈负相关，即这一序列长度较短的人群易患肺癌，而长度较长的人群则相对较少患肺癌，并且对于那些患肺癌的人，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度较短的肺癌患者的生存期较短。
最后，从机理上分析，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系可能是通过影响肿瘤的生长、增殖、侵袭和分化等方面来实现的。
例如，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度较短的个体雄激素调节作用减弱，在肺癌细胞中可能会使雄激素抑制作用降低，从而导致肺癌细胞增殖和侵袭的能力增强。
总之，雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系已被证实。
但目前对于这种关系的具体机制还未能完全解决，需要通过进一步的研究加以明确。
雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关
雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关作者：刘贵秋，苏勤，张伟，刁小莉，冯英明【关键词】膀胱肿瘤Length of CAG repeat at exon 1 of androgen receptor gene is associated to development of bladder carcinoma in males 【Abstract】 AIM: To study the possible association between the length of the polymorphic CAG short tandem repeat (STR) at androgen receptor (AR) first exon and bladder cancer development. METHODS: Genomic DNA was extracted from the paraffinembedded bladder carcinoma tissues from male patients and amplified by PCR and then the products were resolved by electrophoresis on denaturing polyacrylamide gels and visualized through silver staining. The CAG repeat numbers were assessed by the mobility of their products and direct sequencing for some representative samples. The samples with appendicitis from 94 male patients were examined in a parallel way as a reference group. RESULTS: A total number of 95 of bladder cancer samples were examined. Six of them (6.3%) showed microsatellite instability, with one excluded from the following assessment due to the difficulty in determining precisely the normal position of its amplification product. The CAG repeat numbers for the 94patients with bladder cancer and the reference patients with appendicitis were 8-26 (20.07±3.12) and 14-30 (21.06±3.39), respectively, with statistically significant difference. CONCLUSION: CAG STR at the first exon of AR gene is associated to the development and/or progression of bladder carcinoma in male patients. A shorter CAG STR at the locus may predispose the male individuals to the development of bladder cancer.【Keywords】 gene, androgen receptor; CAG repeat; gene polymorphism; bladder neoplasms【摘要】目的：探讨人雄激素受体（AR）基因第一外显子CAG串联短重复序列（STR）多态性与男性膀胱癌发生之间的关系. 方法：石蜡包埋的男性膀胱癌标本进行基因组DNA提取，PCR扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，经银染显示单股DNA链片段长度. 根据标本的泳动度推算CAG STR的n值；选取代表性的标本产物直接测序，验证上述检测的准确性. 以男性阑尾炎标本作为参照组. 结果： 95例膀胱癌标本中有6例（6.3%）出现微卫星不稳定（MSI）现象，其中1例因正常组织过少而无法确定其产物的正常泳动位置，不做以下分析. 94例膀胱癌及相同例数参照标本的CAG STR n值范围分别为8~26和14~30，均数分别为20.07±3.12和21.06±3.39，两者有统计学意义（P<0.05）. 结论： AR基因第一外显子CAG STR与男性膀胱癌的发生或（和）发展有关，CAG STR较短的男性个体患膀胱癌的危险性可能增加.【关键词】雄激素受体基因；CAG重复序列；基因多态性；膀胱肿瘤0引言膀胱癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤，男性发病率是女性的3.5倍［1］. 除了吸烟和职业因素等环境因素外，性激素的影响可能与这种性别差异有关. 动物实验研究显示，雄性动物对膀胱癌发生比雌性易感，这可能与雄激素或(和)雌激素的作用有关［2］. 雄激素通过雄激素受体（androgen receptor, AR）发挥作用，已经在人膀胱尿路上皮和膀胱尿路上皮癌（urothelial carcinoma, UTC）组织中检测到AR存在［3］. 我们设想，AR介导的反应可能在一定程度上决定了膀胱癌发生率的性别差异；同时，AR功能的差异也可能影响不同个体对这一肿瘤的易感性.AR是核受体家族的一员，其编码基因位于X染色体的q1112区，有8个外显子组成［4］. 由第一外显子编码的N（氨基）末端区含有正常受体活性所需的转录激活单位，其活性可能与该区域内几个多态性结构有关［5］，其中最为明显的是位于第一外显子的CAG串联短重复序列（shorttandem repeat, STR）. 体外研究显示，AR的转录活性与AR基因 CAG STR的重复次数（n值）呈负相关，n值越小，AR的转录活性越强［6,7］. 已经知道AR基因CAG STR异常与雄激素不敏感征和延髓脊髓性肌萎缩有关［8,9］，并影响对前列腺癌［10］、肝细胞癌［11］、乳腺癌［12］、卵巢癌［13］、子宫内膜癌［14］以及子宫肌瘤的易感性［15］. 到目前为止，文献中少见有关这一多态性位点与膀胱尿路上皮肿瘤发生或发展关系的报道. 此研究对陕西地区人群的AR编码基因中的CAG STR长度与男性膀胱癌之间的关系进行了探讨.1材料和方法1.1材料95例男性膀胱癌和94例男性阑尾炎石蜡包埋的标本来自第四军医大学唐都医院病理科. 膀胱组年龄为17~84岁，中位数年龄为63岁；均为尿路移性上皮癌，其中病理分级Ⅰ级20例，Ⅱ级55例，Ⅲ级20例.1.2方法1.2.1DNA提取石蜡包埋组织4 μm切片5张经二甲苯脱蜡及乙醇冲洗后，应用常规酚氯仿法进行基因组DNA的抽提，用紫外分光光度计（Eppendorf, RS 232 C, City name, Germany）确定DNA浓度.1.2.2PCR扩增引物序列AR1A (221+): 5′GAGGAGCTTTCCAGAATCTG3′；AR1B (454-): 5′CATGGGCTTGGGGAGA3′；AR2A (230+): 5′TCCAGAATCTGTTCCAGAGC3′；AR2B (446-): 5′TGGGGAGAACCATCCTCACC3′. DNA参见以前的方法［16,17］进行扩增.1.2.3琼脂糖凝胶电泳、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及数据记录按以前的方法［16,17］,琼脂糖凝胶电泳显示扩增效果，扩增成功进行变性聚丙烯酰胺凝胶（AmershamPharmacia Biotech）进行长胶分离28 h（150 V）. 进行凝胶银染，分别用UVP凝胶分析系统和光学照相记录数据.1.2.4产物测序及数据评价和统计学分析为了评价凝胶电泳检测STR多态性的可靠性，我们选取3例不同的扩增产物应用Sanger 法［18］进行测序. 结合测序结果及10 bp DNA分子量标志物做产物泳动位置的对照，按以前的方法［15］确定每例标本的CAGn的n值. 为了明确数据的可靠性，上述反应都经过至少一次重复证实.统计学处理：应用SPSS 10.0统计软件包的单因素方差分析对男性膀胱癌和阑尾炎的CAG STR长度进行比较，判断两者之间的关系，P<0.05为有统计学意义.2结果2.1AR基因CAG STR n值的测定共对95例膀胱癌和94例阑尾炎（对照组）标本的AR基因第一外显子CAG STR长度进行了测定. 对其中3例不同标本测序，以确定此实验的可靠性. 测序结果如下：显示1例泳动度为202 bp左右扩增产物的测序结果，显示CAG STR n 值为14，与以前的测定结果［19］一致.电泳显示，对照组所有标本均显示出单一条带（Fig 1），而膀胱癌标本中有6例（6.3%）出现额外条带（Fig 2），为微卫星不稳定性（microsatellite instability, MSI）［19］表现. 这6例标本中，5例成功地分离到癌组织和癌旁组织，对照其电泳图像，确定正常的AR基因扩增条带及其额外条带，完成CAG STR长度测定；其中1例癌组织AR扩增条带为梯形，但未能找到相应癌旁组织，无法确定其STR长度，故自以下分析中剔除.2.2两组标本AR基因CAG STR n值比较参照组CAG STR n值范围为14～30，均数为21.06±3.39，与女性阑尾炎患者的n值［15］一致；男性膀胱癌的n值为8~26，均数为20.07±3.12（Fig 3）. 二者之间有统计学意义（F=4.330, P=0.039），后者短于前者.2.3膀胱癌标本不同年龄组CAG STR n值的比较膀胱癌组中，患病年龄≤60岁的为32例，>60岁的为62例；两组标本CAG STR n值分别为19.94±3.33和20.10±3.08，二者差别无统计学意义（F=0.055，P=0.816）.3讨论膀胱癌在男性中的发病率明显高于女性，提示性激素介导的功能活动可能影响其发生过程. Okajima等［2］等的实验研究显示雄激素促进膀胱癌发生，而雌激素能够抑制这一过程. 雄激素是通过AR 发挥作用的. 对癌组织进行的免疫组织化学检测表明，膀胱癌组织中的AR表达水平高于癌旁组织［3］. AR基因由8个外显子组成［4］；AR分子有四个功能区，其中转录调节活性单位位于N端多变区［5,6］. 不同个体间在此区域氨基酸数目差异较大，这是由于其编码区存在几个多态性结构［5,20］，最为明显的是CAG三联体，它存在于AR基因第一外显子内，编码具有长度多态性的多聚谷氨酰胺结构，后者的长度决定AR分子的转录调节活性［8,9,21］. 此序列的重复次数为8～31［20］. AR基因CAG STR长度对AR分子的转录调节功能有微调作用［22］，即AR的转录调节活性与其编码基因第一外显子的STR n 值呈负相关，n值较小的个体AR活性较强，较大者AR活性较弱［6,7］. AR基因CAG STR异常不但可直接导致某些疾病［8,9,22］，而且还影响对多种常见疾病的易感性. 对于后一种情况，AR基因CAG STR长度通过调节AR分子活性对疾病发生或(和)发展过程发挥辅助作用. 显而易见，这种作用较弱，不是决定性因素. 然而，这种作用将持续数10 a，对于暴露于有关疾病其他发生因素的个体来讲其影响是不可低估的，相关基因的多态性将会影响相应病变出现的年龄，乃至病变进展速度. 针对AR基因多态性位点的易感性病理学（predisposition pathology）［23］研究将会阐明其疾病发生影响谱系以及相应机制，这对于相应疾病的预防，乃至治疗都有重大意义. 已经有数据表明，CAG STR n值较小的男性个体患前列腺癌［10］和乙型肝炎病毒相关肝细胞癌［11］的危险性明显增加；n值较小的女性个体易患卵巢癌［13］；n值较大者患乳腺癌［12］、患子宫内膜癌［14］及子宫肌瘤［15］的危险性增加. 关于AR编码基因第一外显子CAG序列长度多态性与膀胱癌的关系文献中尚少见报道. 本研究表明，男性膀胱癌患者的CAG STR短于对照组. 这提示，膀胱癌的发生也与AR基因CAG STR多态性有关，即这一STR结构较短的个体患膀胱癌的危险性较大.微卫星DNA（microsatellite DNA）是一类短串联重复序列，重复次数10～60次左右，常以2或3个碱基重复形式存在于内含子结构中，也可见于编码区. 肿瘤发生或进展过程中某些微卫星重复次数可以发生增多或减少而造成长度改变，从而在同一位点上出现不同于正常组织的片段，称为MSI，反映了该病变细胞群体中DNA错配修复功能障碍［19］. 此研究的 95例标本中，发现6例（6.3%）出现MSI，此现象的发生与肿瘤组织学分级无明确关系（数据未显示），这与其他作者的研究结果［24］一致，提示这个位点的MSI可能在某些膀胱癌的早期已经出现. 需更多标本进行研究有可能证实这一点.此研究提供的数据显示，AR基因第一外显子CAG STR长度可影响机体膀胱癌发生的过程，这一多态性位点可用作预测膀胱癌遗传易感性，发现高危个体. 这对于膀胱癌的预防可能有重要意义，但要应用于临床还有大量工作要做，这些还需要临床与实验的进一步结合.【参考文献】［1］ Parkin DM, Pisani P, Ferlay J. Estimates of the worldwide incidence of 25 major cancers in 1990［J］. Int J Cancer，1999; 80(6):827-841.［2］ Okajima E, Hiramatsu T, Iriya K,et al. Effects of sex hormones on development of urinary bladder tumors in rats induced by NbutylN(4hydroxybutyl) nitrosamine［J］. Urol Res，1975; 3(2):73-79.［3］米华, 甘俊常, 刘天长,等. 性激素及其受体与膀胱癌［J］. 肿瘤防治研究, 2000;27(3):167-169.Mi H, Gan JC, Liu TC, et al. Androgen receptor and bladder cancer［J］. Chin J Cancer Prev Treat, 2000; 27(3):167-169.［4］ Brown CJ, Goss SJ, Lubahn DB, et al. Androgen receptor locus on the human X chromosome: Regional localization to Xq1112 and description of a DNA polymorphism［J］. Am J HumGenet， 1989;44(2):264-269.［5］ Jenster G, Van der Korput HA, Trapman J, et al. Identification of two transcription activation units in the Nterminal domain of the human androgen receptor［J］. J Biol Chem, 1995; 270(13):7341-7346.［6］ Chamberlian NL, Drive ED, Miesfeld RL. The length and location of CAG trinucleotide repeats in the androgen receptor Nterminal domain affect transactivation function［J］. Nucleic Acids Res， 1994;22(15):3181-3186.［7］ KazemlEsfarjani P, Trifiro MA, Pinsky L. Evidence for a repressive function of the long polyglutamine tract in the human androgen receptor: Possible pathogenetic relevance for the (CAG)n expanded neuropathies［J］. Hum Mol Genet, 1995; 4(4):523-527.［8］ Wallerand H, RemyMartin A, Chabannes E, et al. Relationship between expansion of the CAG repeat in exon 1 of the androgen receptor gene and idiopathic male infertility［J］. Fertil Steril， 2001; 76(4):769-774.［9］Brinkmann AO. Molecular basis of androgen insensitivity［J］. Mol Cell Endocrinol, 2001; 179(12):105-109.［10］ Hardy DO, Scher HI, Bogenreider T, et al. Androgen receptor CAG repeat lengths in prostate cancer: Correlation withage of onset ［J］. J Clin Endocrinol Metab, 1996; 81(12):4400-4405.［11］ Yeh SH, Chang CF, Shau WY, et al. Dominance of functional androgen receptor allele with longer CAG repeat in hepatitis B virusrelated female hepatocarcinogenesis［J］. Cancer Res, 2002; 62(15):4346-4351.［12］ Suter NM, Malone KE, Daling JR, et al. Androgen receptor (CAG)n and (GGC)n polymorphisms and breast cancer risk in a populationbased casecontrol study of young women［J］. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2003; 12:127-135.［13］ Santarosa M, Bidoli E, Gallo A, et al. Polymorphic CAG repeat length within the androgen receptor gene: Identification of a subgroup of patients with increased risk of ovarian cancer［J］. Oncol Rep, 2002; 9(3):639-644.［14］ Yaron M, Levy T, Chetrit A, et al. The polymorphic CAG repeat in the androgen receptor gene in Jewish Israeli women with endometrial carcinoma［J］. Cancer, 2001; 92(5):1190-1194.［15］李斌, 刁小莉, 张伟,等. 雄激素受体第一外显子CAG 重复序列长度多态性与子宫肌瘤遗传易感性有关［J］. 第四军医大学学报,2004; 25(9):836-840.Li B, Diao XL, Zhang W, et al. CAG repeat polymorphism at androgen receptor gene exon 1 is associated withpredisposition to uterine leiomyoma［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2004; 25(9):836-840.［16］刁小莉，苏勤，王淑芳，等. 非放标AR基因多态性分析探讨子宫平滑肌瘤的克隆性［J］. 第四军医大学学报,2002；23(21):1969-1973.Diao XL, Su Q, Wang SF，et al. Nonisotopic clonality analysis on uterine leiomyomas based on AR gene polymorphism ［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2002；23(21):1969-1973.［17］刁小莉，苏勤，王淑芳，等. 子宫平滑肌瘤不同结节X染色体失活类型的研究［J］. 中华病理学杂志，2003; 32(4):308-313.Diao XL, Su Q, Wang SF, et al. The internodular relationship in multiple leiomyomas of uterus demonstrated by Xchromosome inactivation patterns ［J］. Chin J Pathol, 2003; 32(4):308-313.［18］ Sanger F, Nicklen S, Coulson AR. DNA sequencing with chainterminating inhibitors［J］. Proc Natl Acad Sci USA, 1977; 74(12):5463-5467.［19］ Boland CR, Thibodeau SN, Hamilton SR, et al. A national cancer institute workshop on microsatellite Instability for cancer detection and familial predisposition: Development of international criteria for the determination ofmicrosatellite instability in colorectal cancer［J］. Cancer Res, 1998; 58(22):5248-5257.［20］ Edwards A, Hammond HA, Jin L, et al. Genetic variation at five trimeric and terameric trandem repeat loci in four human population groups［J］. Genomics, 1992; 12(2):241-253.［21］ Yong EL, Lim J, Qi W, et al. Molecular basis of androgen receptor diseases［J］. Ann Med, 2000; 32(1):15-22.［22］ La Spada AR, Wilson EM, Lubahn DB, et al. Androgen receptor gene mutations in Xlinked spinal and bular muscular atrophy［J］. Nature, 1991;352(6330):77-79.［23］苏勤. 妇科肿瘤分子病理研究进展的启示［J］. 中华病理学杂志, 2003; 32:305-307.Su Q. Approaches in molecular pathology of some gynecological tumors［J］. Chin J Pathol, 2003; 32:305-307.［24］ GonzalezZulueta M, Ruppert JM, Tokino K, et al. Microsatellite instability in bladder cancer［J］. Cancer Res, 1993;53(23):5620-5623.。
Galanin、CgA及Syn在前列腺癌中的表达及临床意义的开题报告
Galanin、CgA及Syn在前列腺癌中的表达及临床
意义的开题报告
题目：Galanin、CgA及Syn在前列腺癌中的表达及临床意义
背景与意义：
前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一，目前已成为世界上男性死亡
率最高的恶性肿瘤。
然而，目前治疗前列腺癌的方法存在一定的局限性，需要进一步地研究诊断和治疗前列腺癌的新方法。
Galanin、CgA及Syn是神经肽，它们在神经系统中发挥着重要的生理功能。
近年来的研究表明，这些神经肽在肿瘤细胞中的表达与肿瘤的
生长和进展有关，因此，它们可能成为前列腺癌的新潜在标志物。
本研究旨在探讨Galanin、CgA及Syn在前列腺癌组织中的表达情况，并探讨它们与前列腺癌的临床病理特征及预后的相关性，从而为前列腺
癌的诊断和治疗提供新的思路。
研究设计与方法：
本研究将纳入前列腺癌患者的组织标本，通过免疫组化技术检测Galanin、CgA及Syn的表达情况，并分析其与临床病理特征及预后的相
关性。
预期结果：
本研究预计将获得以下结果：
1. Galanin、CgA及Syn在前列腺癌组织中的表达情况。
2. Galanin、CgA及Syn的表达与前列腺癌的临床病理特征的关系。
3. Galanin、CgA及Syn的表达与前列腺癌患者预后的相关性。
结论与意义：
本研究将探讨Galanin、CgA及Syn在前列腺癌中的表达情况及其临床意义，有望为前列腺癌的诊断和治疗提供新的思路和方法。
前列腺癌——性腺轴的分子生物学雄激素受体...
前列腺癌——性腺轴的分子生物学雄激素受体...
前列腺癌——性腺轴的分子生物学
雄激素受体（AR）是受体超家族成员之一。
有接收性腺甾体类激素的受体，包括接受雄激素、雌激素、孕激素，接受肾上腺激素的甾体，包括盐皮质激素、糖皮质激素、甲状腺激素、类维生素D。
激素与受体结合后，激活前列腺癌细胞中的靶基因开始转录，引起癌细胞增殖。
所有的雄激素剥夺治疗，都是通过降低雄激素水平来阻断雄激素受体的结合。
由此推断去势抵抗性前列腺癌是雄激素介导的信号通路的再激活。
去势抵抗性前列腺癌的分子生物学机制总结为以下五点。
第一，经过分子修饰以后，雄激素受体通路变得超敏感，可以被低水平的雄激素锁激活，在1/3的去势抵抗性前列腺癌中发现了雄激素受体基因的扩增，意思就是出现了更多的雄激素受体基因；第二，雄激素受体出现杂交情况，不仅对雄激素敏感，而且对其它一些因子也变得敏感；第三，雄激素受体模型不走寻常路，在雄激素缺乏的情况下，一些肽类生长因子，包括表皮生长因子和胰岛素样生长因子也能够激活雄激素转录活性，因子类还有白细胞介素6、蛋白激酶A、蛋白激酶C；第四，雄激素受体模型中找到了另外一条信号通路，叫作旁路，可以在没有雄激素的情况下，使癌细胞继续生存；第五。
Lurker细胞模型，这些细胞原先就一直在前列腺内，数量比较少，属于上皮干细胞，在去势治疗中生存下来，进入去势抵抗性以后变为主要数量的癌细胞。
雄激素受体基因中 GGN 三核苷酸重复序列多态性与前列腺癌风险的相
性 重 复 长 度 与 前 列 腺 癌 风 险 的 相 关 性 进 行 ｍｅ ｔ ａ分 析 。结 果 共 纳 入 ９篇 病 例 对 照 研 究 文 献 ， 共 组成 ２ ４ ３ ８个 病 例 和 １ ９ ６ ８个 对 照 。Ｇ ＧＮ 重 复 序 列 小 于 或等 于 １ ６个 者 有 更 高 的 患 前 列腺 癌 的 风 险 （ Ｏ Ｒ一 １ ． １ ５ ， ９ ５ Ｃ Ｉ ： １ ． ０ ０ ～１ ． ３ １ ， Ｐ一０ ． ０ ４ ） 。 结 论 ＡＲ 基 因中的重复 Ｇ ＧＮ 序 列 小 于 或 等 于 １ ６个 与 前 列腺 癌 风 险 的 增 加 有 关 。 关键 词 ： 雄 激 素 受体 ； Ｇ ＧＮ 多态 性 ； ｍｅ ｔ ａ分 析 ； 前 列腺 癌 Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ ． ２ ０ １ ４ ． １ ７ ． ０ １ ０ 文 献标 识 码 ： Ａ 文章编 号： ｉ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ （ ２ ０ １ ４ ） １ ７ — ２ ２ ９ ３ 一 ｏ ３
于 爱清 ， 杨 晓文 ， 胡 培 ， 严世 荣 。 △ （ １ ． 武汉 大学 中南 医院基 因诊 断 中心 ， 湖北 武汉 ４ ３ ０ ０ ０ ０ ； ２ ． 湖 北 医药 学院 生化 教研 室， 湖北 十堰 ４ ４ ２ ０ ０ ０ ）
《前列腺癌相关成纤维细胞中雄激素受体促进前列腺癌生长及侵袭转移能力的研究》
《前列腺癌相关成纤维细胞中雄激素受体促进前列腺癌生长及侵袭转移能力的研究》一、引言前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在全球范围内呈上升趋势。
前列腺癌的发生、发展与多种因素有关，其中雄激素受体（AR）的异常表达和功能异常被认为是一个关键因素。
在前列腺癌组织中，相关成纤维细胞与肿瘤细胞的相互作用也对肿瘤的生长及侵袭转移起到重要作用。
因此，研究前列腺癌相关成纤维细胞中雄激素受体对前列腺癌生长及侵袭转移能力的影响，对于深入了解前列腺癌的发病机制和寻找新的治疗方法具有重要意义。
二、研究内容1. 研究对象与方法本研究以前列腺癌组织中的相关成纤维细胞为研究对象，采用免疫组化、Western blot、RT-PCR等技术手段，检测雄激素受体在成纤维细胞中的表达情况。
同时，通过细胞培养、细胞转染等技术，研究雄激素受体对前列腺癌细胞生长及侵袭转移能力的影响。
2. 雄激素受体在成纤维细胞中的表达情况通过免疫组化等实验技术，我们发现前列腺癌组织中相关成纤维细胞中雄激素受体的表达明显高于正常组织。
进一步通过Western blot、RT-PCR等技术手段，我们证实了雄激素受体在成纤维细胞中的表达与前列腺癌的发生、发展密切相关。
3. 雄激素受体对前列腺癌细胞生长及侵袭转移能力的影响通过细胞培养、细胞转染等技术，我们发现雄激素受体能够促进前列腺癌细胞的生长及侵袭转移能力。
具体而言，雄激素受体能够促进前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，同时还能抑制细胞的凋亡。
这些结果提示我们，雄激素受体在前列腺癌的发生、发展过程中起到了重要的促进作用。
三、讨论本研究结果表明，前列腺癌相关成纤维细胞中雄激素受体的表达与前列腺癌的生长及侵袭转移能力密切相关。
雄激素受体能够促进前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，同时抑制细胞的凋亡，从而促进肿瘤的发生、发展。
这为我们深入了解前列腺癌的发病机制提供了新的思路和方向。
此外，本研究还提示我们，针对雄激素受体的治疗可能成为治疗前列腺癌的新途径。
新疆维吾尔族人群雄激素受体基因CAG重复多态性与良性前列腺增生的关系
新疆维吾尔族人群雄激素受体基因CAG重复多态性与良性前列腺增生的关系古力米热;李鸿伟;王军起;那彦群【期刊名称】《中华泌尿外科杂志》【年(卷),期】2004(025)009【摘要】目的初步探讨雄激素受体(AR)基因CAG重复多态性与良性前列腺增生(BPH)的关系.方法收集80例维吾尔族BPH患者和40例健康者外周血标本,应用PCR和直接测序法行AR基因CAG重复长度测定.分析评价CAG重复长度与BPH 的关系.结果BPH组CAG重复次数范围13～30,平均22.78.对照组CAG重复次数范围14～29,平均22.38.两组比较差异无显著性意义(P＞O.05).CAG重复长度＜22和≥22比较,其OR值为1.06(95%CI 0.46～2.48,P＞0.05).CAG重复长度与BPH患者年龄(γ=-0.06,P＞0.05)、国际前列腺症状评分(IPSS)(γ=0.11,P＞0.05)无相关性,而与前列腺的体积相关(γ=-0.26,P＜0.05).在BPH患者,前列腺体积随着CAG重复次数的增加而减小,差异有显著性意义(趋势检验P＜0.05),CAG重复长度≤20与≥25相比,前列腺体积差异有显著性意义(P=0.05).结论AR基因CAG重复长度与BPH腺体的增长有关.【总页数】3页(P634-636)【作者】古力米热;李鸿伟;王军起;那彦群【作者单位】830049,乌鲁木齐市友谊医院泌尿外科;北京大学第一医院泌尿外科;北京大学泌尿外科研究所;北京大学第一医院泌尿外科;北京大学泌尿外科研究所;北京大学第一医院泌尿外科;北京大学泌尿外科研究所【正文语种】中文【中图分类】R697.3【相关文献】1.雄激素受体基因(CAG)n重复多态性与先天性尿道下裂的关系 [J], 徐哲;郑克立;乔慧;谢家伦;李桂生;刘文旭2.雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与肺癌的关系 [J], 刘贵秋;李刚;巩丽;张伟;冯英明;苏勤3.雄激素受体基因外显子一CAG重复序列长度多态性与男性代谢综合征的相关性[J], 杨德玉;姜敏;田进海;李鑫;张旭;于晶晶;李淑亚;黄琦;马荣;王嘉4.雄激素受体基因CAG重复序列多态性与男性急性心肌梗死的关系 [J], 孟冬梅;王林;牛远杰;刘颖颖;刘黎洁5.老年男性雄激素受体基因CAG重复序列长度多态性与代谢综合征的关系 [J], 沈琳辉;崔斌;赵咏桔;颜美珠;林云;巩云霞;吴方因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
雄激素受体对IgG蛋白表达及前列腺癌细胞增殖和迁移的影响
雄激素受体对IgG蛋白表达及前列腺癌细胞增殖和迁移的影响邓煜麟;郭凯;曾颖科;吴凯辉;唐晨;郑少波【摘要】目的研究前列腺癌细胞中雄激素受体(AR)对免疫球蛋白lgG表达的影响,及对前列腺癌细胞增殖、迁移的作用.方法 (1)Western blot检测雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCap与去势抵抗性前列腺癌细胞株PC-3中AR、IgG蛋白的表达;(2)AR基因(pCDNA3.1+)转染PC-3构建AR过表达的PC-3-AR细胞,沉默LNCap中AR基因表达构建LNCap-siAR细胞;Westernblot检测AR及IgG表达量;Q-PCR检测细胞株中IgG mRNA表达量;四氮甲基唑氮、细胞划痕方法检测细胞的增殖及迁移能力.结果 LNCap细胞与PC-3细胞相比较,AR高表达,IgG低表达(P＜0.05).PC-3-AR细胞lgG降低表达(P＜0.01),细胞增殖及迁移能力减弱;LNCap-siAR细胞IgG增高表达(P＜0.01),细胞增殖及迁移能力增强.结论 AR 调控IgG蛋白表达呈负相关并与前列腺癌细胞增殖、迁移能力相关.%Objective To investigate the effect of androgen receptor (AR) on IgG protein expression and the proliferation and migration of prostate cancercells.Methods Western blotting was used to detect the expression of AR protein and IgG in androgen-dependent prostate cancer LNCap cells and castration-resistant prostate cancer PC-3 cells.In AR-overexpressing cells (PC-3-AR cells) established by transfecting PC-3 with AR gene (pCDNA3.1) and LNCap cells with small interfering RNA-mediated AR silencing (LNCap-siAR cells) were analyzed for expressions of AR protein and IgG with Western blotting;the expression of IgG mRNA was detected by Q-PCR,and the cell proliferation and migration were assessed with MTT assay andwound healing assay,respectively.Results Compared with PC-3 cells,LNCap cells expressed a higher level of AR protein and a lower level of IgG (P＜0.05).PC-3-AR cells showed attenuated proliferation and migration with a lowered expression of IgG (P＜0.01),while LNCap-siAR cells showed enhanced proliferation and migration with increased expression of IgG (P ＜0.01).Conclusion The expression of AR is inversely correlated with IgG and is associated with the proliferation and migration of prostate cancer cells in vitro.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2017(037)003【总页数】5页(P388-392)【关键词】前列腺癌;雄激素受体;免疫球蛋白IgG;雄激素依赖性前列腺癌;去势抵抗性前列腺癌【作者】邓煜麟;郭凯;曾颖科;吴凯辉;唐晨;郑少波【作者单位】南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282【正文语种】中文前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤，随着人口老龄化及生活习惯改变，包括中国在内的亚洲地区，前列腺癌发病率呈逐年上升趋势，已位居该地区泌尿系肿瘤的第2位［1］。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
#论著#前列腺癌与雄激素受体基因(CAG)n 重复多态性的关系王钢 陈光椿 王晓慧 夏冰 张金山 卢建=摘要> 目的 探讨前列腺癌(PC)与雄激素受体(AR)基因(CAG)n 重复多态性的关系。
方法 应用DNA 双链循环测序方法对34例PC 组织与癌旁正常组织、2例PC 患者外周血白细胞内的A R 基因(CAG)n 重复数进行测定。
结果 同一PC 患者的癌组织与癌旁正常组织(CA G)n 重复数相同;36例患者癌组织A R 基因(CAG)n 呈重复多态性,平均20.06,显著低于正常组织,差别有显著性意义(P <0.05);不同分化程度的癌组织(CAG)n 重复数差别无显著性意义(P >0.05)。
结论 A R 基因(CAG)n 重复数改变的体细胞突变在PC 癌细胞中罕见,该重复数的减少可能与PC 发病相关。
=关键词> 前列腺肿瘤; 癌; 受体,雄激素; 基因Study on the polymorphism of (C AG)n repeats within androgen receptor gene in patients with prostate cancerWA N G Gang ,CH EN Guangchun,WA N G X iaohui,et al.Dep ar tment of Pathop hysiology ,Second M illitary M edical University ,Shanghai 200433,China=Abstract > Objective T o study t he relationship between polymorphic (CAG)n repeats of androgen r eceptor(A R)gene and occurrence o f prostate cancer (P C). Methods (CA G)n repeats of both malig -nant cells and adjacent nonmalignant cells from 34paraffin -embedded PCs,and that of peripheral blood cells from 2PC patients w ere assessed using dsDN A cycle sequencing. Results T he number of (CAG )n re -peats in malignant cells w as equal to that in adjacent nonmalig nant cells from the same par affin -embedded PC;the mean of (CAG)n r epeats in the 36P C patients was 20.06w hich w as sig nificantly smaller than t hat of normal men (P <0.05),althoug h no significant difference in t he po lymorphic distributio n of (CA G)n was found among various grades of PC (P >0.05). Conclusions Shortening of (CAG )n re -peats w ithin AR gene may be associated with the occurrence of PC.=Key words > Prostate neoplasms; Carcinoma; R eceptor,androg en; G enes基金项目:国家自然科学基金(39670300)作者单位:200433上海,第二军医大学病理生理学教研室前列腺癌(PC)为雄激素依赖性肿瘤,雄激素受体(AR)作为介导雄激素生物学效应的关键大分子在PC 的发生、发展过程中有重要地位。
AR 由位于X 染色体q 11-12的单拷贝AR 基因编码,后者含有8个外显子和7个内含子。
其中第一外显子内含有(CAG)n 三核苷酸重复/微卫星序列,该重复序列在人群中呈现出多态性[1]。
近年来研究发现,该多态性重复序列与PC 发病之间存在相关性[2,3],但也有不同结论[4]。
我们在研究了中国正常男性AR 基因(CAG)n 多态性的基础上[5],对该重复多态性与PC 发病之间的关系进行探讨。
材料与方法一、试剂C -32P -ATP 系北京亚辉医学工程公司产品,DNA 测序试剂盒为美国Epicenter 公司产品。
二、标本34例PC 病理石蜡切片标本及2例PC 患者外周血标本,病理诊断为浸润性腺癌。
其中高分化8例,中分化13例,低分化15例。
三、方法1.组织细胞DNA 提取:石蜡切片经HE 染色后在显微镜下划分开癌组织和癌旁正常组织,以此为参照,将同份标本中未染色切片中的癌组织和癌旁正常组织分别刮至1.5ml Eppendorf 管内,按文献[6]的方法进行组织DNA 的粗提;用酚-氯仿法抽提PC 患者外周血白细胞基因组的DNA 。
2.AR 基因(CAG)n 的PCR 扩增、测序:参照文献方法[7],在(CAG)n 两侧合成5.引物(5.-CGC -CTGT TGAACT CTTCTGAGC -3.)和3.引物(5.-GCT GTGAAGGTTGCTGTTCCT C -3.),热启动PCR 方法扩增(CAG)n 序列;纯化和回收扩增产物,按测序试剂盒说明书对(CAG)n 进行双链DNA 循环测序。
3.统计学处理:采用秩和检验结 果一、36例PC 患者(CAG)n 重复数的测定结果(表1)表1显示,36例PC 组织AR 基因(CAG)n 重复呈多态性,重复数多为21(23/36),平均20.06。
表1 36例PC 组织标本AR 基因中(CAG)n 重复数目分化程度例数(CAG)n 161819202122高分化8010070中分化13010381低分化15501081合计365213232二、PC 组织和癌旁组织(CAG)n 重复数的比较34例PC 组织与癌旁组织的(CAG)n 重复数均相同,未发现肿瘤组织存在(CAG)n 数目改变的体细胞突变(somatic mutation)。
图1为2例低分化PC 石蜡切片癌组织AR 基因(CAG)n 重复序列的测序结果。
三、PC 组织与正常组织之间AR 基因(CAG)n 重复多态性的比较正常组织AR 基因的(CAG)n 重复数以22为最多[5],平均21.60;而PC 组织重复数多集中在21,平均20.06(图2)。
统计学分析表明,PC 组织AR 基因(CAG)n 重复数显著低于正常组织,差别有显著性意义(P <0.05);但(CAG)n 重复多态性在不同PC 分化程度之间的差别无显著性意义(P >0.05)。
讨 论图1 2例PC 组织标本中AR 基因(CAG)n 测序结果图2 PC 组织与正常组织之间AR 基因(CAG)n 重复多态性的比较AR 作为介导雄激素生物学效应的关键大分子,与PC 发病的关系正日益引起人们重视。
迄今,人们已在PC 细胞中检测出了多种形式的AR 基因变异,它们可通过改变AR 质量影响雄激素作用的信号转导通路,从而可能在PC 的发生和发展过程中发挥重要作用[8]。
作为一种配体依赖性的核转录因子,AR 的一级结构可分为N 端的转录激活区(transcriptional activation domain,TAD)、居中的DNA 结合区(DNA binding domain,DBD)及C 端的配体结合区(ligand binding domain,LBD)。
与核受体家族中大多数成员相比,AR 的一个显著特点是在其TAD 内含有长度多态性的多聚谷氨酰胺[(Gln)n]片段,它由AR 基因第一外显子中多态性(CAG)n 三核苷酸重复/微卫星序列编码[1]。
分子流行病学研究表明,PC 的发病率存在种族差异,这种差异可能与不同种族人群AR 基因(CAG)n 重复数不同有关。
人群调查研究表明,黑种人体内该重复数最小,白种人居中,亚裔美国人最大,与流行病学调查显示的三者PC 发病率依次由高到低相关[9]。
其次,一些病例对照研究表明,AR 基因中(CAG)n 重复数目越少,PC 的发病风险越大[2],癌组织的分化程度越低[3]。
但Correa -Cerro 等[4]对散发性及家族性PC 病例进行对照研究,结果未发现AR基因(CAG)n的重复多态性与PC发病相关。
因此AR基因(CAG)n重复数减少与PC发病的相关性尚需进一步研究。
本实验室曾建立了一种简便的检测(CAG)n重复数的[A-32P]dCTP掺入不对称PCR)变性PAGE 方法,并用该法初步研究了正常男性AR基因(CAG)n重复多态性,后者以22为最多[5]。
中国人与黑种人、白种人之间(CAG)n重复数的集中趋势不同。
Schoenberg等[10]在1例雄激素不敏感PC患者的癌组织内检测出了(CAG)n重复数减少的体细胞突变。
本实验中我们采用了较为繁琐的PCR-DNA测序法以准确得出PC患者的(CAG)n重复数,并对34例PC石蜡切片中癌组织和癌旁组织同时进行了检测,结果未发现癌细胞中存在该重复序列的体细胞突变。
本实验结果显示,PC患者AR基因(CAG)n重复数显著低于正常男性,提示该重复数减少与PC 的发病有关。
有人认为,(Gln)n数目减少可能赋予AR较强的转录活性,通过增强雄激素对前列腺上皮细胞增殖作用而最终促进PC发病[2,3]。
本实验结果未发现不同分化程度PC的(CAG)n数目有显著性差别,与文献结论不一致[3],可能与本研究诊断标准、样本量有关。
值得提出的是,本实验室在同期工作中利用PCR-SSCP-DNA测序于3例低分化PC石蜡切片组织中分别检测出了3种AR基因点突变: G503T(Gly142Val)、G739C(Asp221H is)[11]及C966A(Ser296Arg)[12],它们均位于AR的N端TAD内,且3例PC组织内的AR基因(CAG)n重复数均为16,远低于正常男性平均值。
最近有文献报道,(CAG)n编码的(Gln)n重复数的减少,可以增强一种引起雄激素不敏感综合征(androgen insen-sitivity syndromes,AIS)的功能缺陷型AR突变体(mtARM780I)的转录激活功能[13]。