荧光产生的机理
荧光基团发光原理
荧光基团发光原理
荧光基团发射原理是一种利用物质能够把外界强烈的电磁波转换成发射较弱的电磁波，从而能够形成荧光发射机理。
荧光是一种特殊状态，物质受到外界特定波长的光的吸收，能量转换的过程中，由一
种能源状态转变到另一种较低能量状态时，物质会发出光（即荧光），从而实现外界能量
的转换。
荧光发射的主要机理有分子和原子两种：
分子型：当分子处于激发态时，受到外界的电磁波的吸收，从能量较高的状态转变到
能量较低的状态，当它从较高能量状态发射光子能量到较低能量状态时，就会产生了荧光
发射，我们就称这个现象为分子型荧光发射。
以上就是荧光基团发射原理的简要介绍，主要包括了：受到外界电磁波的吸收，以及
物质从较高能量状态发射出少量能量到较低能量状态，两种发光机理（分子型和原子型）
等内容。
如果你想学习更多关于荧光发射原理的内容，可以独自进行研究，以深入了解该
现象。
荧光产生机理
荧光产生机理
哎，说起来荧光这玩意儿，简直就是自然界的一大奇观。
你想想看，晚上时分，那些小虫子、宝石啊，甚至有些植物的叶子，都会发出那种绿油油、闪闪烁烁的光。
这光啊，就像是夜空中的星星，神秘又迷人。
其实啊，这荧光的产生，就跟我们人类看电影放烟花似的，关键在于化学反应。
就像是给你放烟花，得有引线、炸药和烟花筒，荧光的产生也有它的“三件宝”——光子、能量和分子。
先说这光子，它是荧光产生的“引线”，负责把能量传递给分子。
分子呢，就像是放烟花时的炸药，储存着能量。
当光子来了，它就跟分子说：“嘿，给你点能量！”于是分子就变得兴奋起来，开始振动、旋转。
这个过程中，分子吸收了光子的能量，变得异常活跃。
但是，分子可不是那么好哄的，它得找个地方发泄一下这股能量。
于是，它就开始释放光子，这个过程就叫作“荧光发射”。
这光子就像是一串串小火花，从分子中迸发出来，形成我们看到的荧光。
不过，这个过程可不像放烟花那么简单。
有时候，分子可能释放的光子太少了，你看不见；有时候，分子释放的光子太多，那就成了白光，不再是荧光了。
这就像放烟花，放的太急了，火药都没烧完，那烟花就灭了。
说到底，荧光这东西，就是分子在能量的推动下，释放光子的过程。
关键是要控制好这个“度”，才能看到那迷人的荧光。
哎呀，你这么一听，是不是觉得荧光的产生还挺有意思的？下次晚上散步的时
候，不妨多留意一下那些发出荧光的小虫子、宝石和植物，它们的“表演”可都是自然界最真实的“光影秀”哦！。
碳点发射荧光的机理和原理
碳点发射荧光的机理和原理引言：碳点作为一种新型纳米材料，具有极高的应用潜力。
其在生物医学领域、光电子学领域等方面都有广泛的应用。
其中，碳点的荧光性质是其应用的重要基础。
本文将探讨碳点发射荧光的机理和原理。
一、碳点的结构和性质碳点是由碳元素组成的纳米颗粒，其直径一般在1到10纳米之间。
碳点可以分为有机碳点和无机碳点两类。
有机碳点主要由碳、氢、氧等元素组成，而无机碳点则由碳、硅、氮等元素组成。
碳点具有良好的光学性质，如发射荧光、磷光等。
二、碳点发射荧光的机理碳点发射荧光的机理主要包括两种：量子限域效应和表面缺陷效应。
1. 量子限域效应量子限域效应是碳点发射荧光的重要机理之一。
碳点的尺寸非常小，因此其表面积较大，而且碳点表面具有很高的能量状态。
当外界能量作用于碳点表面时，碳点表面的能级会发生改变，从而导致电子的激发和跃迁。
在跃迁过程中，碳点会发射出特定波长的荧光。
2. 表面缺陷效应表面缺陷效应也是碳点发射荧光的重要机理之一。
在制备碳点的过程中，由于制备条件的不同，碳点表面往往会存在不同程度的缺陷。
这些缺陷可以提供额外的能级，从而促使碳点在受到激发时发射荧光。
三、碳点发射荧光的原理碳点发射荧光的原理主要包括两个方面：能级结构和能量传递。
1. 能级结构碳点的能级结构是决定其发射荧光特性的关键。
碳点的能级结构是由其内部的碳原子排布和表面的官能团组成的。
这些能级可以对外界的能量进行吸收和释放，从而产生发射荧光的现象。
2. 能量传递碳点发射荧光的过程中，能量的传递是一个重要的环节。
当碳点受到外界能量的激发时，其能量会从激发态传递到基态。
在这个过程中，能量的传递会通过碳点内部的能级结构进行，最终导致荧光的发射。
四、碳点发射荧光的应用碳点发射荧光具有许多应用价值。
在生物医学领域，碳点可以作为生物标记物，用于细胞成像、药物传递等方面；在光电子学领域，碳点可以用于制备发光二极管、激光器等光电器件。
结论：碳点发射荧光的机理和原理主要包括量子限域效应和表面缺陷效应。
荧光光度分析法
26
浓度测定 1、如何进行校准和浓度测定 如何进行校准和浓度测定 按以下步骤，调整仪器，以便获取数据 第1步： 点击视图中的开始 开始(Stare)按扭，指向程序 开始 程序 (Program)→Cary Eclipse ， 然后选择扫描 扫描(Scan)即显示扫描功能框。 扫描 第2步： 点击设置 设置(Set up)，进入设置 设置(Set up)对话框， 设置 设置 指定检测方法的参数
荧光光度分析法
1
一、基本原理
1.荧光的定义 1.荧光的定义 在紫外光或波长较短的可见光照射 后，一些物质会发射出比入射光波长更 --------荧光 荧光。 长的光 --------荧光。以测量荧光的强度 和波长为基础的分析方法叫做荧光光度 和波长为基础的分析方法叫做荧光光度 分析法。 分析法。
2
4
分子内的光物理过程
VR 2 1 v=0 S2 2 1 v=0 S1 ic VR isc
A1、A2. 吸收 、 F. 荧光 P. 磷光 ic. 内转化 isc. 体系间窜跃 VR. 振动松弛 VR 2 1 v=0 T1
ic A2 A1 F P
isc
3 2 1 v=0 S0
5
6
3. 荧光强度与浓度的关系
11
二、Varian Cary Eclipse 荧光 分光光度计的特点
1. 硬件及硬件的主要特点 ⑴ 高能闪烁光源-----氙灯 高能闪烁光源-----氙灯 由于荧光物质的荧光强度与 激发光源的强度成正比，Eclipse采用了无须预 激发光源的强度成正比，Eclipse采用了无须预 耗能12 但脉冲输出能量却高达75 热、耗能12 W 但脉冲输出能量却高达75 KW 的闪烁氙 Xe） 并利用电子技术控制, 的闪烁氙（Xe）灯，并利用电子技术控制,使其 仅在发出测量指令后才闪烁。 仅在发出测量指令后才闪烁。这一设计给荧光 分析者带来极大的方便. 分析者带来极大的方便.
三种原子光谱(发射,吸收与荧光)产生机理
一、概述原子光谱是研究原子内部结构和原子间相互作用的重要技术手段，也是物质分析学、化学分析学、化学物理学和光谱学等领域的重要研究内容。
原子光谱包括发射光谱、吸收光谱和荧光光谱，它们是由原子在外界作用下产生的具有特殊波长和频率的光谱。
发射光谱是原子从高能级跃迁到低能级时产生的谱线，吸收光谱是原子吸收外界光子导致能级跃迁的谱线，荧光光谱则是原子在受激激发后再跃迁回基态时放出的光谱。
本文将重点介绍三种原子光谱的产生机理。
二、发射光谱产生机理1. 激发当原子受到能量激发时，电子从基态跃迁到高能级，此时原子处于激发态，处于不稳定状态。
2. 跃迁在激发态下，原子的电子会趋向于迅速由高能级跃迁到低能级，这个跃迁的过程伴随着光子的发射。
3. 能级结构原子内部的能级结构决定了发射光谱的特性，不同元素具有不同的能级结构，因而发射光谱对于元素的鉴定和定量分析具有重要意义。
三、吸收光谱产生机理1. 能级跃迁吸收光谱是由原子吸收外界光子导致能级跃迁而产生的，能级跃迁的规律与波长和频率的关系可以用于确定原子的能级结构和特性。
2. 共振吸收当外界光子与原子的能级跃迁能量匹配时，发生共振吸收现象，这种吸收现象对于不同元素的吸收光谱研究具有重要意义。
3. 吸收光谱谱线吸收光谱谱线的位置和强度反映了原子吸收外界光子的能力，可以用于分析样品中的元素及其含量。
四、荧光光谱产生机理1. 受激激发荧光光谱是原子在受到外界激发能量后处于激发态的荧光物质产生的光谱，激发的能量可以是光子或者其他激发源。
2. 荧光发射激发后的原子处于不稳定状态，随后电子会从激发态跃迁回到基态，并伴随着荧光发射。
3. 荧光光谱应用荧光光谱在物质分析、生物学、医学和环境保护等领域有着广泛的应用，对于研究物质的结构和性质具有重要的意义。
五、总结发射光谱、吸收光谱和荧光光谱是三种重要的原子光谱，它们具有独特的产生机理和应用价值。
通过对三种原子光谱的产生机理的深入理解，不仅可以帮助人们认识原子内部的结构和性质，还有助于解决实际问题和促进科学技术的发展。
荧光发光原理
荧光发光原理
荧光发光是一种特殊的发光现象，它在自然界和人工制品中都
有广泛的应用。
荧光发光的原理是指某些物质在受到激发后，能够
发出可见光的现象。
在这篇文档中，我们将深入探讨荧光发光的原理，以及它在日常生活和科学研究中的应用。
荧光发光的原理主要涉及到激发和发射两个过程。
当某种物质
受到能量激发时，其内部的电子会跃迁到一个较高能级的轨道上。
这种激发状态并不稳定，因此电子会很快返回到较低能级的轨道上。
在这个过程中，电子释放出多余的能量，这些能量以光子的形式发出，从而产生可见光。
这就是荧光发光的基本原理。
荧光发光的原理可以通过一个简单的实验来加以验证。
我们可
以将一些荧光粉撒在紫外线灯下，当紫外线照射到荧光粉上时，荧
光粉就会发出明亮的光。
这是因为紫外线的能量激发了荧光粉中的
电子，导致它们发出可见光。
这个实验直观地展示了荧光发光的原理。
荧光发光的原理在许多领域都有着重要的应用。
在照明领域，
荧光灯就是利用荧光发光原理制成的。
荧光灯的管内涂有荧光粉，
当灯丝发出紫外线时，荧光粉就会发出可见光，从而实现照明的效果。
此外，荧光发光还被应用在荧光标记、生物医学成像、夜光材料等领域，发挥着重要的作用。
总之，荧光发光是一种重要的发光现象，其原理涉及到能量激发和光子发射两个过程。
通过实验证实了荧光发光的原理，我们也了解了它在照明、标记和医学成像等领域的广泛应用。
希望本文能够帮助读者更加深入地理解荧光发光的原理及其应用。
荧光,热激活延迟荧光,磷光机理和各自优点
荧光，热激活延迟荧光，磷光机理和各自优点荧光、热激活延迟荧光和磷光是三种不同的发光机理，它们各自具有独特的优点。
以下是对这三种机理的详细介绍：1. 荧光：定义：荧光是一种常见的发光现象，发生在某些物质吸收光能后。
当特定波长的光线照射到某些物质上时，物质内部的电子从基态跃迁至激发态，然后从激发态返回到基态，释放出光子，产生荧光。
优点：荧光材料具有高亮度、低能耗、长寿命等优点，因此在显示器、照明、生物成像等领域得到广泛应用。
此外，荧光材料还可以通过不同的颜色和标记技术进行定制，具有较高的灵活性和可调性。
2. 热激活延迟荧光：定义：热激活延迟荧光（TADF）是一种特殊的荧光现象，发生在某些具有较低的单线态和三线态能隙的有机分子中。
这些分子在受到光激发后，能够将部分激发能以热量形式散失，避免非辐射衰减，从而提高荧光量子效率。
热激活延迟荧光材料通常需要较高的温度或光照射条件才能激发，但一旦激发，它们可以持续发出亮丽的荧光。
优点：TADF材料具有高荧光量子效率、低成本、易于合成等优点。
此外，TADF材料在蓝光和绿光区域的发射光谱较窄，有利于实现高色纯度和高显色指数的照明和显示应用。
由于这些优点，TADF材料在有机电致发光器件（OLED）等领域具有广阔的应用前景。
3. 磷光：定义：磷光是一种长寿命的发光现象，发生在某些具有多重最低激发态的物质中。
当这些物质受到光激发后，电子通过不同的能级跃迁进入不同的激发态，然后通过自旋轨道耦合作用返回到基态，释放出磷光。
磷光的寿命通常较长，可以达到毫秒级别，因此可以用于时间分辨实验和生物成像等应用。
优点：磷光材料具有高亮度和长寿命等优点，因此在显示器、生物成像和传感器等领域得到广泛应用。
此外，磷光材料还可以通过不同的掺杂技术进行定制，实现高性能和多功能的应用。
由于磷光材料在长波长区域具有较强的吸收和发射能力，因此它们在红外光谱区域的应用也备受关注。
综上所述，荧光、热激活延迟荧光和磷光各自具有独特的优点，可以应用于不同的领域。
荧光发光机理
荧光发光机理
1、荧光发光机理：某些物质被一定波长的光照射时, 会在较短时间内发射出波长比入射光长的光, 这种光就称为荧光。
2、荧光，汉语词语。
又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。
当某种常温物质经某种波长的入射光（通常是紫外线或X射线）照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的波长长的出射光（通常波长在可见光波段）；很多荧光物质一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。
具有这种性质的出射光就被称之为荧光。
另外有一些物质在入射光撤去后仍能较长时间发光，这种现象称为余辉。
在日常生活中，人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光，而不去仔细追究和区分其发光原理。
也指温度(不是色温)低的冷光。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
荧光产生的机理:（荧光产生对象:可以是原子也可以是分子）光进入某种物质后一部分能量被吸收，光能转移给分子，一部分结构的分子只吸收一定波长的辐射，分子吸收电磁波，从最低激发态重新发射紫外线或可见光。
荧光是指光致发光，荧光物质吸收外界高能光辐射（如紫外、X射线、日光短波段）后，导致内部电子能级跃迁，重新释放出低能长波光，既为荧光。
由于吸收光子与释放光子能量有差异，某些情况下，外界高能光辐射停止后,释放低能长波光过程仍会持续一段时间。
荧光技术用于研究生物医学样品的主要参数：荧光强度（发射荧光的强弱）、量子产率（发射光子数或吸收光子数）、荧光偏振度、荧光寿命（衰减为原来激发时最大光强都的1/e所需要的时间）荧光偏振的意义是什么？1//二1丄，P二0,自然光，荧光分子运动很快，取向随机。
（稀溶液中的荧光分子）I//或I丄为0 , P二±1,平面偏振光，荧光分子运动很慢或取向有序的悄况。
I//HI丄H 0 ,0<P<l,生物大分子的荧光属于这种情况。
荧光技术的应用：采用荧光标记的链终止剂所得到的DNA测序图,DNA探测:澳化乙唳是一种荧光染料，当它在溶液中自山改变构型时，只能发出很弱的荧光；当它嵌入核酸双链的碱基对之间与DYA分子结合后，便可以发出很强的荧光。
荧光探针、物质检测、物质分析（DNA、蛋白质）、检测分子间的结合程度、大分子内基团间或分子间距离的测定、膜生物物理研究物质的定性:不同的荧光物质有不同的激发光谱和发射光谱，因此可用荧光进行物质的鉴别。
与吸收光谱法相比,荧光法具有更高的选择性。
荧光的激发光谱、发射光谱、量子产率和荧光寿命等参数不仅和分子内荧光发色基团的本身结构有关，而且还强烈地依赖于发色团周用的环境，即对周用环境十分敬感。
利用此特点可通过测定上述有关荧光参数的变化来研究荧光发色团所在部位的微环境的特征及其变化。
在此研究中，除了利用生物大分子本身具有的荧光发色团（如色氨酸、酪氨酸、鸟昔酸等，此类荧光称为内源荧光）以外，可将一些特殊的荧光染料分子共价地结合或吸附在生物大分子的某一部位，通过测定该染料分子的荧光特性变化来研究生物大分子,这种染料分子被称为“荧光探针”，它们发出的荧光一般称为外源荧光。
荧光探针的应用，大大地开拓了荧光技术在分子生物学中的应用范围。
荧光蛋口：GFP蛋白：晶体结构：B罐方式发光机理:生物发色团，在氧化状态下产生荧光能够释放出一定波长的光，能够很好的运用于活体动物内脏的深度成像1、液态红外光谱是否需要水作溶剂?为什么？不需要，因为水是极性溶剂，可能跟样品形成氢键,带来额外的红外吸收，通常在极性溶剂中,溶质分子的极性基团的伸缩振动频率随溶剂极性的增加而向低波数方向移动，并且强度增大。
水本身有红外吸收，会严重干扰样品谱，而且会侵蚀吸收池的盐窗。
因此，在红外光谱测定中，应尽量采用非极性的溶剂。
2、线性分子的振动自山度为什么是3N-5?红外光谱中是否能够观察到所有振动自山度对应的红外吸收峰？为什么？设分子曲n个原子组成,每个原子在空间都有3个自山度，原子在空间的位置可以用直角坐标中的3个坐标x、y、z表示,因此,n个原子组成的分子总共应有3n 个自由度，即3n种运动状态。
但在这3n种运动状态中，包括3个整个分子的质心沿x、y、z 方向平移运动和3个整个分子绕x、y、z轴的转动运动。
这6种运动都不是分子振动，因此，振动形式应有（3n-6）种。
但对于直线型分子，若贯穿所有原子的轴是在x方向，则整个分子只能绕y、z轴转动，因此，直线性分子的振动形式为（3n-5）种。
每种简正振动都有其特定的振动频率，似乎都应有相应的红外吸收带。
实际上, 绝大多数化合物在红外光谱图上出现的峰数远小于理论上计算的振动数，这是山如下原因引起的：（1）没有偶极矩变化的振动，不产生红外吸收；（2）相同频率的振动吸收重叠，即简并；（3）仪器不能区别那些频率十分接近的振动，或吸收带很弱,仪器检测不出；（4）有些吸收带落在仪器检测范围之外。
例如,线型分子二氧化碳在理论上计算其基本振动数为4,共有4个振动形式，在红外图谱上有4个吸收峰。
但在实际红外图谱中，只出现667 cm-1和2349 cm-1 两个基频吸收峰。
这是因为对称伸缩振动偶极矩变化为零，不产生吸收，而面内变形和面外变形振动的吸收频率完全一样，发生简并。
基本振动吸收峰数少于振动自山度的原因：（谱带）简并:不同振动形式的振动频率相同，其吸收峰在红外吸收光谱的同一位置岀现。
红外非活性振动：不能引起偶极矩变化，不吸收红外线的振动。
3、C02的红外光谱中能够观察到儿个红外吸收峰?为什么？两个，一个是反对称伸缩振动的吸收峰，一个是变形振动的吸收峰，本应该有四个，但对称伸缩振动的偶极矩变化为零,不产生吸收;而变形振动包括面内变形和面外变形，他们的吸收频率一样,所以重合了。
4、拉曼光谱中为什么Stokes线的强度远大于反Stokes线？（什么是stokes 线）先解释后作答名词解释S是从基态到激发态跃迁，而反S是有激发态到基态跃迁，反斯托克斯线的强度远小于斯托克斯线的强度，处于振动基态上的粒子数远大于处于振动激发态上的粒子数。
散射光中除了与入射光原有角频率相同的瑞利散射线外，在两侧还有角频率为的一系列散射线。
长波部分:Stokes线；短波部分:anti-Stokes线j3 3 +0说明X射线用于解析蛋口质空间结构的原理。
晶体可看作三维立体光栅，原子间距为儿个埃，与X射线波长接近，衍射现象明显，利用X射线的波长和蛋口质晶体中原子的大小及原子间距数量级的特性解析晶体的结构，当能量很高的X射线照射晶体各层面的原子时，原子中的电子将发生受迫振荡,成为衍射中心向各个方向发射子波，这些子波相干叠加，就形成衍射图样。
每种晶体所产生的衍射花样都反映出晶体内部的原子分布规律。
衍射线在空间的分布——晶胞的大小、形状和位向衍射线束的强度一一原子的种类及在晶胞中的位置相邻两个晶面反射X射线干涉加强的条件：（0 :掠射角，布拉格方程）X-Ray晶体衍射蛋口质三维结构测定的主要方法优点:分辨率高，能够精确确定生物大分子中各原子的坐标、键长、键角，给出其分子结构和构型，确定活性中心位置和结构缺点：只能测定单晶，反应静态结构信息，无法测定溶液中的信息解析一个未知蛋口质空间结构的实验过程。
首先获取样品，之后制备蛋口质结晶（X-ray晶体衍射只能测定单晶，反应静态结构信息，无法测定溶液中的信息），晶体解析，处理收集衍射数据，位相求解,模型建立和修正。
1 ：核自旋本身的磁场，在外加磁场下重新排列，大多数核自旋会处于低能态。
我们额外施加电磁场来干涉低能态的核自旋转向高能态，再回到平衡态便会释放出射频,这就是NMR讯号。
2:核磁共振现象来源于原子核的自旋角动量在外加磁场作用下的进动。
根据量子力学原理，原子核与电子一样，也具有自旋角动量，其自旋角动量的具体数值山原子核的自旋量子数决定，实验结果显示，不同类型的原子核自旋量子数也不同：质子数和中子数均为偶数的原子核，自旋量子数为0质量数为奇数的原子核，自旋量子数为半整数质量数为偶数，质子数与中子数为奇数的原子核，自旋量子数为整数3:根据量子力学原理,原子核磁矩与外加磁场之间的夹角并不是连续分布的，而是山原子核的磁量子数决定的，原子核磁矩的方向只能在这些磁量子数之间跳跃，而不能平滑的变化,这样就形成了一系列的能级。
当原子核在外加磁场中接受其他来源的能量输入后，就会发生能级跃迁，也就是原子核磁矩与外加磁场的夹角会发生变化。
这种能级跃迁是获取核磁共振信号的基础。
为了让原子核自旋的进动发生能级跃迁，需要为原子核提供跃迁所需要的能量, 这一能量通常是通过外加射频场来提供的。
根据物理学原理当外加射频场的频率与原子核自旋进动的频率相同的时候，射频场的能量才能够有效地被原子核吸收，为能级跃迁提供助力。
因此某种特定的原子核,在给定的外加磁场中，只吸收某一特定频率射频场提供的能量，这样就形成了一个核磁共振信号。
NMR中外加磁场的作用？请详细说明4:自旋核在外磁场中的自旋取向与能级分裂：自旋核在外磁场中自旋的同时还会有进动，产生附加磁矩，进动时有一定的频率,03称为拉摩尔频率。
自旋核的角速度0v，进动频率03与外加磁场强度H 0的关系为：0002H y Ji v 3二二，y是各种核的特征常数，称为磁旋比，各种原子核有它的固定值。
产生的附加磁矩有不同的方式，使核具有不同的能量状态，从而导致能级分裂NMR中提高外加磁场的强度的作用？5:（提高外磁场，抵消电子云屏蔽）提高外磁场强度和降低工作温度可使低能态的核数相应增加，从而提高NMR信号的灵敏度。
每个原子核都被不断运动着的电子云所包围。
当氢核处于磁场中时，在外加磁场的作用下，电子的运动产生感应磁场，其方向与外加磁场相反，因而外围电子云起到对抗磁场的作用，这种对抗磁场的作用称为屏蔽作用。
山于核外电子云的屏蔽作用，使原子核实际受到的磁场作用减小，为了使氢核发生共振,必须增加外磁场的强度以抵消电子云的屏蔽作用。
NMR通常应用哪些参量?各有何应用？【参量指的是什么？】nH 丫v200二化学位移（核外电子云的屏蔽作用使得外界磁场对原子核的磁场作用减小，要产生核磁共振需增加外磁场强度,外磁场强度的增加现象称之为化学位移）屏蔽作用的大小与核外电子云密切有关，电子云密度越大，屏蔽作用也越大，共振时所需的外加磁场强度也越强。
而电子云密度乂和氢核所处的化学环境有关，与相邻的基团是斥电子的还是吸电子等因素有关分子中电子云对外加磁场强度的影响，会导致分子中不同位置原子核对不同频率的射频场敬感，从而导致核磁共振信号的差异,这种差异便是通过核磁共振解析分子结构的基础。
原子核附近化学键和电子云的分布状况称为该原子核的化学环境，山于化学环境影响导致的核磁共振信号频率位置的变化称为该原子核的化学位移。
弛豫:高能态的核以非辐射的方式释放能量回到低能态的过程。
谱线宽度，它与弛豫时间成反比。
可见，弛豫决定于处于高能级核寿命。
弛豫时间长，核磁共振信号窄；反之，谱线宽。
耦合常数是化学位移之外核磁共振谱提供的的另一个重要信息，所谓耦合指的是临近原子核自旋角动量的相互影响，这种原子核自旋角动量的相互作用会改变原子核自旋在外磁场中进动的能级分布状况，造成能级的裂分，进而造成NMR谱图中的信号峰形状发生变化，通过解析这些峰形的变化，可以推测出分子结构中各原子之间的连接关系。
信号强度是核磁共振谱的第三个重要信息，处于相同化学环境的原子核在核磁共振谱中会显示为同一个信号峰，通过解析信号峰的强度可以获知这些原子核的数量,从而为分子结构的解析提供重要信息。
表征信号峰强度的是信号峰的曲线下面积积分。
1、光学显微镜（暗场、相差、共聚焦）暗场:暗场显微镜技术是利用斜射照明法阻挡透过标本细节的直射光，以反射光和衍射光来观察标本。