实习报告：动物胚胎移植技术
胚胎培养技术实验报告
一、实验目的1. 掌握胚胎培养的基本原理和操作技术。
2. 学习胚胎在体外培养过程中的生理变化和调控方法。
3. 熟悉胚胎培养设备的操作和维护。
二、实验原理胚胎培养技术是指将胚胎在体外人工条件下进行培养，以模拟胚胎在母体内的发育环境，从而研究胚胎的发育规律和生理特性。
该技术广泛应用于动物繁殖、医学研究等领域。
三、实验材料与设备1. 实验材料：受精卵、培养液、胎牛血清、激素、显微镜、移液器、培养箱等。
2. 实验设备：超净工作台、CO2培养箱、显微镜、移液器、培养皿等。
四、实验步骤1. 准备工作- 配制培养液：按照说明书配制培养液，加入胎牛血清、激素等成分。
- 消毒：将培养皿、移液器等实验器材进行高压蒸汽灭菌或紫外线消毒。
- 预热：将培养箱预热至37℃，并保持CO2浓度在5%。
2. 胚胎收集与处理- 收集受精卵：从供体母牛卵巢中取出卵母细胞，与精子进行体外受精，得到受精卵。
- 移植受精卵：将受精卵移植到受体母牛子宫内，等待胚胎发育。
3. 胚胎培养- 将胚胎移入培养皿中，加入适量的培养液。
- 将培养皿放入CO2培养箱中，培养条件为37℃、5%CO2。
- 观察胚胎发育情况，包括胚胎形态、细胞分裂、胚胎球形成等。
4. 数据记录与分析- 定期观察并记录胚胎发育情况，包括胚胎形态、细胞分裂、胚胎球形成等。
- 分析胚胎发育过程中细胞形态、细胞分裂、胚胎球形成等生理变化。
5. 实验结果- 在培养过程中，观察到胚胎细胞逐渐分裂，形成胚胎球。
- 部分胚胎球进一步发育，形成囊胚。
- 通过观察和记录，分析了胚胎发育过程中细胞形态、细胞分裂、胚胎球形成等生理变化。
五、实验结果与分析1. 在培养过程中，观察到胚胎细胞逐渐分裂，形成胚胎球。
2. 部分胚胎球进一步发育，形成囊胚。
3. 通过观察和记录，分析了胚胎发育过程中细胞形态、细胞分裂、胚胎球形成等生理变化。
4. 实验结果表明，胚胎培养技术能够模拟胚胎在母体内的发育环境，促进胚胎的发育。
动物繁殖实训报告
一、实习背景随着我国畜牧业的快速发展，动物繁殖技术在畜牧业生产中扮演着越来越重要的角色。
为了提高我的专业技能，加深对动物繁殖理论知识的理解，我参加了为期两周的动物繁殖实训。
本次实训旨在通过实际操作，掌握动物繁殖的基本技术，提高解决实际问题的能力。
二、实习目的1. 理解动物繁殖的基本原理和规律。
2. 掌握动物繁殖技术操作方法。
3. 培养动手能力和团队协作精神。
4. 提高解决实际问题的能力。
三、实习内容本次实训主要分为以下几个部分：1. 理论学习：通过学习动物繁殖学、动物生理学等相关理论知识，为实际操作打下基础。
2. 实验室操作：包括动物生殖器官的解剖、精液品质检测、人工授精技术、胚胎移植技术等。
3. 生产实践：参观养殖场，了解牛、羊等动物的繁殖过程，学习养殖场的繁殖管理。
4. 课题研究：选择一个与动物繁殖相关的课题，进行文献查阅、实验设计、数据收集和分析。
四、实习过程1. 理论学习：在实习初期，我们系统地学习了动物繁殖学、动物生理学等相关理论知识，为后续实践操作奠定了基础。
2. 实验室操作：在实验室，我们进行了动物生殖器官的解剖、精液品质检测、人工授精技术、胚胎移植技术等实验操作。
在老师的指导下，我们掌握了各项技术要领，并学会了使用相关仪器设备。
3. 生产实践：我们参观了养殖场，了解了牛、羊等动物的繁殖过程。
通过观察和学习，我们掌握了养殖场的繁殖管理方法，了解了繁殖过程中的常见问题及解决措施。
4. 课题研究：我们选择了“胚胎移植技术对奶牛繁殖效率的影响”这一课题。
在文献查阅、实验设计、数据收集和分析过程中，我们掌握了课题研究的基本方法，提高了自己的科研能力。
五、实习成果1. 掌握了动物繁殖的基本原理和规律。
2. 熟练掌握了人工授精、胚胎移植等繁殖技术操作方法。
3. 提高了动手能力和团队协作精神。
4. 培养了科研意识和能力。
六、实习体会1. 动物繁殖技术是畜牧业生产的重要环节，对提高畜牧业经济效益具有重要意义。
胚胎移植牛脑部实验报告
一、实验背景随着生物技术领域的不断发展，胚胎移植技术已经广泛应用于畜牧业生产中。
近年来，关于胚胎移植后胚胎发育与受体母体相互作用的研究逐渐增多。
本研究旨在探讨胚胎移植过程中，胚胎与受体母牛脑部的相互作用及其对胚胎发育的影响。
二、实验材料与方法1. 实验动物：选取健康、发育正常的荷斯坦奶牛作为供体，选取年龄、体重、健康状况相似的荷斯坦奶牛作为受体。
2. 实验分组：将供体和受体奶牛随机分为三组，每组5头。
3. 胚胎采集：采用超排卵技术采集供体奶牛的卵母细胞，体外受精后培养至桑椹胚期，进行胚胎移植。
4. 脑部组织采集：在胚胎移植后第5天、第10天、第15天分别对受体奶牛进行麻醉，采集脑部组织样本。
5. 实验方法：a. 采用免疫组化技术检测受体奶牛脑部组织中与胚胎发育相关的基因表达。
b. 利用实时荧光定量PCR技术检测受体奶牛脑部组织中相关基因的mRNA表达水平。
c. 采用蛋白质印迹技术检测受体奶牛脑部组织中相关蛋白的表达水平。
三、实验结果1. 胚胎移植后，受体奶牛脑部组织中与胚胎发育相关的基因表达水平显著升高。
2. 实时荧光定量PCR结果显示，受体奶牛脑部组织中相关基因的mRNA表达水平在胚胎移植后第5天、第10天、第15天均显著升高。
3. 蛋白质印迹结果显示，受体奶牛脑部组织中相关蛋白的表达水平在胚胎移植后第5天、第10天、第15天均显著升高。
四、讨论与分析1. 胚胎移植过程中，受体奶牛脑部组织中与胚胎发育相关的基因表达水平显著升高，表明胚胎移植对受体奶牛脑部组织产生了显著影响。
2. 实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示，受体奶牛脑部组织中相关基因和蛋白的表达水平在胚胎移植后第5天、第10天、第15天均显著升高，提示胚胎移植后受体奶牛脑部组织可能发生了适应性改变，以适应胚胎的发育需求。
3. 本研究结果表明，胚胎移植过程中，受体奶牛脑部组织与胚胎之间可能存在相互作用，这种相互作用可能对胚胎发育产生重要影响。
小鼠胚胎移植
小鼠胚胎移植海南医学院10级生物技术实习论文——开题报告学号：100301145姓名：黄英礼专业：生物技术表1 海南医学院毕业设计（论文）任务书论文题目小鼠胚胎移植及品系鉴定学生姓名黄英礼专业生物技术班级10级本科指导教师姓名马燕琳专业联系方式137******** 实习单位海南医学院附属医院生殖中心一、毕业设计（论文）主要内容1、研究目标：掌握胚胎移植技术，并在此基础上对Mef2C基因敲除小鼠进行品系鉴定。
2、研究内容：（一）胚胎和受体鼠的准备.将经超数排卵的Mef2C基因敲除雌鼠与正常ICR雄鼠交配见栓后1.5d取胚并冷冻保存。
准备正常ICR雄鼠进行结扎手术作不育雄鼠，挑选与其交配见栓的2.5d ICR假孕雌鼠作为受体鼠。
（二）胚胎移植.将1.5d胚胎解冻复苏，培养3.5d后移植进入受体鼠子宫中着床发育。
（三）繁殖小鼠尾巴的DNA提取纯化及PCR检测.对移植鼠繁殖的小鼠进行DNA检测，设计阴阳性对照，结果分析鉴定小鼠品系。
二、毕业设计的主要技术指标1、胚胎工程技术2、胚胎的培养、冻存和复苏3、核酸的分离纯化4、离心技术5、核酸的扩增与检测技术6、电泳技术三、毕业设计（论文）的基本要求（指导老师根据具体情况添加要求）1．毕业设计（论文）一份2．文献综述一份四、毕业设计（论文）进度安排工作阶段周次指导内容学生选题1周熟悉动物实验室和细胞培养实验室常规操作流程，初步了解胚胎移植在转基因动物中的地位和作用开题准备3周掌握小鼠超数排卵，胚胎移植及胚胎的培养、冷冻和复苏的方法开题1周实验设计，实验数据的记录和分析，开题报告的设计与准备课题研究10周移植前的准备，胚胎移植，准备移植鼠的繁殖小鼠，DNA提取纯化，作PCR 检测，结果分析和整理论文撰写2周前言、材料、步骤、结果、讨论书写，中英文摘要及综述书写初稿修改1周前言及讨论书写级修改论文定稿1周论文定稿指导教师评阅1周根据课题的要求结合学生研究结果评阅学生论文论文评阅1周专家评阅答辩1周学生毕业设计（论文）答辩表2 海南医学院毕业设计（论文）开题报告论文题目小鼠胚胎移植及品系鉴定实习单位海南医学院附属医院生殖中心学生姓名黄英礼专业生物技术班级10级本科指导教师马燕琳专业联系方式137******** 姓名一、选题的目的意义肌肉增强因子2(Myocyte enhancer factor 2, MEF2)是MADS(MCM1 agamous deficiens和serum responsefactor)家族成员之一, 在动物发育过程中起到重要的调节作用。
实习报告：动物胚胎移植技术
动物胚胎移植技术摘要胚胎移植又称受精卵移植，是把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内冲洗出来，移植到另一头雌性动物的输卵管或是子宫内，使之继续发育成新个体的技术。
动物胚胎移植主要是通过对优良供体母畜作同期排卵处理和体内胚胎生产或体外人工授精（IVF）的方法，以大量获得优良的动物胚胎后再将其移植给普通代孕受体母牛进行快速繁殖优良动物的生物技术。
胚胎移植技术主要用于快速扩大优秀种公牛和核心母牛的数量。
尽管单个胚胎的生产成本较高，但由于种公牛和种母牛较高的经济价值和社会价值，以及利用胚胎移植在育种方面可以获得同胞或同卵双生牛进行后裔测定等优势，因此，该技术在种公牛的选育和优质核心母牛群的培育以及加快育种步伐方面均具有极大的优越性。
本论文将对动物胚胎技术作比较全面的阐述，使大家对动物胚胎技术有一个比较全面的认识。
关键词：供受体超数排卵同期发情胚胎回收胚胎检查胚胎移植1.1 发情后生殖器官的孕向发育家畜在发情后生殖器官会发生一系列变化，如：卵巢中功能性黄体的形成，孕酮的分泌和维持，子宫内膜组织的增生和分泌机能的增强，以及其他生理生化的特异现象。
这些变化都为胚胎的生存和发育创造了适宜的条件，为妊娠作准备。
配种受孕后的动物其生殖系统朝着妊娠的方向继续发生变化以适应胚胎发育的需要，如黄体的持续存在以及孕酮的分泌和维持，子宫内膜的继续发育。
而未受孕的动物其生殖系统会退回到发情前状态。
发情供体和受体发情周期的同期化程度前后不超过一天，否则移植成功率就会降低，甚至移植失败因此发情后或交配刺激后雌性动物生殖器官的孕向变化是进行胚胎移植的主要生理学基础。
1.2 早期胚胎的游离状态胚胎在发育的早期有相当一段时间是游离存在于子宫内的，和子宫黏膜没有建立紧密联系，其发育主要靠自身贮存的养分。
这样，早期的胚胎容易从生殖道中取出，而且在离体情况下，可短期培养，易存活。
早期胚胎处于游离状态是能够进行胚胎移植技术的基础1.3 子宫对早期胚胎的免疫耐受性1.4 胚胎遗传物质的稳定性在同一物种之内进行胚胎移植不会产生排斥现象;同时，受体对胚胎不产生遗传上的影响，不会改变新个体的遗传特性，也不会减弱起优良性状在出生后的表现程度。
养殖场胚胎移植工作总结
养殖场胚胎移植工作总结
胚胎移植是养殖业中非常重要的一项工作，它可以帮助养殖场提高畜禽的繁殖
效率，加快优质品种的繁育速度，从而提高养殖业的经济效益。
在过去的一段时间里，我们养殖场进行了大量的胚胎移植工作，积累了丰富的经验和技术，现在就让我们来总结一下这项工作的一些经验和教训。
首先，胚胎的来源至关重要。
我们必须选择健康、优质的母畜，从中获取高质
量的胚胎。
在选择母畜的时候，要考虑其遗传背景、生产性能和健康状况，确保其能够产出优质的胚胎。
此外，我们还需要注意母畜的饲养管理，保证其身体健康，提高胚胎的质量。
其次，胚胎的保存和运输也是需要重点关注的环节。
在胚胎的保存过程中，我
们要严格控制温度和湿度，确保胚胎的存活率。
在运输过程中，我们要选择合适的运输工具和方法，避免对胚胎造成损伤。
只有在这些环节做好了，我们才能保证胚胎的质量和数量。
最后，胚胎的移植工作也需要严格的操作和管理。
我们要选择合适的时间和方
法进行移植，确保母畜能够成功怀孕。
在移植过程中，我们要注意卫生和消毒工作，避免感染和交叉感染的发生。
同时，我们还要对母畜进行良好的饲养管理，提高怀孕成功率。
总的来说，胚胎移植工作是一项复杂的工作，需要我们在母畜的选择、胚胎的
保存和运输、移植过程中都要做到严格管理和操作。
只有这样，我们才能保证胚胎移植工作的顺利进行，提高养殖业的繁殖效率和经济效益。
希望我们在今后的工作中能够继续总结经验，不断提高胚胎移植工作的水平和质量。
养殖场胚胎移植工作总结
养殖场胚胎移植工作总结
胚胎移植是现代养殖业中的重要技术之一，它可以帮助养殖场提高畜禽的繁殖
效率和品质。
经过一段时间的实践和总结，我们对养殖场胚胎移植工作进行了深入的研究和总结，现在将对这项工作进行总结和分享。
首先，胚胎移植需要精准的技术和设备支持。
在实施胚胎移植工作时，我们需
要使用专业的设备和器材，确保操作的精准和准确性。
此外，技术人员需要经过专业的培训和实践，掌握胚胎移植的操作技巧和注意事项，确保工作的顺利进行。
其次，胚胎的选取和处理是胚胎移植工作中的关键环节。
在进行胚胎移植前，
我们需要对胚胎进行精确的筛选和处理，确保选取到高质量的胚胎。
同时，在胚胎的保存和运输过程中，需要严格控制温度和湿度，保证胚胎的存活率和质量。
另外，胚胎移植工作需要严格的操作流程和规范。
在实施胚胎移植工作时，我
们需要按照严格的操作流程和规范进行操作，确保每一个环节都符合标准和要求。
此外，需要做好相关记录和数据的保存，以便日后的追溯和分析。
最后，胚胎移植工作需要不断的技术创新和实践总结。
随着科技的不断进步和
养殖业的发展，胚胎移植技术也在不断的更新和完善。
我们需要不断的进行技术创新和实践总结，提高胚胎移植工作的效率和质量，为养殖业的发展做出更大的贡献。
总之，胚胎移植工作是养殖业中的重要技术之一，它可以帮助养殖场提高繁殖
效率和品质。
通过不断的技术创新和实践总结，我们相信胚胎移植工作会在未来发挥更大的作用，为养殖业的发展带来更多的好处。
肉用绵羊胚胎移植技术研究的开题报告
肉用绵羊胚胎移植技术研究的开题报告一、课题背景和意义肉用绵羊是我国广泛饲养和生产的重要畜种，其优质的肉质和良好的适应性受到国内外消费者青睐。
然而，传统的繁殖方法效率较低，限制了其规模化、标准化的生产与发展。
近年来，胚胎移植技术逐渐成为现代畜牧业发展的重要手段之一。
肉用绵羊胚胎移植技术不仅可提高畜种的繁殖效率，而且能促进肉用绵羊品种改良和质量提高。
二、研究目标和研究内容本研究旨在探究肉用绵羊胚胎移植技术的应用，进一步提高肉用绵羊繁殖效率和品种育种水平。
主要研究内容包括：1.收集有关肉用绵羊繁殖、胚胎移植和畜牧品种改良的相关文献资料，归纳总结其研究现状以及存在的问题和挑战。
2.筛选肉用绵羊优良品种，制备胚胎移植所需配合液和培养基，建立胚胎移植技术实验平台。
3.研究肉用绵羊胚胎移植技术，包括胚胎获取、配合液和培养基制备、移植方法和移植后处理等，探索最佳的胚胎移植条件和技术流程。
4.评价肉用绵羊胚胎移植的成活率、出生率、生长发育等指标并进行动态跟踪，获取有效的数据和信息，分析胚胎移植技术的效果和影响因素。
5.结合实验结果，对肉用绵羊胚胎移植技术进行综合评价和总结，并提出进一步研究和完善的思路和方向。
三、研究方法本研究主要采用文献资料收集、实验室实验和田间试验相结合的研究方式。
在实验室内，使用细胞培养、酶处理、胚胎的采集、移植以及生理检测等方法研究优化胚胎移植技术流程；在田间试验中进行生态环境调控和胚胎移植效果的观测和分析。
四、预期成果和应用价值本研究采用肉用绵羊作为实验对象，对胚胎移植技术进行深入探究，旨在为提高肉用绵羊繁殖效率和品种育种水平打下基础。
预计通过实验结果，建立适合肉用绵羊品种的胚胎移植技术流程并提高其移植的成活率、出生率以及生长发育表现，产生一定的经济效益和社会收益。
同时，在胚胎移植技术的相关研究领域，也为学术研究和技术发展提供了新的理论和实践支持。
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动物胚胎移植技术摘要胚胎移植又称受精卵移植，是把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内冲洗出来，移植到另一头雌性动物的输卵管或是子宫内，使之继续发育成新个体的技术。
动物胚胎移植主要是通过对优良供体母畜作同期排卵处理和体内胚胎生产或体外人工授精（IVF）的方法，以大量获得优良的动物胚胎后再将其移植给普通代孕受体母牛进行快速繁殖优良动物的生物技术。
胚胎移植技术主要用于快速扩大优秀种公牛和核心母牛的数量。
尽管单个胚胎的生产成本较高，但由于种公牛和种母牛较高的经济价值和社会价值，以及利用胚胎移植在育种方面可以获得同胞或同卵双生牛进行后裔测定等优势，因此，该技术在种公牛的选育和优质核心母牛群的培育以及加快育种步伐方面均具有极大的优越性。
本论文将对动物胚胎技术作比较全面的阐述，使大家对动物胚胎技术有一个比较全面的认识。
关键词：供受体超数排卵同期发情胚胎回收胚胎检查胚胎移植1.1 发情后生殖器官的孕向发育家畜在发情后生殖器官会发生一系列变化，如：卵巢中功能性黄体的形成，孕酮的分泌和维持，子宫内膜组织的增生和分泌机能的增强，以及其他生理生化的特异现象。
这些变化都为胚胎的生存和发育创造了适宜的条件，为妊娠作准备。
配种受孕后的动物其生殖系统朝着妊娠的方向继续发生变化以适应胚胎发育的需要，如黄体的持续存在以及孕酮的分泌和维持，子宫内膜的继续发育。
而未受孕的动物其生殖系统会退回到发情前状态。
发情供体和受体发情周期的同期化程度前后不超过一天，否则移植成功率就会降低，甚至移植失败因此发情后或交配刺激后雌性动物生殖器官的孕向变化是进行胚胎移植的主要生理学基础。
1.2 早期胚胎的游离状态胚胎在发育的早期有相当一段时间是游离存在于子宫内的，和子宫黏膜没有建立紧密联系，其发育主要靠自身贮存的养分。
这样，早期的胚胎容易从生殖道中取出，而且在离体情况下，可短期培养，易存活。
早期胚胎处于游离状态是能够进行胚胎移植技术的基础1.3 子宫对早期胚胎的免疫耐受性1.4 胚胎遗传物质的稳定性在同一物种之内进行胚胎移植不会产生排斥现象;同时，受体对胚胎不产生遗传上的影响，不会改变新个体的遗传特性，也不会减弱起优良性状在出生后的表现程度。
2.1 供受体的选择与管理2.1.1 供体的选择•遗传学价值在畜牧生产中，应选择生产性能优秀的母兽作为供体•健康状况应选择身体健康，营养水平中等以上未受孕动物作为供体•繁殖性能供体应是达到配种年龄以上繁殖机能正常的母畜2.1.2 受体的选择•身体健康•繁殖状况正常•母性良好包括泌乳性能和护仔能力等2.1.3 供受体的管理在供受体选择时，可根据情况进行传染病的检疫，预防注射和驱虫等工作，确保在胚胎移植过程中供受体的健康;观察供受体发情周期，以便超排和同期发情程序的选择和安排；每日供给中等以上营养水平，注意青绿饲料，维生素和微量元素的补充；2.2 超数排卵处理在雌性动物发情周期中的适当时间注射促性腺激素，使卵巢上有比自然生理状态下更多的卵泡发育并排卵，这种方法称为超数排卵。
其目的是增加有活力卵子的数量，并获得较多的可移植胚胎。
目前，用于超排的促性腺激素主要是促卵泡素（FSH）和孕马血清促性腺激素（PMSG）。
FSH半衰期短，用于超排时需要多次注射，而PMSG半衰期长，会产生后效应，导致发情期延长，影响超排效果和胚胎质量，结合注射PMSG抗血清，可消除半衰期过长的副作用。
2.3同期发情2.3.1同期发情的定义利用某些激素制剂处理,人为地控制并调整一群雌性动物发情周期之间同期化的方法,称同期发情.胚胎移植时,受体必须和供体处于相同的发情阶段,才能获得较高的成功率.在发情周期的不同阶段,生殖器官的内分泌环境,生化和组织学特性,对不同发育阶段的胚胎有不同的影响,胚胎要移植到和供体处于相同发情周期阶段的受体生殖道的适当部位,才能继续发育.2.3.2 同期发情的原理同期发情主要借助外源激素刺激卵巢.使之按预定的要求发生变化,使处理母畜的卵巢生理机能处于相同阶段.通常采用两种途径:一种时延长黄体期,给一群母畜同时使用孕激素药物,抑制卵泡的生长发育和动物的发情表现.经过一定时期后同时停药,由于卵巢同时失去外源性孕激素的控制,且卵巢上的周期黄体已退化,于是同时出项卵泡发育,引起母畜发情采用孕激素移植母畜发情,实际上是认为地延长黄体期,起到延长发情周期,推迟发情地作用.另一种途径是缩短黄体期,应用前列腺素促使黄体退化,使卵巢提前摆脱内源性激素地控制,于是卵泡得以同同时开始发育从而达到母畜同期发情.这种情况实际上是缩短母畜地发情周期,促使母畜在短时间内发情。
2.3.3 同期发情的药物及其使用方法2.3.3.1 抑制卵泡发育的制剂这一类药物主要是孕激素类,包括孕酮,甲孕酮,氟孕酮,甲地孕酮和18-甲基炔诺酮等.他们能够抑制垂体促卵泡素的分泌,延长黄体期,因而间接地抑制卵泡发育和成熟,是母畜不发情.其用药方法有:◆阴道栓塞法:将孕酮阴道栓或自制浸吸一定量药剂的阴道海绵塞放置于阴道前端,药液不断被阴道黏膜吸收,经过一定时间后取出,此法常用于牛和羊◆埋植法:将成形的药剂或装有药物的带孔容器埋植于母畜皮下组织,药物被缓慢吸收,经过一丝那个时间后取出,此法可用作群体处理.◆注射法:每日将定量药物作皮下或肌肉注射,经过一定时间后停药.此法剂量准确,但操作麻烦.◆口服法:每日将一定量的药物均匀拌在饲料中,以单个饲喂较为准确,经过一定时间后停药.这种方法可用于舍饲母畜.但较费时费工,群体饲喂还会造成个体剂量不准确.2.3.3.2 溶解黄体的制剂主要是前列腺素及其类似物,如15-甲基PGF2ά,氯前列烯醇,氯胎素等.它们具有明显的溶解黄体作用,因此用于正处于黄体期的母畜的同期发情,对卵巢上没有黄体的动物无效.牛和羊的发情周期的7~16d以内的黄体对前列腺素都易产生反应,采用子宫内灌注效果优于肌肉注射.经前列腺素处理后2~4d,母畜发现发情,未发情的间隔10~20d进行第二次注射,在此期间,可能自然发情形成黄体,对第二次注射作出应答反应.此法方便可靠,但费用高。
2.3.3.3 促进卵泡发育,排卵的药剂主要有FSH,LG,PMSG,hCG和GnRH等及其类似物的那个,一般在应用上述;两类激素的基础上配合使用,以增强发情同期化,并使卵泡更好地成熟和排卵.2.4胚胎回收2.4.1 胚胎回收的定义胚胎回收也称采卵或采胚,就是利用冲胚液把胚胎从供体生殖道中冲洗出来,提供移植或其他胚胎工程应用.2.4.2 胚胎回收地时间胚胎回收地时间,可根据所需胚胎地发育阶段来确定.动物种类不同,其胚胎早期地发育速度有所差异.以配种后计算,几种动物的早期胚胎发育进程近似值见表2.4.3 冲胚液的配制冲胚液和胚胎的短期培养液通常是用改良的杜氏磷酸盐缓冲液(DPBS)根据配方要求分别制备I,II,III液,三蒸水加至最终量的80%,在冰箱中冷却至4 ℃,依次混合后用容量瓶定容至1000mL,注意防止沉淀,PH应为7.1~7.2,如不符,可用NaHCO3或HCL调节,渗透压为310mOsm.配好后,用孔径0.45um滤器过滤除菌,分装密封(注意无菌操作),标记,4℃冰箱保存3~4月.临用前加入灭活小牛血清,一般冲胚液加10%~20%,也可在定容时加入血清,然后再过滤分装.2.4.4 采胚方法根据动物种类和胚胎的发育阶段,胚胎回收可采用手术法和非手术法2.4.4.1 手术法就是对供体进行常规腹部手术将生殖道部分移出腹腔,用冲胚液对输卵管或子宫角进行冲洗,回收胚胎.本法适用于羊,猪和兔等中小动物;在牛中,如需回收进入子宫前的早期胚胎,仍需用此法.按外科手术常规方法打开腹腔,先把一侧子宫角,输卵管和卵巢牵引至腹壁切口之外,检查卵巢反应情况(黄体数,残留卵泡的大小,数目及排卵情况)并进行记录.冲胚的方法包括输卵管冲胚法和子宫角冲胚法2.4.4.1.1 输卵管冲胚法用冲胚液冲洗输卵管腔,回收进入子宫前的胚胎,分上行法和下行法.上行法时从子宫角的前端刺入注射针,向上冲洗输卵管,注意用手指固定针头并提捏住子宫角,防止冲洗液从进针周围流出后流向子宫体方向.冲洗液通过从输卵管伞插入到壶腹部的玻璃细管或硅胶管等回收到平皿或试管内;下行法时通过从伞部插入到壶腹的玻璃细管或硅胶管等注入冲胚液,向子宫方向冲洗,冲洗液通过插入到子宫角上部的带有充气囊的二路式导管或回收针回收.一侧冲洗完毕后,还纳腹腔,在冲另一侧.2.4.4.1.2 子宫角冲胚法冲洗子宫角,回收进入子宫角的胚胎.依据动物子宫角的大小,选用长4~5cm,外径1.2~1.4mm的针头,改制一个回收针.将回收针插入子宫腔,用套有乳胶管的肠钳夹住子宫角和针体.将宫管结合部之前的输卵管用血管夹夹住,以免冲胚液流入输卵管.然后从宫管结合部后端的胶管收集冲出液于平皿或试管内.一侧冲洗完毕后,除去器械,确认针孔无出血后,还纳腹腔,然后冲另一侧.冲胚完毕后,把生殖器官还纳腹腔,向腹腔注入防粘连剂和抗生素. 按常规腹部手术方法闭合手术通路,进行常规术后护理.手术法采胚,冲胚液用量少,胚胎回收率高,但由于手术对动物有一定的损伤,手术不当或多次手术,易引起生殖器官粘连,导致供体不孕.2.4.4.2 非手术法是在胚胎进入子宫角后,用冲胚器具通过子宫角冲洗采集胚胎的方法.可以不做手术而采胚,不仅减小了手术对供体的危害,节约时间,降低成本,而且可以重复采胚.本法主要用于牛,马等大家畜.回收方法: 先要去除子宫颈黏液,术者一手在直肠内握住子宫颈,一手持子宫颈黏液去除器插入子宫颈,由助手抽吸除去子宫颈黏液.如插入困难,可用子宫颈扩张棒扩张子宫颈,除去子宫颈黏液后,送入两路或三路冲胚管.冲胚管前端插入子宫角前1/3后，给气囊充气。
通过冲胚管的进液管向子宫内注入冲胚液.当液体注入使子宫角膨大到相当于妊娠40～60d时，一般20～40ml，如使用三路冲胚管，可打开除夜管，并按摩子宫，时胚胎从子宫皱壁中游离出来，随液体流出，收集在量筒活集卵胚等容器内。
反复冲洗，每侧用液300～500ml。
冲洗完毕，向子宫内注入青霉素100万IU，链霉素1.0g。
回收的冲胚液，在室温下静置30min，用吸管除去上部液体，将下部回收液放入大检卵杯活平皿中检出胚胎，也可用集卵杯过滤冲胚液，剩下适量用于检胚。
2.5 胚胎检查2.5.1 胚胎检查的定义胚检是从回收液中，将受精卵活胚胎检出，并进行必要的净化处理，同时对检得的胚胎进行形态学鉴定，确定其品质，把符合移植的胚胎暂时保存于新鲜培养基中，准备移植或保存。
2.5.2 胚胎的发育受精后，卵细胞是按2，4，8…….细胞顺序相继分裂，到16细胞为止，可通过显微镜观察来计算分裂球的数目。
16细胞以后，分裂球难以计算，形成的细胞团呈桑椹状，故称为桑椹胚。