1-免疫器官简介+骨髓细胞分离
医学免疫学实验：免疫器官和免疫细胞
第一次实验：免疫器官和免疫细胞（示教）一、免疫器官免疫器官包括中枢免疫器官和外周免疫器官。
在哺乳类动物，中枢免疫器官包括胸腺和骨髓；在禽类，中枢免疫器官包括胸腺和法氏囊。
外周免疫器官有淋巴结、脾脏等。
1.胸腺胸腺位于胸腔纵隔上部，胸骨后方。
胸腺的组织结构：胸腺分左右两叶，表面覆盖有一层结缔组织被膜，被膜深入实质将实质分割成若干小叶。
胸腺小叶的外层为皮质，内层为髓质。
胸腺皮质区分为浅皮质区和深皮质区。
皮质区内85%-90％的细胞为未成熟的T 细胞。
髓质区内有大量的胸腺上皮细胞和稀疏分散的较成熟的胸腺细胞、单核﹣巨噬细胞和树突状细胞。
人类胸腺在胚胎期及出生后2岁内生长很快，体积较大；2岁后到青春期发育仍很快；但青春期后开始萎缩，逐渐由脂肪组织所代替，它在机体免疫功能的建立上占有重要地位。
骨髓内有部分淋巴细胞迁移到胸腺内，在胸腺素的影响下，增殖分化成为具有免疫功能的T 细胞，再经血流输送到淋巴结和脾等周围免疫器官发挥免疫功能。
若新生期切除胸腺或胸腺生长肿瘤，可导致细胞免疫功能显著下降，常因感染而死亡。
胸腺组织切片2.骨髓骨髓位于骨髓腔中，分为红骨髓和黄骨髓。
红骨髓有造血功能，由造血组织和血窦构成。
造血组织主要由基质细胞和造血细胞组成。
基质细胞包括网状细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞等。
骨髓是各类血细胞和免疫细胞发生的场所。
骨髓又是B 细胞分化成熟的场所和体液免疫应答发生的场所。
因此骨髓既是中枢免疫器官又是外周免疫器官。
骨髓概述图3.法氏囊在禽类，法氏囊是位于泄殖腔上方的一个囊状物，内充满着淋巴组织，其中淋巴细胞不断受囊素的影响，发育成B 淋巴细胞。
若新生期切除法氏囊，抗体的形成将受影响，而细胞免疫功能不受影响。
对于 B 淋巴细胞发育而言，禽类的法氏囊具有哺乳类动物骨髓相似的作用。
法氏囊外观4.淋巴结淋巴结的实质分为皮质区和髓质区两部分。
皮质区分为浅皮质区和深皮质区两部分。
浅皮质区靠近被膜下，是B 细胞定居的场所，称为非胸腺依赖区。
高中生物人体免疫系统的结构与功能
高中生物人体免疫系统的结构与功能人体免疫系统是一套复杂而庞大的系统，负责识别、攻击和消灭入侵体内的病原体。
它由多个器官、细胞和分子组成，相互协作，旨在保护我们的身体免受感染和疾病的侵害。
本文将介绍人体免疫系统的结构和功能，以及其在保持身体健康方面的重要作用。
一、免疫系统的结构1. 免疫器官人体免疫系统的主要器官包括骨髓、脾脏、淋巴结和扁桃体。
骨髓是造血干细胞的产生和分化的场所，是免疫细胞的生成地。
脾脏是免疫细胞分化修饰和激活的场所，负责血液滤波和储备免疫细胞。
淋巴结是免疫细胞聚集和交流的场所，起到筛查和抵御病原体的作用。
扁桃体在口咽部起到过滤病原体的作用，是呼吸道和消化道的第一道防线。
2. 免疫细胞免疫细胞是人体免疫系统的核心组成部分，包括淋巴细胞、巨噬细胞和粒细胞等。
淋巴细胞分为T细胞和B细胞两大类，其中T细胞主要负责细胞免疫，B细胞主要负责体液免疫。
巨噬细胞负责吞噬和消化病原体，粒细胞则负责释放细胞毒素杀死病原体。
3. 细胞因子细胞因子是免疫系统中的重要信号分子，可以调节和协调免疫细胞的活动。
常见的细胞因子包括干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等，它们在抵御病原体、引发炎症等过程中发挥重要作用。
二、免疫系统的功能1. 识别病原体免疫系统可以通过识别病原体的抗原来分辨正常细胞和异常细胞，保护身体免受病原体的侵袭。
免疫细胞上的受体可以与病原体的抗原结合，并启动免疫应答。
2. 活化免疫细胞一旦免疫细胞识别到病原体的存在，它们会释放信号分子，例如细胞因子，来活化其他免疫细胞的功能。
这种协同作用可以增强免疫细胞的杀伤能力，并加速病原体的清除过程。
3. 吞噬和杀灭病原体巨噬细胞是免疫系统中的主要吞噬细胞，它们可以将病原体包围并吞噬进细胞内，然后通过溶酶体消化病原体。
此外，免疫细胞还可以释放细胞毒素，直接杀灭病原体。
4. 产生抗体B细胞是免疫系统中的主要抗体产生细胞，当它们识别到病原体的抗原时，会迅速分化为浆细胞，大量产生和释放抗体。
免疫学基础--免疫器官和免疫细胞、免疫球蛋白、补体系统、细胞因子、抗原
二、免疫器官和免疫细胞
5
免疫系统--其他免疫细胞
➢ K细胞：即杀伤细胞（killer cell），专一的杀伤被IgG抗体所覆盖的靶细胞；IgG抗体的Fc
片段可与K细胞表面的Fc受体结合，从而触发K细胞的杀伤作用；ADCC:抗体依
赖
性细胞介导的细胞毒性作用；
➢ NK细胞：✔即自然杀伤细胞（natural killer cell），属淋巴细胞，主要分布于外周血和脾
脏，具有不须事先致敏，不须其它辅助细胞或分子的参与而直接杀伤靶细胞的功
能；
✔某些肿瘤细胞和微生物感染细胞可成为NK细胞的靶细胞，而且NK细胞活性
较
其它杀伤细胞更早出现，因此在抗肿瘤抗感染特别是病毒感染中起重要作用；
２
免疫系统--免疫细胞
➢ 免疫细胞：一切与免疫有关的细胞，包括Ｔ细胞、Ｂ细胞、Ｋ细胞、ＮＫ细胞、粒细胞、 巨噬细胞、树突状细胞等；
➢ 免疫活性细胞：仅指能特异的识别抗原，即能接受抗原的刺激，并随后进行分化、增殖和 产生抗体或淋巴因子，发挥特异性免疫应答的一类细胞；Ｔ细胞、Ｂ细胞 是最主要的免疫活性细胞；
➢ 胸腺：是T细胞成熟和发育的主要器官；未成熟的T细胞前体从骨髓迁移到胸腺， 95%的细胞凋亡，5%的细胞发育、分化成为成熟的T细胞，释放到外周免疫器官；
二、免疫器官和免疫细胞
１
免疫系统--免疫器官
➢ 外周免疫器官：免疫细胞居住和发生免疫应答的场所，包括淋巴结、脾脏和粘膜相关淋巴 组织；
➢ 淋巴结：人体约有500~600个淋巴结,清除各个组织器官中的抗原物质，淋巴结内主 要 有T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨嗜细胞；
微生物学基础
单元九 免疫学基础
免疫器官定义
免疫器官定义一、免疫器官的定义免疫器官是机体执行免疫功能的器官。
根据其发生的时间顺序和功能差异，可分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
1. 中枢免疫器官- 骨髓- 骨髓是各种血细胞（包括免疫细胞）的发源地，是B淋巴细胞发育、分化、成熟的场所。
在骨髓中，造血干细胞（HSC）能够分化为多能祖细胞，进而分化为各种血细胞。
对于B细胞而言，其发育过程经历了多个阶段，从祖B细胞、前B细胞到未成熟B细胞，最后发育为成熟B细胞，这些过程都在骨髓特定的微环境下进行。
- 胸腺- 胸腺是T淋巴细胞分化、发育、成熟的场所。
胸腺由皮质和髓质组成，胸腺细胞（即胸腺内发育的T细胞）在皮质中经历阳性选择，主要识别自身MHC分子，只有那些能够识别自身MHC分子的T细胞才能继续发育；而在髓质中经历阴性选择，识别自身抗原肽 - MHC分子复合物的T细胞发生凋亡，从而保证了成熟T细胞对自身抗原的耐受性，只有约5%的胸腺细胞能够发育成熟并迁移到外周免疫器官。
2. 外周免疫器官- 淋巴结- 淋巴结广泛分布于全身非黏膜部位的淋巴通道上，是淋巴细胞定居和免疫应答发生的场所。
淋巴结的结构分为皮质区和髓质区。
皮质区又分为浅皮质区和深皮质区，浅皮质区是B细胞定居的场所，称为非胸腺依赖区；深皮质区是T细胞定居的场所，称为胸腺依赖区。
当病原体等外来抗原侵入机体后，可随淋巴液流入淋巴结，在淋巴结内引发免疫应答，抗原提呈细胞（如树突状细胞）摄取、加工处理抗原后，将抗原提呈给T细胞和B细胞，激活的T、B细胞发生增殖、分化，产生免疫效应。
- 脾- 脾是人体最大的外周免疫器官，位于腹腔的左上方。
脾的白髓是淋巴细胞聚集的部位，其中动脉周围淋巴鞘为T细胞定居的场所，脾小结（又称淋巴滤泡）是B 细胞定居的场所。
脾的红髓主要由脾血窦和脾索组成，红髓内有大量的巨噬细胞，可吞噬衰老的血细胞、病原体等异物。
脾具有免疫应答、过滤血液等功能，当血液中的病原体等抗原进入脾后，可在脾内激发免疫应答。
免疫器官和细胞
脾脏功能：
1.各类免疫细胞定居的场所 2.发生免疫反应的部位 3.过滤作用:清除抗原和血液中的衰老细胞
三、粘膜相关的淋巴组织
概念：指呼吸道、肠道及泌尿生殖道的粘膜 上皮细胞下，聚集无包膜的淋巴组织。 如扁桃体、小肠派氏集合淋巴结 、阑尾等。 机体50%淋巴组织存在粘膜。 作用：参与粘膜免疫应答过程，产生 SIgA 在抵御消化道和呼吸道病原体侵袭.
意义： 1. 补充淋巴细胞，有利于淋巴细胞归 巢 2.更好的扑捉抗原，清除抗原 ★
第二节 免疫细胞
一、造血干细胞 二、淋巴细胞 三、抗原提呈细胞 四、其他免疫细胞
一、
自我更新的能力
二、淋巴细胞
TC BC NKC
（一）T淋巴细胞 (TC)
T淋巴细胞（T lymphocyte）简称T细胞 ↗表面标记及功能 TC→亚群 ↘功能
⑷有丝分裂原受体： PHA-R 、 Con-A R等 如：淋巴细胞转化试验，检测TC数目。 转化率%~80%
⑸ 细胞因子受体（CKR） ⑹ MHCⅠ分子、MHCⅡ分子 ⑺ 病毒受体、、、、、
根据表达TCR的类型：T细胞可分为
TCRαβ+TC
TC
TCRγδ+TC
根据功能分为：
淋巴细胞再循环： 是指淋巴细胞在血液、淋巴液、淋巴器官 或组织间的反复循环。 参加再循环 TC:70~75% BC:25~30%
大多是长命的TC、BC
再循环途径：
淋巴结途径
简述免疫器官的组成与功能
免疫器官以淋巴组织为主，根据功能可以分成中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官主要包括骨髓和胸腺，外周免疫器官主要包括淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织。
一、中枢免疫器官：1、骨髓：是各类血细胞、免疫细胞的发源地，免疫细胞包括T细胞、B细胞、浆细胞，都是从骨髓的多能干细胞中发育而来。
因此，骨髓的主要功能是各类血细胞、免疫细胞发生，以及B细胞和NK 细胞分化、成熟和体液免疫应答发生的场所，对机体免疫功能起到重要作用；2、胸腺：主要位于心脏附近，在前纵隔、胸骨后。
胸腺的功能主要是T细胞分化、成熟的场所，具有免疫调节作用。
老年期胸腺明显缩小，皮质和髓质被脂肪组织代替，胸腺微环境改变，T细胞发育成熟减少，可导致老年人的免疫功能减退。
如果成年人发现胸腺明显增大，可能有胸腺的肿瘤。
二、外周免疫器官：1、淋巴结：多分布于全身非黏膜部位的淋巴通道汇集处，淋巴结是成熟T细胞和B细胞的定居部位，也是淋巴细胞接受抗原刺激，发生适应性免疫应答的主要部位之一。
淋巴结可以清除淋巴液中的病原微生物、毒素和其他有害物质，参与淋巴细胞再循环；2、脾脏：是胚胎时期的造血器官，自骨髓开始造血后，脾脏演变成人体最大的外周免疫器官。
脾脏是成熟淋巴细胞定居的场所，也是淋巴细胞接受抗原刺激，并发生免疫应答的重要部位，脾脏可合成并分泌某些重要生物活性物质，如补体成分和细胞因子等。
人体内大部分循环血液流经脾脏，可清除血液中的病原体、衰老死亡的自身血细胞、免疫复合物以及其他异物，从而发挥过滤作用，使血液得到净化；3、黏膜相关淋巴组织：亦称黏膜免疫系统，主要是指胃肠道、呼吸道及泌尿生殖道，黏膜固有层和上皮细胞下散在的淋巴组织，以及带有生发中心的淋巴组织，如扁桃体、小肠派尔集合淋巴结及阑尾等，是发生黏膜局部免疫应答的主要部位，可产生分泌型IgA。
黏膜是病原体等抗原性异物入侵机体的主要部位，黏膜相关淋巴组织构成了人体重要的防御屏障。
在日常生活中，应注意保持良好的心情，注意保暖，可适当进行锻炼，增强身体素质。
免疫器官和免疫细胞
❖ CD40分子：是B细胞表面的协同刺激分子受 体，该分子与T细胞的CD40配体结合，对T 细胞依赖性B细胞激活具有重要意义。
❖ CD80分子（B7）：表达在活化B细胞及其他 APC表面，是T细胞表面的CD28分子和细胞 毒性T细胞相关抗原形毕露的配体，具有协同 刺激分子的作用。
❖ 杀伤细胞抑制受体：当KIR结合自身组织细 胞表面MHC-I类分子，将激和信号停止杀伤 作用，间接促进特异性T细胞的杀伤作用。
2、NK细胞杀伤靶细胞的机制
❖ 1）、通过释放穿孔素和颗粒酶引起靶细胞溶解 ❖ 2）、通过配体诱导的受体介导的凋亡途径引起靶
细胞的凋亡 ❖ 3）、释放细胞因子，可与靶细胞表面相应受体结
❖ 内皮细胞、纤维母细胞、上皮及间皮细胞→ 非专职抗原提呈细胞。
树突状细胞:
具有典型树突状形态、 膜表面高表达MHC Ⅱ类分子、 刺激初始T细胞进行活化增殖、 是功能最强的抗原提呈细胞
为T细胞提供 第一信号: 抗原肽:MHC分子复合物 第二信号: 辅助刺激分子，CD80、CD86
吞噬细胞主要功能：
白细胞分化抗原(CD抗原)
❖ 1)CD79a/cd79b:由二硫键连结的异二聚体, 表达在除浆细胞外的B细胞发育的各个阶段, 是B细胞的特征性标记.
❖ 与BCR以非共价键连接,介导抗原与BCR结合 信号的转导.
❖ 2)CD19/CD21/CD81:为三分子复合物,复合 物中的CD19在胞质区与多种激酶结合,将抗 原刺激信息导入胞质激活B细胞.
2、脾的功能
❖ 在胚胎期脾可以是造血干细胞增殖分化的场 所，具有造血功能。
❖ 脾为血液的滤过器，清除血中病原微 生物和 自身衰老损伤的细胞。
❖ T、B细胞移居和接受抗原刺激后发生免疫应 答、产生免疫效应的重要场所。
免疫器官分类
免疫器官分类免疫器官是人体内起着重要作用的一组器官，它们共同协作，维护人体免疫系统的正常功能。
免疫器官主要包括骨髓、胸腺、淋巴结、脾脏和扁桃体等。
下面将对这些免疫器官进行分类和介绍。
一、骨髓骨髓是免疫系统中最重要的器官之一，主要分为红骨髓和黄骨髓两种。
红骨髓是造血的主要场所，它能产生各种类型的免疫细胞，如B细胞和T细胞等。
这些免疫细胞起到识别和杀灭病原体的作用，维护人体免疫系统的正常功能。
而黄骨髓则主要负责脂肪存储。
二、胸腺胸腺位于胸腔内，是免疫系统中的另一个重要器官。
胸腺主要负责T细胞的生长和分化。
在胸腺中，T细胞经过多道筛选，只有那些能正常识别和攻击病原体的细胞才能成熟并进入循环系统，发挥免疫作用。
胸腺的功能异常可能导致免疫系统失调，引发免疫疾病。
三、淋巴结淋巴结是免疫系统中的“过滤器”，分布在全身各个部位。
它们通过淋巴液的循环，将体内的废物、病原体和异常细胞等有害物质过滤掉，起到免疫防御的作用。
淋巴结还是免疫细胞的重要聚集地，能够促进免疫细胞的活化和增殖，增强免疫应答。
四、脾脏脾脏是人体最大的淋巴器官，位于胃的左上方。
它具有多种功能，包括免疫防御、造血、储存和清除血液中的老化和异常细胞等。
脾脏中的免疫细胞能够识别和杀灭病原体，维护人体健康。
此外，脾脏还能够储存和释放一定数量的血液，对维持血液循环起到重要作用。
五、扁桃体扁桃体是免疫系统中的一部分，分布在口咽部和鼻咽部。
它们起到阻挡和杀灭病原体的作用，是呼吸道和消化道的重要防御器官。
扁桃体发炎常见于儿童，可能导致咽喉疼痛、咳嗽和发热等症状。
免疫器官是人体免疫系统中不可或缺的组成部分，它们分别负责着免疫细胞的生成、成熟、分化和活化等重要功能。
这些免疫器官通过协同作用，保护人体免受外界病原体和有害物质的侵害，维护身体健康。
因此，保持免疫器官的正常功能和健康状态对于人体免疫系统的正常运行至关重要。
我们应该通过合理的饮食和生活方式，加强免疫系统的保护，提高身体免疫力，预防和抵抗疾病的侵袭。
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1. 中枢免疫器官:
• 胸腺：T细胞分化、成熟场所
• 骨髓：造血多能干细胞所在地；人及哺乳类 动物B细胞分化、成熟场所
• 腔上囊：鸟类B细胞分化、成熟场所
2.外周免疫器官:
• 淋巴结：过滤、清除异物 产生免疫应答
• 脾脏：血液滤过作用 产生免疫应答 产生吞噬细胞增强激素
• 皮肤、粘膜相关淋巴组织
免疫学创新实验
山东大学免疫学系
时间 内容
教学安排
第一次 免疫器官简介 小鼠免疫器官的识别和分离 小鼠骨髓细胞的分离和计数 小鼠急性肝损伤模型的诱导
第二次 小鼠急性肝损伤的观察和分析 流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4
第三次 小鼠急性肝损伤血清学检测（ALT、TNF-a）
第四次 体外抗体形成细胞检测——QHS
3.皮肤和粘膜相关淋巴组织
➢ 皮肤相关淋巴组织 （SALT，skin associated lymphoid tissue) 包括: —表皮层、真皮层/免疫活性细胞 —表皮层/langerhans细胞， （ICC， immunocompetent cells，
免疫活性细胞）
—淋巴结/并指状DC（APC作用）
作用：摄取、转运抗原； 活化、增殖部位
M cells establish immunity in the digestive tract
二、小鼠免疫器官的识别和分离
颈椎脱臼法处死小鼠，识别并分离取得骨髓、胸腺、脾脏、 淋巴结
三、小鼠骨髓细胞的分离和计数
➢颈椎脱臼法处死小鼠，无菌剥离股骨和胫骨，去除两端 骨骺，用1ml注射器将骨髓冲出直至骨髓腔发白。 ➢用PBS反复冲洗细胞使其成为单个细胞悬液，收集骨髓 细胞，1600rpm离心5min，弃上清。 ➢加5ml Tris-NH4Cl 红细胞裂解液，室温孵育10min， 1600rpm，离心5min，弃上清。 ➢加5ml PBS混匀，1600rpm，离心5min，弃上清。 ➢加5ml PBS重悬细胞沉淀，计数，调整细胞浓度约为 1.5×106/ml。
Cellular components of the cutaneous immune system
➢粘膜相关淋巴组织
（MALT，mucosal associated lymphoid tissue)
包括： 消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜。 (1)淋巴滤泡样结构----ICC活化、增殖部位 以B细胞为主,T细胞少 还有M细胞（membranous cells)：
WBC
1mm WBC 1mm
WBC
WBC
Cell concentration/ml = Total cell count in 4 squares /4 x 104
RBC
Cell concentration/ml = Total cell count in 5 squares x 5 x 104
四、小鼠急性肝损伤模型的诱导
注意事项：
1.黄色垃圾桶物品：手套、EP管、Tip头、注 射器（不含针头）
2.注射器针头回收放入器材车上的专门盒子内 3.生活垃圾不能放入黄色垃圾桶，请放入普通
垃圾桶
实验一
1、免疫器官简介 2、小鼠免疫器官的分离和识别 3、小鼠骨髓细胞的分离和计数 4、小鼠急性肝损伤模型的诱导
一、免疫器官简介
C57BL/6J小鼠，腹腔注射ConA 200mg/kg，24h