固定化乳酸菌产酸
14株乳酸菌产酸抗盐特性研究
14株乳酸菌产酸抗盐特性研究作者：罗丽蓉李宏洋李升来源：《山地农业生物学报》2021年第06期摘要：乳酸菌特别是乳杆菌是泡椒发酵过程中的风味微生物。
为探究乳酸菌的产酸特性，研究选取从发酵辣椒产品中分离筛选的14株乳酸菌作为试验材料。
通过测OD值、pH、消耗碱的量、活菌数，对14株乳酸菌的生长繁殖、產酸强弱、总酸度、抗盐性进行分析比较。
结果表明，编号为5-1（Lactobacillus plantarum）和29-1（Lactobacillus alimentarius）的2株菌生长性能好、产酸能力强且适合低盐环境生长，因此可作为纯种强化低盐发酵泡椒的优良菌种。
关键词：乳酸菌;生长性能;pH;产酸特性;抗盐性中图分类号：TS201.3文献标识码：A文章编号：1008-0457（2021）06-0076-05国际DOI编码：10.15958/ki.sdnyswxb.2021.06.011Abstract：Lactic acid bacteria，especially Lactobacillus，are the flavor microorganism in the fermentation process of pickled pepper.In order to explore the acid-producing properties of lactic acid bacteria，14 strains of lactic acid bacteria isolated and screened from fermented pepper were selected as experimental materials.The growth and reproduction，acid production strength，total acidity and salt resistance of 14 strains of lactic acid bacteria were analyzed and comparedby measuring the OD value，pH，consumption of the alkali and viable count.The results showed that the strains numbered 5-1（Lactobacillus plantarum） and 29-1（Lactobacillus alimentarius） had good growth performance，strong acid production capacity，and were suitable for low salt environment，so they could be used as excellent strains of pure strain to enhance low salt fermentation of pickled pepper.Keywords：lactic acid bacteria;growth characteristic;pH;acid production;salt resistance乳酸菌（Lactic acid bacteria，LAB）是一类细菌的总称，这类细菌都能够发酵糖类[1]产生乳酸（主要产物），其共同特征是过氧化氢酶阴性、革兰氏染色阳性[2]。
淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸的研究
淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸的研究最近，乳酸产品被广泛应用于食品加工、药物制造及工业生物合成等多种领域，乳酸的提取与分离一直是当前研究的重点。
淀粉是一种广泛存在的天然多糖，可以分解产生乳酸，因此，将淀粉固定化到德氏乳酸菌（Lactobacillus dextrinicus）上可以很好地解决淀粉分解过程中乳酸减量反应不足的问题。
为探索淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸的最佳工艺参数，本研究以淀粉原料固定化德氏乳酸菌为研究对象，采用单因素和多因素综合实验，分析其乳酸产量以及乳酸转化率。
结果表明，在优化工艺的条件下，淀粉原料固定化德氏乳酸菌发酵菌种的定性及定量特性显著优越，乳酸产量达到最高值，乳酸转化率达到85.3％。
此外，研究还证实了淀粉原料固定化德氏乳酸菌发酵菌种具备抗折叠性质。
在酸性及中性条件下，德氏乳酸菌具有极好的抗折叠性能，其品质特性在pH3.0和pH8.0时分别达到96％和97％，与传统乳酸菌相比，具有更强的稳定性和发酵效率。
本研究表明，淀粉固定化德氏乳酸菌具有优越的乳酸产量和转化率，以及良好的抗折叠性能，值得进一步研究。
首先，为了提高德氏乳酸菌的抗折叠特性，可以尝试改变发酵条件，如PH值、培养温度等。
另外，可以增加反应过程中乳酸的产量，这将有助于更有效地开发和应用淀粉固定化德氏乳酸菌发酵乳酸。
本研究的结果为淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸提供了重
要的参考性参数，为乳酸行业的发展提供了重要的理论和技术支持，使乳酸菌具有更佳的发酵稳定性，更高的发酵效率，并有助于提高乳酸产量。
因此，本研究认为，淀粉原料固定化德氏乳酸菌可以稳定分解淀粉，获得优质乳酸，为提高乳酸产量提供了技术保障，并为工业生物合成乳酸提供了重要的理论依据。
乳酸菌的生理生化鉴定
乳酸菌的生理生化鉴定①过氧化氢酶试验在产细菌素菌株和指示菌菌株的MRS固体平板上分别取适量菌体涂于干净载玻片，滴加15%H 2 O2 溶液。
有气泡产生为阳性反应，无气泡产生为阴性反应。
②糖醇发酵试验不同的糖、醇分别按1%或0.5%的比例加入PY 培养基中，同时加入0.16g/L溴甲酚紫溶液作产酸指示剂。
分别将产细菌素菌株和指示菌菌株按1%接种量接种，37℃培养1～2d，培养液变为黄色则表示产酸，确定为阳性反应。
③淀粉水解试验将产细菌素菌株和指示菌菌株分别按1%接种量接种到含有0.5%可溶性淀粉的PY培养基中，37℃培养1d～2d。
向培养液中加入几滴卢戈氏碘液，如不显色表示淀粉水解阳性反应，显蓝黑色或蓝紫色表示淀粉水解阴性反应。
④精氨酸产氨试验在PY培养基中加入精氨酸溶液，调pH至7.0，灭菌后取新鲜液体培养物2 滴加入精氨酸水解培养基内，将产细菌素菌株和指示菌菌株分别按1%接种量进行接种，同时接种于不含精氨酸的培养基作对照，分别于37℃培养72h。
取少量培养液于比色盘中，加奈氏试剂数滴，产生黄色沉淀且强于不添加精氨酸的对照时才能确定为阳性反应。
⑤从葡萄糖产气试验向PY培养基中加入3%葡萄糖和0.5mL Tween80，再添加6g琼脂和0.16g/L溴甲酚紫1.4mL，做成软琼脂柱。
将产细菌素菌株和指示菌菌株的新鲜培养物穿刺接种到软琼脂柱，37℃培养72h，指示剂变黄表示产酸，琼脂柱内产生气泡证明产气。
⑥生长试验将产细菌素菌株和指示菌菌株分别接种至MRS固体培养基斜面，分别置于15℃和45℃，观察菌体是否能够生长。
⑦pH 耐受性试验将产细菌素菌株和指示菌菌株分别以1%接种量接种在pH4.0 和pH9.0 的MRS液体培养基中，观察菌体是否能够生长。
⑧耐盐性试验将产细菌素菌株和指示菌菌株分别按1%接种量接种于含6.5% 和10% NaCl 的MRS 液体培养基中，观察菌体生否能否生长。
固定化酵母细胞发酵啤酒实验与酸奶制作
固定化酵母细胞发酵啤酒实验与酸奶制作在食品工业中，酵母是一个不可或缺的微生物，它们能够发酵食物，产生美味的食品。
酵母发酵被广泛应用于啤酒和酸奶的制作过程中。
然而，传统的发酵方法可能会存在一些问题，如发酵时间长、不稳定，以及产品质量的不一致。
为了解决这些问题，固定化酵母细胞发酵技术应运而生。
固定化酵母细胞发酵是一种将酵母细胞固定在载体上进行发酵的方法。
这种技术有助于提高发酵效率、减少发酵时间并改善产品的质量。
下面将介绍固定化酵母细胞发酵啤酒实验和酸奶制作的步骤和原理。
一、固定化酵母细胞发酵啤酒实验1. 实验材料准备：- 酵母菌株：选择一种适合发酵啤酒的酵母菌株。
- 固定化载体：可以选择海藻酸钠、明胶等，将酵母菌进行固定。
- 发酵培养基：准备好适合酵母菌生长和发酵的培养基。
2. 实验步骤：a. 制备固定化酵母细胞：将选定的载体和酵母菌培养在发酵培养基中，使酵母细胞固定在载体上。
b. 发酵实验：将固定化的酵母细胞加入到发酵培养基中，在适宜的温度和pH条件下进行发酵。
c. 产品收获：等待一段时间后，收获经过固定化酵母细胞发酵的啤酒。
3. 实验结果分析：通过比较传统发酵和固定化酵母细胞发酵的结果，可以评估固定化技术对啤酒发酵的影响。
固定化酵母细胞发酵可能具有以下优点： - 发酵速度快：相比传统发酵方法，固定化酵母细胞发酵可以缩短发酵时间。
- 产品质量稳定：固定化酵母细胞发酵可以减少发酵过程中的变异性，提高产品的一致性。
- 可重复使用：固定化酵母细胞可以反复使用，降低生产成本。
二、酸奶制作中的固定化酵母细胞发酵1. 实验材料准备：- 乳酸菌株：选择适合制作酸奶的乳酸菌株。
- 固定化载体：选择适合乳酸菌生长并固定的载体，如明胶。
- 发酵培养基：准备适合乳酸菌生长和发酵的培养基。
2. 实验步骤：a. 制备固定化乳酸菌：将选定的载体和乳酸菌培养在发酵培养基中，使乳酸菌固定在载体上。
b. 发酵实验：将固定化的乳酸菌加入到发酵培养基中，在适宜的温度下进行发酵。
海藻酸钙固定化乳酸菌连续化预发酵生产酸奶
海藻酸钙固定化乳酸菌连续化预发酵生产酸奶包永华;董明盛【摘要】Two strains of lactic acid bacteria （ Lactobacillus delbruekii ssp. Bulgaricus and Streptococcus salivarius ssp. Thermophilus ）were immobilized separately in liquid-core alginate capsules and used for continuous inoculation- prefermentation of milk for yoghurt production in a stirred tank reactor. The result showed that the coagulum time was shortened with the increase of temperature under the lower level pH. The effect of stirring speed on the dilution rate was significant. The dilution rate decreased as stirring speed increased. The inoculation of pre-fermented milk （total number of bacteria） were unaffected by pre-fermentation temperature, pH and stirring speed. In all cases, pre-fer- mented milk was inoculated at 10^8 CFU/mL.%将唾液链球菌嗜热亚种、德氏乳杆菌保加利亚亚种分别固定化于海藻酸钙形成的液芯包囊中，在一个连续搅拌反应器中对牛奶进行连续化接种，预发酵生产酸奶。
利用微生物生产有机酸的研究进展
利用微生物生产有机酸的研究进展在化工领域，有机酸是一类重要的有机化合物，广泛应用于食品、医药、化妆品等多个行业。
传统的有机酸生产方法通常依赖于化学合成，但这种方法存在成本高、环境污染等问题。
近年来，利用微生物生产有机酸的方法受到了广泛关注，因为它具有环境友好、资源可再生等优势。
本文将介绍利用微生物生产有机酸的研究进展。
一、利用发酵方法生产有机酸发酵方法是目前生产有机酸的主要途径之一。
通过将合适的微生物与底物（如葡萄糖、淀粉等）进行发酵，微生物可以将底物转化为有机酸。
常用的微生物包括大肠杆菌、乳酸菌、醋酸菌等。
其中，乳酸菌广泛应用于乳酸、苹果酸等有机酸的生产中。
通过改变发酵条件和发酵菌株的选用，可以调节有机酸的种类和产量。
二、利用代谢工程优化产酸微生物除了传统的发酵方法，利用代谢工程优化产酸微生物的研究也取得了一定的进展。
通过基因工程手段改造微生物的代谢网络，可使微生物在产酸过程中更高效地利用底物、产物切换更为灵活。
例如，研究人员通过引入异源代谢途径，成功构建了乳酸菌产丙酸和丁酸的菌株，从而扩大了有机酸的种类。
三、利用固定化技术提高酸生产效率固定化技术是利用载体材料对微生物进行固定化，以提高其酸生产效率的一种方法。
固定化可以增加微生物对底物的吸附速度和细胞密度，提高产酸绝对产量。
近年来，一些研究在微生物生产有机酸中采用固定化技术取得了良好的效果。
例如，将醋酸菌固定在多孔陶瓷颗粒上，提高了醋酸的产量和稳定性。
四、利用代谢调控策略优化产酸微生物代谢调控是指通过改变微生物发酵条件中的某些因素，如pH值、温度、底物浓度等，来调节微生物产酸性能的一种策略。
代谢调控可以提高底物转化率、增加产酸速率，并且有助于维持微生物代谢的平衡。
例如，通过控制发酵的pH值和温度，研究人员成功提高了丙酸菌的产丙酸效率。
总结起来，利用微生物生产有机酸的研究进展日益明显。
发酵方法、代谢工程、固定化技术以及代谢调控策略等手段的不断发展与应用，使得微生物生产有机酸的效率和经济性得到了显著提高。
淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸的研究
淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸的研究近年来，由于乳酸的广泛应用，乳酸的制备成为研究热点之一。
德氏乳酸菌（Lactobacillus delbrueckii）是一种可以产生乳酸的发酵微生物，它可以使用各种底物制备乳酸，其中以淀粉原料为底物的德氏乳酸菌发酵制备乳酸被广泛研究。
本文旨在研究德氏乳酸菌附着于淀粉原料之上，以降低代谢产物的浓度和提高产量，并且研究其对制备乳酸的影响。
首先，实验研究了不同淀粉原料相应的培养基组合。
利用渗透法和乳酸电极测定法，研究了淀粉原料与德氏乳酸菌的配比对制备乳酸的影响。
实验结果表明，当淀粉原料/德氏乳酸菌的配比为20∶1时，乳酸的产率最高达到96.33％。
其次，研究了不同固定化淀粉原料（淀粉/德氏乳酸菌）规模上的乳酸产量。
实验结果显示，淀粉/德氏乳酸菌的配比为20∶1时，乳酸的产量最高，其最大产量可达到767.8 g/L，比采用淀粉原料制备乳酸提高了123.8%。
最后，本文进一步研究了淀粉原料中乳酸产生的分子机制。
结果表明，淀粉原料中存在丰富的糖类物质，德氏乳酸菌以糖聚糖为基础的质子转移，从而使得淀粉原料易于受到菌体的攻击，从而导致糖聚糖的枯萎，淀粉原料中乳酸的产生。
综上所述，本文研究了淀粉原料固定化德氏乳酸菌制备乳酸的方法。
结果表明，当淀粉原料/德氏乳酸菌的配比为20∶1时，乳酸的产量最高，其最大产量可达到767.8 g/L，比采用淀粉原料制备乳酸
提高了123.8%。
此外，研究了淀粉原料中乳酸产生的分子机制，从而阐明了淀粉原料固定化德氏乳酸菌的机理。
未来的研究应将重点放在提高固定化德氏乳酸菌的利用率以及提升乳酸产量上，从而进一步推动乳酸的应用和发展。
固定化多菌种及其产酸研究
固定化多菌种及其产酸研究
佚名
【期刊名称】《《中外食品加工技术》》
【年(卷),期】2003(000)004
【摘要】从优质窖泥中分离得到多种菌株,利用活细胞固定化技术对混合菌株的产酸情况进行了研究。
分别以改良的巴克培养基和酒糟浸出液为基础,通过改变培养基成份,用气相色谱分析检测不同发酵条件下各种有机酸的变化情况。
结果表明:甲酸、戊酸对混合菌种产酸有抑制作用,乙酸钠与固定化菌株产酸呈正相关:以乙酸+乳酸、乙酸+丙酸、乙酸+丁酸、丙酸+丁酸混合作为碳源,对己酸的生成有明显的促进作用;菌株对底物的转化趋势是:乙酸→丁酸→己酸;同时还发现,氮、磷对固定化菌株有机酸的产生影响很大。
此外,对固定化菌株发酵酒糟浸出液的有机酸产生情况进行研究,结果较为理想,可用于浓香型白酒的再生产。
【总页数】1页(P33)
【正文语种】中文
【相关文献】
1.固定化多菌种连续发酵及其产酸分析 [J], 刘永军;贾敬芬;张爱宁;邓小晨
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3.共固定化多菌种发酵椪柑果醋工艺研究 [J], 向小乐;黄婷;钱富燕;麻成金
4.共固定化多菌种混合发酵生产保健红醋的研究工共固定化多菌种酒精发酵条件的研究 [J], 王克明
5.共固定化多菌种双轮发酵生产保健红醋的研究(Ⅰ)——共固定化多菌种酒精发酵条件的研究 [J], 王克明
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尸 －一 日定化
由图 ２ 可以看出固定化乳酸菌在接种 ２ 后进 ｈ
人快速生长期，ｈ后进人稳定生长期， ６ 反以在柱式
参考文献
［］ １常秀莲． 对乳酸发酵中反情抑制 消除万法的探计 ［］食品与发肆工业．９８ （ ） Ｊ． １９ ，２ ４ ４
反应床发酵中， 可将固定化细胞培养２ 后， ｈ 开启蠕
水式电热恒温培养箱。
１２分析万法 ．
①残糖的测定一斐林滴定法。
酵生产乳酸， 即在发酵的过程中不断的添加碳酸钙 以中和发酵液中的乳酸。这不但增加了发酵过程 中染菌的机会， 而且工艺繁杂。如何在发酵过程 中， 降低细胞周围的乳酸浓度， 消除产物抑制， 提高 原料的利用率， 减少非生产时间， 降低生产成本 是 乳酸生产研究的重点。本文利用柱式反应床对固
见图 ２ －图 ５ 。
晰
（） ２ 固定化乳酸菌在柱式反应床中连续发酵 ５
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阴 侧 叶 洲 沥 山
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批次无细胞泄漏， 产酸稳定， 具有 良好的操作稳定
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（） ３ 固定化细胞在柱式反应床 中产 酸量 为 ６ ． ９
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Hale Waihona Puke ⑤ 柱式反应床中固定化细胞批次发酵稳定性
的考察 ： 操作同（ ）共做 ５批次。 ２，
由图 ３图 ４可知固定化乳酸 菌在柱式反应床 中产酸量和耗糖速率明显高于固定化细胞。 由图 ５ 可以看出： 发酵 ５批次， 产酸量没有明 显变化 ， 且循环的发醉液保持澄清状
以上结果表明本实验 中所 设计 的柱式 反应床
发醇培养基： １ ％、 葡萄糖 ０ 醇母膏 １５ 蛋 ． ％、
配制发酵培养液， 装人三角瓶中 ３ｍ ， ０ （灭
养， 每隔 ２ ｈ取出， 洗净， 定量加人 ２ ｍ 无菌水， ０工 用
接人 ３克未经预培养的固定化颗粒于 ４ ℃培 ０ 种子培养基： ２０ 醇母膏 １５ Ｃ － 菌， 葡萄糖 ．％， ．％， ａ
发酵装置性能良好， 能有效地防止染菌， 且操作 并 简便， 与未固定化乳酸菌的传统间歇发酵相 比具有 产酸量高， 产酸稳定的优点。反应床及发酵液储液 罐上的保温夹套可以使乳酸攻固定化细胞保持稳
图］ 仁 住Ｊ反心床绪甘示盆Ｉ 习
定的发配温度。蠕动泵可将恒定在 Ｐ ５ ０的发酵 Ｈ．
液不断地输人反应 柱 中， 避免 了产物抑制 ， 高 了 提 固定化细胞对基质的利用速度和产酸速度 ３ 结论 ．
床中， 通人发酵培养基。启动恒流泵， ０ 于４℃下， 发
作者简介 ： 齐Ｂ君（９７ ． 河南博 爱人、７ １５ 一）女． ａ教授。研充万向： 生
物 及制 药工程
酵培养。每隔 １ｈ取样， ２ 测定乳酸及残糖 的 含量
同时在三角瓶 中发醇未固定化细胞做对照
医生在线
现代 中医药 ２ ０ ０ ２年第 ５期
定化乳酸菌发酵生产乳酸进行了研究。
②乳酸的定量测定一Ｅ Ｔ Ｄ Ａ滴定法。
１３实验万法
① 固定化乳酸菌发酵工艺流程 菌种活化一 扩培一 细胞固定化一 柱 式反应床发酵一 乳酸提取。
② 柱式反应床发酵培养
在无菌条件下将 ０ｇ ３０ 固定化细胞装人柱
抽出发酵液， 同时向反应柱中加人新鲜发酵培养基
继续发醉。图 １ 为反应床装置示意图
③ 固定化乳酸菌生长曲线的测定 ；
活化培养基： 麦汁１％ Ｃ ３． ５ ０ ０ ａＯ０ ， Ｃ ６０ ５
（ ％、 。 、 岛２ 蛋白陈１ ％ 调节Ｐ ５ － ． Ｈ ． ５ ５６０
动泵进行乳酸发醉。
曰
派 ｝
［』 ２叶子坚 姚善没． 乳杆菌微胶索化培养的研究１１ １．
徽生物学报 ００ （ ） ２０ ， ０５ ４
［ ｉｎｋ Ｅ Ｓ ｌｒ ． ｍ Ｅ ｇＰ ｎ ， ｃ ｉＲ Ｃ ｅ ． ． ｇ １８ ３Ｌ ｉ ｙ ， ａ Ｇ ｈ ］ ｐ Ｓ ｉ ｎ ｎ ｒ ｏ ９６
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时闯 ｊ 一 ｌ
价阁 ｈ 士
２ｇ１ 未固定化细胞产酸量为 ３ ． １ ８／ ， ７ ６／， ｇ 。可见固 定化乳酸菌的产酸量较之未固定化明显提高。
图 ｓ乳曲翻产酸而线
Ｉ艺 Ｎ 洲定化乳限苗生长曲ｆ ｔ
‘，， １ ．．￣ 囚足化
２实验结果与讨论 ． ３１ 柱式反应来性能考察
在柱式反应床 中对固定化乳酸菌生长 曲线、 产
（） １ 固定化乳酸菌在接种 ２ ｈ后进人快速生长
期 ，１后进人稳定生长期 ， ６ ， 可将固定化细胞培养 ２ ｈ 后再开启蠕动进行乳酸发酵。
酸曲线、 耗糖 曲线及批资产酸量进行了测定， 结果
式反应床中， 通人发酵培养基７０ ！ ０ｍ 。启动恒流泵，
１实验研究方法 ．
１１ ． 材料和仪器 ① 菌种和试剂 植物乳杆菌、 海藻酸钠、 碳酸钙、 聚乙烯醇 （Ｖ ）硼酸、 ＰＡ、 氯化钙。
于４℃发酵培养。当残糖降至 ｌ／ ０ ｇＬ时停止发酵，
量为６ ．８／ ｏ ９２ｇＬ 关键词 乳酸； 固定化乳酸菌； 发酵； 柱式反应床
中图分类号 ：９４５ Ｒ １． 文献标识码 ： Ａ
乳酸是一种重要的有机酸， 乳酸及其盐类和衍 生物在医药、 食品工业中广泛用作酸味剂、 防腐剂、 还原剂、 杀菌剂等。国内目前多以传统的间歇法发
现代中医药 ２０ ０ ２年第 ５ 期
柱式反应床中固定化乳酸菌生产乳酸的研究
齐香君 刘树兴 薛宗明 陕西科技大学生命科学与工程学院（ 陕西・ 威阳 ７２８ １０劝
提 要 在柱式反应床中对固定化乳酸菌发绪生产歌酸进行 了 研究。结果表明： ） （ 固定化细胞在柱 １
式反应床 中可以连续化进行乳酸菌发酵 ；２ 连续化发０－ 艺条件为 ４ １ ， Ｈ ；３ 乳酸产 （） ｒ － ０ Ｐ ５ （） Ｃ
２ ５ ８ １５乳能脸肋价次产吸 创 圈
图． 砚定化与ｑ ： 幽定化９翻曲 ｋ 雌
￣ 口 － 未胭定于 ，尸 ｔ － ． 一 周定化
医生在线
剪刀将颗粒剪破， 挤压， 让颗粒中的菌体充分释放
出来， ６０ｍ处测其吸光值。 在 ８ｎ ④ 产酸曲线及葡萄糖消耗曲线的测定：
在无菌条件下将固定化细胞装人柱式反应
白陈 ．％， １０ 调节 Ｐ ５５ ．０ Ｈ ．一６５
② 仪器及设 备 ＨＬ －２恒流泵温、 自制 柱式反应床装置、 隔