测定金银花中6种有机酸类化合物含量的一种新方法
响应面法优化金银花中有机酸类成分提取工艺
响应面法优化金银花中有机酸类成分提取工艺1. 内容简述本论文研究了响应面法在优化金银花中有机酸类成分提取工艺中的应用。
通过构建数学模型，分析了不同提取条件对金银花中有机酸提取效果的影响，并确定了最佳提取条件。
研究结果表明，响应面法能够有效指导金银花有机酸提取工艺的优化，为提高提取效率和产品质量提供了科学依据。
本研究首先对金银花中有机酸类成分的提取工艺进行了综述，指出了传统提取方法存在的问题。
采用响应面法中的中心组合设计方法，选取了三因素三水平进行实验，建立了有机酸提取的二次多项式回归模型。
通过对模型进行分析和显著性检验，确定了各因素对提取效果的影响程度，并筛选出了最优提取条件。
为了验证模型的准确性和实用性，本研究利用优选出的最佳提取条件进行了实际操作，并对提取效果进行了评价。
实验结果表明，采用响应面法优化的提取工艺具有较高的提取效率和较好的重现性，为金银花有机酸类成分的进一步开发和应用奠定了基础。
1.1 研究背景学名为Lonicera japonica Thunb.，是忍冬科植物忍冬的花蕾，自古以来被誉为清热解毒的良药。
其花朵中含有丰富的有机酸类成分，这些成分具有广泛的生物活性，如抗菌、抗病毒、抗氧化等，对医药、食品、化妆品等行业具有重要意义。
随着现代制药工业的发展，对金银花中有效成分的提取工艺研究越来越受到重视。
传统的提取方法如水提取、醇提取等虽然操作简便，但存在提取效率低、溶剂残留等问题。
开发高效、环保、安全的提取工艺成为当前的研究热点。
响应面法（Response Surface Methodology, RSM）是一种基于数学模型和统计技术的优化方法，它通过构建合理的数学模型，实现对实验条件的精确控制，从而提高提取工艺的效率和产品质量。
RSM在中药提取工艺优化中的应用逐渐增多，显示出其独特的优势。
本研究旨在利用响应面法优化金银花中有机酸类成分的提取工艺，通过探讨不同提取条件对提取效果的影响，建立数学模型，为金银花有机酸类成分的高效提取提供理论依据和实践指导。
金银花中锌、铁、铜、钙、镁含量的测定
金银花中锌、铁、铜、钙、镁含量的测定摘要:目的:测定金银花中锌、铁、铜、钙、镁的含量。
方法:采用火焰原子吸收光谱法。
结果:在最佳实验条件下,使用混合标准溶液系列,测得结果如下, 锌:线性范围0.0107～0.5000μg/mL,γ= 0.9977,RSD=7.46% ,平均回收率=93.58%,检出限:0.0107μg/mL;铁: 线性范围0.0425～4.0000μg/mL,γ= 0.9992,RSD=5.10%,平均回收率=100.89%,检出限:0.0425μg/mL;铜:线性范围0. 0245～4. 0000μg/mL,γ=0.9991,RSD= 2.94%,平均回收率=103.78% , 检出限:0.0245μg/mL; 钙:线性范围0.0838～2.0000μg/mL,γ= 0. 9993, RSD= 5.77% , 平均回收率=103.19%,检出限:0.0838μg/mL; 镁:线性范围0.0048～0.3000μg/mL,γ= 0.9971,RSD=1.85%,平均回收率=103.90,检出限: 0.0048μg/mL。
结论: 火焰原子吸收光谱法测定金银花中的锌、铁、铜、钙、镁的含量, 方法简便可行, 准确度较高。
主题词:金银花/化学;@微量元素;锌;铁;@原子吸收光谱法金银花是忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb菰腺忍冬L.hypoglaucaM iq. 山银花L.confusa DC. 或毛花柱忍冬L. do systyla Rehd. 的干燥花蕾。
在我国金银花主要分布在河南、山东、广西等地。
本实验选取两个主产地的金银花, 用检出限低、选择性好、精密度高的原子吸收光谱法, 测定其锌、铁、铜、钙、镁的含量。
为研究中药功效与所含微量元素的关系提供基础数据。
1. 仪器与材料1. 1 仪器原子吸收分光光度计。
1. 2 材料硝酸(HNO3):优级纯,广东.汕头市西陇化工厂; 高氯酸(HClO4):优级纯,金鹿化工有限公司;锌(Zn)、铁(Fe)、铜(Cu)、钙(Ca)、镁(Mg)对照品溶液购于北京有色金属研究总院; 山东产金银花、河南产金银花均购于好一生医药超市。
高效液相色谱法测定金银花中4种有机酸含量
高效液相色谱法测定金银花中4种有机酸含量王建寰;张霞【摘要】目的建立高效液相色谱法(RP- HPLC)同时测定金银花中原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸含量的方法.方法采用高效液相色谱法,Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),0.1%磷酸溶液和乙腈采用梯度洗脱,检测波长280 nm,流速1.0 mL·min-1.结果金银花40%甲醇提取物中的杂质对4种成分的测定无干扰,4组分在各自的线性范围内:原儿茶酸0.252～6.30 μg·mL-1、绿原酸4.51～112.8 μg·mL-1、咖啡酸0.133～3.32 μg·mL-1、阿魏酸0.112～2.80 μg·mL-1内均呈良好的线性关系(r＞0.999),平均加样回收率、精密度、重现性和稳定性均符合有关规定.结论高效液相色谱法测定金银花操作简便,结果准确,为该类药材的入药及资源利用提供了依据.【期刊名称】《宁夏医科大学学报》【年(卷),期】2013(035)003【总页数】3页(P350-352)【关键词】金银花;高效液相色谱法;有机酸【作者】王建寰;张霞【作者单位】宁夏医科大学药学院、宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川,750004【正文语种】中文【中图分类】R931金银花(Flos Lonicerae)又名银花、双花、忍冬，性味甘寒，有清热解毒、凉散风热等功效，在临床上主要用于痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热［1］。
常以干燥花蕾或初花入药［2］，是临床常用中药。
金银花含黄酮类、有机酸、肌醇、皂甙及鞣质等［3］，有机酸及挥发油是金银花的主要有效成分。
绿原酸常常作为金银花质量控制的指标成分，但还不能全面反映金银花的内在质量，天然产物的功效通常不是靠单一成分的作用，而是多类型的组分结合，同时起作用才有诸多功效。
为了较全面反映金银花的质量，本研究建立了用微波提取、高效液相色谱法同时测定金银花中4种有机酸:原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸和阿魏酸含量的方法。
近红外光谱法快速测定山银花中四种有机酸
近红外光谱法快速测定山银花中四种有机酸张易;方婷;马晋芳;凌亚东;彭银;葛发欢【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2018(020)005【摘要】目的:建立近红外光谱(Near-Infrared Spectroscopy,NIR)快速检测山银花提取过程中四种有机酸含量的方法.方法:采集山银花NIR图谱,以高效液相色谱法为参考方法测定绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C的含量.采用偏最小二乘法(Partial Least square,PLS)建立定量校正模型.结果:校正模型中绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C的相关系数R分别为0.997 6、0.997 0、0.979 2、0.998 9,内部交叉验证均方根误差(RMSECV)分别为0.0394、0.0144、0.007 3、0.007 8;预测结果中上述成分对应的相关系数分别为0.892 0、0.827 9、0.878 4、0.995 1,预测均方根误差(RMSEP)分别为0.045 0、0.013 5、0.007 8、0.008 0,相对预测偏差(RSEP)分别为0.351 0％、0.018 0％、0.040 0％、0.005 7％.结论:所建近红外检测方法快速、准确,可用于山银花四种有机酸的快速检测.【总页数】7页(P644-650)【作者】张易;方婷;马晋芳;凌亚东;彭银;葛发欢【作者单位】中山大学药学院广州510006;广东省中药超临界流体萃取工程技术研究中心广州510006;广东药科大学广州510006;中山大学药学院广州510006;广东省中药超临界流体萃取工程技术研究中心广州510006;广州讯动网络科技有限公司广州510630;广东省中药超临界流体萃取工程技术研究中心广州510006;中山大学药学院广州510006;广东省中药超临界流体萃取工程技术研究中心广州510006【正文语种】中文【中图分类】R93【相关文献】1.近红外光谱法快速测定红花中羟基红花黄色素A [J], 李耿;高海燕;陈旭;宋嬿2.近红外光谱法测定西红花中西红花苷I含量的研究 [J], 张聪;胡馨;张英华;俞佳宁;周庆氢3.近红外反射光谱快速测定四种大豆制品中寡糖含量的研究 [J], 王潇潇;李军涛;孙祥丽;韩苗苗;陈义强;张丽英4.液相色谱-串联质谱法测定山银花中有机酸和黄酮类化合物的含量 [J], 史颖珠;侯建波;谢文;钱艳;黄超群;张雅琴;刘翠平;张辉5.近红外光谱法测定金银花中绿原酸含量 [J], 郝海群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
金银花提取物中5种有机酸含量测定的紫外光谱法
金银花提取物中5种有机酸含量测定的紫外光谱法金银花提取物中5种有机酸含量测定的紫外光谱法金银花是一种被广泛用于食品、饮料、药物等领域的传统中药材，被证明具有抗病毒、抗炎、镇静等多种作用。
因此，对金银花提取物的质量控制显得非常重要。
其中，有机酸是影响金银花提取物质量的关键因素之一，因此，测定其中有机酸的含量是必要的。
本文将介绍一种测定金银花提取物中5种有机酸含量的紫外光谱法。
一、实验原理利用紫外光谱法测定金银花提取物中5种有机酸的含量。
其原理是：有机酸分子中的羧基（COOH）能够吸收200~300 nm波长的紫外光，因此，在该波长范围内，有机酸溶液将吸收部分光线，其吸光度与溶液中所含有机酸的浓度成正比。
二、实验步骤1. 制备样品溶液：取金银花提取物5 g，用水稀释至100 mL，并确保溶液均匀。
2. 制备标准曲线：分别取浓度为0.01 mol/L的乙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸的溶液，用水稀释至一定浓度，分别在200~300 nm波长范围内进行紫外吸收实验，并记录吸光度和浓度，绘制标准曲线。
3. 测定样品吸光度：取样品溶液2 mL，用水稀释至10 mL，利用紫外可见分光光度计，在200~300 nm波长范围内测定样品吸光度。
4. 计算样品中有机酸的浓度：利用标准曲线，根据样品吸光度计算出每种有机酸的浓度，再相加即可计算出金银花提取物中5种有机酸的总含量。
三、实验结果在本实验条件下，测量了样品吸光度，并利用标准曲线计算出5种有机酸的浓度，最终得到金银花提取物中乙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸的含量分别为0.0233 mol/L、0.0135 mol/L、0.0122 mol/L、0.0196 mol/L、0.0251 mol/L，总含量为0.0937 mol/L。
四、实验结论本文介绍了一种测定金银花提取物中5种有机酸含量的紫外光谱法。
实验结果表明，金银花提取物中乙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸的含量分别为0.0233 mol/L、0.0135 mol/L、0.0122 mol/L、0.0196mol/L、0.0251 mol/L，总含量为0.0937 mol/L。
高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸的含量
高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸的含量【摘要】目的建立金银花提取物中绿原酸含量的HPLC测定方法。
方法国产C18柱（4.6 mm×250 mm，7 μm）;流动相为乙腈：0.4%磷酸（12∶88）；检测波长为327 nm；流速1 ml・min-1；进样量10 μl；柱温25℃。
结果绿原酸在0.071 6～0.644 4 μg范围内线性关系良好，r=0.999 6；平均回收率99.99%，RSD=1.61%（n=6）。
结论该方法简便、快速、准确，可用于金银花提取物的含量测定及质量控制。
【关键词】金银花提取物；绿原酸；高效液相色谱法AbstractObjectiveTo establish a method for the determination of Chlorogenic acid in the extract of Flos Lonicerae.MethodsThe chromatographic conditions were as follows: C18 chromatographic column (4.6 mm×250 mm，7 μm)，a mobile phase of acetonitrile and 0.4%H3PO4(12:88)，the detection wavelength at 327 nm and the flow rate being 1 ml・min-1. ResultsA linearity of Chlorogenic acid in the extract was obtained in the range of 0.071 6～0.644 4 μg r=0.999 6(n=6).The average recovery was 99.99% and RSD=1.61%(n=6). ConclusionThis method is easy，sensitive and accurate for the determination of Chlorogenic acid in the extract of Flos Lonicerae.Key wordsChlorogenic acid; HPLC; Determination金银花Flos Lonicerae又名忍冬、双花，为临床常用中药，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等［1］。
紫外-可见(UV-Vis)光谱法在中药质量控制中的应用
紫外-可见(UV-Vis)光谱法在中药质量控制中的应用李文龙【摘要】紫外-可见(UV-Vis)光谱法作为一种传统的光谱分析方法,在中药质量控制领域得到广泛应用,本文对该技术的应用现状进行文献综述,对该技术在大类物质含量测定、作为色谱检测器、及其与化学计量学的结合使用情况进行详细论述,并对其应用前景进行展望,可为该技术更为深入、全面的应用提供参考.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2018(027)022【总页数】4页(P47-50)【关键词】紫外-可见光谱;中药质量控制;比色法;检测器;化学计量学【作者】李文龙【作者单位】天津中医药大学中药制药工程学院, 天津 300193;浙江大学药物信息学研究所, 浙江杭州 310058【正文语种】中文【中图分类】R282紫外可见光谱(Ultraviolet-visible spectroscopy, UV-Vis)是指波长范围在200～760 nm之间的波段，该波段属于电子光谱，是由于价电子的跃迁而产生的吸收光谱。
利用物质的分子或离子对紫外和可见光的吸收所产生的UV-Vis光谱及吸收程度可以对物质的组成、含量及结构进行分析、测定和推断。
UV-Vis光谱用于具有紫外、可见光吸收物质的检测，灵敏度高，特征性好，在中药质量控制得到了广泛的应用。
本文对UV-Vis光谱法在中药质量控制中的应用进行综述，并对其应用前景进行展望，以期为相关领域的研究提供参考。
1 比色法测定多种大类物质的含量比色法(colorimetry)是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度，并根据朗伯比尔定律确定待测组分浓度或含量的方法。
常用的检测波段是UV-Vis波段，虽然该方法是一种历史悠久的传统分析方法，但目前在中药质量控制领域仍被广泛应用。
苏玉顺等[1]对UV-Vis光谱法测定植物多糖含量过程中的显色剂选取、测定条件的优化以及具体应用进行了分析，具有较好的参考价值。
古炳明等[2]采用UV-Vis 分光光度法建立了巴豆中可溶性蛋白含量的测定方法，检测波长为593 nm，巴豆中可溶性蛋白在0.010 3～0.103 0 mg/ml范围内线性关系良好,平均回收率为98.37%，RSD为1.01%，该方法简单、方便、专属性强，可为其质量评价提供理论依据。
高效液相色谱法同时测定会银花中6种成分
高效液相色谱法同时测定会银花中6种成分
高效液相色谱法同时测定会银花中6种成分
建立了高效液相色谱法同时测定金银花中3种有机酸(绿原酸、咖啡酸、阿魏酸)和3种黄酮(芦丁、木犀草苷、槲皮素)的方法.样品中6个组分用50%甲醇在80℃水浴浸泡提取1 h,采用Agilent TC-C18色谱柱分离,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,用紫外二极管阵列检测器检测,方法的加标回收率为93.3%-98.6%.实验结果表明该方法的精密度和重现性良好,操作简单、准确,可同时测定金银花中的有机酸类和黄酮类成分.
作者：胡海山余燕影万春花鄢兵龙洲雄Hu Haishan Yu Yanying Wan Chunhua Yan Bing Long Zhouxiong 作者单位：胡海山,Hu Haishan(南昌大学化学系,南昌,330031;江西省分析测试研究所,南昌,330029)
余燕影,Yu Yanying(南昌大学化学系,南昌,330031)
万春花,鄢兵,龙洲雄,Wan Chunhua,Yan Bing,Long Zhouxiong(江西省分析测试研究所,南昌,330029)
刊名：现代科学仪器ISTIC英文刊名：MODERN SCIENTIFIC INSTRUMENTS 年，卷(期)：2008 ""(5) 分类号：P65 关键词：高效液相色谱金银花绿原酸咖啡酸阿魏酸芦丁木犀草苷槲皮素。
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成分的浓度与检测器响应在一定的范围内 成正比，即ｆ＝Ｗ／Ａ（其中，ｗ表示浓度，Ａ表 示响应值）。本研究在金银花的多指标含量测
定时，分别以绿原酸和咖啡酸为参照物，计算其
它成分的相）（寸校正凶子。在实际测定时，用外 标法测定绿原酸或咖啡酸，再通过校正因子计 算其它化学成分的含量。同时，用常规方法进 行同步测定，以验证计算值的正确性和可行性。 相对校正因子的计算方法一Ｊ：
第４１卷第１期
２０１２丘
浙江大学学报（医学版）
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＺＨＥＪＩＡＮＧ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥＳ）
Ｖｏｌ ４ｌ Ｎｏ １
２０１２
ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｏｕｒｎａｌｓ．ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ／ｍｅｄ
ＤＯＩ：１０．３７８５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—９２９２．２０１２．０１．００３
。｜，等＝鬻 ㈩
其中：Ｓ，ｋ分别代表内参物和其它待测 成分。 ２．１色谱条件色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ— Ｃ１ ８（２５０ １Ｙｌｍ×４．６ ｍｍ，５¨ｍ）。流动相：Ａ相为 ０．１％甲酸一水，Ｂ相为０．１％甲酸一乙腈，采用二 元梯度洗脱，洗脱程序为０～２５ ｍｉｎ，Ｂ相：８％ ～８％；２５～３０ ｒａｉｎ，Ｂ ｊ：｛：目：８％～１９％；３０～６０
ｏｒｇａｎｉｃ ａｃｉｄｓ ｗｅｒｅ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ＲＣＦｓ ｆｏｒ ｔｈｅ
ｎｅｏｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ（ＮＣＡ），３，４－０一ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ ａｃｉｄ（３，４一ＤＣＡ）．３，５－０一ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ ａｃｉｄ（３，５． ＤＣＡ），ａｎｄ ４，５·Ｏ—ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ ａｃｉｄ（４，５一ＤＣＡ）ｗｅｒｅ ５．４６２，５．６８９，２．３１３，２．３８２（ｔｏ ＣＡ）ａｎｄ
金银花（Ｌｏｎｉｃｅｒａｅ Ｊａｐｏｎｉｃａｅ Ｆｌｏｓ．）为忍冬 科植物忍冬（Ｌｏｎｉｃｅｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｔｈｕｎｂ）的干燥花 蕾或带初开的花，味甘、性寒，为常用中药，具有 清热解毒、疏散风热的功效。有机酸类化合物 是金银花的主要有效成分，包括咖啡酸（ＣｆＡ）、 绿原酸（ＣＡ）、新绿原酸（ＮＣＡ）和异绿原酸等， 其中异绿原酸为一种混合物，它的异构体有６ 种，分别为４，５一二咖啡酸酰奎尼酸（４，５－ＤＣＡ）、 ３，４－二叻Ｉ］啡酸酰奎尼酸（３，４一ＤＣＡ）、３，５一二咖 啡酸酰奎尼酸（３，５一ＤＣＡ）、ｌ，３’一二咖啡酸酰奎 尼酸、３一阿魏酰垒尼酸和４一阿魏酰奎尼酸¨“。 除绿原酸和咖啡酸外，其余标准品由于分离纯 化比较困难，价格昂贵，难以应用到常规分析 中。本研究以金银花药材为例，通过对其中ＣＡ 和ＣｆＡ含量的测定，实现了对其它４种有机酸 类化合物（ＮＣＡ、３，４．ＤＣＡ、４，５一ＤＣＡ、３，５一ＤＣＡ） 的含量测定，效果较为满意。
表１重复性考察结果
Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ
２．６稳定性考察将供试品溶液置于室温下， 分别在０、２、４、８、１６、２４ ｈ后进样分析，结果见 表２。在该色谱条件下，各有机酸类成分的稳 定性ＲＳＤ均＜５％，表明在２４ ｈ以内，各有机酸
［Ｊ Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖ（Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉ），２０１２，４１（１）：１３—１８．］
中药成分的复杂性决定了必须采用多成分 含量测定、多指标质量评价的模式对其进行质 量控制，建立这种分析方法需要有多种对照品 建立标准曲线，但是部分中药标准品存在分离 难度大、单体不稳定、难以供应或供应价格高等 问题，使得该模式仅限于少数科研项目，而难以 推广到工业生产上。为解决这一问题，王智民 等。１。３ ｏ提出，通过测定一个易得对照品成分的含 量，求出其它药效成分对应于这一标准品的校 正因子，来实现多个成分的“一测多评法”，尤 其是对照品匮乏成分的测定。该方法可实现在 对照品短缺的情况下，进行多指标成分的含量 测定。此法经实践验证，具有可行性和技术适 应性，已被采纳录入２０１０版《中国药典》【４Ｉ，目 前有白芍、黄芩等药材。５。１ ２。以及喜炎平、冠脉康 胶囊等中成药。１ ３’１４ ｏ的相关研究报道。
万方数据
第１期
令文龙，等．测定金银花中６种有机酸类化合物含量的一种新力‘法
ｒａｉｎ，Ｂ相：１９％～１９％。另外，流速：１ ｍｌ· ｒａｉｎ～，检测波长：２８０ ｎｍ，柱温：２５％，进样量： １０¨Ｉ。在此色谱条件下，所得混合标准品和样 品的色谱图如图１所示。
６００
３ ４００ 《 ｃ ２００
０
】Ｏ
２０
３０
４０
５０
６０
ｔＲ／ｍｉｎ
８００
６００
４００
２００
Ｏ
１０
２０
３０
４０
５０
６０
ｔＲ／ｒａｉｎ
１：新绿原酸；２：绿原酸；３：咖啡酸；４：３，５－二
咖啡酸酰奎尼酸；５：３，４－二咖啡酸酰奎尼酸；６：４， ５－二咖啡酸酰奎尼酸．
图１ 混合标准品（Ａ）及金银花药材提取液Ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ
１仪器与试药
１．１ 仪器 Ａｇｉｌｅｎｔ １１００型高效液相色谱仪 （美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；ＭＩＬＬＩＰＯＲＥ超纯水器（美 国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）；ＫＱ一２５０Ｂ型超声波清洗仪 （昆Ｉ ＪＪ市超声仪器有限公司）；ＭＥＴＦＬＥＲ ＡＥ２４０ 电子天平（梅特勒一托利多公司）；ＦＬ－０２７高速 台式离心机（德国Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司）。 １．２试药实验用乙腈、甲酸均为色谱纯，水 为超纯水。ＣＡ、ＣｆＡ对照品购自中国药品生物 制品检定所，ＮＣＡ、３，４一ＤＣＡ、３，５一ＤＣＡ、４，５一 ＤＣＡ由本实验室自制，纯度均＞９５％。金银花 药材样品由上海凯宝药业有限公司提供。
测定金银花中６种有机酸类化合物含量的一种新方法
李文龙１，张文明２，薛东升２，陈 俊１，瞿海斌１
（１．浙江大学药物信息学研究所，浙江杭州３１００５８；２．上海凯宝药业有限公司，上海２０１４１８）
［摘 要］ 目的：为解决金银花药材分析中部分对照品价格高、不易获得的问题，建立了一测多评 的分析方法。方法：通过测定绿原酸（ＣＡ）、咖啡酸（ＣｆＡ）的含量，以及与其它有机酸的相对校正因 子（ＲＣＦ），计算出其它几种有机酸的含量。结果：在一定线性范围内，ＣＡ与新绿原酸（ＮＣＡ）、３，４． 二咖啡酸酰奎尼酸（３，４一ＤＣＡ）、３，５一二咖啡酸酰奎尼酸（３，５一ＤＣＡ）、４，５一二咖啡酸酰奎尼酸（４，５一 ＤＣＡ）的ＲＣＦ分别为５．４６２、５．６８９、２．３１３、２．３８２，ＣｆＡ与ＮＣＡ、３，４一ＤＣＡ、３，５一ＤＣＡ、４，５一ＤＣＡ的ＲＣＦ 分别为３．９４１、４．１０３、１．６６９、１．７１８。该方法在不同实验室、不同型号的高效液相色谱仪以及不同 色谱柱上进行验证，重现性满意；与外标法相比，所得结果经方差分析均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）， 准确度较高。结论：该方法可采用较易获得的对照品测定金银花药材中多种有机酸的含量，有助于 对金银花药材进行更为全面的质量控制。
ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄｓ（Ａ）ａｎｄ ｓａｍｐｌｅ
ｓｏｌｕｔｉｏｎｆ Ｂ）
２．２对照品溶液制备 精密称取ＣＡ、ＣｆＡ、 ＮＣＡ、３，４．ＤＣＡ、４，５－ＤＣＡ、３，５．ＤＣＡ标准品适 量，用５０％的甲醇配制成单个标准品储备液， 分别精密量取各储备液适量，配制成混和标准 品储备液，并稀释成系列浓度的混和标准品。 以上６种有机酸在混合标准品储备液中的质量 浓度分别为０．９６０、１．０５、０．９７５、０．４３５、０．９４５、
ａｓ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｌｏｎｉｃｅｒａｅ Ｊａｐｏｎｉｃａｅ Ｆｌｏｓ ｗｉｔｈ ｅａｓｙ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ．
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］
Ｆｌｏｓ ｌｏｎｉｃｅｒａｅ／ａｎａｌｙｓｉｓ；Ｏｒｇａｎｉｃ ａｃｉｄｓ；Ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ／ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ， ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｌｉｑｕｉｄ
Ｊａｐｏｎｉｃａｅ Ｆｌｏｓ
ＬＩ Ｗｅｎ—ｌｏｎ９１，ＺＨＡＮＧ Ｗｅｎ—ｍｉｎ９２，ＸＵＥ Ｄｏｎｇ—ｓｈｅｎ９２，ＣＨＥＮ Ｊｕｎｌ，ＱＵ Ｈａｉ－ｂｉｎ １（１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｌｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，Ｚｈ巧ｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ ３ １００５８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｋａｉｂａｏ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｃｏ，Ｌｔｄ．， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１４１８，Ｃｈｉｎａ）
３．９４１，４．１０３，１．６６９，１．７１８（ｔｏ ＣｆＡ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｖａｌｉｄａｔｅｄ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
，ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
０．８７０ ｍｇ·ｍｌ～。
２．３供试品溶液制备精密称取１ ｇ金银花 药材粉末置于２５ ｍｌ容量瓶中，用５０：５０的甲 醇：水定容至刻度，超声提取２ ｈ，取提取液１ ｍｌ，在１０ ０００ ｒ／ｍｉｎ下离心１０ ｒａｉｎ，取１０斗ｌ上 清液用于液相分析。 ２．４精密度实验在线性范围内，分别进行日 内精密度（１ ｄ内连续分析６次）和日问精密度 （３ ｄ内每天分析１次）的考察。结果表明，６ 种有机酸的日内精密度ＲＳＤ均＜３％，日问精 密度ＲＳＤ均＜５％。表明该方法具有满意的精 密度。 ２．５重复性考察 精密称取同一批次金银花 药材粉末６份，按照２．３项下的方法进行提取， 提取液依次进行ＨＰＬＣ分析。在该色谱条件 下，各有机酸类成分的重复性ＲＳＤ均＜５％（表 １），表明该定量方法的重复性良好。