肺泡上皮细胞培养
胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离及原代培养
胎 鼠肺泡 Ⅱ型上皮 细胞 的分离及 原代培 养
付红敏 ， 许 峰， 黄 波， 杨 呜， 符跃 强 ， 方 芳， 匡风梧
４０ １） ００ ４ （ 重庆医科大学附属儿 童医院儿科重症监护室 ， 重庆
【 摘
要】 的： 目 探讨胎 鼠肺泡 Ⅱ 型上皮细胞（ ｌ ｏ ｒｐｈｌｌｅ ｐ Ａｖ ｌ ｉｅａｃｌｙｅⅡ，Ｅ ） ｅ ａｅ ｔ ｉ ｌ ｔ Ａ ＣＩ 的分离 、 Ｉ 纯化及原代培养方法 ， 为有关胎儿肺
一
５６一 ８
重庆医科大学学报 ２０ 年第 ３ 卷第 ５ （ ｕｎ ｌ ｆ ｈ ｎ ｑ ｇ ｅ ｉ ｌ ｎ ｅｓ ｙ ， ９ Ｖ １４ ｏ ０９ ４ 期 Ｊ ｒａ ｏ Ｃ ｏ ｇ ｉ ｄ ａ Ｕ ｉ ｒｔ ０ ． ｏ ３ ． ｏ ｎ Ｍ ｃ ｖ ｉ ２ ０ ． Ｎ ５）
攮 方 章 号２— ６００ ５ ０ 誉 法 文 编 ：３６（９—８ ４ ０ ３ ２ ）０ — ５ ２０ ５ ６
大小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离培养方法
大小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离培养方法程涵蓉;吴本清;何少茹【摘要】肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)是肺泡上皮细胞的"祖细胞",可分化为AECⅠ,其作用与肺组织的生理功能密切相关,获取AECⅡ将为肺部疾病的研究提供良好的实验模型和基础.大鼠和小鼠是常用的制备AECⅡ的动物,胎肺的消化方法和消化酶的种类、分离纯化的方法、鉴别的方法以及培养方法等是AECⅡ研究的重点和难点,虽然已经进行了广泛研究,但目前尚未形成一套完善的胎鼠AECⅡ分离、纯化与鉴定的方法.此外,AECⅡ的产量、纯度和传代等都是需要将来继续探索的问题.%Type Ⅱ alveolar epithelial cells(AEC Ⅱ) are the ''progenitor cells'' of alveolar epithelial cell,which can differentiate into AECⅠ and its effect is closely related to physiological function of lung tissue.Fetal rat AECⅡ provides a good experimental model and basis for studying lungdise ases.Rats and mice are the common animals for preparing AEC Ⅱ.Fetal lung digestion methods and digestive enzyme types,isolation and purification methods, identification and culture methods are the focus of AEC Ⅱ studies,though extensive studies have been c arried out,good methods for AECⅡisolation,purification and identification have not been established.The production,purity and survival of AEC Ⅱ are need to be explored in the future.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)013【总页数】5页(P2653-2657)【关键词】胎鼠;大鼠;小鼠;肺泡Ⅱ型细胞;分离;纯化;鉴定【作者】程涵蓉;吴本清;何少茹【作者单位】暨南大学第二临床医学院广东省深圳市人民医院儿科,广东深圳518020;广东省人民医院儿科广东省医学科学院,广州 510080;南方医科大学,广州510515;暨南大学第二临床医学院广东省深圳市人民医院儿科,广东深圳518020;广东省人民医院儿科广东省医学科学院,广州 510080;南方医科大学,广州 510515【正文语种】中文【中图分类】R321.54肺泡Ⅱ型上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithel ial cell，AECⅡ)被认为是肺泡上皮细胞的“干细胞”，具有原代特性，因而原代培养的AECⅡ是病因学和病机学的重要模型[1]。
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞处理方法
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞处理方法小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理。
一．小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞贴壁细胞客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X 各一张）。
显微镜观察细胞，当细胞融汇80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。
如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
用PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
1000rpm,5min离心，重悬细胞。
换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2培养。
二．小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞悬浮细胞1.接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
2.肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。
5.1000rpm,5min离心，重悬细胞。
换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2培养。
小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定
小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的别离、培养和鉴定
小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的别离、培养和鉴定
目的:建立一套可靠的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)别离、纯化和培养技术, 为进一步研究小鼠支气管肺泡干细胞(BASC)的增殖、分化及其在肺腺癌发生中的作用奠定根底.方法:采用分散酶消化小鼠肺组织块,经免疫黏附法纯化小鼠AEC Ⅱ,并进展原代培养.用SP-C和CCSP免疫荧光染色和透射电镜对所别离的细胞进展鉴定.结果:该方法所获得细胞产量大、纯度高.AEC Ⅱ比例约为(80±2.6)%(n=5),Clara细胞约
(6.7±1.2)%(n=5),并能维持培养3～5 d.透射电镜观察AEC Ⅱ,细胞内可见板层小体.结论:该方法是一种可靠的`小鼠AEC Ⅱ的别离、纯化和培养技术,可满足一般的实验要求.
作者：
安江洪钱莘敖绪军卓文磊陈正堂 AN Jiang-hong QIAN Shen AO Xu-jun ZHUO Wen-lei CHEN Zheng-tang 作者单位：
第三军医大学附属新桥医院解放军肿瘤研究所,重
庆,400037
刊名：
医学研究生学报 ISTIC
英文刊名：
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES
年，卷(期)：
2023 21(3)
分类号：
Q813.1
【关键词】：^p ：
肺泡Ⅱ型上皮细胞原代细胞培养小鼠支气管肺泡干细胞。
大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞使用说明
大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞编号名称规格北京派瑞金GK1003大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞5×105cells/瓶为能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
大鼠II型肺泡上皮细胞简介：1、名称：大鼠II型肺泡上皮细胞2、组织来源：正常大鼠3、规格：25cm2培养瓶4、细胞简介：肺泡上皮细胞由肺泡I型(AECI)上皮细胞和肺泡Ⅱ型(AECII)上皮细胞构成，其比例约为1：2，这两类细胞在功能上和形态上明显不同。
AEC II在数量上比AECI 多，但是即使将AECⅡ顶部的微绒毛计算在内，其所占的肺泡上皮表面面积的比例也不足10%。
AECⅡ呈立方形，胞浆里面含有板层小体是其基本特征，是鉴别AECⅡ的主要依据。
肺泡Ⅱ型上皮细胞是肺泡上皮组织干细胞，在正常的细胞更新和修复过程中，它既可以分化为AECⅡ，也可以通过有丝分裂来维持自身细胞群。
本公司生产的大鼠II型肺泡上皮细胞采用胰酶和胶原酶消化制备而来，细胞总量约为5X105个/瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5、培养基信息：1）培养基类型：M1992）添加因子：FBS、Penicillin、Streptomycin等大鼠II型肺泡上皮细胞使用方法：收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1.取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化和鉴定
ＩＧ ｏ ｔｄ ｐ ａｅ ｉ ａ ｂ ｔ ｒｍｅｈ ｄ ｔａ ｔ ｅ ｅ ｏｔｄ ｍｅｈ ｄ ． Ｉｃ ｌ ｏ ｌ ｅｃ ａａ ｔｒｚ ｄ ｔｒｕ ｈ ｄ — ｇ ｃ ａｅ ｌｔ ｓ ｅｔ ｔｏ ｈ ｎ ｏｈ ｒｒｐ ｒｅ ｔｏ ｓ ＡＴ Ｉ ｅｌ ｃ ｕｄ ｂ ｈ ｒｃｅ ｅ ｈ ｏ ｇ ｅ ｅ ｓ ｉ
Ｍ ｅ ｈｏ ＡＴ Ｉｃ ｉｓ ｗｅ ｅ ｉｏ ａｅ ｂ ＇ ｔ ｄ．Ｔｈ ｅｌ ｒ ｕ ｉ ｅ ｙ ｕ ｉ ａ ｇ ｃ ａ ｅ ｓ ｅ ｔ ｄｓ Ｉ ｅ ｌ ｒ ｓ ｌｔ ｄ ｂｙ Ｄｏ ｂｓｓ ｍｅｈｏ ｅ ｃ ｌｓ ｗｅ ｅ ｐ ｒｆ ｄ ｂ ｓｎｇ ｒ ｔＩ Ｇ ｏ ｔ ｄ ｄｉｈ ｓ ｉ
１ 实验 动物 Ｓ Ｆ ． １ Ｐ 级雄性 Ｓ Ｄ大 鼠２ 只 （ Ｏ 大连 医 科 大 学 动 物 实 验 中 心 ， 可 证 号 ＳＸ 辽 ） 许 Ｃ Ｋ（ ２ ０一 ０ ２ ， ０ ２ ｏ０ ）体质量 １０ ２０ｇ ８ ～ ２ 。 １ 主要实验仪器 细胞培养箱 （ ｅａｕ 德 国 ） ． ２ Ｈｒ ｓ ｅ ； 研究级荧光倒置生物显微镜（ｅ ａ Ｌｉ 美国）低温离心 ｃ ；
ｏ Ｉｃ ｌ ａ ２ ． Ｃｏ ｃｕ ｉｎ Ｉ Ｉｃ ｌ ｓ ｌｔ ｎ ｕ ｆ ａｉｎ ａ ｄ ｉｅ ｔ ｃ ｔ ｎ ｐ ｏ ｅ ｕ ｅ ，ｏ ｔ ｆ ＡＴ Ｉ ｅｌ ｗ ｓ９ ％ ｓ ｎ ｌ ｓｏ ｎ ＡＴ Ｉ ｅｌ ｉｏａｉ ，ｐ ｒｉ ｔ ｎ ｄ ｎｉ ａｉ ｒｃ ｄ ｒｓ ｐ ｉ ｓ ｏ ｉ ｃ ｏ ｉ ｆ ｏ —
肺表面活性物质相关蛋 白Ａ Ｓ— ） （Ｐ Ａ 免疫组化染色， 其在电镜下有特征性板层小体， 免疫组化染色见胞浆有ｓ— Ｐ Ａ表达。结 果 ：
纯化后台盼蓝染色显示细胞活力为９ ％以上。通过ｓ — 免疫组化染色判定 ， ５ ＰＡ 纯化后Ａ Ⅱ纯度可达９ ％。结 论 ： Ｔ ２ 分离、 纯化
干细胞改善肺纤维化的五个经典案例
干细胞改善肺纤维化的五个经典案例
1. 2016年，美国哈佛大学医学院的研究团队成功通过干细胞治疗，使一名患有严重肺纤维化的患者病情得到明显缓解。
研究人员将自体干细胞注射到患者的肺部，干细胞能够修复受损的肺组织，减少纤维化程度，改善呼吸功能。
2. 2017年，中国广东省人民医院的研究团队成功使用干细胞治疗肺纤维化患者。
研究人员从患者的骨髓中提取干细胞，经过培养和扩增后，将其注射到患者的肺部。
治疗后，患者的肺功能明显改善，纤维化程度减轻。
3. 2018年，日本名古屋大学医学院的研究团队成功将诱导多能干细胞（iPSCs）转化为肺泡上皮细胞，并成功移植到小鼠模型中。
研究人员发现，移植的肺泡上皮细胞能够修复受损的肺组织，减轻肺纤维化的程度。
4. 2019年，英国伦敦帝国理工学院的研究团队通过使用干细胞修复剂（stem cell conditioner）治疗肺纤维化患者。
研究人员将干细胞修复剂喷雾到患者的肺部，干细胞修复剂能够促进干细胞的生长和分化，从而修复受损的肺组织，改善呼吸功能。
5. 2020年，韩国首尔大学医学院的研究团队成功使用间充质干细胞治疗肺纤维化患者。
研究人员将间充质干细胞注射到患者的肺部，间充质干细胞能够抑制炎症反应和纤维化过程，促进受损肺组织的
修复和再生。
治疗后，患者的肺功能得到明显改善。
一种大鼠ⅱ型肺泡上皮细胞原代提取方法
一种大鼠ⅱ型肺泡上皮细胞原代提取方法大鼠ⅱ型肺泡上皮细胞原代提取方法：
1.采集实验动物，洗涤表皮，将肺泡放入PBS缓冲液中浸泡；
2. 以刮片的方式，将少量的肺泡放入蜜糖酸钠液(0.25 mg/ml)内，均匀搅拌分散肺泡；
3.将搅拌后的肺泡液滤过，采用毛细管滤过，去除杂质；
4. 采用0.25% trypsin/EDTA液溶解上皮细胞，对溶解后的细胞悬液进行脱离，细胞懸浮液放入新配制的培养皿内，恢复培养；
5.采用体外培养技术，添加特殊的培养基，进行培养，培养环境控制在37℃、5%CO2的条件下，从而获得大鼠ⅱ型肺泡上皮原代细胞。
细胞培养基本技术
医学实验中心 闾宏伟
主要内容
细胞培养的基本概念 细胞培养的基本条件 细胞培养用液的配制 细胞培养的基本方法 培养细胞活力测定 细胞冻存和复苏 细胞培养的污染和检测
一、基本概念
细胞培养(cell culture)：在体外条件下，模 拟体内的生理环境，用培养液维持细胞生 长与增殖的技术。 组织培养 (Tissue culture)：把活体的一小 片组织（O.5～1立方毫米）置于底物上孵 育，细胞自其周围移出并生长。 器官培养 (Organ culture)：将活体中整个 器官或一部分器官取出，置于体外生存、 生长并同时保持其一定的结构和功能特征。
血清解冻步骤
逐步解冻法
–20℃ 或–70℃至4℃冰箱溶解一天，至室 温下全溶后再分装，一般用50 ml无菌离心管可 分装40～45 ml。
勿直接由–20℃至37℃解冻，因温度改变 太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
无机盐
CaCl2 、KCl 、MgSO4、 NaCl 、 NaHCO3 、NaH2PO4 对调节细胞渗透压、某些酶的活性 及溶液的酸碱度都是必须的。
酶液等均采用滤过法除菌。
安装滤膜时注意：滤膜光滑一面是正面，要朝
上，否则起不到过滤的作用。
CO2培养箱
CO2培养箱设定的条件为37℃，5％CO2 使用CO2培养箱应注意的问题：
。
①用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，
以保证通气。 ②保持培养箱内空气干净，定期消毒擦拭。 ③箱内蒸馏水槽中定期更换灭菌蒸馏水3000 毫升，以保持箱内湿度。
抗生素溶液
通常是青霉素和链霉素联合使用，俗称“双抗 溶液”。
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞使用说明
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞其他相关小鼠原代细胞：小鼠小肠粘膜上皮细胞小鼠大隐静脉平滑肌细胞小鼠肺微血管内皮细胞小鼠冠状动脉平滑肌细胞小鼠肺血管平滑肌细胞小鼠大隐静脉内皮细胞小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞小鼠气管上皮细胞小鼠骨细胞小鼠气管平滑肌细胞小鼠滑膜细胞小鼠肺成纤维细胞小鼠骨骼肌细胞小鼠支气管上皮细胞小鼠表皮细胞小鼠支气管成纤维细胞小鼠真皮成纤维细胞小鼠肺大静脉平滑肌细胞小鼠破骨细胞小鼠肺大动脉平滑肌细胞小鼠皮肤肥大细胞小鼠肺大动脉内皮细胞小鼠前脂肪细胞小鼠肺动脉成纤维细胞小鼠成骨细胞小鼠肺大静脉内皮细胞小鼠关节软骨细胞小鼠气管和支气管上皮细胞小鼠胎儿表皮角质形成层细胞小鼠胰岛细胞小鼠成年表皮角质形成层细胞小鼠胰腺星状细胞小鼠皮下脂肪细胞小鼠胰腺导管上皮细胞小鼠内脏脂肪细胞小鼠颌下腺上皮细胞小鼠脑动脉血管内皮细胞小鼠腮腺细胞小鼠脑动脉血管平滑肌细胞小鼠乳腺上皮细胞小鼠脑静脉血管内皮细胞小鼠胰腺上皮细胞小鼠脑静脉血管平滑肌细胞小鼠甲状腺上皮细胞小鼠脑膜细胞小鼠淋巴管内皮细胞小鼠神经胶质细胞小鼠淋巴成纤维细胞小鼠海马神经元细胞小鼠外周血白细胞小鼠脑微血管内皮细胞小鼠骨髓基质细胞小鼠脑成纤维细胞小鼠食管上皮细胞小鼠神经小胶质细胞小鼠食管平滑肌细胞小鼠雪旺氏细胞小鼠肠动脉内皮细胞小鼠小脑颗粒细胞小鼠肠静脉内皮细胞小鼠嗅鞘细胞小鼠肝实质细胞小鼠视网膜微血管内皮细胞小鼠肝动脉内皮细胞小鼠小梁网细胞小鼠肝动脉平滑肌细胞小鼠视网膜色素上皮细胞小鼠小肠血管内皮细胞小鼠视网膜muller细胞小鼠小肠隐窝上皮细胞小鼠虹膜色素上皮细胞小鼠肝内胆管上皮细胞小鼠晶状体上皮细胞小鼠胃粘膜上皮细胞小鼠角膜上皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠视网膜神经节细胞小鼠肝星形细胞小鼠角膜成纤维细胞小鼠直肠平滑肌细胞小鼠脉络膜血管细胞小鼠小肠平滑肌细胞小鼠牙乳头细胞小鼠结肠平滑肌细胞小鼠肝外胆管上皮细胞小鼠肠上皮细胞小鼠肝Kupffer细胞小鼠肠微血管细胞小鼠骨髓间充质干细胞小鼠肠巨噬细胞小鼠下丘脑神经元细胞小鼠子宫内膜上皮细胞小鼠睾丸支持细胞小鼠卵巢颗粒细胞小鼠心肌微血管内皮细胞小鼠子宫颈上皮细胞小鼠真皮微血管上皮细胞小鼠子宫平滑肌细胞小鼠胚胎成纤维细胞小鼠卵巢上皮细胞小鼠心脏干细胞小鼠子宫成纤维细胞小鼠神经干细胞小鼠卵巢成纤维细胞小鼠骨髓来源内皮祖细胞小鼠肾实质细胞小鼠椎间盘髓核细胞小鼠肾系膜细胞小鼠肾足突细胞小鼠膀胱上皮细胞小鼠肾小管平滑肌细胞小鼠膀胱平滑肌细胞小鼠肾成纤维细胞小鼠肾动脉内皮细胞小鼠尿道上皮细胞小鼠肾动脉平滑肌细胞小鼠输尿管上皮细胞小鼠肾小管上皮细胞小鼠肾管状上皮细胞小鼠肾小球内皮细胞小鼠心肌细胞小鼠前列腺上皮细胞小鼠心肌成纤维细胞小鼠肾上皮细胞小鼠主动脉内皮细胞小鼠膀胱成纤维细胞小鼠主动脉平滑肌细胞小鼠血管外膜成纤维细胞。
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需注意问题及措施
需要注意的问题 防止ATII细胞向ATI细胞分化 防止ATII细胞向成纤维细胞分化 措施
添加有利于细胞分裂、繁殖、表型维持的细胞因子，
如重组人表皮生长因子、转铁蛋白、肾上腺素等，再 配以 1% FBS。
谢谢大家！ 祝大家元旦快乐！
平上皮细胞之间，可分泌表面活性物质。 C. 隔细胞：位于肺泡间隔中，当进入肺泡腔内就叫尘 细胞。在尘细胞的细胞质内有大量尘埃颗粒，属于吞 噬细胞。 D. 肺泡隔：是相邻肺泡壁之间的结构，由结缔组织和 丰富的毛细血管组成。
培养条件
培养条件：DMEM培养基(GIBCO，添加NaHCO3 1.5g/L，
3、 细胞传代
1） 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次； 2） 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置 显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化； 3）用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新 鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养； 4） 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
丙酮酸钠 0.11g/L)；优质胎牛血清10%，细胞生长因子。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养 箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态； 2、 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养；
三、肺泡上皮细胞的培养
肺泡上皮细胞的获取 1. 大鼠肺泡上皮细胞 2. 人肺泡上皮上皮细胞
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肺泡壁是由单层扁平上皮构成， 有三种细胞：
肺泡：肺泡壁是由单层扁平上皮构成，有三种细胞： A. 扁平上皮细胞（I型细胞），其基膜紧贴毛细血管。 B. 分泌上皮（II型细胞），该细胞突向管腔或夹在扁