琼脂糖凝胶电泳技术的原理和方法
DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和操作步骤
DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和操作步骤DNA的琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分子生物学技术，用于分析DNA 的大小和纯度，以及进行DNA分子的分离和纯化。
凝胶电泳实验可以帮助我们确定DNA样本的大小和获得纯化的DNA片段供进一步研究使用。
下面是DNA琼脂糖凝胶电泳实验的原理和操作步骤。
【原理】DNA琼脂糖凝胶电泳是根据DNA分子在电场中的不同迁移速率来分离大小不同的DNA片段。
琼脂糖凝胶是一种凝胶状物质，其孔隙大小能够将DNA分子限制在一定范围内，较大的DNA分子迁移速率较慢，而较小的DNA分子迁移速率较快。
琼脂糖凝胶通常是在平均浓度为1%至2%之间的范围内制备，以便在不同大小的DNA分子之间提供适当的分辨率。
实验中，DNA样品通过切割酶或PCR等方法获得，样品经过核酸电泳缓冲液稀释，并在琼脂糖凝胶板上进行电泳。
凝胶板两侧连接电源，DNA 的带电粒子将在电场的作用下从负极迁移到正极，迁移过程中形成DNA的“条带”，条带的位置和长度反映了DNA的大小。
通常，DNA条带由荧光染料或核酸染料标记，以便在电泳结束后进行可视化。
【操作步骤】以下是DNA琼脂糖凝胶电泳实验的一般操作步骤：1.制备琼脂糖凝胶板：a.准备琼脂糖粉末和核酸电泳缓冲液（通常为TAE或TBE缓冲液）。
b.按照说明书将琼脂糖粉末溶解于核酸电泳缓冲液中。
c.将溶液加热至沸腾并搅拌，使琼脂糖完全溶解。
d.将溶液倒入预先准备好的电泳仓中，插入梳子或制备好的孔板，使其凝固。
2.样品制备：a.提取DNA样品并测定其浓度。
b. 将DNA样品稀释到适当浓度，通常为10-50 ng/μL。
c. 添加适当的加载缓冲液，通常是一些染料和甘胺酸（glycine）或其他添加剂。
3.DNA加载和电泳：a.打开琼脂糖凝胶仓盖，将DNA样品负载于凝胶孔内。
b.将DNA负载区域和样品标注在电泳仓中，以便在电泳结束后可以准确识别DNA带。
c.关闭盖子，将电泳仓放入电泳设备中。
琼脂糖凝胶电泳的理论技术和应用
琼脂糖凝胶电泳的理论技术和应用1 引言琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）主要是应用琼脂糖凝胶作为支持物的电泳法，借助琼脂凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或者分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离，这种技术时基因操作中常用的一种方法。
下面简单介绍琼脂糖凝胶电泳的理论技术及其应用。
2 琼脂糖凝胶电泳技术及其原理(1)电泳主要是指混悬于溶液中的样品电荷颗粒，在电场影响下向着与自身相反电荷的电极移动的现象，电泳技术是一种非常先进的检测手段，电泳技术与其它先进的技术相配合能够创造出非常之高的成果，这种技术能够使人们以最小的代价获得最大的利益。
电泳技术现在主要用于纯化以及分离DNA片段的一种最常用的技术。
原理：电泳是现在用于纯化以及分离DNA片段的最常用的技术，如果装备一块“胶”包含电解质的多孔支持介质，并把这些介质放置在静电场中，DNA分子将会随着向阳极移动，这主要是因为DNA分子沿着双螺旋骨架两侧带有含有电荷的磷酸根残基，当DNA的长度增加后，来自电场的驱动力以及凝胶的阻力之间的比率就会降低，并且不同长度的DNA片段就会出现不同的迁移率，所以就可以根据DNA分子大小使其分离。
这个过程可能是通过把分子量标准参照物或者是示踪燃料以及样品一起进行电泳检测分子量标准参照物也可以提供一个用于确定DNA片段大小的标准。
(2)琼脂糖凝胶电泳主要是采用琼脂糖作为支持介质的电泳方法，琼脂糖凝胶电泳技术的分析原理与其他支持物电泳的最主要的区别是它具有“电泳”和“分子筛”双重作用。
琼脂糖凝胶是一种网络结构，物质分子通过时会受到阻力，其中较大的分子物质在涌动时受到的阻力比较大，所以在凝胶中，带电颗粒的分离不仅与静电荷的性质以及数量有关，而且与废纸的大小有很大的关系，这就可以大大的提高了粪便能力，但是由于其孔径相差比较大，对于大多数蛋白质来说其分子筛效应很小，目前琼脂糖凝胶技术主要用于核酸的研究中。
琼脂糖凝胶电泳实验原理和实验方法
琼脂糖凝胶电泳实验原理和实验方法琼脂糖凝胶电泳实验原理和实验方法[实验原理]电泳是现在用于分离和纯化DNA片段的最常用技术。
包含电解质的多孔支持介质----“胶”并把它置于静电场中。
则DNA分子将向阳极移动，这是因为DNA分子沿其双螺旋骨架两侧带有含负电荷的磷酸根残基。
当DNA长度增加时，来自电场的驱动力和来自凝胶的阻力之间的比率就会降低，不同长度的DNA片段就会表现出不同的迁移率。
因而就可依据DNA分子的大小来使其分离。
该过程通过把示踪染料（Purple Loading Dye）或分子量标准参照物(Ladder)和样品(DNA&RNA)一起进行电泳而得到检测。
分子量标准参照物也可以提供一个用于确定DNA片段大小的标准。
琼脂糖凝胶适用于分离大小在0.2-50Kb范围内的DNA片段。
[实验用品]1.琼脂糖 1.0%1.0g琼脂糖+100ml电泳缓冲液(TAE),微波炉中火30秒至沸腾,熔化的琼脂物冷却至60℃时可加入10mg/ml溴化乙锭10μl,充分混匀,将温热的凝胶倒入已置好梳子(鉴定胶用细密点的梳子；回收胶用粗稀的梳子）的胶膜中在室温下放置30-45min后现进行电泳。
1.5%:琼脂糖1.5g。
2.电泳缓冲液50×TAE Tris 乙酸 Tris 242g 终2 mol/L乙酸57.1ml 终1mol/L0.5M EDTA200ml pH8.0 终100mmol/LdH2O 补足至1000ml使用时稀释1×TAE。
5×TBE Tris 硼酸 Tris 54g 终445mmol/L硼酸27.5g 终445mmol/L0.5M EDTA20ml pH8.0 终10mmol/LdH2O 补足至1000ml使用时稀释10倍成0.5倍如50ml贮存液+450ml水→500ml工作液。
[实验内容与方法]1.移取适量的琼脂糖(如制备1%的琼脂糖胶液就移1g的琼脂糖溶于100ml TAE缓冲液中)微波炉加热使其溶于TAE缓冲液中。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳原理和操作
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳原理和操作血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳是一种常用的生化分离和分析技术，主要用于血清中脂蛋白的分析。
其原理是利用琼脂糖凝胶电泳的分离特性，将血清中的脂蛋白按照分子大小进行分离，从而获得脂蛋白的电泳图谱。
琼脂糖凝胶是由琼脂糖溶液制备而成的凝胶。
琼脂糖分子之间通过氢键结合，在溶液中形成网状结构，能够阻碍大分子的迁移，使分子在凝胶中按照分子大小逐渐分离。
根据琼脂糖凝胶的浓度和凝胶体积，可以调整分离脂蛋白的范围和分辨率。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳的操作步骤如下：1. 样品制备：将要分析的血清样品进行离心，将清除过量脂蛋白颗粒。
取适量样品于离心管中，加入适量凝胶缓冲液，混匀。
2. 制备凝胶：根据所需的凝胶浓度，称取相应质量的琼脂糖溶解于电泳缓冲液中，并加热至溶解。
待溶液温度降至室温后，加入凝胶稳定剂并混匀。
3. 填充凝胶孔：将凝胶溶液倒入电泳池，待凝胶凝固后，用专用的样品载体或者微量移液器将样品填充到凝胶孔中。
注意不要将样品液面超过凝胶表面。
4. 电泳分离：将电泳池连接电源，设定合适的电泳条件，如电压和电流。
在电泳过程中，离子在电场作用下沿着琼脂糖凝胶的移动方向迁移，分离出不同迁移速度的脂蛋白组分。
5. 染色和观察：电泳结束后，取出凝胶，进行染色和观察。
目前常用的染色方法有银染、共伴染色和乳化状胶体金染色等。
在染色后，可以使用分子影像仪或者专用的凝胶分析系统进行图像捕捉和分析。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳可以用于分析血清中各种脂蛋白的分布和比例，如低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）等。
通过分析脂蛋白的电泳图谱，可以得到脂蛋白的相对含量和分子大小的分布情况，进一步了解脂质代谢的状态以及与某些疾病的关联。
总之，血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳是一种常用的生化分离和分析技术，主要用于血清脂蛋白的分离和分析。
通过其原理和操作步骤的了解，我们可以更好地利用该技术进行实验和数据解读，为脂质相关疾病的研究提供有力的支持。
实验琼脂糖凝胶电泳的原理和方法
实验琼脂糖凝胶电泳的原理和方法实验琼脂糖凝胶电泳（Agarose gel electrophoresis）是一种常用的分离DNA和RNA分子的技术。
它基于琼脂糖凝胶电泳原理，利用琼脂糖凝胶的孔隙大小和电泳电场的力对DNA和RNA分子进行分离。
琼脂糖是一种高分子多糖，当加热溶解后冷却凝固时，形成一个多孔的凝胶网络。
这个凝胶网络中的孔隙大小是可以调控的，通过改变琼脂糖的浓度可以得到不同孔隙大小的凝胶。
1.制备琼脂糖凝胶：按照实验需要，称取适量琼脂糖加入缓冲液中，搅拌使其溶解，然后加热至溶解。
等溶液冷却至约50℃时，在一个电泳板间夹两块玻璃片或塑料片，将琼脂糖凝胶溶液倒入电泳板中，并将梳子插入凝胶中，让凝胶固化。
2.样品制备：将要检测的DNA或RNA分子提取和纯化，并用缓冲液稀释合适浓度。
添加适量的DNA荧光染料或核酸染色剂，使其在紫外光下可见。
3.样品加载：将样品加入琼脂糖凝胶的凝胶孔口中，注意不要将样品推到凝胶中。
4.电泳分离：将凝胶板放入电泳槽中，加入适量缓冲液，注意保证电泳液中缓冲液位置高于凝胶。
然后将负极电极和正极电极分别连接到电泳槽的两端，开启电源，施加适当电压使DNA或RNA分子在电场力的作用下进行电泳分离。
5.染色和可视化：电泳结束后，取出凝胶板，并用染色剂对DNA或RNA分子进行染色。
染色剂与DNA或RNA结合后，用紫外光照射凝胶，通过相应设备观察凝胶上的条带形成。
实验琼脂糖凝胶电泳的原理是基于DNA和RNA分子在电场下按照大小进行分离的特性。
在电场作用下，DNA或RNA分子荷负性被引向正极（阴极）方向移动。
琼脂糖凝胶的孔隙大小可以根据需要调控，大分子难以通过，小分子易于通过。
因此，DNA或RNA分子根据其大小不同，通过孔隙大小的限制，从而形成条带，完成了对DNA或RNA的分离。
琼脂糖凝胶电泳原理及应用
琼脂糖凝胶电泳原理及应用1. 琼脂糖凝胶电泳概述琼脂糖凝胶电泳，听起来是不是有点高大上？其实，它就像一场“科学秀”，能把DNA、RNA或蛋白质等分子在电场中分开，真是太神奇了！在这个过程中，我们将琼脂糖溶解在水里，制成一种像果冻一样的凝胶。
说到这里，大家可能会想，这个果冻有什么用呢？别急，咱们慢慢来，先了解一下它的基本原理。
1.1 原理解析简单来说，琼脂糖凝胶电泳就是利用电场的力量把分子进行分离。
想象一下，你在一个派对上，大家都是不同大小的气球，电场就像是一个巨大的风扇，吹着这些气球朝不同的方向移动。
小气球跑得快，大气球慢慢悠悠，这样一来，不同大小的分子就被分开了。
通过电泳，我们可以清楚地看到不同分子的“身影”，就像在舞台上，谁走得快，谁走得慢，一目了然。
1.2 应用领域琼脂糖凝胶电泳的应用真是五花八门，从医学研究到法医学，几乎无处不在。
比如，科学家们可以通过它来分析基因组，看看哪些基因在起作用，哪些又在“睡觉”。
在法医领域，警方能用它来比对嫌疑人的DNA，揭开案件的谜团。
这就像侦探小说里的情节，科学家们则是那个揭开真相的“福尔摩斯”。
2. 实验步骤接下来，咱们就来聊聊琼脂糖凝胶电泳的具体实验步骤。
这可不是随便就能搞定的，得有点技术含量哦！首先，我们需要准备琼脂糖凝胶。
这一步就像是做饭，要把琼脂糖和热水混合，然后等它变成“果冻”。
这时候，你可以想象自己在厨房，香气四溢。
2.1 加样当琼脂糖凝胶冷却后，我们就可以把样品加入其中。
通常用微量移液器把样品小心翼翼地加进去，就像是给每个小朋友分糖果，生怕哪个小朋友没得到。
然后，连接电源，电泳的“秀”就开始了，大家开始在舞台上秀自己的才艺！2.2 结果分析电泳完成后，凝胶上就会出现许多条带。
这些条带就像一幅精美的画，展示了分子们的“舞蹈”。
接下来，我们需要通过染色来可视化这些条带，通常用一种叫做“溴化乙锭”的染料。
看着这些条带，就像看到一场盛大的烟花表演，五彩斑斓，令人目不暇接。
dna琼脂糖凝胶电泳原理
dna琼脂糖凝胶电泳原理DNA琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分离、纯化和分析DNA分子的方法。
它基于DNA分子在电场下的迁移速度与其分子大小和形态之间的关系，利用琼脂糖凝胶的孔隙结构来分离DNA分子。
在这篇文章中，我将深入探讨DNA琼脂糖凝胶电泳的原理、方法和应用，并分享我的个人观点和理解。
一、DNA琼脂糖凝胶电泳的原理DNA分子是生物体内存储遗传信息的重要分子，其大小可在数百至数千碱基对之间。
DNA琼脂糖凝胶电泳是基于电荷分离的原理进行的。
DNA分子在电场中会带有负电荷，因此会受到电场力的作用而迁移。
琼脂糖凝胶是一种多孔性凝胶，可以形成一些微小的孔隙，这些孔隙能够根据DNA分子的大小和形态来筛选DNA分子。
当DNA样品通过琼脂糖凝胶电泳时，较小的DNA分子会迁移更快，而较大的DNA 分子会迁移更慢。
通过对琼脂糖凝胶上DNA分子的分离和检测，我们可以得到DNA分子的大小分布信息，进而进行DNA的纯化、分析和定性等研究。
二、DNA琼脂糖凝胶电泳的方法1. 准备琼脂糖凝胶：我们需要制备一定浓度的琼脂糖溶液，并加热融化。
我们将琼脂糖溶液倒入电泳槽中，在上下两端放置电极，形成一个电场。
2. 准备DNA样品：将需要进行分析的DNA样品与染料混合，使之具有一定的负电荷，并进行预处理，如加热变性。
3. 进行电泳分离：将DNA样品施加在琼脂糖凝胶孔隙上方，开启电源，使电场通过琼脂糖凝胶。
DNA分子会在电场力的作用下从样品孔隙处迁移到相反电极的方向。
迁移的速度与DNA分子的大小和形态有关，较小的DNA分子迁移较快，而较大的DNA分子迁移较慢。
4. 可视化和分析：凝胶电泳结束后，我们可以使用染料或放射性示踪剂来可视化DNA分子的分离结果，如荧光染料或放射性探针。
通过观察凝胶上的DNA条带，我们可以推测DNA分子的大小分布，进而对样品进行纯化、分析和定性等进一步研究。
三、DNA琼脂糖凝胶电泳的应用DNA琼脂糖凝胶电泳技术在分子生物学、遗传学和犯罪学等领域都有广泛的应用。
琼脂糖凝胶电泳详解
一、简介琼脂糖凝胶电泳是以琼脂糖凝胶作为支持介质、利用核酸分子在电场中时的电荷效应和琼脂凝胶的分子筛效应，达到分离核酸混合物的一种电泳技术。
1、琼脂糖的分子筛效应1）琼脂糖（Agarose）来源于海洋红藻细胞壁，是一种大分子线性聚合物，基本结构是由D-半乳糖和3,6-anhydro-α-L-半乳糖通过β-1,4糖苷键结合而成的双糖单位在α-1,3糖苷键的连接下形成的一个长链。
琼脂糖具有亲水性，并几乎完全不存在带电基团，对敏感的大分子极少引起变性和吸附，是理想的惰性载体。
常用作电泳、层析等技术中的半固体支持物，用于生物大分子或小分子物质的分离和分析。
琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解，温度下降到40℃左右形成良好的半固体状凝胶。
琼脂糖加热溶解后分子呈随机线团状分布，当温度降低时链间糖分子上的羟基通过氢键作用相连接，形成直径从50nm-200nm不等的孔径结构，孔径的大小由凝胶浓度控制。
琼脂糖凝胶中孔径的大小，影响了通过的核酸分子的大小以及通过的速度。
通常来说，琼脂糖凝胶的浓度越高，孔径越小，能够通过的核酸分子越小，迁移速度也越慢。
DNA片段越小，所需的胶浓度越大；而DNA 片段越长，所需的胶浓度则越小。
选择合适的胶浓度才能更好的分离片段。
2）琼脂的质量评价琼脂糖通常通过其凝胶强度和电内渗情况判断质量好坏。
强度越高，凝胶性能越好。
质量较好的琼脂糖强度通常在1200g/cm2以上，硫酸根含量在0.2%以下，电内渗在0.13以下。
琼脂糖是从琼脂中分离而来的。
琼脂由琼脂糖和琼脂果胶组成的，琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物，和琼脂糖结构相似，但带硫酸根和羧基组分，凝胶能力差。
在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除，否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团，附着到琼脂糖的多糖基质上，造成电内渗（EEO）。
电内渗会导致缓冲液中产生正电荷反向离子，它们向负极移动，从而造成与DNA反方向迁移的液流，使DNA的分离效果变差。
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能较好地区分dsDNA与ssDNA。
新型低毒，高灵敏度染料，可 价格昂贵。对小于50
以加入样品中。
bp染色缺失，小于100
的染色效果较差。稳定
性差
花青类染料,毒性很低；最大吸收 重复性较差。能引起
峰为 470nm。具有安全、灵敏、 有机体突变。
经济的特点
溴化乙锭
溴化乙锭（ 3，8-二氨基-5-乙基-6苯基菲啶溴盐EB），EB染色（EB可 很好地掺入到双链DNA中），在紫外 光下会发出橙红色的荧光，用于对 DNA进行染色和观察。
液 （ 6X loading buffer）和DNA分子量标准（Marker ） 等。
1.凝胶电泳系统
美国Bio-rad伯乐 小型水平电泳槽Mini-Sub Cell GT Cell
DYY-6C型 双稳定时电泳仪电源（北 京六一） 输出范围（显示分辨率）： 6-600V(1V) 4-400mA (1mA) 240W
琼脂糖单糖分子结构
琼脂糖凝胶结构形成过程
核酸分子大小及琼脂糖的浓度的关系
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于 等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。在一定的电场强度下， DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即DNA分子本身的大小和构型。当 DNA分子大小超过20kb时，普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开，此时电泳的迁 移率不再依赖于分子大小，因此，应用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，分子大小不 宜超过此值。
实验三 琼脂糖凝胶电泳技术的
原理和方法
主讲教师和实验员：张运峰
一 实验目的
学习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法 检测碱裂解法提取质粒的结果 检测双酶切法鉴定重组质粒的结果（后续实验） 检测PCR法鉴定质粒的结果（后续实验）
二 实验原理
（1）某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的速率，电泳的速率与 核酸分子大小和构型有关。
5.上样缓冲液
电泳指示剂溴酚兰在碱性液体中呈紫兰色，一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖 400组成上样缓冲液。作用： ①增加样品比重，以确保DNA均匀沉入加样孔内。 ②形成肉眼可见的指示带，预测核酸电泳的速度和位置。 ③使样品呈色，使加样操作更方便。
4.常用核酸染料
名称
EB （溴化乙锭）
Gldview
SYBR Genefinder
用于观察的紫外光有３种波长， 一般使用中波紫外光（302nm）。短 波紫外光（254nm）观察效果较好， 但 对 DNA 的 破 环 很 大 。 长 波 紫 外 光 （366nm）：回收。
四.实验步骤
1.制备琼脂糖凝 胶（1%） 2.制备凝胶板 3.加样 4.电泳 5.染色 6.结果观察
1.制备凝胶和胶板：
配制多大浓度的琼脂糖凝胶，要根据被检的DNA分子大小来确定。琼 脂糖是一种线性多糖聚合物。浓度越高，孔隙越小，其分辨能力就越强。
Hale Waihona Puke 表1 琼脂糖凝胶的浓度与DNA分子大小的关系
琼脂糖浓度(%) 0.3 0.6 0.7 0.9 1.2 1.5 12.0
线型DNA分子的分离范围(Kb) 5～60 1～20 0.8～10 0.5～7 0.9～6 0.2～3 0.1～2
2.凝胶成像分析系统
3.Marker
一个已知分子质量的 DNA 样品做最对照，用来确定待 测样品的相对分子质量。
4.常用电泳缓冲液
缓冲液
TAE
TBE TPE
缓冲容量 最低 很高
迁移速度 最快
(高10％)
较慢
分辨率 高分子量高 低分子量高
用途
高度复杂DNA混 合物；超螺旋 DNA
价格昂贵，不常 用
优点
缺点
染色操作简便，快速，室温下 EB是诱变剂，使用时
15-20min；不会使核酸断裂； 一定要戴手套。 EB废
灵敏度高，10ng或更少的DNA 液要经过处理才能丢弃。
即可检出；可以加到样品中或
胶中。
低毒，灵敏度较高的染料；可
以加入样品中。dsDNA呈现绿 价格稍高，灵敏度 较
色荧光,而ssDNA呈红色荧光, 低。背景强烈。
（3）溴化乙锭为扁平状分子，在紫外光照射下发射荧光。EB可与DNA分子形成 EB-DNA复合物，其荧光强度与DNA的含量成正比。据此可判断DNA分子量大小
和粗略估计样品DNA浓度。
三 仪器、材料与试剂
1.质粒样品、酶切样品和PCR样品。 2.凝胶电泳系统和电泳图像分析系统(凝胶成像系统)等。 3.琼脂糖、 1XTAE电泳缓冲液、Goldview、 6X载样缓冲
DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。 分子质量越小跑得越快，紧密构型快于松散型开环分子或线性分子，从 而可以分离大小不同的DNA或RNA分子。 （2）琼脂糖是一种线性多糖聚合物，可以形成具有刚性的滤孔，凝胶 孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。浓度越高，孔隙越小，其分辨能力 就越强。
20ml(1×TAE)+0.2g琼脂糖（ 三角瓶 ），煮胶，溶解，冷却 至60℃(不烫手)，倒板，室温下充分凝固，竖直拔下梳子 。
胶板设计（27人）： •每11孔胶板（4人：2样品 +1marker）。
2.加样
5μl质粒DNA+1μl loading buffer 混匀；
15μlPCR 产 物 +3μl loading buffer，混匀；
10μl 酶 切 产 物 +2μl loadingbuffer混匀；
5μl DNA Marker(每板胶一孔）
3.电泳
电压3-5V/cm，约80-90V，注意电极方向
4.观察
紫外透射分析仪下观察。
六 实验结果
琼脂糖粉形成琼脂糖凝胶的过程
琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷。琼脂糖链依分子内和 分子间氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。