矮垂头菊不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性研究
垂头菊属植物化学成分及药理活性研究进展
垂头菊属植物化学成分及药理活性研究进展范小飞;景临林;高荣敏;贾正平【摘要】垂头菊属植物有多种药用价值,数种被用做传统藏药,用于止痛,治疗发热、炎症和中风.本属植物所含化学成分众多,主要为倍半萜类、三萜甾体类、苯丙素类、黄酮类和挥发油等.本文通过查阅近年的文献资料,对垂头菊属植物的化学成分、药理活性进行综述,为垂头菊属植物的研究开发和应用提供科学依据.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2013(031)004【总页数】5页(P254-257,282)【关键词】垂头菊;化学成分;药理活性【作者】范小飞;景临林;高荣敏;贾正平【作者单位】兰州军区兰州总医院,甘肃兰州730050;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州军区兰州总医院,甘肃兰州730050;兰州军区兰州总医院,甘肃兰州730050;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州军区兰州总医院,甘肃兰州730050;兰州大学药学院,甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R282.7垂头菊属(Cremanthodium)是菊科(Compositae)多年生草本植物，全世界约64种，在我国全部均有分布，主要生长在喜马拉雅山及其毗邻地区的高山灌丛、高山草甸及高山流石滩等环境中[1]。
垂头菊属植物种类繁多，近年来，文献报道的主要集中在车前状垂头菊、盘花垂头菊、戟叶垂头菊、向日垂头菊、膜苞垂头菊、侧茎垂头菊、褐毛垂头菊、矮垂头菊、柴胡叶垂头菊等植物。
据《藏药志》和《青海经济植物志》记载，该属植物具有十分重要的药用价值，为传统藏药，具有多种生物活性。
例如，盘花垂头菊( C.discoideum) 藏药名为“曲豆那保”，主治中风、胆囊炎、头痛、呕吐等[2]；矩叶垂头菊(C.oblongatum)蒙药名为“额布森-嘎”，临床用于中暑，具有清“希日”，清热，解毒，愈伤，止痛之功[3]；褐毛垂头菊(C.brunneo-pilosum)与车前状垂头菊(C. ellisii)均作为藏药“嘎肖”使用，具有清热解毒、杀虫等功效[4，5]；侧茎垂头菊(C.pleurocaule)具有清热、解毒、止痛的功效，临床用于治疗感冒发烧、胆囊炎、化脓性发烧、胃痛、头痛等[6]。
菊花中总黄酮成分不同提取工艺的比较
菊花中总黄酮成分不同提取工艺的比较作者：尤静等来源：《江苏农业科学》2014年第05期摘要：采用超声法、酶法结合半仿生法提取野菊花中的总黄酮类物质，通过正交试验优化提取条件，用分光光度法测定总黄酮含量。
结果表明，超声法的最佳提取条件为：提取溶剂50%乙醇，提取温度70 ℃，料液比1 g ∶40 mL，时间30 min；酶法结合半仿生法的最佳提取条件为：于37 ℃分别在模拟胃肠环境pH值条件下提取2 h，果胶酶酶解最佳料液比为1g ∶20 mL，纤维素酶酶解最佳料液比为1 g ∶15 mL，但果胶酶酶解效果更优。
综合比较可以发现，超声提取法简单易行且提取率较高，酶法结合半仿生提取法的耗时较长，提取率较低，但更符合口服给药的药物代谢原理。
关键词：野菊花；总黄酮；超声法；酶法结合半仿生法中图分类号： R284.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）05-0218-02野菊花为菊科植物野菊的头状花序。
在我国分布广泛，野生资源非常丰富[1]。
野菊花的主要药效成分是黄酮类化合物，具有保护心脑血管、抗癌抗氧化、利胆保肝等多种生物活性[2]。
野菊花在临床上的主要作用是抗菌消炎，主要产品有菊藻丸、野菊花注射液、野菊花栓等，在食品、化妆品、保健品等行业还具有进一步开发利用的广阔前景[3]。
为了对生物资源进行综合利用，提取方法的选择在制剂工艺中占据十分重要的地位，传统的方法有水提、醇提、碱提酸沉等，随着科学技术的进步，发展出了诸如半仿生提取、酶提取、超声提取、微波提取和超临界流体萃取等方法，从而大大提高了中药制剂的产量和质量[4]。
本研究采用半仿生法和酶法相结合的方式，模拟人体消化吸收的过程对野菊花总黄酮成分进行提取，并与提取效率较高的超声法提取结果进行比较[5]，以期得到更加适宜的总黄酮提取方法，为更好地开发利用野菊花提供一定参考。
2.3酶法结合半仿生法提取结果选择了酶法提取中经常用到的纤维素酶和果胶酶为考察对象[6]。
DPPH法测定茄叶斑鸠菊不同极性部位的抗氧化活性
DPPH法测定茄叶斑鸠菊不同极性部位的抗氧化活性史资;陈新;刘梁【摘要】The plants are divided into different polar parts by means of extraction, and to study the antioxidant activity of different polar parts from the Vemonia solanifolia Benth with the method of DPPH. The experimental study shows that different polar parts have certain antioxidant ability, and under the condition of the same con-centration, chloroform extract and ethyl acetate layer extract, n-butanol extract,total extract, petroleum ether extract showed the antioxidant capacity decreased in turn, and chloroform and ethyl acetate extract antioxidant capacity is outstanding, it has the development value.%通过萃取手段将植物分为不同极性部位,并利用DPPH法研究茄叶斑鸠菊不同极性部位的抗氧化活性.通过试验研究表明,不同极性部位都具有一定的抗氧化能力,且在相同浓度的条件下,氯仿层浸膏、乙酸乙酯层浸膏、正丁醇层浸膏、总提物、石油醚层浸膏所表现出的抗氧化能力依次减弱,且氯仿层和乙酸乙酯层浸膏抗氧化能力突出,具有开发价值.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)009【总页数】3页(P19-21)【关键词】茄叶斑鸠菊;不同极性部位;DPPH;抗氧化活性【作者】史资;陈新;刘梁【作者单位】武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023【正文语种】中文茄叶斑鸠菊（Vernonia solanifolia Benth）为菊科（Compositae）斑鸠菊属（Vernonia）植物的一种，该植物主要产地分布于国内的南方地区、东南亚、南亚等地。
菊花提取物的抗氧化活性研究
菊花提取物的抗氧化活性研究p.-I(_762000V ol,jINo.,《食品科学》※基础研菊花提取物的抗氧化活性研究方黎捷俞丽君肖湘汕头大学理学院生物学系汕头Z82-7/55063盯l'.7,I摘要通过菊花提取物对Fe"诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系,TBAS生成体系和郫苯三酚一Ltuninol发光体系的抑制作用.研究了菊花的不同提取物的抗氧化活性.结果表明,菊花黄酮类化台物有清踪-OH,0'的能力.且有着较强的抗氧化活性.并且发现菊花抗氧化活性与黄酮类化合物含量相关. 关键词菊花黄酮类化合物抗氧化活性脂质过氧化硫代巴比妥酸反应物AbstractAstudywascarriedOllant[-oxtdatb,'eactivityofFIoschrysanthemumextract.Ch~, santhemumextractwasfullolflavor*asSomeprecessestoextractflaV olleSfromchD,santhemumforscavengingactive oxygenradicalwerereportedinthispaper.Theresultsshowedthatchrysanthemumflavonescouldscavenge'OH,0'andafi%c ltheallt[-oxidativeactixitv.KeywordsFlosChDsanthemumAntio-oxidativeFlavonesoxygenradical菊花是菊科植物菊(C.hrysanthemummorifoliumRamat)的头状花序.为多年生草本.在我国大部分地区有栽培.传统医学认为菊花的功效包括清热,明日,解毒,治疗头疼,眩晕,心胸烦热,疗疮等作用,民间更以饮用菊花水来解暑热.菊花古黄酮类化合物,本研究通过对菊花的抗氧化作用的初步研究为进一步开发菊花的保健效用提供理论依据1材料与方法1.材料,试剂与仪器干杭白菊购于市场.绞碎备用.卵黄悬液:新鲜鸡蛋去卵清,卵黄用等体积的pH7.45.01to1,L磷酸铺缓冲液【PBS)配成1:1的悬液磁力搅拌10mi~ 再用PBS稀释成l:25的悬液(置于冰箱中备用)次黄嘌呤(/luka公司),黄嘌呤氧化酶(酶活力5U/ml,广州军事医学研究所),2一脱氧一D棱糖(feinbiochemicahe!de!berg,newyork),硫代巴比妥酸(生化试剂,上海试剂二厂】=751一型分光光度计(2t海分析仪器厂),GHG—c型生物化学发光测量仪(上海市检授I技术所检坝擞器厂),LGJ0.5一II 冷冻_F燥机t军事医学科学院实验仪器厂),旋转蒸发器IlotrYEvaPcraEorRE一47,Y AMATOSC:ENTIFICCo?L:d.'?okyc.Japan),BeckmanJ2—2M高速冷冻离心机Pecma￡.USA】=l2方法1.:1提取工艺～-于菊花绞碎.加入15倍体积70%乙醇热浸提12h,抽滤,滤渣用热水冲洗.滤液减压浓缩.蒸去乙醇,3000r/min离心28min,上清液保存待用(样品I).取一定量样品I,用2倍体积100%的正丁醇萃取2次,萃取液蒸干溶剂,再用水定容.得样品II.取一定量样品I,用2倍体积∞%的乙酸乙酯.莘取2次萃取液蒸干溶剂,再用水定容.得样品III取一定量样品I.用2倍体积100%的氯仿.萃取2砍莘取液蒸干溶剂,再用水定容,得样品Ⅳ.干菊花绞碎,15倍体积水直接浸提12h,低温浓缩获得样品Vt作为对照).1.2,2Fe诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系:选用1:25的卵黄悬液吸取0.2m1.加人一定量的样品.加人0.2mlFeSO.25maol儿,用pH7.4,0imol/L的PBS~b充至2mi 37℃振荡15min,取出后加入0.5吐三氯乙酸(简写TCA),3503r. min离心iOmin,吸取2ml上清液加人lml硫代巴比妥酸L简写TBA)加塞.放人沸水浴中15min,冷却后,于532ear:处比色测出吸光度(A)值以不加样品管的吸光度为(A)样品抗氧化活性(AOAj用对卵黄脂蛋白LPO的抑制率表示:AOA(%):(ACA)/A0×100%12.3Fe一次黄嘌呤一黄瞟呤氧化酶一TBAS生成体系.加样顺序为:FeSO(2r0~ol/L)004ml,黄嘌畸氧化酶(简写:XO)(5U/m1)3.51,脱氧核糖【3Onur.o1..,'L)0.2ml,EDTA(5rmmol/L)0.04ml,H20(7.6rm~ol/Lj0.Om,加人0.iml样品,pH7PBS(015mol/L).48mi,次黄嘌呤c简写:x)(2mol/L)0.2ml总体积为2m!(陈?HS,FeSC用重蔫水配制外其它试剂均用pH7.4PBS0.15mol皿配制J.然后.35℃温浴lSmim取lml反应液加1%W/VTBA(NaOH005mol/L配制)及冰醋酸lml,混匀后放人沸水浴30min.冷却.在532m~ 处测其吸光度A.以不加样品管的吸光度为A清除活性以抑制TBAs生成量AⅢ值的抑制百分率表示即(Ao-A)/A×100% 1.2.4超氧阴离子的邻苯三酚一L~inol发光体系※基础研究《食品科学》2000,如j.2|,21o.77向测量管加入10ul样品液.然后再加入2OlimmollL邻苯三酚(简写为PA),最后加入970u1鲁米诺一碳酸缓冲液混合液(cB—L混合液,Luminol终浓度为O.immol,L),加后15s开始连续测量,测定6s的发光强度(CP6s)连续20扶,取其峰值(CP6s)计算,重复测定三次,取平均值.空白对照用l0ui0.05mol,LpH7.8PB5代替样品液.按下式求出各样品浓度点的发光抑制率(%):即以发光抑制率为纵坐标,样品对数浓度为横坐标,绘出发光抑制曲线, 求出抑制发光强度50%的样品浓度(ng/m1.即IC50).阳性对照物为标准SOD.:.25芦丁含量测定ie芦丁标准曲线的绘制:取1.2.4,6ml芦丁标准溶液0.2$4mg/m1)加入30%乙醇补充至12.5ml:加入0.7mlNaNO. Ll:20)摇匀,放置5min{再加入0.7mlA1(No,),(1:i0)6min后加入5mlImol儿NaOH混匀用30%乙醇定容至25mi:10min 后于50Or~处(以不加芦丁为空白)比色测定然后,绘出标准曲线并求出回归方程.取一定浓度的样品液用以上相同方法可测出样品的A.值.然后利用芦丁含量与吸光度的关系曲线的回归方程求出芦丁含量.2结果与讨论2.1黄酮含量测定21.1芦丁标准曲线根据标准芦丁样品的含量与AⅧ值可绘制标准越线(图1)用最小二乘法作线性回归.得芦丁含量(y)与吸光度A的关系曲线的回归方程式Y=3.5699A~00206相关系数r=0.9995故芦丁含量与A值成线性关系:用此方程式得知AⅢ值后可以算出对应的芦丁含量.2.12菊花提取物的黄酮类化合物含量分别翘i定经不同溶剂萃取的菊花提取物.其黄酮含量分芦丁含量Img0图1芦丁标准曲线别为:水浸提物含28.4ng/g菊花,7o%乙醇浸提物为37.30rigg菊花,正丁醇萃取物为3.19nglg菊花,乙酸乙酯萃取物为O.99ng/g菊花,氯仿萃取物为0.26ng/g菊花.其含量按大小顺序排列为:7O乙醇浸提>水浸提>正丁醇萃取>乙酸乙酯萃取>氯仿萃取.22菊花提取物的抗氧化活性2.2.1菊花提取物对卵黄脂蛋白LPO抑制活性由表1可以发现,样品I对卵黄脂蛋白LPO有抑制作用.随着芦丁含量的增加样品I对卵黄脂蛋白Lpo的抑制率也加太,说明黄酮类化合物与抑制效果有关这是与文献结果相符合的由表2可见.样品I再经过正丁醇萃取后所得的样品lf对卵黄脂蛋白LPO仍有抑制作用.且活性有所提高.随着芦丁台量的增加样品II对卵黄脂蛋白LPO的抑制率也加太,进一步证明了黄酮类化合物与抑制作用有关.由表3可见.样品V对卵黄脂蛋白Lpo有抑制作用.随着芦丁含量的增加样品V对卵黄脂蛋白LPO的抑制率基本上随之加大.上述结果可见,三种样品中正丁醇萃取物活性较高.水表1菊花乙鲥醵喊物(I)对卵黄目旨蛋白LP0抑锚舴用表3菊花水提取物(V)对卵黄脂蛋白LPO的抑制作用82000oi?jl2F'o?7《食品科学》※基础研舟蔫曩舟磊晕竺辟垂罪芦丁音量【g】图0菊花乙醇提取镑(I)对卵黄脂蛋白LPO抑翻作用芦丁含量(gI图3菊花正丁醇萃取镑(II)对卵黄脂蛋白LPo的抑制作用芦丁含量Ig)图41萄花水提取物(V)对卵黄脂蛋白LPO的抑{目作用浸提物活性较低且不稳定.由于正丁酵萃取物中的黄酮类化台物经过了进一步纯化.由芦丁含量与抑制率的关系来盾,黄酮类化台物在菊花抗氧化括性中起着重要作用2.2.2菊花提取物对TBAs生成体系的抑制由表4可见,菊花提取物对TPa~S的生成有明显的抑制作用,各种提取物中以正丁醇萃取物效果最明显.由上表可以看出黄酮类化合物与抑{目活性有关.由TBAS生成的原理来看,菊表4菊花提取物对TBAS生成体系的抑{目作用花提取物阻断了TBAS的生成具有清除羟自由基的功能菊花也可能清除的是H0或超氧阴离子0):而菊花提取物对O的清除作用已被证实22.3对超氧阴离子的抑制作用表5菊花乙醇提取物(I)对发*啉系的抑{目作用根据表5还应得抑制发光强度达50%的提取物浓度为0817g,lfICj可见,菊花黄酮类化台物对超氧阴离子(0T,发光摸型有较强的抑制.季悯此法检翘I灵敏度高综上所述.菊花提取物对卵黄脂蛋白L?O,TBAS生成,邻竺辟毒足维蜃比圈5菊花乙醇提物(I)对邻苯三酚一1umino1发光体系的抑{目苯三酚一lumlnol发光体系都有较强的抑制,证明菊花提取物具有抗氧化活性.而其抗氧化括性与黄酮化合物含量直接相关用正丁醇萃取的样品较水提样和乙醇提样活性都高,证明菊花中黄酮类化合物是抗氧化作用的重要成分有关菊花的其它抗氧化成分以及菊花对其它话性氧的清除作用将进一步研究. 参考文献苏祝成等杭白菊浸提液的不同萃取分离物对0:自由基清除作用研究食品科学,1995,6L2):60～632胡春.菊花总黄酮的提取工艺优化.广州食品工业科技,l996.12(2J:1～3.3胡敏等.银杏叶中黄酮类化合物最佳提取工艺研究(Ij鲫∞帅0※基础研《食品科学》2000,V ol,l,Ho.79食品工业科技,199'7.L5j:49～54张尔贤,俞丽君等Fe"诱发脂蛋白PUFA过氧化体系及对若干天然产物抗氧化作用的评价生物化学与生物物理学报.1996,28(2):2184222.5张尔贤.俞丽君等.含酚基化台物抑制?BAS生成体系的抗氧化活性比较.生物化学杂志.1996.12【3):374～376.∈张佃志.方允中Fe一次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶产生的活性氧损伤脱氧核糖的研究.军事医学科学院刊,198913{4),243～246.7王爱国.罗广华.羟自由基启动下的脱氧棱糖降解及其产物的TBA反应.生物化学与生物物理进展,1993,20(2),l5.～l52.8陈运中.苦荞麦黄酮含量的测定.食品科学,1898,19(354～55.3042的液体培养特性(;7～～7—1及其产氨基酰化酶的特性研究,//三坚窭嬖马忠海元英进袁淑敏天津大学化工学院生物化工系30摘要对液体培养的米曲霉{Aspergillusoryzae)3042所产生的氪基酰化酶胞内外分布及其酶的最适pH,温度和热稳定性进行了探讨结果表明米曲霉3042属于凝聚型菌株,当搅拌速率为9O～120r/min时可获得较好的菌珐氨基酰化酶属于胞内酶.存在于缅胞内部或分布于细胞壁上菌体酶括最适pH为7.0,最适温度为55'C关键诃米曲霉3哩2液体培养氨基酰化酶凝聚型菌株胞内酶AbstractInsubmergedculturestheaminoaeylaseactivitiesofAspergilluso~zae3042inVlV Oorinvitrowerediscussed. andoptimalpHandtemperatureofpetletantinoa~'lascactivlb,studiedTheresultsshowedtha tAspergiIluso~zae3042couldfrompelletinflaskatspeed90～I20rpmduringsubmergedculturesAmlnoaeylaseofAsperglltusoryzaewas believedIobeacellboundenzyme.whichcouldexistintheceltorontheeel1walIOp6malDHa ndtemperatureofpelletamlnoacyloseactivitywerc70and55respective1),: KeywordsAspergfllusoryzae3042SubmergedcuhureAminoacytasePelletedformCellbo undenzyme近年来,L一氨基酸在食品和医药中的应用迅速发展.氨基酸的生产一般采用蛋白水解法发酵法和化学合成法.对于一些发酵法尚难生产的氨基酸,化学合成法是制造这些氨基酸的重要途径,因其成本低,可适用于大量生产但由于台成得到的氨基酸都是DL型外梢旋体,必须经过光学拆分才能得到L一氨基酸.氨基酰化酶(13C3.51.14)的立体特异性是L一型,可将化学音成的N一乙酰一DL一氨基酸拆分(水解)从而获得一氨基酸反应物中留下的D一型氨基酸可用化学方法消旋转型或继续拆分这一方法几乎适用于所有台成法生产的DL一氨基酸的拆分.Chibata~一首先发现米曲霉(Aspergi/lusoryzae)的氨基酰化酶具有良好的专一性,从而代替了由动物肾脏提取的酰化酶.自60年代末日本用DEAE—Sephadex作裁体将此酶固定化实现TI业化生产L一氨基酸以来,不断推出固定化氨基酰化酶新的研究成果.它们都是采用载体固定酶法从酶的提取,精翩列固定化,工艺复杂,要求低温条件,而且有时不稳定.所以价格昂贵.教育部"跨世纪优秀人才培养计划基金资助我国对固定化氨基酰化酶的研究工作开始于7O年代初期,得到了一些研究成果",但基车上没有应用,直接用固定化米曲霉菌体光学拆分DL一氨基酸的研究更少.至于工业应用,还是一个空白米曲霉3042是多酶体系,作为产酶菌株,目前主要用途是进行固体培养获取蛋白酶,但它还具有氨基酰化酶系为了大规模培养苗体获得高产量的氪基酰化酶.本研究采用液体培养菌体成菌球,对米曲霉菌体生长及菌丝体内外氨基酰化酶的分布进行了研究,并考察了菌体氨基酰化酶的pH 及热稳定性.1材料与方法1.1材料11.i菌种:米曲霉(Aspergil/usoryzae)3042.天津第三诃料厂提供.1.1.2原料:N一乙酰?DL一蛋氨酸(N—Ac?DL—Met),河北冀荣氨基酸有限公司提供为化学台成法生产,纯度#z-~98%.此产品用无水乙醇重结晶两次得到N—Ac?DL?Met纯产品,用1%。
矮冷水花成分预试验及不同溶剂提取物的抗氧化活性
矮冷水花成分预试验及不同溶剂提取物的抗氧化活性曹剑锋;任朝辉;芦静波;朱磊;梁志远;夏丽莎【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2016(044)007【摘要】通过对1，1－二苯基－2－三硝基苯肼（DPPH）自由基、·OH的清除活性、还原力、螯合能力、总抗氧化能力的测定，评价矮冷水花水提取物、95％乙醇提取物及其石油醚相、乙酸乙酯相和水溶性3个不同极性部位的抗氧化活性；测定总黄酮、总酚含量；采用化学反应鉴别法对矮冷水花提取物进行化学成分预试验。
预试验结果表明：矮冷水花可能含有酚类、鞣质、黄酮类、挥发油或油脂、氨基酸、多肽、蛋白质、还原糖、多糖、苷类、甾体、萜类内酯、香豆素及其苷类化学成分。
试验结果表明：水提取物、95％乙醇提取物以及其石油醚相、乙酸乙酯相、水溶性部位提取物均表现出一定抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位的黄酮、总酚含量最高，分别为28．43％、2．16％，清除DPPH自由基、·OH的能力、还原力、螯合力及总抗氧化能力的IC50值分别为0．142、0．598、0．328、1．008、0．298 mg／mL，并且随着浓度的增加，清除活性增强。
综合试验结果可知，矮冷水花提取物具有很好的抗氧化活性，乙酸乙酯部位抗氧化活性最强。
【总页数】5页(P307-311)【作者】曹剑锋;任朝辉;芦静波;朱磊;梁志远;夏丽莎【作者单位】贵州师范学院贵州省生物资源开发利用特色重点实验室，贵州贵阳550018; 贵州师范学院转化与分离研究所，贵州贵阳550018;贵州师范大学，贵州贵阳550001;皖南医学院，安徽芜湖241002;皖南医学院，安徽芜湖241002;贵州师范学院贵州省生物资源开发利用特色重点实验室，贵州贵阳550018;贵州师范学院贵州省生物资源开发利用特色重点实验室，贵州贵阳550018【正文语种】中文【中图分类】S132【相关文献】1.矮垂头菊不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性研究2.藏紫菀不同溶剂提取物的体外抗氧化活性3.绿豆皮在不同溶剂中提取物的抗氧化成分及抗氧化活性研究4.澳洲坚果青皮不同极性溶剂分步提取物功能成分与抗氧化活性及其相关性分析5.油橄榄叶不同溶剂超声提取物的抑菌和抗氧化活性及其主要成分分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
菊花主要活性成分含量及其抗氧化活性测定
菊花主要活性成分含量及其抗氧化活性测定王婷婷;王少康;黄桂玲;印虹;宋志秀;杨立刚;孙桂菊【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2013(034)015【摘要】目的:建立测定菊花中主要活性成分含量的方法并对其抗氧化活性进行测定.方法:利用高效液相色谱法(HPLC)测定不同菊花品种提取物中绿原酸、木犀草苷、槲皮素、木犀草素和芹菜素的含量；测定菊花总黄酮的含量及其抗氧化活性,考察两者的相关性.结果:不同品种菊花中的生物活性成分含量各异,贡菊中绿原酸含量最高,为9.8mg/g；杭白菊中的木犀草苷和槲皮素含量最高,分别为0.94、2.76mg/g;毫菊中木犀草素含量最高,为2.48mg/g;滁菊中芹菜素含量最高,为0.20mg/g.贡菊和杭白菊总黄酮提取率分别为5.07％、2.65％.贡菊、杭白菊和市场购得的菊花提取物相比,贡菊的T-AOC能力、清除·OH能力和DPPH自由基清除率能力均为最强,分别为(51.22±1.66)、(57.38±1.39)U/mg和(89.68±0.23)％,菊花总黄酮含量与各抗氧化指标有一定的相关性,相关系数(R2)分别为0.993(P＜0.05)、0.968(P＜0.05)和0.977(P＜0.05).结论:不同品种菊花中的活性成分含量各异,贡菊的抗氧化活性较强且与总黄酮的含量有一定的相关性.【总页数】5页(P95-99)【作者】王婷婷;王少康;黄桂玲;印虹;宋志秀;杨立刚;孙桂菊【作者单位】东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009;浙江大学医学院附属第一医院营养科,浙江杭州 310003;东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009;东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009;东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009;东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009;东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009;东南大学公共卫生学院,江苏南京 210009【正文语种】中文【中图分类】R151.2【相关文献】1.UPLC法同时测定野菊花中8种活性成分的含量 [J], 范帅帅;田伟;王相;高乐;田宇柔;牛丽颖2.两色金鸡菊花提取物的抗氧化活性测定及TLC-Bio 分析抗氧化活性成分 [J], 古扎力努尔·艾尔肯;王健;兰怡;李新霞;李琳琳;王烨;毛新民3.高原环境对药用菊花主要活性成分含量的影响 [J], 喻兆阳;汪艳;薛慧颖4.野菊花中活性成分的含量测定 [J], 张璐; 戴群芳5.几种茶用菊花在高原环境下引种后主要活性成分含量测定及分析 [J], 汪艳; 郭晓飞; 把桥环; 周利鹏; 徐立军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
菊花叶中总黄酮提取及对自由基清除作用的研究
菊花叶中总黄酮提取及对自由基清除作用的研究作者：林砚淋王志良，陈婷，王彧，胡志军，陈建秋【摘要】目的优化菊花叶中总黄酮的提取工艺，考察菊花叶总黄酮抗氧化活性。
方法采用L9 (34 ) 正交实验, 考察浸提剂浓度、料液比、浸提时间和温度等影响因素;研究D-101大孔吸附树脂分离富集菊花叶提取液中总黄酮;参照Fenton反应原理研究菊花叶总黄酮的清除·OH中作用。
结果菊花叶总黄酮的最佳提取工艺为：40 %乙醇溶液为提取溶剂，采用料液比1∶20 ( m∶V) ，在60 ℃下浸提2.5 h;D-101大孔吸附树脂能较好分离富集菊花叶黄酮类物质;菊花叶中总黄酮对Fenton体系产生的·OH有较好的清除作用。
结论该研究为菊花叶中有效成分的综合利用提供了实验基础。
【关键词】菊花叶; 总黄酮; 提取; 正交实验; 清除自由基菊花叶，是菊科(Compsitae) 植物菊花脑Dendranthema nankingense的干燥嫩茎叶。
菊花叶为江苏地产药材，味苦、辛，性凉，具有清热解毒，疏风平肝之功能，主治风火赤眼、鼻炎、咽喉肿痛、支气管炎、疮疖肿痛等。
菊花叶含有丰富的蛋白质、脂肪、纤维素、矿物质、盐等，其中维生素A 和矿物质含量最为突出，另含有具防癌作用的黄酮类和具特殊香味的挥发油芳香物质。
由于其含有特殊的营养成分，食用可清热解毒、开胃健脾，对防治流感、流脑、肝炎、痢疾有非常好的作用[1]。
现代研究表明，黄酮类化合物是菊花叶乙醇提取液中含量较多的有效成分，因其具有显著的清除人体内自由基、抗老化、抗突变、调血脂、降血压等药理保健功能，是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂[2]。
目前主要运用乙醇-水溶剂提取、碱性稀醇提取、超声波和超临界流体萃取等方法对药用植物中黄酮类化合物进行提取[3]，然后采用大孔吸附树脂对黄酮类化合物进行分离富集[4]，最后利用Fenton反应等多种自由基产生体系研究其抗氧化能力[5]。
菊花提取物的抗氧化活性研究
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1.学位论文 付为琳 菊花黄酮的提取纯化及其对脂代谢紊乱大鼠作用的研究 2008
目的：(1)研究提取菊花中黄酮类化合物的最佳工艺条件,得到菊花黄酮提取物。(2)探索适合对菊花黄酮进行分离纯化的方法条件,制备出纯度较高的菊花黄 酮。(3)分析鉴定该菊花黄酮的主要成分。(4)了解菊花黄酮是否能改善试验大鼠的脂代谢紊乱状态及可能的作用机制。
２．１ ２菊花提取物的黄酮类化合物含量 分别测定经不同溶剂萃取的菊花提取物，其黄酮含量分
加大。 上述结果可见，三种样品中正丁醇萃取物活性较高，水
苎工鱼量！！！！ ！ 抑制率（％）０
表１菊花乙醇提豹取物（Ｉ）对卵黄脂蛋白ＬＰｏ抑制作用
！！：！！
１４．ｏ．４９
塑：！！
５２．２士１．３５
ＡＯＡ（％）＝（Ａ０一Ａ）／Ａ。×１００％ １．２．３ Ｆｅ“次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一ＴＢＡｓ生成体系ｎ ４
加样顺序为：Ｆｅｓｏ．（２ｍｍ。１，Ｌ）ｏ．０４ｍｌ、黄嘌呤氧化酶 （简写：ｘｏ）（５ｕ／ｍ１）３．５ ｕ ｌ、脱氧核糖（３０ｍｍ０１，Ｌ）ｏ ２ｍｌ、 ＥＤＴＡ（５吼ｏｌ，Ｌ）Ｏ．０４ｍ１、Ｈ２０２（１７．６黝ｏｌ，Ｌ）ｏ ０１ｍｌ、加入 ｏ．１ｍｌ样品、ｐＨ７．４ ＰＢｓ（Ｏ．１ ５ｍｏｌ／Ｌ）１．４８ｍｌ、次黄嘌呤（简 写：ｘ）（２ｍｏｌ／Ｌ）ｏ．２ｍｌ总体积为２ｍｌ（除ＰＢｓ、Ｆｅ∞．用重蒸水 配制外．其它试剂均用ｐＨ７．４ ＰＢｓ ｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ配制）。然后，３５ ℃温浴１５ｍｉｍ．取ｌｍｌ反应液加１％ｗ／ｖ ＴＢＡ（ＮａｏＨ ｏ ０５ｍｏｌ／Ｌ 配制）及冰醋酸ｌｍｌ，混匀后放人沸水浴３０ｍｉｎ，冷却。在５３２ｎｍ 处测其吸光度Ａ，以不加样品管的吸光度为ｋ：清除活性以抑 制ＴＢＡｓ生成量Ａｓ３２ｎ。值的抑制百分率表示即（Ａ。一Ａ）／Ａ。×ｌｏｏ％。 １．２．４超氧阴离子的邻苯三酚“ｕＩｎｉｎ。ｌ发光体系
矮垂头菊正丁醇提取物改善高原缺氧小鼠脑组织损伤的作用
矮垂头菊正丁醇提取物改善高原缺氧小鼠脑组织损伤的作用谭宏强;张洁;田贻婷;达清越;马慧萍;张汝学;景临林【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2023(36)1【摘要】目的研究矮垂头菊正丁醇提取物对高原缺氧小鼠脑组织的保护作用。
方法将50只小鼠分为缺氧模型组、阳性对照组(乙酰唑胺)和矮垂头菊正丁醇提取物低、中、高剂量组(125、250、500 mg·kg^(-1)),进行常压密闭缺氧实验选择最佳给药剂量。
另将40只小鼠分为正常对照组、低压低氧组、阳性对照组(乙酰唑胺)和矮垂头菊正丁醇提取物给药组(500 mg·kg^(-1)),连续灌胃5 d,最后一次给药后,除正常对照组外,其余小鼠在模拟8000米海拔的低氧舱中暴露24 h,随后处死小鼠,取脑组织,测定丙二醛、乳酸、过氧化物酶、乳酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和总抗氧化能力的水平,酶联免疫法测定脑组织中白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α含量,蛋白印迹法检测脑组织中核因子E2相关因子2、血红素加氧酶1、核转录因子-κB和肿瘤坏死因子-α蛋白的表达水平。
结果与正常对照组比较,低压低氧组小鼠脑组织中丙二醛、乳酸、乳酸脱氢酶的含量显著升高(P<0.01),炎性因子白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的水平增加(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化氢酶和总抗氧化能力的水平显著降低(P<0.01),核因子E2相关因子2、血红素加氧酶1、核转录因子-κB、肿瘤坏死因子-α的蛋白表达增加(P<0.05),各指标数据均有显著性差异,因此低压低氧模型建立成功。
与低压低氧组比较,矮垂头菊正丁醇给药组小鼠脑组织中丙二醛、乳酸、乳酸脱氢酶的含量显著降低(P<0.01),炎性因子白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化氢酶和总抗氧化能力的水平显著升高(P<0.01),核转录因子-κB、肿瘤坏死因子-α的蛋白表达降低(P<0.05),而核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1的蛋白水平表达进一步升高(P<0.05)。
菊属花茶活性物质含量及体外抗氧化活性的比较研究
㊀㊀2023年第64卷第10期2521收稿日期:2022-10-11作者简介:黎侠,从事花卉育种研究,E-mail:654557635@㊂通信作者:吴超(1981 ),女,辽宁葫芦岛人,博士,从事花卉育种研究,E-mail:semporna@㊂文献著录格式:黎侠,童健全,叶立红,等.菊属花茶活性物质含量及体外抗氧化活性的比较研究[J].浙江农业科学,2023,64(10):2521-2524.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20221060菊属花茶活性物质含量及体外抗氧化活性的比较研究黎侠1,童健全2,叶立红3,张薇4,郭方其1,付曼曼1,林森洪1,吴超1∗(1.浙江省农业科学院园艺研究所,浙江杭州㊀310021;2.淳安县农业技术推广中心,浙江杭州㊀311700;3.淳安县威坪镇综合服务中心,浙江杭州㊀311715;4.淳安县农业发展服务中心,浙江杭州㊀311700)㊀㊀摘㊀要:对菊属花茶的活性物质含量进行测定,并采用2,2ᶄ-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除能力和还原力法的体外抗氧化还原能力测定,综合评价菊属6种花茶的抗氧化活性㊂结果表明,不同菊属花茶的水提物中金丝皇菊的多糖最高,而雏菊和寿菊的水提物中多酚和总黄酮含量最高㊂在清除ABTS 自由基方面,各种花茶的作用差异并不明显,雏菊和贡菊的作用相对较强,而杭白菊和紫花野菊较弱;在还原力方面,雏菊和寿菊具有较强的还原能力㊂初步推测水提物中抗氧化活性与它们含有的活性物质存在相关性㊂不同菊属花茶均具有一定的抗氧化能力,但类型间存在一定差异㊂关键词:菊属花茶;活性成分;氧化能力;还原力中图分类号:S682.1+1㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2023)10-2521-04㊀㊀菊属植物头状花序是我国传统花茶,隶属于菊科菊属,长期以来,菊属植物在我国除作为观赏栽培外,在作为花茶和药用植物方面也有广泛的应用㊂‘神农本草经“认为 久饮菊花茶能够利血气,使身体轻盈,能耐老而延寿 ;又云,白菊花茶 主诸风头眩㊁肿痛㊁目欲脱㊁恶风湿痹,久服利气㊁轻身延年 ㊂菊属花茶含有较高的营养成分,如氨基酸㊁花青素㊁生物碱㊁多糖㊁多酚等[1-3]㊂现代医学研究表明,丰富的黄酮㊁多糖和酚类化合物是主要的抗氧化活性成分㊂此外,菊属花茶在抗炎消肿㊁抗衰老耐疲㊁保护心血管㊁调血脂㊁抗肿瘤等方面都有显著作用[4-8]㊂我国作为菊属植物的发源地,品种资源十分丰富,尤其近年来,花茶产业传统结构发生了极大的转变,菊属花茶的品种和类型逐年增多,菊属花茶作为饮品原料进行功能开发是未来菊属花茶产业研究的重点,也是提高菊属花茶商品化销售水平的必要途径㊂余欣珂等[9]以4种菊花为原料真空冷冻干燥后,菊花总酚含量显著增加,其中雏菊的总酚含量增加率最高(增加了2.525倍);真空冷冻干燥后,除清除ABTS 能力差异不显著外,其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)能力㊁铁还原能力以及氧化自由基吸收能力(ORAC)变化显著㊂宋佳慧等[10]对8种菊花茶汤的感官品质和活性成分进行比较,利用偏最小二乘回归分析,确定了中药味与4-萜烯醇等6种物质相关,甜菜味与(e)-泰烯酮等13种物质相关,菜腥味与桃金娘烯醇等14种物质相关㊂对总黄酮含量的分析表明,有机种植杭白菊中总黄酮含量最高,祁白菊中总黄酮含量最低㊂鲍忠定等[11]采用水蒸气蒸馏法从杭白菊中提取挥发油,用气相色谱-质谱对挥发油化学成分进行分析,分离出126个峰,鉴定出50种化合物㊂杭白菊挥发性成分主要为单萜烯类㊁倍半萜烯类及其含氧衍生物等㊂虽然中国菊属花茶的年产量已达6000~7000t,但其研究力量十分薄弱㊂为了科学合理利用菊属花茶品种资源,以浙江省主栽的菊属花茶品种为材料,对各品种的活性成分和抗氧化能力等相关指标进行检测,以筛选出不同菊属花茶更适合的开发方向㊂本研究拟对浙江省主栽培的菊属茶品种水提物中含有活性成分进行分析,进一步验证菊属茶具有食药用兼具的特性,并通过对不同品种的体外抗氧化活性的测定分析,为浙江菊属花茶品种开发奠定基础㊂1 材料与方法1.1㊀材料2522㊀㊀2023年第64卷第10期6个试验菊花茶品种分别为贡菊㊁杭白菊㊁紫花野菊㊁金丝皇菊㊁雏菊㊁寿菊㊂各品种花茶特性详见表1㊂表1㊀6个品种菊花茶主要特性类型来源地区花朵颜色花瓣类型贡菊安徽黄色重瓣金丝皇菊江西黄色重瓣紫花野菊淳安淡紫色单瓣杭白菊桐乡白色重瓣雏菊桐乡乳白色重瓣寿菊桐乡淡黄色重瓣1.2㊀花茶水提物提取方法㊀㊀样品经炮制处理后,粉碎过0.125mm(120目)筛,取粉末50g加入1500mL去离子水, 95ħ回流提取1h,提取结束后,8000g离心,残渣再重复提取一次,合并上清液,真空旋转蒸发浓缩后,冷冻干燥得到水提物㊂1.3㊀活性成分含量测定㊀㊀多酚含量:根据Singleton等[12]的方法略加改动㊂具体步骤:准确移取0.1㊁0.2㊁0.4㊁0.6㊁0.8mL五倍子酸溶液于离心管中,用蒸馏水定容至1mL,再加入0.5mL的福林酚试剂,摇匀,反应8min,再加入2mL10%碳酸钠溶液,摇匀,避光反应60min,于750nm处测定吸光度,以五倍子酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线㊂准确移取0.5mL样品溶液,按上述方法在760nm处测花茶的吸光度,计算样品中多酚的含量㊂总黄酮含量:根据柴建新等[13]的方法,具体步骤:准确移取0㊁0.1㊁0.2㊁0.4㊁0.6㊁0.8mL 芦丁标准溶液于离心管中㊂用70%乙醇补足至1mL㊂首先加入0.3mL5%亚硝酸钠溶液,摇匀,反应5min;再加入0.3mL10%硝酸铝溶液,摇匀,反应5min;最后加入1mol㊃L-1氢氧化钠溶液4.0mL,摇匀,反应10min㊂在波长510nm下测量吸光度,以芦丁浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,得到回归方程㊂准确移取1mL样品溶液,按上述方法在510nm处测量吸光度值,计算总黄酮含量㊂多糖含量:根据刘晓涵等[14]的方法,分别精密量取葡萄糖标准溶液0.1㊁0.2㊁0.3㊁0.4㊁0.5mL,置10mL具塞玻璃试管中,用蒸馏水补足至0.5mL,向试液中加入5%苯酚溶液0.5mL,然后快速加入2.5mL浓硫酸,静置10min㊂涡旋振荡器混匀后,30ħ水浴中反应20min,490nm 下测吸光度,以相应的试剂为空白,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线㊂1.4㊀抗氧化活性分析㊀㊀ABTS清除能力:根据Sarikurkcu等[15]的方法,配制ABTS+储备液:称量0.0318g ABTS+放入10mL容量瓶,用去离子水定容㊂称取0.0134 g过硫酸钾放入另一个10mL容量瓶中,用去离子水定容㊂将定容好的ABTS+溶液和过硫酸钾溶液按照1ʒ1的比例混合后,避光保存12~16h㊂ABTS+测定液:用磷酸缓冲溶液稀释ABTS+储备液,使其在734nm波长处测定的吸光度值为0.7ʃ0.02㊂提取物溶液0.5mL+ABTS+测定液2.0mL,准确振荡30s,测定在734nm波长处的吸光度值㊂还原能力测定:根据陈晨等[16]的方法,在1mL磷酸缓冲溶液(pH值6.6)中加入0.4mL 提取物溶液,1mL1%铁氰化钾,混合物在50ħ水浴保温20min,急速冷却,加1mL10%三氯乙酸,5000r㊃min-1离心10min㊂取上层清液2mL,加0.2mL0.1%FeCl3,混合均匀,在波长700nm下测吸光度㊂2 结果与分析2.1㊀菊花茶活性成分含量测定㊀㊀根据供试菊花茶水提物总黄酮㊁多酚和总多糖含量测定结果(图1),不同的菊花茶活性物质含量具有显著性差异,有些品种间还有极显著差异(P<0.01)㊂试验雏菊的总黄酮和多酚含量均高于其他样品,寿菊的总黄酮和多酚含量也较高,而紫花野菊和杭白菊的总黄酮和多酚含量较低;金丝皇菊总多糖含量最高,含量最低的为杭白菊,见图1㊂样品中总黄酮含量范围为2.48%~8.92%,多酚含量范围为4.90%~11.36%,总多糖含量范围为9.89%~13.50%㊂测定的标准曲线为黄酮Y= 1.9727X+0.117,R2=0.9997,多糖Y=9.6814X-0.0012R2=0.9982,多酚Y=7.7925X+0.0115, R2=0.9928㊂2.2㊀不同花茶水提物对ABTS自由基的清除作用㊀㊀ABTS自由基的清除原理是电子转移过程, ABTS自由基经活性氧氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子ABTS+㊃,这种自由基在734nm处有最强吸收,当加入抗氧化剂时,储备液颜色变浅,测得吸光度的减少幅度,从而表现出抗氧化剂对自由基的图1㊀不同菊属花茶水提物活性成分含量清除率[17]㊂实验样品对ABTS自由基清除能力如图2所示,随着样液的浓度增大,各抗氧化剂对ABTS自由基清除率增大㊂当样品质量浓度为0.50 mg㊃mL-1时,杭白菊和紫花野菊对ABTS清除率没有显著差异(P>0.05),与其他样品之间存在显著差异(P<0.05)㊂当试样质量浓度>0.50mg㊃mL-1时,雏菊㊁贡菊和寿菊的清除能力均大于其他三者(P<0.05);当样品质量浓度为1.00mg㊃mL-1时,雏菊和贡菊对ABTS自由基清除能力均达到80%以上,样品之间的差异存在显著差异㊂因此,整体清除能力:雏菊>贡菊>寿菊>金丝皇菊>紫花野菊>杭白菊㊂图2㊀不同菊属花茶对ABTS的清除力2.3㊀不同菊属花茶水提物还原力㊀㊀还原能力是潜在抗氧化活性的一个重要指标,还原力强的样品同时也是良好的电子供应者,其供应的电子除了可使Fe3+还原为Fe2+外,也可参与自由基反应,与自由基结合生成稳定的物质㊂抗氧化物在酸性条件下,将Fe3+还原成蓝色的Fe2+,测定其吸光度,就可得到被测液体的还原力[18]㊂由图3可知,不同浓度的提取物均具有一定的还原能力,吸光度的高低反映提取物的还原能力㊂随着样品浓度升高,在700nm处的吸光度增大,说明样品浓度越高,能够把越多的铁氰化钾还原成亚铁氰化钾㊂在样品质量浓度为1.00mg㊃mL-1时,雏菊的还原能力最强,与贡菊㊁杭白菊㊁紫花野菊和金丝皇菊之间存在极显著差异(P<0.01),与寿菊差异不显著㊂由此可知,样品间的还原能力强弱顺序为:雏菊>寿菊>贡菊>紫花野菊>金丝皇菊>杭白菊㊂图3㊀不同菊属花茶的还原力3 结论菊属植物作为中草药及茶饮应用历史悠久,具有消暑㊁生津㊁祛风㊁润喉㊁养目等多重保健功能,随着花茶的需求增加,对茶用菊的要求也日渐提升㊂但目前我国茶用菊品种多为传统白色和黄色,形态㊁色泽等均较为单一,难以满足目前市场对多元化㊁个性化品种的需求,且传统品种在花期㊁产量㊁加工后外观特点等方面常存在部分不足㊂因而进一步在野生菊属种资源中开展茶用特性的评价,筛选具有色泽㊁花型㊁花期㊁产量等特异性,并能够满足饮用口感㊁药用成分等要求的新品种,将对茶用菊花的市场开发具有重要意义㊂抗氧化活性化合物属植物次生代谢产物,是广泛存在于植物中具有功效活性的一类化合物,普遍具有良好的抗氧化㊁抑菌作用,能够防治心血管疾病㊁调节动物激素水平和提高机体免疫力㊂本试验系统地研究了不同的体外抗茶菊属花茶的活性成分含量,包括总黄酮㊁总多糖和总多酚等,结果表明,雏菊和寿菊中多酚和总黄酮含量最高㊂不同类型菊属花茶的活性物质含量有一定差异,雏菊的总黄酮和多酚含量略高于其他品种,后期用于药用植物的研究方向更为适合㊂而金丝皇菊的多糖含量最高,风味佳,具有作为饮品的开发潜力较大㊂2524㊀㊀2023年第64卷第10期目前为止,就菊属花茶品种研究的层次和应用领域来说,还有一定的局限性㊂比如,在提取方法上,对菊属花茶品种的提取工艺仅限于一种或两种常见的提取工艺,缺乏全面性和选择性㊂在功能性研究上,对菊属花茶品种有效成分的功能性研究只有少量报道;对我国原种的菊属花茶品种抗氧化能力的测定鲜有报道,对于清除自由基的体外抗氧化实验的研究尚未报道㊂通过体外氧化还原能力测定,包括ABTS自由基清除能力和还原力等㊂结果表明,菊属花茶样品均对自由基具有一定的清除能力,且清除率随多酚单体浓度的增加而增大,雏菊和贡菊清除ABTS自由基能力高于其余4种菊属花茶样品;此外,雏菊和寿菊具有较强的还原能力,在样品质量浓度为1.00mg㊃mL-1时,雏菊和寿菊的还原力极显著高于贡菊㊁杭白菊㊁紫花野菊和金丝皇菊(P< 0.01)㊂由以上结论可知,不同类型菊属花茶的抗氧化活性与活性物质的含量有很大关系,但进一步关系还需要深入研究,以便更好地发挥菊属花茶中活性物质抗氧化的效果㊂参考文献:[1]㊀AL-YAFEAI A,BÖHM V.In vitro bioaccessibility ofcarotenoids and vitamin E in 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血管疾病［５］等。据报道，抗氧化剂能够清除自由 氨基苯磺酸、萘乙二胺购自阿拉丁试剂公司；抗坏
基，破坏链式反应，结合金属离子和作为氧清除剂 血酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、盐酸等均为中国
来干扰氧化过程［６］。适当补充抗氧化剂可以中和 市售的分析纯试剂。
ＲＯＳ 并防止氧化损伤，能够有效地预防或抑制相 关疾病的发生。
（ ， ， ， ； １． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｔｈｅ ９４０ｔｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｊｏｉｎｔ Ｌｏｇｉｓｔｉｃｓ Ｓｕｐｐｏｒｔ ｆｏｒｃｅ ｏｆ ＣＰＬＡ Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００５０ Ｃｈｉｎａ ， ， ， ， ２． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌａｎｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００００ Ｃｈｉｎａ．
， ， ， ） ３． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｇａｎｓｕ ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００００ Ｃｈｉｎａ
： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｒｕｄｅ ｅｘ （ ） （ ）， （ ）， （ ） （ ） ｔｒａｃｔｓ ＣＥ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｓｏｌｖｅｎｔ ｆｒａｃｔｉｏｎｓ ｈｅｘａｎｅ ＨＥ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ＥＡＥ ｎｂｕｔａｎｏｌ ＢＥ ａｎｄ ａｑｕｅｏｕｓ ＷＥ ｏｆ ｃｒｅｍａｎｔｈｏｄｉｕｍ ｈｕ ， ， ， ， ｍｉｌｅ ｂｙ ＤＰＰＨ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ＡＢＴＳ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｎｉ （ ） ｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｎｄ ｉｒｏｎ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ／ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ ＦＲＡＰ ａｓｓａｙ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ
比色法，以芦丁为标准品， 度的芦丁标准品溶液（０ ～
１４０ · μｇ ｍＬ－１）置于一离心管中，加入 ５０ μＬ ５％
ＮａＮＯ２ 溶液，摇匀，反应 ６ ｍｉｎ 后加入 ５０ μＬ １０％
（ ） Ａｌ ＮＯ３ ３ 溶 液，静 置 ６ ｍｉｎ 后 再 加 入 ２５０ μＬ
（ ＮａＯＨ １ ｍｏｌ·Ｌ－１ ）溶液，摇匀，静置 １５ ， ｍｉｎ ５１０
（μｇ· ｍＬ－１ ），即在 ５１７ ｎｍ 处引起吸光度降低
５０％ 所需的样 化活性越高。
品
剂
量。ＥＣ５０
值
越
小，代
表
其
抗
氧
１ ５ ２ ＡＢＴＳ 自由基清除实验 ＡＳＢＴＳ 自由基清
基双（３乙基苯并噻唑啉６磺酸）二钠盐（ＡＢＴＳ）、 下测定不同溶剂萃取物样品的吸光度，平行测定 ３
硝基蓝四唑（ＮＢＴ）、吩嗪硫酸甲酯（ＰＭＳ）购自 ｓｉｇ 次，代入相应的回归方程，计算矮垂头菊不同溶剂
１７５４
化学研究与应用
第 ３１ 卷
萃取物样品的总酚含量 （ｍｇ 没食子酸／ ｇ 提取
物）。
１ ５ 抗氧化活性的测定
； 收稿日期：２０１９０３１０ 修回日期：２０１９０６２５ 基金项目：国家自然科学基金项目（８１８７２７９６，８１２０２４５８）资助；甘肃省自然科学基金项目（１８ＪＲ３ＲＡ４０８，１３０８ＲＪＹＡ０６）资助；中国博士后科 学基金项目（２０１２Ｍ５２１９２６）资助 联系人简介：景临林（１９８２），男，副主任药师，主要从事天然产物化学方面的研究。Ｅｍａｉｌ：ｌｆｊｉｎｇｌｉｎｌｉｎ＠ １６３． ｃｏｍ
， ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ＦＲＡＰ ｖａｌｕｅ ｏｆ ＢＥ ｏｆ Ｃｒｅｍａｎｔｈｏｄｉｕｍ ｈｕｍｉｌｅ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ． Ｈｏｗｅｖｅｒ ＨＥ ｏｆ
ｃｒｅｍａｎｔｈｏｄｉｕｍ ｈｕｍｉｌｅ ｈａｄ ｌｅａｓｔ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｓ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＥＡＥ ｅｘｔｒａｃｔ ａｎｄ ｔｈｅ ＢＥ ｅｘｔｒａｃｔ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｃｏｕｌｄ ｃａｎ ｂｅ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｎａｔｕｒａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ．
邵 瑾１，２，马慧萍１，赵 彤 ，杨 １，３ 颖１，２，贾正平１，景临林１
（１． 联勤保障部队第九四 ０ 医院药剂科，甘肃 兰州 ； ７３００５０ ２． 兰州大学药学院，甘肃 兰州 ； ７３００００
３ 甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 ） ７３００００
摘要：为了研究矮垂头菊植物的抗氧化活性，本文采用 ＤＰＰＨ 自由基清除法、ＡＢＴＳ 自由基清除法、羟基自由基 清除法、超氧自由基清除法、一氧化氮自由基清除法和铁还原／ 抗氧化能力（ＦＲＡＰ）测定法六种抗氧化对矮垂 头菊粗提物（ＣＥ）、正己烷相（ＨＥ）、乙酸乙酯相（ＥＡＥ）、正丁醇相（ＢＥ）、水相（ＷＥ）等 ５ 个不同极性溶剂萃取 物的抗氧化活性进行评价，并探讨抗氧化活性与总酚和总黄酮含量之间的关系。结果显示矮垂头菊不同极性 溶剂的萃取物均有抗氧化活性，且抗氧化活性与总黄酮和总酚含量密切相关，其中 ＢＥ 中总黄酮含量最高可 达 ５８８ ０２±１０ １８ ｍｇ 芦丁／ ｇ，总酚含量最高可达 ５６８ ４９±８ １４ ｍｇ 没食子酸／ ｇ，且自由基清除能力和 ＦＲＡＰ 值 均高于其它组分，但 ＨＥ 中总黄酮和总酚含量及抗氧化活性均较低。结果表明矮垂头菊 ＥＡＥ 萃取物和 ＢＥ 萃 取物具有很强的自由基清除能力，可作为潜在的天然抗氧化剂开发。 关键词：矮垂头菊；抗氧化活性；总酚类含量；总黄酮含量；自由基清除 中图分类号：Ｏ６２９ 文献标志码：Ａ
当细胞内抗氧化系统无法消除机体产生的过 ｍａ 公司；芦丁标准品、没食子酸标准品购自中国
量活性氧（ＲＯＳ）时会发生氧化应激，其被认为是 食品药品检定研究院；还原性辅酶 二 Ⅰ 钠（β
生物衰老和多种疾病发展的重要因素，如癌症［１］， ＮＡＤＨ）、硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）、三氯乙酸（ＴＣＡ）、
急性高山病［２］，神经退行性疾病［３］，炎症［４］，心脑 ２，４，６三（２吡啶基）Ｓ三嗪（ＴＰＴＺ）、硝普钠、对
虽然在市场上可购买到多种有效的合成型抗 氧化剂，如 ２，６二叔丁基４甲基苯酚（ＢＨＴ）、丁基 羟基茴香 醚 （ＢＨＡ ）和 叔 丁 基 对 苯 二 酚 （ＴＢＨＱ ） 等，但其具有潜在的毒理作用［７］。因此，从药用植 物中开发天然抗氧化物质越来越受到人们的关 注。
矮垂头菊（ ）是菊 Ｃｒｅｍａｎｔｈｏｄｉｕｍ ｈｕｍｉｌｅ ｍａｘｉｍ 科垂头菊属的一员，是青藏高原的特有物种，生长 在海拔 ２ ４００ ～５ ６００ｍ 的高山流石滩的石缝之中。 这种特殊的草药自古以来就被用于传统的藏药 中，具有抗炎，解毒和缓解疼痛的作用［８］。迄今为 止，很少报道该物种的化学成分和药理活性，可能 是由于收集困难和样本稀缺。本研究通过六种不 同的方法，系统地评价矮垂头菊粗提取物及其不 同极性溶剂萃取物的抗氧化能力，并比较各萃取 物的抗氧化能力与其总黄酮和总酚含量之间的相 关性，以期为矮垂头菊抗氧化活性物质的进一步 研究及矮垂头菊的开发利用提供一定的科学依 据。
过滤，浓 缩，干 燥 得 到 正 己 烷 相 （ＨＥ，非 极 性 组
分），乙酸乙酯相（ＥＡＥ，中等极性组分），正丁醇相
（ＢＥ，极性组分）和水相（ＷＥ，高极性组分）样品。
１ ４ 总黄酮和总多酚含量测定
总黄酮含量根据 等 Ｖｉａｃａｖａ［９］ 人描述的方法
测定，并进行了相应的修改。总黄酮含量的测定
采用 （ ） ＮａＮＯ２Ａｌ ＮＯ３ ３ 将 ５００ μＬ 不同质量浓
司，由兰州大学药学院杨永健教授鉴定为矮垂头 准品溶液（０ ～ １４０ · ）置于 μｇ ｍＬ－１ ４ ｍＬ 离心管
菊。
中，依次加入 １ ｍＬ ＦＣ 试剂（即 ）试 ＦｏｌｉｎＣｉｏｃａｌｔｅｕ
１ ２ 试剂与化学药品 １，１二苯基２三硝基苯肼（ＤＰＰＨ）、２，２′联氮
７剂６０，１ｎｍｍＬ处７测％定Ｎａ标２Ｃ准Ｏ３系溶列液的充吸分光混度匀值，室。在温同放样置条５ ｈ件，
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｏｌａｒ ｓｏｌｖｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｃｒｅｍａｎｔｈｏｄｉｕｍ ｈｕｍｉｌｅ
， ， ， ， ， ＳＨＡＯ Ｊｉｎ１，２ ＭＡ ＨｕｉＰｉｎｇ１ ＺＨＡＯ Ｔｏｎｇ１，３ ＹＡＮＧ Ｙｉｎｇ１，２ ＪＩＡ Ｚｈｅｎｇｐｉｎｇ１ ＪＩＮＧ Ｌｉｎｌｉｎ１
第 １０ 期
邵 瑾，等：矮垂头菊不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性研究
１７５３
： ； ； ； ； Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｃｒｅｍａｎｔｈｏｄｉｕｍ ｈｕｍｉｌｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｎｍ 处测定标准系列的吸光度值。在同样条件下
测定不同溶剂萃取物样品的吸光度，平行测定 ３
１ 材料与方法
次，代入相应的回归方程，计算矮垂头菊不同溶剂 萃取物样品的总黄酮含量（ｍｇ 芦丁／ ｇ 提取物）。
１ １ 植物材料 矮垂头菊购于青海西宁三江宝商贸有限公
总酚含量通过 等 Ｚａｒｚｅｃｋａ［１０］ 人描述的方法， 并稍作修改。将 １００ μＬ 不同浓度的没食子酸标