杂菌污染防治
食用菌杂菌防治方法
食用菌杂菌防治方法在食用菌栽培过程中，杂菌污染是造成减产甚至失败的主要原因，如何将杂菌污染的损失降至最低，现以黑木耳为例总结下。
1试管母种（斜面培养基）在菌种分离或继代扩繁时，由于种种原因，造成培养基受杂菌污染，早期发现可采取如下处理：①种接前发现细菌污染：早期表现在斜面培养基周围的乳白色糊状物。
不论面积大小，应立即淘汰被污染试管，之后将剩余的试管培养基重新灭菌之后再利用。
②接种前发现霉菌污染早期表现在斜面上为孤立白点，可立即将污染部分切除，再连同未污染的试管培养基重新灭菌后再利用。
③接种后发现杂菌污染：继代扩繁或组织分离时，如果遇到有问题的母种，子实体或菌丝没处理好，都会造成批量污染杂菌，同时表现在种块周围。
不论是霉菌（未形成孢子）或细菌（未扩散），就可按照无菌操作，将杂菌及周围培养基切除之后，重新灭菌再利用；如果菌种萌发生长健壮，而出现在其它部位孤立的杂菌污染菌落，可通过无菌操作，将杂菌及周围培养基切除之后继续培养。
2原种（木屑麸皮培养基）在原种生产过程中，常见的问题有接种后不成活及杂菌污染，可采取如下相应措施：①母种接入原种培养基后，发现培养基内部有霉点或在适温条件下经过72h培养，大批量母种不萌发，也没有杂菌污染，这是培养基灭菌时内部所产生的有害气体未排出造成的，需重新灭菌后再接种。
②培养过程中发现表面有霉菌，早期（未形成孢子之前）可按无菌操作，倒置原种瓶去除杂菌继续培养；杂菌污染严重时去除杂菌污染部分，补充新种后灭菌再接种。
3栽培种（木屑麸皮或稻糠培养基）东北栽培黑木耳都是用栽培种进行出耳管理，生产量较大，少则1~2万袋，多达十几万袋甚至更多，季节性强，没时间和人力进行检查，只有在培养成熟后，下架打孔催芽时才能发现问题。
可采取如下补救措施。
栽培春耳，菌种未成活及仅有一小部分被杂菌污染（去除被污染部分补充新料）的，重新灭菌后改栽元蘑；栽培秋耳出现的未成活及被污染袋改栽榆黄蘑及平菇。
木耳菌袋中有部分杂菌，可在木耳菌丝生长的部位割口出耳，能挽回部分损失。
如何防治黑木耳制种阶段杂菌污染
湿度过高或过低都会影响黑木耳菌种的生长和杂菌繁殖，导致污染发生。
03
黑木耳制种阶段杂菌污染 的防治措施
选择高质量的菌种
选用经过严格筛选和检验的优质菌种，避免使用带有杂菌或质量不佳的菌种。 选择具有抗病性强、产量高、品质优良的菌种，提高黑木耳的制种质量和效益。
了解菌种的适应性，选择适合当地气候、土壤等条件的菌种。
案例一：菌种带菌导致杂菌污染
01
02
03
杂菌种类
青霉、曲霉、毛霉等常见 霉菌。
带菌原因
菌种老化、培养环境不良 、接种操作不规范等。
防治方法
选择优良菌种，改善培养 环境，严格接种操作。
案例二：培养料消毒不彻底导致杂菌染
杂菌种类
细菌、放线菌等。
带菌原因
培养料未彻底消毒，存在残留的细菌和放线菌。
防治方法
接种操作不当
操作不规范
接种操作不当是黑木耳制种阶段杂菌污染的另一个重要来源 ，如接种时未严格按照无菌操作规程进行，导致杂菌进入培 养基中。
设备污染
接种设备未进行彻底消毒或存在污染，也会导致杂菌污染的 发生。
环境条件不良
温度不适宜
黑木耳制种阶段对温度要求较高，如温度过高或过低都会导致杂菌繁殖加快，从而产生污染。
污染途径
带菌的菌种在培养过程中会不断繁殖，占据优势地位，导致其他有益菌无法 生长，从而产生污染。
培养料污染
杂菌种类
培养料污染主要由腐朽菌、木霉、根霉等杂菌引起。
污染途径
培养料在制备、运输、贮藏过程中易受杂菌污染，使用受污染的培养料进行黑木 耳制种，会导致杂菌在培养基中大量繁殖，影响黑木耳菌种的生长。
对污染的菌种进行隔离处理，避免 与其他菌种接触。
《防止杂菌污染的技术》 讲义
《防止杂菌污染的技术》讲义一、引言在许多生产和实验过程中，杂菌污染是一个令人头疼的问题。
它不仅会影响产品的质量和产量，还可能导致严重的经济损失甚至危害健康。
因此，掌握有效的防止杂菌污染的技术至关重要。
本讲义将详细介绍相关的技术和方法。
二、杂菌污染的来源和危害（一）杂菌的来源1、空气传播空气中存在着各种各样的微生物，如细菌、真菌孢子等。
在通风不良的环境中，这些微生物容易进入生产区域或实验场所。
2、人员带入人员的衣物、皮肤、头发等表面可能携带杂菌。
尤其是未经过严格清洁和消毒的人员，容易将杂菌带入。
3、原材料污染原材料本身可能就含有一定量的杂菌，如果在使用前未进行充分的检测和处理，就会引入污染。
4、设备和器具生产或实验使用的设备、器具，如果清洁消毒不彻底，也会成为杂菌滋生的温床。
（二）杂菌污染的危害1、降低产品质量杂菌的存在可能会改变产品的成分、性质和口感，使其不符合质量标准。
2、影响产量杂菌与目标微生物或细胞竞争营养和生存空间，导致目标产物的产量下降。
3、引发安全问题某些杂菌可能会产生毒素或有害物质，对人体健康造成威胁。
三、防止杂菌污染的基本原则（一）清洁保持生产和实验环境的清洁是预防杂菌污染的基础。
定期对地面、墙壁、设备等进行清扫和擦拭，去除灰尘、污垢和杂物。
（二）消毒使用合适的消毒剂对环境、设备和器具进行消毒，杀灭可能存在的杂菌。
（三）隔离将生产或实验区域与外界环境进行有效的隔离，防止外界杂菌的侵入。
（四）无菌操作在涉及微生物培养、细胞培养等操作时，严格遵循无菌操作规范，减少人为因素导致的污染。
四、防止杂菌污染的具体技术（一）环境控制1、空气质量控制安装高效空气过滤器（HEPA），对进入生产或实验区域的空气进行过滤，去除其中的微生物。
保持良好的通风系统，确保空气流通，降低微生物的浓度。
2、温度和湿度控制控制适宜的温度和湿度条件，不利于杂菌的生长和繁殖。
例如，某些微生物在高温高湿的环境中更容易滋生，通过调节温湿度可以抑制其生长。
采取有效措施 防治食用菌菌种受污染
采取有效措施防治食用菌菌种受污染食用菌生产过程中，制种是关键的一环。
而在菌种的制作过程中，操作不当，消毒不彻底等原因会导致杂菌的侵入，污染菌种，使食用菌商品率下降，效益下降，下面就食用菌生产中常见的杂菌及防治措施介绍如下：一、青霉菌是最常见的一种杂菌。
污染后在培养基上呈现小而单独的绿色粉末状。
霉斑。
该菌分布极广，靠空气中的分生孢子附着在未经彻底消毒而潮湿的材料上传播。
防治措施：①培养料要严格消毒。
②接种时要严格掌握无菌操作技术。
③加强通风、降温、降湿。
④局部污染可用5-10%石灰水冲洗。
二、木霉菌主要是绿色木霉或康氏木霉。
依靠产生于腐烂的木材、种子、植物残体、堆肥及土壤等有机质培养料中和浮游在空气中的孢子进行传播。
该菌喜酸性，温度达25-30℃，空气相对湿度80-90%时容易发生，能在3-5天内由点片发展到整个料面。
木霉常与青霉混生，二者菌丝颜色相似，不同处是青霉由白向绿或淡黄色转变，而木霉菌丝开始为白色，产生绿色孢子后变成绿色或铜绿色，并逐渐加深。
木霉菌的纤维素酶活性强，能分解纤维素，主要发生于室内锯木屑等木质素纤维丰富的培基中。
因其生长迅速，除与食用菌争夺营养外，还分泌毒素，所以常与食用菌丝体间形成对峙的”岛屿状”“拮抗线”抑制食用菌菌丝的生长。
防治措施：①培养料严格消毒，彻底消灭培养料中的菌丝及孢子；做好无菌操作，加强通风、降温。
②消毒时甲醛用量不宜过多，防止造成酸性环境。
③培养基上有木霉时，及时局部涂755酒精、15%漂白粉液，50%多菌灵200倍液，喷1-5%的石灰水或撒白灰粉再行挖除，后用石灰水涂抹。
处理时最好将菌种袋（瓶）搬到室外，防止孢子飞散。
出现木霉后，严禁任意打开瓶盖或揭开薄膜，避免蔓延。
利用塑料袋制种时，培养期间不宜过多的移动。
④及时揭除未萌发的菌种块。
⑤菌种瓶及菌种袋的棉塞不能受潮，培养室保持干燥清洁。
⑥母种要纯正。
⑦拌料时每公斤干料加入25%（或5%）的多菌灵2克或75%的甲托1克。
微生物发酵中杂菌污染及其防治
微生物发酵中杂菌污染及其防治发酵染菌是指在发酵过程中，生产菌以外的其他微生物侵入了发酵系统，从而使发酵过程失去真正意义上的纯种培养的现象。
发酵生产过程大多为纯种培养过程，需要在无杂菌污染的条件下进行。
从国内外目前的报道看，在现有的科学技术条件下要做到完全不染菌是不可能的。
目前要做的是提高生产技术水平，强化生产过程管理，防止发酵染菌的发生。
一旦发生染菌，应尽快找出污染的原因，并采取相应的有效措施，把发酵染菌造成的损失降到最小。
一、发酵异常现象及原因分析发酵过程中的种子培养和发酵的异常现象是指发酵过程中的某些物理参数、化学参数或生物参数发生与原有规律不同的改变，这些改变必然影响发酵水平，使生产遭受损失。
对此，应及时查明原因，加以解决。
（一）种子培养的异常现象种子培养异常导致培养的种子质量不合格。
种子质量差会给发酵带来较大影响。
然而种子内在质量常被忽视，由于种子培养的周期短，可供分析的数据较少，因此种子异常的原因一般较难确定，也使得由种子质量引起的发酵异常原因不易查清。
种子培养异常往往表现为菌体生长缓慢、菌丝结团、代谢不正常三方面。
1．菌体生长缓慢种子培养过程中菌体数量增长缓慢的原因很多。
培养基原料质量下降、菌体老化、灭菌操作失误、供氧不足、培养温度偏高或偏低、酸碱度调节不当等都会引起菌体生长缓慢。
此外，接种物冷藏时间长或接种量过低而导致菌体量少，或接种物本身质量差等也会使菌体数量增长缓慢。
生产中，培养基灭菌后需取样测定其pH，以判断培养基的灭菌质量。
2．菌丝结团在液体培养条件下，繁殖的丝状菌并不分散舒展而聚成团状称为菌丝团。
一个菌丝团可由一个孢子生长发育而来，也可由多个菌丝体聚集一起逐渐形成。
菌丝结团时从培养液的外观就能看见白色的小颗粒，菌丝聚集成团会影响内部菌丝的呼吸和对营养物质的吸收。
如果种子液中的菌丝团较少，进入发酵罐后，在良好的条件下，可以逐渐消失，不会对发酵产生显著影响。
如果菌丝团较多，种子液移入发酵罐后往往形成更多的菌丝团，影响发酵的正常进行。
生料栽培平菇如何预防杂菌污染
2023-11-10CATALOGUE目录•引言•预防杂菌污染的措施•生料栽培平菇的优点•生料栽培平菇的缺点及解决方法•结论•参考文献01引言•生料栽培平菇是一种常见的食用菌栽培方法，但由于生料中含有丰富的营养成分，容易滋生杂菌，导致污染。
杂菌污染不仅会影响平菇的产量和质量，还会对食用者的健康造成潜在威胁。
因此，预防杂菌污染对于生料栽培平菇至关重要。
背景介绍杂菌污染的危害杂菌在生料中繁殖，与平菇争夺营养，导致平菇生长缓慢，产量下降。
产量下降品质下降引发食品安全问题经济损失杂菌污染会导致平菇的外观、口感和营养价值下降，影响销售和食用价值。
某些杂菌污染可能产生有毒物质，对人体健康造成威胁，甚至引发食品安全事故。
由于产量和品质下降，种植者的经济效益受到影响，甚至可能面临亏损。
02预防杂菌污染的措施选用新鲜、无霉变、无虫蛀的原料，并确保原料中不含有杂菌。
原料选择将原料暴晒、干燥，并清洗干净，以减少附着的杂菌和虫卵。
原料处理原料选择与处理场地选择选择通风良好、环境干燥、无污染的场地进行栽培。
布局设计设计合理的布局，包括栽培室、接种室、菌种培养室等，以减少杂菌的传播和扩散。
栽培场地的选择与布局在栽培过程中，保持环境清洁、干燥，并定期进行消毒处理。
栽培管理在接种过程中，严格执行无菌操作规程，避免杂菌的侵入和传播。
接种操作选择抗杂菌能力强、适应性广的优良菌种进行栽培。
菌种选择在栽培过程中，定期检查平菇的生长情况，及时发现并防治病虫害。
病虫害防治栽培与管理03生料栽培平菇的优点优化培养基质生料栽培平菇可以优化培养基质，提高平菇的产量。
例如，通过添加适宜的营养成分，调整培养基的pH值和含水量等，可以促进平菇的生长和繁殖。
减少杂菌污染生料栽培平菇通过选择优良菌种和严格控制培养条件，可以减少杂菌污染，提高平菇的产量。
简化栽培流程生料栽培平菇的栽培流程相对简单，可以减少人力和物力的投入，提高生产效率，进而提高平菇的产量。
发酵生产中杂菌的检查与防治
发酵生产中杂菌的检查与防治在发酵生产过程中，杂菌的检查与防治是至关重要的环节。
杂菌的存在会严重干扰目标菌的生长发育，影响发酵效率，甚至会污染目标产品。
以下将详细介绍杂菌检查与防治的方法。
一、杂菌检查方法1.显微镜检查：取发酵液进行显微镜检查，观察菌体形态和生长情况。
如果发现杂菌，可以进一步进行革兰氏染色、芽孢染色等实验，确定杂菌种类。
2.培养基培养：将发酵液均匀涂布在选择性培养基上，观察菌落形态和颜色。
如果有杂菌，可以根据菌落的特征鉴别其种类。
3.抗体检测：有些杂菌会产生特定的抗体，可以利用抗体检测技术如ELISA、免疫荧光等方法检测杂菌的存在。
4.分子生物学方法：利用PCR、基因测序等分子生物学技术，可以快速、准确地检测杂菌。
二、杂菌防治方法1.发酵原料控制：严格控制原料来源，保证无污染。
对发酵设备进行定期消毒，防止设备带菌。
2.菌种选择与保藏：选择抗逆性强的菌种，并进行定期纯化与保藏，防止杂菌污染。
3.培养基优化：优化培养基成分和配方，提高目标菌对杂菌的竞争力。
4.发酵过程控制：通过控制发酵温度、pH值、溶氧量等参数，抑制杂菌生长。
5.添加抗生素：在发酵过程中添加适量的抗生素，抑制杂菌生长，但要注意不能影响目标菌的生长。
6.膜过滤法：采用膜过滤技术，将发酵液中的杂菌滤除，保证目标菌的纯度。
7.生物防治法：利用某些特定微生物或植物提取物，抑制杂菌生长。
例如，某些乳酸菌可以抑制病原菌的生长。
三、实际案例分析以酱油发酵为例，常见的杂菌检查与防治方法如下：1.杂菌检查：取发酵液进行显微镜检查，观察是否有杂菌存在。
如果发现杂菌，进行革兰氏染色确定其种类。
同时，将发酵液涂布在选择性培养基上，观察菌落形态和颜色。
根据菌落的特征，判断是否有杂菌污染。
2.杂菌防治：首先，严格控制原料和水质，避免污染。
其次，选择优良的菌种进行发酵，并定期进行纯化和保藏。
在发酵过程中，控制温度、pH值和溶氧量等参数，以抑制杂菌生长。
《防止杂菌污染的技术》 讲义
《防止杂菌污染的技术》讲义一、引言在各种生产和实验过程中，杂菌污染是一个经常面临的问题。
杂菌的存在不仅会影响产品的质量和产量，还可能导致严重的经济损失和安全隐患。
因此，掌握有效的防止杂菌污染的技术至关重要。
本讲义将详细介绍防止杂菌污染的相关技术，希望能为大家提供有益的参考。
二、杂菌污染的来源与危害（一）杂菌污染的来源1、空气传播空气中存在着大量的微生物，如细菌、真菌孢子等。
在通风不良的环境中，这些微生物容易进入生产区域，造成污染。
2、人员操作操作人员的手部、衣物、头发等可能携带杂菌。
如果操作不规范，如未进行严格的消毒、未遵循无菌操作流程等，就容易将杂菌引入。
3、原材料原材料本身可能带有杂菌，如果在使用前未进行有效的处理和检测，就会成为污染源。
4、设备和器具生产设备、容器、工具等如果清洁消毒不彻底，也会滋生和传播杂菌。
（二）杂菌污染的危害1、降低产品质量杂菌的生长和代谢可能会改变产品的成分、结构和性能，导致产品质量下降，不符合标准要求。
2、影响生产效率杂菌的存在可能会消耗营养物质，干扰正常的生产过程，从而降低生产效率，增加生产成本。
3、引发安全问题某些杂菌可能会产生毒素或有害物质，对人体健康造成威胁。
在食品、药品等行业，杂菌污染更是可能引发严重的安全事故。
三、防止杂菌污染的基本原则（一）清洁卫生保持生产环境、设备、器具等的清洁是防止杂菌污染的基础。
定期进行清洁、消毒，去除污垢和微生物滋生的条件。
（二）无菌操作在涉及微生物培养、药品生产等对无菌要求较高的操作中，必须严格遵循无菌操作规范，如使用无菌器具、在无菌环境中操作等。
（三）控制污染源对可能的污染源进行有效控制，如对原材料进行严格检测和处理，加强人员培训和管理，确保操作规范。
（四）监测与检测建立有效的监测和检测机制，及时发现杂菌污染的迹象，采取措施进行处理，防止污染扩散。
四、防止杂菌污染的具体技术（一）环境控制技术1、空气净化采用高效空气过滤器（HEPA）等设备，对进入生产区域的空气进行过滤，去除空气中的微生物。
食用菌杂菌污染及预防
食用菌杂菌污染及预防在食用菌生产过程中任何一个环节的某一点上，不注意清洁卫生及灭菌治虫工作，就会遭受病虫的危害。
造成减产，甚至全功尽弃。
因此，搞食用菌生产，杂菌防治是非常重要的一环。
防治方针应“以防为主，防重于治”。
1、原料带杂菌及预防食用菌的原料，通常为工农业生产的副产品和部分饲料，其营养丰富，适合各种微生物的生长。
如果原料保管不善，受潮后更有利于微生物的繁殖。
采用这些原料，虽经灭菌，因无高压灭菌设备或操作中疏忽，仍不能彻底灭菌，往往出现原料带杂菌。
预防措施：1、要用新鲜干燥，未生过霉的原料。
2、使用前在阳光下摊晒2天，晒死部分杂菌。
3、生料栽培的平菇、凤尾菇、草菇，在料中（以干料重计）加入0.1%的50%可湿性多菌灵拌料，可以抑制或杀死料中大部分半知菌纲的杂菌；草菇用的原料用2%的石炭酸水浸泡12－24小时，也可杀死大部分小杂菌。
蘑菇用的原料要充分发酵产生70℃以上的高温，也可杀死料中大部分杂菌及虫卵。
熟料栽培的黑木耳、银耳、香菇、金针菇及猴头等，高压灭菌，料放在灭菌锅中（不能堆放，放时瓶与瓶，或袋与袋之间要有一定的空隙），使其受热均匀，达到灭菌彻底。
其次，高压灭菌时锅中的冷空气要排尽。
常压灭菌，连续蒸6小时，往往没有间歇灭菌效果好。
间歇灭菌法是：上气后，蒸3小时，停48小时（夏秋季把料拿出放在自然温度下停放，秋冬季料仍留锅中停放），再上锅蒸3小时。
2、培养基带杂菌及预防母种、原种及栽培种的培养基往往灭菌不彻底，几天后，培养基表面和内部同时发生杂菌，而且污染率很大。
要使培养基不带杂菌，高压蒸气灭菌时，冷空气一定要排尽，蒸气压力及时间要达到要求；常压蒸气灭菌，计算时间须从培养基已达100℃时算起，并要保持锅内水始终沸腾。
3、菌种带杂菌与预防母种、原种及栽培种均可带有杂菌，用于扩大培养或生产会加重污染，其表现是从接种块上首先发生杂菌，所以要严格挑选不带杂菌的菌种。
各种菌种的颜色是：母种全斜面为整齐的白色菌丝，若有其他颜色或菌丝之间有空隙，则表示污染了杂菌，这种母种不能用来扩大原种。
《防止杂菌污染的技术》 讲义
《防止杂菌污染的技术》讲义在生物、食品、医药等众多领域中，防止杂菌污染是至关重要的一项工作。
杂菌的污染不仅会影响产品的质量和产量，还可能对人体健康造成威胁。
因此，掌握有效的防止杂菌污染的技术是保障生产安全和产品质量的关键。
一、杂菌污染的来源要有效地防止杂菌污染，首先需要了解杂菌的来源。
杂菌主要来源于以下几个方面：1、空气空气中存在着大量的微生物，如细菌、真菌孢子等。
在生产过程中，如果空气未经有效的过滤和净化处理，这些微生物就有可能进入生产环境，造成污染。
2、原材料原材料可能携带各种微生物。
例如，在食品生产中，未经过严格筛选和处理的原料可能含有杂菌。
3、人员操作人员是杂菌污染的一个重要来源。
人体表面、呼吸道和消化道都存在着微生物。
如果操作人员不遵守卫生规范，如不洗手、不穿戴合适的工作服和帽子等，就容易将杂菌带入生产区域。
4、设备和器具生产设备和器具如果没有进行彻底的清洁和消毒，残留的微生物就可能在后续的生产中繁殖并造成污染。
5、水生产过程中使用的水如果未经处理或处理不当，也可能含有杂菌。
二、防止杂菌污染的技术措施1、环境控制（1）净化空气安装高效空气过滤器（HEPA）可以有效地去除空气中的微生物。
同时，保持生产区域的正压，防止外界未经过滤的空气进入。
（2）清洁和消毒生产环境定期对生产车间的地面、墙壁、天花板等进行清洁和消毒。
常用的消毒剂有含氯消毒剂、过氧化氢等。
消毒的频率和方法应根据生产的产品和环境的污染情况来确定。
2、原材料的处理（1）严格筛选原材料确保原材料的质量，选择无污染、无变质的原料。
（2）原材料的预处理对于一些容易携带杂菌的原材料，如农产品，在使用前应进行清洗、消毒或灭菌处理。
3、人员卫生管理（1）培训对操作人员进行卫生知识培训，使其了解杂菌污染的危害和预防措施。
（2）个人卫生要求操作人员保持良好的个人卫生习惯，如勤洗手、戴口罩、帽子和手套等。
（3）健康检查定期对操作人员进行健康检查，防止患有传染病的人员进入生产区域。
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1.4黄曲霉 • 黄曲霉菌群对黑曲霉发酵的危害很大. 无论在深层发酵还是表面发酵中,黄曲霉孢 子的发芽都比黑曲霉快,如果感染的黄曲霉 孢子量不太大,黑曲霉仍能正常发育,细菌 的污染和黄血盐的存在可削弱黑曲霉对黄 曲霉的抗性.
1、污染不同种类和性质的微生物的影响
（1）污染噬菌体 噬菌体的感染力很强，传播蔓延迅速，也较防治， 噬菌体的感染力很强，传播蔓延迅速，也较防治，故 危害极大。污染噬菌体后， 危害极大。污染噬菌体后，可使发酵产量大幅度下 严重的造成断种，被迫停产。 降，严重的造成断种，被迫停产 （2）污染其它杂菌 有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫， 有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫，即使添加消泡 剂也无法控制逃液，影响发酵过程的通气搅拌。 剂也无法控制逃液，影响发酵过程的通气搅拌。有的杂菌 会使发酵液发臭、发酸，致使pH下降， pH下降 会使发酵液发臭、发酸，致使pH下降，使不耐酸的产品破 特别是染芽孢杆菌，由于芽孢耐热，不易杀死， 坏。特别是染芽孢杆菌，由于芽孢耐热，不易杀死，往往 一次染菌后会反复染菌。 一次染菌后会反复染菌。
（3）发酵中期染菌
发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大量产酸， 发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大量产酸， 培养液pH下降； pH下降 氮消耗快，发酵液发粘，菌丝自溶， 培养液pH下降；糖、氮消耗快，发酵液发粘，菌丝自溶， 产物分泌减少或停止，有时甚至会使已产生的产物分解。 产物分泌减少或停止，有时甚至会使已产生的产物分解。 有时也会使发酵液发臭，产生大量泡沫。 有时也会使发酵液发臭，产生大量泡沫。 降温培养，减少补料，密切注意代谢变化情况。 措施 降温培养，减少补料，密切注意代谢变化情况。 如果发酵单位到达一定水平可以提前放罐， 如果发酵单位到达一定水平可以提前放罐，或者抗生素 生产中可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐， 生产中可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐，抑 制杂菌。 制杂菌。
（4）灭菌不彻底
发酵罐、培养基配制罐等设备的清洗质量 发酵罐、培养基配制罐等设备的清洗质量——有无灭菌的死 有无灭菌的死 对减少或避免染菌仍然是十分必要的。 角，对减少或避免染菌仍然是十分必要的。
（二）染菌的防止
1、防止种子带菌
制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制。 制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制。 沙土制备时要多次间歇灭菌 注意接种时的无菌操作 子瓶、 子瓶、母瓶的移种和培养 无菌室和摇床间都要保持清洁。 无菌室和摇床间都要保持清洁。无菌室内要供给恒温恒 湿的无菌空气，还要装紫外灯用以灭菌， 湿的无菌空气，还要装紫外灯用以灭菌，或用化学药品 灭菌。 灭菌。
（三）柠檬酸发酵污染菌及其防治
对柠檬酸发酵有害的微生物有细菌，酵母和霉菌 的某些种类，常见的污染菌有大肠菌群、芽孢杆 菌、假丝酵母、青霉和曲霉中的一些种类。
1.1大肠杆菌 大肠杆菌并不能利用柠檬酸,但是柠檬酸发酵中的拮抗菌, 它在20～40℃范围内快速繁殖,代谢能力强,消耗糖等生成乙酸、 乳酸、乙醇二氧化碳等,还原硝酸盐为亚硝酸盐,其中挥发酸和 亚硝酸盐对黑曲霉有毒性,大肠杆菌的繁殖能完全抑制黑曲霉 的生长,大幅度降低柠檬酸产率.大肠菌群的其他一些菌也能导 致污染,它们都能使培养液颜色加深,甚至发生褐化,产生特殊 臭味.
2、不同时间染菌对发酵的影响
污染时间是指用无菌检测方法确准的污染时间， 污染时间是指用无菌检测方法确准的污染时间，不是杂 菌窜入培养液的时间。杂菌进入培养液后， 菌窜入培养液的时间。杂菌进入培养液后，需有足够的 生长、繁殖的时间才能显现出来， 生长、繁殖的时间才能显现出来，显现的时间又与污染 菌量有关。污染的菌量多，显现染菌所需的时间就短， 菌量有关。污染的菌量多，显现染菌所需的时间就短， 污染菌量少，显现染菌的时间就长。 污染菌量少，显现染菌的时间就长。
四、发酵染菌及防治
（一）染菌的影响
发酵过程污染杂菌，会严重的影响生产。 发酵过程污染杂菌，会严重的影响生产。 造成大量原材料的浪费，在经济上造成巨大损失 造成大量原材料的浪费， 扰乱生产秩序，破坏生产计划。 扰乱生产秩序，破坏生产计划。 影响产品外观及内在质量
染菌对发酵产率、提取收得率、产品质量和三废治理等都 有很大影响。然而，生产不同品种，污染不同种类和性质的 杂菌，不同的污染时间，不同的污染途径、污染程度，不同 培养基和培养条件，所产生后果是不同的。 从国内外目前的报道来看，在现有的科学技术条件下要做 到完全不染菌是不可能的。目前要做的是要提高生产技术水 平，尽可能防止发酵染菌的发生，而且一旦发生染菌，要能 尽快找出其污染的原因，并采取相应的有效措施，把发酵染 菌造成的损失降低到最小。
（2）发酵染菌对提炼的影响
染菌发酵液中含有比正常发酵液更多的水溶性蛋白和其它 杂质。采用有机溶剂萃取的提炼工艺， 极易发生乳化， 杂质。采用有机溶剂萃取的提炼工艺，则极易发生乳化， 很难使水相和溶剂相分离，影响进一步提纯。 很难使水相和溶剂相分离，影响进一步提纯。采用直接用 离子交换树脂的提取工艺， 离子交换树脂的提取工艺，染菌后大量杂菌黏附在离子交 换树脂表面，或被离子交换树脂吸附，大大降低离子交换 换树脂表面，或被离子交换树脂吸附，大大降低离子交换 树脂的交换容量，而且有的杂菌很难用水冲洗干净， 树脂的交换容量，而且有的杂菌很难用水冲洗干净，洗脱 时与产物一起进入洗脱液，影响进一步提纯。 时与产物一起进入洗脱液，影响进一步提纯。
3、防止培养基灭菌不彻底
培养基灭菌方法——高压蒸汽灭菌 高压蒸汽灭菌 培养基灭菌方法 分批灭菌 连续灭菌 钟 30分钟 1210C，30分钟 罐温125－ 30－45分 罐温125－1300C，30－45分 125
4、防止空气引起的染菌 空气过滤除菌设备流程
粗过滤
空压机
储罐
二级冷却
加热器
空气过滤
（1）种子培养期染菌 ）
由于接种量较小，生产菌生长一开始不占优势， 由于接种量较小，生产菌生长一开始不占优势， 因而它防御杂菌能力低，容易污染杂菌。 因而它防御杂菌能力低，容易污染杂菌。如在 此阶段染菌，应将培养液全部废弃。 此阶段染菌，应将培养液全部废弃。
（2）发酵前期染菌
发酵前期最易染菌，且危害最大。 发酵前期最易染菌，且危害最大。 发酵前期菌量不很多，与杂菌没有竞争优势； 发酵前期菌量不很多，与杂菌没有竞争优势；且还未合 成产物或产生很少，抵御杂菌能力弱。 成产物或产生很少，抵御杂菌能力弱。 在这个时期要特别警惕以制止染菌的发生。 在这个时期要特别警惕以制止染菌的发生。 可以用降低培养温度，调整补料量， 染菌措施 ：可以用降低培养温度，调整补料量，用酸碱 pH值 缩短培养周期等措施予以补救。如果前期染菌， 调pH值，缩短培养周期等措施予以补救。如果前期染菌， 且培养基养料消耗不多，可以重新灭菌，补加一些营养， 且培养基养料消耗不多，可以重新灭菌，补加一些营养， 重新接种再用。 重新接种再用。
（五）染噬菌体的防治 1、染噬菌体对发酵的影响 、
发酵过程中如果受噬菌体的侵染，一般发生溶菌， 发酵过程中如果受噬菌体的侵染，一般发生溶菌， 随之出现发酵迟缓或停止，而且受噬菌体感染后， 随之出现发酵迟缓或停止，而且受噬菌体感染后， 往往会反复连续感染，使生产无法进行， 往往会反复连续感染，使生产无法进行，甚至使 种子全部丧失。 种子全部丧失。
4、造成染菌的主要原因总结 、 （1）设备渗漏
设备渗漏包括夹套穿孔、盘管穿孔、接种管穿孔、 设备渗漏包括夹套穿孔、盘管穿孔、接种管穿孔、阀门渗 漏、搅拌轴渗漏、罐盖漏和其它设备漏等。所以说加强设 搅拌轴渗漏、罐盖漏和其它设备漏等。 备本身及附属零部件的严密度检查， 备本身及附属零部件的严密度检查，对制服染菌是极其主 要的，也是重要的。 要的，也是重要的。
3、发酵染菌对提炼和产品质量的影响 、 （1）发酵染菌对过滤的影响
染菌的发酵液一般发粘，菌体大多数自溶， 染菌的发酵液一般发粘，菌体大多数自溶，所以在发酵 液过滤时不能或很难形成滤饼，导致过滤困难。 液过滤时不能或很难形成滤饼，导致过滤困难。即使采 取加热、冷却、添加助滤剂等措施，使部分蛋白质凝聚， 取加热、冷却、添加助滤剂等措施，使部分蛋白质凝聚， 但效果并不理想。 但效果并不理想。
3、霉菌污染的挽救措施 在未进入产酸期以前污染霉菌应该重新灭菌,进入产酸期后 如果发现黄曲霉,可以加入一部分成熟发酵液使迅速下降,使 黄曲霉自溶,在晚期发现霉菌污染可能是青霉污染,可以用 20～40mg/L黄血盐或80～100mg/L硫酸铜拟制青霉生长,如果 残糖已降低很低,可以加快通风使糖耗完,提前升温,放罐.
染噬菌体表现为： 染噬菌体表现为： （1）1镜检可发现菌体数量明显减少，菌体不规则，严重 镜检可发现菌体数量明显减少，菌体不规则， 时完全看不到菌体，且是在短时间内菌体自溶。 时完全看不到菌体，且是在短时间内菌体自溶。 （2）发酵pH值逐渐上升，4~8小时之内可达8.0以上，不 发酵pH值逐渐上升，4~8小时之内可达8.0以上， pH值逐渐上升 小时之内可达8.0以上 再下降。 再下降。 (3)发酵液残糖高，有刺激臭味，粘度大，泡沫多。 (3)发酵液残糖高，有刺激臭味，粘度大，泡沫多。 发酵液残糖高 (4)生产量甚少或增长缓慢或停止 (4)生产量甚少或增长缓慢或停止 有无染噬菌体， 有无染噬菌体，根本的要做噬菌斑检验
1.2枯草芽孢杆菌 • 该菌最适合生长PH5.5,最适合温度37～40℃,本 菌的芽孢耐热能力强,在生产培养基中要杀死该菌 的芽孢至少要在121℃维持10～15min.该菌在培养 基中的代谢能力强,能产生2,3-丁二醇,3-羟基丁 酮,二氧化碳等副产物,尤其在不同条件下能产生 各种色素,使发酵液变褐,也能产生不同的气味.
（四）杂菌污染的挽救措施
1、细菌污染的挽救措施 污染柠檬酸发酵的细菌多数情况下是杆菌,偶尔是球 菌.杆菌在高酸性条件下会自溶,而球菌危害较大.如 果在接近产酸期发现杆菌,可以家大通分量使PH加速 下降,一般PH下降到3以下就可以拟制杆菌,如果通分 后还不能使PH下降,可以加酸调节,在更早时发现染 菌应该用药物防治或重新杀菌接种.