实验一培养基的配制.ppt

2、pH的调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛 肉膏蛋白胨培养基的配制。 121℃灭菌20-30min。
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3、马丁氏培养基的配制
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马丁氏培养基的配制
配方：
KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，琼脂 15-20g，水 1000ml，pH 自然
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各组任务
第一、二组配制牛肉膏蛋白胨培养基各400mL 第三、四组配制高氏I号培养基各500mL 第五、六组配制马丁氏培养基各400mL
水均为自来水
每组分装10支试管，其余装三角瓶，马丁氏 培养基100ml/每三角瓶。
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每组任务
1ml吸管5支，用报纸包好 试管4支，每支装4.5ml水，加塞，外加报纸 10个培养皿，用报纸包好 一个三角瓶，装99毫升的自来水，放玻璃珠，加塞，
目的：学习和掌握配制培养基的一般方 法和步骤
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二、操作步骤 1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
配方：
牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g， 水1000ml，pH7.4-7.6。
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
外加报纸 刮铲一个，用报纸包好
实验一、培 养 基 的 配 制
实验一、培养基的制作 实验二、消毒灭菌（多种灭菌方法） 实验三、细菌观察（一） 实验四、细菌观察（二） 实验五、放线菌观察（5406、紫、灰、诺卡氏等） 实验六、酵母菌观察和血球板计数 实验七、霉菌观察（青、曲、根、木等）
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实验八、土壤微生物的稀释分离、纯化 实验九、分离结果检查及平板计数，细胞大小测定 实验十、空气、水、食品中微生物的检测 实验十一、生化实验（一） 实验十二、生化实验（二） 实验十三、细菌噬菌体效价测定 实验十四、菌种保藏 实验十五、考查
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2、高氏Ⅰ号培养基的配制
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高氏Ⅰ号培养基的配制
配方：
可溶性淀粉20g，NaCl 0.5g，KNO3 1g， K2HPO4 ·3H2O 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g， FeSO4·7H2O 0.01g，琼脂15-20克， 水1000ml， pH 7.4-7.6
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
7. 灭菌： 121℃灭菌20-30min。
8.搁置斜面： 将灭菌的试管培养基冷至50℃左右（以防斜面上冷凝水 太 多），将试管口端搁在合适高度的器具上，搁置的斜面长 度以不超过试管总长的一半为宜。
9.无菌检查 ： 放入37℃的温室中培养24-48h，以检查灭菌是否彻底。
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实验报告
(统一用A4实验报告纸,手写)
一、目的要求 二、原理 三、器材 四、操作步骤 五、结果
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内容： 1.牛肉膏蛋白胨培养基（细菌） 2.高氏1号培养基（放线菌） 3.马丁氏培养基（分离土壤真菌）
附录Ⅱ P214
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一、实验目的ห้องสมุดไป่ตู้
1. 称量
按配方称取各种药品放入大烧杯。
牛肉膏用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中 称量，用热水熔化后倒入烧杯,也可放在称量 纸上, 称量后直接放入水中，这时若稍微加热, 牛肉膏便会与称量纸分离，然后取出纸片。
蛋白胨很容易吸湿，在称取时动作要迅速。
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
2 . 熔化
1mol/L HCl ，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其 pH，直至pH达到所需范围。
注意： pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内 各离子的浓度。
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
4.分装 分装试管，其装量不超过管高的1/5;分装三角
瓶的量以不超过三角瓶容积的一半为宜。
注意：分装过程中，注意不要使培养基沾在管（瓶） 口上，以免沾污棉塞而引起污染。
2、分装、 加塞、包扎、灭菌检查与牛肉膏蛋白胨培 养基相同。

115℃灭菌30min。
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马丁氏培养基的配制
3、链霉素的加入
将链霉素配成1%的溶液，在100ml培养基中加1%链 霉素液0.3ml，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
注意：链霉素受热容易分解，所以临用前，将培养基 熔化后待温度降至45-50℃时才能加入。
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
5. 加塞
培养基分装完毕后，在试管或三角瓶上塞上 棉塞（或泡沫塑料塞及试管帽等），以阻止外 界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有 良好的通气性能。
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
6. 包扎
加塞后，再在棉塞外包一层牛皮纸或报纸，以 防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道棉绳 或橡皮筋扎好。用记号笔注明培养基名称、班级、 组别、配制日期。
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高氏Ⅰ号培养基的配制
1、称量和溶化
先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少 量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的 沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化，然 后再称取其他各成分依次逐一溶化。待所有药品 完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
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高氏Ⅰ号培养基的配制
在烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻棒 搅匀，加热熔化，最后补足所损失的水分。
注意：在琼脂熔化过程中，需不断搅拌，以防琼 脂烧焦糊底。
配制培养基时，不可用铜或铁锅加热熔化， 以免离子进入培养基中，影响细菌生长。
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
3. 调pH 用滴管向培养基中逐滴加入 1mol/L NaOH 或
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马丁氏培养基的配制
1、称量和溶化
准确称取各成分，并将各成分依次溶化在少于 所需要的水量中。将各成分完全溶化后，补足水 分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的溶液，在 1000ml培养基中加入1%的孟加拉红溶液3.3ml，混 匀后，加入琼脂加热溶化。
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马丁氏培养基的配制