悬浮培养与传统工艺两种方法制备猪口蹄疫疫苗的质量比较
悬浮培养生产口蹄疫病毒灭活工艺研究
悬 浮培养 生产 口蹄疫 病毒 灭 活安全 性 及灭 活 效 果 ，
同时研究 摸索 了新 的灭活 工艺 。
１ 材 料
工艺 是近 年来 我 公 司在 国内 率先 研 发 和 成 功 应 用 的全 新技 术体 系 。细胞 经 悬 浮培 养 、 毒 收 获 ， 接 获
悬 浮灭 活疫苗 生 产 过 程 中的灭 活工 艺 而 言 是 一 种 挑 战 一］ 。本 实 验 考 察 和 验 证 了现行 灭 活 工 艺 对
为关 键 的环 节之 一 ， 灭 活 工 艺 的科 学 、 理 直 接 其 合 影 响到产 品安 全 性 和效 价 ＿ ２。 口蹄 疫 病 毒 灭 活 １１ － 方法 很多 ， 目前 国内外 普 遍 采用 的是 将 ２一溴 乙 而 胺氢溴 酸盐 （ ２一ｂｏ ｅｈｌ ｒｍｏｔｙ ａ—ｍｉｅｙ ｒｂｏ ｉｅ ｎｈ ｄｏ ｒｍ ｄ ， Ｂ Ａ） Ｅ 经环化 制成 二 乙烯 亚胺 （ Ｅ ） Ｂ Ｉ 后加 人 口蹄 疫 病毒 液 内进 行 灭 活 。 。但 不 同产 品 、 同 厂 家 不
２ ２ ３ 二 乙烯 亚胺 一甲醛 （ Ｅ —Ｆ 联 合 灭 活 ．． Ｂ Ｉ Ａ）
当病毒 液 温 度 升 至 （０±１ ℃ 时 ， 别 按 ０ ０ ％ 、 ３ ） 分 ．６ １ 比例加 入 甲醛 溶 液及 ０ ２ｍｏ ＬＢ Ｉ使 其 Ｂ Ｉ ％ ． ｌ Ｅ ， ／ Ｅ 终 浓度 为 ２ ｍ ｏ Ｌ ｍ ｔ 。混 匀 并 倒 瓶 后 待 温 度 升 至 ／
口蹄疫 病 毒 灭 活 是 口蹄 疫 灭 活 疫 苗 生 产 中最
得 的 口蹄疫 病 毒 液 不 仅 含有 高浓 度 的 口蹄 疫 完 整 病毒 颗粒 （４ Ｓ ， 时也 含 有 大量 细 胞碎 片 、 １６ ） 同 口蹄 疫病 毒非 结构蛋 白等 非抗 原性 蛋 白物 质 ， 口蹄 疫 对
如何正确评价口蹄疫疫苗效力
一、口蹄疫疫苗口蹄疫疫苗是由强毒接种悬浮培养BHK-21细胞，收获细胞毒液，经二乙烯亚胺(BEI)灭活，与油佐剂混合乳化制成的灭活疫苗，同时灭活疫苗是目前我国用于预防口蹄疫的主要产品。
二、疫苗制苗毒株口蹄疫病毒抗原性多变，各血清型间无交叉免疫性。
同一型内又存在多种不同毒株，它们之间也有明显的抗原差异，有的能够提供部分交叉保护，有的完全不能。
目前，国际上普遍采用细胞中和试验或ELISA方法计算r值，以此反映毒株间的抗原关系。
r值愈接近1，毒株间抗原关系愈靠近；反之，抗原关系疏远，毒株差异较大。
r值是反映了一个毒株的抗血清对另一个毒株抗原的交叉反应程度。
通过我国口蹄疫流行变化来看，病毒往往发生变异之后，原有的疫苗株对新的流行毒株没有保护或保护力下降。
因此，所选疫苗毒株必须与流行毒株在抗原特性上相互匹配，免疫才能有较好的效果。
三、口蹄疫疫苗146S口蹄疫疫苗146S，即完整的病毒颗粒，口蹄疫完整病毒颗粒和组装体在蔗糖密度梯度中的沉降系数有所不同。
完整病毒粒子的沉降系数为146S，无核酸的空衣壳沉降系数为75S，由VP0、VP1和VP3各5 个分子组成的五聚体沉降系数为12S，由VP0、VP1和VP3各一分子组成的单体沉降系数为5S。
完整的病毒颗粒以及降解产物空衣壳（75S）可引起较好的免疫保护效力，对于体液免疫，尽管12S和5S结构蛋白免疫原性较弱，但两者仍具有细胞免疫和免疫增强的作用，可提高免疫应答水平[1]。
根据146S的生化特性，现阶段可采用蔗糖密度梯度离心法、单克隆抗体夹心ELISA定量法、分子排阻色谱法、蛋白层析法等方法测定口蹄疫病毒抗原含量，但目前还没有能够检测刺激机体产生抗体的75S含量的方法，同时国家对口蹄疫疫苗146S的含量以及检测方法均没有相关标准和要求，不同企业、不同检测机构使用的检测方法不同，检测结果也会有差异，虽口蹄疫灭活疫苗以体液免疫为主，但细胞免疫水平也是衡量疫苗免疫效力的重要指标，所以检测146S含量不能完全体现疫苗的免疫效力。
悬浮培养生产口蹄疫病毒灭活工艺研究
当病毒液温 度升 至（ ±ｌ℃时 按 ２％ 的 比例 加 入 已 环 化 ２ ６ ｆ １
，
ｌ材料
１ ． １病毒液
好的 ． ｏＬ Ｅ，其ＢＩ浓度为 Ｍ 混匀并 ０ １ Ｉ ２ ／Ｂ 使 Ｅ终 ｍ ４ 。 ｍ 倒瓶后 待温度
升至（ ±１ｏ时开始计时 ， ２ ６ ）Ｃ 灭活２ ｈ ８。
通过生物反应器悬浮培养生产的猪 口蹄疫Ｏ Ｋ９ 毒株 细 ２ ． Ｂ 卜一Ａ 型Ｚ ／３ ．３ Ｅ Ｆ 联合灭活 ２ 胞毒液ｊ 批 ， ＝ 批号分别为 ： １０ ９ Ｍ １ ０ １Ｍ １０ ５ 由 口蹄 三 Ｍ０ ４ ０ 、 Ｏ ４ １ 、 ０ ４ １ ， 疫车间接毒班生产提供 。 １ ＿ ２灭活剂 胺氢溴酸盐（Ｅ １ Ｂ Ａ后置于３ 水浴进行环化 ， ０ ｎ ７ 每１ 摇匀一次 ， ｍｉ 作用后即可获得０ ｍｏＩ ． Ｙ ２ ￣
．．
７． ４ ．
阅 考 学 憾占 外技一 禽
乔亮明 ， 董永明， 熊德 晶 （ 金宇保灵生物药品有限公 司， 内蒙古 呼和浩特 ０ ０ ３） １０ ０
摘 要 ： 采用单 独使 用Ｂ Ｉ 活剂３） Ｅ灭 （ ℃灭 活、 单独使 用Ｂ Ｉ Ｅ％活剂２ ℃ 灭活及Ｂ ＩＦ 联合 灭活等 三种方 法对猪 口 疫０型Ｚ ／３ ＇ ６ Ｅ— Ａ 蹄 Ｋ ９
２４ 灭 活后 检 验 ． ２ １１６ 抗 原含 量 测 定 ４． ４ Ｓ
以０ Ｎ ￣０ ． （［． ２ １ ８％浓度）ａ Ｈ为溶剂 ， ＮＯ 按４％浓度） Ａ２ 溴乙 ２ 灭活 阻断 ￣ 一 Ｕ ． ３
烯亚胺（ｉ） Ｂ 灭活剂 。 ｎ 过滤除菌后备 溶液进行终止灭活， 使其Ｎ ２ ２ ３ ａＳ ０ 终浓度为２％。
Ｖ蹄疫病毒灭活是 口蹄疫灭活疫苗生产 中最为关键的环节 １
口蹄疫悬浮灭活疫苗质量控制措施
［ 摘 要 ］ 结合 几年 来 的 口蹄疫 生产 质量 管理 实践 ， 对 质量控 制 的意 义及 质量 控制 的保 证 措 施 （ 原
辅料、 工 艺、 检验 等 方 面对质 量控 制措 施 ） 等方 面进 行 了综述 和探 讨 ， 为 建 立科 学合理 的质 量控 制 措
施， 保证 产 品质 量提 供参 考 。
２ ０ １ ３ ， ４ ７ （ １ １ ） ： ６ ５～ ６ ７ ／ 武春芳 ， 等
中国兽药杂志
口蹄 疫 悬 浮 灭 活 疫 苗 质 量 控 制 措 施
武春芳 ， 韩 四娥
（金 宇保 灵 生 物 药 品有 限公 司 ， 呼和 浩 特 ０ １ ０ ０ ３ ０ ）
［ 收稿 日期 ］２ ０ １ ３— ０ ７—１ ０ ［ 文献标 识码］ Ａ ［ 文章编 号］ １ ０ ０ ２—１ ２ ８ ０【 ２ ０ １ ３ ）１ １—０ ０ ６ ５— ０ ３ ［ 中图分类号 ］ ￥ ８ ５ ９ ． ７ ９ ７
疫 的 防控 是 一个 系 统 工程 ， 高效 、 安 全 的疫 苗 是 防 止 口蹄疫 疫 情 发 生 的最 有 效 方 法 之 一 。我 国 多 年 来 一 直采 取转 瓶 培养方 式 生 产 口蹄 疫 ， 该生 产 方 式 存在污染率高、 收获率低等问题 ， 对 疫 苗 质 量 的 控 制 存在 一定 的 困 难 。从 ２ ０ ０ ９年 开 始 ， 国 内部 分 口
ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ａ ｎ ｄ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｓ（ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｍ ｓ ｏ ｆ ｒ ａ ｗ ｍ ａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ｓ ， ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ， ｉ ｎ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ）ｗ ｅ ｒ ｅ
口蹄疫疫苗生产工艺
口蹄疫疫苗生产工艺口蹄疫是一种由口蹄疫病毒引起的疾病，主要感染偶蹄类动物，如牛、猪、羊等。
为了控制口蹄疫的传播，研发和生产口蹄疫疫苗是非常重要的。
下面将介绍口蹄疫疫苗的生产工艺。
首先，疫苗生产需要进行病毒的分离和培养。
一般来说，选择已经患有口蹄疫的动物组织，如牛或猪的皮肉、淋巴结等，进行样本的采集。
然后将这些样本带回实验室，将其分离出病毒。
分离病毒的方法可以采用组织块悬液法或传代培养法。
目的是获得病毒棉絮，作为后续工艺的原料。
接下来，需要进行病毒的增殖和提取。
首先，将分离得到的病毒棉絮在合适的细胞培养基中进行增殖。
常用的培养基有鸡胚培养基或绵羊胚。
在培养基中，将病毒棉絮接种在适当的培养基中，然后放入恒温箱中，使其细胞增殖。
待细胞增殖到一定的数量后，将细胞和培养基一起收集。
然后通过超离心来获得病毒上清液，即病毒提取物。
病毒提取物需要进行纯化和灭活。
为了提高疫苗的纯度和活性，病毒提取物通常需要进行纯化。
常见的纯化方法是通过离心、膠層慢速流式濃縮等技术。
然后，通过添加适当的灭活剂，如甲酸和硫酸酚，对病毒进行灭活。
这是为了防止疫苗使用后引起病毒感染。
纯化和灭活后，疫苗还需要进行包装。
包装方法主要有液态包装和冻干包装。
液态包装是将病毒提取物注入适当容器中，如小瓶或针筒。
冻干包装则是将病毒提取物在低温下冻结，并通过真空将水分从中去除，最终得到冻干疫苗。
冻干疫苗可以延长其保存时间和增强稳定性。
最后，疫苗需要进行质量检验和包装。
对疫苗进行质量检验是为了保证疫苗的安全性和有效性。
包装是为了便于运输和使用。
常见的包装方法有玻璃瓶封装、塑料瓶封装和针筒封装等。
总结起来，口蹄疫疫苗的生产工艺包括病毒的分离和培养、病毒的增殖和提取、病毒的纯化和灭活、疫苗的包装和质量检验等环节。
每个环节都需要严格控制和操作，确保疫苗的质量和安全性。
只有通过科学的生产工艺，我们才能生产出高质量的口蹄疫疫苗，为控制口蹄疫的传播做出贡献。
不同毒株制备的两种猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果对比试验
中图 分 类 号 ：￥ ８ ５ ５ ． ３ 文 献标 识 码 ：Ａ 文章 编号 ： １ ０ ０ ５ － ８ ５ ６ ７ （ ２ ０ ｌ ５ ） ０ ３ － ０ ０ ２ ３ — ０ ３
摘 要 ：本试验采用 ２ 种不同毒株的 口蹄疫灭活疫苗分别对 １ ２ ０头 ３ ５日 龄仔猪进行 了免疫效果试验 。结果 显示：首次免疫时，猪 口蹄疫 ０ 型灭活疫苗 （ Ｏ ／ Ｍ Ｙ Ａ ９ ８ ／ Ｂ Ｙ ／ ２ ０ １ Ｏ 株）免疫组的抗体合格率和疫苗稳 定性均优 于 使用猪 口蹄疫 Ｏ 型 灭活疫苗 （ Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３ 株＋ Ｏ Ｒ ／ ８ ０ 株） 免疫组 。７ ５日龄 二免 时，使用猪 口蹄疫 Ｏ型灭活疫 苗 （ Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株 ＋ ０ Ｒ ／ ８ ０株 ） 免 疫 组 的 抗 体 合 格 率 和 疫 苗 稳 定 性 均 优 于 使 用 猪 口蹄 疫 Ｏ型 灭 活 疫 苗
烈性 传染 病 口 ］ 。 由于 口蹄 疫病 毒 的高度 变 异性 和 对 不 同动 物 的适 应 性 ，在 流 行 中 出现 新 的特 点 ； Ｆ Ｍ Ｄ Ｖ在 动 物体 内和 细 胞 中长 期存 在 ， 引发 持续 感 染。 使 本病得 不 到有 效控制 ， 在许 多国家和 地 区重
Ｉ Ｉ 苗： 猪 口蹄 疫 ０型 灭活 疫 苗 （ Ｏ ／ Ｍ Ｙ Ａ ９ ８ ／ Ｂ Ｙ ／ ２ ０ １ ０株） ， 国内某 公司 产 品，规 格 ： ｌ Ｏ Ｏ ｍ Ｌ ／瓶 ， 批
广 东畜牧兽 医科技 ２ ０ １ ５ 年（ 第４ ｏ 卷） 第３ 期
猪瘟疫苗微载体悬浮培养生产工艺试验
猪瘟疫苗微载体悬浮培养生产工艺试验苏玮玮;赵攀攀;丁赫楠;张秀华;么亮;吕晓研;张树成;武华【摘要】为优化猪瘟病毒(CSFV)的BT细胞悬浮培养工艺以提高CSFV抗原含量,采用2L生物反应器对BT细胞的最佳接种密度、CSFV的最佳接种剂量进行了摸索和优化,采用优化的工艺参数,进行了BT细胞5倍消化放大工艺验证,同时对比了BT细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺增殖CSFV的差异.结果表明,在3 g/L微载体浓度下,采用1.5 ×105个/mg的细胞初始接种密度,培养72 h可获得最佳细胞密度;采用MOI(感染复数)为0.5的接种剂量可收获≥106.8 FAID50/mL的CSFV抗原;BT细胞从2L到10 L生物反应器的5倍消化放大工艺验证试验,3批细胞培养96 h均能达到4.0×106个/mL以上;悬浮培养工艺增殖的CSFV抗原含量约是转瓶培养工艺的15倍.以上试验为猪瘟疫苗的生物反应器规模化生产奠定了基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2018(054)003【总页数】4页(P108-111)【关键词】猪瘟疫苗;生物反应器;微载体;悬浮培养【作者】苏玮玮;赵攀攀;丁赫楠;张秀华;么亮;吕晓研;张树成;武华【作者单位】华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300;华威特(江苏)生物制药有限公司,江苏泰州225300【正文语种】中文【中图分类】S852.65+1猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病。
猪瘟病毒为黄病毒科瘟病毒属成员,病毒粒子呈球形,核衣壳为二十面体对称,为有囊膜的单股正链RNA病毒。
两种不同免疫方法对猪口蹄疫O型抗体的影响
１ ． １ ． ３抗 体监 测 方 法
告 的传 染病之 一，我 国规 定为一 类动物疫病 ，为 强制 免疫类疾病 。该病 不但 引起 幼畜死 亡，生产 性 能 下 降 ，而 且 严 重 影 Ⅱ 向 家 畜及 畜 产 品流 通 和 贸
１ ６ ３ ６ ０１ ８。
的一种 急性 、热 性 、高度 接触性 传染病 。除感染 猪外 ，还可感染 牛 、羊等 偶蹄动 物 。该病 传播迅
速 ， 发病 率 高 ， 是 世 界 动 物 卫 生 组 织 规 定 必 须 报
１ ． １ ． ２ 实验 动 物
某猪场 商品代三 ７ 已 长 白猪 ，品种一致 ，健康
～ 。 一 年第 。期广告
口蹄疫 疫苗 ， 根据 免疫 时间 ， ２ ８ ｄ 后 采血测 抗体 。
结果 如表 ２ ：
表 ２ 抗 体 检 测结 果
一
此 免疫 注 射对 比试验 在不 同 的时 间段 进行 ， 也 不 是 同群 猪 ，但 随 机 抽 选 的猪 体 重 、 日龄 均 是
中图分类号：￥ ８ １ ５ ． ４
文献标志码 ：Ｃ
文章编号 ：１ ０ ０ １ － ０ ７ ６ ９ （ ２ ０ ｌ ７ ） １ ｏ 一 ０ ０ ５ ０ — ０ ２
猪 ０型 口蹄 疫 是 由 ０型 口蹄 疫 病 毒 引 起 的 猪
特 金 字 保 灵 生 物 药 品 宵 限 公 司 生 产 ， 疫 苗 批 号
两 种 不 同 免 疫 方 法 对 猪 口蹄 疫
刘金玲 ，严 勇 ，张怀宜，张 伟 （ 新疆生产建设 兵 团第十二 师二二二 团畜牧 兽医工作站 ，新疆 阜康
８ ３ １ ５ ０ ０ ）
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１ ． ４ ． ３ 内毒 素 含量 测 定 按 《 中华 人 民共 和 国 兽 药典 ￣ ２ ０ １ ０版 ¨ 检验 ， 内毒 素 含量应 ￣ ＜５ ０ Ｅ Ｕ ／ ｍＬ 。
１ ． ４ ． ４ 成 品理 化性 状 检 验 外 观性 状 、 剂型 、 稳 定 性、 黏度检 验 ， 符合 检验规 程 。 １ ． ４ ． ５ 无 菌 检 验 按 《 中 华 人 民共 和 国兽 药 典 》 ２ ０ １ ０版 三部 …检 验 。 １ ． ４ ． ６ 安 全 检 验 按 猪 口蹄 疫 Ｏ 型 灭 活 疫 苗 （ Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株 ＋Ｏ Ｒ ／ ８ ０株 ） 制造及检验规程 ， 用 体 重 （ ３ ５ ０～ ４ ５ ０ ） ｇ的 豚 鼠 ２只 ， 皮下注射疫 苗 ２ ． ０ ｍ Ｌ ； 用体 重 （ （ １ ห้องสมุดไป่ตู้～ ２ ２ ） ｇ的小 鼠 ５只 ， 每 只皮下 注射 疫 苗 ０ ． ５ ｍ Ｌ 。连续 观 察 ７ ｄ ， 均 不 得 出 现 因注 射 疫 苗 引
中图 分 类 号 ： ￥ ８ ５ ８ ． ２ 文献标志码 ： Ｂ
文章编号 ： ０ ５ ２ ９ － ６ ０ ０ ５ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ２ － ０ ０ ９ ７ － ０ ３
口蹄 疫 （ Ｆ ＭＤ） 是 由 口蹄疫 病毒 （ Ｆ ＭＤ Ｖ） 引起 的
一
培养观察 ４ ８～７ ２ ｈ ， 根据 Ｃ Ｐ Ｅ产 生 情 况 按 Ｒ ｅ ｅ ｄ —
后获得 的病 毒含量 、 制备疫苗效价 都有 明显 提高， 中间产品 内毒素含 量值有大 幅降低 ， 在实际接种 动物后 ， 会 大大降低 副反
应 发生率 ， 同时疫苗 的免疫效 价以及持续期均会有所 升高。表 明 ， 悬 浮培养工艺的疫苗质量高于转瓶培养工艺 。 关键词 ： 口蹄疫 ； 疫苗； 细胞悬浮培养 ； 转 瓶培养
中国兽医杂志
２ ０ １ ７ 年（ 第５ ３ 卷） 第 ２期 ９ ７
悬 浮 培 养 与 传 统 工 艺 两 种 方 法 制备猪 Ｉ ３ ＇ 蹄 疫 疫 苗 的 质 量 比 较
贾智 丽
（ 包头轻工职业技术学院 ，内蒙占 包头 ｏ １ ４ ０ ３ ５ ） 摘要 ： 为 比较悬浮培养与转瓶培养生 产的猪 口蹄疫 疫苗 的质量 ， 通 过病毒 含量浸 ０ 定、 灭活检验 、 内毒 素 含量测定 、 成 品 理 化性状 、 无菌检验 、 安全检验 、 效力检验等方 面开展试验 ， 以比较两种工艺的优缺点。根据 试验结果得 出， 经细胞悬 浮培养
（ Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株 ＋Ｏ Ｒ ／ ８ ０株 ） 制造及检验规程 ， 灭 活 液 原样 接种 乳 鼠后 ， 观察 ７ ｄ不 得 出现 口蹄 疫 症 状 和
鼠毒经 Ｂ ＨＫ ２ ｌ细胞 传代适 应 的细胞 毒 ； 检 验用 毒种
为Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株 和 Ｏ Ｒ ／ ８ ０株 乳 鼠毒 ， 均 由 中 国农业 科 学 院兰 州兽 医研 究 所 国家 口蹄疫 参考 实 验 室 鉴 定 、
可靠 的 实验依 据 、
１ 材料 与方 法
１ ． １ 毒种
制 造 及检验 用 毒 种 为猪 口蹄疫 Ｏ型 病
毒Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株 和 Ｏ Ｒ ／ ８ ０株 。疫 苗 制 造 用 毒 种 为乳
低于 ｌ ０ ” Ｌ Ｄ 。
１ ． ４ ． ２ 灭 活 检 验 按 猪 口蹄 疫 Ｏ 型 灭 活 疫 苗
状 和 死亡 。
抗体的 ３ ０～ ４ ０ Ｅ ｌ 龄的健康 易感仔猪 ， 体重约 （ １ ８～ ２ ２ ） ｇ
健康小 鼠（ 清洁级 ） ， 体重 （ ３ ５ ｏ～ ４ ５ ０ ） ｇ豚鼠。 １ ． ３ 试剂 内毒 素 检 测 用 标 准 品 批 号 为 ２ ０ １ １ ７ ４ 、
保 管和提 供 。
１ ． ２ 动物 ２～３日龄健康 乳 鼠（ 清 洁级 ） ， 无 口蹄疫
死亡 。盲 传 乳 鼠观 察 ５ ｄ不 得 出现 口蹄 疫 症 状 和 死 亡 。将 灭 活 液 注 射 仔 猪 ２头 ， 每 头 耳 根 后 分 点
注射 共 ５ ｍ Ｉ 。仔 猪 观 察 ｌ ０ ｄ ， 不 得 出 现 口蹄 疫 症
性 在 我 国 ， 口蹄 疫属 于 一 类 动 物 传 染 病 。本 试 验 通 过对转 瓶 培 养 和 全 悬 浮 细 胞 培 养 生 产 的 猪 口蹄 疫疫 苗进 行 质量 检验 ， 来 比较 两 种 工 艺 下疫 苗 质 量
的优缺 点 ， 从 而为 口蹄 疫 疫 苗 生 产 的 升级 换 代 提 供
种动物 性 传 染 病 ， 表 现 为急 性 、 热 性 和 高 度接 触
Ｍｕ ｅ ｎ ｃ ｈ法计算 Ｔ Ｃ Ｉ Ｄ 每０ ． １ ｍ Ｌ病 毒 含量 Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３ 株应不低 于 １ ０ Ｔ Ｃ Ｉ Ｄ ∞； Ｏ Ｒ ／ ８ ０株 应 不 低 于 ｌ ０ Ｔ Ｃ Ｉ Ｄ Ｌ Ｄ ， 测定 ， 用 Ｐ Ｂ Ｓ或 细 胞 维 持 液 将 生 产 毒 液作 １ ０倍 系 列 稀 释 ， 取 １ ０～、 １ ０ ～、 ｌ ０ ３个 稀 释 度， 每个 稀释 度 颈 背 部 皮 下 接 种 ２～３ 日龄 乳 鼠 ４ 只， 每 只注 射 ０ ． ２ ｍ Ｌ 。观 察 ３～５ ｄ ， 根据 发病 死 亡 乳 鼠数按 Ｒ ｅ ｅ ｄ ． Ｍｕ ｅ ｎ ｃ ｈ法 计算 Ｌ Ｄ 每０ ． ２ ｍ Ｌ病 毒 含量 ， Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株应 不 低 于 １ ０ Ｌ Ｄ Ｏ Ｒ ／ ８ ０株 应 不
限公 司提供 ； Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测 用 Ｏ型 口蹄 疫 抗 体 液 相 阻 断检 测 试 剂盒 ， 批号为 ２ ０ １ ２ ０ ３ ｌ ６ ０ １ ， 由 中 国农 业 科 学院 兰州 兽医 研究 所提 供 。