有机酸测定
果酒有机酸含量的测定方法
果酒有机酸含量的测定方法
果酒是一种含有很高有机酸的饮品，例如苹果酒、草莓酒、葡萄
酒等，因此测定果酒的有机酸含量对于了解饮品的质量和口感有着重
要的作用。
下面就介绍一种测定果酒有机酸含量的方法。
（一）实验原理
使用碱溶液滴定果酒中的有机酸，有机酸和碱反应产生盐和水，
反应速度快，且滴定结束点明显，准确度高。
（二）实验步骤
1.称取10毫升的果酒，加入50毫升蒸馏水稀释至100毫升，混
匀待用。
2.取25毫升这个混合溶液，加入几滴酚酞指示剂，并加入
0.1mol/L的氢氧化钠溶液，搅拌均匀。
3.用0.1mol/L盐酸滴定氢氧化钠至混合液颜色变为粉红色，记
录所需的滴定计数N。
（三）计算结果
（1）计算盐酸的摩尔浓度（C）。
C=0.1mol/L（由于盐酸与氢氧化钠的滴定反应是一对一的反应，因此
盐酸的摩尔浓度与氢氧化钠的摩尔浓度相等）
（2）计算有机酸含量（m/V）。
m/V = N*C*88.01/1000
其中，N为滴定计数，C为盐酸浓度，88.01为分子量，1000为溶液的
体积（单位为毫升）。
以上就是测定果酒有机酸含量的实验步骤，需要注意的是，在实
验过程中应该保证实验器材的干净和精准，以确保实验结果的准确性。
有机酸含量的测定
有机酸含量的测定原理:有机酸大多系固体弱酸,如果它易溶于水,且符合弱酸的滴定条件(cK a ≥10-8),则可在水溶液中用标准碱溶液滴定,测得其含量。
由于反应产物为弱酸的共轭碱,滴定突跃在弱碱性范围内,故常选用酚酞作指示剂。
以草酸为例,滴定反应方程如下:H 2C 2O 4+2NaOH=Na 2C 2O 4+2H2O步骤:1、 0、1 mol ·L -1NaOH 溶液的配制台秤称取NaOH 1、0g →250mL 烧杯,加少量水搅动→溶解→加水稀释至200mL →试剂瓶,摇匀。
2、 0、1 mol ·L -1NaOH 浓度的标定准确称取0、4~0、6g 邻苯二甲酸氢钾(KHC 8H 4O 4)3份→锥形瓶→加20～30mL 水→溶解→加1~2滴0、2%酚酞→NaOH 滴定→微红色(半分钟不褪色)→终点。
记录数据:浓度:844NaOH844KHC H O KHC H O NaOHc M V =M KHC8H4O4=204、2g ·mol -1相对平均偏差:NaOH100%r dd c =⨯,而3NaOH NaOH 113i d c c ==-∑3、 有机酸含量的测定(1)准确称取草酸0、6~0、8g →100mL 烧杯→加适量水溶解→定量转入100mL 容量瓶,→用水稀释至刻度,摇匀.(2、)准确移取上述溶液25、00mL(3份)→锥形瓶→加酚酞1~2滴→NaOH 滴定→微红色(半分钟不褪色)→终点。
含量:224224NaOH NaOH H C O H C O 100%25.0021000100.0c V M w m =⨯⨯⨯M H2C2O4=90、03g ·mol -1 相对平均偏差:224H C O 100%r d d w =⨯,而2242243H C O H C O 113i d w w ==-∑。
蔬菜中有机酸含量的测定
蔬菜中有机酸含量的测定实验30果实、蔬菜中有机酸含量的测定在植物的各个器官中，普遍存在着有机酸，并在代谢中起着重要作用。
在呼吸作用中，它们是碳水化合物、脂肪、蛋白质代谢的中间产物，也是这三大类物质代谢的重要联结者。
有机酸在植物体内存在状况，随植物的不同部位有所不同。
在果实和浆果中，自由酸最多，而在叶中主要是有机酸的盐类，它们的含量因栽培条件而异。
果蔬在成熟和储藏过程中，其酸的性质与含量都发生变化。
故测定果蔬中有机酸含量，可以鉴别其品质的变化。
一、原理有机酸易溶于水、醉和谜中，可用这些溶剂先将有机酸提取出来，然后用碱液滴定，即能测定出有机酸的含量。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料苹果、梨或植物其他组织。
（二）试剂1% 酚fit试剂，0. 1 mol/L NaOH。
（三）仪器设备天平，恒温水浴，研钵，漏斗，滴定管，移液管，容量瓶，量筒，三角瓶。
三、实验步骤1.提取称取果实或蔬菜5 g放入研钵中，加少许石英砂研磨成匀浆，用少量蒸储水冲洗至50 mL三角瓶中，再加水至30 mL左右，置于80 ?水浴中浸提30min ,每隔5 min搅拌1次，取出冷却后过滤，滤液与冲洗残渣滤液合并，定容50 mL o摇匀，供测定之用。
2.测定取50 mL干洁三角瓶3只，分别装入样品提取液10 mL , 1%酚酸3滴，用0. 1 mol/L NaOH滴定至微红色，摇动1 min 不褪色即为滴定终点，记录消耗碱液的数量。
如提取液有颜色时可能干扰滴定终点，为此可在提取液中放入一块石蕊试纸，根据颜色变化来确定终点。
四、结果计算式中：W ——样品重量，g o C —— NaOH浓度，0. 1 mol/L。
K 一一换算系数:苹果酸为67 ,酒石酸为75 oV 1 ——提取时样液总量，mL oV 2 一一测定时样液用量，mL oV3——消耗NaOH液量，mL 。
有机酸摩尔质量的测定实验报告
有机酸摩尔质量的测定实验报告有机酸摩尔质量测定一、实验目的1、进一步熟悉分析天平减量称量法。
2、进一步熟悉滴定方法。
3、了解滴定误差的减免方法4、进一步掌握酸碱指示剂的使用二、实验原理大部分有机酸是弱酸,且为固体,这类物质纯度测定大都采用酸碱滴定法。
当浓度约为0.1mol•L-1时,若CKa≥10-8,即可用NaOH标准溶液滴定。
因滴定突跃在弱碱性范围内,常选用酚酞作指示剂。
滴定至终点溶液呈微红色,根据NaOH标准溶液的浓度和滴定时所消耗的体积,可计算该有机酸的摩尔质量。
相关反应过程以及计算公式如下:1、有机酸与氢氧化钠反应方程式:nNaOH+HnA Na n A+nH2O有机酸除了具有抗生素作用外，还具有其它几种作用，包括降低消化物pH和增加胰腺分泌。
有几个国家已撤消了在动物饲料中使用非治疗性抗生素的主张，饲喂低剂量促生长剂的行为在世界范围内也在迅速消失。
那些想在无药市场进行销售活动的生产者正在寻求饲料抗生素的非药物性替代物。
为了弄清什么是合适的替代物，有必要了解抗生素的作用方式。
多数数据表明，抗生素的促生长作用可以完全归于它们的抗菌活性和由此带来的生理反应。
因此，寻找替代物着重注意具有抗菌活性的天然分子物质。
最有效的候选替代物是有机酸，可以是单项酸，也可以是多项酸的混合物。
这些有机酸长期用于断奶仔猪日粮中，对仔猪的健康和生长都有积极作用。
本报告将比较抗生素和有机酸的作用，并描述一种新的有机酸，即2-羟基-4-（甲硫基）丁酸（HMB) 的活性。
HMB是一种蛋氨酸补充源，一般用于猪、禽及反刍动物饲料中。
HMB 实际是一种天然的L－蛋氨酸前体，饲喂时，从化学上是一种一元羧酸，即有机酸，直至到动物组织后被酶转化为L－蛋氨酸。
与其它具抗菌活性的有机酸一样，HMP 在低pH环境下是亲脂的，且可以以扩散的方式被吸收到脊椎动物和细菌或真菌细胞中。
一旦进入细胞，pH的变化就会引起这些弱酸的溶解。
有机酸的多重作用就是由于这种细胞内的溶解和由此引起的细胞反应。
有机酸的分析与检验——对羟基联苯比色法测定乳酸含量
有机酸的分析与检验——对羟基联苯比色法测定乳酸含量有机酸是一类含有羧基（COOH）的有机化合物，具有特殊的化学性质和广泛的应用。
有机酸的分析与检验对于实验室研究和工业生产都具有重要意义。
其中，对羟基联苯比色法可以用于测定乳酸含量。
乳酸（lactic acid）是一种常见的有机酸，是由乳酸菌在发酵过程中产生的。
乳酸广泛应用于食品工业、药品工业和医药领域。
因此，测定乳酸含量是非常重要的。
对羟基联苯比色法基于乳酸与对羟基联苯反应生成有色产物的原理进行测定。
该方法操作简便，灵敏度高，具有较高的准确性和精密度。
具体操作步骤如下：步骤一：制备标准曲线1.准备一系列乳酸浓度逐渐递增的标准溶液。
可以使用已知浓度的乳酸溶液进行稀释，或通过乳酸的溶液配制。
2.将标准溶液分别转移到不同的容量瓶中，加入定量的对羟基联苯试剂。
3.在常温环境下，利用分光光度计测量乳酸和对羟基联苯试剂反应产生的有色产物的吸光度。
4.利用所得吸光度数据绘制乳酸浓度与吸光度之间的标准曲线。
步骤二：样品处理1.取适量待测样品，用水稀释至一定体积。
2.将稀释后的样品分别转移到不同的容量瓶中。
3.各个容量瓶中加入定量的对羟基联苯试剂。
4.在常温环境下，利用分光光度计测量样品和对羟基联苯试剂反应产生的有色产物的吸光度。
步骤三：计算样品中乳酸含量1.根据标准曲线，利用所得吸光度数据计算出样品中乳酸的浓度。
2.根据样品的稀释倍数和最初样品的体积，计算出样品中乳酸的实际含量。
需要注意的是，实验过程中应该严格控制温度和时间，避免有色产物与空气中的氧气反应产生误差。
此外，对乳酸本身的特性和分子结构也需要了解，以正确操作和解读实验结果。
通过对羟基联苯比色法测定乳酸含量，可以实现对有机酸乳酸的定量分析。
这种方法具有操作简便、准确度高的特点，适用于实验室研究和工业生产过程中乳酸含量的测定。
果蔬有机酸含量测定
果蔬有机酸含量的测定植物材料中含有丰富的有机酸，如苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、草酸等。
利用酸碱滴定法测定果蔬中的可滴定酸含量，可以从风味及营养的角度衡量其品质。
重点：①碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；②邻苯二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；③有效数字的取舍及确定。
难点：滴定终点的判断及掌握。
一、实验目的1.学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择。
2.掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择。
二、实验原理1.大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka>>10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。
滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。
2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。
邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下：反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂。
邻苯二甲酸氢钾通常在105-110℃下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。
3. 在一定温度下，用蒸馏水或乙醇将植物材料中的有机酸浸提出来，用碱溶液滴定浸出液，即可计算出样品的可滴定酸含量。
果实中的有机酸含量如柑橘类可换算成柠檬酸、葡萄可换算成酒石酸，苹果类可换算成苹果酸表示。
二、仪器设备1. 天平2. 250 mL三角瓶3. 匀浆机（或研钵）4. 恒温水浴锅5. 低速离心机（或漏斗） 6. 50mL离心管（或定性滤纸）7. 碱式滴定管8. 100 mL容量瓶9.25mL移液管三、试剂1. 0.05 mol·L–1NaOH标准溶液：在天平上取约0.5g固体NaOH（可用干燥小烧杯称取），另用大量筒量取250mL去离子水（无CO2），倒少量水入装有NaOH固体的小烧杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀。
大肠发酵有机酸的测定
大肠发酵有机酸的测定大肠发酵是指大肠杆菌等肠道菌群在人体肠道中将未被小肠吸收的食物残渣进行发酵作用产生有机酸的过程。
有机酸是一类碳原子数较少的含有羧基的有机化合物，常见的有机酸包括乙酸、丙酸、丁酸等。
测定大肠发酵产生的有机酸对于评估肠道菌群功能、消化道健康以及某些疾病的诊断和治疗具有重要意义。
测定大肠发酵有机酸的方法有很多种，下面将介绍一种常用的方法。
收集被测者的粪便样本。
在收集样本前，被测者需要遵守相关的采样要求，避免将其他物质污染到样本中。
在收集样本时，可以使用专用的容器或者塑料袋，并尽量保持样本的新鲜性。
接下来，将样本进行处理。
将收集到的粪便样本均匀搅拌后，取适量的样本加入含有生理盐水或缓冲液的试管中。
接着，用离心机将样本离心，以将固体颗粒与液体分离。
离心后，取上清液进行后续的测定。
然后，利用高效液相色谱法（HPLC）进行有机酸的测定。
HPLC是一种高效、精确的分析方法，可以实现对多种有机酸的定量分析。
在进行HPLC测定前，需要准备好相应的试剂和标准品。
首先，根据需要测定的有机酸种类选择合适的色谱柱和流动相。
然后，根据标准品的浓度制备一系列浓度不同的标准曲线。
接着，将样本和标准品按照一定比例混合，并进行必要的稀释。
最后，将混合好的样品注入到HPLC系统中进行分析，通过峰面积或峰高来计算样品中有机酸的浓度。
根据测定结果进行数据分析和解读。
根据测定的有机酸浓度，可以评估大肠发酵的强度和菌群功能。
较高的有机酸浓度可能表示肠道菌群的过度生长或发酵产物的代谢紊乱，而较低的有机酸浓度可能与肠道菌群失调或功能异常有关。
因此，通过测定大肠发酵有机酸的浓度，可以为评估肠道健康和疾病诊断提供参考依据。
测定大肠发酵产生的有机酸是一种评估肠道菌群功能和消化道健康的重要方法。
通过收集样本、处理样品、利用HPLC进行分析以及数据分析和解读，可以获得有关大肠发酵有机酸的相关信息。
这些信息对于研究肠道菌群、评估肠道健康以及某些疾病的诊断和治疗具有重要意义。
[工学]食品中有机酸的分离与测定
![[工学]食品中有机酸的分离与测定](https://img.taocdn.com/s3/m/d0ab1c61b307e87101f696aa.png)
二、试剂 草酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、 延胡索酸所有溶液均用重蒸馏水配制。用 10mmol/L磷酸盐缓冲溶液配制各分析样 品浓度为0.01mol/L， 4℃下保存不超过 3d,使用之前应用分离缓冲溶液稀释到所需 浓度。电泳缓冲溶液为pH6.5的 10mmol/LPBS,其中添加溴化十六烷基溴 化吡啶0.4mmol/L和β-CD15.0mmol/L. 所有溶液在电泳之前均需要用0.25um醋酸 纤维膜过滤。
六、结果计算 将同一色谱条件下得到的样品色谱图和 有机酸标准溶液色谱图进行对照，根据色 谱峰的保留时间定性。必要时可在样液中 加入一定量的某种有机酸标准液以增加峰 高方法来进行定性。根据峰面积或峰高进 行定量，再根据样品稀释倍数即可求出样 品中各有机酸的含量。 图7-3是上述色谱条件下的桔子提取液色谱 图。
三、试剂 离了交换树脂:使用阳离了交换树脂 AmberLite(一种人工合成的酚甲醛离子交 换树脂)CG120、阴离了交换树脂 AmberLite CG4B ; AmberLite IRA410。 四、仪器 气相色谱仪:装有氢火焰离了检测器，程序 升温装置。 色谱柱:填充10%SiLicone Dc560 （6080日）的3mm X 2m不锈钢柱或玻璃柱。
五 操作方法 1 样品处理 (1) 固体样品:称取5-10g样品(视有机酸含量而 定)于加有石英砂的研钵中研碎，用25 mL80% 乙醇转移到50mL锥形瓶中，于750C水浴中加热 浸提15min，在20000r/min下离心20min,沉淀 用10mL80%乙醇洗涤两次，离心分离后，合并 上清液并定容50mL。取5mL上清液于蒸发皿中， 在75℃水浴上蒸干，残渣加5mL流动相溶解，离 心，上清液经0.45um滤膜在真空下超滤后进样。 (2)液体样品:吸取5mL样液(视有机酸含量酌情 减)于蒸发皿中，在75 ℃ 水浴上蒸干，残渣加 5mL 80%乙醇溶解，离心，上清液水浴蒸十， 残渣加5mL流动相溶解，离心，上清液经 0.45um滤膜于真空下超滤后进样。
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反相液相色法谱测定 10 种有机酸
马淑伟 郭亦如 杨定忠
（Agela Technologies 天津 300457）
摘要： 本文建立了一种利用高效液相色谱同时分析 10 种有机酸的方法， Venusil MP C18 (5μm 4.6 在
mm x 250 mm ) 色谱柱上,0.1mol/L K2HPO4(pH2.05 )溶液和乙腈做梯度洗脱,流速为 1.0mL/min,柱温为
30 ℃,紫外检测波长为 210nm 时,可以很较好地分离常见的 10 种有机酸。
关键词：反相液相色谱 有机酸
1
实验部分
1. 1 仪器与试剂
高效液相色谱系统:岛津LC-10A XMTG-8000 型柱温箱 酸度计(PHS-25) 分析纯磷酸、磷酸氢二钾(天津市化学试剂三厂)
1. 2 色谱条件
色谱柱: Venusil MP C18 (5μm,4.6mmi.d. ×250mm) 流 速:1.0mL/min
进样量:20μL 波 柱 长:210nm 温:30 ℃
流动相: 缓冲盐：13.6 克磷酸氢二甲溶解到 1000ml 水中，用磷酸调 pH=2.05，过滤； 梯度条件： 时间（min） 0 18 30 乙腈（%） 0 0 20 缓冲盐（%） 100 100 80
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2 结果与讨论 2. 1 检测波长的选定
用200～350nm (紫外) 光对10种有机酸的标准溶液进行扫描,结果表明10种有机酸均在210nm附近 有较大的吸收,重复性好,不受流动相中其他物质的干扰,故以下实验均采用210nm 波长进行检测。
2. 2 流动相浓度的选择
将流动相分别配成0.05 、0.10 、0.15 和0.20mol/L 的K2HPO4 溶液(用H3PO4 调pH 值为2.05 ) ,对 各有机酸进行分离。
结果表明: 逐步增加流动相中磷酸盐的浓度,有机酸均能得到分离,且不影响分离效 果，但考虑到色谱柱的使用寿命，最终选定0.10 mol/L.
2. 3 流动相pH 值的选择
以不同pH 值(用H3PO4 调节)的0.10mol/L的K2HPO4溶液作流动相,测定各有机酸的保留时间,结果 显示流动相pH值对有机酸的分离影响很大。
综合考虑各有机酸间的分离度和色谱柱的pH范围， 选定2.05.
2. 4 分离条件的优化
以分离的影响因素流动相pH值、乙腈含量、流速和柱温做正交试验对分离条件进行优化，最终得 到优化条件：（1）由于丁酸保留太强所以选用梯度洗脱；（2）流速选用1.0ml/min；（3）柱温为30℃；
图1
10 种有机酸图谱
1 甲酸 2 丙酮酸 3 苹果酸 4 乳酸 5 乙酸 6 柠檬酸 7 琥珀酸 8 延胡索酸 9 丙酸 10 丁酸
2. 5 检测限、标准曲线、回收率
取同一果汁样品2 份,其中一份作本底,另一份添加一定量的10种有机酸标品溶液后测定各成分含量, 每份样品进行5 次平行测定,考察方法的回收率和精密度,以峰高A (mV) 对质量浓度C(mg/L) 求得线性 回归方程,以3 倍信噪比( S/ N ) 计算最小检测出限。
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表1 有机酸 甲酸 丙酮酸 苹果酸 乳酸 乙酸 柠檬酸 琥珀酸 延胡索酸 丙酸 丁酸
10种有机酸的回归方程、回收率和检测限 回归方程 检测限（µg/mL） 1.89 0.11 0.51 0.36 1.08 0.43 1.83 0.65 0.19 0.12 回收率 98.1 99.2 100.3 96.9 99.6 98.2 100.8 101.2 97.4 100.5
C = 3. 904+0. 7499×10-4 A C=0.0142+1.603×10-5A C =-0 .2998+2.983 ×10 -4 A C = 6. 601+0. 2120 ×10-4 A C =0. 2652+0. 9513×10 - 4 A C =0 .0153+4.966 ×10 -4 A C =0 .2320+1.06 ×10 -3 A C=0.1380+1.380×10-4A C=0.0705+1.920×10-3A C=5.1213+1.01×10-4A
3 结论：
经多次实验结果证明: 采用Venusil MP C18 (5μm,4.6mmi.d. ×250mm)色谱柱, 0.1mol/L 流速1.0mL/min, 在210nm 波长下,可以较好地分离果汁中常见 K2HPO4(pH2.05 )溶液和乙腈做梯度洗脱， 的10种有机酸，该方法具有测试组分多、简便等优点,对于鉴别果汁真假、控制果汁质量具有重要的意 义。
参考文献： [1]李小平, 姚浔平, 范建中, 金米聪，果汁中9种有机酸的反相高效液相色谱法测定，中国卫生检验杂志 2008年4月第18卷第4期
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