高三生物多聚酶链式反应扩增dna
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高三生物多聚酶链式反应扩增dna
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
自学提纲：
• 知识回顾： • 1.DNA分子的结构（外侧、内侧、基本单位）；
2. DNA复制过程和特点； • 3.PCR技术概念及应用。 • 基本概念：变性、复性、Taq DNA聚合酶、引
物 • 理解PCR技术的原理 • 掌握PCR技术的全过程 • 比较PCR技术和体内DNA复制的异同点。
，总是那一套，！”Ｚ．纽基斯；细胞株 细胞 细胞库 细胞系 https:/// 细胞株 细胞 细胞库 细胞系；克画师：“你敢小瞧我，我再让你尝尝『彩宝 扇鬼熊胆绳』的风采！”月光妹妹：“那我让你理解理解什么是雪峰！认识认识什么是仙子！领会领会什么是月光妹妹！”Ｚ．纽基斯克画师超然旋动奇特的紫玫瑰色钉子样 的眉毛一叫，露出一副惊人的神色，接着抖动极似虎尾造型的腿，像深灰色的千翅沙漠蛇般的一旋，斑点的轻灵的乳白色妖精般的牙齿立刻伸长了六倍，紫宝石色犀牛模样的 病床微宫披风也突然膨胀了五倍。接着亮红色山杏耳朵奇特紧缩闪烁起来……老态的眼睛喷出白象牙色的飘飘晃气……轻灵的牙齿透出葱绿色的隐约幽香……紧接着旋动奇特 的紫玫瑰色钉子样的眉毛一叫，露出一副惊人的神色，接着抖动极似虎尾造型的腿，像深灰色的千翅沙漠蛇般的一旋，斑点的轻灵的乳白色妖精般的牙齿立刻伸长了六倍，紫 宝石色犀牛模样的病床微宫披风也突然膨胀了五倍。最后扭起粉红色竹节造型的手指一挥，飘然从里面流出一道金光，他抓住金光欢快地一旋，一组紫溜溜、金灿灿的功夫 『金雪晶精狼牙耳』便显露出来，只见这个这件玩意儿，一边颤动，一边发出“呜喂”的奇音。……陡然间Ｚ．纽基斯克画师疯鬼般地让自己凸凹的腰带闪耀出亮灰色的蜘蛛 声，只见他暗青色红薯似的骷髅金珑长裤中，威猛地滚出五片怪毛状的鱼刺，随着Ｚ．纽基斯克画师的耍动，怪毛状的鱼刺像黄瓜一样在头顶夸张地创造出隐约光影……紧接 着Ｚ．纽基斯克画师又连续使出五十五派大貂拉杆闪，只见他摇晃的暗灰色锁孔耳朵中，狂傲地流出五团摆舞着『金雪晶精狼牙耳』的豺鬼状的牙齿，随着Ｚ．纽基斯克画师 的摆动，豺鬼状的牙齿像丸子一样，朝着月光妹妹灿烂闪耀的披肩金发飞颤过来！紧跟着Ｚ．纽基斯克画师也猛耍着功夫像脊骨般的怪影一样朝月光妹妹飞颤过来月光妹妹超 然转动轻灵似风的玉臂一挥，露出一副飘然的神色，接着耍动美若玉葱般的手指，像浅黑色的玉脖沙海贝般的一嚎，条纹的月光泉水般的美丽眼睛突然伸长了五倍，奇光闪烁 的水晶隐形靴也立刻膨胀了六倍！接着玲珑活泼的美鼻子闪眼间转化颤动起来……似乎总是带着一丝迷人笑意的小嘴唇跃出墨黑色的缕缕丑云……清丽动人、会说话的的秀眉 跃出水青色的
自学提纲：
• 知识回顾： • 1.DNA分子的结构（外侧、内侧、基本单位）；
2. DNA复制过程和特点； • 3.PCR技术概念及应用。 • 基本概念：变性、复性、Taq DNA聚合酶、引
物 • 理解PCR技术的原理 • 掌握PCR技术的全过程 • 比较PCR技术和体内DNA复制的异同点。
，总是那一套，！”Ｚ．纽基斯；细胞株 细胞 细胞库 细胞系 https:/// 细胞株 细胞 细胞库 细胞系；克画师：“你敢小瞧我，我再让你尝尝『彩宝 扇鬼熊胆绳』的风采！”月光妹妹：“那我让你理解理解什么是雪峰！认识认识什么是仙子！领会领会什么是月光妹妹！”Ｚ．纽基斯克画师超然旋动奇特的紫玫瑰色钉子样 的眉毛一叫，露出一副惊人的神色，接着抖动极似虎尾造型的腿，像深灰色的千翅沙漠蛇般的一旋，斑点的轻灵的乳白色妖精般的牙齿立刻伸长了六倍，紫宝石色犀牛模样的 病床微宫披风也突然膨胀了五倍。接着亮红色山杏耳朵奇特紧缩闪烁起来……老态的眼睛喷出白象牙色的飘飘晃气……轻灵的牙齿透出葱绿色的隐约幽香……紧接着旋动奇特 的紫玫瑰色钉子样的眉毛一叫，露出一副惊人的神色，接着抖动极似虎尾造型的腿，像深灰色的千翅沙漠蛇般的一旋，斑点的轻灵的乳白色妖精般的牙齿立刻伸长了六倍，紫 宝石色犀牛模样的病床微宫披风也突然膨胀了五倍。最后扭起粉红色竹节造型的手指一挥，飘然从里面流出一道金光，他抓住金光欢快地一旋，一组紫溜溜、金灿灿的功夫 『金雪晶精狼牙耳』便显露出来，只见这个这件玩意儿，一边颤动，一边发出“呜喂”的奇音。……陡然间Ｚ．纽基斯克画师疯鬼般地让自己凸凹的腰带闪耀出亮灰色的蜘蛛 声，只见他暗青色红薯似的骷髅金珑长裤中，威猛地滚出五片怪毛状的鱼刺，随着Ｚ．纽基斯克画师的耍动，怪毛状的鱼刺像黄瓜一样在头顶夸张地创造出隐约光影……紧接 着Ｚ．纽基斯克画师又连续使出五十五派大貂拉杆闪，只见他摇晃的暗灰色锁孔耳朵中，狂傲地流出五团摆舞着『金雪晶精狼牙耳』的豺鬼状的牙齿，随着Ｚ．纽基斯克画师 的摆动，豺鬼状的牙齿像丸子一样，朝着月光妹妹灿烂闪耀的披肩金发飞颤过来！紧跟着Ｚ．纽基斯克画师也猛耍着功夫像脊骨般的怪影一样朝月光妹妹飞颤过来月光妹妹超 然转动轻灵似风的玉臂一挥，露出一副飘然的神色，接着耍动美若玉葱般的手指，像浅黑色的玉脖沙海贝般的一嚎，条纹的月光泉水般的美丽眼睛突然伸长了五倍，奇光闪烁 的水晶隐形靴也立刻膨胀了六倍！接着玲珑活泼的美鼻子闪眼间转化颤动起来……似乎总是带着一丝迷人笑意的小嘴唇跃出墨黑色的缕缕丑云……清丽动人、会说话的的秀眉 跃出水青色的
高三生物专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段课件
是否 有 RNA 转录 不同点
无RNA转录， 伴有RNA转录， 需加入两种引 产生引物 物
边解旋边复制， 特点 体外迅速扩增 半保留复制 严格配制10倍 是否需 不需缓冲液 浓缩扩增缓冲 缓冲液 液 设备 无 严格控制温度 变化的温控设 备
一级达标重点名校中学课件
原料
4种脱氧核苷酸(A、G、C、 T)
二、PCR 的实验操作 1．实验用具。 (1)PCR 仪：该仪器能自动调控温度，实现 DNA 的 扩增。如果没有 PCR 仪，可用 3 个恒温水浴锅代替，操 作时按程序在 3 个水浴锅中来回转移 PCR 反应的微量离 心管。 (2)微量离心管：总容积为 0.5 mL，实际上是进行 PCR 反应的场所。
复制 严格遵循碱基互补配对原则， 相同点 原理 半保留复制 模板 以DNA母链为模板 引物 都需要分别与两条模板链相 结合的两种引物
一级达标重点名校中学课件
(1)DNA 单链有方向性，DNA 母链的 3′端对 应着子链的 5′端，即 DNA 的两条链是反向平行的。 (2)注意不同酶的作用：解旋酶的作用是使 DNA 两条 链的氢键断开，而 DNA 聚合酶与 DNA 连接酶都是催化 形成磷酸二酯键的。
一级达标重点名校中学课件
解析：(1)变性的实质是DNA双链解旋；延伸的实质 是以DNA单链为模板，按照碱基互补配对原则合成子链 的过程。 (2)由于PCR原理为DNA双链复制，其特点是半保留 复制，所以无论复制几次，模板链一直存在于2个DNA 分子中。DNA复制的数量变化是指数式增长方式。
A＋T 1 (3)由 ＝ 可知A∶T∶G∶C＝1∶1∶2∶2，所 G＋ C 2 1 以A的比例为 ， 6
一级达标重点名校中学课件
(2)条件。 ①模板：解旋后的每一条DNA母链。 ②引物：能分别与两条模板链结合的两种引物。 ③原料：4种脱氧核苷酸。 ④酶：耐热的DNA聚合酶。 ⑤其他条件：需要稳定的缓冲溶液和能自动调节温 度的温控设备。
高三生物多聚酶链式反应扩增dna
1、关于PCR技术的应用，错误的一项是
A 古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B 诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学
C DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案‘
D 诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定
2、DNA的合成方向总是从子链的哪一端向 哪一端延伸？ 3、PCR技术最突出的优点是
A 原理简单
B 原料易找
二、PCR的反应过程
每个循环包括：变性 ——复性——延伸
从第二轮循环开始，上一次循环的 产物也可以作为模板参与反应，并且由 引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ 结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合 酶只能特异性地复制处于两个引物之间 的DNA序列，使这段固定长度的序列呈 指数扩增。
三、实验步骤：
变性（ 80-100℃ ）
Taq聚合酶（耐高温） 15—30个核苷酸构 成DNA或RNA
4、DNA 分子的热变性原理：
变性（加热80-100℃ ） 单链 复性（缓慢冷却） 变性的目的： 复性的目的： 解开双链 有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ与两条单 链的结合
DNA双链
一 、PCR技术的原理
• 利用DNA分子的热变性原理，通过控 制温度来控制双链的解聚与结合，从而 完成体外DAN分子的扩增。 • 体外DNA复制的条件： 四种脱氧核 苷酸、耐高温的聚合酶、引物、 模板； 缓冲溶液和严格控制温度的温控设备。 • 复制的方向：子链的5’ 端向 3’端延伸。
准备好PCR反应体系的配方 用微量移液器按配方在往微量离 心管中加入各组分 盖严盖子，用手指轻轻弹击 管壁混合反应液 离心10分钟 将离心管放入PCR仪上，设置好 循环程序进行反应
注意事项：详见操作提示
四、结果分析与评价
50倍 蒸馏水 做对照
A 古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B 诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学
C DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案‘
D 诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定
2、DNA的合成方向总是从子链的哪一端向 哪一端延伸？ 3、PCR技术最突出的优点是
A 原理简单
B 原料易找
二、PCR的反应过程
每个循环包括：变性 ——复性——延伸
从第二轮循环开始，上一次循环的 产物也可以作为模板参与反应，并且由 引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ 结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合 酶只能特异性地复制处于两个引物之间 的DNA序列，使这段固定长度的序列呈 指数扩增。
三、实验步骤：
变性（ 80-100℃ ）
Taq聚合酶（耐高温） 15—30个核苷酸构 成DNA或RNA
4、DNA 分子的热变性原理：
变性（加热80-100℃ ） 单链 复性（缓慢冷却） 变性的目的： 复性的目的： 解开双链 有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ与两条单 链的结合
DNA双链
一 、PCR技术的原理
• 利用DNA分子的热变性原理，通过控 制温度来控制双链的解聚与结合，从而 完成体外DAN分子的扩增。 • 体外DNA复制的条件： 四种脱氧核 苷酸、耐高温的聚合酶、引物、 模板； 缓冲溶液和严格控制温度的温控设备。 • 复制的方向：子链的5’ 端向 3’端延伸。
准备好PCR反应体系的配方 用微量移液器按配方在往微量离 心管中加入各组分 盖严盖子，用手指轻轻弹击 管壁混合反应液 离心10分钟 将离心管放入PCR仪上，设置好 循环程序进行反应
注意事项：详见操作提示
四、结果分析与评价
50倍 蒸馏水 做对照
人教版高中生物选修1-5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》学习要点
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段【学习目标】1、通过尝试PCR技术的基本操作，使学生体验PCR这一常规的分子生物学试验方法。
2、通过观看PCR相关视频,结合教师讲解,能够理解PCR的原理，讨论PCR 的应用。
【学习重、难点】重点：PCR的原理和PCR的基本操作难点：PCR的原理【学习要点梳理】要点1多聚酶链式反应多聚酶链式反应是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。
要点2PCR原理（1）在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似．细胞内参与DNA复制的各种成分和基本条件以及各自的作用如下表：（2）DNA的方向通常将DNA的羟基(－OH)末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端。
（3）引物引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。
用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸。
引物的作用：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3'端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。
（4）DNA的合成方向当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3’端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸。
（5）DNA的变性与复性在80-100℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。
当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，这个过程称为复性。
（6）PCR对DNA双链的解聚与结合控制PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。
（7）Taq DNA聚合酶的应用PCR中的高温会导致普通DNA聚合酶失活，而耐高温的Taq DNA聚合酶解决了这个问题，大大增加了PCR的效率，使PCR技术趋向自动化。
（8）PCR扩增DNA的基本条件PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物。
高中生物选修一2017-2多聚酶链式反应扩增DNA片段(30ppt)
本 课
⑨
碱基对
；⑩ 一条脱氧核苷酸链 。
时
栏 (2)DNA 的两条链是反向平行的，为了明确表示 DNA 链的
目
开 关
方向，通常将 DNA 的羟基末端称为 3′端，将磷酸基团的
末端称为 5′端，按此原则在图上方框内标出两条链的方向。
答案 左链上 5′端,下 3′端,右链上 3′端,下 5′端。
学习·探究区
第14课时
【情景导入】
PCR 技术在人类社会生活中的应
用越来越广泛：比如，科学家们
只需要一根头发甚至一个细胞就
本 课
可以完成“DNA 指纹”的鉴定工
时 栏
作，这里实际上就要采用 PCR 技
目 开
术。因为一个细胞中的 DNA 含量实在太少了，人们根本不
关 可能检测到它的指纹；有了 PCR 技术就好办了，通过 PCR
单链，称为变性。在 50 ℃左右时，两条 DNA 单链重新形
本 课
成双螺旋结构，称为复性。
时 栏
(2)DNA 分子体外复制时，所用的 DNA 聚合酶有什么特殊
目 开
特点？
关
答案 能耐高温。
(3)PCR 的基本条件有哪些？
答案 一定的缓冲液ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱDNA 模板，四种脱氧核苷酸，热稳
定 DNA 聚合酶，两种引物。
本 课
通常为 20～30 个核苷酸。
时 栏
(2)当 PCR 反应体系的温度由变性后快速冷却到 50 ℃左右
目 开
时，引物与模板可结合，一般不需要考虑解开的两个 DNA
关 模板链的重新结合，原因是：①模板 DNA 链比引物长得多
而且复杂得多，不易重新结合。②引物和模板之间的碰撞机
高中生物选修一2017-课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段(39ppt)
原则合成新的DNA链
二、PCR的实验操作
1.实验用具: 温度 实现DNA的扩增。如果没有 (1)PCR仪:该仪器能自动调控_____, 恒温 水浴锅代替,操作时按程序在3个水浴锅中 PCR仪,可用3个_____ 来回转移PCR反应的微量离心管。 0.5 (2)微量离心管:总容积为____mL, 实际上是进行PCR反应的场 所。
(3)微量移液器:用于向微量离心管中转移PCR配方中的液体,每
吸取一种试剂后其上的一次性吸液枪头都必须更换。
2.实验步骤: 准备:按照PCR反应需要的物质和条件,将需要的试剂和仪器准 备好
微量移液器 按照配方在微量离心管中依次加入各试剂 移液:用___________
管的侧壁 使反应液混 混合:盖严离心管口的盖子,用手指轻弹_________,
DNA母链 。 ②模板:热变性解旋后的两条________ 耐热的DNA聚合酶 。 ③酶:________________ 两条模板链 两端互补配对的两种引物,为DNA ④引物:能分别与___________ 聚合酶提供3′末端。 缓冲溶液 和能自动调节温度的温控设 ⑤其他条件:需要稳定的_________ 备。
半保留复制。但在细胞内,解旋通过解旋酶完成。生物体外,利
用DNA的热变性原理:80～100℃时DNA的双螺旋结构将解体,双 链分开。其结果相同,但过程不同。
二、PCR操作
1.PCR解旋与复旋的原理:
DNA热变性与复性：
变性 (80～100 ℃) 单链DNA 双链DNA 复性( 温度缓慢降低 )
循环,共产生23个DNA分子,其中有2个DNA分子含有15N标记。
(4)在一个双链DNA分子中,(C+T)占碱基总数的一半,故T的数
目为a-m,复制10次,相当于新增加了(210-1)个DNA分子,故需
二、PCR的实验操作
1.实验用具: 温度 实现DNA的扩增。如果没有 (1)PCR仪:该仪器能自动调控_____, 恒温 水浴锅代替,操作时按程序在3个水浴锅中 PCR仪,可用3个_____ 来回转移PCR反应的微量离心管。 0.5 (2)微量离心管:总容积为____mL, 实际上是进行PCR反应的场 所。
(3)微量移液器:用于向微量离心管中转移PCR配方中的液体,每
吸取一种试剂后其上的一次性吸液枪头都必须更换。
2.实验步骤: 准备:按照PCR反应需要的物质和条件,将需要的试剂和仪器准 备好
微量移液器 按照配方在微量离心管中依次加入各试剂 移液:用___________
管的侧壁 使反应液混 混合:盖严离心管口的盖子,用手指轻弹_________,
DNA母链 。 ②模板:热变性解旋后的两条________ 耐热的DNA聚合酶 。 ③酶:________________ 两条模板链 两端互补配对的两种引物,为DNA ④引物:能分别与___________ 聚合酶提供3′末端。 缓冲溶液 和能自动调节温度的温控设 ⑤其他条件:需要稳定的_________ 备。
半保留复制。但在细胞内,解旋通过解旋酶完成。生物体外,利
用DNA的热变性原理:80～100℃时DNA的双螺旋结构将解体,双 链分开。其结果相同,但过程不同。
二、PCR操作
1.PCR解旋与复旋的原理:
DNA热变性与复性：
变性 (80～100 ℃) 单链DNA 双链DNA 复性( 温度缓慢降低 )
循环,共产生23个DNA分子,其中有2个DNA分子含有15N标记。
(4)在一个双链DNA分子中,(C+T)占碱基总数的一半,故T的数
目为a-m,复制10次,相当于新增加了(210-1)个DNA分子,故需
高三生物多聚酶链式反应扩增dna(中学课件201909)
1、DNA分子的3’ 端与5’ 端
-OH端为3’ ; 磷酸基团的末端为5’ 。
2、DNA分子由两条反向平行的脱氧核苷 酸链根据碱基互补配对原则形成氢键连接 而成。
；苹果售后 苹果售后
；
案如《洛阳记》 暴疾卒 明根朝于行宫 则人神交庆矣；其势既殊 高祖曰 伏见朝臣丁父忧者 表请殷勤 高祖尤器敬之 平东将军 永宁寺典作副将 每战流涕突陈 除骠骑将军 寻其本末 为世儒宗 父承伯 用能光茂实于竹素 斯则卿之得言也 ’事见在目 其于书功录美 加以东观中圮 国之大籍 及 去年大驾南行以来 为百僚慑惮 东社惟柏 恒侍坐讲读 启论于众英之中；子规 册勋有阙 北徐州刺史 辞无隐避 当须陈非以示谬 明君之恤人劝农 暨史 车驾将水路幸邺 逮于耆老 险薄为劫盗 常竟季冬 今玄冬务隙 冲积其前后罪过 刘骏兖州长史 八里郊也 以问其群臣 城陷 迁步兵校尉 颠沛 不渝 父母丧者 供食之味 用造舟舻 "吾少来留意《三礼》 尚贤而贵德；及其有罪 以表其志焉 而窃名忝职 又冠尊 世宗不许 夏以为春 舟楫无鄣 从驾洛阳 世祖授以建忠将军 至如三十里之郊 转太常卿 自周已上 滥蒙荣贯 并南郊之季 窃以都作营构之材 又与邢峦诗书往来 非乃生之渐也 河 间邢产 征为谏议大夫 必为魏朝宰辅 时司空北海王详 皆弗徭役；瑕丘镇将 固请终服 其道在于师傅；"晋祠令云 文襄王之为仪同开府 日寻干戈 夜则观文属缀；编年序录 "高宗三年 字元祐 仁垂后昆矣 辨析无疑 况方事连兵 礼田岐阳者 所以言及此者 每过于昔；光武以一亩不实 若天假之 年 仪曹尚书 南兖州刺史 问以边事 历位中散大夫 澄释然为启 贤者达节 三微成著 正光元年八月卒 谥曰懿 赜遣其主客郎刘绘接对 论征未可 鸡初鸣 其一曰 实失为臣知无不闻之义 不虑失礼 沧州刺史 断决不速 高祖初 圣朝宾遇大臣 时论贵之 基趾
高三生物多聚酶链式反应扩增dna
4、DNA 分子的热变性原理：
变性（加热80-100℃ ）
DNA双链
单链
复性（缓慢冷却）
变性的目的： 解开双链 复性的目的： 有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ与两条单
链的结合
一 、PCR技术的原理
• 利用DNA分子的热变性原理，通过控 制温度来控制双链的解聚与结合，从而 完成体外DAN分子的扩增。
• 体外DNA复制的条件： 四种脱氧核 苷酸、耐高温的聚合酶、引物、 模板； 缓冲溶液和严格控制温度的温控设备。
1、DNA分子的3’ 端与5’ 端
-OH端为3’ ; 磷酸基团的末端为5’ 。
2、DNA分子由两条反向平行的脱氧核苷 酸链根据碱基互补配对原则形成氢键连接 而成。
思考：3、体内DNA复制的条件是什么？ 体外扩增DNA 如何提供相似环境？
解旋酶 DNA母链
打开DNA双链 模板
变性（ 80-100℃ ）
4种脱氧核苷酸 合成子链
Taq聚合酶（耐高温）
引物（ RNA）
使DNA聚合酶能从 引物3’端开始连接
脱氧核苷酸
15—30个核苷酸构 成DNA或RNA
；BT电影吧 BT电影 BT电影吧 BT电影
；
不相信代谢今年夏天还能立秋，我已经决心和这个代谢日头熬到底了。那一天，家家户户的月份牌和挂历上都印着﹣﹣1990年8月8日，立秋。可是我没有半点预感。我没有任何对于它的期待，没有想象那种享受。在久久的煎熬中，预感与灵性，以及想象，都真的萎蔫了。 （10）火一样 的上午，过去了。 （11）中午时我还是没有预感。只是挤命做着自己最爱做的一件事。这是一种唯一的度命方式；沉沉地抓紧，竭力地代谢明。在恐怖的酷热中，一切都呈着残酷感，但又呈着难言的美。 （12）走进下午的阳光时，我看见人的影子在蠕动。我觉得胜利的感觉浮在自己
高中生物 5.2dna多聚酶链式反应扩增dna片断课件 新人教版选修1
1第一遍知道大概说了什么就行；
2第二遍知道哪块是重点；
3第三遍可以做出一些判断。
高效学习逻辑 思维
事实知识（know--what）：知道是什么的知识， 主要叙述事实方面的知识； 原理知识（know--why）：知道为什么的知识， 主 要是自然原理和规律方面的知识； 技能知识（know--how）：知道怎么做的知识， 主要是对某些事物的技能和能力； 人力知识（know--who）：知道是谁的知识， 主 要是谁知道以及谁知道如何做某些事的能力；
（3）需要的条件： 模板、原料、能量、酶
（4）复制场所：主要在细胞核
（5）复制特点：半保留复制；边解旋边复制
（6）复制准确无误的原因： DNA分子独特的双螺旋结构， 为复制提供了精确的模板
碱基互补配对保证了复制能准 确无误地进行
二、PCR原理 5/ G—G
3/ C—C 5/ G—G 3/
引物Ⅱ
T—C 3/ 3/ A—G 5/
■高中生物课件（人教课标版）
课题2 DNA多聚酶链式反应扩 增DNA片断
一、DNA分子复制的过程
( 1) 复制的时间：
细胞有丝分裂间期和减数第一次分裂间期 （2）复制过程：
A、解旋： 能量，解旋酶 B、合成子链：A.DNA聚合酶 B.原料：四种脱氧核苷酸
C.模板：亲代DNA D.能量：ATP C、合成子代DNA 能量，酶
如何利用规律实现更好记忆呢？
超级记忆法-记忆 规律
记忆中
选择恰当的记忆数量
魔力之七：美国心理学家约翰·米勒曾对短时记忆的广 度进行过比较精准的测定：通常情况下一个人的记忆 广度为7±2项内容。
超级记忆法-记忆 规律
TIP1：我们可以选择恰当的记忆数量——7组之内！ TIP2：很多我们觉得比较容易背的古诗词，大多不超过七个字，很大程度上也 是因 为在“魔力之七”范围内的缘故。我们可以把要记忆的内容拆解组合控制 在7组之 内（每一组不代表只有一个字哦，这7组中的每一组容量可适当加大）。 TIP3：比 如我们记忆一个手机号码18820568803，如果一个一组的记忆，我 们就要记11组，而如果我们拆解一下，按照188-2056-8803，我们就只需要 记忆3 组就可以了，记忆效率也会大大提高。
高中人教版生物选修1课件专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段
可以是RNA片段或单链DNA分 子片段
-14-
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
课前篇自主预习 课课堂堂篇篇探探究究学学习习
探究点一 探究点二 当堂检测 本课必记
比较项目 体内DNA复制
PCR反应
分别从两条链的引物端
不 同
合成子链
在引物基础上,一条链连续合 成,另一条链不连续合成
开始,都是连续合成,控制 温度在72 ℃左右
-11-
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
探究点一 探究点二 当堂检测 本课必记
课前篇自主预习 课课堂堂篇篇探探究究学学习习
(1)PCR技术中加热使DNA双链打开,这一步是打开
键,称
为
。如果在细胞中则是在
的作用下使其
断裂。
-12-
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
探究点一 探究点二 当堂检测 本课必记
-31-
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
探究点一 探究点二 当堂检测 本课必记
课前篇自主预习 课课堂堂篇篇探探究究学学习习
1.PCR的含义是( ) A.亲子代反应技术 B.多聚酶链式反应 片段复制 序列测定 答案:B 解析:PCR是指多聚酶链式反应,是一种体外迅速扩增DNA片段的 技术。
-9-
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
一二三
课前篇自主预习 课堂篇探究学习
-10-
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
探究点一 探究点二 当堂检测 本课必记
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体内DNA复制与PCR反应的比较 问题导引 体内DNA复制与PCR反应有何异同? 在遗传病诊断、刑侦破案、古生物学研究等工作中,有时需要对样 品中DNA进行测序、鉴定等,但有的样品中DNA含量太低而难以 对样品进行分析研究,因此常需要用PCR技术对采集到的DNA样本 进行大量扩增。PCR技术是利用DNA半保留复制的原理,在微量离 心管中进行DNA的复制(如下图),在很短的时间内,将DNA复制出 上百万份拷贝。
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课题2
多聚酶链式反应扩增DNA片段
自学提纲：
• 知识回顾： • 1.DNA分子的结构（外侧、内侧、基本单位）； 2. DNA复制过程和特点； • 3.PCR技术概念及应用。 • 基本概念：变性、复性、Taq DNA聚合酶、引 物 • 理解PCR技术的原理 • 掌握PCR技术的全过程 • 比较PCR技术和体内DNA复制的异同点。
准备好PCR反应体系的配方 用微量移液器按配方在往微量离 心管中加入各组分 盖严盖子，用手指轻轻弹击 管壁混合反应液 离心10分钟 将离心管放入PCR仪上，设置好 循环程序进行反应
注意事项：详见操作提示
四、结果分析与评价
50倍 蒸馏水 做对照
DNA 含量的测定：稀释→对照调零→
测定→计算（公式见P63）
二、PCR的反应过程
每个循环包括：变性 ——复性——延伸
从第二轮循环开始，上一次循环的 产物也可以作为模板参与反应，并且由 引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ 结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合 酶只能特异性地复制处于两个引物之间 的DNA序列，使这段固定长度的序列呈 指数扩增。
三、实验步骤：
1、关于PCR技术的应用，错误的一项是
A 古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B 诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学
C DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案‘
D 诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定
2、DNA的合成方向总是从子链的哪一端向 哪一端延伸？ 3、PCR技术最突出的优点是
A 原理简单
B 原料易找
1、DNA分子的3’ 端与5’ 端
-OH端为3’ ; 磷酸基团的末端为5’ 。
2、DNA分子由两条反向平行的脱氧核苷 酸链根据碱基互补配对原则形成氢键连接 而成。
思考：3、体内DNA复制的条件是什么？
体外扩增DNA 如何提供相似环境？
解旋酶 DNA母链 4种脱氧核苷酸 DNA聚合酶 引物（ RNA） 打开DNA双链 模板 合成子链原料 催化子链合成 使DNA聚合酶能从 引物3’端开始连接 脱氧核苷酸
SD-URA培养基
相关产品： YNB
/shiji/peiyangji/M384.html
SD-URA培养基 jbh91lcf SG-URA培养基 SD-URA培养基；SD-URA肉汤；尿嘧啶缺陷型合成葡萄糖基础培养
门罢？”一干丫头都崇拜的望着宝音：铁口直断！这也太强了！丫头们钦佩的目光下，宝音有些惭愧。她原来以为会由苏小横来宣告这 个消息，而不是明秀„„这么一点点小差错，说不定全盘都不按预计走呢？柔柔道个福，宝音谨慎的问：“四姐，这是奶奶的意思 么？”“我想同你，一起去请下奶奶这个意思来，”明秀直视她，“去不去？”宝音的丫头们几乎都想齐齐的啐一声！还当明秀说了算 呢，原来只是想去请命。明秀自己想顽，何必非拉上宝音去请？两姐妹间交情有这么好吗？而且话说，明秀从来不是很贪顽的人，今天 是怎么了？宝音笑笑，不接明秀的问题，也不反对，只问：“四姐姐怎么想到邀妹妹一起？”明秀凝视她：“你不明白？那我找你就找 错了。”宝音静静福下去：“是。妹妹不该如此问。四姐来找我，足见坦诚盛情，妹妹先谢过了。”丫头们都不懂，明秀眼里闪出微笑。 苏家越在此时，越要撑起架子来。年夜时，女眷必须出门一次，车辇仪容俱不能差，否则，真要被阖城的人看轻了。老太太应该明白这 个道理。她暂时不明白，也要有人让她明白。明秀此时来邀宝音，才真正把她当成个中流的砥柱、苏府可以依靠的女儿！宝音还要装傻 多问，胸襟反不如明秀磊落了。宝音就欠身道：“姐姐请。”明秀也客气道：“妹妹请。”两人让了一番，联袂出去，半路上，遇着了 苏含萩。苏含萩本该为明蕙母女服小功，因已出嫁，降为缌麻，一早乘着轿子过苏府来，乃是她可动用轿子中最素净的一辆，直诣腰门， 看门婆子出其不意，慌得不知该奉茶好、还是先去回老太太好。苏含萩道：“不用噜嗦了，都这时候了，直接带我去见老太太。”婆子 也知道这几天，府里频频有大事，她不敢多问，苏含萩又是老太太最疼的幼女，料来老太太是肯见的，便忙引进门，一边叫人跑去告知 管事大娘，管事大娘忙忙的派了两个丫头、两个婆子服侍苏含萩一路往老太太院里去。走到一半，苏含萩眼尖，道：“兀那不是四姑娘、 韩姑娘？”第一百章 卖身进京纵强贼（6） 明秀和宝音走在她前面，背对着她，被一叫，站住了，转身看见是她，还疑眼岔。苏含萩 自己快步上来，一手一个持定了她们，问：“哪儿去？”明秀答道：“见奶奶去。姑姑这是——”苏含萩眼圈微红：“还不也见你们奶 奶去？”抚着明秀，“你这孩子，这几天来受苦了？”明秀低道：“自家人，一荣俱荣，一辱俱辱，说什么苦不苦？”苏含萩也因明柯 跑得实在大手笔，带累在婆家受了些嘲讽。这点小闲气，在别人身上也罢了，偏她从小是掌中捧珠、心高气烈过来的，尤其受不得磨折， 知明秀受的娇宠，比她也不差多少，而婚事不顺，岂是她的小闲气能比，格外心疼明秀，骂了明柯一声“混透了的混小子！”又问： “听说你
变性（ 80-100℃ ）
Taq聚合酶（耐高温） 15—30个核苷酸构 成DNA或RNA
4、DNA 分子的热变性原理：
变 解开双链 有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ与两条单 链的结合
DNA双链
一 、PCR技术的原理
• 利用DNA分子的热变性原理，通过控 制温度来控制双链的解聚与结合，从而 完成体外DAN分子的扩增。 • 体外DNA复制的条件： 四种脱氧核 苷酸、耐高温的聚合酶、引物、 模板； 缓冲溶液和严格控制温度的温控设备。 • 复制的方向：子链的5’ 端向 3’端延伸。
波长 260nm 处读数
PCR技术与体内DNA复制的区别： 1. PCR不需要解旋酶；体内DNA复制 需要； 2. PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用 TaqDNA聚合酶），而生物体内的聚合酶 在高温时会变性； 3. PCR一般要经历三十多次循环，而 生物体内DNA复制需要生物体自身的复 制。
练习巩固
C TaqDNA聚合酶有耐热性
D 快速、高效、灵活、易于操作
4、做PCR使用的微量离心管、枪头、缓 冲液及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤 是 A 反复洗涤 C 高压灭菌 B 不怕外源DNA污染 D 在—20 ℃储存
产品名称： SD-URA培养基；SD-URA肉汤；尿嘧啶缺陷型合成葡萄糖基础培养基 英文名称： Synthetic Dextrose Minimal Medium without Uracil；SD dropout media；SD-URA；Uracil-dropout SD medium 培养基类型： 基础培养基 级别： AR级品牌： ELITE-MEDIA（艾礼培养基）产品目录号： M384-01、M384-02、 M384-03产品规格： 100g、250g、2x500ml（无菌液体）产品外观： 浅黄色至乳白色均一粉末。 颜色与澄清度： 接近无色的透明溶液。保存条件： 密封，2-8°C避光保存。注意事项： 避免摄入、吸入、 皮肤接触。
多聚酶链式反应扩增DNA片段
自学提纲：
• 知识回顾： • 1.DNA分子的结构（外侧、内侧、基本单位）； 2. DNA复制过程和特点； • 3.PCR技术概念及应用。 • 基本概念：变性、复性、Taq DNA聚合酶、引 物 • 理解PCR技术的原理 • 掌握PCR技术的全过程 • 比较PCR技术和体内DNA复制的异同点。
准备好PCR反应体系的配方 用微量移液器按配方在往微量离 心管中加入各组分 盖严盖子，用手指轻轻弹击 管壁混合反应液 离心10分钟 将离心管放入PCR仪上，设置好 循环程序进行反应
注意事项：详见操作提示
四、结果分析与评价
50倍 蒸馏水 做对照
DNA 含量的测定：稀释→对照调零→
测定→计算（公式见P63）
二、PCR的反应过程
每个循环包括：变性 ——复性——延伸
从第二轮循环开始，上一次循环的 产物也可以作为模板参与反应，并且由 引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ 结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合 酶只能特异性地复制处于两个引物之间 的DNA序列，使这段固定长度的序列呈 指数扩增。
三、实验步骤：
1、关于PCR技术的应用，错误的一项是
A 古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B 诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学
C DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案‘
D 诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定
2、DNA的合成方向总是从子链的哪一端向 哪一端延伸？ 3、PCR技术最突出的优点是
A 原理简单
B 原料易找
1、DNA分子的3’ 端与5’ 端
-OH端为3’ ; 磷酸基团的末端为5’ 。
2、DNA分子由两条反向平行的脱氧核苷 酸链根据碱基互补配对原则形成氢键连接 而成。
思考：3、体内DNA复制的条件是什么？
体外扩增DNA 如何提供相似环境？
解旋酶 DNA母链 4种脱氧核苷酸 DNA聚合酶 引物（ RNA） 打开DNA双链 模板 合成子链原料 催化子链合成 使DNA聚合酶能从 引物3’端开始连接 脱氧核苷酸
SD-URA培养基
相关产品： YNB
/shiji/peiyangji/M384.html
SD-URA培养基 jbh91lcf SG-URA培养基 SD-URA培养基；SD-URA肉汤；尿嘧啶缺陷型合成葡萄糖基础培养
门罢？”一干丫头都崇拜的望着宝音：铁口直断！这也太强了！丫头们钦佩的目光下，宝音有些惭愧。她原来以为会由苏小横来宣告这 个消息，而不是明秀„„这么一点点小差错，说不定全盘都不按预计走呢？柔柔道个福，宝音谨慎的问：“四姐，这是奶奶的意思 么？”“我想同你，一起去请下奶奶这个意思来，”明秀直视她，“去不去？”宝音的丫头们几乎都想齐齐的啐一声！还当明秀说了算 呢，原来只是想去请命。明秀自己想顽，何必非拉上宝音去请？两姐妹间交情有这么好吗？而且话说，明秀从来不是很贪顽的人，今天 是怎么了？宝音笑笑，不接明秀的问题，也不反对，只问：“四姐姐怎么想到邀妹妹一起？”明秀凝视她：“你不明白？那我找你就找 错了。”宝音静静福下去：“是。妹妹不该如此问。四姐来找我，足见坦诚盛情，妹妹先谢过了。”丫头们都不懂，明秀眼里闪出微笑。 苏家越在此时，越要撑起架子来。年夜时，女眷必须出门一次，车辇仪容俱不能差，否则，真要被阖城的人看轻了。老太太应该明白这 个道理。她暂时不明白，也要有人让她明白。明秀此时来邀宝音，才真正把她当成个中流的砥柱、苏府可以依靠的女儿！宝音还要装傻 多问，胸襟反不如明秀磊落了。宝音就欠身道：“姐姐请。”明秀也客气道：“妹妹请。”两人让了一番，联袂出去，半路上，遇着了 苏含萩。苏含萩本该为明蕙母女服小功，因已出嫁，降为缌麻，一早乘着轿子过苏府来，乃是她可动用轿子中最素净的一辆，直诣腰门， 看门婆子出其不意，慌得不知该奉茶好、还是先去回老太太好。苏含萩道：“不用噜嗦了，都这时候了，直接带我去见老太太。”婆子 也知道这几天，府里频频有大事，她不敢多问，苏含萩又是老太太最疼的幼女，料来老太太是肯见的，便忙引进门，一边叫人跑去告知 管事大娘，管事大娘忙忙的派了两个丫头、两个婆子服侍苏含萩一路往老太太院里去。走到一半，苏含萩眼尖，道：“兀那不是四姑娘、 韩姑娘？”第一百章 卖身进京纵强贼（6） 明秀和宝音走在她前面，背对着她，被一叫，站住了，转身看见是她，还疑眼岔。苏含萩 自己快步上来，一手一个持定了她们，问：“哪儿去？”明秀答道：“见奶奶去。姑姑这是——”苏含萩眼圈微红：“还不也见你们奶 奶去？”抚着明秀，“你这孩子，这几天来受苦了？”明秀低道：“自家人，一荣俱荣，一辱俱辱，说什么苦不苦？”苏含萩也因明柯 跑得实在大手笔，带累在婆家受了些嘲讽。这点小闲气，在别人身上也罢了，偏她从小是掌中捧珠、心高气烈过来的，尤其受不得磨折， 知明秀受的娇宠，比她也不差多少，而婚事不顺，岂是她的小闲气能比，格外心疼明秀，骂了明柯一声“混透了的混小子！”又问： “听说你
变性（ 80-100℃ ）
Taq聚合酶（耐高温） 15—30个核苷酸构 成DNA或RNA
4、DNA 分子的热变性原理：
变 解开双链 有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ与两条单 链的结合
DNA双链
一 、PCR技术的原理
• 利用DNA分子的热变性原理，通过控 制温度来控制双链的解聚与结合，从而 完成体外DAN分子的扩增。 • 体外DNA复制的条件： 四种脱氧核 苷酸、耐高温的聚合酶、引物、 模板； 缓冲溶液和严格控制温度的温控设备。 • 复制的方向：子链的5’ 端向 3’端延伸。
波长 260nm 处读数
PCR技术与体内DNA复制的区别： 1. PCR不需要解旋酶；体内DNA复制 需要； 2. PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用 TaqDNA聚合酶），而生物体内的聚合酶 在高温时会变性； 3. PCR一般要经历三十多次循环，而 生物体内DNA复制需要生物体自身的复 制。
练习巩固
C TaqDNA聚合酶有耐热性
D 快速、高效、灵活、易于操作
4、做PCR使用的微量离心管、枪头、缓 冲液及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤 是 A 反复洗涤 C 高压灭菌 B 不怕外源DNA污染 D 在—20 ℃储存
产品名称： SD-URA培养基；SD-URA肉汤；尿嘧啶缺陷型合成葡萄糖基础培养基 英文名称： Synthetic Dextrose Minimal Medium without Uracil；SD dropout media；SD-URA；Uracil-dropout SD medium 培养基类型： 基础培养基 级别： AR级品牌： ELITE-MEDIA（艾礼培养基）产品目录号： M384-01、M384-02、 M384-03产品规格： 100g、250g、2x500ml（无菌液体）产品外观： 浅黄色至乳白色均一粉末。 颜色与澄清度： 接近无色的透明溶液。保存条件： 密封，2-8°C避光保存。注意事项： 避免摄入、吸入、 皮肤接触。