常用培养基配方
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乳酸杆菌培养基(MRS)
蛋白胨10.0 g
牛肉膏10.0 g
酵母膏 5.0 g
柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7] 2.0 g
葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g
吐温80 1.0 mL
乙酸钠(CH3COONa·3H2O) 5.0 g
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O) 2.0 g
硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.50g
硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25 g
琼脂15.0 g
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.2~6.6 (115°20min灭菌)
脱脂奶粉培养基配方:
1.牛肉膏1g,蛋白胨2g,NaCl 1g,脱脂奶粉10-12%,琼脂2%,水200ml,pH 7.0~7.2 115度灭15min 110度15min 108度15min
2.培养基分开灭菌.即牛肉膏0.5g,蛋白胨1g,NaCl 0.5g,,琼脂2%,水100ml,pH 7.0~7.2 121度20min
脱脂奶粉3g 115度20min
酵母菌培养基
(复壮)马铃薯200克自来水 1000毫升煮20min 过滤除渣
葡萄糖 20克
琼脂 20克
补足至1000ml水
自然PH
(培养)YPD :
1 溶解10g酵母膏, 20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉
2 高压121度20min
3 加入100ml 20g葡萄糖(葡糖糖溶液灭菌后加入)
酵母菌种扩大培养步骤:
1.恢复培养。将深冻菌种在水浴中溶解,用接种环接种到斜面或者平皿,30℃下培养2-3d,这个步骤也可称为“复壮”。
2.从斜面或者平皿中挑取菌种,接到10mlYPD培养基中,30℃,180r/min 转速下恒温摇瓶24小时。
3.以1:100比例,将种子液接到YPD培养基中,以实施扩大培养。
枯草芽孢杆菌培养基(牛肉膏蛋白胨)
1L蒸馏水
20g葡萄糖
15g蛋白胨
5g氯化钠
0.5g牛肉膏
20g琼脂
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4
配制一升溶液,需要189mmoI FeSO4*6H2O;0.586mmoI EDTA*Na2 FeSO4*6H2O 189mmoI*L-1,
EDTA*Na2 0.586mmoI*L-1
然后用氨水把PH调到7.4,即可。
EDTA就是乙二胺四乙酸,它的结构式:
(HOOC-CH2)2 -C(NH2)-C(NH2)-(CH2COOH)2
它的二钠盐相当于去掉羧基上的两个氢,换成钠离子。
所以分子量(权且这样称谓,尽管不合理)为:218.