常用培养基配方

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乳酸杆菌培养基(MRS)

蛋白胨10.0 g

牛肉膏10.0 g

酵母膏 5.0 g

柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7] 2.0 g

葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g

吐温80 1.0 mL

乙酸钠(CH3COONa·3H2O) 5.0 g

磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O) 2.0 g

硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.50g

硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25 g

琼脂15.0 g

蒸馏水 1 000 mL

pH 6.2~6.6 (115°20min灭菌)

脱脂奶粉培养基配方:

1.牛肉膏1g,蛋白胨2g,NaCl 1g,脱脂奶粉10-12%,琼脂2%,水200ml,pH 7.0~7.2 115度灭15min 110度15min 108度15min

2.培养基分开灭菌.即牛肉膏0.5g,蛋白胨1g,NaCl 0.5g,,琼脂2%,水100ml,pH 7.0~7.2 121度20min

脱脂奶粉3g 115度20min

酵母菌培养基

(复壮)马铃薯200克自来水 1000毫升煮20min 过滤除渣

葡萄糖 20克

琼脂 20克

补足至1000ml水

自然PH

(培养)YPD :

1 溶解10g酵母膏, 20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉

2 高压121度20min

3 加入100ml 20g葡萄糖(葡糖糖溶液灭菌后加入)

酵母菌种扩大培养步骤:

1.恢复培养。将深冻菌种在水浴中溶解,用接种环接种到斜面或者平皿,30℃下培养2-3d,这个步骤也可称为“复壮”。

2.从斜面或者平皿中挑取菌种,接到10mlYPD培养基中,30℃,180r/min 转速下恒温摇瓶24小时。

3.以1:100比例,将种子液接到YPD培养基中,以实施扩大培养。

枯草芽孢杆菌培养基(牛肉膏蛋白胨)

1L蒸馏水

20g葡萄糖

15g蛋白胨

5g氯化钠

0.5g牛肉膏

20g琼脂

LB培养基的配方如下:

胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L

酵母提取物(Yeast extract) 5g/L

氯化钠(NaCl) 10g/L

另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4

配制一升溶液,需要189mmoI FeSO4*6H2O;0.586mmoI EDTA*Na2 FeSO4*6H2O 189mmoI*L-1,

EDTA*Na2 0.586mmoI*L-1

然后用氨水把PH调到7.4,即可。

EDTA就是乙二胺四乙酸,它的结构式:

(HOOC-CH2)2 -C(NH2)-C(NH2)-(CH2COOH)2

它的二钠盐相当于去掉羧基上的两个氢,换成钠离子。

所以分子量(权且这样称谓,尽管不合理)为:218.

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