高效毛细管电泳技术及其在中药分析中的应用进展共51页文档
【优】高效毛细管电泳分析法应用与进展PPT资料
效果优于HPLG法 形成配合物的稳定常数有差异，结合HPCE的高效率；
二、药物分析
analysis of pharmaceutics 五、核酸分析及DNA排序
analysis of nucleic acids and sequence of DNA 形成配合物的稳定常数有差异，结合HPCE的高效率； HPCE分离分析手性化合物的方法：加入手性选择剂；
CE-MS；
3.阵列毛细管凝胶电泳
应用于人类基因DNA测序； 5～10万个基因，30亿个碱基对，目前最有效的DNA序列 分析仪，10小时/次；可同时电泳24个样品；速度1200碱基对 /小时，提高速度！ 100支毛细管阵列电泳；速度280碱基对/小时/支
请选择内容
第一节 概述
generalization
第二节 高效毛细管电泳的理论基础
basic theory of HPCE
第三节 高效毛细管电泳仪器
high performance capillary electrophoresis apparatus
第四节 高效毛细管电泳的分离模式
separate types of HPCE
第五节 应用与进展
application and advances of HPCE
三、手性化合物分析
analysis of chiral compounds
合成获得单一手性化合物相当困难；528种手性合成药物， 61中以单一对映体形式销售，其他为外消旋体；检测分析也 相当困难；研究热点；
R-反应停是安眠药，S-式致胎儿畸形；
HPCE分离分析手性化合物的方法：加入手性选择剂；
形成配合物的稳定常数有差异，结合HPCE的高效率；
高效毛细管电泳在现代中药中的应用
高效毛细管电泳在现代中药中的应用【摘要】高效毛细管电泳是指以高压电场为驱动力，以毛细管作为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
高效毛细管电泳一般存在六种分离模式，即毛细管区带电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管电色谱、毛细管等电聚焦电泳及毛细管等速电泳。
通过对每种分离模式的分离特点介绍以及近年来对几种分离模式的应用情况，本文阐述了高效毛细管电泳在现代中药发展中的广阔前景。
【关键词】高效毛细管电泳；中药；应用高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis， hpce），是指以高压电场为驱动力，以毛细管作为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
经典电泳法是早于20世纪30年代提出的，广泛用于医学、生物化学分离分析，但其存在分辨率较低和柱效低的缺点，而高效毛细管电泳就是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物，具有色谱和电泳两种分离机制，不仅克服了经典色谱的缺点，兼有高压电泳的高速、高分辨率的特点，而且还具有高效液相色谱法的高效率的优点，因此，毛细管电泳法广泛用于离子型生物大分子的快速分析、dna序列的测定、单个细胞和病毒的分析，已经成为生命科学研究、医学诊断、刑事侦查的重要手段。
而近十几年来，hpce技术才用于中药的研究，虽然还处于起步阶段，但是与常用于研究中药的高效液相色谱法相比，却也已经显现出明显的优势，有利于中药中有效成分的分析，更重要的是，对现代化的发展起着积极的推动作用。
本文就近年来对高效毛细管电泳法在中药成分研究分析的应用作一简要的介绍。
1 高效毛细管电泳简介1.1 原理hpce是在电场作用下离子的大小、电荷数量与符号及双电层电位高低的不同，而导致的迁移速率不同的电泳分离行为。
是区别于液相色谱法基于组分在流动相和固定相之间的分配系数的不同而导致选择性与保留时间不同的色谱行为。
毛细管电泳技术在药物分析中的应用研究
毛细管电泳技术在药物分析中的应用研究药物分析是现代药学研究的重要领域之一，其目的是确定药品的成分、质量和纯度等指标。
毛细管电泳技术是一种高效、灵敏、快速和准确的药物分析方法，已广泛应用于各种药物的分离、定量和结构分析等方面。
一、毛细管电泳技术的基本原理毛细管电泳技术是利用毛细管作为分离柱，通过电场效应分离药物及其成分的方法。
它基于分子电荷和大小的差异，将混合物中的成分在电压作用下沿毛细管内移动，并在观察点处被依次检测和记录。
电泳色谱法可以根据不同的物性进行物质分离，如电荷、相对分子质量、极性等。
毛细管电泳技术通过改变样品的分子充电量、外部电场大小和环境介质等因素来实现成分的分离。
二、毛细管电泳技术在药物分析中的应用毛细管电泳技术具有高效、快速、灵敏、准确等优点，已被广泛应用于药物分析领域。
其应用主要涉及药物的分离、定量和结构分析等方面。
1. 分离应用毛细管电泳技术可以有效地分离许多药物，并且分离效果优于传统的色谱法和电泳法。
例如，毛细管电泳技术可以分离抗癌药物、心血管药和皮肤科药品等各种药物。
此外，该技术也可以用于分离混合物中的多种成分。
2. 定量应用毛细管电泳技术可以用于药物的定量分析。
该技术精度高，灵敏度高，检测限低，能够准确地测定药品的含量与质量等参数。
毛细管电泳技术对药品中的极性物质和非极性物质分析均具有良好的应用效果。
3. 结构分析应用毛细管电泳技术可以用于药品的结构分析，例如能够对药品中不同结构的异构体进行分析。
该技术具有高分辨率和高选择性，能够分析药品的结构、组分及其含量等参数。
三、毛细管电泳技术的局限性毛细管电泳技术虽然具有许多优点，但在实际应用中也存在一些局限性。
该技术需要具有高度纯度的药品样本，并且样品的预处理过程比较繁琐，需要使用化学试剂等。
此外，毛细管电泳技术具有一定的操作难度，需要经过专业的操作培训和实验室实践才能掌握。
四、研究方向和展望毛细管电泳技术在药物分析中的应用领域很广泛，但是今后还需要进行进一步的研究和发展。
高效毛细管电泳法在中药化学成分分析中的应用
通 过 HPCE
方法建立了对 通光藤 中的 通光藤 苷 J 的分 析 方法 , 结 果在 15 分 钟 内可 实 现 通 光 藤 苷 J 的 分 离 与 测 定 , 在 43 43 ~ 1732 06ug /m l范围 内线 性 关 系 良 好 ( r = 0 9985 , n = 6 )。 李玉莲等
[ 5]
胶 ( 或加在凝胶基 质中的 添加剂 ) 生成络合 物 , 又 能使分 离度增加 , 同时凝 胶又 可防止 溶质 在毛细 管壁 的吸 附并减 少电渗流。此外 , 但是 , CGE 的样品容量为 1012g , 用于定量 , 可 以实现自动化 , 也可用于大分子 物质的微 制备和馏分 收集。 CGE 的柱 制备 较困难 , 且 寿命 较短。有 人采 用黏度 低的线性聚合 物如甲 基纤 维素代 替聚 丙烯酰 胺 , 可 形成无 凝胶但有 筛 分作 用的 无 胶筛 分介 质 , 它 能避 免 空泡 形 成 , 比凝胶柱制备 简单 , 寿 命长 , 但 分离能力比凝胶柱略差。 3. 毛细管导电 聚集电 泳法 ( C I EF ) CIEF 是依 据样 品组分 ( 主要是两 性化合 物 ) 等电 点不同而 实现 分离 ; 毛 细管的等电聚 焦是将一 种两性 电介 质的混 合物 作为 载体注 入毛细管中产 生 pH 值梯度 , 使有不同等电点的分子分别聚 集在不同的位置上 , 不 作迁移 而彼此 分离。 CIEF 具 有极高 的分辨率 , 通常可以分 离等电点差值小于 0 01pH 值单位的 两种蛋白质。在毛细管电泳中 , 如果缓冲 液的 pH 高于硅胶 表面的 Pka值 , 则会 在带 电的硅 胶表 面形成 一个 双电 层并
[ 6]
导致电渗。在 C I EF中 , 电渗流碱环 境稳定的 聚焦区带 , 目 前多采用将亲 水性聚合 物键合 到毛 细管管 壁表 面来 减少电 渗流 , 同时还能除去管 壁上可能造成蛋白质吸附的活性点。 4. 毛细管胶束电 动色 谱法 ( M ECC ) M ECC 是 根据 分子在胶束 中的 保留时 间不 同来进 行分 离的。通 常 , 由于 胶束的静电排斥作用 , 阴离子在 缓冲液相 的停留时间 最短 , 阴离子电荷 越大 , 流 出越快 ; 中性分 子的 分离 是以疏 水性 为基础 , 流出速 度较 阴离子 慢 ; 阳离 子则 受到 胶束的 静电 吸引作用 的影响 , 电荷越 大 , 保留 时间 越长。但 是如 果溶 质的疏水作用很强 , 则往往能克 服静电排 斥或吸引的 影响 , 另外电迁移 有时 也会 影响 流动 次序。 沈江 姗等 [ 8] 在 M ECC 中使用二元环 糊精体系 拆分 CBI 氨基 酸对映 体 , 在 实验选 定的条件下 , 两者均能 达到完全手性拆分。 5. 毛细管等速电泳色谱法 ( C I TP ) 毛细管等速电泳 是一种较早的 模式 , 分 离机理 也是 依据样 品组 分电 泳淌度
高效毛细管电泳的发展及在中药学中的应用
高效毛细管电泳的发展及在中药学中的应用李红(第三军医大学野战外科研究所大坪医院药剂科,四川重庆400042)摘 要:目的:总结高效毛细管电泳的发展史及应用于中药学中的重要意义。
方法:通过文献、资料中的实验和一些大量临床研究进行分析,并以中药学为例进行阐述。
结果:显示了高效毛细管电泳具有“三高两少一广”的优点。
结论:该技术简便、快速、灵敏,具有广泛的医药学应用前景。
关键词:高效毛细管电泳;中药学;药用植物分析;有效成分分析;生药鉴定中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1002-2392(2003)01-0024-03作者简介:李红(1977-),女,药师,主要从事药物制剂研究工作。
收稿日期:2002-09-25 高效毛细管电泳(High Per formance Cupillary E leccrophoresis ,HPCE )是80年代后期迅速发展起来的一项新技术。
高效毛细管电泳(HPCE )是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物,他具有“三高两少一广”的特点,所以成为近20年来一种迅速发展的分离新技术。
即:高灵敏度,常用紫外检测器的检测限可达10-13～10-15m ol ,激光诱导荧光检测器则达10-19～10-21m ol ;高分辨率,其每米理论塔板数为几十万,高者可达几百万乃至千万,而HP LC 一般为几千到几万;高速度,最快可在几十秒内完成,有报道在90秒内分离6种血清蛋白;样品少,只需毫微升(10-9L )的进样量;成本低,只需少量(几毫升)流动相和价格低廉的毛细管;应用范围广,由于HPCE 符合了以生物工程为代表的生命物理学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶、抗体),核酸乃至脱氧核糖核酸(DNA )的分离分析要求得到了迅速的发展。
如今HPCE 正逐步成为各生命科学实验室中一种必备的分析仪器,除分离生物大分子(肽、蛋白、核苷酸和DNA 片段及序列)外,还可以用于氨基酸、各类药物、无机离子、有机酸、表面活性剂、染料、手性分离、糖类等,甚至可分离整个细胞和病毒颗粒、硅胶等其它颗粒。
毛细管电泳技术在中药研究中的应用
毛细管电泳技术在中药研究中的应用摘要：对毛细管电泳技术（HPCE）的特点及设备做简要的介绍。
对HPCE在中药材鉴别和质量控制、中药有效成分的分离和测定、指纹图谱的建立做简要的综述。
关键词：毛细管电泳;中药研究一：毛细管电泳技术简介。
高效毛细管电泳（HPCE）又称毛细管电泳（CE），是20 世纪末发展的一种高效、快速的分离技术，是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物，是继高效液相色谱（HPLC）之后又一重大进展。
它使分析科学进入纳米水平，为小体积样品分析提供可能，适合于从无机离子到有机、从核电离子到中性分子的分离分析。
特点：与高效液相色谱(HPLC)相比，HPCE具有高灵敏度、高分辨率、高速度、样品少、成本少、应用范围广的特点。
HPCE常用紫外检测器的检测限可达10-15～10-13mol·L-4 ，光诱导荧光检测器则达10-23～10-19 mol·L-4的范围；HPCE 理论柱效极高，其每米理论塔板数为几十万，高者可达几百万乃至千万，而HPLC 一般为几千到几万；分析时间短，通常≤30 min，一般在几分钟内完成，有的约1 min完成，最快可在几十秒内完成，而HPLC的分析时间则多为0.05—1.00 h；所需样品很少，只需毫微升的用量；在分析过程中，由于样品不需进行前处理或只需作简单预处理，并只需要少量的流动相和价格低廉的毛细管。
毛细管柱易于清洗，可重复利用，使成本降低，特别适合于中药的化学分析。
设备：基本结构大致包括：毛细管柱、进样系统、高压系统、检测系统和数据收集系统等。
二:在中药研究中的应用。
中药品种繁多，不同品种间活性成分的含量相差悬殊，成分多样，有效成分受各种因素影响很大；由多种中药组成的复方制剂。
情况更为复杂。
高效毛细管电泳(m)CE)是一种先进的新型分离分析技术，它具有分析效率高、分析速度快、样品用量小、运行费用低、溶剂消耗小、对环境几乎无污染等突出优点，对许多植物药中有效成分的分析十分有效(例如黄酮、生物碱、酚酸、奎宁、香豆素等)。
毛细管电泳在药物分析中的应用及进展
毛细血管电泳法在药物中应用及发展的论文摘要：毛细管电泳（capillary electrophoresis,CE）是离子或荷电粒子以电场为驱动力，在毛细管中按其淌度和分配系数不同进行高效、快速分离分析的一种新技术。
被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题，也是近20年来发展最快的分离技术之一。
本文就CE的发展和工作原理做了有关介绍并对其在药物分析中的应用及相关发展做了毛细管电泳(capillary electrophoresis，CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM)是以高压直流电场为驱动力，内径为25一100娜的弹性石英熔融毛细管柱内荷电粒子按其淌度(mobility)或迁移速度(migrationvelocity)的差异而实现分离的一类液相分离技术。
CE迅速发展于20世纪80年代中后期，可以说是经典电泳技术与现代微柱分离技术完美结合的产物，是分析科学中继气相色谱(gaschromatography)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography，HPLC)之后的又一重大进展，它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平，并使细胞分析乃至单分子分析成为可能，并被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题，也是近20年来发展最快的分离技术之一，它将分离柱效提高到上百万塔板数。
长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机，尤其是多通道集成芯片毛细管电泳技术的出现，极大提高了DNA测序的速度，使人类基因组草图的绘制工作提前三年完成。
CE具有分离效能高、分析速度快、样品用量少、分析对象广，多模式化和环保等特点，已成为一种重要的分离分析手段，在生物、医药、化工、环保、食品等领域具有广阔的应用前景。
1 毛细管电泳在药物分析中的有关应用毛细管电泳的药物分析大致可分为三部分：一是原药的定量，原药中杂质的测定、药剂的分析以及对它们的稳定性的评价等以药品质量管理为目的的测试方法。
毛细管电泳仪应用於中药成分之分析定量
毛细管电泳仪应用於中药成分之分析定量毛细管电泳仪是一种高效液相色谱技术的种类。
它可以将混合物中的药物、蛋白质、细胞等分离出来，达到定量和分析的目的。
由於毛细管电泳仪分离过程中，不需要任何参数调整，可以使得相应样品在短时间内被分离、检测和定量。
因此，集成毛细管电泳仪在中药领域可以实现快速、准确、有效的分析。
中药在世界各地都有着广泛的应用。
但是，由於中药复杂的化学组合和生物多样性，中药品质和成分的准确性是中医药研究的一大难题。
毛细管电泳仪可以在静电场的作用下，将不同的化合物分离开，然后通过检测，得出各种化合物的含量。
这可以帮助确保药材的质量和有效成分的含量符合标准。
毛细管电泳技术在中药领域的应用已经取得了一些显著的成果。
例如，已成功地使用毛细管电泳技术来分离和定量川楝和丹参中的活性成分，它们都是中药材料中的重要成分。
通过使用毛细管电泳仪，可以精确地测量出这些药材中的主要成分，进一步实现对治疗和质量控制的规范化。
毛细管电泳仪的应用需要对毛细管、药剂和分离条件的选择有一定的科学依据。
如选择药剂时，需要考虑每种成分的化学特性，以及它们之间的电性和相互作用。
然后，通过调整毛细管电泳的参数，如pH 值、离子强度、电压、检测波长等，以实现最佳的分离效果。
毛细管电泳仪技术的应用需要配备较高的专业知识和技能，并且需要一定的实验室基础。
同时，毛细管电泳技术在中药定量分析中存在一些局限性。
它在对包含多种成分的复杂药材分析上，由于存在化学成分的交叉作用和选择性的差异，所能够分离出来的化合物并不完全。
这时，一些其他先进的分析方法，如气相色谱、质谱分析和高效液相色谱，都可以提供更综合和准确的结果。
总之，毛细管电泳仪可以在中药成分的分离和定量方面提供有效方法，并在制定药材标准和药品分析监控上发挥着重要作用。
但是，我们还需要为毛细管电泳技术的改进和推广投入更多的工作和研究，以提高其在中药研究中的应用级别和实用性。