手性药物的液相色谱法分析法在药物分析中的应用1
高效液相色谱技术在药物分析中的应用
高效液相色谱技术在药物分析中的应用导语：药物分析是药学领域中的重要分支，它涉及到药物的质量控制、研究与开发等方面。
而高效液相色谱技术（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）由于其高灵敏度、高分辨率、高选择性和广泛适用性等特点，在药物分析领域得到了广泛的应用。
一、HPLC技术原理HPLC技术是一种液相色谱分离方法，其原理是将待测样品通过一定方式注入到固定相柱中，再通过流动相的作用下，样品成分在固定相上发生分离。
在HPLC 系统中，流动相的选择和条件的控制对于药物分析具有重要的意义。
二、药物分析中常用的HPLC技术1. 反相色谱法反相色谱法是药物分析中应用最广的HPLC技术之一。
常用的反相色谱固定相包括C18、C8、C4等。
反相色谱法适用于疏水性药物的分析，其分离效果好，分析时间短。
2. 离子对色谱法离子对色谱法适用于具有阴、阳离子特性的药物分析。
通过加入适当的离子对试剂，可以改变流动相的离子性，使某些离子化合物在色谱柱上发生离子对形成，从而实现对药物的选择性分离。
3. 手性色谱法手性色谱法主要用于对具有手性结构的药物进行分析。
由于手性药物对于人体的作用机制存在差异，因此对药物的手性分析具有重要意义。
手性色谱可通过手性固定相或手性添加剂来实现对手性化合物的选择性分离。
三、HPLC技术在药物质量控制中的应用药物质量控制是药物研究与开发的重要环节，而HPLC技术在药物质量控制中起到了关键作用。
通过HPLC技术，可以对药物的纯度、含量、残留物等进行准确测定，确保药物的质量安全。
四、HPLC技术在药物研究与开发中的应用在药物研究与开发过程中，HPLC技术发挥了重要的作用。
通过HPLC技术，可以对药物的代谢产物、药代动力学等进行研究，从而了解药物在体内的转化和效应。
此外，HPLC技术还可用于药物配方的优化和稳定性研究等方面。
五、HPLC技术在中药分析中的应用中药是我国传统文化的重要组成部分，在现代药物分析中，HPLC技术被广泛应用于中药的质量控制和成分分析。
手性药物及其中间体光学纯度的测定方法与应用
手性药物及其中间体光学纯度的测定方法与应用
一、药物的光学纯度检测
光学纯度指的是某种物质的不同同分界光对应的峰的相对强度的比例称为光学纯度。
该指标是衡量反应物或中间体质量的重要指标之一。
一般来说，光学纯度的检测
方法有多种，其中最常用的方法包括液相色谱法(LC)和气相色谱法(GC)。
液相色谱法(LC)是一种检测药物及其中间体光学纯度的测定方法，主要是通过
分析特定物质在溶剂中吸收率来检测。
LC检测特定物质的光学纯度，我们需要测
量这些物质在溶剂中的吸光度，然后计算这些物质在溶剂中的比例，以获得它们的光学纯度。
气相色谱法（GC）也是一种可用于检测特定物质的光学纯度的检测方法。
GC
检测中，特定物质在特定温度和压力下，会在质谱仪中吸收不同波长的谱图，峰的强度比例反映物质的光学纯度。
二、应用
LC法和GC法都可用于检测药物及其中间体的光学纯度。
特别是LC法普遍用于检
测液体化合物的光学纯度，它可以有效检测到液体状态的物质的不同同分光强度比例；而GC法则普遍用于检测固体和气相化合物的光学纯度，一般不需要液体状转换，因此测量效率更高。
药物及其中间体的光学纯度检测是研制新药及中间体合成程序的重要环节，LC
法和GC法的应用可以有效地提高药物制备的质量，确保新药研制的安全性和有效性，为医疗保健工作提供重要的技术支持。
三、结论
药物及其中间体光学纯度的检测是研制新药及中间体合成程序的重要步骤。
LC法
和GC法都可用于检测反应物或中间体的光学纯度，具有测量灵敏度高、步骤简单
等特点，在研制新药及中间体合成过程中具有重要作用。
药物分子分离
药物分子分离
药物分子的分离主要有以下两种方法：
1.液相色谱法。
这种方法已成为目前手性药物分离测定的首选方法。
其中流动相的选择是手性分析的关键，通常采用正相。
最常用的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种，乙醇和异丙醇起洗脱作用，正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。
不同的醇具有不同的选择性，改变醇的种类可以改变选择性，常用的醇类是乙醇和异丙醇。
2.透析法。
这种方法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的目的。
例如分离和纯化皂貳、蛋白质、多肽、多糖等物质时，可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质。
高效液相色谱法在药品检验中的应用和效果
高效液相色谱法在药品检验中的应用和效果摘要：经典液相色谱是高效液相色谱法的基础，高效液相色谱法的优点由很多，包括分离周期短、传质阻力小、检测灵敏度高、分离效率高等，该方法被视为检验药品的主要方法，其在药物质量控制中具有重要作用。
近些年来，在我国社会经济及医疗设备仪器、设备不断发展、完善和更新的同时，高效液相色谱法发展迅猛，其不仅将经典液相色谱高效色谱优点保留下来，同时也进行了深入分析，并取得了一定成效。
本文主要针对药品检验中高效液相色谱法应用进行分析。
关键词：药品检验；高效液相色谱法；药品含量引言随着我国经济的发展和人民生活水平的提高，人们对药品质量的要求也越来越高，而合格的药品需要严格的检测流程和先进的检测方法。
其中，高效液相色谱技术（HighPerformanceLiquidChromatog-raphy，HPLC）就是目前最常使用的检测手段，其在所有的药品质量检测技术中运用已较为成熟。
1分析高效液相色谱法原理、特点高效液相色谱法的流动相为液体，而高压输液系统是色谱中相对重要的一个分支。
该方法利用高压输液泵，混合不同比例或不同集性的溶剂，将所制流动相泵入到存在固定项的实验色谱柱中，利用样阀注将检测样品注入其中，通过流动相向柱内流通，柱内液体分离充分后，逐步向检测器内渗入并进行有效监测，以此达到试样化学分析。
从原理角度分析，从本质上来讲，两种检测方法并未见显著差异，其通过高效微粒固定相、高灵敏度检测器和新型高压输液泵进行，充分发挥经典液相色谱法优势。
现阶段，高效液相色谱法应用过程中使用了高效色谱填料及小口径柱，通过高压输液泵加快溶剂流通速度，在短时间内通过色谱柱。
因为高效液相色谱法利用具有较高工作效率的高压输液泵，所以其可以快速检测药物成分，并利用色谱柱实施分离，从一定程度上，使分离效果及检测速度提高。
相比于经典柱色谱法，其分离速度更快，有些甚至高达1000倍，高效液相色谱法特点主要包括四点，即高灵敏、高压、高效及高速，所以，临床应用过程中，高效液相色谱法使用范围越来越广。
浅谈高效液相色谱(HPLC)在目前手性药物分析领域中的应用
体进行分离。铜和锌等都是常用的配位金属。氨基酸及衍生物、 多巴胺、氧氟沙星等均可用此类方法分离[4]。由于目前为止还未 发现任何一种试剂可以作为通用型试剂，所以在选择手性试剂时 可能会经过多次尝试，选择分离效果最好的手性添加剂。
2.3 手性衍生化试剂法（CDR） 当满足以下条件时可以使用手性衍生化试剂法：①手性化 合物对映体中有氨基、羟基或羧基等基团，其容易发生衍生作 用；②反应产物具有稳定的化学性质，手性试剂具有稳定的手 性性质，以及较高的光学纯度，不易发生变化，不会在色谱条 件下发生消旋化反应[5]。根据手性化合物对映体中有氨基、羟 基或羧基等基团以及分离效率之间的差别，将反应产物进行分 离。胺类试剂、酰化试剂氯甲酸酯类等均是目前常用的衍生化 试剂。因为该类方法是使用普通色谱柱，因此成本较低，分离 的灵敏度较高。
过去常使用酶消化法、分布结晶法等非色谱方法对手性药 物进行拆分，拆分过程耗时、烦琐，具有较大的不可控性，近 年来随着色谱技术的不断发展，在对手性药物进行拆分方面有 了较为广泛的应用[2]。 目前在手性药物进行拆分时较为常用的 方法有气象色谱、毛细管电泳和毛细管色谱以及高效液相色谱 法等，其中高效液相色谱法（HPLC）以其反应速度快、效率 高、准确性强等特点被广泛应用。
究进展[J].药物分析杂志,2015,35(7):1127-1133. [2] 刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用
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沈阳药科大学,2007. [4] 康自华,阳小成,陈婷.高效液相色谱法在药物分析中的应用[J].广
高效液相色谱（HPLC）是一种在近年来被广泛应用的色 谱分析方法，其与传统色谱法相比，具有效率高、灵敏性高和 分析分离速度快等优点。高效液相色谱法原理上可对所有的 热稳定性差、沸点高和相对分子质量大的有机物进行分离和分 析，其不仅可用于对手性药物的定量分析，而且可用于制备分 离，在手性药物分析领域具有较为广泛的应用。
色谱技术在手性药物拆分中的应用分析
色谱技术在手性药物拆分中的应用分析色谱技术是一种基于物质在固定相和流动相间的物理化学相互作用而进行分离和检测的分析方法。
在药物分析中，色谱技术广泛应用于药物的质量控制、药代动力学研究和药物代谢等领域。
而在手性药物拆分中，色谱技术尤为重要。
手性药物是指分子具有非对称碳原子而存在两种镜像异构体（对映体），即左旋体和右旋体。
这两种对映体在药理活性、药代动力学和毒性等方面可能存在着明显的差异。
对手性药物进行拆分和分离是药物研发和质量控制中的关键环节。
在手性药物拆分中，常用的色谱技术主要包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）和超高效液相色谱（UHPLC）等。
这些色谱技术在手性药物拆分中的应用分析主要包括以下几个方面。
色谱技术可以用于手性药物的鉴定和纯度分析。
通过将手性药物样品与手性拆分柱相互作用，可以将左旋体和右旋体分离出来，实现对手性药物的鉴定和分析。
色谱技术还可以用于检测手性药物的不对称合成过程中是否产生了对映异构体的杂质。
色谱技术还可以用于手性药物的代谢研究。
手性药物在体内往往会经历吸收、分布、代谢和排泄等过程，这些过程可能会导致手性药物的代谢产物产生手性反映。
通过色谱技术的分离和检测，可以对手性药物及其代谢产物进行定性和定量分析，揭示手性药物的代谢途径和代谢产物的手性构型。
色谱技术还可以用于手性药物的体内和体外解离动力学研究。
通过测定手性药物的解离动力学常数和药物在体内的药代动力学参数，可以评估手性药物的药效学、药动学和体内药物相互作用等特性。
色谱技术在手性药物拆分中的应用分析为药物研发和质量控制提供了重要的支持。
通过色谱技术的分离和检测，可以实现手性药物的鉴定、纯度分析、定量分析、代谢研究和解离动力学研究，为药物的合理使用和研发提供科学依据。
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展一、概述高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于药物分析的重要技术，具有快速、高效、灵敏度高和分辨率高等特点。
自20世纪70年代以来，随着色谱理论和仪器技术的不断发展，HPLC已成为药物分析领域中不可或缺的工具。
其利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异，通过高压泵将流动相推动通过装有固定相的色谱柱，实现样品中各组分的分离。
随后，通过检测器对分离后的组分进行检测，从而实现对药物成分的定性和定量分析。
近年来，随着药物分析需求的不断提高，HPLC在药物分析中的应用研究也取得了显著的进展。
在药物质量控制方面，HPLC可用于药物有效成分的含量测定、杂质含量的检测以及药物制剂中各组分的分离分析等。
HPLC还可应用于药物代谢产物的分析，为药物研发提供重要的参考信息。
在药品检验中，HPLC的应用不仅提高了检验的准确性和效率，还有助于实现药品检验的自动化和智能化。
同时，随着HPLC技术的不断发展，其在药物分析中的应用也将不断拓展和完善。
本文旨在综述HPLC在药物分析中的应用研究进展，为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。
1. 高效液相色谱技术简介高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种重要的色谱分析技术，广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等多个学科领域。
作为色谱法的一个重要分支，HPLC以液体为流动相，通过高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱。
在柱内，各成分因与固定相发生作用的大小、强弱不同，而在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，进入检测器进行检测，实现对试样的分析。
HPLC具有“四高一广”的特点，即高压、高速、高效、高灵敏度和应用范围广。
高压是因为流动相为液体，流经色谱柱时受到的阻力较大，需要高压泵来推动流动相通过色谱柱。
药物分析中的手性分析技术应用
药物分析中的手性分析技术应用手性分析是药物分析领域中的重要技术之一。
由于药物分子中存在手性中心，即分子中存在手性异构体，其对于药物活性、代谢和药效等方面具有重要的影响。
因此，手性分析技术在药物研发、质量控制和临床应用中扮演着重要的角色。
本文将就药物分析中的手性分析技术应用进行论述。
一、手性分析技术概述手性分析技术是对手性药物的立体特性进行定性和定量分析的一类分析方法。
常见的手性分析技术包括极性手性色谱法（CSP）、核磁共振技术（NMR）和圆二色光谱技术（CD）等。
这些技术可以对手性药物进行手性异构体的分离和结构鉴定，进而研究手性药物的性质和应用。
二、极性手性色谱法（CSP）在药物分析中的应用极性手性色谱法是一种高效的手性分析方法，广泛应用于药物分析领域。
该方法利用手性色谱柱对手性异构体进行分离，通过优化色谱条件实现手性化合物的定性和定量分析。
极性手性色谱法在药物质量控制、药代动力学研究和药效学等方面发挥着重要的作用。
三、核磁共振技术（NMR）在手性分析中的应用核磁共振技术是一种基于核磁共振现象的手性分析方法。
通过测定手性异构体的化学位移差异，可以实现对手性异构体的身份鉴定和含量分析。
核磁共振技术具有无损、高灵敏度和高分辨率等优点，在药物分析中得到广泛应用。
四、圆二色光谱技术（CD）在手性分析中的应用圆二色光谱技术是对手性分子的光学旋光性质进行分析的一种有效手段。
通过测量手性化合物在紫外-可见光区域的旋光角度，可以确定手性异构体的构型和含量。
圆二色光谱技术具有高选择性和灵敏度，广泛应用于药物分子的手性分析和结构研究。
五、手性分析技术在药物研发中的应用手性分析技术在药物研发中起到了至关重要的作用。
在新药研发过程中，药物化学师需要对合成的手性药物进行手性分析，确定主要手性异构体的存在与含量，并进一步评估其药代动力学和药效学特性。
手性分析技术的应用使得药物研发人员能够更全面地了解手性药物的特性，指导药物设计和优化。
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手性药物的液相色谱法分析法在药物分析中的应用第2组：冯文立0903511107彭新平0903511109李茂山0903511105摘要手性药物在目前使用的药物中占有很重要的地位，而液相色谱法在手性药物拆分中有广泛的应用。
本文就手性药物的分离测定中的液相色谱分析现状、分类、具体应用案例研究进行整理和描述，以此来帮助研究手性药物的药动学过程、药理和毒理作用机制、以及手性药物质量控制。
进而指导临床的应用。
手性药物在临床应用的化学药物中占有相当比例，但绝大多数仍以外消旋体给药，药理学研究表明，手性药物的各对映体在进入人体后药理作用有着明显差异，而市场上手性纯的药物和单一光学异构体的药物急剧增加，因此，手性药物的分离，测定对研究手性药物的药动学代谢过程，药理和毒理作用机制以及手性药物的质量控制等多方面具有重要的意义，本文随手性药物研究中应用较多的液相色谱加以综述。
AbstractChiral drugs play an important role in current use of drug, Moreover, liquid chromatographic method on chiral resolution have been widely used. Therefore This paper by the separation of chiral drugs determination of liquid chromatographic analysis situation, classification, application case studies were finishing and description, so as to be of the chiral drugs help to pharmacokinetic process, pharmacological and toxicological effect mechanism, and chiral drugs quality control and guide clinical application in the final.Chiral drugs in clinical application of chemical drug occupies scale, but most still away to spin body other than medicine, pharmacology study show that the chiral drugs each enantiomers in entering the human body pharmacological effects have obvious difference, and the market to pure drugs and sex of a single optical isomers drugs increase sharply, therefore, the separation of chiral drugs, determination of chiral drugs pharmacokinetic metabolic process, pharmacological and toxicological effect mechanism, and the quality of the chiral drugs control and so on various has an important关键词：手性药物液相色谱法药物分析前言[1]据报道：天然或半合成药物几乎都有手性，其中98%以上为光学活性物；全合成药物中40%为手性药物；目前常用的700多种药物有一半至少含有一个手性中心，其中90%使用外消旋体。
很多内源性大分子物质，如酶、载体、受体、血浆蛋白等都具有手性特征。
手性对映体药物在吸收、分布、代谢与排泄过程中，通过与体内大分子的不同立体结合，产生不同的药理作用和不良反应。
所以，针对这些情况，下面就做一简单的综述。
一、手性药物色谱法的总体情况概述1.手性药物[5]许多药物中存在着分子组成与构造完全相同但分子的立体结构不同的化合物，他们是立体异构体，不能完全叠合但能互为镜像，，如左手跟右手，这就是手性药物。
2.研究背景1992年FDA发布手性药物的指导原则，要求所有在美国上市的消旋体新药，生产者需提供详细报告，说明药物中所含对应体各自的药理作用，药性和效果，显然单一异构体的实验次数比较单纯，经济上更加合算。
目前普遍使用2000多种合成药物中有600余种为手性药物，而活性的单一对应体不足一百种，其他500种都是左右旋混在一起的消旋体药物。
1999年，手性药物市场第一次超过1000亿美元，单一异构体药物销售额达到1150亿美元，占世界药品市场的32%。
[2]3.常用的手性药物测定技术高效液相色谱法，气相色谱法，毛细管电泳，超临界流体色谱法。
高效液相色谱法(HPLC)在80年代初HPLC法迅速成为药物对映体分离和测定最为广泛应用的方法。
特别适用于极性强、热稳定性差的手性药物分析。
HPLC用于手性分离概括起来有两大类：间接（CDR)和直接方法(CSP)。
其中间接法（CDR) 又称为非对映体拆分法或柱前手性衍生化法。
对映体混合在处理中进行柱前衍生成一对非对映体，依其理化性质差异，在非手性柱上得以分离。
[3]优点：1)可采用通用的非手性柱分离；2)通过衍生化可提高检测的灵敏度；3)分离条件简单；分离效果好。
缺点：1)要有可悲衍生化的基因;2)要有高光学纯度的手性试剂；3)衍生化和色谱过程中不能发生消旋作用；直接方法(CSP)：对映体之一与手性固定相或手性流动相添加剂间发生分子间的三点作用，另一对映体发生两点作用：行程短暂的非对映体的结合物，通过洗脱分离。
优点：1）能广泛适用于各类化合物；2）除非必须衍生化，否则无需高光学纯试剂；3）样品处理步骤简单；分离方便，定量分析可靠性较高。
缺点是：1)样品有时也许有柱前衍生；2)对样晶结构有一定的限制；3)迄今为止cps商品已有40多种，但大多价格昂贵。
二、手性药物液相色谱的具体描述1.HPLC法[4]HPLC法在手性药物拆分中的应用远较GC广泛。
目前常用的方法有CDR法手性流动相添加剂（CMPA）法及CSP法。
2.CDR法：[5]（1）手性衍生化反应条件手性化合物对映体的化学结构中应具有易于衍生化的基团，如氨基、羧基、羟基或巯基等；手性试剂和反应产物须有稳定的化学和手性性质，手性试剂还须具有高的化学和光学纯度，且在贮存中不发生改变；手性试剂和反应产物在衍生化反应和色谱条件下应是稳定的，不会发生消旋化反应；衍生化反应生成的非对映体在色谱分离时应能显示高柱效。
（2）分离机制非对映体在色谱系统中的差速迁移与下列因素有关；非对映体分子的手性结构、手性中心所连接的基团和色谱系统的分离效率（包括溶质分子与固定相和流动相之间的作用力，如氢键、偶极-偶极、电荷转移和疏水性等）。
反应产物的构型差异越大，分离越容易。
（3）检测对映体的检测方法随着手性反应所生成的衍生物的不同而不同，常用的有UV 法、荧光法和电化学法等，随着HPLC-MS联用技术的发展，也可采用MS检测。
手性试剂的种类目前常用的有酰化试剂、胺类试剂、异硫氰酸酯类、氯甲酸酯类、邻苯二醛和手性硫醇等。
3.CMPA法[6]（1）手性包含复合法经常采用的添加剂是环糊精（CD）和手性冠醚。
环糊精对疏水性和亲水性药物对映体都具有很强的包合作用。
此法已用于分离氨基酸及其衍生物、巴比妥类、氯胺酮、苯妥英代谢物、美芬妥英及其代谢物、哌嗪类镇痛药、伪麻黄碱、去甲羟基安定等。
采用的固定相常为ODS、CN、C8、苯基、硅胶等。
检测方法多用UV和电导检测法（ECD）。
（2）手性配合交换法将手性金属配合剂加入HPLC流动相中，形成三元非对映体配合物，此配合物与固定相发生立体选择性吸引或排斥反应，由于其结构稳定性和能量的差异，使对映体得以分离。
配合交换系统使用水性流动相和疏水性固定相，洗脱顺序与反相HPLC一致，可采用反相柱，UV检测。
溶质疏水性增加，保留时间延长。
常用的手性配合试剂多为氨基酸及其衍生物，配位金属有Cu2+、Zn2+、Ni2+、Cd2+等。
该法可用于分离氧氟沙星、氨基酸及衍生物、苯妥英类代谢物、多巴胺等。
（3）手性离子对色谱法其原理是在HPLC流动相中加入反离子，使之与流动相中对映体生成非对映的离子对复合物，由于这些离子对复合物具有不同的稳定性和分配性质，在与固定相发生静电、疏水或氢键作用后，产生差速迁移而得以分离。
此法可用于拆分氨基酸类、β-受体阻断剂、羧酸及磺酸类等化合物。
4.CSP法[7]将手性试剂化学键合到固定相上与药物对映体形成非对映体对复合物这种固定相称作CSP。
在CSP表面所形成的非对映体对可根据其稳定常数不同而获得分离，分离的效率和洗脱顺序取决于复合物的相对强度。
CSP的主要类型有蛋白质键合相、手性聚合物键合相、环糊精键合相和Pirkle型手性固定相等。
对于体内手性药物的分析，单独采用CSP法往往不能排除内源性杂质的干扰，采用非手性柱-手性柱联用技术能克服此不足。
此法将非手性柱与手性柱以柱切换系统或直接相连系统连接起来，经预处理的样品进样后，首先随流动相载入非手性柱上，被测手性药物与干扰成分分离，接着被测手性药物进入手性柱，不受干扰地各自拆分。
此法不仅能提高CSP的分离能力，而且能延长CSP柱的使用寿命。
三、具体应用近年来，对手性药物的拆分定量分析进行了广泛深入的研究。
其中，对生物体液中药物对映体的分离分析，有利于了解各种对映体的药代动力学、体内代谢过程和生物利用度。
因此对手性药物对映体的拆分也是HPLC分析的热点。
手性HPLC拆分法是以现代HPLC技术为基础引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异而进行分离。
HPLC法拆分手性药物对映体可分为直接法和间接法。
前者是将不对称中心引入分子间，可分为手性流动相添加剂(CMP)法和手性固定相(CSP)法；后者又称为手性试剂衍生化(CDR)法，它是将不对称中心引入分子内。
手性试剂衍生化法是将对映体经手性试剂衍生，生成非对映异构体后，利用常规HPLC方法进行分离和测定。
适用于不宜直接拆分测定的化合物如手性脂肪胺类、醇类等。
该法分离效果好，分离条件简便，但对手性衍生试剂的要求较高，操作比较麻烦，多在其它方法无法实现时才采用。
对生物样品中对映体拆分过程中，由于内源性物质及代谢产物的干扰，单用HPLC分析，易造成谱峰重叠，不能直接分析体内手性药物。
目前，使用多柱偶联技术已成功解决了该类问题。