葡萄糖参考方法
葡萄糖检验方法化学
葡萄糖检验方法化学葡萄糖检验方法是一种常见的临床化验方法，用于检测人体内血糖水平，是评估糖尿病、高血糖和低血糖等疾病的重要手段。
化学方法是其中一种常见的检验方法，本文将介绍葡萄糖的化学检验方法，包括其原理、步骤、常用试剂和设备等内容。
一、葡萄糖检验方法的原理葡萄糖在化学检验中通常采用的方法是酶法测定。
其原理是利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时还原辅酶将还原成辅酶。
还原辅酶与二甲基氨基苯磺酸钠在碱性条件下生成紫色化合物，用分光光度计在546nm波长下测定其吸光值，从而得到葡萄糖的含量。
二、葡萄糖检验方法的步骤1.标准曲线的制备：分别取不同浓度的葡萄糖标样，用蒸馏水稀释成一系列标样液，按步骤加入试管中，然后加入相应的试剂。
2.血浆或尿样的处理：将待测样品离心去蛋白，获得上清液进行检测。
3.反应过程：将标样液与试管中的试剂充分混合后，放入37摄氏度水浴中进行恒温反应。
4.测定吸光值：用分光光度计在546nm波长下测定样品的吸光值，根据标准曲线计算出样品中的葡萄糖含量。
三、葡萄糖检验方法的常用试剂和设备1.试剂：包括葡萄糖标样、葡萄糖氧化酶、辅酶、二甲基氨基苯磺酸钠等。
2.设备：分光光度计、水浴仪、离心机等。
葡萄糖检验方法化学的实验操作中需要严格掌握试剂用量、反应温度和时间等关键因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
实验人员还需要注意操作过程中的安全，避免与试剂接触，确保个人安全。
在临床应用中，葡萄糖检验方法的化学测定为医生提供了重要的实验数据，有助于评估病人的血糖水平和疾病状况，为疾病的诊断和治疗提供参考依据。
对葡萄糖检验方法化学的研究和掌握具有重要意义。
通过本文对葡萄糖检验方法化学的介绍，希望能够使读者对该检验方法有一个清晰的了解，从而为临床实验工作提供帮助和指导。
也希望医学工作者们能够不断深入研究，推动葡萄糖检验方法的不断改进和完善，为临床医学实践提供更加准确、可靠的数据支持。
葡萄糖测定方法操作规程
葡萄糖（GLu）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：葡萄糖（GLu）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质，也是组织细胞的主要成分。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖症状。
1.病理性高血糖：（1）原发性糖尿病（2）内分泌疾病：嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤；（3）胰腺疾病：急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病（血红蛋白沉着症）等；（4）抗胰岛素受体抗体与有关疾病：棘皮症、Wernicke’s脑病。
2.病理性低血糖：（1）胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏；（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少；（3）严重肝病患者，肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。
【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。
D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品：葡萄糖溶液。
*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【试剂准备】R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内，在2℃~8℃有效期为一年。
糖尿病葡萄糖指标参考值表
糖尿病葡萄糖指标参考值表
糖尿病葡萄糖指标参考值表，是根据糖尿病患者的血糖水平制定的参考标准。
根据世界卫生组织的定义，正常的空腹血糖值应该在3.9-6.1mmol/L之间。
而对于糖尿病患者来说，他们的空腹血糖值应该控制在7.0mmol/L以下。
以下是糖尿病患者常见的葡萄糖指标参考值：
1. 空腹血糖值：正常值为3.9-6.1mmol/L，糖尿病患者应控制在7.0mmol/L以下。
2. 餐后血糖值：正常值为小于7.8mmol/L，糖尿病患者应控制在10.0mmol/L以下。
3. 糖化血红蛋白值：正常值为4%-5.6%，糖尿病患者应控制在7.0%以下。
4. 糖尿病患者血糖控制目标：空腹血糖值应低于7.0mmol/L，餐后2小时血糖值应低于10.0mmol/L，糖化血红蛋白值应低于7.0%。
以上是常见的糖尿病葡萄糖指标参考值，糖尿病患者应在医生的指导下进行血糖控制。
定期检查血糖水平，及时调整治疗方案，可以有效预防并控制糖尿病的进展。
- 1 -。
0GTT实验方法,参考值和临床意义
0GTT实验方法,参考值和临床意义
糖耐量试验，也称葡萄糖耐量试验，是诊断糖尿病的一种实验室检查方法。
主要有静脉和口服两种，前者称IVGTT，后者称OGTT。
IVGTT只用于评价葡萄糖利用的临床研究手段，或胃切除后，吸收不良综合症等特殊病人。
OGTT
则是临床最常见的检查手段。
OGTT试验、方法、正常值、临床意义是：
（1）OGTT试验：即葡萄糖耐量试验，是指人体对葡萄糖的耐受能力。
（2）方法
①进行OGTT试验之前每天糖类的摄人量不少于150g，有正常的体力活
动至少3d。
②试验前过夜空腹8〜14h。
早上不吃饭，不服降糖药，可以饮水。
③抽空腹血后，喝葡萄糖水200〜300ml（含75g无水葡萄糖），于
5min内喝完，记录喝第一口糖水的时间。
喝糖水后不要大运动量活动和吸烟，不喝茶及咖啡。
④服糖后在30min、lh、2h、3h分别抽血1次，共4次。
⑤取血后应尽早将标本送检。
（3）正常值
①空腹血糖3.9〜6lmmol/L。
②30min血糖<11lmmol/L。
③lh血糖<11lmmol/L。
④2h血糖<7.8mmol/L。
（4）临床意义：作为糖尿病诊断的标准。
葡萄糖测定标准操作规程
葡萄糖测定标准操作规程1.检验原理：（葡萄糖氧化酶法）葡萄糖氧化酶（GOD）利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。
过氧化物酶（PoD）在色原性氧受体4-氨基安替比咻（4-AA）和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色酶类化合物，即Trinder反应。
红色醍类化合物的生成量成正比。
D-葡萄糖+。
2+”2。
建,•＞葡萄糖酸+%。
22%。
?+KAA+对羟基苯甲酸钠pod＞红色醍类物质+4H2O2.试剂组成成分保存8小时，2〜8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融!4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.1在给定的样本/试剂比例和条件测定时，本试剂线性范围可达25mmol∕L0样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释倍数为10.7. 2.单位换算：mg∕dl=mπιol∕L×188.检验方法的局限性8.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在500nm处吸光度大于0.200时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：Rh无色或淡红色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在50Onm处，光径ICm时，空白吸光度AWO.2009.4线性范围：试剂的线性区间为[2.2-25]mmol∕L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.2-4.7]πιπκ)l∕L区间内，线性绝对偏差不超过±10U∕L;(4.7-25)mmol/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：使用参考物质测定时，当浓度W4.16mmol∕L,实测值与标识值偏差应不超过±0.833mmol∕L,当浓度＞4.16mmol∕L,实测值与标识值偏差应在±20%范围内。
葡萄糖耐量试验参考范围
葡萄糖耐量试验参考范围好啦，今天咱们来聊聊葡萄糖耐量试验，听起来是不是有点复杂？其实没那么可怕，咱们就把它当成一次有趣的“糖分大冒险”。
想象一下，咱们的身体就像一辆车，而葡萄糖就是车子的燃料。
你想啊，车子得有足够的油才能跑得动，咱们的身体也一样，得有足够的糖分来保持活力。
不过，问题来了，咱们的身体能不能好好处理这些糖分呢？这就得靠葡萄糖耐量试验来揭晓了。
咱们得知道，葡萄糖耐量试验的主要目的是检查身体对糖分的反应。
一般来说，医生会让你空腹，之后喝一杯超甜的葡萄糖水，嘿，听起来是不是就有点恶心？但没关系，咱们的目标就是看看你身体里的“车子”能不能顺利把糖分转化成能量。
试验后，医生会定期抽血，检查你血液中的葡萄糖含量。
根据不同的时间点，看看你是“顺风车”，还是“抛锚”的状态。
咱们说说这个参考范围。
正常情况下，空腹时你的血糖应该在70到100毫克每分升之间。
喝完葡萄糖水后，两小时内，正常的血糖水平应该在140毫克每分升以下。
如果超出这个范围，那就得考虑一下了，可能是糖尿病的前兆。
哎，真是让人心慌慌呀，毕竟谁都不想被“糖”给困住。
试验的时候，医生也会问你一些问题，比如你最近的饮食习惯、运动情况之类的，嘿，这可不是在审问你，而是在收集信息帮助你。
毕竟每个人的身体状况都不同，咱们不能拿一个标准去套每个人嘛。
想象一下，吃了一大堆甜甜圈的你，跟一个坚持健身的朋友，结果肯定不一样呀，对吧？葡萄糖耐量试验就像是身体的一次“体检”，它让你了解自己对糖分的处理能力。
就好比你把车开到修理厂，看看有没有需要修理的地方。
如果你平时吃得比较多，又缺乏运动，这次试验可能就会给你敲响警钟。
听起来有点可怕，但其实这也是一种提醒，别把身体逼得太紧，适当放松一下，给自己加点“油”。
咱们也不能忘了生活中的小技巧。
比如说，多吃一些富含纤维的食物，像蔬菜、水果、全谷物，这些可是天然的“润滑油”。
想象一下，当你的车子加了好油，开起来是不是顺畅多了？同样，给身体加点好东西，血糖水平自然就会更稳定。
用GOD法测定血清中葡萄糖浓度
酶法：葡萄糖氧化酶法
（一）化学法
方法
磷钼酸法 （Folin-Wu）
类型
原理
定量 G+Cu2+→Cu2O↓ 分光 Cu2O +磷钼酸试剂 →蓝色钼化合物
（430nm）
用途及备注
稳定、准确、但对 葡萄糖无特异性，
受血中非糖还 原物 质的影响。
邻甲苯胺法
定量
G+邻甲苯胺→蓝绿色的席弗(Schiff)碱 （630nm）
思考题：
a) 本实验原理为酶促化学反应，为何未加终止剂 终止酶的反应？
b) 本实验涉及显色反应，该反应与血清碱性磷酸 酶活力测定中的显色反应有何异同？
c) 为何不同检测方法所提供的空腹正常血糖参考 值存在差异？
葡萄糖氧化酶法： 3.89~6.11mmol/L Folin-Wu法： 4.4~6.7mmol/L 邻-甲苯胺法： 3.89~6.11mmol/L
③ 严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白 血滤液，然后再进行测定。
临床意义：
生理性高血糖：摄入高糖食物，情绪紧张
病理性高血糖：
①糖尿病
②内分泌腺功能障碍
③颅内压增高
④脱水引起高血糖
生理性低血糖：见于饥饿和剧烈运动
病理性低血糖：特发性功能性低血糖，依次是药源性，
肝源性和胰岛素瘤等。
❖调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮 质激素和肾上腺素。
血糖的来源、去路
血糖水平恒定的生理意义
保证重要组织器官的能量供应，特别是某些以 葡萄糖供能的组织器官。 ➢ 脑组织不能利用脂酸，正常情况下主要以来葡 萄糖供能； ➢ 红细胞没有线粒体，完全通过糖酵解获能； ➢ 骨髓及神经组织代谢活跃，经常利用葡萄糖供 能。
临床生化检验 第三章 葡萄糖的测定
糖代谢紊乱－－高血糖和糖尿 脂类代谢紊乱－－高血脂、酮症酸中毒 体重减轻和生长迟缓 微血管、神经病变和白内障的发生
糖尿病的诊断
临床症状
糖尿病的诊断
生化诊断
血糖的测定 尿糖的测定 葡萄糖耐量试验
一、血糖的测定
1．出现糖病症状加上随机血糖浓度≥11.1mmol/L。 2．空腹血糖≥7.0mmol/L。空腹指至少8h内无含热量食 物的摄入。 3．口服葡萄糖耐量试验（OGTT） ，2h血糖浓度 ≥11.1mmol/L。
空白管（B） 标准管（S） 测定管（U）
－
－
0.1
－
0.1
－
0.1
－
－
3.0
3.0
3.0
混匀，置沸水中煮沸10min，取出置冷水中冷却5min， 在630nm处比色，以空白管调零，读取各管吸光度。
计算
血清葡萄糖 (mmol/L)
测定管吸光度 标准管吸光度
5
参考值
临床意义
评价
回收率98.6%～99.6%，线性范围可达30.8mmol/L， 日 内CV2%左右，日间CV不大于4%。特异性强，但不及氧化 酶法。
第一节 体液葡萄糖测定 一、己糖激酶法（ＨＫ法）（理解） 原理：
葡萄糖＋ATP ＨＫ 葡萄糖-６-磷酸＋ADP 葡萄糖-6-磷酸＋NADP＋ G-6-PD ６-磷酸葡萄糖内酯 +NADPH
NADPH在340nm有吸收峰
评价：
本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，适用于自动化 分析，为葡萄糖测定的参考方法，但是试剂较贵。
生理性：饥饿和剧烈运动
低血糖
病理性:药源性、肝源性、胰岛素瘤等
三、邻邻甲苯胺法（理解）
原理：
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测定葡萄糖的推荐参考方法1.样本处理、保存和储藏a：在处理任何葡萄糖溶液中最基本的预防措施是防止糖分解。
这种方法设计用于无细胞的样本。
为了更好地保持葡萄糖的最初浓度必须避免微生物和细菌污染，这是样本分解的主要来源，少量样本的蒸发也可能产生严重问题，由于化学污染能在很短时间内产生，因此，在处理和保存样本时严格要求样本瓶清洁、无菌、密闭。
b:葡萄糖标准溶解稀释在1g/L安息香酸溶液中，可抗微生物污染，它在4℃可长期保存在室温下可稳定数周。
葡萄糖标准的水稀释液或其他稀释液和复溶冻干品对糖分解非常不稳定，须经过无菌或加入防腐剂处理。
c：用于这个分析的样本所使用的生物样品严格限定为血清和血浆，两种标本在制备与保存中要求特殊的防腐抗细菌学糖酵解以及细胞学伤害。
冻干血清产品不一定分离这些污染物，通常比新鲜收集的阴性血清糖酵解速度快。
血液在无菌条件下收集，即使使用了防腐剂，过期控制与校准品样品也必须进行过滤以除掉组织细胞和微生物，由于细胞糖酵解的完全抑制剂有限，许多这样物质存在干扰问题，因此血浆与血清必须离心确保产生与细胞分离的血清。
血清可以保存到任何时间。
在含有抗凝剂或收集的血清中加入足量防腐剂。
肝素、草酸盐、柠檬酸和EDTA不干扰这项分析。
NaF是安全防腐剂，但是作为高浓度的专用抗凝剂不可避免的产生血浆不稳定并干扰这项分析。
肝素以外的抗凝剂导致血样本中细胞内水和其他物质的渗透压的改变，最终导致血浆葡萄糖浓度的改变。
d.血中NaF在2.0mg/ml浓度是推荐防腐浓度。
NaF最好与1mg/mlEDTA-Na2盐联合使用，这个混合物在常规真空采血管中是可能的(加到收集的血清或血浆中，1mg/ml NaF浓度足够)。
e：收集的新鲜样本必须立即混匀，轻轻地溶解干的抗凝剂，防止冷冻血浆中Fb 的后期问题.f样本长期储藏的关键是无菌、密闭、低温和远离细胞或化学污染物。
超过48h 的保存，即使已经经防腐处理，样本也应在容器中冷冻，确保密闭和防止水蒸气渗入；选择深色小玻璃瓶。
通过特定的合适的螺旋帽可获得一个很好的密封，在小于30℃的水容箱中冰冻样本迅速融化。
在同一瓶反复溶解，样本反复取样，增加样本潜在分解、蒸发和污染的危险。
2.要求和材料说明a:量值测量（1）天平精密度（2）天平准确度（3）样本转移（量取）b:分光光度计测量（1）比色杯系统（a）固定位置（b）单一杯子（c）单一1.0cm比色杯（2）340nm分光光度计特性（a）光谱溶液、波长和杂散光：340nm时半波宽≤8nm。
重复测定340nm处波长精密度和准确度在±2nm之间，340nm处杂散光<0.1%，这些影响因素的总和被消除时不降低仪器对超浓度NADH的溶液的线性反应性，NADH溶液吸光度的实验在340nm时，吸光度在正常设定狭缝宽度时为1.0±10%范围内。
适当的空白溶液时在仪器半波宽2倍外时不改变超过±0.5%。
（b）稳定性：低于噪音，每小时吸光度漂移<0.001Abs，在要求的狭缝和能量水平时，在1.0 Abs时，每小时吸光度漂移<0.003 Abs。
（c）分光光度计不精密度，包括噪声。
对0.000--1.500 Abs范围甚至更宽时，重复读数时的变异率（1SD）<0.0005 Abs或任意吸光度读数的0.25%。
（d）分光光度计线性：在0.100-1.000 Abs之间的任何水平，测定吸光度的线性斜率是最好的，通过调零后，应<0.001 Abs或小于吸光度的0.5%。
在葡萄糖分析或NADH的精确稀释量的吸光度测量的定标反应曲线的测量中，（分光光度计元件导致的）相应浓度吸光度的变化率的测量误差，与0.2-1.000 Abs之间的测定的变异率0.5%没有明显不同，<0.2 Abs时，相应影响在均值变化率+0.001 Absc：玻璃制品（1）所有玻璃制品必须化学清洁，清洁程序包括至少用（）冲洗2遍，蒸馏水和在清洁环境中干燥。
（2）（3）d：化学说明书：（1）试剂水：（2）无CO2水：试剂水在敞开的长颈烧瓶中煮沸15分钟，用透明的玻璃瓶盖或用碱石灰帽盖住冷却，直到使用前。
（3）葡萄糖标准：用国家标物局有证D-葡萄糖标准品：SRM917配制，葡萄糖标准液的原有尖顶瓶储存于实验室的充满无水硫酸钙的真空干燥容器中。
（4）化学试剂（a）硫酸锌，7个结晶水，ACS说明书（b） Ba(OH)2,8H2O, ACS说明书（c）醋酸Mg,4 H2O, ACS说明书（d）Tris base， reagent grade（e） Tris -HCL reagent grade（f）β-NAD+(氧化型)，2 H2O,纯度>98%，常规称重。
（g） ATP-Na2.3 H2O,纯度>98%，常规称重。
（h）牛血清AlB,第五部分，纯度96-99%。
（i）葡萄糖-1-磷酸，二钠盐，4 H2O，纯度>98% （j） D-果糖，NAS/NRC说明书（k）安息香酸：见ACS说明书（5）酶说明：（a） HK(ATP:6-磷酸D-葡萄糖转移酶；EC 2.7.1.1），酶来源于酵母，要求高纯度，4.d中给出恰当的酶检验数据，注意4.d(2).（b） G6PDH(6-磷酸-D-葡萄糖：NAD（P）氧化还原酶；EC 1.1.1.49），酶来源于肠膜明串珠菌，可以悬浮于硫酸胺液或为冻干粉，要求高纯度，4.d中给出恰当的验证数据，注意4.d(2).3.血清或血浆中葡萄糖测定程序：a:原液标准液的配制：（1）安息香酸稀释液（1g/l）：在大容量瓶中用2000ml热的试剂水溶解2.0gACS级安息香酸，彻底混匀，盖盖冷却至室温。
全部液体倒进试剂瓶，密闭保存于室温。
（2）葡萄糖标准贮存液（10g/l）：称取5.000±0.002gNBS无水D-葡萄糖，放入500ml class A级容量瓶中，用安息香酸稀释液冲洗和稀释葡萄糖至容量瓶的2/3瓶处，旋转使葡萄糖完全溶解，加安息香酸溶液至500ml标记线下1cm处，把容量瓶放20℃±1℃水槽中，水没至瓶颈处，密闭，用安息香酸稀释液补足前平衡溶液30分钟。
塞紧颠倒混匀至少10次，每一次颠倒、旋转倒置容量瓶10秒。
每125ml一份，放入带有螺旋盖的硼硅酸盐的瓶中，盖紧并标记，还要注明日期。
保存在4℃或-20℃。
一瓶用于制备1整套系列标准液。
如果处理得当，准备充分，这种标准原液可以长期稳定，但还是建议每6个月重新配制。
在一个新批号开始使用之前，从新标准原液配一个新的mg/dl(11.10ml/l)工作标准，与旧的系列标准在一批测试各双份比较它们的变异。
（3）葡萄糖工作标准液（a）配制一套纯品葡萄糖的系列工作标准液：葡萄糖标准原液和安息香酸稀释液在20℃+1℃的水浴箱中平衡30分钟，按下表转移等份的葡萄糖原液至100ml classA 容量瓶中，用安息香酸稀释液稀释至接近刻度，在水浴箱中平衡15分钟后调至刻度线。
为配制标准需准备一特殊系列的安息香酸稀释液中一部分是用于配制试剂空白的，它用作“0”浓度标准液。
一次配制一套完整系列标准液，如果任何一个浓度减少或有怀疑，整批都将被替换。
旧的和新的系列标准通过一个分析批双份分析测试进行比较。
（b）工作标准液贮存于4-ounce聚乙烯螺旋帽瓶中，放4℃不超过1个月。
塑料存贮瓶的清洗很关键，交叉污染不被发现，对测定的影响会从一种溶液倒另一种溶液。
尽管安息香酸是一种很好的抗常规糖酵解微生物的防腐剂，它不能防御严重的细菌污染。
（c）在每一分析日中，要求平衡至25℃的工作标准重新分到干净管中，原液瓶重新放回冰箱。
b试剂配制（1）沉淀蛋白试剂(a)ZnSO4溶液（22g/l）：用刚配好的热的无CO2蒸馏水大约900ml溶解22g ZnSO4。
7 H2O，溶液冷却至室温后，移到1L容量瓶中，用无CO2水稀释至1000ml充分混匀，移至玻璃瓶，密闭保存。
(b)饱和Ba(OH)2溶液，用刚配好的热的无CO2蒸馏水约950ml溶解刚开瓶称取的80g Ba(OH)2。
8H2O，溶液冷至室温，移到1L容量瓶中，用无CO2蒸馏水稀释至1000ml，充分混匀，转移到存储瓶中，存储瓶用短圆柱形指示型SIO2凝胶（硅胶）保护碱石灰咀，咀的寿命相当短，碱石灰必须经常更换。
允许超量的Ba(OH)2和不溶解的碳酸盐沉淀过夜或几天，必要时，稀释前清除它。
（d） Ba(OH)2溶液，0.11N。
如果不干扰沉淀，转移245ml饱和Ba(OH)2到1L容量瓶，用无CO2蒸馏水稀释至1000ml，用这个稀释的Ba(OH)2溶液滴定10ml硫酸锌溶液用酚酞做指示剂（0.5%指示剂溶解于95%乙醇中，2滴）滴至淡粉色为终点，结果应为10ml ZnSO4溶液需要10±0.1ml Ba(OH)2溶液滴定。
若超过这个范围，在Ba(OH)2溶液中根据大致计算量加入适量Ba(OH)2或无CO2水，重新滴定。
转移校正好的Ba(OH)2溶液至使用碱石灰咀和苏打水瓶或细水瓶管试剂瓶中，每个月用滴定法检查该溶液当量浓度。
（2） 25℃时，PH7.5的0.1m Tris buffer,含5.0mmol/l乙酸镁（a） TRIS-HCL 原液，在2.0L 的容量瓶中用试剂水溶解31.52g TRIS-HCL并稀释到2000ml。
（b）Tris base原液：在500ml容量瓶中用试剂水溶解6.06 g Tris base 并稀释至500ml。
配制酶试剂时需新鲜配制这个原液。
（c）PH7.5 Tris -Mg buffer，在一个大烧杯里，混合800ml Tris -HCL液和200ml 的Tris base溶液，然后在溶液里溶解1.1g醋酸镁。
在25℃测定混合液的PH，必要时，用Tris -HCL液或Tris base溶液调至PH7.5±0.1。
用0.45μm滤菌膜过滤溶液，到一个无菌带螺旋帽的硼硅酸盐玻璃贮存瓶中，配酶试剂时要新鲜配制，贮存于4℃冰箱。
C：酶试剂的准备与分析（1）酶试剂成分的本质分析(a)试剂（ⅰ）Tris -白蛋白：在250ml容量瓶中用Tris -Mg buffer溶解0.5g牛血清白蛋白，校正至250ml。
储存在大约4℃冰箱。
（ⅱ）NAD+原液：在Tris -Mg缓冲液中溶解0.9952g氧化型NAD+，补足至250ml，在4℃冰箱保存，配制当天测定。
（ⅲ）ATP原液：在Tris –Mg buffer中溶解0.8268g ATP二钠盐，并补足至250ml，保存于4℃冰箱，配制当天测定。
（ⅳ）葡萄糖，用0.1%安息香酸稀释60ml葡萄糖标准原液至100ml，保存在4℃冰箱。
（ⅴ）己糖激酶原液：在25℃称量或用Darrow和Colowick的方法或使用6-磷酸葡萄糖脱H酶的方法测定酶含量获得总活性1250U的己糖激酶，转移至250ml 酶的容量瓶，用Tris –Mg buffer调至刻度，放在4℃冰箱保存，配制当天分析。