硫酸脱氢表雄酮化学发光微粒子免疫法定量测定试剂的研制_黄明聪
微粒子化学发光酶免疫法与放免法测定促甲状腺激素的临床价值比较
微粒子化学发光酶免疫法与放免法测定促甲状腺激素的临床价值比较闻海霞;李忠萍【期刊名称】《临床荟萃》【年(卷),期】2002(017)024【摘要】目的为了比较微粒子化学发光酶免疫法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)及放射免疫法(radiomunoassay,RIA)用于评价甲状腺功能的临床价值.方法分别采用这两种方法对50例正常人(对照组)、50例甲状腺性甲亢患者(甲亢组)及50例原发性甲减患者(甲减组)进行促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、FT3、FT4、TT3、TT4等测定.结果用CLIA测定sTSH甲亢患者与对照组比较具显著性差异,而用RIA测TSH则甲亢与对照组没有差别.对甲减患者,sTSH、TSH与对照组比较均具显著性差异.结论表明CLIA测sTSH对甲状腺性甲亢诊断更具有临床价值.【总页数】2页(P1427-1428)【作者】闻海霞;李忠萍【作者单位】连云港市第二人民医院,内分泌科,江苏,连云港,222023;连云港市第二人民医院,内分泌科,江苏,连云港,222023【正文语种】中文【中图分类】R.446.6【相关文献】1.全自动微粒子化学发光免疫分析法与放射免疫分析法测定血清促甲状腺激素的对比分析 [J], 赵静峰;罗天敏;王攀2.微粒子化学发光酶免疫法测定sTSH与放免法测定TSH临床价值比较 [J], 闻海霞;李忠萍3.微粒子化学发光酶免疫法定量测定甲胎蛋白的初步临床应用 [J], 刘娟4.微粒子酶免疫法测定血清泌乳素及其临床意义 [J], 王旭莹5.化学发光微粒子免疫法与电化学发光法测定促甲状腺激素的性能比较 [J], 范婵;陈姝;龚国忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)的研制及性能评价
硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)的研制及性能评价苏立;贾晨路【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2017(009)005【摘要】目的研制硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法),并对其试剂盒性能进行评价. 方法利用竞争抑制法,对原料进行筛选.建立硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒.并分别对本试剂盒的准确性、最低检测限、线性、重复性、特异性、参考范围及样本对比方面进行评价.结果经过筛选,选用反应模式:磁微粒包被羊抗鼠IgG-鼠抗硫酸去氢表雄酮单克隆抗体-吖啶酯标记DHEAS-BSA;对此方法建立的试剂盒进行方法学评价,最低检测限可达1.84 μg/dL,线性在0～1 500 μg/dL 之间,相关系数r=0.999 8,准确度的回收率为105.38％,重复性均小于8％;建立了健康人参考范围(女性:47.9～407.5 μg/dL,男性97.1～522.5 μg/dL),与西门子ADVIA Centaur测定结果显著相关,线性方程为y=1.078 13+0.992 16x,相关系数r=0.994 7,2种试剂盒的测定结果具有较高的一致性. 结论本研究建立的硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)各项性能均达到了临床检验的要求,为国产化66硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)的研发奠定了基础,有望用于临床血清硫酸去氢表雄酮的检测.【总页数】7页(P347-352,366)【作者】苏立;贾晨路【作者单位】郑州大学第三附属医院新生儿疾病筛查中心,河南,郑州450052;郑州大学第三附属医院新生儿疾病筛查中心,河南,郑州450052【正文语种】中文【相关文献】1.硫酸脱氢表雄酮化学发光微粒子免疫法定量测定试剂的研制 [J], 黄明聪;张晓琍;林光华;翁祖星;孙旭东;葛胜祥;张军2.血清硫酸去氢表雄酮在前列腺癌中的临床应用 [J], 黄燕娣3.银屑病患者血清去氢表雄酮和硫酸去氢表雄酮水平的测定及临床意义 [J], 叶有兴;康丽;李莉4.硫酸去氢表雄酮促宫颈成熟的临床观察 [J], 刘玲珍5.硫酸去氢表雄酮在分娩活跃期中使用体会 [J], 张苔因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
微粒子化学发光分析仪检测TESTO的性能验证
微粒子化学发光分析仪检测TESTO的性能验证肖辉建;王秋菊;车思思;王艺娜;王思敏;李向庭;庄岳鹏【期刊名称】《医疗卫生装备》【年(卷),期】2016(037)003【摘要】目的:验证贝克曼ACCESS2微粒子化学发光仪检测睾酮(TESTa)的性能,同时探讨适用于贝克曼ACCESS2微粒子化学发光分析系统性能的验证方案.方法:以TESTO检测为例,参考美国临床实验室标准化委员会(NationalCommittee for Clinical Laboratory,NCCLS)文件,制定一套实验方法验证方案,对方法的精密度、正确度、分析测量范围、生物参考区间、携带污染率进行验证.结果:重复性精密度高低水平各为5.06％和2.13％,中间精密度高低水平各为7.59％和6.75％;正确度的偏倚为2.94％～8.80％;分析测量范围为0.22～10.4 ng/ml;参考范围为男性2.19～7.52 ng/ml,女性0.08～0.59 ng/ml;携带污染率为0.42％.结论:贝克曼ACCESS2微粒子化学发光分析仪精密度好、正确度高、分析测量范围广、厂家提供的参考区间可转移至临床实验室使用、携带污染率低;各项验证指标均符合厂家提供的要求,验证全部通过,且验证方案简便、有效.【总页数】3页(P90-92)【作者】肖辉建;王秋菊;车思思;王艺娜;王思敏;李向庭;庄岳鹏【作者单位】362000福建泉州,解放军180医院检验科;362000福建泉州,解放军180医院检验科;362000福建泉州,解放军180医院检验科;362000福建泉州,解放军180医院检验科;362000福建泉州,解放军180医院检验科;362000福建泉州,解放军180医院检验科;362000福建泉州,解放军180医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R318.6;TH776【相关文献】1.化学发光微粒子免疫分析法检测性激素6项的性能验证 [J], 罗立梅;张彬;陈刚2.微粒子化学发光法检测 TPO-Ab及 TG-Ab的实验室性能验证 [J], 耿伏生;张卫庆;苏丽霞;李艳宁3.AutolumiS3000型微粒子化学发光分析仪\r检测乙肝表面抗原的性能评价 [J], 邵淑丽;丛海燕;曲业敏;耿建利;孙胜波;王明义4.电化学发光法检测鳞状上皮细胞癌抗原的性能验证及与化学发光微粒子法检测的一致性评价 [J], 陈芳;刘光霞;侯瞻;卢亚敏;边艳珠5.西门子ADVIA Centaur CP全自动化学发光免疫分析仪检测血浆超敏肌钙蛋白I 的性能验证 [J], 韩莉莉;余鸿;陈点;赖力;王尧城;刘尚龙;林赛梅;黄毅;沈晓丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一种利用磁微粒化学发光免疫技术检测雌二醇的试剂盒[发明专利]
![一种利用磁微粒化学发光免疫技术检测雌二醇的试剂盒[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/c4bd09f488eb172ded630b1c59eef8c75fbf959a.png)
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公布说明书[11]公开号CN 101639478A [43]公开日2010年2月3日[21]申请号200910091848.9[22]申请日2009.08.27[21]申请号200910091848.9[71]申请人清华大学地址100084北京市100084－82信箱[72]发明人林金明 辛天兵 肖勤 [74]专利代理机构北京众合诚成知识产权代理有限公司代理人史双元[51]Int.CI.G01N 33/543 (2006.01)G01N 21/76 (2006.01)G01N 33/535 (2006.01)权利要求书 3 页 说明书 16 页 附图 1 页[54]发明名称一种利用磁微粒化学发光免疫技术检测雌二醇的试剂盒[57]摘要本发明公开了一种属于免疫分析领域的利用磁微粒化学发光免疫技术检测雌二醇(E 2)的试剂盒。
该试剂盒包括雌二醇系列校准品、二抗包被的磁微粒溶液、辣根过氧化酶标记的雌二醇、雌二醇抗体、化学发光底物液以及浓缩洗涤液。
本发明还公开了所述试剂盒的制备方法。
本发明试剂盒可定量检测人体血清、血浆样品中雌二醇的含量。
可同时检测大量样品，具有简便、快速、灵敏、稳定、高灵敏度等优点，为临床诊断和科研工作提供一种非常有价值的检测手段。
200910091848.9权 利 要 求 书第1/3页 1、一种利用磁微粒化学发光免疫技术检测雌二醇的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括雌二醇系列校准品、二抗包被的磁微粒溶液、辣根过氧化酶标记的雌二醇、雌二醇抗体、化学发光底物液以及浓缩洗涤液。
2、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述二抗为多克隆抗体。
3、根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述二抗为羊抗兔的多克隆抗体。
4、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述雌二醇抗体为兔抗雌二醇多克隆抗体。
5、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物液为A液和B液，其中：化学发光底物A液是p H值为8.0～10.0的含有8～10m M鲁米诺、0.1～0.3m M 4-羟基联苯和0.05～0.1mM 4-碘苯硼酸的0.1～0.2M硼酸-硼砂缓冲液；化学发光底物B液是p H值为7.0～7.6的含有3.5～5m M过氧化脲和体积百分比浓度为0.1～0.5％的Tween20的0.1～0.2M磷酸盐缓冲液。
硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒及其制备方法[发明专利]
![硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒及其制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/ddf19ae86e1aff00bed5b9f3f90f76c660374c46.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201811113148.0(22)申请日 2018.09.25(71)申请人 迪瑞医疗科技股份有限公司地址 130000 吉林省长春市高新区宜居路3333号(72)发明人 孙天旭 李婷 高威 孙成艳 何浩会 (74)专利代理机构 长春众邦菁华知识产权代理有限公司 22214代理人 李外(51)Int.Cl.G01N 33/74(2006.01)(54)发明名称硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒及其制备方法(57)摘要本发明提供一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒及其制备方法，属于免疫分析医学检测技术领域。
该试剂盒包括：校准品及质控品、链霉亲和素磁颗粒悬浮液、吖啶酯标记的硫酸脱氢表雄酮衍生物、生物素标记的硫酸脱氢表雄酮抗体。
本发明还提供一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒的制备方法。
该试剂盒使用链霉亲和素-生物素体系，使得信号进一步放大，提高试剂灵敏度。
权利要求书1页 说明书7页 附图1页CN 109061202 A 2018.12.21C N 109061202A1.一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：校准品及质控品链霉亲和素磁颗粒悬浮液吖啶酯标记的硫酸脱氢表雄酮衍生物生物素标记的硫酸脱氢表雄酮抗体。
2.根据权利要求1所述的一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述的包被链霉亲和素的磁珠粒径为0.05～3μm。
3.根据权利要求1所述的一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述的吖啶酯标记的硫酸脱氢表雄酮衍生物中，硫酸脱氢表雄酮衍生物与吖啶酯的摩尔比为1:3-1:20。
4.根据权利要求1所述的一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述的生物素标记的硫酸脱氢表雄酮抗体中，硫酸脱氢表雄酮抗体与生物素的摩尔比为1:3-1:15。
5.根据权利要求1所述的一种硫酸脱氢表雄酮化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述的校准品的浓度分别为0μg/dL、1μg/dL、10μg/dL、50μg/dL、250μg/dL、500μg/dL、1000μg/dL 的硫酸脱氢表雄酮溶液。
硫酸脱氢雄甾酮标准操作程序SOP文件
0.003─27μmol/l或0.100─1000μg/dl
稀释：
高于检测范围的标本可用低DHEA-S含量的人标本稀释。建议1:5稀释。稀释后的标本DHEA-S含量必须高于1.5μmol/l或45μg/dl。如内源性DHEA-S可忽略不计，
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-32
nµg/dlµmol/lµg/dlµmol/l
女性:
10–14 15 168 4.56 54.4 – 255 1.48 – 6.92
15–19 30 140 3.80 66.6 – 306 1.81 – 8.30
20–24 30 236 6.39 158 – 412 4.29 – 11.2
25–34 60 183 4.96 98.0 – 315 2.66 – 8.55
储存和稳定性：
存放在2－8度，切莫倒置。
未开封，可稳定至标明的保质期。
开封后，2－8度12周；
放在Elecsys2010上，8周；（使用后放回2－8度；如置20－25度，约20小时）。
标本采集和准备：
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素、EDTA-K3、枸橼酸钠、氟化钠和草酸钾抗凝均可。标本在2－8度可稳定2天，-20度可稳定2个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。
> 75 29 60.9 1.65 12.0 – 154 0.33 – 4.18
男性:
10–14 18 113 3.07 49.5 – 245 1.34 – 6.65
15–19 30 325 8.81 133 – 553 3.61 – 15.0
20–24 27 351 9.54 210 – 496 5.70 – 13.5
一种孕酮磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法[发明专利]
![一种孕酮磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/dea57b7051e79b89690226b8.png)
专利名称：一种孕酮磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法
专利类型：发明专利
发明人：李明勇,姜雪莲,黄金浪,张玲,胡洁,黄伟
申请号：CN201810550555.1
申请日：20180531
公开号：CN108802373A
公开日：
20181113
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种孕酮磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法，所述试剂盒包括：链霉亲和素包被的磁微粒悬浮液，碱性磷酸酶标记的孕酮衍生物，生物素标记的孕酮抗体，测试稀释液，孕酮校准品，孕酮质控品。
本发明的试剂盒与现有试剂盒相比，制备工艺更简单，成本更低，检测范围宽，稳定性好。
申请人：湖南远璟生物技术有限公司
地址：410154 湖南省长沙市开福区沙坪街道中青路1048号山河医药健康产业园4栋6楼
国籍：CN
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化学发光微粒子免疫检测法 竞争法
化学发光微粒子免疫检测法竞争法下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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Development of chemiluminescent microparticle immunoassay for quantitative determination of dehydroepiandrosterone sulfate HUANG Mingcong1, ZHANG Xiaoli2, LIN Guanghua2, WENG Zuxing1, SUN Xudong1, GE Shengxiang3, ZHANG Jun3★ (1. XiБайду номын сангаасmen Innodx Biotech Co., Ltd, Xiamen, Fujian, China, 361022; 2. Clinical Laboratory Department, Fujian Medical University Union Hospital, Fuzhou, Fujian, China, 350001; 3. National Institute of Diagnostics and Vaccine Development in Infectious Disease, Xiamen University， Xiamen, Fujian, China, 361102)
DHEAs 的 定 量 检 测 方 法 主 要 有 液 相 色 谱-质 谱联用法和 免疫检测法 。 ［7-8］ 液相色谱-质谱法由于 其样品前处理复杂，仪器昂贵，耗时长，其应用受 到限制。 免疫学检测方法包括放射免疫法、酶联免 疫 法 和 化 学 发 光 微 粒 子 免 疫 法 （chemiluminescent microparticle immunoassay， CLIA）。 其 中 CLIA 灵 敏度高、线性范围宽、再现性好、易于实现自动化 和高通量检测， 已逐渐成为临床检测中的主流方 法。 目前，国内只有罗氏、雅培、西门子和贝克曼等 国 外 大 公 司 的 DHEAs CLIA 定 量 检 测 试 剂 上 市 ， 价 格昂 贵 ，研 制 国 产 化 的 DHEAs 化 学 发 光 免 疫 定 量检测试剂十分必要。
· 302 · 分 子 诊 断 与 治 疗 杂 志 2015 年 9 月 第 7 卷 第 5 期 J Mol Diagn Ther， September 2015， Vol． 7 No． 5
誗论 著誗
硫酸脱氢表雄酮化学发光微粒子免疫法定量测定试 剂的研制
黄明聪 1 张晓 琍 2 林光华 2 翁 祖星 1 孙旭东 1 葛胜祥 3 张军 3★
分 子 诊 断 与 治 疗 杂 志 2015 年 9 月 第 7 卷 第 5 期 J Mol Diagn Ther， September 2015， Vol． 7 No． 5 · 303 ·
硫 酸 脱 氢 表 雄 酮 （dehydroepiandrosterone sulfate，DHEAs） 是 脱 氢 表 雄 酮 （dehydroepiandrosterone， DHEA）的 硫 酸 酯 形 式 ，是 一 种 主 要 由 肾 上 腺 皮质分泌的 甾醇类激素 。 ［1－2］ 作为雄性 激素和雌 性 激 素 的 前 体 ，DHEAs 是 人 体 中 含 量 最 丰 富 的 甾 醇 类 物 质 ， 在 人 血 清 中 的 含 量 比 DHEA 高 250～ 500 倍 ，比 睾 酮 高 100～500 倍 ，比 雌 二 醇 高 1 000～ 10 000 倍 ［3－4］。 循 环 血 液 中 的 DHEAs 并 不 具 备 雄 性和雌性激素的生物学活性， 运送到靶组织后经 脱 硫 酸 化 生 成 DHEA， 进 而 转 变 为 不 同 的 雄 性 和 雌性激素化合物， 发挥生物学功能。 在临床上， DHEAs 的定量检测常用于多毛症、 女性男 性化及 多囊性卵巢综合症的辅助诊断， 当发生肾上腺肿 瘤 时 DHEAs 的水平也 会异常升高 ［5－6］。
磁 微 粒 用 MEST （10 mmol ／ L MES，pH 6．0， 0．05％ Tween 20） 洗 涤 2 次 后 加 入 新 配 制 的 EDC 活化 30 min， 用 MEST 洗 涤 2 次 ； 加 入 抗 体 或 抗 原 ，37℃ 反 应 3 h； 用 MEST 洗 涤 5 次 ， 用 含 2％ 酪 蛋白的磷酸盐缓冲液重悬后于 4℃保存。 1．2．5 吖啶酯标记
取 6 ～8 周 龄 的 Balb ／ c 小 鼠 ， 人 工 完 全 抗 原 DHEAs-BSA 和 佐 剂 乳 化 后 皮 下 注 射 小 鼠 ，初 次 免 疫注射 100 μg 抗原，加强免疫注射 50 μg 抗 原，免 疫 间 隔 周 期 为 3w，加 强 免 疫 3 针 后 ， 眼 眶 后 静 脉 丛采血 4～6 滴，分离血清后检测血清效价，取效价 高的小鼠进行脾脏免疫。 1．2．2 单克隆抗体的筛选
[ABSTRACT] Objective To develop chemiluminescent microparticle immunoassay for quantitative determination of dehydroepiandrosterone sulfate. Methods Mice were immunized by dehydroepiandrosterone sulfate artificial complete antigen.Monoclonal antibodies against dehydroepiandrosterone sulfate were prepared by hybridoma technique.Chemiluminescent microparticle immunoassay for quantitative determination of dehydroepiandrosterone sulfate was developed based on competitive binding method. Results 27 monoclonal antibodies were obtained. Chemiluminescent microparticle immunoassay for quantitative determination of dehydroepiandrosterone sulfate prototype kit was established. The coefficient r of testing specimens with reagent from Abbott company was over 0．99. Conclusion Development of domestic chemiluminescent microparticle immunoassay for quantitative determination of dehydroepiandrosterone sulfate reagent was laid foundation by this study.
1 材料与方法
1．1 材料 1．1．1 试剂
人 工 完 全 抗 原 DHEAs-BSA、DHEAs-OVA 由 本实验室自行合成，弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐 剂购自 Sigma 公司，吖啶酯来自于厦门大学。 1．1．2 临床血清标本
临床血清标本来源于厦门大学。 1．1．3 仪器
Berthold Sirius 单管 式 化 学 发 光 检 测 仪 为 德 国 Berthold Technologies 公 司 产 品 ；PHOMO 全 自 动 酶标仪为安图生物公司产品。 1．1．4 实验细胞、动物
· 304 · 分 子 诊 断 与 治 疗 杂 志 2015 年 9 月 第 7 卷 第 5 期 J Mol Diagn Ther， September 2015， Vol． 7 No． 5
取 50 μg 抗原或抗体加入到 600 μL 0．1 mol ／ L 的 PBS（pH 8．0） 中 ， 加 入 5 μL 1 mmol ／ L 吖 啶 酯 ， 混 匀 ， 室 温 避 光 反 应 1 h； 加 赖 氨 酸 溶 液 反 应 15 min，然 后 4℃透 析 至 20 mmol ／ L pH 6．5 的 PBS 中 12 h。 1．2．6 间接竞争酶联免疫吸附试验
小鼠脾脏免 疫 72 h 后取脾脏 细胞与骨髓 瘤 细 胞融合 ，融合 5 d～7 d 后换液 ，间接酶联 免疫吸附 试验和间接竞争酶联免疫吸附试验筛选阳性克 隆，采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化。 1．2．3 单克隆抗体的制备
取 F1 小 鼠 ， 向 腹 腔 中 注 射 0．5 mL 的 液 体 石 蜡油；3 d 后， 向腹腔中注射对数生长期的杂交瘤 细胞 约 1×106 个；7 d～14 d 后，抽取 腹水，离心 取上 清。 上清经饱和硫酸 铵沉淀后用 Protein A 亲和层 析柱纯化单克隆抗体。 1．2．4 磁珠包被
骨 髓 瘤 细 胞 Sp2 ／ 0-Ag14 由 本 实 验 室 保 存 ； Balb ／ c 小 鼠 和 F1 小 鼠 均 购 自 上 海 斯 莱 克 实 验 动
物有限责任公司。 1．1．5 耗材
细 胞 培 养 板 购 自 美 国 Thermo Nunc 公 司 ；96 孔酶标板购自厦门怡佳美实验器材有限公司；细胞 冻存管为德国 Greiner 公司产品；磁微粒 Dynabeads M-270 购自美国 Lifetechnologies 公司。 1．2 方法 1．2．1 小鼠免疫
[KEY WORDS] Dehydroepiandrosterone sulfate; Chemiluminescent microparticle immunoassay; Quantitative determination kit
基 金 项 目 ：国 家 高 技 术 研 究 发 展 计 划 （863 计 划 ）（2011AA02A101） 作 者 单 位 ：1． 厦 门 万 泰 凯 瑞 生 物 技 术 有 限 公 司 ，福 建 ，厦 门 361022