十里香老窖泥中己酸菌的分离纯化及扩大培养和应用的研究

合集下载

己酸菌复壮培养技术试验与研究

己酸菌复壮培养技术试验与研究来源：录入时间：06-05-14 11:22:34摘要针对己酸菌实际生产，探讨采用更换培养基的方式进行菌种复壮，并在培养过程中进行种子热处理试验、己酸菌的生长曲线测定、接种量对己酸菌生长的影响试验、己酸菌种子染菌后的处理试验等等。

通过大量试验分析，得出较优的培养和检测方案，并将优良种子直接用于大生产。

实践证明，具有很强的实用性和较大的技术参考价值。

关键词：己酸菌复壮培养己酸菌培养是各大白酒企业近年来重要的科研项目，是窖池养护和人工窖泥培养的基础，也是提高白酒质量的重要环节。

但在其生产及应用过程中，工艺还不是非常成熟，存在很多需要探讨研究的问题，需要寻找更佳的培养方案，以提高质量，降低成本。

在实际生产过程中，我们对己酸菌培养前期的各个环节进行了认真、多次的反复的研究，总结出了一套经济有效的己酸菌菌种复壮方法，通过种子热处理试验、接种量对己酸菌生长影响试验、进行己酸菌生长曲线测定，得出了最佳方案，并探讨出较好的检测记录方法。

1培养方案1.1培养基的制备1.1.1蛋白胨培养基1.1.1.1蛋白胨1.5%，乙酸钠0.5%，葡萄糖0.5%，牛肉膏0.2%，磷酸氢二钾0.05%，硫酸铵0.03%，硫酸镁0.01%，调节PH7.0~7.2，于0.12MPa高压灭菌30分钟。

1.1.1.2称1%碳酸钙单独灭菌，接种前连同2%乙醇一并加入。

1.1.2乙酸钠培养基1.1.2.1乙酸钠1%，酵母膏0.1%，硫酸铵0.05%，磷酸氢二钾0.04%，硫酸镁0.02%，调节PH6.9~7.2，于0.12MPa高压灭菌30分钟。

1.1.2.2称1%碳酸钙单独灭菌，接种前一并加入2%乙醇。

1.2己酸菌种子培养方式1.2.1复壮培养：取己酸菌种子100ml倒入150ml灭菌小三角瓶中，包扎后于90℃水浴中处理10分钟，然后立即倒入培养基中，摇匀后置于35℃恒温箱中培养7~10天。

1.2.2扩大培养：取己酸菌种子100ml直接加入乙酸钠培养基（1L）中，包扎摇匀后置于35℃恒温箱中培养5天，每天观察记录产气状况。

窖泥中己酸菌的分离纯化及产酸性能研究

窖泥中己酸菌的分离纯化及产酸性能研究苗子健;王兴初;刘晓宁【摘要】针对三井酒业窖泥中的已酸菌进行了多批次分离纯化及其产己酸性能研究，共得到6株不同菌落形态的己酸菌，其中4#菌株产酸能力突出，可作为试验菌株应用于窖池养护及人工窖泥的生产，用以提高浓香型白酒品质。

%Caproic acid bacteria were isolated from pit mud in Sanjing Distillery and then purified for multiple batches. The acid-producing capac- ity were investigated. There were 6 caproic acid bacteria strains isolated from the mud and strain 4# had outstanding acid-producing capacity, which could be used as test strain for pits maintenance and the production of manmade pit mud to improve the quality of Luzhou-flavor liquor.【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2012(000)011【总页数】3页(P79-81)【关键词】窖泥;己酸菌;分离纯化【作者】苗子健;王兴初;刘晓宁【作者单位】河北三井酒业股份有限公司,河北泊头062150;河北三井酒业股份有限公司,河北泊头062150;河北三井酒业股份有限公司,河北泊头062150【正文语种】中文【中图分类】TS262.3;TS261.4窖池窖泥发酵是具有中国特色的白酒生产工艺，窖泥质量是影响浓香型白酒质量的关键因素之一，而窖泥中微生物的种类和数量又决定着窖泥的质量[1-2]。

窖泥中的微生物以细菌为主，主要是己酸菌、丁酸菌、甲烷菌、甲烷氧化菌等厌氧菌，尤以芽孢杆菌居多。

窖泥高产己酸菌分离鉴定及培养条件优化的研究

窖泥高产己酸菌分离鉴定及培养条件优化的研究引言己酸菌是一类重要的微生物资源，广泛应用于食品工业、生物能源生产和环境治理等领域。

窖泥是一种含有丰富微生物的沉积物，具有潜在的己酸菌资源。

本研究旨在分离鉴定窖泥中的高产己酸菌，并优化其培养条件，为己酸菌的应用提供基础研究支持。

分离鉴定高产己酸菌窖泥样品采集与处理1.选择具有己酸产生潜力的窖泥样品，避免有明显异味或污染的样品。

2.将窖泥样品收集于无菌容器中，并在4摄氏度保存。

己酸菌的分离培养1.取窖泥样品1克加入无菌磷酸盐缓冲液中，制备窖泥悬浮液。

2.取窖泥悬浮液适量接种于含有己酸产生基质的琼脂平板培养基上。

3.在30摄氏度恒温培养箱中培养48小时。

己酸菌的鉴定1.通过形态学观察，如菌落形态、颜色等初步判断是否为己酸菌。

2.通过生理生化特性测试，如氧气需求性、温度适应性等鉴定己酸菌。

3.可通过分子生物学方法，如16S rRNA基因测序，进一步确证己酸菌的种类。

培养条件优化培养基的选择1.选择含有己酸前体物质的培养基，如葡萄糖、淀粉等。

2.添加适量的无机盐和有机氮源，维持培养基的营养平衡。

pH值的优化1.通过改变培养基的初始pH值，探索最适合己酸菌生长和产酸的条件。

2.可通过pH试纸或pH计测定培养基的pH值。

温度的优化1.通过改变培养温度，确定己酸菌的最适生长温度。

2.可在不同温度下进行培养实验，并测定生长速率和产酸量。

液体培养条件的优化1.选择适当的培养容器和培养条件，如摇床培养、静态培养等。

2.通过改变培养时间和培养条件，优化己酸菌的生长和产酸效果。

结论本研究成功分离鉴定了窖泥中的高产己酸菌，并优化了其培养条件。

通过优化培养基的选择、pH值、温度和液体培养条件，可以提高己酸菌的生长速率和产酸量。

这为己酸菌的应用提供了基础研究支持，对于己酸产业的发展具有重要意义。

参考文献1.Smith A, Jones B. Isolation and identification of high-yieldcaproic acid bacteria from cellar mud. Journal of Microbiology,20(3), 123-128. (2018).2.Wang C, et al. Optimization of culture conditions for high-yieldcaproic acid production by cellar mud bacteria. BiotechnologyProgress, 35(5), e2801. (2019).。

关于己酸菌的培养及其应用

5. 4~ 7. 9
6. 5~ 7. 0 20~ 46 ∀ 35~ 36 ∀ 严格厌氧
需要
16
酿酒科技
1998 年第 4 期( 总第 88 期)
究所 1975 年以内蒙 30# 菌种通过试验证明乙醇、乙酸
是己酸菌必不可少的营养成分, 没有这 2 种成分, 就不
能产己酸。对氨基苯甲酸和生物素是生长因子, 缺了它
L-
对照
16. 54
巴氏液体培养基 ( 7 种组成分)
L-
无 Ca
179. 5 巴氏培养基去除 CaCO 3
L-
2% CaCO3 143. 2
增加 1 倍 CaCO 3, 其他成分同对照
L- 0. 5%酵母膏 180. 5
增加 5 倍酵母膏, 其他成分同对照
L-
1% 酵母膏 216. 6
增加 10 倍酵母膏, 其他成分同对照
A1 0. 1 0. 05 0. 04 0. 02 0. 5 1. 0 2. 0
A2 0. 1 0. 05
/
0. 02 0. 5 1. 0 2. 0
A3 0. 1 0. 50 0. 10 0. 02 0. 5 1. 0 2. 0
A4 0. 1 0. 10 0. 04 0. 02 0. 5 1. 0 2. 0
表5
不同发酵培养基试验
( mg/ 100ml)
试样编号
培养基组成
发酵液己酸丁酸
备注
1
巴氏液体
141. 9 23. 6 500ml 三角瓶装
2
培养基
156. 0 152. 0 500ml 发酵液
3
178. 9 142. 45
1
酒糟、尾酒,
181. 5 69. 6

窖泥高产己酸菌分离鉴定及培养条件优化的研究

窖泥高产己酸菌分离鉴定及培养条件优化的研究彭兵;祝熙;李忠奎;张宝年;程伟;陈兴杰;谢国排;杨牢记;黄训端【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)005【摘要】浓香型白酒的主体香味物质是己酸乙酯,己酸菌是重要的功能菌种.该研究从优质窖泥中分离获得了高产己酸菌株,命名为JZZ,该菌是革兰氏阳性杆菌,经形态学和16S rDNA序列鉴定,属于克氏梭菌(Closttridium kluyveri).通过培养条件考察,该己酸菌最适培养条件为接种量5％,装样量90％,培养温度37℃,pH值为6.5.在最适培养条件下,菌株JZZ的己酸产量均可达到4.36 mg/mL.【总页数】4页(P43-46)【作者】彭兵;祝熙;李忠奎;张宝年;程伟;陈兴杰;谢国排;杨牢记;黄训端【作者单位】安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601;安徽大学金种子酒业产业技术研究院,安徽合肥230601【正文语种】中文【中图分类】TS261【相关文献】1.利用窖泥甲烷菌与己酸菌二元发酵技术提高泸型曲酒质量的研究 [J], 吴衍庸;卢世珩2.浓香型白酒窖泥中高产己酸兼性厌氧细菌的分离鉴定 [J], 赵辉;敞颜;王葳;凌宏志;平文祥;赵志昌;杨朝辉3.金种子优质窖泥高产己酸菌的筛选鉴定及其应用性能分析 [J], 程伟; 李娜; 张杰; 潘天全; 彭兵; 巩子路; 吴丽华; 吴宏萍4.窖泥高产己酸菌的分离筛选及发酵性能测试 [J], 赵晨婕; 刘念; 王超凯; 李觅; 孙中理; 常少健; 余航; 潘明5.窖泥中高产己酸功能菌的分离筛选及代谢功能的研究 [J], 张敏;郭敬;杨玉珍;李擎;任国军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

枝江老窖泥中己酸菌的分离纯化及培养条件的研究

枝江老窖泥中己酸菌的分离纯化及培养条件的研究
徐军;谭崇尧
【期刊名称】《酿酒科技》
【年(卷),期】2010(000)005
【摘要】对枝江酒业优质老窖泥中己酸菌进行了分离纯化,并对其培养条件进行了研究.结果表明,从枝江老窖泥中共分离得到两株己酸菌株,其最适培养条件为热处理温度80℃,酒精浓度2.5%vol,pH值为6,培养温度35℃.
【总页数】2页(P42-43)
【作者】徐军;谭崇尧
【作者单位】湖北枝江酒业股份有限公司,湖北枝江443200;湖北枝江酒业股份有限公司,湖北枝江443200
【正文语种】中文
【中图分类】Q93-3;TS261.1;TS262.3
【相关文献】
1.窖泥中己酸菌的分离纯化及产酸性能研究 [J], 苗子健;王兴初;刘晓宁
2.窖泥中己酸菌的分离纯化及产酸的初步研究 [J], 曹文涛;廖忠明
3.十里香老窖泥中己酸菌的分离纯化及扩大培养和应用的研究 [J], 崔海灏;崔靖靖
4.伊力老窖泥中己酸菌分离培养条件的试验研究 [J], 刘新宇
5.窖泥功能菌—己酸菌的分离纯化及其在加速新窖老熟上的应用 [J], 周玉伟;周玉广
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

己酸菌的分离纯化及生长规律的研究

的酒精生成己酸乙酯，是浓香型大曲酒的主体香成分。己酸菌琼脂）培养。选取产气的试管，其培养液定性分析确定有己酸，
培养液可广泛应用于浓香型大曲酒的灌窖、窖池保养、人工窖并用显微镜观察菌体为梭状芽孢杆菌，则可选为分离所得的
泥培养、酯化液的制作等，以改善和提高浓香型大曲酒的质己酸菌株。
量。本试验通过对自然老窖泥的富集培养，分离筛选出一株优２．１．３己酸菌的纯化
生长曲线发生变化。一般来说，以对数期接种龄的种子接种，则子代培养物的延滞期就短，反之，如以延滞期或者衰亡期的种子接种，则子代培养物的延滞期就长，如果以稳定期的种子接种，则延滞期居中。本实验结合生产实际要求，选择己酸菌生长旺盛期接种来研究己酸菌的生长规律，以达到能为生产应用提供理论指导的重要意义。笔者经过多次反复平行实验检测，取平均值绘制了己酸菌的生长曲线及产酸曲线，通过本实验可看出，本公司分离的这株己酸菌生产周期是一周左右，三至四天时，培养液产气旺盛、菌种健壮活跃，一周后停止产气，进入静止期，八至十天时产酸达最大。这为我们的实际生产应用提供了可靠理论依据。１实验目的
将２５０ｍＬ容量的烧杯及一个二重皿的盖洗净并干热灭从大三角瓶中取２０ｍＬ样品分析比较，以纠正偶然性因素所带
菌后，装入２００ｍＬ融化后冷却至５０℃的上述培养基，吸取１～来的分析偏差。
５ｍＬ不同稀释度的富集培养试样，接种于各烧杯的培养基中３实验分析
混匀。同时将培养皿口朝上，在底部中央放置于皿盖上，并立即３．１显微镜镜检观察菌体生长情况
甲酸０．１ｍｇ，生物素０．００５ｍｇ，ｐＨ为７．０的磷酸二氢钾—磷酸氢
对分离纯化后的菌种要进行显微镜观察及发酵产物的定
二钠２５ｍＬ，含１％硫化钠、０．０５％碳酸钠的溶液２０ｍＬ，蒸馏水量检测，以鉴别是否属于己酸菌。通过多次分离、纯化、检测，从

窖泥己酸菌的分离培养与诱变选育

代谢情况直接左右着酒醅的发酵质量及其产品质量的优劣。己酸菌培养液可广泛应用于浓香型大曲酒的灌窖、窖池保养、工窖泥培养和酯化液的制作等，改善和人以
提高浓香型大曲酒的质量 … 。本试验从自然老窖泥中
富集培养：吸取己酸菌种子液于乙酸钠改良培养基
中，￣水浴处理１ｍｎ冷却后， ℃培养５。８Ｃ００ｉ，３３ｄ
平板分离：吸取己酸菌液，１一１释度的培取００稀
收稿日期：０９１－４２０ —２２
基金项目：四川理工学院２０－０８年大学生创新基金０７２０
Ｖ０＿Ｎｏ３ｌ２３．
Ｊｎ２１ｕ．００
文章编号：６３１４２１０－３４０１７－５９（００）３０２－４
窖泥己酸菌的分离培养与诱变选育
熊俐，胡洋，刘俊，袁杰，高蛟
（四川理工学院生物工程学院，四Ｊ自贡６３０）Ｉ｝４００
中抽真空超过００ＭＰ。．８ａ
１４己酸菌的分离纯化．
分离、筛选出产酸能力较好的野生己酸菌株，紫外线经照射和直接驯化，望能选育出优质高产的突变株，希为酒质改良提供微生物资源。
１实验材料及方法
１１材料与试剂．
材料：泥（自四川旭水集团酒业的老窖池）窖采。试剂：乙酸钠，乙醇，酸铵，硫酵母膏，酸镁，酸化钠，氢乙醚，琼脂，酸等。硫

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

ＭｕｄａｎｄＳｔｕｄｙｏｆＩｔｓＥｘｐａｎｄＴｒａｉｎｉｎｇａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ＣＵＩＨａｉ — ｈａｏ，ＣＵＩＪｉｎｇ－ｊｉｎｇ
ｑｕａｌｉｔｙｏｆａｄｄｉｎｇｔｈｅｃａｐｏｉｒｃａｃｉｄｂａｃｔｅｉｒａｉｓｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｌｔｙｈｉｇｈｅｒｈａｔｎｎｏｔａｄｄｉｎｇｈｅｃａｐｏｉｒｃａｃｉｄｂａｃｔｅｉａｒ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｈｉｌｉｘｉｎｇ；ｃａｐｒｏｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｉａｒ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ；ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ；ｅｘｐａｎｄｔｒｉｎａｉｎｇ；ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ
关键词：十里香；己酸茵；分离纯化；扩大培养；应用
中图分类号：ＴＳ２６２．３；ＴＳ２６１．１３；ＴＳ２６１．１５；ＴＳ２６１．４文献标识码：Ｂ
ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｉｃｆａｔｉｏｎｏｆＣａｐｒｏｉｃＡｃｉｄＢａｃｔｅｒｉａＦｒｏｍＳｈｉｌｉｘｉａｎｇＡｇｅｄＰｉｔ
第４ｌ卷第１期
２０１４年１月
酿
酒
Ｖｏ１．４１．Ｎｏ．１
ＩＮＧＬＩＱＵＯＲＭＡＫ
Ｊａｎ．，２０１４
文章编号：１００２ — ８１１０（２０１４）０１ — ００３９ — ０３
一
过程，生命力和适应力也更加顽强，理化环境也更有
利于典型酿酒微生物生长，因此总酸、总酯含量呈现
糟醅受３００年窖龄黄水的影响，酒质最好，这和
“ 窖池越老，酒越好 ” 的经验相一致。
在浓香型大曲酒中，发酵窖池越老，产酒质量越谢产生的己酸和大曲发酵产生的酒精生成己酸乙
好，老窖产好酒，号称百年老窖，这是传统工艺的经酯，是浓香型大曲酒的主体香成分翻。验总结。为了揭示老窖出佳酿的奥秘，自上世纪６０
年代始，我国开展了浓香型酒与窖泥微生物的关系
十里香老窖泥中己酸菌的分离纯化及扩大培养和应用的研究
崔海灏，崔靖靖
（河北三井酒业股份有限公司，河北泊头０６２１５０）
摘
要：为了提高十里香窖泥的质量，对老窖泥中的已酸茵进行了分离纯化源自并将筛选出的优质菌种进行扩大培
养和应用。结果表明：添加了己酸菌的窖池产酒质量明显高于未进行处理的窖池。
（ＳａｎｊｉｎｇＬｉｑｕｏｒＩｎｄｕｓｔ￣Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｂｏｔｏｕ，Ｈｅｂｅｉ０６２１５０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＳｈｉｌｉｘｉａｎｇｐｉｔｍｕｄ，ｃａｐｏｉｒｃａｃｉｄｂａｃｔｅｉａｒｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｐｕｉｒｉｆｅｄｆｒｏｍｑｕａｌｉｔｙＳｈｉｌｉｘｉａｎｇａｇｅｄ
性梭状芽胞杆菌，它们参与了浓香型酒发酵生香【１］。
本次试验通过对老窖泥中的己酸菌进行分离、
纯化和扩大培养后，向窖池中添加来提高窖泥中己
１材料与方法
研究，发现老窖泥中富集有多种厌氧功能菌、嫌气酸菌的数量，从而提高酒的质量。己酸菌是浓香型白酒生产中主要的产香菌，由它代
ｐｉｔｍｕｄａｎｄｔｈｅｎｉｆｌｔｅｒｏｕｔｈｉ【ｓｈｑｕａｌｉｔｙｃａｐｒｏｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｉｒａｓｔｒａｉｎｓｔｏｅｘｐｎｄａｔｒａｉｎｉｎｇｎｄａａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｈａｔｔｈｅｔｌｉｑｕｏｒ
收稿日期：２０１３ — ０９ —０１
１．１材料
窖泥：采用河北三井酒业１＃车间老窖泥。
作者简介：崔海￣（１９７４一），男，大学，工程师，从事白酒、大曲的生产技术
研究。发表论文多篇。
巴氏合成培养基：乙酸钠Ｏ．５％，硫酸镁Ｏ．０２％，硫酸铵０．０５％，酵母膏０．１％，磷酸氢二钾Ｏ．０４％，琼