甘草有效成分的提取分离实验方案
甘草有效成分的提取分离实验方案
甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。
实验原理：黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。
根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。
代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。
甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。
甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。
超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。
本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。
【1】大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。
萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂进行分离纯化。
与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。
使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。
【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。
甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。
鉴于甘草酸和甘草多糖都溶于水的性质，本实验采用超声或微波辅助法对它们同时进行提取[3]。
对于提取后的甘草酸和甘草多糖的分离，可查阅到的方法包括醇沉酸沉法[3]。
甘草中有效成分的分离提取
甘草中有效成分的分离提取摘要：甘草具有多种药用功效，自古以来就是一味重要的药材。
本文简要探讨对甘草中有效成分的分离提取方法，以期为甘草的研究与应用提供参考依据。
关键词：甘草有效成分分离与提取一、甘草简介甘草属于豆科多年生草本植物。
作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。
甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。
据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。
因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。
二、甘草中的有效成分1.甘草甜素甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。
它的甜度是蔗糖的2～3百倍。
它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。
2.甘草次酸甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。
3.甘草黄酮甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。
4.甘草多糖它是将甘草提纯后获得的一种α-D-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。
三、甘草有效成分的提取方法1.甘草酸的提取方法1.1溶剂提取法指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。
根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。
1.2超声提取法根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。
具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。
启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。
甘草鲜药材加工方案
甘草鲜药材加工方案一、试验报告1.试验目的1.1通过甘草出膏率、提取物含量两个质量指标对比甘草鲜药材不同加工方法的质量差异，找到影响甘草提取物含量转移率的最佳加工方法，提高甘草提取物含量转移率。
从而确定一条合理的生产工艺。
2.1通过对不同干燥程度甘草的前处理、提取、浓缩等过程分别检验其含量（甘草苷和甘草酸），确定甘草最佳干燥程度。
2.试验背景目前，我公司生产甘草时甘草提取物含量转移率偏低，为保证产品质量对甘草工艺进行再研究，通过对甘草鲜药材不同加工方法的质量差异考察，找到影响甘草提取物含量转移率的主要因素，提高甘草提取物含量转移率。
3. 实验方法3.1原药材切制及提取的考察3.1.1 取某批号的甘草鲜药材800g，将鲜药材用水冲洗干净后，切成约0.2-0.5cm的厚片，切制后饮片铺成2-3cm进行晾晒，每天上午8点到下午4点每隔一小时翻晒一次，其中每天上午8点和下午4点必须翻晒一次，取样检测，大约晒至五成干、八成干、完全燥时，分别备用。
3.1.2 另取与3.1.1同一批号的药材800g，置于通风良好且阳光充足的空间晾晒，至测定含水量约50%、20%、0%左右，再切成约0.2-0.5cm的厚片，分别备用。
表1原药材处理方法批次原药材重量（g）干燥程度（水分%）处理方式切制规格（cm）样品重量（g/份）样品份数200 100 先切再晒0.2-0.550 120050 先切再晒0.2-0.550120020 先切再晒0.2-0.550 12000 先切再晒0.2-0.550 1200 100 先晒再切0.2-0.5 50 1200 80 先晒再切0.2-0.5 50 1200 50 先晒再切0.2-0.5 50 1200 0 先晒再切0.2-0.5 50 13.1.3 将两份饮片分别加热煎煮两次，第一次加投料量10倍的水，加热煎煮2小时；第二次加投料量8倍的水，加热煎煮1.5小时，煎液滤过。
趁热用350目筛过滤，合并滤液。
实验七 甘草中甘草酸的提取分离
实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内，易溶于热水，因此可用水提取甘草酸钾盐，水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸，因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。
也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀，将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中，用三氯甲烷除去黄酮类化合物，即可得甘草皂苷。
【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸（粗品）的提取
（1）水提法：取甘草粗粉100g，加水煎煮提取2-3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。
浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。
（2）醇提法：取甘草粗粉100g，加10%乙醇渗漉，收集渗漉液酸化，放置过夜，滤过得沉淀（甘草总皂苷）。
总皂苷用7%盐酸的甲醇，回流4~6小时，滤取甲醇液，冷却，放置后滤取沉淀，溶于三滤甲烷，用5%KOH萃取除去黄酮类，再用蒸馏水洗去碱性，所得沉淀用80%乙醇重结晶，滤过得甘草酸白色针状结晶。
【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时，水提液酸化后析出的沉淀，杂质较多难以过滤，故可倾出上清液再抽滤。
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
甘草提取黄铜实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在学习甘草中黄酮类化合物的提取方法，通过溶剂提取、分离纯化等步骤，获得甘草黄酮粗品，并对其理化性质进行初步分析。
二、实验原理甘草中含有丰富的黄酮类化合物，具有多种生物活性。
本实验采用溶剂提取法，利用有机溶剂（如甲醇、乙醇等）提取甘草中的黄酮类化合物，再通过有机溶剂萃取、浓缩等步骤进行分离纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：甘草粉末（市售）甲醇（分析纯）乙醇（分析纯）氯仿（分析纯）碳酸氢钠（分析纯）石英砂烧杯蒸馏装置漏斗滤纸烧瓶恒温水浴锅紫外-可见分光光度计2. 实验仪器：上述实验材料所列仪器四、实验步骤1. 甘草粉末的制备：将甘草粉末过筛，取40目筛的粉末备用。
2. 甘草黄酮的提取：（1）取10g甘草粉末，加入100mL甲醇，在恒温水浴锅中回流提取2小时。
（2）提取液过滤，滤液浓缩至约10mL。
3. 甘草黄酮的分离纯化：（1）将浓缩液转移至分液漏斗中，加入等体积的氯仿，充分振荡，静置分层。
（2）分取氯仿层，加入5g碳酸氢钠，充分振荡，静置分层。
（3）分取水层，用氯仿萃取2次，合并氯仿层。
（4）将氯仿层浓缩至约1mL，加入适量乙醇，溶解，转移至50mL容量瓶中，用乙醇定容。
4. 甘草黄酮的鉴定：（1）取适量甘草黄酮溶液，在紫外-可见分光光度计上测定其吸收光谱。
（2）与标准黄酮溶液进行比较，确定甘草黄酮的吸收峰。
五、实验结果与分析1. 甘草黄酮的提取率：根据实验结果，甘草黄酮的提取率为1.5%。
2. 甘草黄酮的理化性质：（1）甘草黄酮的吸收光谱：在紫外-可见分光光度计上，甘草黄酮的吸收峰位于278nm和355nm。
（2）甘草黄酮的性状：甘草黄酮为黄色粉末，无臭，味苦。
六、实验讨论本实验采用溶剂提取法提取甘草黄酮，操作简便，提取率较高。
通过有机溶剂萃取、浓缩等步骤，可获得较纯的甘草黄酮粗品。
实验结果表明，甘草黄酮具有良好的理化性质，具有进一步研究开发的潜力。
七、实验总结本实验成功地从甘草中提取了黄酮类化合物，并对甘草黄酮的理化性质进行了初步分析。
甘草中甘草酸提取与分离的研究
内 蒙古 石 油化 工
１
甘 草 中甘 草 酸 提 取 与分 离 的 研 究
李赞 忠 ， 子 荣 ， 乔 乌 云
（ 内蒙古化工职业学院 ， 内蒙 古 呼和 浩特 ００１） １ ０ ０
摘
要 ： 草 是我 国传 统 的 中药 ， 甘 来源于 豆科植 物甘 草 （ ｙ ｙｒ ｉ ｒｌｎ ｉ Ｆｓｈ 、 果甘 草 （ Ｇｌｃ ｒｈｚ ｕａｅ ｓ ｉ ） 胀 ａ ｓ ｃ Ｇ．
（） １ 粉碎 ： 将挑 选 除杂后 干净 干燥 的甘 草放入 粉
碎 机 中粉碎 ， １ 过 Ｏ目筛 选 ， 得甘 草粉 试样 。 制
（） ２ 提取 ： 称取 ２ ０ ０ ｇ甘 草粉 试样 ， 滤纸 包好 放 用 入 索 氏 提 取 管 中 ， １ ０ ｍＬ 圆 底 烧 瓶 中 ， 入 在 ５０ 加
草酸 （ｌｃｒｈｚ ｃ ＧＡ） ｇｙｙｒｉｃａｉ ｉ ｄ， 又名甘 草 甜 素 ， 是甘 草 中分 离 出的一种 三 萜 类化 合 物［ ， ３ 也是 最 重 要 的有效 Ｊ
成分 之一 。本 文对 甘 草 中甘 草酸 及 其他 成分 的提取 分 离方 法进行 了摸 索和改进 ， 得 了较 好 的效 果 。 取 关键 词 ： 草 ； 甘 甘草 酸 ； 提取 ； 离 分 中图分 类号 ： ８ ． Ｒ２ ４ ２ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编号 ：Ｏ ６ ７ ８ （ ０ ０ ２ ～ Ｏ ０ — ０ １Ｏ — ９１ ２ １）４ ｏ１ ３
ｉｆ ｔ ａ． 或光 果甘 草 （ ｇａ ｒ ． 的干燥 根 和根 茎［ 。具 有 多种 药 用功 效 ， ｎｌ ａＢ ｔ ） ａ Ｇ． ｌｂ ａＬ ） １ ］ 主要 生长 在 我 国西 北、 华北 、 东北 等三北 地 区［ 近 年 来在 内 蒙古 自治 区西部人 工 栽培甘 草 已获成 功 ， 草 资源极 为丰 富［ 。 。 甘 引 甘
甘草酸的提取、分离和纯化
甘草酸的提取、分离及纯化实验甘草酸的性质及用途甘草为豆科植物的根，主要产于我国内蒙古、山西、甘肃、宁夏、新疆等地。
甘草味甘，故又名甜草、蜜草。
其主要化学成分有四类：三萜类、黄酮类、生物碱类及多糖类。
其中三萜类成分有甘草酸、羟基甘草次酸等。
甘草酸又称甘草皂苷、甘草甜素。
白色结晶，可用冰醋酸结晶，有很强的甜味。
分子式为C42H62O16，分子量为822.90。
纯品为白色、无臭的结晶性粉末，熔点212～217℃，易溶于热水及热的稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚。
甘草酸在植物中常以钙、钾、铵盐等形式存在。
从甘草根为原料制得的甘草浸膏中提取的铵盐，其甜度为蔗糖的50～100倍，精制甘草酸钠、钾盐的甜度为蔗糖的200～300倍，是一种天然的甜味剂。
甘草素入口后不能立刻感觉到甜味，而是逐渐才有感觉，并且一直延续很长时间还留有余味，因此甘草素与砂糖、葡萄糖等糖类复配，可以得到口感良好的甜味。
因为它是非糖类、高甜度的甜味剂，因此没有褐变、吸湿及发酵等缺点。
甘草素在医药上还可用作消化道溃疡治疗剂、解毒剂、消炎剂以及降血脂、抗动脉粥样硬化、降胆固醇等。
目前，甘草素已广泛用于食品、医药、化妆品、饮料、卷烟等行业。
我国甘草资源丰富，带皮甘草中含甘草酸7%～10%，去皮甘草中约5.5%～9.0%。
甘草经溶剂浸取，可以制得甘草浸膏，再进一步加工可以制得甘草酸。
1 实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。
2.掌握甘草酸的分离纯化方法。
2 实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取。
提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
3实验材料、仪器和试剂实验材料：甘草实验仪器：电子分析天平（精确至0.001g）、移液管、紫外分光光度计、超声波清洗器、抽滤装置、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶（10mL、25mL、100mL）试剂：70 ％的乙醇溶液、蒸馏水、硫酸（3.5mol/L）、浓氨水、25 ％氨水、冰醋酸、80%甲醇质量分数为70 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取75 mL 无水乙醇，25 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为10 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取12．5 mL 无水乙醇，87．5 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨水溶液（100 mL）：用量筒量取2 mL 25 ％氨水，98 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨性醇溶液（100 mL 以无水乙醇为溶剂）：用量筒量取98．5 mL 无水乙醇，1．5 mL25 ％氨水于烧杯中，混匀。
论甘草药用价值及其提取分离方法
论甘草药用价值及其提取分离方法发布时间：2021-09-25T00:38:08.915Z 来源：《探索科学》2021年8月下16期作者：林丽[导读] 甘草作为我国中医临床治疗中的一种常用药物，其中的甘草黄酮、甘草酸、甘草次酸等几类化合物都是其中的重要组成部分，并且在抗氧化、抗病毒等方面发挥着十分重要的作用。
本文针对甘草有效成分的医疗价值做出了深刻的分析，随后就常见的有效成分提取分离方法进行了研究。
广州市康伦生物技术有限公司 3708021973102****0 林丽广州 510320摘要: 甘草作为我国中医临床治疗中的一种常用药物，其中的甘草黄酮、甘草酸、甘草次酸等几类化合物都是其中的重要组成部分，并且在抗氧化、抗病毒等方面发挥着十分重要的作用。
本文针对甘草有效成分的医疗价值做出了深刻的分析，随后就常见的有效成分提取分离方法进行了研究。
关键词:甘草；有效成分；提取分离方法1、甘草中有效成分的实际药用价值1.1甘草黄酮成分甘草黄酮作为甘草内所含有的一类重要化合物，在抗肿瘤方面具备着十分优异的疗效。
在实际的临床治疗过程中，甘草黄酮这类化合物质能够更好地抑制肿瘤细胞的增殖，对其生长产生一定的阻碍，并对肿瘤组织内部调控细胞凋亡的蛋白表达给出合理的影响，以此来达成诱导肿瘤细胞逐渐凋亡的治疗目的。
黄酮类物质的抗氧化作用是其能够对抗肿瘤生长的重要因素，因为自由基可以引发脂质的过氧化反应，又能够和蛋白质、核酸等物质进行作用，从而引发DNA链的断裂以及碱基改变，从而带来基因突变导致癌症的发生[1]。
甘草黄酮类物质能够在清除多种类型自由基的前提下，对脂质过氧化反应做出有效的抑制，发挥其抗肿瘤的临床治疗作用。
除此之外，甘草内所含有的异甘草素作为黄酮类物质的一种，能够在对L型钙电流通道以及电压依赖性钾电流通道做出有效阻滞，做到在L型钙电流峰值及电压依赖性有效抑制的同时，对整流K+电流进行延迟，以此对心律失常的潜伏期进行有效延长，缩短心律失常现象出现、持续的时间，具备较为显著的抵抗心律失常的医疗作用。
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甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：
通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。
实验原理：
黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。
根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。
代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。
甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。
甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。
超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。
本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。
【1】
大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。
萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂
进行分离纯化。
与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。
使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。
【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。
甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。
鉴于甘草酸和甘草多糖都溶于水的性质，本实验采用超声或微波辅助法对它们同时进行提取[3]。
对于提取后的甘草酸和甘草多糖的分离，可查阅到的方法包括醇沉酸沉法[3]。
考虑到大孔吸附树脂对糖类的吸附能力很差，也可以尝试用大孔树脂对甘草酸和甘草多糖进行分离。
本实验采用前者进行分离。
一、甘草黄酮的提取：超临界C02萃取法
工艺【1】：
原料粒度:40-60目
投料量:180g/罐
萃取压力:30Mpa
萃取温度:50 0C
夹带剂及液固比: 85%乙醇，液固比(V：W)为5:1
C02流量:l0kg/h
萃取时间:5小时
分离压力:5. 5Mpa.
分离温度:400C
二、甘草黄酮的分离纯化：硅胶柱层析
工艺【1】：
萃取液浓缩干品:硅胶量=0.5:20
流速：1.0倍柱体积/小时
流动相：CHCl3 : CH30H=4 :1
三、甘草酸和甘草多糖的提取：超声辅助溶剂提取法
工艺【1】：
溶剂：水
提取次数：3次，每次25min
温度：450C
固液比=1: l0
超声功率：1000W
四、甘草酸和甘草多糖的分离：醇沉酸沉法[5]
(1)萃余相用95％乙醇或无水乙醇调节至乙醇浓度为50～80％，静置8～24小时，过滤，上清液备用，滤渣干燥得甘草多糖粗品。
(2)上清液浓缩至20℃时的比重为1.05～1.20，用硫酸或盐酸调pH 至1.5～2.0，室温或4～10℃低温静置8～48小时，去上清液，沉淀物用冷水或冷酸水洗涤至洗涤水pH3～5，沉淀物干燥得甘草酸粗品。
五、含量测定：分光光度法
1、甘草黄酮含量测定[1]
标准曲线绘制：精密称取在105℃干燥恒重的芦丁对照品适量，用95%乙醇溶解，摇匀，定容使之成为浓度为1mg/ml的芦丁标准品溶液，作为贮备液。
精密量取上述溶液0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4. 0.5, 0.6m1，分别加水至3m1，加5%亚硝酸钠水溶液0. 5m1，放置6分钟，加10%硝酸铝0.5m1,混匀后放置5分钟，加入5%氢氧化钠溶液25m1,混匀，放置15分钟后，蒸馏水定容至lOml。
用721紫外分光光度计，在λ
=500nm处测吸收度。
以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标做标准曲线。
含量测定：测出样品吸光度，带入回归方程，计算得出样品浓度。
2、甘草多糖含量测定[3]
标准曲线的制备：精密称取干燥恒重的葡萄糖0.0194g,配成1OOml 溶液，浓度为0.194mg/ml。
从中精密吸取O.lml, 0.2m1,0.3m1, O.5ml, 0.7m1, 0.9m1，分别加入1 ml苯酚溶液和5ml浓硫酸，300C恒温O.5h，冷水浴冷却至室温，定容到5Oml，在490nm处测定吸光度。
以不加样为空白。
以浓度C对吸光度A回归,做回归方程。
含量测定：测出样品吸光度，带入回归方程，计算得出样品浓度。
3、甘草酸含量测定[3]
标准曲线的制备：精密称取适量甘草酸标准品，配成0.4217mg.m1-1的标准溶液。
分别精密量取1.00m1, 2.00m1, 3.00m1,4.00m1的标准溶液，用50%的乙醇溶液稀释至250m1,在最大吸收波长λmax= 259nm 处测吸收度，以空白为参比液，得线性回归方程.
含量测定：测出样品吸光度，带入回归方程，计算得出样品浓度。
[1]付玉杰. 甘草黄酮和甘草酸提取纯化工艺研究[D].东北林业大学,2002.
[2]王巧娥. 甘草有效成分的新型提取技术及高速逆流色谱分离方法研究[D]. 厦门大学, 2004.
[3]李炳奇,刘振华,马燕. 超声法联合提取甘草渣中多糖和甘草酸的研究[J]. 现代食品科技,2006,04:26-28.
[4]李春英. 甘草多糖提取纯化工艺研究[D].东北林业大学,2002
[5]专利号：CN 1803789 A。