TLC常用试剂配制及显色方法
薄层层析TLC通用显色剂
薄层层析TLC通用显色剂薄层层析通用显色剂1 通用试剂(1) 重络酸钾-硫酸:检查一般有机物.喷洒剂:5克重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中.薄层检查:喷洒后加热到150℃至班点出现(2) 荧光素-溴:检查不饱和化合物喷洒剂:0.1克荧光素溶于100毫升乙醇中溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保留了原有荧光;若点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色.(3) 碘:检查一般有机物.方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内，缸内预先放有碘结晶少许，大部分有机化合物呈棕色斑点。
b 层析谱放碘蒸气中5分钟（或喷5％碘的氯仿溶液）取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后，喷1％淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。
(4)硫酸：通用喷洒剂：5％的浓硫酸乙醇溶液，或15％浓硫酸正丁醇溶液，或浓硫酸－醋酸（1：1）喷洒后处理：空气中干燥15分钟，再热至110℃直至出现颜色或荧光。
(5)硝酸银－氢氧化铵（Tollen-Zaffaroni）试剂：检查还原性物质。
溶液I : 0.1%N硝酸银; 溶液II: 5N氢氧化铵喷洒剂: I和II以1:5混合(临用前混合)喷洒后处理: 105℃加热5~10分钟,至深黑色斑点出现.(6)磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查还原性物质,类脂体,生物碱,甾体喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液喷洒后处理: 120 ℃加热至斑点出现.沉淀试剂: 1克硅钨酸溶于20毫升水中,加10%盐酸至强碱性.2 生物碱(7)硫酸: 检查生物碱及含碘化合物喷洒剂: 0.1克硫酸?混悬于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清.喷洒后处理: 110℃加热数分钟至斑点出现.(8)碘化铋钾(Drage ndorff)试剂:检查生物碱及其他含氟化合物.溶液I: 0.85克次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中溶剂II: 8克碘化钾溶于20毫升水中.制备液I+II,等体积混合.可用于棕色瓶中保存较长时间,一般制备液可作沉淀试剂用.喷洒液: 制备液1毫升与2毫升醋酸,10毫升水混合即得(9).碘化汞钾(Mayer)试剂: 检查生物碱.制备液: 13.55克氯化汞和49.8克碘化钾各溶于20毫升水中,等体积混合并用水稀释至1000毫升.喷洒液: 制备液加1/10体积的17%盐酸.喷洒后处理: 观察斑点,并于紫外线荧光分析灯下检出.(10) ?酸纳-浓硫酸(Mandelin)试剂:检查生物碱.1%>酸纳的浓硫酸溶液.与多种生物碱呈不同颜色.(11)碘－碘化钾(Wagner)试剂:检查生物碱.1克碘及10克碘化钾,溶于50毫升水中,加热,加2毫升醋酸,再用水稀释至100毫升.可作纸层板显色剂,液可作沉淀试剂.3 酚类,鞣质(12)三氯化铁:检查酚类及??酸.喷洒剂:1~5%三氯化铁的水溶液或乙醇溶液.并加盐酸少许.??酸呈红色斑点,酚类称蓝色或绿色斑点.(13)铁氰化钾-三氯化钾:检查酚类,芳香胺类及还原性物质.喷洒剂: 1%铁氰化钾水溶液,2%三氯化铁水溶液.临用前等体积混合.喷洒后处理: 喷洒后酚性物质呈蓝色斑点.再喷2N盐酸,能使颜色加深,纸谱可用稀盐酸洗去喷洒液.(14) 4-胺基安替比林-铁氰化钾(Emerson反应): 检查酚类.喷洒剂: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液;II. 8%铁氰化钾水溶液.或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液方法: 先喷洒I,再喷洒II,即显色,或再放入密闭缸中,缸内放25%氢氧化铵,即产生橙色至深红色.(15) 对氨基苯磺酸,重氮盐(Pauly试剂): 检查酚类,芳香胺类及能偶合的杂环化合物.喷洒剂: 4.5克对氨基苯磺酸,加热溶于45毫升12N盐酸中,用水稀释至500毫升,取10毫升稀释液用冰冷却,加10毫升冷4.5%亚硝酸钠水溶液,0℃放15分钟(此试剂于0℃可保存3天), 用前加等体积1%碳酸钠水溶液.一般重氮化试剂,也可用联苯胺,对硝基苯胺等.(16) 对甲苯磺酸: 检查甾体,黄酮,鞣质.喷洒剂: 20%对甲苯磺酸氯仿溶液.喷洒后处理: 100℃加热数分钟,紫外线分析灯下检查荧光斑点.4 含氧杂环及蒽醌类*(17) 三氯化铝: 检查黄酮体.喷洒1%三氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示,呈黄色荧光(18)碱式醋酸铅: 检查黄酮体.喷洒剂: 饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液.于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点.(19)醋酸镁: 检查蒽醌甙,甙元及黄酮体喷洒剂: 0.5%醋酸镁甲醇溶液方法: 90℃加热5分钟,呈红色至紫色斑点.(20)氢氧化钾: 检查香豆素,蒽醌甙及甙元喷洒剂: 5~10%氢氧化钾的甲醇溶液.于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点.5 萜类,甾体(21) 三氯化锑(Carr-Price试剂): 检查甾体,萜类,皂类.喷洒剂: 25克三氯化锑溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液). 喷洒后处理: 100℃加热5分钟,于紫外线荧光分析灯下检示荧光.(22) 五氯化锑: 检查甾体,萜类,皂甙.喷洒剂: 五氯化锑-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鲜配制.喷洒后处理: 120℃加热至斑点出现,并于紫外线荧光分析灯下检示.(23)香兰醛-硫酸: 检查高级醇类,酚类,甾体,萜类,芳香油.喷洒剂: 1克香兰素溶于100毫升浓硫酸,或0.5克香兰醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中.喷洒后处理: 室温或120℃加热观察显色斑点.(24) 4-二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.试剂): 检查? Azulene 及?前体Proazulene.喷洒剂: 0.25克4-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸5克85％磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存数月):烃室温即成蓝紫色斑点,>前体于80℃加热10分钟出现蓝紫色斑点.(25) 氯胺T－三氯醋酸: 检查强心甙.喷洒剂: I. 3%氯仿T水溶液新鲜制备.II. 25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存数天).10毫升I加40毫升II,用前混合.喷洒后处理: 110℃加热7分钟,紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光. (26) 亚硝酸基铁氰化钠-氢氧化钠(Legal试剂): 检查不饱和内酯;甲基酮或活性次甲基,常用于强心甙喷洒剂: 1克亚硝基铁氰化钠溶于100毫升2N氢氧化钠-乙醇(1:1)的水溶液.显红色或紫色斑点.(27) 3,5-二硝基苯甲酸(Legal试剂): 检查强心甙,α,β-不饱和内酯.喷洒剂: 1克3,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氢氧化钾50毫升.强心甙呈紫红色斑点.6 糖类(28) 邻苯二甲基苯胺: 检查还原糖.喷洒剂: 0.93克苯氨,1.66克邻苯二甲酸溶于100毫升水饱和的正丁醇中.喷洒后处理: 105℃加热10分钟.(29) 2,3,5-Triphenyl-tetrazo lium chloride (T.T.C.)：检查还原糖及其他还原物质。
TLC显色
1、薄层层析(TLC)中杀虫剂显色试剂：溴／荧光素／硝酸银试剂：溴／荧光素／硝酸银检出物：杀虫剂。
溶液；I．5％溴的四氯化碳溶液；Ⅱ．1ml 0.25％荧光素的二甲基甲酰胺溶液，用乙醇稀释至50ml；Ⅲ．1.7g硝酸银溶于5ml水中，加2-苯氧基乙醇，用丙酮稀释至200ml。
方法：展开后的薄层置试液I容器中薰30s，取出先喷溶液Ⅱ，再喷溶液Ⅲ，再置紫外光下7min2、薄层层析(TLC)中氯化杀虫剂显色试剂：二苯胺／氯化锌试剂：二苯胺／氯化锌检出物：氯化杀虫剂(DDT、CPCA、氯-DDT、克菌丹、甲氧氯、毒杀芬)。
溶液：二苯胺及氯化锌各0.5g溶于100ml丙酮中。
方法：喷后200℃加热5min3、薄层层析(TLC)中有机磷杀虫剂显色试剂：溴／四氯化碳试剂：溴／四氯化碳检出物：有机磷杀虫剂。
溶液：10％溴的四氯化碳溶液。
方法：薰溴蒸气。
4、薄层层析(TLC)中有机硫代磷杀虫剂显色试剂：锰／水杨醛试剂：锰／水杨醛检出物：有机硫代磷杀虫剂。
溶液：I．100mg氯化锰溶于100ml 80％乙醇；Ⅱ．溶解1.3g 2-肼喹啉于小量热乙醇中，溶1g水杨醛于5ml乙醇并加1～2滴冰醋酸，合并两溶液并回流30min，冷却后析出水杨-2-醛-2-喹啉腙沉淀，并用乙醇重结晶。
用50mg此衍生物溶于100ml乙醇中。
方法：等量溶液I及Ⅱ混合后，喷板。
5、薄层层析(TLC)中氯化杀虫剂及抗菌化合物显色试剂：甲基黄方剂：甲基黄检出物：氯化杀虫剂及抗菌化合物。
溶液：0.1g甲基黄于70ml乙醇中，加25ml水并用乙醇稀释至100ml。
方法：喷板后于室温干燥，并在无滤光片紫外光下照射5min。
结果：黄色背景上呈红色斑点。
6、薄层层析(TLC)中生物碱、伯、仲、叔胺类显色试剂：硫氰酸钴(Ⅱ)试剂：硫氰酸钴(Ⅱ)．检出物：生物碱、伯、仲、叔胺类。
溶液：硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。
结果：白色至粉红色背景上呈蓝色斑点，2h后颜色消退。
TLC 显色问题
展开剂：极性大的一般用甲醇－三氯甲烷，乙腈－三氯甲烷TLC板显色问题的讨论①硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110oC烤15min，不同有机化合物显不同颜色。
②0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180oC加热15～20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC烤薄层。
⑦5％磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。
溶液I：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1)烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。
方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。
②荧光素／溴检出物：不饱和烃。
溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。
方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色③四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。
方法：喷后置紫外光下观察。
(整理)常用TLC试剂
有机TLC 板显色问题的讨论①硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol ／L 硫酸溶液与0.5-1.5mol ／L 硫酸铵溶液，喷后110oC 烤15min ，不同有机化合物显不同颜色。
②0.5％碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05％高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I ：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I 和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂 喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注重防止爆炸)，喷后薄层于180oC 加热15～20min 。
⑥酸性重铬酸钾试剂 喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC 烤薄层。
⑦5％磷钼酸乙醇溶液 喷后120oC 烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂 还原性物质显蓝色，再喷2mol ／L 盐酸溶液，则蓝色加深。
溶液I ：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I 和溶液Ⅱ等量混合。
2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1)烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。
溶液：硝酸银O.1g 溶于水lml ，加2-苯氧基乙醇lOOml ，用丙酮稀释至200ml ，再加30％过氧化氢1滴。
方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。
②荧光素／溴检出物：不饱和烃。
溶液：I ．荧光素0.1g 溶于乙醇lOOml ；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。
方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
③四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃。
溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。
TLC显色剂大全
TLC显色剂大全通用显色剂硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1:1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液；1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液，喷后110℃烤15min，不同有机化合物显不同颜色。
0.5％碘的氯仿溶液或碘-硅胶对很多化合物显黄棕色。
中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I：1%高锰酸钾溶液；溶液II：5%碳酸钠溶液；溶液I和溶液II等量混合应用。
酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180℃加热15～20min。
酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150℃烤薄层。
5%磷钼酸乙醇溶液喷后120℃烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。
烃类硝酸银/过氧化氢检出物：卤代烃类溶液：硝酸银0.1g溶于水1ml，加2-苯氧基乙醇l00ml，用丙酮稀释至200ml，再加30%过氧化氢1滴。
方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。
荧光素/溴检出物：不饱和烃溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇100ml；II．5%溴的四氯化碳溶液。
方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10:1)的溶液。
方法：喷后置紫外光下观察。
甲醛/硫酸检出物：多环芳烃溶液：37%甲醛溶液0.2ml溶于浓硫酸l0ml。
醇类3,5-二硝基苯酰氯检出物：醇类溶液：I．2%本品甲苯溶液；II．0.5%氢氧化钠溶液；III．0.002%罗丹明溶液。
方法：先喷(I)，在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min，将纸或薄层通过试液(II)30s，喷水洗，趁湿通过(III)15s，空气干燥，紫外灯下观察。
TLC常用显色剂
TLC常用显色剂适用范围显色剂名称配制方法使用方法显色通用碘蒸气将碘结晶置于密闭容器产生饱和碘蒸气放入碘蒸汽数分钟黄棕色硫酸浓H2SO4:MeOH(1:1)或５％H2SO4乙醇溶液喷雾110℃加热5min各种颜色磷钼酸试液5%5%磷钼酸乙醇溶液磷钼酸乙醇溶液喷雾120℃加热蓝色具还原性物质中性KMnO40.05%KMnO4水溶液喷雾淡黄色背景黄色斑点生物碱改良碘化铋钾试剂Dragendoff’sreagentⅠ.碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸和40mlH2O Ⅱ.8g碘化钾溶于20mlH2O贮存液：Ⅰ与Ⅱ等体积混合喷雾剂：1ml贮存液、2ml冰醋酸和10mlH2O混合喷雾桔红色碘－碘化钾试剂(wagner’s reagent) 1gI2和10gKI加50mlH2O溶解，再加2ml冰醋酸，用H2O稀释至100ml 喷雾棕褐色硫酸铈－硫酸试剂将0.1g硫酸铈悬浮与4mlH2O,加1g三氯乙酸煮沸，后滴加浓H2SO4至浑浊消失喷雾110℃加热８min各种颜色还原糖草酸苯胺试剂0.9g苯胺溶于0.1N草酸水溶液100ml中喷雾1０0℃加热粉红－棕红糖茴香醛－硫酸试剂1ml浓H2SO4加至含0.5ml茴香醛的50ml乙醇溶液中（用时配）喷雾105℃加热颜色不一a-萘酚-硫酸试剂(Molish’reagent)21ml 15%-萘酚乙醇溶液，13ml浓H2SO4,87mlEtOH,8mlH2O混合喷雾100℃加热３~6min蓝色（鼠李糖橙色）黄酮碱性试剂氨气，10%NaOH或KOH甲醇溶液喷雾前后在日光和紫外灯下观察本身颜色或荧光加强或改变三氯化铝试剂1%或5%AlCl3乙醇溶液醋酸镁试剂2%MgAc2甲醇溶液三氯化铁试剂1-2%FeCl3乙醇溶液蒽醌酸性试剂氨气，10% KOH甲醇，3%NaOH或NaCO3溶液喷雾日光和紫外灯下观察同上醋酸铝试剂０.5%AlCl3溶液醋酸镁试剂０.５%MgOAc2甲醇溶液喷雾90℃显色5min 紫色或红色等1适用范围适用范围 显色剂名称显色剂名称配置方法配置方法使用方法使用方法显色显色香豆素，酚芳香胺和能偶合的杂环化合物重氮化氨基苯磺酸试剂酸试剂0.9g 对氨基苯磺酸加热溶解于9ml 12N HCl 中，用水稀释至100ml,100ml,取取10ml,10ml,冷却，冷却，加热冰冷的4.5%4.5%亚硝酸钠亚硝酸钠10ml,010ml,0℃放置℃放置15min,用前加等体积１%NaCO 3喷雾喷雾不同颜色不同颜色酚 三氯化铁－铁氰化钾试剂化钾试剂 Ⅰ. 2%FeCl 3乙醇溶液乙醇溶液Ⅱ. 2%铁氰化钾水溶液铁氰化钾水溶液 使用前Ⅰ、Ⅱ等量混合使用前Ⅰ、Ⅱ等量混合喷雾喷雾蓝－紫色蓝－紫色 挥发油挥发油香草醛－硫酸试剂5%5%香草醛乙醇溶液香草醛乙醇溶液100ml,100ml,临用临用加4ml 浓H 2SO 4喷雾喷雾110℃加热℃加热各种颜色各种颜色 茴香醛－硫酸试剂1ml 浓H 2SO 4加入50ml 冰醋酸中冷却加0.5ml 茴香醛茴香醛 喷雾喷雾 105℃加热℃加热各种颜色各种颜色 有机酸有机酸甲红－溴酚兰指示剂示剂1g 甲红、3g 溴酚兰溶于95%EtOH100ml 如展开剂有HOAc,HOAc,先于先于先于 120℃挥去喷雾喷雾 黄色背景红色斑点红色斑点 溴甲酚绿指示剂溴甲酚绿指示剂1ml 浓H 2SO 4加至含0.5ml 茴香醛的50ml 乙醇溶液中（用时配） 蓝色背景黄色斑点黄色斑点皂甙皂甙血球试液血球试液取羊血或兔血1份，加玻璃球不断振摇除去玻璃球和凝集的血蛋白，加pH7.4磷酸缓冲液7份稀释而成份稀释而成喷雾喷雾 红色背景白色斑点白色斑点皂甙、萜皂甙、萜磷钼酸试剂磷钼酸试剂5%5%磷钼酸乙醇溶液磷钼酸乙醇溶液磷钼酸乙醇溶液喷雾喷雾140℃加热℃加热5~10min深蓝色深蓝色皂甙、强心苷、甾、萜三氯化锑试剂三氯化锑试剂 25%25%或饱和三氯化锑氯仿溶液或饱和三氯化锑氯仿溶液或饱和三氯化锑氯仿溶液 喷雾喷雾 100℃加热℃加热 5min同上同上五氯化锑试剂五氯化锑试剂25%25%五氯化锑氯仿溶液五氯化锑氯仿溶液五氯化锑氯仿溶液 同上同上 各种颜色各种颜色 甾体、三萜三萜 氯磺酸－乙酸试剂 氯磺酸－乙酸氯磺酸－乙酸(1:2) (1:2)喷雾喷雾 130℃加热℃加热 5min 各种颜色紫外灯下观察观察 皂甙皂甙 三氯乙酸试剂三氯乙酸试剂 三氯乙酸：乙酸三氯乙酸：乙酸(1:2) (1:2) 喷雾喷雾 120℃加热℃加热黄色黄色 强心苷、甾体三氯乙酸试剂三氯乙酸试剂Ⅰ.25%.25%三氯乙酸的乙醇或氯仿三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液Ⅱ．取Ⅰ取Ⅰ10ml 10ml 加过氧去氢4滴或与新配置的3%3%氯胺氯胺T 水溶液4:1混合混合喷雾喷雾110℃加热℃加热7~10min 紫外灯下观察荧光观察荧光皂甙及甾醇 醋酐－浓硫酸试剂(Liebermann-Bur chard chard’’s reagent)冷却下，小心将5ml 醋酐与5ml 浓硫酸混合，并将其加入50ml 无水乙醇中（用前配置）无水乙醇中（用前配置） 喷雾喷雾100℃加热℃加热 10min 长波紫外灯下观察灯下观察强心甙强心甙Kedde Kedde’’sreagent 2%3,5-2%3,5-二硝基苯甲酸甲醇溶液与二硝基苯甲酸甲醇溶液与2N 氢氧化钾溶液用前1:1混合混合喷雾喷雾 紫红色紫红色 碱性三硝基苯试剂Ⅰ．间三硝基苯试剂100mg 溶于二甲基甲酰氨40ml 40ml，再加浓硫，再加浓硫酸3~4滴加水至100ml Ⅱ．Ⅱ．5%5%5%碳酸钠溶液碳酸钠溶液碳酸钠溶液先喷雾Ⅰ再喷雾Ⅱ90~100℃ 加热5min 浅橙色背景橙色红斑点斑点氨基酸氨基酸茚三酮试剂茚三酮试剂 茚三酮0.3g 溶于正丁醇100ml,加冰醋酸3ml 或0.2%0.2%乙醇溶液乙醇溶液乙醇溶液 喷雾喷雾110℃加热℃加热 蓝紫色蓝紫色 1,2-1,2-萘醌萘醌萘醌-4--4--4-磺酸磺酸试剂试剂1,2-1,2-萘醌萘醌萘醌-4--4--4-磺酸磺酸0.02g 溶于5%碳酸钠溶液100ml 中（用前配置）置） 喷雾喷雾 室温干燥室温干燥 各种颜色各种颜色。
TLC(薄层色谱)显色试剂及配方大全
薄层色谱的显色反应显色试剂显色剂可以分成两大类：一类是检查一般有机化合物的通用显色剂；另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多，本章只能列举一些常用的显色剂。
l．通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110oC烤15min，不同有机化合物显不同颜色。
②0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180oC加热15～20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC烤薄层。
⑦5％磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。
溶液I：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1)烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。
溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。
方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。
②荧光素／溴检出物：不饱和烃。
溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。
方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
TLC常用试剂配制及显色方法
常用试剂配制及显色方法（一）通用显色剂1．重铬酸钾——硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。
喷洒后加热至150o C斑点出现。
2．碘：检查一般有机物（1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高显色的灵敏度。
（2）0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。
3．碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。
4．5%——磷钼酸乙醇溶液：喷后120o C烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。
5．20%磷酸乙醇溶液：喷后120o C，还原性物质显兰色。
6．碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液II：5%碳酸钠溶液。
溶液I和溶液II等量混合使用。
7．中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8．硝酸银——氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后105o C烤5~10分钟，还原性物质显黑色。
溶液I：0.1N硝酸银溶液。
溶液II：氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1：5混合。
注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9．硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I：0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1：1：2）。
临用前配制。
溶液II：高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。
溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II：6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。
溶液I：1%铁氰化钾溶液。
溶液II：2%三氯化铁溶液。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
TLC常用试剂配制及显色方法常用试剂配制及显色方法（一）通用显色剂 1．重铬酸钾――硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。
喷洒后加热至150oC斑点出现。
2．碘：检查一般有机物（1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高显色的灵敏度。
（2） 0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。
3．碘――碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。
4．5%――磷钼酸乙醇溶液：喷后120oC烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。
5． 20%磷酸乙醇溶液：喷后120oC，还原性物质显兰色。
6．碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液II：5%碳酸钠溶液。
溶液I和溶液II等量混合使用。
7．中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8．硝酸银――氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后105oC烤5~10分钟，还原性物质显黑色。
溶液I：0.1N硝酸银溶液。
溶液II：氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1：5混合。
注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9．硝酸银――高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I：0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1：1：2）。
临用前配制。
溶液II：高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。
溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II：6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。
溶液I：1%铁氰化钾溶液。
溶液II：2%三氯化铁溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
12．浓硫酸：甲醇（1：1）溶液，或5%硫酸的乙醇溶液，喷后100oC烤15分钟，各种不同物质显不同颜色。
13．萤光显色剂溶液：试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或其他萤光斑点。
A：0.2%2.7――二氯萤光素乙醇溶液。
B：0.01萤光素乙醇液 C：0.1%桑色素乙醇溶液 D：0.05罗丹明B乙醇溶液 E：萤光素一溴，检不饱和化合物。
（1）0.1%萤光素乙醇溶液（2）5%溴的CCL4溶液。
喷洒（1）以后，放置（2）溶液的缸内，可在UV光下检查萤光，萤光素与溴化合成曙红（ensln）（无萤光），而光饱和化合物则与溴加成，保留了原来的萤光；若点样量较多，则成黄色斑点，底板成红色。
14．碱式醋酸铅试剂（可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合物均反应）。
取Pbo14g置乳钵内，加蒸馏水10ml，研后成糊状后，倾入玻璃瓶中，乳钵用10ml蒸馏水洗净，洗液并入瓶中，加醋酸铅溶液（取醋酸铅22g，加蒸馏水70ml制成）70ml，用力振摇，放置七天，滤过，并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使成100ml即得。
（二）生物碱显色剂通用显色剂：1．改良碘化铋钾（Dragendorff）试剂：生物碱和某些含氯化合物显橙红色。
溶液I：碱式硝酸铋0.85g，溶于冰乙酸10ml和40ml. 溶液II：碘化钾0.8g溶于水20ml.储存液：溶液I和溶液II等量混合（置棕色瓶中杨以长期保存）。
显色剂：储存1ml与冰乙酸2ml和水70ml混合，用前配制。
2．碘化铂钾（碘铂酸）试剂，不同的生物碱显不同的颜色。
10%六氯化铂酸溶液3ml和水97ml混合，加6%碘化钾溶液100ml，混合均匀，临用前配制。
3．碘―碘化钾（Wagner）试剂：生物碱显棕褐色。
碘1g和碘化钾10g溶于50ml水中，加热，加冰醋酸2ml用水稀释到100ml。
4．改良碘化铋钾：碘，碘化钾（1：1）试剂；生物碱显紫棕色或灰黑色。
5．硫酸铈――硫酸试剂（改良sonnensclein试剂）：喷后110oC烤几分钟，不同的生物碱显不同的颜色。
硫酸铈0.1g悬浮于水4ml中，加三氯化乙酸1g，加热煮沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直到混浊消失为止。
6．碘化氯钾（vmayer）试剂（沉淀试剂）：取HgCL2（毒）1.35g加蒸馏水60ml溶解后，量取碘化钾5g，加碘馏水10ml使溶解将两液混合，加蒸馏水稀释使成100ml即得。
7．硅钨酸（Bertrand）试剂（沉淀试剂）：5g硅钨酸溶于100ml蒸馏水中，加稀盐酸使呈酸性反应即得。
（三）强心苷显色剂1．碱性3.5――二硝基苯甲酸试剂：强心苷显紫红色、几分钟后褪色。
2%3.5――二硝基苯甲酸甲醇溶液与2N氢氧化钾溶液，用前按劳1：1混合。
2．碱性三硝基苯：在浅橙色背景上显橙红色。
溶液I：间三硝基苯100mg。
溶于二甲基甲酰胺40ml，加浓HCL3~4滴，加水至100ml，避光能长期保存。
溶液II：5%碳酸风溶液先喷溶液I，再喷溶液II，喷后90~103.0oC烤5分钟。
3．三氯乙酸试剂：喷后110oC烤7~10分钟，紫外光下观察萤光。
试剂I：25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日。
或用试剂II：上述乙醇溶液用前每10ml加过氧化氢溶液4滴或新配3%氯铵T水溶液按4：1混合。
4．三氯化锑试剂：喷后100oC烤5分钟，日光下或紫外光下观察。
25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液。
5．磷酸――溴试剂溶液I：10%磷酸溶液。
溶液II：溴化钾饱和溶液：25%盐酸溶液（1：1：1）。
薄层用溶液I喷洒后，在125oC烤12分钟（薄层太湿时则烤的时间可适当延长），在紫外光下观察一次，将薄层再烤热，趁热喷溶液II，再在紫外光下观察。
6．Keller――Kllianl试剂：（检查α――去氧糖）试液：100ml冰HAC和FeCL3试液0.5ml混匀，试样1ml混匀。
试样1ml加试液2ml溶解后，沿试管壁滴入浓硫酸2接触面即显棕色。
渐变浅绿，兰色。
最后HAC层全部染成兰色。
（四）黄酮苷显色剂黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧化钠等碱性溶液，则颜色变深或变色。
1．氨气2．10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。
3．1%或5%碳酸钠溶液。
4．1%或5%三氯化铝乙醇溶液。
5．2%乙酸镁甲醇溶液。
6．饱和三氯化锑的氯仿溶液，100oC烤5分钟。
以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察。
7．1~2%三氯化铁乙醇溶液。
8．1%中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。
9．0.1N硝酸银溶液。
10．铁氰色钾――三氯化铁试剂。
溶液I：2%铁氰化钾溶液。
溶液II：2%三氯化铁溶液。
临用前溶液I与溶液II 等量混合。
11．硼氢化钾试剂：双氢黄酮化合物显红、橙红色。
溶液I：1~2%硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制。
溶液II：浓盐酸先喷I、5分钟后放入盐酸蒸气槽内。
12．Shinoda试剂：在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，黄酮醇显红紫色。
制备硅胶薄层时，加入2%w/w锌粉混合，薄层展开后盐酸溶液,如展开剂为酸性，可在展开后先喷锌――丙酮混悬液，再喷盐酸溶液。
罗丹明――氨试剂。
溶液I：0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液。
溶液II：浓氨溶液。
先喷溶液I，然后再将薄层放入氨汽槽内。
14．对氨基苯磺酸试剂。
溶液I：对氨基苯磺酸盐溶液。
溶液II：5%亚硝酸钠溶液。
将对氨基苯磺酸0.3g溶液对8%盐酸溶液100ml中，到紫溶液25ml用冰冷却，加预冷的溶液II1.5ml。
15．硼酸――柠檬酸试剂溶液I：饱和硼酸的丙酮溶液。
溶液II：柠檬酸丙酮溶液。
先喷溶液I，再喷溶液II。
16．福林试剂（Folin Ciocalteu试剂）钨酸钠10g和钼酸钠2.5g溶于70ml水中，再缓缓加85%磷酸5ml和浓盐酸10ml，将混合液回流煮沸10小时，然后加硫酸锂15g，水5ml及溴1滴，再回去流煮沸15分钟，所得溶液冷却后移置100ml溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备液），溶液应不显绿色。
溶液I：20%碳酸钠溶液。
溶液II：临用前上述贮备液1份用水三分稀释。
先喷溶液I，稍干再喷溶液II。
（五）皂苷灶显色剂1．25%磷钼酸乙醇溶液：喷后在140oC加热5~10分钟皂苷元均呈深兰色。
2．三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液：喷后在90oC烤10分钟（应在通风厨中进行），不同的皂苷元在可见光或紫外光下显出各种颜色。
3．硫酸：甲醇（1：2）溶液，喷后加热，不同的皂苷元可显红褐色、紫色、黄色或黑色，所显颜色与温度无关。
4．氟磺酸：乙酸（1：1）溶液，喷后130oC加热5分钟。
各种皂苷元可显天兰紫、粉红、淡棕等色，在紫外光下也显不同萤光。
5．碘蒸汽：薄层置于碘蒸汽筒中，皂苷无皆显棕黄色斑点。
6．三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（1：2）溶液，喷后在100oC加热20分钟皆显黄色。
7．2%血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂苷）。
取新鲜兔血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白，并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管通接读取）用生理盐水配成2%混悬液贮冰箱内备用（贮存期2~3天）。
（六）蒽醌苷显色剂蒽醌及其苷本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光。
在薄层上用氨熏或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜色变深或变色。
1．氨气2．10%氢氧化钾、甲醇溶液。
3．3%氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。
4．50%哌啶的苯溶液。
5．饱和喷酸锂溶液。
6．饱和硼砂溶液。
7．0.5%乙酸镁甲醇溶液：喷后90oC烤5分钟。
8．0.5%乙酸铝溶液，喷后紫外光下看萤光。
9．0.5%牢固兰B试剂，喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显萤光的斑点此时在可见光下显棕、紫或绿色。
也可先喷本试剂，再喷稀氢氧化钠溶液而显色。
也用于酚类及能偶芳香胺的显色。
感谢您的阅读，祝您生活愉快。