艾滋病实验室检测规范要求
HIV抗体初筛实验室管理规章制度
HIV抗体初筛实验室管理规章制度第一章总则第一条为加强HIV抗体初筛实验室的管理，确保检测质量，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《艾滋病防治条例》等法律法规，结合本实验室实际情况，制定本规章制度。
第二条本规章制度适用于本实验室开展HIV抗体初筛检测的各项工作。
第三条本实验室应当坚持科学、公正、准确、及时的原则，严格遵守国家有关法律法规和标准，确保检测结果的准确性和可靠性。
第四条本实验室应当建立健全质量管理体系，定期对实验室进行内部审核和外部评审，不断提高检测水平和服务质量。
第二章组织结构与职责第五条实验室主任负责实验室的全面管理工作，对实验室的检测质量负总责。
第六条实验室应设立质量管理组，负责实验室质量管理体系的建立、实施和维护，对实验室检测质量进行监督和控制。
第七条实验室应设立技术组，负责实验室检测技术的研发、培训和指导，提高实验室检测水平。
第八条实验室应设立样品管理组，负责样品的接收、处理、保存和分发，确保样品的安全和完整。
第九条实验室应设立设备管理组，负责设备的采购、安装、维护和校准，确保设备的精确性和可靠性。
第十条实验室应设立信息管理组，负责实验室信息系统的建立、运行和维护，确保信息的安全和保密。
第三章样品管理第十一条样品管理组负责样品的接收、处理、保存和分发，确保样品的安全和完整。
第十二条样品管理组应建立样品管理制度，包括样品的接收、处理、保存、分发、销毁等环节，确保样品的安全和完整。
第十三条样品管理组应建立样品档案，记录样品的来源、数量、状态、检测结果等信息，确保样品的可追溯性。
第十四条样品管理组应建立样品保存制度，确保样品在保存期间保持稳定和有效，防止样品变质或损坏。
第十五条样品管理组应建立样品分发制度，确保样品在分发过程中保持安全、完整、准确和及时，防止样品污染或混淆。
第四章设备管理第十六条设备管理组负责设备的采购、安装、维护和校准，确保设备的精确性和可靠性。
第十七条设备管理组应建立设备管理制度，包括设备的采购、安装、维护、校准、报废等环节，确保设备的精确性和可靠性。
艾滋病初筛实验室标准
艾滋病初筛实验室标准艾滋病初筛实验室标准是指在实验室条件下对个体进行艾滋病初筛的一系列标准和要求。
艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的严重传染病，对人类健康造成了严重威胁。
因此，艾滋病初筛实验室标准的制定和实施对于预防和控制艾滋病具有重要意义。
本文将对艾滋病初筛实验室标准进行详细介绍，以便实验室工作人员和相关从业人员能够严格按照标准进行操作，确保初筛结果的准确性和可靠性。
首先，艾滋病初筛实验室标准要求实验室必须具备一定的设施和设备条件。
实验室应具备相应的空间和设备，以保证实验操作的安全性和准确性。
实验室应有足够的防护设施和装备，以保护实验人员和实验环境的安全。
此外，实验室应有完备的设备和仪器，以进行艾滋病初筛所需的实验操作。
其次，艾滋病初筛实验室标准要求实验室工作人员必须具备专业的知识和技能。
实验室工作人员应具备相关的医学和实验室技术知识，了解艾滋病初筛的操作规程和标准要求。
实验室工作人员应具备严谨的工作态度和操作技能，以确保实验操作的准确性和可靠性。
此外，实验室工作人员还应具备相关的安全知识和应急处理能力，以应对突发情况。
再次，艾滋病初筛实验室标准要求实验室应建立完善的质量管理体系。
实验室应建立严格的质量管理制度和操作规程，以确保实验操作的规范性和可控性。
实验室应定期进行设备和仪器的检测和维护，以保证设备和仪器的正常运行。
实验室还应建立健全的实验记录和数据管理制度，以保证实验结果的准确性和可追溯性。
最后，艾滋病初筛实验室标准要求实验室应加强对实验操作的监督和检查。
实验室应建立严格的实验操作监督和检查制度，对实验操作进行全程监控和检查。
实验室还应定期进行实验操作的质量评估和内审，以发现和纠正实验操作中存在的问题和不足。
综上所述，艾滋病初筛实验室标准对实验室的设施条件、工作人员素质、质量管理体系和实验操作监督等方面都提出了严格的要求。
实验室工作人员和相关从业人员应严格按照标准要求进行操作，确保初筛结果的准确性和可靠性，以保障人类健康和社会安全。
艾滋病筛查实验室文件
艾滋病筛查实验室文件一、实验室目的和背景本实验室文件旨在规范和指导艾滋病筛查实验室的操作流程，确保实验室工作的准确性、可靠性和安全性，以提供及时有效的艾滋病检测服务。
二、实验室设备和材料1. 实验设备：- 生化分析仪- 免疫分析仪- PCR仪器- 荧光显微镜- 离心机- 培养箱等2. 材料：- 试剂盒- 超净台- 实验手套- 纯净水- 废液收集容器等三、实验室操作流程1. 样本接收与记录a) 样本接收：- 确保样本标识与病人信息一致- 将样本放置于适当的存储条件下（如4℃）b) 样本记录：- 记录样本编号、接收日期和接收者信息- 将记录存档以备查阅2. 样本处理与分装a) 样本处理：- 严格按照试剂盒说明，采用正确的方法进行样本处理 - 避免交叉污染，确保每个样本的纯净性b) 样本分装：- 将处理后的样本分装于标有编号的试管或小瓶中- 妥善保存并记录样本的存放位置3. 实验室检测方法a) 血清学检测：- 使用ELISA法检测HIV抗体- 遵循试剂盒说明进行操作- 记录结果并进行分析b) 分子生物学检测：- 使用PCR法检测HIV核酸- 严格遵循反应体系的准备和扩增条件- 检测结果进行解读和分析c) 细胞学检测：- 使用荧光显微镜观察HIV病毒感染的细胞- 绘制并记录观察到的细胞图像4. 结果判读和报告a) 结果判读：- 由专业人员进行结果判读，确保准确性和可靠性 - 参考内部质控结果和标准，排除干扰和误判b) 报告：- 将结果填写在专用报告单上- 注明样本信息、检测方法和结果5. 废弃物处理a) 废液：- 将废液倒入专门的收集容器中- 定期清空废液容器b) 废弃物：- 将用过的试剂盒、管子等废弃物转移到标有医疗废弃物的容器内- 定期进行医疗废弃物的处理四、实验室质量管理1. 内部质量控制：- 定期进行内部质量控制，确保仪器和试剂的稳定性和准确性- 记录质控结果，并及时采取纠正措施2. 外部质量评估：- 参与相关机构组织的外部质量评估活动- 分析评估结果，并改进实验室工作中存在的问题3. 培训和更新：- 对实验室工作人员进行定期培训，提高技能和知识水平- 紧跟艾滋病筛查技术的最新发展，更新实验室操作流程五、实验室安全管理1. 个人防护：- 所有进入实验室的人员必须佩戴实验手套、口罩和实验服等防护用品- 避免接触感染性危险物质2. 设备安全：- 定期对实验仪器进行维护和保养- 使用和操作仪器时，需按照操作手册要求进行3. 废弃物处理：- 严格按照有关规定对废弃物进行分类和处理- 防止废弃物对环境和人员造成危害六、实验室文件管理1. 文件存档：- 将实验室操作流程、质控记录、评估结果等文件进行分类存档 - 定期对存档文件进行整理、归档和备份2. 文件使用：- 在实验室内建立文件使用和借阅制度- 确保文件的准确性、完整性和保密性七、总结本实验室文件详细规定了艾滋病筛查实验室的操作流程、质量管理和安全管理要求。
艾滋病实验室检测流程及规范 课程
艾滋病实验室检测流程及规范课程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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艾滋病检测确证实验室工作制度
艾滋病检测确证实验室工作制度
本实验室主要从事艾滋病的确证工作，因此全体工作人员必须以严格遵守实验室生物安全管理制度以及所有的实验室规章制度。
1、不得在实验工作区内吃、喝、抽烟，以及装卸隐形眼镜和上妆。
实验用的冰箱和冰库中不得储存饮料、食物。
2、进入实验室前须更换工作衣、帽、鞋，操作时要戴好手套，非工作人员不得入内。
3、在实验操作时请穿好实验防护衣及其它合适的防护服。
实验室中不宜穿凉鞋、露趾鞋。
操作感染性、有毒物质或动物时，必须戴双层手套。
不宜将实验衣、手套或其它个人防护装备穿着到实验室以外的场所。
4、核对血液标本编号、姓名，认真执行操作规程及细则，正确吸样加试剂，发现可疑标本反复进行复查，务必做出正确结果。
疑有H1V阳性，经确证实验复核后依然阳性，应送省确认实验室确定，同时做好记录，并保护患者隐私。
5、实验工作台应每日清理，若有污染发生应立即进行消毒；所有设备在使用后均必须及时清理和处理，以保持无污染状态。
6、针筒、针头、巴斯德吸管等尖锐物品，必须置于硬质且防漏的容器中，并遵守废弃物处置规定处理。
7、在实验过程中所有废物，废水必须严格消毒处理，实验室每天必须进行消毒杀菌工作。
8、具有传染性的毒种、菌种和标本必须保存在专用冰箱内。
9、在遇到不能处理的问题时，请立即与本实验室生物安全负责人联系即便及时
采取相应的处理或消毒措施。
艾滋病检测点实验室工作制度
艾滋病检测点实验室工作制度
一、工作人员进入实验室应按生物安全防护水平要求，更换工作鞋，穿工作服、防护服、口罩、手套。
二、实验室内应保持清洁，在实验操作完成后要对环境及台面、设备等进行消毒。
三、工作人员要严格守实验室生物安全制度，实验操作应在生物安全工作台内或固定工作台上进行，操作过程应避逸产生起溶胶、飞沫、溅出或溢漏，严防试剂、标本直接接触皮肤。
四、凡被污染的吸管、试管等器具，需投2000mg∕1含氯消毒液内消毒，凡被污染的工作台面、地面或衣物,应立即用2000mg∕1含氯消毒液浸没后再擦拭或洗涤。
具有传染性的液体或固体废物都应集中焚烧或高压消毒。
五、认真做好标本的登记编号。
实验记录和结果判断,经最后核对无误，方可发出报告单，做好检验试剂和阳性标本保管工作。
六、做好原始记录及资料保存,资料保存年限不少于10年。
七、工作人员离开实验室前应做好门窗、水电检查工作，然后将工作服、鞋帽放在指定地点，并洗手方可离开。
八、严格执行实验室感染性废物消毒及安全规程。
九、试验结果应遵循保密原则，不透露除受检者以外的任I可人。
HIV实验室检测及规范操作
快速检测试剂的优缺点
硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ►优点 所需时间短 操作简便，不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ►缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。
HIV抗体检测程序及流程图
1、筛查试验 标本验收合格后，用筛查试剂进行检测，如 呈阴性反应，报告为HIV抗体阴性；对呈阳性 反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家 的试剂重复检测，如两种试剂复测均呈阴性 反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应， 或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确 认。
HIV抗体确认检测流程
筛查试验阳性反应样品 免疫印迹法（WB，HIV-1/2混合型）
HIV抗体初筛检测
ELISA）
（阿克苏
结果判定 ⑴阴性对照（Negative Control,，NC）的参考标准 NC必须＜0.250，去除≥0.250的各孔； 计算剩余NC的平均值（NCx） 0.6NCx＜NC＜1.4NCX,如果有一个以上超出此范围， 去除后重新计算NCx。 ⑵判定实验有效性： 至少有2个阴性对照OD值有效。 PC1-NCx≥0.400（PC1：HIV-1抗体阳性对照值） PC2-NCx≥0.400（PC2：HIV-2抗体阳性对照值）
HIV抗体初筛检测结果解释
造成检测结果不确定的原因
(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗 体。 (2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体 水平下降。 (3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫 性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖 等，此时，身体产生的一些抗体与Ｐ２４核 心蛋白抗体相似。 (4)以前接种过HIV疫苗。
HIV抗体检测（明胶颗粒凝集试验）
全国艾滋病检测技术规范
全国艾滋病检测技术规范艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的病毒性感染，对个人和社会都具有极大的危害。
为了有效预防、控制艾滋病传播，提高艾滋病检测技术水平，本文档旨在提供全国艾滋病检测技术规范的主要内容，以便各地开展规范的艾滋病检测工作。
本规范旨在明确艾滋病检测技术的要求、方法和结果判断原则，提高检测质量，为防治艾滋病的科学决策提供技术支持。
本规范适用于全国各级医疗卫生机构、疾病预防控制中心、血液中心等开展艾滋病检测的相关单位。
检测前要求：开展艾滋病检测的单位应具备相应的资质和条件，包括合格的人员、设备、实验室设施等。
检测人员需经过专业培训，掌握艾滋病检测技术和相关政策法规。
检测中要求：艾滋病检测应遵循科学、规范的原则，使用经国家认证的试剂和仪器。
检测过程中应建立严格的质控体系，确保检测结果的准确性和可靠性。
同时，要保护受检者的隐私权和知情权。
检测后要求：检测结束后，应将检测结果及时告知受检者，并为其提供相应的咨询和转介服务。
同时，按照国家相关规定，定期向上级主管部门报送艾滋病疫情信息。
血清学检测：常用方法包括HIV抗体筛查试验和确认试验。
抗体筛查试验包括ELISA、化学发光或免疫荧光等方法；确认试验常用免疫印迹法。
病毒载量检测：用于监测HIV病毒在体内的复制情况，常用方法有逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和核酸序列依赖性扩增（NASBA）等。
细胞学检测：通过观察淋巴细胞亚群和细胞因子水平，评估患者的免疫状态。
常用方法包括流式细胞术、免疫细胞化学染色等。
病理学检测：通过活检或尸检观察艾滋病患者的组织病理学变化，对疾病诊断、病情监测和预后评估具有重要意义。
血清学检测： HIV抗体筛查试验阳性，需进行确认试验。
确认试验阳性者即可判定为HIV感染。
病毒载量检测：病毒载量高于正常范围即可判定为HIV感染。
细胞学检测：根据淋巴细胞亚群和细胞因子水平，评估患者的免疫状态。
细胞计数低于正常范围可能提示病情加重或治疗不理想。
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《全国艾滋病检测技术规范2015年修订版》 对快速检测质控专门有要求
1、《全国艾滋病检测技术规范2015年修订版》对快速检
测质控专门有要求 2、采用商用质控品或自制质控品。 （8NCU/ml？） 3、可以由当地CDC不定期提供质控品
分为HIV定性和HIV定量检测两大类
：
HIV定性检测：HIV核 酸（RNA和前病毒DNA） 的检测
●阳性样本应立作危急值处理，电话告知患者和临床 医生，做好危急 异常值记录和临床沟通记录；
●阳性样本除按要求送样到相关做补充实验， 实验室还应保存患者血
清样本，并做好相应的保存记录。 ●阳性样本初筛实验室结果报告模式“待确认”
ELISA容易出的问题 不仔细看说明书，不能理解说明书含义： 对照设孔错误* 样本量错误
艾滋病实验室检测规范要求及有关 艾滋病实验室检测方法的选择与质量控制
实验方法 检测策略 结果解释 样本问题
人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiency Virus, HIV)， 属于逆转录病毒， RNA病毒，主要 破坏人体的免疫系统，主要分为HIV-1和HIV-2两种型 别。
HIV的主要基因及其产物 （HIV标志物）
补充试验
① 免疫印迹法 WB:（Western ② 条带免疫试验RIBA/LIA ③核酸定性定量
Blot）
实验原理：利用包被在固相载体表面的HIV抗原或抗体，与待检 血清及酶标记抗原结 合形成抗原抗体复合物，加底物显色，用酶标仪 （450/620nm双波长）测定光密度值。
ELISA 是国际上应用最早!! 目前HIV临床最常用的初筛检测方法!!
筛查试验有反应，须作补充试验
筛查试验无反应，不应作补充试验 对筛查及补充试验对象均应做咨询工作（接诊
医生尤其作好工作）
结果解释
初筛实验中的假阳性：
血液恶性病变 自身免疫性疾病 多发性胆汁型肝硬化 酒精性肝炎 疫苗接种（流感，乙肝） 多发性骨髓瘤 肾移植或慢性肾衰竭 疟疾或丝虫病 其他（试剂或操作原因、某些孕妇）
HIV病毒标志物产生的动力学
病毒RNA
P24抗原
标志物强度
AB
感染时间HBiblioteka V 实 验 室 检 测 主 要 目 的
HIV抗体检 测
艾 滋 病 适 宜 检 测 技 术
HIV-1 P24抗原 检测
HIV核酸检测
CD4+/CD8+T淋 巴细胞检测
筛查试验
① ② ③ ④ ⑤
酶联免疫吸附试验 ELISA 快速检测 RT：金标、硒标等 化学发光免疫分析（CLIA） 时间分辨荧光免疫（TRFIA） 电化学发光免疫分析（ECLIA)
CUT值计算错误
结果是否有效等？
3、快速检测方法（ RT）：金标、 硒标等
优点：简便快速，一般可在10～30分钟 内得出结果。适用于应急检测、门诊急 诊
检测。 检测结果采用目测法，不需要特殊的仪 器 设备。对检测人员技术要求不高，适 用于各 级检测机构。 做好实验记录（快速检测原始记录以能再现 检测过程为主）
结果解释
初筛实验中的假阴性
窗口期* 抗体迟反应* 免疫移植 换血输血 恶性肿瘤 免疫功能丧失（B细胞功能缺损） 其他（试剂或操作原因）
结果解释
确证试验的假阳性 样本搞错 实验过程中意外 。。。。
结果解释
确证试验的假阴性
感染晚期，无法产生能检测限内的抗体
样本错误 。。。。 实际上确证样都是筛查阳性才确认，所 以筛查的结果非常重要，记录也要能够 准确无误。
临产及分娩的孕产妇首次检测，应同时应用两
种不同的快速检测试剂 进行筛查，若两种试剂均 无反应直接报告阴性，若两种均有反应或其 中一 种有反应必须立即报告临床采取相应措施。
① 适用于未进行婴儿早期诊断检测或婴儿早期诊断 检测结果为阴性的儿童。应于12、18月龄进行艾滋 病抗体筛查 及必要的补充试验，以明确艾滋病感 染状态。
酶联免疫吸附试验（ ELISA）以珠海丽珠试剂为例
●实验的操作步骤（加样、温育、洗板、显色）必 须严格按照试剂说 明书要求； ●实验必须设置4阳性孔+3阴性孔+1外部对照孔， 其中HIV-1阳性2孔， HIV-2阳性2孔； ●实验审核发放的前提：必须是实验阳性、阴性质 控孔正确显色，外 部对照结果在控。若外部对照失 控，应分析查找实验原因，做好失控 处理记录，立 即重新实验，实验在控后才能审核结果。 ●酶标仪、洗板机必须定时、规范的做好仪器维护 和保养； ●实验必须做好样本原始检测记录、复查记录登记， 患者信息需完善。
底物
E
4.2 HIV 抗体检测的要点 4.2.1 根据目的选择检测方法及检测策略。
4.2.2 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。
4.2.3 结果判定以试剂盒说明书为标准。 4.2.4 筛查试验有反应，须作补充试验。
补充试验是通过检测样本中是否存在艾滋病病毒 抗体、抗原或者核酸而确定艾滋病病毒感染的检
HIV定量检测：又称HIV病毒载量 检测（Viralload），主要用于 抗病毒治疗患者的疗效评价，也 可用于补充试验。
艾滋病实验诊断方法
艾滋病检测策略原则
首先应选择 最敏感的实 验
第二次实验应 该采用更特异 的实验
HIV检测顺序
孕产妇产检时HIV初筛和复检流程
孕产妇临产及分娩首次HIV检测 流程
E
固相抗原 标本（含抗 体） 酶标抗 原 E
底物
E
实验原理：利用包被在固相载体表面的HIV抗原或抗体，与待检 血清及酶标记抗原结 合形成抗原抗体复合物，加底物显色，用酶标仪 （450/620nm双波长）测定光密度值。
ELISA 是国际上应用最早!! 目前HIV临床最常用的初筛检测方法!!
E
固相抗原 标本（含抗 体） 酶标抗 原 E
(任何检测都不可能绝对，所有方法都存在缺陷和不 足)
检测结果是给临床医生提供诊断参考，而不是把实 验结果作为唯一标准。
临床医生不应该过度依赖检测结果，而应该结合临
床进行综合分析。
检测要点
根据目的选择检测方法及策略 严格遵守实验室标准操作程序（SOP） 结果判定以试剂说明书为标准
② HIV感染产妇所生婴幼儿满 12个月时应 进行第一 次HIV抗体检测。 同时使用两 种不同原理或不同厂家筛查试剂进行
样本问题
抗体筛查和确认，目前常用的是血清或血浆
不复合要求样本：
严重脂血 严重溶血 样本量严重不足 ……
要有规范的送检单
检测试剂的选择
希望是敏感度和特异度均为100%，
低病毒检测值可能是核酸污染所致的结果，阴 性不能排除感染！ 是否把核酸检测作为剖腹产依据？？
上送阳性样本问题
1、送样单位、日期有没有逻辑错误
2、身份信息，户籍地址 3、检测试剂信息 4、检测结果信息（初筛、复检）
5、结论（按“规范”结果报告要求正确写 ）
6、一定要避免把样本送错的情形发生！
结果解释
核酸用于HIV-1感染的诊断*： 检测值>5000 CPs/mL(或IUs/mL)，报告检测值；检测值 ≤ 5000 CPs/mL(或IUs/mL)*，尽快再次严格按核酸检测 的要求采样检测，报告检测值，结果>5000 CPs/mL(或 IUs/mL)，报告检测值，结果仍≤5000 CPs/mL，则需充 分结合流行病学史、临床病史、CD4+T淋巴细胞计数和 HIV-1抗体随访检测结果等进行综合判断。
测方法。补充试验包括抗体确证试验（免疫印迹 试验，条带/线性免疫试验，特定条件*下的替代检 测，免疫层析或免疫渗滤试验）和核酸试验（核 酸定性和核酸定量试验）。替代检测包括三种酶 联免疫试验、三种快速试验或酶联免疫加 快速试验。(替代确认策略，四川不用) * 特定条件：高流行地区（流行率大于5%）、高 危人群（如男男同性恋，吸毒人群）、三种试剂 均经过使用地区中心实验室评价。 4.2.5 筛查试验无反应，不应做补充试验。 4.2.6 对筛查及补充试验对象均应做好咨询工作。