人参皂苷Rh_2含量测定方法及药理作用研究现状
人参皂甙单体Rh2-对人K562-白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析

人参皂甙单体Rh2 对人K562 白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析摘要目的: 观察人参皂甙单体Rh2 对人K562 细胞增殖和凋亡的影响, 分析该影响的时间和剂量依赖性。
方法: 实验于2006-07 / 08 在吉林医药学院临床检验系实验室完成。
①取对数生长期人K562 细胞制成细胞悬液, 浓度1×108L- 1, 接种于96 孔培养板内, 每孔100μL, 6h 后加入终质量浓度分别为6.25 , 12.5 , 25.0 , 50.0 ,100.0 mg / L 的人参皂甙单体Rh 2100μL ( 购自吉林省宏久生物科技股份) , 每一浓度组均设4 孔。
对照孔及调零孔加100μL 培养液。
各孔总体积均为200 μL。
在加药后48 h 采用四甲基偶氮比色法检测各孔中细胞的抑制率。
在接近于半数抑郁浓度的人参皂甙单体Rh 2 处理作用于细胞6 , 12 , 24 , 48 和72 h 后采用四甲基偶氮唑盐比色法计算抑制率。
②在倒置显微镜下观察加药与未加药孔K562 细胞形态。
③常规苏木精-伊红染色, 检测25.0 mg / L 人参皂甙单体Rh 2 作用0 , 12 , 24 和48 h 后K562 细胞的凋亡率, 并观察人参皂甙单体Rh 2 质量浓度分别为0 , 12.5 ,25.0 , 50.0 , 100.0 mg / L 时, 培养24 h 后的细胞凋亡率。
结果: ①人参皂甙单体Rh 2 对K562 细胞生长抑制作用: 当人参皂甙单体Rh 2 质量浓度为6.25 , 12.5 , 25.0 , 50.0 和100.0 mg / L 时, 抑制率逐渐升高,呈现明显剂量依赖性。
人参皂甙单体Rh 2 对K562 细胞的半数抑制浓度为25.8 mg / L, 处理K562 细胞6 , 12 , 24 , 48 , 72 h 后细胞抑制率逐渐升高,且后4 个时间点明显高于处理6 h 时( t=11.79~50.89,P < 0.01 ) 。
人参皂苷Rb1、Rg3、Rh2抗肿瘤作用与机制概况

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江苏建康职业 学院院级课题( J K 2 O l 1 O 8 ) : 星形胶 质细胞在 D 一 半乳糖诱 导脑 衰老发生发展 中的作用及其机 制, 负责人 : 雷鸣。
★★ 通讯作 者 : 姜卫卫 , 讲师 , 主要 研 究方向 : 天然 药物。
( Wo r l d S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y / Mo d e r n i z a t i o n o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e Me d i c i n e nd a M ̄ e n a Me d w a ]j 6 3 4
亡, 并 能抑 制 肿 瘤 新 血 管 生 长 ; Rh 通过 抑 制肿 瘤 细 胞 增 殖 、 诱 导其 凋 亡、 控 制 肿 瘤 细胞 转 移 来起 到 抗 肿 瘤
作 用, 本 文通过对人参皂苷 R b 、 R 、 R h 抗肿瘤作用及机制的 阐述 , 为其临床应用开发提供理论依据。 关键词 : 人参皂苷 R b 人参皂苷 R g a 人参皂苷 R h 2 抗肿瘤 机制 d o i : 1 0 . 1 1 8 4 2 / w s t . 2 0 1 3 . 0 7 . 0 2 7 中 图分 类号 : R 2 8 5 . 6 文献 标 识码 : A
具有 主补五脏 , 安精神 , 定魂 魄 , 止惊 悸 , 除邪气 , 明 目开 心益 智 , 久服 轻身延 年 的功效 。人 参 主要化 学 成分 为人参 皂苷 、 人 参 多 糖 和 挥 发 油 类 。现 代 药 理
与 临床研 究表 明 , 人参 的活性 成分具 有诱导 肿瘤 细 胞凋 亡 、 阻滞肿 瘤细胞 周期 、 抑 制肿瘤 细胞 增殖 , 抑 制肿 瘤细胞 的转 移和血 管生 长 、 降低 肿瘤细 胞 的多 药耐 药性 。目前认为人参 皂苷是人参抗 肿瘤 的主要 成分 , 已发 现 人 参 中含 有 4 0多 种 人 参 皂 苷 成 分 , 多 数 为达玛烷 型 四环三 萜皂 苷 , 如人 参皂 苷 R a 、 R a 、 R a 3 、 R b 1 , R b 2 , R b 3 、 R g 1 、 R g 2 、 R h 1 、 R h 2 ,少 数 为齐 墩果
人参皂甙Rh2产品质量检验及含量测定方法

人参皂甙Rh2产品质量检验及含量测定方法蒋磊;卢明春;鱼红闪;金凤燮【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2002(021)003【摘要】研究了酶转化法生产人参皂甙Rh2产品一般质量检验,确定了符合药典规定的产品质量标准.建立了高效液相色谱法测定人参皂甙Rh2含量的方法.通过对高效液相色谱系统适用性实验、稳定性实验、精密度实验、重现性实验、回收率实验的讨论,可以确定一个准确的色谱条件用来测定人参皂甙Rh2的含量.其测定条件为流动相甲醇∶乙腈∶水为8∶8∶1,流速1 mL/min,紫外检测波长203 nm,色谱柱ThemoHypersil ODS2 (250 mm×4.5 mm,5 μm),回收率≥99.74%,平均标准偏差(RSD)<1.83%,达到了药典规定.在该色谱条件下,人参皂甙Rh2的保留时间8~10 min.在流动相比例(甲醇∶乙腈∶水)改变,其他条件不变的情况下测定了人参皂甙Rh2 的R型和S型的含量比例为6∶4, R型保留时间为17 min左右,S型保留时间为16 min左右,R型在S型后面出峰.【总页数】5页(P197-201)【作者】蒋磊;卢明春;鱼红闪;金凤燮【作者单位】大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034【正文语种】中文【中图分类】Q503;Q946.49【相关文献】1.三七叶甙制备抗癌活性成分20(R)-人参皂甙-Rh2和人参皂甙Rg3 [J], 陈业高;黄荣;桂世鸿;吕瑜平;文净2.人参复方制剂中人参皂甙含量测定方法研究(大孔吸附树脂——比色法) [J], 徐晖;张润清3.人参皂甙Rh2对人胶质瘤细胞内钙离子浓度的影响 [J],4.中华人民共和国国家标准《人参加工产品分等质量标准》(二)对人参中总皂甙含量及人参皂甙Rb<sub>1</sub>含量标准的研究与讨论 [J], 汤美兰;徐颖;庞亚清;秦静;梁雪芹;朱飞;朱妙英;许莹;赵秋萍;王晓萍;鞠萍;丁贵忠;王琳;初正云;王瑞江;郭安;富力;何晓秋;李树殿;赵晓松;魏春雁;徐绥绪5.人参皂甙Rh2对人胶质瘤细胞U87MG凋亡的影响 [J], 白磊;陈晨;李志磊;霍国进;冯毅;严飞平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人参皂甙单体Rh2对人喉癌细胞株Hep2抗增殖作用

人参皂甙单体Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用[关键词]喉肿瘤(Laryngeal Neoplasms);人参皂甙(GINSENOSIDE)人参皂甙单体R h 2 (ginsenoside Rh2 ,G – Rh2)是近年从人参中提取的一种新的有效活性成分。
研究表明它对卵巢癌、黑色素瘤、肝癌、白血病和神经胶质瘤等肿瘤细胞生长具有明显的抑制作用。
探讨G – Rh2 对喉癌细胞的作用及其机制,现报道如下。
1资料与方法1.1 细胞培养。
喉鳞状细胞癌细胞株Hep - 2 购自北京市耳鼻咽喉科研究所,细胞用含1 0 % 灭活胎牛血清的RPMI1640培养基培养,每周传代2次。
1.2 M T T 试验。
取对数生长期H e p - 2 细胞,接种培养板中5 ×103/孔,每2 4h 换培养液。
培养2 4、4 8、7 2 h 后,观察细胞形态变化。
每孔加入MTT溶液10 µl,培养4 h后弃上清,加入D M S O 溶液1 0 0 µ l ,震荡后室温静止1 0 m i n ,然后用酶标仪于570n m 处测定吸光度(A)值,计算细胞生长抑制率。
生长抑制率(%)=(1-实验组A值/对照组A值)×100%。
1.3流式细胞仪检测细胞周期变化。
用G-Rh2 30 µg/ml处理Hep - 2 细胞2 4 h ,常规处理,碘化丙啶染色,流式细胞仪分析结果。
1.4免疫组化S A B C 法检测p27蛋白的表达。
按SABC 试剂盒说明进行常规免疫组化染色,封片后光镜观察。
每张切片随机取1 0 个高倍镜视野(400×),以CIAS - 1000 型全自动彩色细胞图像分析系统分析计算平均值,灰度值随表达量的增多而减少。
2 结果2 . 1 G-Rh2对Hep -2 细胞形态的影响。
不同浓度的G-Rh2对Hep -2 细胞共同培养2 4 、4 8、7 2h 后,倒置显微镜下观察。
HPLC法测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量

HPLC法测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量
张天斌;丁长江;李绪文;孟勤
【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》
【年(卷),期】2003(029)004
【摘要】目的:采用高效液相色谱法(HPLC)测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量.方法:乙醇提取红参中总皂苷,乙醚萃取,硅胶柱层析分离.纯化制备人参皂苷-Rh2,色谱柱为惠普Zobax ODX(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇∶水∶磷酸(87∶13∶0.2).结果:红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量为0.25%.结论:HPLC法简便,准确度高.
【总页数】2页(P533-534)
【作者】张天斌;丁长江;李绪文;孟勤
【作者单位】吉林大学化学中心综合实验室,吉林,长春,130021;吉林大学化学中心综合实验室,吉林,长春,130021;吉林大学化学中心综合实验室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1;R446.1
【相关文献】
1.HPLC法测定西洋参果浆及其发酵液中人参皂苷—Rg3、Rh2的含量 [J], 刘桂艳;刘墨祥;于连贵;杨献文;张春红
2.HPLC法测定酶转化生产人参皂苷Rh2的含量 [J], 蒋磊;赵寿经;梁彦龙;李军华
3.RP-HPLC同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rh1、Rg3和Rh2的含量[J], 张泰;袁萍;茅仁刚;张华
4.HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rg_3的含量 [J], 孟勤;尹建元;赵俊艳;梁迪
5.HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rh_2的含量 [J], 丁长江;孟勤;李政;张明恺
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人参皂甙RH2

药物经济学与新药研究开发论文人参皂苷rh2的药物作用华南农业大学11经济学2班刘斌201131141611人参皂苷rh2的药物作用华南农业大学11经济学2班刘斌201131141611前言人参皂苷RH2来源为五加科植物人参的干燥根。
它适合早期肿瘤患者及免疫低下预防肿瘤发生人群服用。
急、重、晚期癌症患者,体质较虚弱,服用可提高自身免疫功能,增强抗瘤能力,减轻化疗后毒副作用如:骨髓抑制、外周血象改变、免疫抑制、恶心呕吐、乏力、脱发等;提高生活质量,延长生命期限。
本文通过文献综述的方法,列举了人参皂甙rh2的各种药物效用,说明人参皂甙是一种很重要的经济药物之一。
关键字:人参皂甙抗癌抗疲劳正文人参皂苷RH2是以人参为主要原料的特定提取成份精制而成的复方成分。
人参皂苷Rh2的别名是20(S)-人参皂苷Rh2,化学名为原人参二醇-3-氧-B-D-吡喃葡萄糖苷,英文名为Ginsenoside Rh2,分子式是C36H62O8,分子量622.87,CAS 号78214-33-2,检测方式为高效液相色谱法HPLC≥98%,性质为无色液体。
人参具有大补元气,滋补强壮,安神益智,生津,复脉固脱等功效。
现代医学普遍认为人参对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、内分泌系统、泌尿生殖系统有广泛的作用,从而可提高人体力、智力的活动能力,增强机体对有害刺激的非特异性抵抗力。
人参的药理活性常因机体机能状态不同双向作用,因此人参是具有“适应原”样作用的典型代表药。
人参皂苷是从人参中提取出来的一个天然活性多糖总成分,主要成分:Rg、Rg1、Rg2、Rg3、Rh、Rh2、Rh1、Rb1、Rb2等,RH2的抗肿瘤作用在其中是最强的,提高免疫力,缓解疲劳的作用最好。
人参皂苷Rh2——人参皂苷主要活性物质经水解后,最后产物中抑制癌细胞增殖作用的能力最强的成分。
经过众多国际权威专家论证具备良好的抗肿瘤活性功能,抑制肿瘤癌细胞生长。
Rh2 可以有效增强单核巨噬细胞的吞噬功能,诱发肿瘤癌细胞凋亡。
HPLC法测定红参总皂苷中人参皂苷_Rh_2的含量

[文章编号] 16712587 (2003)0420533202[收稿日期] 2002203203[作者简介] 张天斌(1969-),男,吉林省辽源市人,技师,主要从事天然药物的研究。
HPLC 法测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh 2的含量张天斌1,丁长江1,李绪文1,孟 勤2(1.吉林大学化学中心综合实验室,吉林长春130021;2.吉林大学药学院)[摘 要] 目的:采用高效液相色谱法(H PL C )测定红参总皂苷中人参皂苷2R h 2的含量。
方法:乙醇提取红参中总皂苷,乙醚萃取,硅胶柱层析分离。
纯化制备人参皂苷2R h 2,色谱柱为惠普ZobaxODX (4.6mm ×250mm ,5Λm );流动相为甲醇∶水∶磷酸(87∶13∶0.2)。
结果:红参总皂苷中人参皂苷2R h 2的含量为0.25%。
结论:H PL C 法简便,准确度高。
[关键词] 人参皂甙 分析;红参;色谱法,高压液相[中图分类号] R 28411; R 44611 [文献标识码] A 1992年宋长春等[1]从引种西洋参叶中分离得到人参皂苷2R h 2。
1993年马兴元等[2]从引种西洋参茎叶分离得到人参皂苷2R h 2。
近年来,未见有关人参皂苷2R h 2提取方面的报道。
红参中人参皂苷2R h 2含量低,一般方法难以检测出其含量。
现以红参为原料分离提取总皂苷,通过乙醚萃取,硅胶柱反复层析,制得人参皂苷2R h 2,经高效液相色谱归一化法测定其含量为98%以上。
1 材料与方法111 仪器、材料与试剂 美国W aters 高效液相色谱仪,W aters 2478双波长紫外检测器,Ch rom stati on 数据处理系统;人参皂苷2R h 2对照品含量98.3%(自制);甲醇为色谱纯;水为双蒸水;硅胶G 与硅胶H 为青岛海洋化工厂出品;硅胶G 薄层板(自制);溶剂系统CHC l 3∶M eO H ∶H 2O (2∶2∶4下层);所用试剂均为分析纯;红参由吉林抚松县参茸联合公司提供。
人参皂甙Rh_2抗肿瘤作用的研究

・综 述・人参皂甙Rh2抗肿瘤作用的研究赵 越,苏 适(长春生物制品研究所,吉林长春 130062)摘 要 作为中国传统中药的人参在中药史中占有重要的地位,被用于多种古方验方的主药。
其主要成分人参皂甙具有多种药理作用,其中二醇组皂甙Rh2为从人参中提取的天然活性成分,经现代医学研究证明具有很高的抗肿瘤活性,对肿瘤细胞具有分化诱导、增殖抑制、诱导细胞凋亡等作用。
关键词 人参皂甙Rh2;抗肿瘤;细胞凋亡中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1005-7021(2003)02-0061-03 人参(Panax ginseng C.A)为五加科多年生草本植物,其成分具有诸多生物活性,为研究者所瞩目并进行了深入的研究,现代医学研究表明人参具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性作用[1]。
人参皂甙是人参中一类主要的有效成分,迄今已确定结构的至少在30种以上,人参皂甙Rh2是由人参中提取的天然活性成分,属于二醇组皂甙,自从Odashima报告了从红参中提取的有效成分Rh2在体外对黑色素瘤B16细胞具有分化诱导作用后[2],各国学者先后通过多种体内外实验证实,Rh2可以通过诱导分化或调亡,抑制多种肿瘤细胞的增殖与生长,并证明对正常细胞的毒性甚低,现将近几年有关人参皂甙Rh2针对肿瘤细胞生物作用研究综述如下。
肿瘤治疗一般分为外科手术、放射疗法、化学疗法3种。
肿瘤化疗的目的是通过化学药物杀伤肿瘤细胞,促进肿瘤细胞的死亡或阻止其增殖,但是绝大多数化学药物的细胞毒性缺乏特异性,它在杀死肿瘤细胞的同时,无选择的杀伤正常细胞特别是造血组织细胞,正常细胞的损伤常导致严重的并发症。
此外并非所有肿瘤细胞都对化疗敏感,即使对化疗敏感的肿瘤细胞,在停止用药后也易复发。
由于肿瘤分化异常在肿瘤发病学上占有重要地位,所以有学者提出使用药物对肿瘤细胞的异常分化进行逆转,即将肿瘤细胞诱导分化为正常细胞或近似正常细胞,作为抗肿瘤药物研究的新途径,而从天然化合物中寻找分化诱导剂成为学者们研究的热点。
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apoA 21concentation in bamsters fed a lithogenicdiet [J ].J He patol ,2001,35(5):550.[15] Schmidt AM ,Hori O ,Cao R ,et al ..A novel cellularreceptor for advanced glycation and products [J ].Diabetes ,1996,45(Suppl 3):S 77.[16] Clark J M ,Diehl AM.Hepatic steatosis and type 2di 2abetes mellitus[J ].Ourr Diab Re p ,2002,2(3):210.[17] Swidsinski A ,L udwing W ,Pahlig H ,et al ..Molec 2ular evidence of bacterial colonization of cholesterol gallstones[J ].Cast roenterolog y ,1995,108(3):860.[18] Spranger J ,Kroke A ,Waki H ,et al ..Adiponectinand protection against type 2diabetes mellitus [J ].L ancet ,2003,361(9353):228.[19] Wang SN ,Yeh YT ,Yu ML ,et al ..Serum adiponec 2tin levels in cholesterol and pigment cholelithiasis[J ].B r J S urg ,2006,93(8):981.[20] 邹玲梅,陆春红.2型糖尿病患者血清C 肽、血脂水平与胆结石关系探讨[J ].临床医学,2007,32(6):680.[收稿日期] 20092042163[通迅作者] 朴惠顺(1964—),女(朝鲜族),副研究员,硕士,研究方向为抗肿瘤药物活性成分分离.人参皂苷Rh 2含量测定方法及药理作用研究现状李学哲1,朴惠顺23(1.延边大学附属医院肿瘤内科;2.延边大学药学院:吉林延吉133000)[关键词] 人参皂甙类;抗肿瘤剂(中药);黑色素瘤;食管癌;前列腺肿瘤[中图分类号] R 28515 [文献标识码] A [文章编号] 100021824(2009)022******* 人参是五加科人参属植物,是传统的名贵药材.近年来,众多学者报道了人参单体的药理作用,特别是抗肿瘤作用,而研究发现人参中的抗肿瘤有效成分主要为人参多糖和人参皂苷.随着对人参研究的深入,日本学者首次从红参(人参经蒸制、烘干后得到的制成品)中发现了人参皂苷Rh 2.这种皂苷是次生苷,是加入过程中由某些二醇组皂苷受热降解后生成的.金凤燮等[1]报道了酶转化法生产Rh 2等人参稀有皂苷,提取效果较传统方法提高了500~700倍,实现了工业化生产,为Rh 2的实际应用提供了可行性.本文对人参皂苷Rh 2含量的测定方法及药理作用进行了综述.1 Rh 2含量测定方法蒋磊等[2]报道,采用H PL C 法测定Rh 2准确含量,其测定条件中流动相为甲醇2乙腈2水为8∶8∶1,流动速度为1mL/min ,紫外检测波长为203nm ,色谱柱为Thermo Hypersil ODS 2(25010mm ×415mm ,510μm ),柱温为室温,回收率高于99174%,RSD 小于1183%,达到了药典规定.在该色谱条件下,人参皂苷Rh 2的保留时间均为8~10min ,并确定了人参皂苷Rh 2的R 型和S 型含量的高效液相色谱条件为Thermo Hypersil ODS 2(25010mm ×415mm ,510μm )色谱柱,流动相为乙腈2水为1∶1,柱温为室温,流动速度为1mL/min,进样量为10μL,检测波长为203nm,理论塔板数按人参皂苷Rh2峰计算应不低于3700,分离度应大于115,得人参皂苷Rh2中R型与S型之比为6∶4,在该色谱条件下,人参皂甙Rh2的R型保留时间均为17min,S型保留时间均为16min, R型在S型之后出峰.冯林等[3]报道,采用反相高效液相色谱法测定人参Rh2的含量,测定条件中色谱柱为ODS2C18(25010mm×416mm,51μm),流动相为乙腈2水(60∶40),流动速度为110mL/min,检测波长为203nm,柱温为30℃,结果表明人参皂苷Rh2质量浓度在80~240mg/L范围内时进样量与峰面积呈良好的线性关系,r=019992,平均回收率为99175%(n=6).顾轶等[4]报道,采用L C2MS 法测定Beagle犬血浆中人参皂苷20(R)2Rh2的含量,检测条件色谱柱为Cosmosil ODS柱(15010mm×210mm i.d.,5μm,Nacalai Tesque,日本),外加1个C18柱(Security Guard,Phe nomenex,美国),柱温为40℃,流动相为乙腈及500μmol/L氯化铵水溶液,流动速度为012mL/min,梯度为乙腈40mL/L(0min),乙腈60mL/L(0103min),乙腈80mL/L(5100min),乙腈95mL/L(5103min),乙腈99mL/L(7100min),乙腈40mL/L(7150min),Pump Stop(9150min).质谱检测条件中离子化方式为电喷雾(ESI),检测模式为选择性离子检测(SIM),检测离子为负离子, 20(R)2Rh2的m/z为657135,洋地黄毒苷m/z为799155,雾化气流动速度为115L/min,反吹气压力为1M Pa,曲形脱溶剂装置温度为250℃,电压为-5V,加热块温度为200℃,离子源温度为250℃,电压为-415kV,四级杆流电压为0V,交流电压为150V,检测电压为116kV.取具塞离心管数只,各加入Beagle犬空白血浆1mL,精密加入不同质量浓度的20(R)2Rh2标准品溶液10μL,分别制备成含20(R)2Rh2质量浓度为015,110,510,1010, 5010,10010,20010μg/L的溶液,按上述血浆样品处理方法进行操作测定.样品峰面积与内标峰面积的比值(Y)及对血药质量浓度(c)作线性回归,得标准曲线回归方程(n=6)为Y=010244c+010088 (r=019998).按上述方法测得20(R)2Rh2在Beagle犬血浆中最低定量限为015μg/L(信号噪声比大于10),相对标准偏差(RSD)为1717% (n=6),符合FDA对生物样本LLOQ的要求.方亮等[5]报道,采用大孔吸附树脂法测定梅花参芪精中人参皂苷含量,此法回收率为94158%,RSD为1154%.2 药理作用211 抗肿瘤作用 人参皂苷的抗肿瘤作用已备受关注,特别是Rh2对多种癌细胞的直接杀伤作用.已发现的作用机制有调节肿瘤细胞信号通路系统,影响细胞端粒酶的活性,阻断肿瘤细胞重要成分的合成与代谢,逆转肿瘤细胞的异常分化及耐药性,增强机体免疫力,提高抗肿瘤能力[6].21111 对黑色素B16细胞具有明显的分化诱导作用 体外实验证明,10mg/L人参皂甙Rh2可明显抑制黑色素B16细胞的生长,并呈现质量浓度依赖性, IC50为411mg/L;对B16细胞有较强的分化诱导作用,表现为黑色素生成能力明显增强,形态向上皮样细胞分化,黑色素颗粒增多,生长变缓慢.细胞动力学研究结果表明,Rh2可使黑色素B16细胞阻断在G1期,亦提示Rh2对B16细胞具有分化诱导作用[7]. 21112 C6胶质瘤细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用 2,4,8μmol/L人参皂苷Rh2对C6胶质瘤细胞均有抑制增殖作用,且呈现出明显的量效关系; 4μmol/L人参皂苷Rh2作用72h后,对C6胶质瘤细胞诱导凋亡作用最为明显;人参皂苷Rh2作用后,处于G0/G1期细胞百分率明显下降,而处于S期细胞百分率则显著增高[8].21113 对食管癌Eca2109细胞周期的影响 研究结果表明,人参皂苷Rh2对Eca2109细胞的生长具有抑制作用,并呈剂量及时间依赖性.人参皂苷Rh2可将人食管癌Eca2109细胞阻滞于G0/G1期,诱导肿瘤细胞分化,并通过影响细胞周期调控因子cy2clinE,CD K2,p21WA F1基因的表达来抑制食管癌细胞的增殖[9].21114 对前列腺癌细胞株PC23M移行周期的影响 可使PC23M细胞增殖周期阻滞于G1期,延缓肿瘤细胞增殖速度[10].21115 对人喉癌细胞株H ep22抗增殖作用的影响 人参单体皂苷Rh2可明显抑制Hep22细胞的增殖,并呈剂量及时间依赖性.用30mg/L人参单体皂苷Rh2处理细胞24h后,G期细胞由60109%显著增加至68186%,S期细胞由18189%明显减少至l2130%,G2/M期细胞及凋亡细胞无明显变化,细胞阻滞于G1期[11].提示人参单体皂苷Rh2对人喉癌细胞株Hep22具有明显的抑制增殖作用,使细胞阻滞于G1期.21116 对人类乳腺癌细胞MCF27增殖的抑制作用 人参皂苷Rh2可显著抑制MCF27细胞的生长,并呈剂量依赖关系,使细胞停留在G1期[12].经Rh2处理细胞,其周期蛋白D3水平下降,而抑制Cdk2活性的p21WA F1/CIP1水平上升.Rh2可显著降低磷酸化p Rb的水平和转录因子E2F21的水平. 21117 对裸鼠体内人卵巢癌细胞肿瘤的生长抑制作用 在体外只需10~60μmol/L的Rh2即可抑制多种人卵巢癌细胞的增殖,且IC50剂量可诱导细胞凋亡[13].Rh2经口服给药较腹腔给药效果佳,经口服给药除具有增加N K细胞活性的功效外,亦可诱导细胞凋亡.21118 对B el27404细胞及人肝癌SMMC27721细胞的作用 流式细胞术证实人参皂苷Rh2对体外培养的Bel27404细胞具有诱导凋亡的作用,细胞凋亡率(AR)随人参皂苷Rh2质量浓度的增高和作用时间的延长而升高[14215],当人参皂苷Rh2质量浓度由1215mg/L增高至5010mg/L时,AR则由1612%升高至2715%,但人参皂苷Rh2质量浓度由5010mg/L增高至10010mg/L时,A R却未见相应升高.人参皂苷Rh2以时间依赖性和浓度依赖性抑制人肝癌SMMC27721细胞的增殖,10mg/L人参皂苷Rh2作用6d后,抑制率达50%,而20mg/L 人参皂苷Rh2作用4d后抑制率近50%.10, 20mg/L人参皂苷Rh2作用于SMMC27721细胞后,A FP合成量明显下降,分泌量亦从6160±0130显著下降到2135±0106,γ2GT及耐热型AL P活性显著降低,而不耐热型AL P活性及Alb分泌量则显著升高.21119 对白血病H L260细胞凋亡的诱导作用 M T T结果显示,用0~60μmol/L人参皂苷Rh2分别处理HL260细胞24,48,72h后发现,HL260细胞的增殖明显受到抑制,且呈现浓度依赖性[16].人参皂苷Rh2作用于HL260细胞48h后,IC50为25μmol/L.212 抑制肿瘤转移的作用 通过人参皂甙Rh2对癌细胞转移影响的实验发现,人参皂甙Rh2对小鼠B162BL6黑色素瘤细胞转移株自发性肺部转移具有显著的抑制作用,25,52mg/kg Rh2作用后小鼠的肺转移抑制率与对照组相比较有显著性差异,813, 1616mg/kg Rh2预先给药后,小鼠肺转移抑制率分别为44%,64%[17].213 对免疫功能的影响 人参皂苷Rh2注射液可提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能及血清溶血素抗体的生成能力,提高小鼠N K细胞杀伤活性和IL22活性[18].214 抗过敏反应 人参皂苷Rh2可明显抑制IgE 诱导RBL,2H3细胞释放β2氨基己糖苷酶(IC50为011mmol/L)和小鼠被动皮肤过敏反应,且作用强于色甘酸钠.215 抗耐药作用 顺铂为临床广谱抗肿瘤药物,可诱导多种肿瘤细胞凋亡[19].通过人参单体皂苷Rh2增强顺铂对PC23M致凋亡效应的研究发现,顺铂与Rh2联合应用可提高顺铂对前列腺癌细胞的诱导凋亡效应[20].216 抗增生作用 在培养小鼠成纤维细胞过程中发现,人参皂苷Rh2对DNA合成具有抑制作用[21].[参 考 文 献][1] 金凤燮,鱼红闪,卢明春,等.人参皂苷实现工业化生产[J].家庭医学,2004(9):5.[2] 蒋磊,卢明春,鱼红闪,等.人参皂甙Rh2产品质量检验及含量测定方法[J].大连轻工业学院学报,2002,21(3):197.[3] 冯林,曾宪斌,胡现辉.反相高效液相色谱法测定人参源胶囊中人参皂苷Rh2的含量[J].食品与药品,2008, 10(7):35.[4] 顾轶,王广基,孙建国,等.L C2MS法测定Beagle犬血浆中人参皂苷20(R)2Rh2及其药代动力学研究[J].中国临床药理学与治疗学,2006,11(3):256.[5] 方亮,戈延茹,郭建鹏,等.吸附树脂法测定梅花参芪精中人参皂甙的含量[J].延边大学医学学报,1998,21(3):165.[6] 王占峰,罗毅男,洪新雨,等.人参皂甙Rh2抗肿瘤作用机制的研究[J].北华大学学报:自然科学版,2005,6(1):50.[7] 夏丽,娟韩锐.人参皂甙Rh2体外对小鼠黑色素瘤细胞的分化诱导作用[J].药学学报,1996,31(10):742. [8] 李殿友,罗毅男,杨红,等.人参皂苷Rh2诱导C6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用[J].白求恩医科大学学报,2000,26(4):342.[9] 李丽,齐凤英,刘俊茹,等.人参皂苷Rh2对食管癌细胞Eca2109细胞周期的影响[J].中国中药杂志,2005,30(20):1617.[10] 周桂花,孟艳,李杨,等.人参单体皂苷Rh2对前列腺癌细胞株PC23M细胞移行周期的影响[J].中国病理生理杂志,2002,18(7):823.[11] 于光久,康健,郭风.人参皂苷Rh2对人喉癌细胞株Hep22抗增殖作用的研究[J].锦州医学院学报,2003,24(6):34.[12] Oh M,Choi S,Chung H.Anti2proliferating effects ofginsenoside Rh2on MCF27human breast cancer cells[J].I nt J Oncol,1999,14(5):869.[13] 张丽娟.人参皂苷对卵巢癌细胞的影响[J].国外医学中医药分册,1996,18(4):4.[14] 樊光华,姜浩,欧文胜.人参皂苷Rh2诱导人肿癌Bel27404细胞凋亡的作用[J].实用癌症杂志,2003,18(1):16.[15] 曾小莉,涂植光.人参皂苷2Rh2对人肝癌细胞SMMC27721信号传导的影响[J].中华肝脏病杂志,2004,12(9):565.[16] 李罗丝,罗志勇,文斌,等.人参皂苷Rh2对白血病HL260凋亡的诱导作用[J].中国现代医学杂志,2006,16(21):3215.[17] 陶丽华,高峰,刘红岩,等.20(R)2人参皂苷Rh2抗癌细胞转移实验研究[J].人参研究,2002,14(4):17. [18] 葛迎春,李晨燕,任慧君,等.人参皂苷Rh2注射液对荷肝癌(H22)小鼠免疫功能的影响[J].特产研究,2002(3):4.[19] 元放,张宝泉,徐炎,等.铂诱导的喉癌细胞凋亡及其对细胞周期的影响[J].中华医学杂志,1999,79(4):298.[20] 盂艳,周桂华,李扬,等.人参单体皂甙Rh2增强顺铂对PC23M致凋亡效应的研究[J].中国病理生理杂志,2003,19(5):689.[21] Byun B H,Shin IL,Lee L.Antipholiferative effects ofPanax ginseng ginseno2sides on DNA synthesis in cul2tured mouse fibroblasts[J].Koryo I nsam H ak hoechi,1995,19(2):114.。