桔梗总皂苷含量测定方法研究
桔梗总皂苷含量测定方法研究
作者：李妍， 张崇禧， 魏建和， 许旭东， 褚庆龙， LI Yan， ZHANG Chong-xi， WEI Jian-he ， XU Xu-dong， CHU Qing-long
作者单位：李妍,LI Yan(吉林农业大学中药材学院,吉林,长春,130118;中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100193)， 张崇禧,ZHANG Chong-xi(吉林农业大学中药材学院,吉
林,长春,130118)， 魏建和,许旭东,褚庆龙,WEI Jian-he,XU Xu-dong,CHU Qing-long(中国
医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100193)
刊名：
时珍国医国药
英文刊名：LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
年，卷(期)：2009,20(7)
被引用次数：1次
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本文链接：/Periodical_szgygy200907006.aspx。
HPLC 法对杏桔合剂中桔梗皂苷 D 的含量测定研究
HPLC 法对杏桔合剂中桔梗皂苷 D 的含量测定研究芮海波;赵学龙;王文晓;张国花【摘要】目的：建立杏桔合剂中桔梗皂苷 D 的含量测定方法，为杏桔合剂的质量控制提供量化参考。
方法：采用 HPLC 方法测定桔梗皂苷 D 的含量。
结果：桔梗皂苷D 在0．5～8μg 范围内线性关系良好，回归方程：y ＝238632x ＋10382，r ＝0．9997，加样回收率93．64％，RSD ＝1．54％。
结论：应用 HPLC 测定杏桔合剂中桔梗皂苷 D 含量的方法可行，可以作为其质量控制的参考依据。
%Objective:To establish content determination method of platycodinD in apricot orange mixture so as to provide quanti-tative information for quality control of apricot orange mixture.Methods:HPLC was used to determine contents of platycodin D.Re-sults:Platycodin D in the range 0.5~8ug had good linear relationship,and the regression equation was:y=238632x +1 0382, r =0.9997,recovery was 93.64%,RSD=1 .54%.Conclusion:The method of HPLC to determine Platycodin D in apricot orange mixture is feasible,and it can be used as a reference for its quality control.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P910-912,916)【关键词】杏桔合剂;桔梗皂苷D;含量;HPLC【作者】芮海波;赵学龙;王文晓;张国花【作者单位】南京市中医院药剂科，南京，210001;南京市中医院药剂科，南京，210001;南京中医药大学，南京，210014;南京中医药大学，南京，210014【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R-331杏桔合剂为江苏省南京市中医院较早大量生产的浓缩剂之一,并收载于“南京市医院制剂规范”中。
大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷
大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷有一种植物可以用来治疗疾病桔梗，它含有称为桔梗总皂苷的一类药物，对许多疾病有很好的药理作用。
为了提取这种物质，我们必须进行分离。
这里，我们使用大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷这种技术，即将混合物通过一种吸附树脂柱色谱分离、纯化的柱色谱方法。
大孔吸附树脂柱色谱法的操作步骤是，首先将样品加入树脂柱色谱容器中，并通过采用不同的溶剂组合，流动时间及各种参数，将混合物分为各种分子量的混合物，并将每一部分收集起来，然后从收集的混合物中提取桔梗总皂苷，使其成为一种纯度很高，可用于治疗疾病的药物。
此外，有几点需要特别注意。
例如，树脂柱色谱容器应在清洗后被消毒，否则可能会污染样品；另外，检测桔梗总皂苷的纯度时，应选择准确的仪器，以确保测量准确；最后，在分析过程中，应及时记录操作细节和结果，以便进行后续处理和分析。
大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷的操作步骤为：首先，将桔梗样品加入树脂柱色谱容器中，并在固定的时间内放置；其次，用合适的溶剂，根据不同的混合物的分子量，采用选择性的离子交换电容器，借助固定的温度、压力等，进行大孔吸附树脂柱色谱；最后，收集每一种分子量的混合物，分离、纯化桔梗总皂苷，使其成为一种可用于治疗疾病的药物。
大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷这种技术由于其快速、稳定、可控等优点，成为当前植物药物提取技术中的优良选择。
然而，在实际操作中，还需要注意温度控制，液体流量控制，混合溶剂组合，溶剂流速等，以确保提取的桔梗总皂苷的纯度准确。
总之，大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂苷是一种高效、稳定、可控的技术，具有很多优点，可以准确、有效地提取桔梗总皂苷，以治疗疾病。
但在操作的过程中，应特别注意温度控制，以保证提取的桔梗总皂苷的正确性和完整性。
只有这样，才能使桔梗总皂苷被准确、有效地提取，而不会受到任何干扰，从而保证治疗植物药物的效果。
桔梗酊实验报告
一、实验目的1. 掌握桔梗酊的提取方法。
2. 学习并掌握分光光度法测定桔梗中总皂苷含量的方法。
3. 了解桔梗的药用价值和桔梗酊的制备过程。
二、实验原理桔梗（Platycodon grandiflorus）为桔梗科植物，具有清热解毒、宣肺利咽、消肿止痛等功效。
桔梗中含有多种皂苷类成分，其中以桔梗皂苷D为活性成分。
本实验采用超声提取法提取桔梗中的皂苷，利用分光光度法测定桔梗中总皂苷含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：桔梗（购自药店）、乙醇、水、硝酸、氯化钠、正丁醇、无水硫酸钠等。
2. 仪器：超声波清洗器、电子天平、电热恒温水浴锅、分光光度计、离心机、容量瓶、移液管、滴定管等。
四、实验步骤1. 桔梗酊提取（1）将桔梗粉碎，过筛，取一定量粉末置于锥形瓶中。
（2）加入一定量的乙醇，超声提取30分钟。
（3）取出锥形瓶，过滤，收集滤液。
（4）将滤液置于电热恒温水浴锅中，蒸去乙醇，浓缩至一定体积。
（5）加入适量的水，定容至100mL，得到桔梗酊。
2. 桔梗中总皂苷含量测定（1）配制标准溶液：准确称取一定量的桔梗皂苷D标准品，用乙醇溶解并定容至100mL，得到浓度为1mg/mL的标准溶液。
（2）绘制标准曲线：分别取0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL标准溶液，加入适量的水，定容至5mL，得到浓度分别为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL的标准溶液。
以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
（3）样品测定：准确吸取0.1mL桔梗酊，加入适量的水，定容至5mL。
以水为参比，在540nm波长下测定吸光度。
（4）计算总皂苷含量：根据标准曲线，计算样品中总皂苷含量。
五、实验结果与分析1. 桔梗酊提取结果：通过超声提取法，成功提取了桔梗中的皂苷成分，得到了桔梗酊。
2. 桔梗中总皂苷含量测定结果：根据标准曲线，计算出样品中总皂苷含量为0.055mg/mL。
桔梗茎、叶中总皂苷含量测定方法研究
技术与教育TECHNIQUE&EDUCATION Vol.34No.l N0.1.2020第34卷第1期2020年第1期桔梗茎、叶中总皂背含量测定方法研究王文姣（吉林工业职业技术学院，吉林吉林132013）摘要：为建立测定桔梗茎、叶中总皂昔含量的方法，通过比较香草醛-冰醋酸-浓硫酸比色法、香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法、香草醛-乙醇-硫酸比色法的紫外可见光谱图，确定香草醛-冰醋酸-浓硫酸比色法更适合测定桔梗茎、叶中总皂昔含量，并对该方法的显色条件进行了优化，同时对其进行方法学验证。
试验结果表明，该方法操作简便快速，专属性好，灵敏度高，重复性好，稳定性高，适用于桔梗茎、叶中总皂昔含量的测定。
关键词：桔梗;茎；叶；总皂昔;齐墩果酸;分光光度法中图分类号:R284.1文献标识码:A1引言桔梗为桔梗科桔梗属多年生草本植物,主要分布于我国东北和华北地区，为多年生药食同源的传统中药叫主要含有三帖皂昔、黄酮类化合物等活性成分。
现代研究发现桔梗具有祛痰镇咳、保肝、降血糖、降血脂、抗氧化、免疫调节等药理作用已。
由于桔梗的药用和食用价值均很高，其需求量呈上升趋势。
因其药用部分主要为干燥根，故资源丰富、廉价易得的桔梗茎、叶由于不易储存和保管而多被丢弃。
现有研究表明桔梗茎叶中总皂昔含量高于桔梗根中总皂昔的含量，其茎、叶提取物具有明显的抗炎、祛痰作用网。
皂昔类化合物是一些天然植物的有效成分之一，天然植物的总皂昔含量测定一般采用比色法、紫外法、高效液相色谱法等㈣。
比色法是被2015年《中华人民共和国药典》所采用的测定历史较长、应用较普遍的总皂昔测定方法。
因此,本文分别采用香草醛-冰醋酸-浓硫酸比色法、香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法、香草醛-乙醇-硫酸比色法对桔梗茎、叶中的总皂昔含量测定进行研究，选出最佳方法并进行方法学验证，为桔梗茎、叶的质量控制和进一步开发利用提供依据。
2材料与方法2.1仪器与试剂TU-1810.TU-752N型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）,FA2004N 型电子天平（上海精密科学仪器有限公司），W5-100SP型数显恒温水浴锅（上海申生科技有限公司）,DNZ-9076A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）,RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）,SHB-IIIA型循环水式真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。
桔梗中三萜皂苷类化学成分及质量控制研究共3篇
桔梗中三萜皂苷类化学成分及质量控制研究共3篇桔梗中三萜皂苷类化学成分及质量控制研究1桔梗中三萜皂苷类化学成分及质量控制研究桔梗，又称甘草冬凌草，是一种常见的中草药，常被用于清热解毒、镇咳化痰等功效。
其有效成分主要是三萜皂苷类化合物。
本文将从三萜皂苷类化学成分和质量控制两个方面分别进行介绍。
一、三萜皂苷类化学成分三萜皂苷类化合物是桔梗的主要有效成分，其结构复杂，具有多种生物活性。
根据不同的结构特征，三萜皂苷类化合物可以分为五类，分别是桔梗皂苷Ⅰ、桔梗皂苷Ⅱ、桔梗皂苷Ⅲ、桔梗皂苷Ⅳ和桔梗皂苷Ⅴ。
其中，桔梗皂苷Ⅰ为桔梗中含量最高的三萜皂苷类化合物，其具有抗炎、镇咳、消肿等功效。
此外，桔梗中还含有甙类、黄酮类等化合物。
二、质量控制方法为了保证桔梗的安全、有效性，需要建立相应的质量控制方法。
目前，常用的质量控制方法主要有以下几种。
1. 药材鉴定：桔梗的药材鉴定主要依据外观、性状、气味、味道、显微特征等进行判断。
例如，桔梗的外观为长圆柱形或半圆形，有色泽，质地坚实，断面平坦或略凹，气味香味特殊，味道微苦微辛。
2. 性状鉴别：桔梗的性状鉴别主要依据外观、气味、味道等进行判断。
例如，桔梗的气味特殊，有清香味，味道微苦、辛、甘。
3. 含量测定：采用高效液相色谱法（HPLC）等方法，以桔梗皂苷Ⅰ为指标成分，测定桔梗中三萜皂苷类化合物的含量。
4. 杂质检查：对桔梗进行杂质检查，包括微生物、重金属、农药残留等。
5. 质量标准：制定相关的质量标准，包括外观、质量控制指标、含量测定、杂质限量等。
综上所述，桔梗是一种常见的中药材，其有效成分主要是三萜皂苷类化合物，具有多种功效。
为了保证其质量和安全，需要建立相关的质量控制方法和标准综合以上所述，桔梗是一种重要的中药材。
其含有丰富的三萜皂苷类化合物和其他次生代谢产物，具有抗炎、镇咳、消肿等多种药理作用。
为了保证桔梗的质量和安全性，需要建立全面、科学的质量控制方法和标准，包括药材鉴定、性状鉴别、含量测定、杂质检查和制定质量标准等方面。
HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量
HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量植物资源与环境2001,10(4):11—13JoMofP/antResourcesandEr~vlronmentHPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量朱丹妮,舒娈,郅慧,高山林(中国药科大学,江苏南京210038)摘要:首次采用高效液相一蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗[P/atycodonl朋卿1帅(Jacq.)A.Dcj中桔梗皂苷D吉量,c.a(5.um,46哪×250哪)为色谱拄,(乙腈):"水)=28:72为流动相,流速O7mI3min,ELSD-5~为检测器,外标法定量.结果表明:桔梗皂营D在O.3～2.4腭范厨内呈线性,回收率为99.57%(n=5),RSD为110%.对8种不同来源的桔梗材料和加个四倍体株系桔梗皂甙D含量的测定说明,此法是测定桔梗皂苷D的较佳方法,可作为我国桔梗质量控制和评价的一种可靠的技术.关键词:桔梗;桔梗皂甙D;高效液相一蒸发光散射中国分类号:$657.72;S:~i7.239;o946.83文献标识码:A文章编号:l0(2∞1)04-001I-03I)e~fionofpla留0曲D.m用哟m峨肋nⅢby珈PIⅡI地山0dZttUDan-ni,sHuh锄,丑ⅡHui,GAOshan—bn(ChinaPharmaceuticalUniversity,Naniing210o38,cna),J.P/o~aRe∞Ⅳ.&Er~ron.2cl01.10(4):11—13A晌ct:1kSp4perestabliBhedanHPLc-E|Dmeth0dtodeterminethe~,nlentofplatye0dinDin differentsampofPlacycodon曲%Ⅲ(Jaeq.)A.Dc.Allt~hC18Ilr|lrI(5,4.6mmX250mm) w鹊used,mobilepIIasew鹊(aeetonimle):(water)=28:72at0.7m[/n~,l即eed.Ⅱs】)-500deteemrwasUSedforqualitativeandqu~ltitativeanalysisinextemalstandardⅡIetll0d.Obrainedresultsindie~tedthatwithin0.3— 2.4pl0ayeodinDhadago0dlinearity.1heaveragerecoveryw舾99.57%(n=5)wi由RSD1.10%.Inordertoevaluatetllereliabilltyoftllisnewmethod.thecontentofplatye~linDin8eV elldifferent疵lals~np]esand20inducedtetraploidlinesintissuecultureweredetermined.11leobtainedres ultsindie~tedthatthisiSfirsttimetoreportanadvancedandeffectivem柚0dfortlleqltv~ntm]andevaluatiOnforrawmaterialsofP..Key删rds:Placycodo~姗回z叭m(J.)A.IX1.;p【a|yo0djnD;l~yploid;}删一ELsD 中药桔梗为桔梗科植物桔梗(im耐‰m(Jacq.)A.IX:.]的干燥根.在我国药用历史悠久,有宣肺,利咽,祛痰和排脓之教….桔梗皂苷为桔梗中主要有效成分,桔梗皂苷D是桔梗皂苷中的主要皂苷.中国药典中对桔梗总皂苷含量的测定用重量法…,无桔梗皂苷D含量测定方法的记录.韩国学者采用反相ttPLC测定桔梗皂苷D.测得韩国国内桔梗根中的皂苷D含量为0.050%～0.090%."l.日本学者用ttPLC法以'INK-GEL酰胺.8o为分析柱,以(乙腈):V(水):82:18为洗脱液,检测波长203nm,定量或定性分析桔梗皂苷D;我国学者许传莲等采用I/P-IfPLC法测定不同产地桔梗中皂苷D的含量,选择C,.柱为色谱分析柱,检测波长为210nm.由于桔梗皂苷D无C=C双键和共轭结构,无强的发色基团,末端吸收(203n/in,210nm)检测干扰较大.作者首次采用ttPLC.E1SD法测定桔梗皂苷D含量,旨在为控制桔梗药材质量提供科学的分析方法.l材料和方法1.1材料来源供试的桔梗药材购白安徽省毫州药材公司.经余伯阳教授鉴定;桔梗四倍体株系由中国药科大学遗传育种教研室经组织培养人工诱导培育;对照品桔梗皂苷D由吉林农业大学刘墨祥教授惠赠.1.2仪器与试剂Shin~lzu10A高效液相色谱仪(配备Shama~C—R6A数据处理机,NlteehELSD.500型蒸发光散射收藕日期:20Ol-O7—23作者简介:朱丹妮(1946一).女,上海市人.学士.副研究员,长期从事中药复方化学和物质基础研究.2植物资源与环境第1O卷检测器)乙腈(色谱纯1,水为二次重蒸水.1.3色谱条件色谱柱为c8柱(5,4.6mm×250ram):流动相:(乙腈):V(水)=28:72;流速0.7mLhnin;柱温为室温;进样量:2(】;ELSD检测器检测参数:漂移管温度l11;载气()流速2.75Um_ml_理论塔板数据按桔梗皂苷D峰计算,应不低于30C0.1.4供试品提取方法比较1.4.1回流提取精密称取干燥粉碎过5O日筛的桔梗药材200mg,加入5OrIlL甲醇于索氏提取器中四流提取4h,过滤,滤液回收至干,残渣加入25mL水溶解,以乙醚萃取3次.水液以水饱和正丁醇萃取5次,合并正丁醇液,LHj收至干,残渣以甲醇溶解并定容5mL作为供试品.1.42超声提取精密称取干燥粉碎过5O目筛的桔梗药材2OOmg,加入25mL甲醇超声提取30min, 过滤,滤渣再加入25mL甲醇超声提取30mln,过滤,用少量甲醇洗涤滤渣,合并2次滤液,回收甲醇至于,将残渣以甲醇溶解并定容于5mL容量瓶中. 以上2种供试液按上述色谱条件注入液相色谱仪,测定峰面积,试验表明两种方法制备的供试品中桔梗皂苷D的含量无显着性差异,因此以下供试品溶液的制备采用操作简便的超声提取法.l_5对照品溶液的制备精密称取桔梗皂苷D对照品1.2mg,置10mL容量瓶中加适量甲醇溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液(O.12rrrIlL).l_6测定方法按超声提取法制备供试品溶液精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20uL,注入液相色谱仪,按以上色谱条件测定峰面积,峰面积及浓度均取自然对数后用标准曲线计算桔梗皂苷D含量.1.7不同产地及桔梗多倍体样品桔梗皂苷D含■测定取河南,广西,安徽,山西,湖南,湖北和江苏产桔梗药材及2o个四倍体株系试管苗,依上法测定桔梗皂苷D含量2实验结果2.1桔梗皂苷D浓度和峰面积线性关系的考察分别取上述对照品溶液2.5,5,lO,l5和2ouL进样,按上述色谱条件测定峰面积,以色谱峰峰面积的自然对数为纵坐标,以桔梗皂苷D对照品进样量的自然对数为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程:l,=1.7858X+4.8797,r=0.9991,线性范围为0.3～2.4tzg表明线性关系良好2.2精密度试验精密吸取桔梗皂苷D对照品溶液2OuL,重复进样5次,测定其峰面积积分值分别为44191, 44980,44O69,44784和43806,平均44366,RSD为1.12%(n=5),表明进样精密度良好2.3稳定性试验将同一供试品溶液分别在0,2,4,6和8h进样.测得桔梗皂苷D的峰面积分别为24384,24775, 248o3,24773和24468,均值24641,ItSD为0.81%,表明样品溶液在8h内稳定2.4重现性试验取同一产地桔梗药材5份,按1.4.2项下制得供试品,按以上色谱条件测得桔梗皂苷D的含量分别为0.2470%,02442%,0.2475%,0.2427%和0.2447%,平均0.2452%,RSD=0.82%,表明用此方法测定桔梗皂苷D重现性较好.2.5回收率试验采取加样回收测定方法,精密称取已知含量同批药材粉末(其中含桔梗皂苷D0245%)5份,每份约100mg,加入对照品溶液2mL(含桔梗皂苷D 0.24mg),按1.4.2项下制备,进样2o止,测定桔梗皂苷D峰面积,计算回收率,结果见表l.可以看出5份样品的平均回收率为99.57%,表明此法的回收率较高.2.6不同产地桔梗药材中桔梗皂苷D含■采自河南,广西,安徽,山西,湖南,湖北和江苏的桔梗药材中桔梗皂苷D的含量(ng)分别为2.65,2.68,2.49,2_86,2.8o,2.68和2.78,变动于2.49Ⅱg～2.86mug(0.249%～0.286%)之间,但均显着高于采用反相HPLC法测得的韩国产桔梗根中的桔梗皂苷D含量(O050%～0.090%)3J.2.7桔梗多倍体样品桔梗皂苷D含■根据本研究建立的方法,以桔梗二倍体为对照测定了20个多倍体株系(称样量均为200mg)桔梗皂苷D含量,结果见表2.第4期朱丹妮等:HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量13 表1桔梗皂苷D加样回收覃试验结果Table1R咧惦0f呻叫哪r0fp咖_mD襄2桔梗四倍体株系殛亲奉二倍体试管苗桔梗皂苷Ⅱ音量2Tk蛳t0f曲哪∞d-ⅢD-mtet瑚p10柚删曲,l.id0f∞出嘞mⅢIJ日蚺.)A.Dc.表2表明:20个四倍体株系的桔梗皂苷D含量在2.02~ng/g～306IIg之问,有8个株系高于=:倍体,c.5株系含量最高达3.06lg,比二倍体高176%,余均与二倍体接近,桔梗四倍体,二倍体株系测得的桔梗皂苷D含量大多在2.5mg(0.25%)以上,与7省区采集的桔梗根的桔梗皂苷D含量相近四倍体的田问农艺性状及根部产量优于二倍体,因此为进一步选育产量高及皂甙含量高的优良桔梗品种展示了较好的前景3讨论蒸发光散射检测器ELSD是一种通用质量型检测器,流动相由热气流使之气化喷雾.再进人加热管,溶剂在此挥发,所得分析检测的物质颗粒通过狭窄光束散射,由光电倍增管收集,ELSD的响应取决于被分析物质颗粒的数量和大小,不受溶剂的干扰,已成功用于皂苷,生物碱,萜类内酯,氨基酸和糖类等分析,是分析无紫外吸收和紫外吸收弱成分的有力工具本实验的条件是经过反复实验后,综台评价而得出的.作者首次采用HPLC—ELSD法测定桔梗皂苷D的含量.并通过对7个不同来源的桔梗材料和20个四倍体株系桔梗皂苷D的含量测定,验证此方法用于桔梗皂苷D含量测定是可行的.供试样品溶液的制备采用2种方法.一种为超声提取法;另一种为传统提取法经过测定,得出两种方法制备的供试品中桔梗皂苷D的含量无显着性差异.因此选择采用步骤少,操作简便的超声提取法作为供试品的制备方法.2OOO年版中华人民共和国药典未收载桔梗皂苷D的含量测定方法,仅用重量法测定正丁醇部位的量,比较粗糙,HPLC—ELSD法的建立,为控制桔梗的质量和试管苗的早期筛选提供了新的方法.参考文献:[1]中华^民共和国药典委员会.中华^民共和国药典2∞0年版(一部)[M]北京:化学工业出版社.2∞02252]肖祟厚中药化学[川上海:上海科学技术出版社.1997,419—421.【3jKimTJ,LeeSjlsolati~anddetemfimai~ofplaty,zodlnD platyc,od~【J.~malSeiTedmol,1990.3(3):339～341.[4]小木曾弘尚桔梗皂苷的I-IPLC定量分析J].国外医学中医中药分册,1995.17(5):33[5]原田正敏繁用生药成分定量M],京:东京广JIJ书店,j989j20一j33[6]许传莲.杨睹虎,郁毅男,等应用RP.I-IPLC法测定不同产地中桔梗皂苷DJ].吉林农业大学.1999.21(4):35—38.7]舒娈.高山林.桔梗蛆鲤培养技术的研究[J]植物资掉与环境,2.00110(3):63—64(责任编辑:宗世贤)。
比色法测定桔梗中桔梗总皂苷的含量
图 2 供试品显色后的紫外全波长扫描图 F ig 2 UV Spectrum of Total Platycosides after Color Develop ing
至干 ,用 5 mL水溶解残留物 ,所得溶液缓缓通过已处理好的 2. 4 线性关系考察
AB - 8型大孔吸附树脂柱 (径高比 1 ∶5) ,反复上样 5 次后 ,
释至刻度 ,摇匀 ,即得 。
2. 2 供试品溶液的制备
取桔梗药材粉末 (过 4 号筛 )约 0. 2 g,准确称定 ,置于
150 mL具塞锥形瓶中 。精密加入 50 mL 甲醇后 ,准确称重 。
浸泡 60 m in,超声提取 30 m in,再次称重 ,补加甲醇至超声前 重量 。过滤 ,精密移取续滤液 25 mL 于蒸发皿中 ,水浴蒸发
图 1 对照品桔梗皂苷 D显色后的紫外全波长扫描图 F ig 1 UV Spectrum of Platycodin D after Color Develop ing
2. 1 对照品溶液的制备
精密称取经 70 ℃减压干燥至恒重的 p latycodin D 8. 00
mg,加 70%甲醇适量溶解 ,置 50 mL 量瓶中 ,用 70%甲醇稀
桔梗 (R adix platycodon is)为桔梗科植物桔梗 ( P latycodon 合并正丁醇层 ,减压蒸干 。残留物用 70%甲醇溶解转移至
g rand iflorum Jacq. A. DC) 的干燥根 [1 ] , 性味苦 、辛 、平 , 归肺 10 mL量瓶中 ,定容 ,摇匀 ,即得 。
对测定无干扰 。 3. 4 对照品溶液进样精密度
精密吸取对照品溶液 (25. 78μg·mL - 1 ) 5份 ,进行顶空 分析 ,按上述条件测定峰面积 ,结果峰面积分别为 261. 32, 263. 90, 255. 61, 253. 74, 254. 56, 相 对 标 准 偏 差 ( RSD ) 为 1. 7% ( n = 5) ,符合中国药典 2005版二部中有机溶剂残留量 测定方法 [2 ]中顶空分析的要求 (RSD < 10% ) 。 3. 5 加样回收率
桔梗总皂苷含量测定方法研究
桔梗总皂苷含量测定方法研究【摘要】目的建立一种香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷含量的方法，为桔梗的质量控制提供科学依据。
方法索氏提取器提取，大孔吸附树脂纯化，香草醛-硫酸比色法测定桔梗总皂苷含量。
结果比色法测定的线性方程为A=0.0034C+0.006 4，相关系数为r=0.999 7，平均加样回收率为96.97%，RSD=1.51%(n=6)。
对不同来源桔梗中总皂苷含量进行测定，其含量范围为1.07%～3.76%。
结论该法测定准确，重复性好，可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定，便于对桔梗药材进行质量评价。
【关键词】桔梗；总皂苷；桔梗皂苷D；比色法Abstract：ObjectiveTo develop a vanillin -H2SO4 colorimetry method for the determination of total saponins in Radix Platycodonis samples， in order to provide a scientific basis for the quality control of Radix Platycodonis. MethodsWith Platycodin D as standard， the total saponins in Radix platycodonis was extracted with soxhlet extractor and purified with macroporous resin column chromatography， its content was determined by vanillin -H2SO4 colorimetry method. ResultsThe calibration curve of total saponins in Radix Platycodonis samples for this method was A=0.003 4C+0.006 4， r=0.999 7. The average recovery and RSD were 96.97% and 1.51%，respectively. The content range of total saponins in Radix platycodonis from different origins was from 1.07% to 3.76%. ConclusionThis determination method is practical， reproducible and can be used for evaluating the quality of Radix Platycodonis samples.Key words：Radix Platycodonis; Total saponins; Platycodin D; Colorimetry桔梗(Radix Platycodonis)为桔梗科(Campanulaceae)植物桔梗Platycodon grandiflorum（Jacq.）A.DC的干燥根［1］，是一种药食同源的植物，用途广泛。
HPLC法测定桔梗药材中桔梗皂苷D的含量
艺。
的峰 面积 ， 其Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ４ ２ ％， 表 明精 密 度 良好 。
三萜 皂 苷 ， 桔 梗 皂苷 Ａ、 桔梗 皂 苷 Ｂ、 桔梗皂苷 Ｄ
柱（ ２ ５ ０ ｍ ｍ×４ ． ６ ａ ｒ ｍ， ５ ｔ ｘ ｍ） ； 流 动 相 Ａ： ０ ． １ ％ 磷 酸溶 液， 流 动相 Ｂ： 乙腈 ， 按 表 １进 行 梯 度 洗 脱 ； 流速 ： ０ ．
５ ｍ ｌ Ｍｍｉ ｎ ； 柱温： ３ Ｏ ℃； 进样量 １ ０ １ ｘ Ｌ ； 检 测 波 长 为
２ｌ Ｏｎ ｍ。
等， 其他 尚含有 黄 酮 、 聚炔 、 甾体 、 酚酸、 脂 肪 酸 等类 型 的化合 物 。现代 研 究 表 明 ， 桔梗 的主 要 活 性成 分
表 １ 梯 度 洗 脱 程 序
Байду номын сангаас
为桔梗皂苷类成分 ， 具有祛痰 、 抗炎 、 降低毛细血管 通 透性 、 抑 制佐 剂性 关 节 炎 、 以 及 松 弛 肠 道 平 滑
明， 超声 提取 与加 热 回流提 取 的桔 梗 皂 苷 Ｄ 的含量
２ ． ５ 精 密度 试验
精 密 吸取 对 照 品溶 液 １ ０ ｐ ￣ Ｌ ， 在
２ ． １ 项 色谱条 件下 ， 连 续进 样 ６次 ， 得 到桔 梗 皂 苷 Ｄ
相当， 且 大 于索 氏提取得 到 的量 ， 由于超声 方法 比较
甲醇 ３ ０ ｍＬ ， 超声 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 滤过 ； 滤 渣 置 具 塞 锥 形 瓶
Ｂ Ｓ Ａ １ ２ ４ Ｓ天平 （ Ｓ ａ ｒ ｔ ｏ ｒ ｉ ｕ ｓ ） 。
中， 精 密加 入 ５ ０ ％ 甲醇 ３ ０ ｍ Ｌ ， 超声 ３ ０ ｍｉ ｎ ， 滤过 ； 合 并续 滤 液 ， 于水 浴 中蒸 干 至 ５ ０ ｍ Ｌ以下 ， 用 甲醇定 容 至５ ０ ｍＬ ， 续滤 液过 ０ ． ２ ２ １ ｘ ｍ微 孔滤膜 ， 备用。
不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： ０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｐ ｌ ａ ｙｃ ｔ ｏ ｄ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｐ ｌ ａ ｔ ｙ ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ Ｄ： Ａ ｎ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ
ｏ ｆ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｐ ｌ ａ ｔ ｙ ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｐ ｌ ａ ｔ ３ ， ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ Ｄ ｉ ｎ Ｐｌ ａ ｔ ｙ ｃ ｏ ｄ ｉ Ｒａ ｄ ｉ ｘ ｆ ｒ ｏ ｍ ｄ ｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｈ ａ ｂ ｉ ｔ ａ ｔ ｓ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｐ ｌ ａ ｔ ｙ ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ ｗａ ｓ
・ １ ６ ８ ２ ・
中草１ Ｉ Ｂ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ａ ｎ ｄ Ｈ ｅ ｒ ｂ ａ ｌ Ｄ ｒ ｕ ｇ ｓ 第４ ６ 卷 第 ｎ期 ２ ０ １ ５ 年６ 月
不 同产地桔梗药材中桔梗 总皂苷和桔梗皂苷 Ｄ 的测定
谭玲玲 ，侯 晓敏 ，胡正海
１ ．青 岛农业大学生命科学 学院 山东省高校植物生物技术重点实验室 ，山东 青 岛 ２ ．西北大学生命科学学 院，陕西 西安 摘 要 ：目的 ７ １ ０ ０ ６ ９ ２ ６ ６ １ ０ ９