医学微生物学(大作业)

问答题（每小题10分，共100分）

1、什么是培养基？分为几类，主要用途。

在一定条件下含有某类微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基,也称为基本培养基.

培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类.

(1)固体培养基.是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等.固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面.

(2)液体培养基.液体培养基中不加任何凝固剂.这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业. (3)半固体培养基.是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态.可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面.

2、人工培养细菌的实际意义？

(一)在医学中的应用

细菌培养对疾病的诊断、预防、治疗和科学研究等多方面都具有重要的作用。

1.传染性疾病的病原学诊断取患者标本，进行细菌分离培养、鉴定和药物敏感试验。是

诊断传染性疾病最可靠的依据，同时也可指导临床治疗用药。

2.细菌学研究研究细菌的生理、遗传变异、致病性、免疫性和耐药性等，均需人工培养

细菌。人工培养细菌还是人类发现尚不知道的新病原菌的先决条件之一。

3.生物制品的制备将分离培养出来的纯种细菌，制成诊断菌液，供传染病诊断使用。制

备疫苗、类毒素以供预防传染病使用。将制备的疫苗或类毒素注入动物体内，获取免疫血清或抗毒素，用于传染病治疗。上述制备的制剂统称生物制品，在医学上有广泛用途。

(二)在工农业生产中的应用

细菌在培养过程产生多种代谢产物，经过加工处理，可制成抗生素、维生素、氨基酸、有机溶剂、酒、酱油、味精等产品。细菌培养物还可用于处理废水和垃圾、制造菌肥和农药，以及生产酶制剂等。

(三)在基因工程中的应用

因为细菌具有繁殖快、易培养的特点，所以大多数基因工程的实验和生产先在细菌中进行。如将带有外源性基因的重组DNA转化给受体菌，使其在菌体内获得表达，现在用此方法已成功制备出胰岛素和干扰素等生物制剂。

3、常用的湿热灭菌法有哪些？主要用途。

湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法,由于蒸汽潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固,所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高,是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法.湿热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法.

4、病原微生物包括哪几类，几型，各是什么？，

病原微生物分八大类：(1)细菌；(2)病毒；(3)立克次氏体；(4)螺旋体；(5)支原体；(6)衣原体；(7)真菌；(8)放线菌。

5、细菌的基本结构有哪些？各有何功能？

细菌的细胞结构基本结构包括：细胞壁、细胞膜、细胞质、核区、间体、核糖体、气泡和储藏物。

功能：（1）细胞壁：保护细菌细胞，维持细胞外形、渗透压。屏障保护：阻挡大分子物质。为细胞生长分裂、运动、鞭毛着生必须。与菌体抗原性、致病性有关与对抗生素等敏感性有关。（2）细胞质膜：渗透屏障：维持着细胞内正常的渗透压。物质运输。参与膜脂、细胞壁各种组分以及糖被等的生物合成。参与产能代谢，在细菌中电子传递链和ATP 合成酶均位于细胞膜。分泌细胞壁和糖被的成分、胞外蛋白以及胞外酶。参与DNA 复制与子细胞的分离。提供鞭毛的着生位点。（3）细胞质内含核糖体、贮藏性颗粒、载色体、质粒、气泡等。核糖体是合成蛋白质的场所。贮藏性颗粒是贮藏营养物质为细菌在营养贫乏时所用兰藻和光合细菌等原核生物没有叶绿体。兰藻的类囊体是分布在细胞内，特别是分散在细胞的周边部位。光合细菌的光合作用是在含有光合色素的细胞内膜进行的。这种内膜呈小泡状或扁囊状，分布于细胞周围，称为载色体。在质粒可作为目的基因载体、遗传物质尤为重要。气泡具有调节细胞比重而使细胞漂浮在水中的功能。（4）核区含极大部分物质。（5）鞭毛具有推动细菌运动的功能。（6）菌毛：促进细胞的粘附。促使某些细菌缠集在一起而在液体表面形成菌膜以获取充分的氧气。是许多革兰氏阴性菌的抗原——菌毛抗原。（7）糖被：保护作用：保护菌体抵抗干燥，免受杀菌物质伤害、抗吞噬。贮藏作用：贮藏营养物质，作为营养吸收一些阳离子。与细菌的致病力、抗原性有关。堆积细胞排除的废物。信息识别作用。（8）芽孢具有抗逆性和休眠能力。

6、细菌的特殊结构有哪些？各有何作用？

特殊结构包括：荚膜、鞭毛、纤毛、芽孢。

特殊结构是细胞可变部分，不是每个都有，如荚膜、鞭毛、芽孢。

特殊结构的作用：

1、荚膜：1）抵抗干燥；2）加强致病力，免受吞噬；3）堆积某些代谢废物；4）贮存物。

2、鞭毛和菌毛：细菌运动器官。

3、芽孢：极强的抗热、辐射、化学药物和静水压的能力。

7、革兰阳性菌的细胞壁，与革兰阴性菌的细胞壁有何异同，有何实际意义？

G+细胞壁：肽聚糖、磷壁酸

G-细胞壁：外膜、磷壁酸

【意义】

1、维持菌体固有的形态

2、保护细菌（抵抗低渗透压环境，阻挡有害物质）

3、参与菌体内外的物质交换

4、与细菌致病有关（G+菌黏附、G-菌内毒素）

5、具有多种抗原表位，诱发机体免疫应答

6、可作为鉴别细菌的依据

7、某些抗生素作用的靶位

8、什么是革兰染色法？其原理、结果和意义。

革兰染色法由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立，是细菌学中很重要的鉴别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。原理：

G﹢菌:细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。

Gˉ菌:肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝

隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是:

(1)载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。

(2)草酸铵结晶紫染1分钟。

(3)自来水冲洗，去掉浮色。

(4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。

(5)用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。

(6)用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。

9、细菌生长繁殖的条件有哪些？

1、温度①微生物生长最旺盛时的温度叫最适生长温度；②绝大多数微生物最适生长温度为25℃~37℃；③最适生长温度范围内,微生物生长速率随温度上升而加快；超过最适生长温度后,微生物生长速率急剧下降.原因是细胞内蛋白质和核酸等发生不可逆破害. ④依据最适

生长温度,可将微生物分为低温型、高温型、中温型. [问题6]若以横坐标表示温度,纵坐标表示生长速率,你能画出温度对微生物生长的影响曲线吗? 2、pH ①每种微生物最适pH不同；

②多数细菌最适pH是6.7.5,真菌5.6.0,放线菌7.8.5；③③超越最适pH,影响酶活性、细胞膜温度性等,从而影响微生物对营养物质的吸收. 3、氧依据对氧的需求,微生物分为——好氧性微生物：如多数细菌,大多数真菌. 厌氧性微生物：如某些链球菌,某些产甲烷杆菌. 兼性厌氧性微生物：如酵母菌. 4化学环境,一些化学药品及拮抗菌等对微生物的生长繁殖、生理生化过程产生影响. 5渗透压6紫外线（辐射）

10、细菌的合成代谢产物有哪些？有什么实际意义？

初级代谢产物是指微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等。在不同种类的微生物细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。此外，初级代谢产物的合成在不停的进行着，任何一种产物的合成发生障碍都会影响微生物正常的生命活动，甚至导致死亡。

与此不同，只在一定范围内主物的特异的代谢，则为次级代谢。在次级代谢的产物中，对维持生命占有重要地位的并不少，但另一方面，各种动植物和微生物所大量积累的生物碱、类萜（ferpenoid）、酚类、抗菌物质、色素等，其生理意义并不完全清楚。次级代谢产物

许多是在胚胎发育的特定时期以及其他特定组织中产生的，所以产物在经济效益上以及对生物体性状表现的调节在研究上都被看成是重要的。