实验设计方案--马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖和试管薯的诱导
一.实验设计方案实验序号一实验名称马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖和试管薯的诱导实验时间2012-4-10至2012-6-15实验室生科院3241．实验目的①熟练准确配制MS培养基母液和组培室常用的化学试剂，巩固相关理论基础知识。
②掌握无菌操作的基本技术；了解马铃薯脱毒种薯生产的过程，为脱毒种薯的生产提供必要的基础苗。
③进一步熟悉配制培养基的步骤，能熟练准确配制培养基；掌握马铃薯试管薯形成的条件，设计适合的马铃薯试管薯诱导培养基。
④通过本次实验，掌握马铃薯试管薯诱导的方法和技术。
2．实验原理、实验流程或装置示意图实验1-1 MS培养基母液和常用试剂的配制培养基是植物离体培养组织和细胞赖以生存的营养基质。
配制培养基时，为了减少试剂称取时的工作量和少量称取时出现的误差，以及避免多种营养成分混合导致沉淀产生或相互反应而失去培养效果，预先要将各种营养成分配制为一定倍数的培养基母液，待使用时稀释到要求的浓度。
母液的浓度为培养基浓度的10倍、100倍或更高。
实验1-2 马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制将事先配制好的培养基母液按一定比例稀释至浓度为培养基中规定的使用浓度，再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等，制备成符合要求的培养基。
实验1-3 马铃薯试管苗的快速繁殖利用适宜的培养基，诱导带有腋芽的马铃薯单节茎段进行芽生长和根再生形成单苗，从而达到快速繁殖的目的。
实验1-4 马铃薯试管薯诱导培养基的配制将事先配制好的培养基母液按一定比例稀释至浓度为培养基中规定的使用浓度，再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等，制备成符合要求的培养基。
实验1-5 马铃薯试管薯的诱导在培养马铃薯脱毒试管苗的培养容器中（试管苗培养4-6周），加入液体的马铃薯试管薯诱导培养基，置于全黑暗条件下即可诱导马铃薯试管苗结薯。
3．实验设备及材料设备冰箱、50ml三角瓶、500ml搪瓷杯、25ml量筒、1ml和5ml吸管、pH试纸（5.4~7.0）、封口膜、橡皮筋、扎口用棉线、药勺、称量纸、普通电子天平、移液管、量筒、烧杯、酒精棉球、小块纱布、已灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉、超净工作台等。
药品及试剂MS基本培养基母液、马铃薯快速繁殖培养基、蒸馏水、75％酒精、蔗糖、琼脂、NAA、6-BA、水解酪蛋白、1mol/LHCl、1mol/LNaOH、。
实验材料: 马铃薯脱毒苗4．实验方法步骤及注意事项方法步骤:1-1 MS培养基母液和常用试剂的配制在配制MS培养基母液时，为减少工作量可以把几种药品（如培养基中的大量元素或微量元素）配在同一母液中，但应注意各种化合物的组合以及加入的先后顺序，以免发生沉淀。
MS培养基母液包括大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液。
可按照以下步骤配制为：确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→定容→装瓶→贴标签→放入冰箱保存4.1大量元素母液的配制MS培养基中的9种大量元素除C、H、O外可由KNO3、NH4NO3、CaCl2 •2H20、MgSO4 • 7H2O、KH2PO4几种无机盐来供应，它们可配在同一母液中母液种类成分规定用量/mg•L-1扩大倍数称取量/mg母液定容体积/ml配1L MS培养基吸取量/ml大量KNO3 1900 38000 NH4NO3 1650 33000元素CaCl2 • 2H20 440 20 8800 1000 50MgSO4 • 7H2O 370 7400KH2PO4 170 34004.2微量元素母液的配制MS培养基中的微量元素可由MnSO4 •4H2O、ZnSO4 •7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4 • 2H2O、CuSO4 • 5H2O、CoCl2 • 6H2O几种无机盐来供应，它们也可配在同一母液中（具体配制见下表）。
母液种类成分规定用量/mg• L-1扩大倍数称取量/mg母液定容体积/ml配1L 培养基吸取量/ml微量元素MnSO4 • H2O 16.920033801000 5 ZnSO4 • 7H2O 8.6 1720H3BO3 6.2 1240KI 0.83 166Na2MoO4 • 2H2O 0.25 50CuSO4 • 5H2O 0.025 5CoCl2 • 6H2O 0.025 54.3分母液的配制MS培养基中所需的维生素和氨基酸等有机成分母液应分别单独配制（具体配制见下表）母液种类成分规定用量/mg•L-1扩大倍数称取量/mg母液定容体积/ml配1LMS吸取量/ml有机成分甘氨酸 2.020100250 5 盐酸硫胺素0.1 5盐酸吡哆素0.5 25烟酸0.5 25肌醇100 5000▪▪▪▪4.4铁盐母液的配制确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→煮沸数分钟→调节pH值至 5.8 →定容→装瓶（棕色）→贴标签→放入冰箱保存。
用时每配l L培养基取该溶液5ml。
母液成分规定用量扩大倍数称取量/mg母液定容体积配1L MS吸取量种类/mg•L-1/ml /ml铁盐Na2EDTA • 2H2O37.32001865250 5 FeSO4 • 7H2O27.8 13904.5生长调节物质母液的配制对于植物生长调节物质，配制成母液时，通常用mg·ml-1或 ppm 较为方便，一般配制成0.1-1mg·ml-1的母液，这样的浓度便于计算也可避免冷藏时形成结晶。
2,4-D/NAA用少量95％酒精溶解，再加水定容；6-BA应先溶于少量1 mol·L-1的HCl中，再加水定容。
母液种类成分称取量(mg )母液定容体积(ml )母液浓度(mg/ml)生长调节物质2,4-D/NAA 501000.5 6-苄氨基嘌呤10 0.14.6用试剂的配制盐酸（lmol·L-1 ）：用浓度36.5%、密度1.19g/cm3的浓盐酸配制氢氧化钠（lmol·L-1 ）：用固体氢氧化钠配制75%酒精(v/v) ：用95%的酒精来配制稀铬酸洗涤液：重铬酸钾50 g溶于1000 ml蒸馏水中，冷却后缓慢加入工业用硫酸90 ml。
1-2 马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制▪配方： MS基本培养基＋0.7％琼脂＋3％蔗糖▪配制体积：每小组配制0.5L（１）根据需要配制的培养基的量称好所需的琼脂（0.７～0.８％），撕碎后放入医用口杯中，加入适量的蒸馏水（估计加入母液后不超过配制总量）置于电磁炉上加热溶解，边加热边用玻棒搅动。
（２）待琼脂完全溶解后，加入规定用量的母液（可事先取好放于一烧杯中），再加入规定用量的蔗糖，继续加温并不断搅拌，待琼脂煮透后端离火源，根据培养基配方及培养基体积加入所需要的生长调节物质，最后加蒸馏水至所需体积。
（３）调节培养基的酸碱性至pH5.8:培养基若偏酸时用lmol·L-1 NaOH来调节，偏碱则可用lmol·L-1 HCl来调节。
一般来说，当pH值高于6.0时，培养基将会变硬；pH值低于5.0时，琼脂不能很好地凝固。
（４）培养基的分装:占其容积的1/4～1/3为宜，果酱瓶每瓶20～30ml，太多既浪费培养基，又减少了培养材料的生长空间；太少又会因营养不良影响生长。
培养基分装完后，用封口膜封严瓶口，并用橡皮筋扎紧。
（５）培养基的灭菌:温度121℃时保持15～30 min左右即可。
(6)接种工具准备:分别取枪状镊子2把、眼科手术剪和手术刀各1把，用牛皮纸和橡皮圈包扎成一套；每套培养皿内放入合适滤纸2～3张，用牛皮纸和橡皮圈包扎成一套；然后和培养基一起统一灭菌。
1-3 马铃薯试管苗的快速繁殖▪（1）准备工作:①接种室的清洁和消毒②超净工作台的开机和消毒③剪刀、镊子、已灭菌培养皿、酒精棉球、酒精灯、待用培养基等的准备④实验材料的准备▪（2）无菌操作①实验操作前，操作人员洗手及手和小臂消毒（注意问题？）②使用的镊子、解剖刀等用95％酒精浸泡，之后放在酒精灯上灼烧灭菌，再放在灭菌后的培养皿中冷却后使用。
③培养瓶外壁的消毒④将马铃薯试管苗剪为单节茎段后接种到培养基中，在植入材料的前后，培养瓶的瓶口须在酒精灯火焰上烧烤灭菌。
⑤封口、标记、将培养瓶置于培养架上，在温度20-25℃，光照强度2000-3000lx，光照时间12-14小时/天的条件下培养。
1-4 马铃薯试管薯诱导培养基的配制▪配方： MS基本培养基＋3mg/L6-BA＋8％蔗糖▪配制体积：每小组配制0.5L，用100ml三角瓶分装成10瓶。
（1）药品及用具的准备（2）培养基配制（3）调节培养基的酸碱性至pH5.8（4）培养基的分装（5）培养基的灭菌1-5 马铃薯试管薯的诱导（1）准备工作a 接种室的清洁和消毒；b 超净工作台的开机和消毒；c 剪刀、镊子、培养皿、待用培养基等的准备；d 实验材料的准备（2）马铃薯试管薯的诱导方法固体培养法、液体培养法、固液双层培养法，本次采用固体、液双层培养法。
（3）无菌操作在无菌条件下将液体的马铃薯试管薯诱导培养基加入到用固体培养基培养马铃薯试管苗的容器中，置于黑暗条件下诱导马铃薯试管苗结薯。
注意事项:①在配制MS培养基母液时，但应注意各种化合物的组合以及加入的先后顺序，以免发生沉淀。
力求Ca2+与SO42- 和PO43-错开，以免形成硫酸钙或磷酸钙的不溶物。
同时，要慢慢地混合，边混合边搅拌。
②配制好的各种母液应分别贴上标签，写明母液名称、配制倍数、配制者、配制日期。
最好在2～4℃的冰箱中保存,发现有霉菌和沉淀结晶产生，就不能再使用③培养基灭菌时注意:▪1灭菌前检查锅内是否有足够的水；▪2装锅不可过满；▪3培养基消毒灭菌时间不宜过长，也不可超过灭菌锅规定的压力范围；否则，培养基中的蔗糖、有机物质，特别是维生素类物质就会分解，导致培养基变质、变色，甚至难以凝固。
▪4当灭菌完成后，应切断电源或热源，待灭菌锅内气压接近“0”时，方可打开放气阀，拧开灭菌锅盖取出培养基。
切勿为急于取出培养基而打开放气阀放气，否则锅内气压下降太快会引起减压沸腾，导致灭菌锅内各容器中的培养基溢出，造成浪费或污染，甚至烫伤工作人员。
5．实验结果:⑴实验现象：诱导共得到马铃薯微型薯3瓶，两瓶均无污染。
三瓶中的微型薯长势不错，但马铃薯苗出现轻微的倒伏现象。
第一瓶共有6株苗，第二瓶共有4株苗，第三共有5株苗，其中第一瓶中有6个微型薯（未拍摄），第二瓶中有微型薯4个（未拍摄），第三瓶中有微型薯4个（未拍摄）。
第一瓶中微型薯直径超过0.5厘米的有5个，第二瓶中微型薯直径超过0.5厘米的有3个。
微型薯呈现淡黄色，其中直径较大的颜色偏白，直径较小的颜色偏黄。
⑵实验现象分析：两瓶中几乎所有的试管苗都产生了微型薯，产生的微型薯数量也较多，但直径超过0.5厘米的微型薯不多，究其原因可能是培养时间不够长。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是我国重要的经济作物之一，但是也受到各种病毒的威胁，其中普通马铃薯Y 病毒和葡萄叶病毒对产量和品质的影响尤为严重。
因此，马铃薯脱毒试管苗快繁技术应运而生，成为解决马铃薯病毒问题的有效途径。
马铃薯脱毒技术主要应用于普通马铃薯Y病毒、葡萄叶病毒、马铃薯卷叶病毒和马铃薯花叶病毒等病毒的控制。
试管苗快繁技术是指将受病毒侵染的母株去除外在病毒污染，通过组织培养技术培养出无病毒的试管苗，再进行大规模繁殖。
该技术有以下优点：一、保证马铃薯品种的纯度和优质性马铃薯试管苗快繁技术可以去除试管苗体内外病毒，降低病毒对马铃薯产量和品质的影响，保证马铃薯品种的纯度和优质性。
二、促进马铃薯种薯产业的发展和壮大马铃薯试管苗快繁技术可以大规模繁殖马铃薯健康种苗，提高种薯产量和品质，促进马铃薯种薯产业的发展和壮大。
三、降低耕地污染和农业用药量马铃薯试管苗快繁技术可以去除病毒，降低马铃薯的病害发生率，从而减少对土壤和水的污染，降低农业用药量，保护生态环境。
四、提高农民收益马铃薯试管苗快繁技术可以提高马铃薯产量和品质，增加农民的收益，改善农民的生活水平。
一、选择底薯并进行消毒。
选用优质种薯作为材料，切割成小块，进行消毒处理，去除外在污染细菌。
二、组织培养获得试管苗。
采取组织培养技术，将马铃薯底薯比如去除病毒后得到的组织块，放在含有营养物质的试管中，在适宜的温度、光照和湿度下培养，最终获得无病毒的马铃薯试管苗。
三、快速繁殖无病毒试管苗。
将无病毒马铃薯试管苗通过快繁技术进行扩繁，获得大量无病毒的马铃薯试管苗，再进行与土壤直接接触的育苗培育。
四、田间移栽。
无病毒的马铃薯试管苗经过特殊处理后，移栽到田间进行培育，获得无病毒的马铃薯种质资源。
总之，马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一项有效的马铃薯病毒控制技术，可以保证马铃薯种质资源的纯度和优质性，为马铃薯种薯产业的发展和壮大提供了有力支撑，也对保护生态环境和提高农民收益具有重要意义。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术一、引言马铃薯是我国重要的粮食作物之一，也是世界上著名的经济植物之一。
然而由于病毒的不断侵袭和疫病的流行，马铃薯的产量和品质不断下降，给农民带来了巨大的经济损失。
因此，繁殖健康无害的马铃薯脱毒试管苗已成为种植业的重要课题。
本文将就马铃薯脱毒试管苗快繁技术进行详细描述。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是指利用组织培养技术，从马铃薯营养组织中培养出无菌结果愈伤组织，然后通过激素处理，使其分化成愈伤组织和根发生体，并再次通过激素培养，使其分化成幼苗。
经过快速繁殖和转移，只需数月就可以获得大量无菌试管苗。
1、原种资料筛选首先要去毒源，选择健康、无病毒的马铃薯株作为原种资料。
2、表型鉴定通过观察和检测，鉴定选定的原种资料是否存在病害。
3、进行消毒处理将所选的马铃薯根茎进行消毒处理，保证原种资料无菌。
4、组织培养将原种资料营养组织分离出来，并进行无菌培养，培养至结果愈伤组织。
5、激素处理将结果愈伤组织分裂成愈伤组织和根发生体，经过激素处理，使愈伤组织分化成为幼苗。
6、快速繁殖和转移幼苗经过快速繁殖和转移，可以在数月时间内获得大量的无菌试管苗。
1、高效快捷马铃薯组织培养技术可以在短时间内获得大量无菌马铃薯苗，极大地提高了马铃薯繁殖的效率。
2、无病毒由于是无菌培养，可以避免病毒的传播和侵袭，从根本上解决了马铃薯病害的问题。
3、一致性强试管苗的形态、生长状态、品种、性状和同一生产人群下的分布均一。
4、推广灵活马铃薯组织培养技术可以根据不同地区和不同需求进行灵活推广和应用。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术具有广阔的应用前景，可以成为解决马铃薯病害的重要手段。
同时，随着科技不断发展和创新，马铃薯脱毒试管苗快繁技术将进一步提高繁殖效率和质量，并推动种植业的发展。
马铃薯脱毒及脱毒种薯繁殖技术-精品文档
马铃薯脱毒及脱毒种薯繁殖技术一、脱毒马铃薯的增产效果及特点1、增产效果同样的品种，经过脱毒和隔离繁殖后，其结果明显不同。
脱毒后的品种植株生长健壮，产量显著增加，其增加幅度要比脱毒前至少增产30%～50%，甚至成倍增产。
退化越严重的品种，脱毒后增产效果越明显。
2、增产的原因脱毒后的马铃薯，摆脱了病毒对植株机体各种生理活动的干扰，恢复了该品种原有的生长发育特性，同时也恢复了其增产潜力，因而植株生长旺盛。
据测定，脱毒后的马铃薯，其植株叶绿素含量比退化植株增加33.4%，并且光合生产率提高14%-41.9%，植株高度增加50%以上。
3、脱毒马铃薯的特点脱毒马铃薯只是将已经侵染进植株体内的病毒脱除，但不能避免病毒的再侵染。
也就是说在繁殖和生产过程中脱毒马铃薯仍会遭到各种病毒的再侵染而重新退化。
因此，要采取有效措施防止或延缓病毒的再侵染。
脱毒马铃薯是有“有效期”的，过了有效期就应淘汰。
马铃薯繁殖、生产代数越高，再退化的就越严重。
二、脱毒技术1、茎尖剥离方法幼苗材料经过消毒处理后，将其置于解剖镜的承物台上，用左手拿镊子夹住植株，右手用解剖针剥离掉植株生长点的小叶片和叶原基，最后只保留一个生长点，这个生长点是带一个叶原基的，大小约为O.1～0.2mm。
然后用解剖针把生长点“切”下来放在培养基上，封严瓶口放于培养室内培养。
2、茎尖培养方法采用Ms基本培养基，每升添加6-BA 2mg NAA 0.5mg，盐酸吡哆素0.5mg，甘氨酸2mg，盐酸硫胺素0.4mg，烟酸0.5mg，生物素0.05mg，肌醇100mg。
温度和湿度是茎尖的主要培养条件，温度23～25℃，光照强度是3000～4000勒克斯，且光照时间为每天16小时左右。
经过30～40天的培养茎尖便有明显的增长。
大约3～4个月后就能长成小植株。
3、病毒检测病毒检测的目的，是鉴定所获得的试管苗是否将所有病毒完全脱除。
病毒检测方法有生物学和血清学两种。
目前，血清学方法应用比较普遍的是“酶联免疫吸附技术（ELISA）”。
实验13马铃薯脱毒试管苗快速繁殖
▪ 4 实验用具和仪器
▪ 酒精棉球、小块纱布、枪状镊子、手术剪、 解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工 作台等。
▪ 5 药品和试剂
▪ 马铃薯快速繁殖培马铃薯脱毒试管
7 实验操作流程
▪ 〔1〕准备工作 ▪ ①接种室的清洁和消毒 ▪ ②超净工作台的开机和消毒 ▪ ③剪刀、镊子、已灭菌培养皿、酒精
棉球、酒精灯、待用培养基等的准备 ▪ ④ 实验材料的准备
〔2〕无菌操作
▪ ① 实验操作前，操作人员洗手及手和小臂 消毒〔注意问题？〕
▪ ② 使用的镊子、解剖刀等用95％酒精浸泡， 之后放在酒精灯上灼烧灭菌，再放在灭菌 后的培养皿中冷却后使用。
▪ ③培养瓶外壁的消毒
〔2〕无菌操作
▪ ④将马铃薯试管苗剪为单节茎段后接种到 培养基中，在植入材料的前后，培养瓶的 瓶口须在酒精灯火焰上烧烤灭菌。
▪ ⑤封口、标记、将培养瓶置于培养架上， 在温度20-25℃，光照强度2000-3000lx， 光照时间12-14小时/天的条件下培养。
图1 马铃薯试管苗的茎段扦插繁殖
实验1-3 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖
▪ 1 实验目的
▪ 通过本次实验，掌握无菌操作的根本技术； 了解马铃薯脱毒种薯生产的过程，为马铃 薯脱毒种薯的生产提供必要的根底苗。
▪ 2 实验方法：单节茎段扦插〔短枝发生型〕 ▪ 3 实验原理
▪ 利用适宜的培养基，诱导带有腋芽的马铃 薯单节茎段进展芽生长和根再生形成单苗， 从而到达快速繁殖的目的。
马铃薯茎段快繁及试管薯诱导
马铃薯茎段快繁及试管薯诱导
马铃薯茎段快繁及试管薯诱导
在马铃薯(Solanum tuberosum)的茎段快繁中,采用生根时间、生根率、节间长度和粗度作为评估马铃薯茎段快繁壮苗的标准.结果表明,以MS为基本培养基,添加40 mg/L 的B9处理马铃薯茎段快繁效果最好;黑暗处理20 d,并在培养基中添加B9能够提高试管薯诱导的效果.
作者：刘华姚振 LIU hua YAO Zhen 作者单位：长江大学园艺园林学院,湖北,荆州,434025 刊名：长江大学学报（自科版）农学卷英文刊名：JOURNAL OF YANGTZE UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2009 6(2) 分类号：Q813.1 关键词：马铃薯(Solanum tuberosum) 茎段快繁试管薯。
脱毒马铃薯试管苗培养及试管薯诱导研究
浅层 静 置 培 养 ． 即在 不 加 琼 脂 的液 体 培养 基 上 来进 行 试 管
苗切 段转 接 。
首先 。 将 不含琼 脂 的 １ ０ ｍＬ ＭＳ培 养液 加 入到 每 瓶 液体
优点 ： 一 是 不受 气 候 影 响 ， 可 以常 年 大规 模 工 厂 化 生产 ； 二 是试 管 薯在 栽 培 管理 方 面 更 简 单 ， 成活率更高 ； 三 是 体 积 小， 便 于 贮 藏 和运 输 ， 从 而 降低 运 输 成 本 以及 种 植 成 本口 ＿ ３ 】 。 本文 以 市 场 零 售 的马 铃 薯 为材 料 ， 对 其 试管 苗 的培 养 以 及 试管 薯 的诱 导进行 分析 研 究 。
园艺 学
Hale Waihona Puke 现 代农 业 科技２ ０ １ ７年 第 １ ６期
脱毒马铃薯试管苗培养及试管薯诱导研究
马 纪
（ 黑 龙 江 省农 业 科学 院植 物 脱 毒 苗 木 研 究 所 ， 黑龙江哈尔滨 １ ５ ０ ０ ８ ６ ）
摘要 以脱毒 马铃 薯 试 管苗 和试 管 薯 为研 究对 象 ， 以其 试 管苗 的培 养 和试 管薯 的诱 导 为研 究 目标 ， 通 过 茎尖 分 生组 织培 养 技 术对 脱 毒马 铃 薯试 管 苗进 行 了培 养 ， 分析 不 同培 养基 和 不 同激 素含 量对 脱毒 马铃 薯 试 管苗 生 长情 况的 影响 。 结 果表 明， 相 比 于固体 培 养基 来 说 ， 液体 培 养基 不仅 能够促 进 脱毒 马铃 薯 试 管苗 的快 速 、 健壮 生 长 。 而且 还 能够 有效 节省 生产成 本 。 当外界环 境 适 宜时 ， 马铃 薯试 管苗 的形 成 和发 育在 没 有任何 激 素的 情 况下也 能够 形成 微型 著 。 但 与 相 同环境 下含 有诱 导结 薯激 素 的培 养基相 比 ， 其 结薯 率较 低 ， 且结 薯较 晚 。 关键 词 脱毒 马铃 薯 ； 试管苗； 试 管薯 ； 培 养基 ； 激素 含量 ； 诱 导 中图分 类号 ￥ ５ ３ ２ 文献 标识 码 Ａ 文章 编号 １ ０ ０ ７ — ５ ７ ３ ９（ ２ Ｏ １ ７ ） １ ６ — ０ ０ ６ ０ 一 Ｏ １
马铃薯的快速繁殖的研究
目录一立题依据---------------------------------------2 二主要研究内容-----------------------------------2 三技术路线---------------------------------------5 四要达到的技术或经济指标-------------------------6 五经济效益分析-----------------------------------9 六研究进度--------------------------------------10 七风险分析--------------------------------------10 八项目组成员------------------------------------11一立题依据(1)马铃薯是高度杂合的，因此它们的种子后代不可能与原种完全相同。
只有由无性繁殖产生的植株，在遗传上才能与其亲本植物完全相同，从而使品种的特性代代相传。
利用植物组织培养技术，在无菌条件下对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法称为植物离体无性繁殖。
马铃薯试管苗在光照条件下进行自养的程度大于异养。
相反，在高浓度的糖类存在的情况下，以及在无光照的限制条件下，马铃薯向着诱导生成试管薯的过程。
这样生长出来的试管薯称之为原种种薯。
(2)短枝发生型是指外植体携带的带叶茎段，在适宜的培养环境中萌发，形成完整植株，再将其剪成带叶茎段，继代再成苗的繁殖方法。
该方法与田间枝条的扦插繁殖方法类似，故又称为微型扦插。
能一次成苗，遗传性状稳定，培养过程简单，移栽成活率高。
许多花卉、葡萄、马铃薯等试管苗的繁殖常用此方法。
(3)在黑暗环境的诱导下，马铃薯试管苗可以在试管薯诱导培养基中结出种薯，且悬于茎秆上。
马铃薯试管薯是利用茎尖分生组织脱毒技术，在组织培养条件下高倍扩繁脱毒试苗，进而诱导试管苗所形成的块茎。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯作为我国重要的经济作物之一，是广大农民和经济发展所依靠的重要农业领域。
而随着现代农业发展的不断推进，马铃薯种植也面临着各种各样的困难和问题。
其中，病毒病是马铃薯种植过程中最严重的问题之一。
为了解决这一问题，现在越来越多的科技工作者开始探索马铃薯脱毒试管苗快繁技术。
以下就从马铃薯脱毒试管苗的定义、制备流程、优势及应用等方面进行详细介绍。
马铃薯脱毒试管苗是指利用组织培养和生物学技术手段在无菌条件下，从被病毒污染的母株中取材，经过一系列处理，得到一定数量无菌苗，最终培育成符合生产要求的健康幼苗。
二、制备流程1、材料准备选择健康的马铃薯作为原材料，对其进行外观检查和芽眼筛选。
同时还需准备有较高的生长潜力和再生能力，无菌培养必需的基本培养基、辅助培养基及添加适量激素和营养物质的诱导培养基等。
2、无菌处理将马铃薯进行消毒处理，以确保材料无菌化。
处理方法包括酒精消毒、盐酸消毒、滴定消毒等。
3、切瘤、分化在消毒的基础上，进行切瘤和分化处理，分离出芽鳖、块茎鳖、滋液鳖等预备试管苗材料。
4、根、茎、叶分离通过培养基的诱导，将原始材料中的根、茎、叶进行分离和再生，形成独立的无菌苗，以便进行大规模培养和繁殖。
5、无菌培养得到无菌苗后，进行无菌培养，增殖数量，以期达到无菌苗的快速繁殖和生长。
6、弱化适应繁殖的苗期过长、适应性不足，则会极大地限制试管苗的生长和繁殖。
为此，可以通过加强营养管理、控制温度环境以加强其适应能力。
三、优势及应用1、提高繁殖能力试管苗繁殖效率高，可以在很短时间内繁殖出大量的健康马铃薯苗，提高其生产效益。
2、保证生产质量脱毒试管苗繁殖过程严格按照国家标准执行，每批苗都具有相同的生长特征和品质，可以保证生产质量。
3、有效防控病害通过脱毒试管苗快繁技术，可以有效避免病毒病等病害的传播，提高马铃薯的健康状态，减少生产损失。
4、推动可持续发展脱毒试管苗效益显著，有助于推动现代化农业发展和可持续发展，为农民增收和增加就业构建了良好的平台。
马铃薯快速繁殖（实验结果）
一．实验设计方案快速繁殖培养基为MS培养基。
诱导培养基的配方如下：MS培养基+5mg/L 6-BA+8%蔗糖。
采用固液培养法诱导。
结薯率=总结薯个数/植株总数×100%单薯的重量=总重量/总薯数*100%步骤（3）培养将果酱瓶置于培养室中培养，培养条件是室温25-27℃。
每天光照16小时。
光强2000-3000lx。
②、更换培养基后，将果酱瓶放在室温25-27℃完全黑暗的条件下静止培养，不需要摇动或者摆动。
（五）注意事项由于高温高压灭菌会对部分物质活性产生一定的影响，因此配制培养基时要予以注意。
如NAA要最后加。
（一）实验现象及观察结果1、马铃薯试管苗快繁结果：下图为马铃薯试管苗快繁结果：图1 马铃薯试管苗快繁结果由图可见：经培养，瓶内15株（每瓶5棵，共3瓶）均成活，长势良好，株高和茎粗正常，叶片深绿色偏小；未出现茎段陡长的现象。
但由于培养时间较长，果酱瓶内培养基明显减少。
2、马铃薯试管薯诱导结果：由于时间关系，本小组实验绝大部分培育的苗尚未开始结薯，有极个别瓶苗结1-2个。
因此，不方便计算结薯率和单薯的重量。
（二）实验分析讨论1、光照对苗的快繁影响较大。
中期观察发现，苗未直立生长，且整体向一个方向倾斜，有较明显的向光生长趋势。
后期对培养瓶移位，改变捕光方向和位置后，有明显改善。
这是由于培养架内各处光照不均匀，以至偏向角落的苗向光生长。
2、马铃薯试管苗快繁过程中发现，有些同学的苗始终不长高，且不生根。
这是由于扦插时，违背了其形态学特性，故不生根。
3、避光才能诱导微型薯的产生。
在培育过程中，不时会有同学打开挡光布，甚至直接将培养瓶拿出来观察，这对试管薯的诱导是及其不利的。
4、有些同学快繁培养基耗尽后未及时更换或补充新的培养基，以致快繁苗因营养缺乏而死。
（三）实验总结本次实验包括以下主要环节：培养基的配制、试管苗快繁培养以及马铃薯试管薯诱导。
在配制培养基过程中，各小组分工合作，操作谨慎。
脱毒马铃薯试管微型薯繁育技术
脱毒马铃薯试管微型薯繁育技术马纪【摘要】马铃薯受到病毒的感染后会出现退化现象,进而降低马铃薯的产量.通过对马铃薯进行脱毒,并使用试管微型薯繁殖技术培养无毒的马铃薯种子,可大大提高马铃薯的产量,保证马铃薯的品质.本文对马铃薯脱毒技术进行分析的基础上,明确脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点,并对马铃薯繁殖技术中病毒检测方法进行了讨论,以期促进脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术的发展,提高马铃薯的经济效益.【期刊名称】《中国果菜》【年(卷),期】2017(037)005【总页数】3页(P73-75)【关键词】脱毒马铃薯;试管微型薯繁殖技术;茎尖脱毒;病毒检测【作者】马纪【作者单位】黑龙江农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨 150086【正文语种】中文【中图分类】S532马铃薯是茄科茄属的双子叶种子植物，生产上绝大多数使用块茎进行无性繁殖。
马铃薯受到病毒的侵染会出现退化现象，主要表现为花叶、卷叶、束顶等症状。
病毒会使植株生长速度减缓，叶片卷曲坏死，块茎变小、变尖、龟裂、内部网状坏死等，甚至会失去发芽能力，不能作为种子使用。
病毒会逐年积累，病情会逐年加重，造成马铃薯严重减产。
研究发现，侵染马铃薯的病毒有18种，其中9种是专门存在于马铃薯上的。
当前解决因病毒引起的马铃薯退化问题，就培育无毒种薯，其中最行之有效的方法就是茎尖脱毒。
马铃薯脱毒种薯是经薯块室内催芽、切取茎尖分生组织、试管苗培养、切段快繁等一系列技术措施后获得的，笔者结合多年研究、实践操作经验，总结出一套高效的脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点。
脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点：先将带毒薯块进行催芽和消毒处理，然后在无菌条件下切取茎尖分生区组织，在试管中进行培养，分生区组织生长4个月，待茎尖分生区组织长成植物苗后，对试管苗进行病毒检测，从中鉴定出不带病毒的脱毒苗，再进行切断快繁，后进行诱导、良种繁殖，最后选出具有原品种特性的脱毒马铃薯，从而实现复壮的目的。