发酵实验报告
发酵工程综合实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵工程的基本原理和操作方法;2. 掌握微生物的培养、分离、鉴定及发酵条件优化等实验技术;3. 提高实验操作能力和数据分析能力。
二、实验原理发酵工程是一门研究微生物发酵过程及其应用的科学。
通过发酵工程,可以利用微生物的代谢活动生产出各种有用的产品,如食品、医药、化工产品等。
本实验主要涉及微生物的培养、分离、鉴定及发酵条件优化等实验技术。
三、实验材料与仪器1. 材料:土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖、酵母提取物、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等;2. 仪器:高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、电子天平、pH计、发酵罐、酒精灯、试管、培养皿等。
四、实验方法1. 微生物分离与纯化(1)土壤样品的采集与处理:在校园内采集土壤样品,将土壤样品过筛,去除杂质,备用;(2)牛肉膏蛋白胨培养基的制备:按照实验要求,称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂,加入适量的水,搅拌均匀,煮沸10分钟,待冷却后加入琼脂,搅拌均匀,倒入培养皿中,待凝固;(3)土壤样品的接种:将处理好的土壤样品稀释,取适量涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上,置于恒温培养箱中培养;(4)分离纯化:观察菌落特征,挑选单菌落进行纯化,重复以上步骤,直至获得纯化菌株。
2. 微生物鉴定(1)观察菌落特征:观察纯化菌株在牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落特征,如菌落大小、形状、颜色、边缘等;(2)显微镜观察:将纯化菌株进行涂片、染色,在显微镜下观察菌体形态、染色特性等;(3)生化试验:进行糖发酵试验、氧化酶试验、淀粉酶试验等,鉴定菌株的生理生化特性。
3. 发酵条件优化(1)发酵培养基的制备:根据实验要求,称取葡萄糖、酵母提取物、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂,加入适量的水,搅拌均匀,煮沸10分钟,待冷却后加入琼脂,搅拌均匀,倒入发酵罐中;(2)发酵条件优化:通过改变发酵温度、pH值、接种量、发酵时间等条件,观察发酵产物的产量和品质,确定最佳发酵条件。
发酵操作实验报告

一、实验目的1. 了解发酵的基本原理和过程。
2. 掌握不同发酵方法的操作步骤。
3. 通过实验验证发酵过程中的现象和结果。
4. 分析发酵过程中可能存在的问题及解决方案。
二、实验原理发酵是一种微生物利用有机物质进行代谢的过程,产生能量和代谢产物。
根据发酵过程中微生物的需求,可分为需氧发酵和厌氧发酵。
需氧发酵是指微生物在有氧条件下进行代谢,如酵母菌发酵;厌氧发酵是指微生物在无氧条件下进行代谢,如乳酸菌发酵。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 酵母菌:干酵母粉- 糖:葡萄糖- 水浴锅- 锥形瓶- 移液管- 玻璃棒- 温度计- 纱布- 石灰水- 橙色的重铬酸钾溶液2. 实验仪器:- 培养皿- 酵母菌接种环- 恒温培养箱- 量筒- 试管- 滤纸四、实验方法与步骤1. 酵母菌发酵实验:(1)将葡萄糖溶解于水中,制成葡萄糖溶液。
(2)将葡萄糖溶液倒入锥形瓶中,加入适量的干酵母粉。
(3)将锥形瓶放入水浴锅中,保温在30-40℃。
(4)观察酵母菌发酵过程中气泡的产生,记录气泡产生的时间。
(5)发酵结束后,将产生的气体通过澄清石灰水,观察石灰水的变化。
2. 乳酸菌发酵实验:(1)将葡萄糖溶液倒入锥形瓶中,加入适量的干酵母粉。
(2)将锥形瓶放入水浴锅中,保温在30-40℃。
(3)待酵母菌发酵结束后,取出锥形瓶,加入适量的乳酸菌。
(4)将锥形瓶放入恒温培养箱中,保温在37℃。
(5)观察乳酸菌发酵过程中气泡的产生,记录气泡产生的时间。
(6)发酵结束后,将产生的气体通过澄清石灰水,观察石灰水的变化。
五、实验结果与分析1. 酵母菌发酵实验结果:在实验过程中,酵母菌发酵产生了大量气泡,表明酵母菌在葡萄糖溶液中进行了代谢。
发酵结束后,将产生的气体通过澄清石灰水,石灰水变浑浊,说明产生了二氧化碳。
2. 乳酸菌发酵实验结果:在实验过程中,乳酸菌发酵产生了少量气泡,表明乳酸菌在葡萄糖溶液中进行了代谢。
发酵结束后,将产生的气体通过澄清石灰水,石灰水未变浑浊,说明未产生二氧化碳。
模拟发酵试验实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵的基本原理和过程。
2. 掌握模拟发酵试验的操作步骤。
3. 通过实验,观察并分析发酵过程中物质的变化。
二、实验原理发酵是一种生物化学过程,在无氧条件下,微生物(如酵母菌、乳酸菌等)将有机物质分解产生能量、气体、酸等代谢产物。
本实验模拟了酵母菌在无氧条件下对蔗糖的发酵过程,通过观察气泡产生、pH值变化等现象,了解发酵的基本原理。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 蔗糖:50g- 温水:500ml- 干酵母:5g- pH试纸:1张- 玻璃棒:1根- 玻璃杯:1个- 药勺:1个2. 实验仪器:- 电子天平:1台- 秒表:1个- pH计:1台四、实验步骤1. 称取50g蔗糖,加入500ml温水中,用玻璃棒搅拌至完全溶解。
2. 称取5g干酵母,用药勺加入溶解好的蔗糖溶液中,继续搅拌。
3. 用pH试纸检测溶液的pH值,记录初始pH值。
4. 将搅拌好的蔗糖酵母溶液倒入玻璃杯中,用玻璃棒蘸取少量溶液滴在pH试纸上,观察pH值变化。
5. 记录实验开始时间,每隔10分钟观察并记录溶液的气泡产生情况、pH值变化。
6. 实验进行60分钟,记录实验结束时间。
五、实验结果与分析1. 实验过程中,溶液中开始出现少量气泡,随着时间的推移,气泡数量逐渐增多,表明酵母菌开始进行发酵作用。
2. 实验开始时,溶液的pH值为6.5,随着发酵过程的进行,pH值逐渐下降,说明发酵过程中产生了酸性物质。
3. 实验结束时,溶液的pH值下降至5.0,说明发酵产生的酸性物质使溶液的酸性增强。
六、结论1. 通过本实验,我们成功模拟了酵母菌在无氧条件下对蔗糖的发酵过程。
2. 发酵过程中,酵母菌将蔗糖分解为酒精和二氧化碳,同时产生酸性物质,使溶液的pH值下降。
3. 本实验为后续发酵实验提供了基础,有助于我们深入了解发酵的原理和应用。
七、实验反思1. 在实验过程中,应注意控制实验条件,如温度、pH值等,以确保实验结果的准确性。
面团发酵实验报告

一、实验目的1. 了解面团发酵的基本原理和过程。
2. 掌握面团发酵过程中温度、湿度、时间等因素对发酵效果的影响。
3. 探究不同发酵方法对面团质量的影响。
4. 提高面团发酵的实际操作技能。
二、实验原理面团发酵是利用酵母菌、乳酸菌等微生物在适宜的条件下,将面粉中的淀粉、糖类等物质分解,产生二氧化碳和酒精,使面团膨胀发酵的过程。
面团发酵过程中,二氧化碳的产生使面团形成许多气孔,从而使面包、馒头等食品具有松软、多孔的口感。
三、实验材料与仪器1. 材料:- 高筋面粉- 干酵母- 温水- 白糖- 盐- 食用油- 发酵箱2. 仪器:- 电子秤- 搅拌器- 面团发酵盒- 温度计- 量杯四、实验步骤1. 面团制备:- 称取100克高筋面粉,加入3克干酵母、5克白糖、2克盐和适量温水。
- 用搅拌器将所有材料混合均匀,揉成面团。
- 将面团揉至表面光滑,有弹性。
2. 面团发酵:- 将揉好的面团放入发酵箱,设定温度为30℃,湿度为75%。
- 发酵时间根据酵母品种和温度调整,一般发酵时间为1-2小时。
3. 面团发酵效果观察:- 观察面团体积是否膨胀,表面是否光滑,有无气泡等。
4. 面团分割与整形:- 将发酵好的面团分割成均匀的小面团。
- 将小面团揉成圆形或长条形,准备下一步制作面包、馒头等食品。
5. 面团二次发酵:- 将整形好的面团放入发酵箱,进行二次发酵,时间约为30分钟。
6. 面团烘烤:- 将二次发酵好的面团放入预热的烤箱中,根据食品种类和烤箱温度调整烘烤时间,一般烘烤时间为10-15分钟。
五、实验结果与分析1. 发酵效果:- 在实验过程中,观察到面团在发酵过程中体积明显膨胀,表面光滑,有少量气泡产生,说明发酵效果良好。
2. 温度、湿度、时间等因素对发酵效果的影响:- 实验结果表明,温度过高或过低、湿度过大或过小、发酵时间过长或过短都会影响发酵效果。
3. 不同发酵方法对面团质量的影响:- 通过对比实验,发现酵母发酵法具有发酵速度快、发酵效果稳定等优点,适合工业化生产。
气球酵母发酵实验报告(3篇)

第1篇一、实验背景发酵现象是微生物在特定条件下,将有机物质分解产生新的物质的过程。
酵母菌作为一种常见的微生物,其在发酵过程中能够产生二氧化碳和酒精。
本实验旨在通过观察酵母菌发酵过程,了解其发酵现象,并探究发酵条件对实验结果的影响。
二、实验目的1. 观察酵母菌发酵过程,了解其产生二氧化碳和酒精的现象。
2. 探究不同温度、不同浓度糖溶液对酵母菌发酵的影响。
3. 分析酵母菌发酵过程中气体的生成和消耗情况。
三、实验原理酵母菌在适宜的条件下,能够将葡萄糖分解成酒精和二氧化碳。
在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,产生大量能量、水和二氧化碳;在无氧条件下,酵母菌进行无氧呼吸,产生少量能量、酒精和二氧化碳。
四、实验材料与仪器1. 实验材料:酵母、白糖、瓶子、气球、温水、漏斗、温度计、计时器。
2. 实验仪器:锥形瓶、胶塞、胶管、大烧杯、玻璃棒、滴管。
五、实验步骤1. 准备实验材料:将酵母、白糖、瓶子、气球等实验材料准备好。
2. 配制糖溶液:取一定量的白糖,加入适量温水溶解,配制成不同浓度的糖溶液。
3. 设置实验组:将锥形瓶清洗干净,分别加入不同浓度的糖溶液,并加入适量酵母。
4. 设置对照组:在锥形瓶中加入等量的清水,作为对照组。
5. 观察记录:将锥形瓶密封,放入温暖环境中,观察记录不同实验组中气球的膨胀情况。
6. 测量气体体积:使用滴管将产生的气体收集到集气瓶中,测量气体体积。
7. 分析实验结果:对比不同实验组中气球的膨胀情况,分析发酵条件对酵母菌发酵的影响。
六、实验结果与分析1. 观察记录:在实验过程中,观察到不同浓度的糖溶液中,气球膨胀情况有所不同。
随着糖浓度的增加,气球的膨胀速度加快,膨胀程度也更大。
2. 测量气体体积:通过测量气体体积,发现随着糖浓度的增加,产生的气体体积也相应增加。
3. 分析实验结果:实验结果表明,酵母菌发酵过程中,糖浓度对发酵产物的生成和气体体积有显著影响。
高浓度糖溶液有利于酵母菌发酵,产生更多的二氧化碳和酒精。
发酵馒头制作实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵馒头的制作原理和过程。
2. 掌握发酵馒头的制作方法。
3. 体验传统发酵食品的制作乐趣。
二、实验材料1. 原料:面粉500g、温水300ml、酵母5g、白糖10g。
2. 工具:面粉筛、和面盆、擀面杖、蒸锅、蒸笼、剪刀等。
三、实验步骤1. 酵母活化:将5g酵母倒入温水中,搅拌均匀,静置5分钟。
2. 和面:将面粉、白糖、温水倒入和面盆中,边倒边搅拌,使面粉充分吸水,形成絮状。
3. 揉面:将絮状面粉揉成光滑的面团,盖上湿布,放置温暖处发酵1小时。
4. 分割:将发酵好的面团分割成若干等份,每个面团揉成圆形。
5. 擀面:将圆形面团擀成厚约1cm的圆片。
6. 成型:将擀好的面片卷起,用剪刀剪成大小均匀的小段。
7. 蒸制:将剪好的面团放入蒸笼中,进行二次发酵,发酵至体积膨胀1倍左右。
8. 蒸煮:将发酵好的面团放入蒸锅中,大火蒸15分钟,关火后焖3分钟。
四、实验结果与分析1. 实验结果:成功制作出发酵馒头,口感暄软,具有独特的发酵香味。
2. 实验分析:(1)酵母活化:酵母在活化过程中,能够迅速吸收水分,释放出酶,使面团发酵。
(2)和面:面粉与水、白糖充分混合,使面团具有足够的弹性,有利于发酵。
(3)发酵:面团在温暖处发酵,产生二氧化碳,使面团膨胀,形成气孔,使馒头暄软。
(4)蒸制:蒸煮过程中,二氧化碳受热膨胀,形成气孔,使馒头更加暄软。
五、实验结论通过本次实验,我们掌握了发酵馒头的制作方法,了解了发酵馒头的制作原理。
发酵馒头是一种营养丰富的传统食品,具有独特的发酵香味,值得推广。
六、实验注意事项1. 酵母活化时,水温不宜过高,以免杀死酵母。
2. 发酵过程中,面团温度不宜过高,以免影响酵母活性。
3. 蒸煮过程中,火候不宜过大,以免馒头表面烧焦。
4. 发酵馒头在储存过程中,应密封保存,以免变质。
七、实验拓展1. 尝试使用不同种类的面粉制作发酵馒头,如玉米面粉、高粱面粉等。
2. 探索发酵馒头与其他食材的搭配,如豆沙、芝麻等。
发酵面制品实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵面制品的基本原理和工艺流程。
2. 掌握发酵面制品的发酵条件、制作方法和质量控制要点。
3. 通过实验,提高对发酵面制品生产过程的实际操作能力。
二、实验材料与设备1. 实验材料:面粉、水、干酵母、白糖、食盐、食用油、发酵剂(如老面、酒曲等)。
2. 实验设备:搅拌机、蒸笼、烤箱、电子秤、温度计、计时器等。
三、实验方法与步骤1. 实验一:面粉发酵实验(1)实验目的:观察面粉发酵过程,了解发酵原理。
(2)实验步骤:① 准备面粉、水、干酵母,按比例混合;② 将混合物放入搅拌机中,搅拌均匀;③ 将面团置于温暖处发酵,观察面团发酵情况;④ 记录发酵过程中面团体积变化、表面状态等。
2. 实验二:馒头发酵实验(1)实验目的:掌握馒头发酵方法,制作出合格馒头。
(2)实验步骤:① 准备面粉、水、干酵母、白糖、食盐,按比例混合;② 将混合物放入搅拌机中,搅拌均匀;③ 将面团置于温暖处发酵,待面团发酵至原体积的2倍;④ 将发酵好的面团分割成小面团,搓成馒头形状;⑤ 将馒头放入蒸笼,蒸制10-15分钟;⑥ 蒸熟后取出,待冷却即可食用。
3. 实验三:面包发酵实验(1)实验目的:掌握面包发酵方法,制作出美味面包。
(2)实验步骤:① 准备面粉、水、干酵母、白糖、食盐、食用油,按比例混合;② 将混合物放入搅拌机中,搅拌均匀;③ 将面团置于温暖处发酵,待面团发酵至原体积的2倍;④ 将发酵好的面团分割成小面团,搓成圆形;⑤ 在面团表面刷上蛋液,撒上芝麻;⑥ 将面包放入烤箱,烤制10-15分钟;⑦ 烤熟后取出,待冷却即可食用。
四、实验结果与分析1. 实验一:面粉发酵实验结果显示,面粉在适宜的条件下可以发酵,发酵过程中面团体积逐渐增大,表面出现气泡,说明面团中的酵母菌在繁殖过程中产生了二氧化碳。
2. 实验二:馒头发酵实验结果显示,通过控制发酵条件,可以制作出合格馒头。
发酵过程中,面团体积增大,馒头表面光滑,口感松软。
发酵工程实验的实验报告

一、实验目的1. 了解发酵工程的基本原理和操作方法。
2. 掌握发酵过程中菌种培养、培养基配制、发酵条件控制等基本技能。
3. 熟悉发酵过程中产物生成的监测方法。
二、实验原理发酵工程是指利用微生物的代谢活动,将生物质资源转化为人类所需产品的一门综合性工程技术。
本实验以谷氨酸棒杆菌为研究对象,通过摇瓶发酵的方式,探究其在适宜条件下对葡萄糖的转化率及谷氨酸的生成情况。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:摇床、锥形瓶(250ml)、移液管、pH计、生物传感仪、分析天平、发酵培养基、葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠等。
2. 试剂:葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠等。
四、实验步骤1. 培养基配制:按照实验要求,称取葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠等试剂,加入适量的去离子水,充分溶解后,调节pH至7.0,定容至1000ml。
2. 菌种活化:从菌种保藏管中取出谷氨酸棒杆菌,接种于装有适量培养基的锥形瓶中,置于摇床上,37℃恒温培养24小时。
3. 接种:将活化后的菌种以1%的接种量接种于新鲜培养基中,置于摇床上,37℃恒温培养。
4. 发酵过程监测:每隔2小时取样,测定还原糖含量、谷氨酸含量、pH值等指标。
5. 数据处理与分析:将实验数据绘制成曲线,分析发酵过程中还原糖消耗、谷氨酸生成、pH值变化等规律。
五、实验结果与分析1. 还原糖消耗曲线:在发酵过程中,还原糖含量逐渐降低,表明谷氨酸棒杆菌在消耗葡萄糖的同时,产生谷氨酸。
2. 谷氨酸生成曲线:在发酵过程中,谷氨酸含量逐渐升高,表明谷氨酸棒杆菌在适宜条件下能够高效地将葡萄糖转化为谷氨酸。
3. pH值变化曲线:在发酵过程中,pH值逐渐下降,表明谷氨酸棒杆菌在代谢过程中产生酸性物质。
六、实验结论1. 本实验成功实现了谷氨酸棒杆菌的摇瓶发酵,为谷氨酸生产提供了实验依据。
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发酵工艺及设备实验报告学院:化学化工学院专业:生物工程班级:1201学号:************ 学生姓名:**日期2014年11月实验一摇瓶发酵法制备糖化酶一、实验目的(1)掌握摇床发酵法制备糖化酶的工艺流程及操作方法(2)了解利用黑曲霉菌菌种发酵时的生长条件及注意事项(3)熟练掌握实验过程中的无菌操作和培养条件的选择二、实验仪器及试剂菌种:黑曲霉仪器:锥形瓶(500ml)、移液管、恒温水浴锅、秒表、50mL比色管、牛皮纸、纱布(8层)、pH计。
药品:三水乙酸钠、冰醋酸、硫代硫酸钠、碘、氢氧化钠、硫酸、可溶性淀粉、玉米粉、豆饼粉、麸皮三、实验原理摇瓶发酵是实验室常用的通风发酵方法,通过将装有液体发酵培养基的摇瓶放在摇床上振荡培养,以满足微生物生长、繁殖及产生许多代谢产物对氧的需求。
它是实验室筛选好气性菌种,以及摸索种子培养工艺与发酵工艺的常用方法。
葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3)系统名为淀粉α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶,俗称糖化酶,是国内产量最大的酶品种。
糖化酶对淀粉分子的作用是从非还原末端切开α-1,4键,也能切开α-1,3键和α-1,6键,产生葡萄糖。
糖化酶有催化淀粉水解的作用,能从淀粉分子非还原末端开始,分解α-1,4-葡萄糖苷键生成葡萄糖。
葡萄糖分子中含有醛基,能被次碘酸钠氧化,过量的次碘酸钠酸化后析出碘,再用硫代硫酸钠标准溶液滴定,计算酶活力。
四、实验步骤1.培养步骤1.1种子培养基制备及灭菌将新鲜土豆去皮切块,称取200~300 g土豆块放入500 mL烧杯中,加入一定量水,在电炉上煮沸至土豆块熟透,用120目纱布过滤,滤渣反复用一定量水清洗、过滤2次,合并各次滤液且定容至1000 mL即得土豆汁。
取一定体积的土豆汁,在其中加入5%的蔗糖,溶解摇匀并调pH至5.5,即得种子培养基。
将适量种子培养基倒入锥形瓶(250ml),用纱布塞塞住管口,并用牛皮纸包扎,置灭菌锅中,于121℃下灭菌30min。
待灭菌完毕,冷却取出。
1.2发酵培养基制备及灭菌取6只500mL摇瓶,分别按装液量100、200、300mL配制培养基(玉米粉6%、豆饼粉2%、麸皮1%),加水后稍微摇动,使原料湿润,浸入水中。
用8层纱布包扎瓶口,再加牛皮纸包扎。
置灭菌锅中,于121℃下灭菌30min。
1.3发酵培养基接种:将已生长好的菌种,在无菌条件下,按照10%的接量(8%-12%)接种到发酵培养基上。
1.4发酵培养基发酵:将摇瓶固定在摇床上,培养温度为31℃,转速为120r/min,培养时间96h。
显微镜观察菌丝形态,用试纸测发酵液pH,测定酶活力。
摇瓶培养时观察各种摇瓶机的结构。
2.糖化酶活力测定2.1待测酶液的制备:精确吸取液体酶 1.00mL,先用少量的乙酸缓冲液溶解,并用玻璃棒捣研,将上清液小心倾入容量瓶中。
沉渣部分再加入少量缓冲液,最后全部移入容量瓶中,用缓冲液定容至刻度(估计酶活力在100~250u/mL范围内),摇匀。
通过4层纱布过滤,滤液供测定用。
2.2酶活力测定:于甲、乙两支50mL比色管中,分别加入可溶性淀粉溶液25mL及缓冲液5mL,摇匀后,于40℃恒温水浴中预热5min。
在甲管(样品)中加入待测酶液2mL,立刻摇匀,在此温度下准确反应30min,立刻各加入氢氧化钠溶液0.2mL,摇匀,将两管取出迅速冷却,并于乙管(空白)中补加待测酶液2mL。
吸取上述反应液与空白液各5mL,分别置于碘量瓶中,准确加入碘溶液10mL,再加氢氧化钠溶液15mL,摇匀塞紧,于暗处反应15min。
取出,加硫酸溶液2mL,立即用硫代硫酸钠标准液滴定,直至蓝色刚好消失为其终点。
2.3酶活力计算:样品酶活力(u/g或u/mL)=579.9×(A-B)c×n式中:A与B分别为空白、样品消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,mL;c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L;n为稀释倍数。
五、数据分析比较不同装液量下的菌体形态特征、酶活力,将结果填入下表:指标装液量/mL100 200 300酶活力420u/mL510u/mL570u/mLpH 4.2 4.1 3.8菌体特征出现球状的白色的菌丝团,瓶壁上出现黑丝的孢子和菌丝六、结论1.不同的装液量对酶活力的影响是随着装液量的增加呈现上升的趋势,但是酶活力变化不大,并且酶活力不高,与其他组数据相比接种量跟酶活力关2.菌体特征在锥形瓶的瓶壁上出现白色的菌丝,在培养基中也出现了丝球3.菌种新陈代谢的旺盛二氧化碳的释放增加,使pH值逐渐下降,最终使培养基的pH下降至3.8左右。
实验二酿酒酵母发酵过程参数的测定及计算一、实验目的1.测定并绘制生长曲线、底物消耗曲线和产物形成曲线2.了解发酵过程中葡萄糖的利用、菌体生长和产物生成的相互关系3.初步学会菌体生长、底物消耗和产物生成有关发酵参数的求解二、实验仪器及试剂菌种:酿酒酵母仪器:锥形瓶(250ml)、移液管、pH计、生物传感仪、分析天平药品:酵母膏、胰蛋白胨、葡萄糖、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠三、实验原理酵母菌是兼性厌氧型真菌,喜欢含糖的环境,有氧时将葡萄糖分解成CO₂和水,无氧时将葡萄糖分解成酒精和二氧化碳,同时都释放出能量生物传感器由生物识别元件和信号转换器组成,能够选择性地对样品中的待测物发出相应,通过生物识别系统和电化学或其他传感器把待测物质的浓度转为电信号,根据电信号的大小定量测出待测物质的浓度。
生物传感器是应用生物活性材料(如酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、生物膜等)与物理或化学换能器有机结合的一门交叉学科,是发展生物技术必不可少的一种先进的检测方法与监控方法,也是物质在分子水平的快速、微量分析方法四、实验步骤1.种子培养基(YEPD,g/L):称取酵母膏10g、胰蛋白胨20g、葡萄糖20g,加蒸馏水溶解,调节pH 5.0左右,并定容至1000ml。
2.发酵培养基(g/L):称取酵母膏10g,胰蛋白胨20g,葡萄糖100g加蒸馏水溶解,调节pH 至5.0左右,定容至1000ml,分装10个锥形瓶(250ml)封口121℃,30min灭菌。
3.种子培养:将活化好的种子培养液,用移液管移去10ml接种于灭菌YEPD 液体培养基中,于30℃、120 r/min全温摇瓶柜中培养24 h左右,观察种子液的色泽、气味与形态等基本情况。
4.发酵方法:将培养好的种子液按8-12%的接种比例,接种于发酵培养基中,置于30 ℃、120 r/min全温摇瓶柜中培养96 h。
5.过程取样:发酵培养基接种发酵后,每隔8小时取样,移取45ml菌液至离心试管中3800r/min离心,上清液取出分析,菌泥放置烘箱烘干,分析菌体生物量、残余葡萄糖浓度与酒精生成量,并以此为基础数据计算参数6.生物量的测定:取等量的两份发酵液,一份由烘干法测得菌体干重(DCW),另一份稀释成一定的浓度于630 nm下测定吸光值(OD值),得到标准曲线为DCW=3.87×OD(R=0.996)。
再以相同方法测得样品的OD值,按标准曲线计算出菌体干重。
7.还原糖的测定与乙醇的测定:使用生物传感仪测定糖类和酒精的含量五、数据分析表1相关参数的计算表2 残糖量-生物量图1图2六、结论1.从酒精的产率上来说理论上是每100g葡萄糖所产酒精的含量是165.6g,但最大酒精含量只有12g左右,产率刚刚达7.03%,说明大多数的葡萄糖转化成菌种生长所需要的能量物质2.出现误差的原因:在移取所含菌种的培养液时没有摇匀,导致所接种的每个锥形瓶中的生物量出现偏差,在测量其残糖含量、转化成酒精的含量受到较大的影响。
3.使用分光光度法测定生物量,由于所配置的培养基中含有葡萄糖,经高温杀菌后,转变成焦糖类物质,出现棕红色,对测吸光度时产生了较大影响,对实验造成了较大的误差。
实验三酿酒酵母反复分批发酵制备酒精一、实验目的1.初步学会酿酒酵母反复分批发酵法生产酒精的工艺操作2.了解反复分批发酵法工艺的优缺点二、实验仪器及试剂菌种:酿酒酵母仪器:锥形瓶(250ml)、移液管、量筒、pH计、生物传感仪、分析天平药品:酵母膏、胰蛋白胨、葡萄糖、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA 钠、氯化钠三、实验要求1.对整个反复分批发酵过程的菌体生长、葡萄糖消耗和酒精生成作图;2.计算每一个发酵过程的酒精浓度(或产量)、得率(或转化率)和产率(生产强度)四、实验步骤1.种子培养基(YEPD,g/L):称取酵母膏2.5g,胰蛋白胨5g,葡萄糖5g;于烧杯中,加蒸馏水溶解,调节pH至5.0左右,定容至250ml。
121℃、30min 灭菌处理。
2.发酵培养基(g/L):称取酵母膏5g,胰蛋白胨10g,葡萄糖50g于烧杯中,加蒸馏水溶解,调节pH至5.0左右,定容至500ml,分装入250ml的锥形瓶中,封口,置于灭菌锅121℃.30min灭菌。
3.种子培养:将活化的种子液移取10ml接种于灭菌YEPD液体培养基中,于30℃、120 r/min全温摇瓶柜中培养20 h左右,观察种子液的色泽、气味与形态等基本情况。
4.发酵方法:将培养好的种子液按10%的比例接种于发酵培养基中,置于30 ℃、120 r/min全温摇瓶柜中培养24 h。
5.反复分批操作:当第一个分批发酵完成后,在无菌操作条件下,将发酵部分或全部倒入灭过菌的50mL离心管中,45ml。
量取,旋紧盖子密封后离心,再在无菌操作条件用无菌水洗涤,如此循环1~2次后,倒入少量新鲜培养基将菌株充分悬浮,重新倒回原新鲜培养基三角瓶后扎紧纱布,置全温摇瓶柜中于发酵条件下培养。
如此循环操作,直到菌株衰退为止。
6.过程取样:每批发酵培养基接种发酵后,每隔几小时取样分析菌体生物量、残余葡萄糖浓度与酒精生成量,并以此为基础数据进一步完成实验要求的内容五、 数据分析表1 分批发酵实验数据图1图2图3实验心得在本次实验中,我们从拿到实验题目到完成全部的实验,可以说遇到了很多的困难,但最后还是在和同学的商讨中找到了解决的方案。
从这次实验中我收获了很多,也加深了对发酵理论知识的一次巩固,下面是我在这次实验中的总结由于时间段,所以我们三个实验同时开始的,所以说工作量有点大,从配制培养基到灭菌接种,然后培养,再到从其中的取样分析的过程。
在培养基的配制过程中我们采取了不同装液量,探究不同的装液量对酒精的生成以及其他的含量组成的变化,因为发酵的时间比较长,所以我们计划在实验二的发酵阶段开始完成对实验一的一些数据的测试。
实验一我们通过分别做静置培养与摇床的搅拌发酵,从结果中可以看出搅拌对发酵是有利的,生物量,酒精的生成量都高于静置发酵。
在实验二中我们在生物量测定的过程中遇到的问题比较多,由于我们所用的葡萄糖在高温下焦糖化,使培养基的颜色变深,这样在后面测定生物量的时候,就会出现吸光度测定不准确,造成实验误差。