唾液淀粉酶的性质和活力测定·
自主实验唾液淀粉酶活力的测定(共6张PPT)

▪ 0.1%氯化汞溶液:称取0.1g氯化汞溶于100ml水中即可。
四、仪器:
▪ 三角烧瓶、移液管、洗耳球、水浴锅、分光
光度计、比色杯、擦镜纸、天平、烧杯、蒸 馏水、玻璃棒、吸水纸。
五、实验操作:
▪ 1、取4个50ml的三角瓶,按下表操作:
量的ห้องสมุดไป่ตู้液,在适宜的条件下唾液淀粉酶将部 5ml溶解候混匀,定容500ml,保存在棕色瓶子中以备用。
1N碘贮存液:精确称取1. 1N碘贮存液:精确称取1.
分的淀粉水解。 5ml溶解候混匀,定容500ml,保存在棕色瓶子中以备用。
5g,共至于500ml烧杯中,加入蒸馏水350ml,并加入HCL4. 1g氯化汞溶于100ml水中即可。 从而推算出淀粉酶的活力。
化钾22.5g,共至于500ml烧杯中,加入蒸馏水350ml, 6g淀粉在50ml烧杯中,加入20ml蒸馏水调匀,转入沸水中,一分钟后冷却,定容至1000ml。
6g淀粉在50ml烧杯中,加入20ml蒸馏水调匀,转入沸水中,一分钟后冷却,定容至1000ml。
1根N据碘蓝贮色存的液深:并浅精得确出加称未取水1入.解淀粉H的C量。L4.5ml溶解候混匀,定容500ml,保存在 棕色瓶子中以备用。 1%氯化汞溶液:称取0.
淀粉可被淀粉酶水解为糊精和麦芽糖。
出淀粉酶的活力。 16%淀粉溶液(在1000ml烧杯加入800ml的蒸馏水,加热到沸腾备用。
三、试剂:
▪ 0.16%淀粉溶液(在1000ml烧杯加入800ml的蒸馏
根据蓝色的深水浅得出,未水加解淀粉热的量到。 沸腾备用。准确称取1.6g淀粉在50ml烧 杯中,加入20ml蒸馏水调匀,转入沸水中,一分钟 785g碘酸钾,碘化钾22.
唾液淀粉酶活力的测定

唾液淀粉酶活力的测定一、实验目的了解并掌握唾液淀粉酶活力的测定方法二、实验原理唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子较小的糊精和麦芽糖。
本实验利用碘的呈色反应来测定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定唾液淀粉酶活力的大小。
三、实验仪器和试剂1. 仪器(1)多孔白瓷板(2)50mL三角瓶(3)恒温水浴锅(4)烧杯(5)500mL容量瓶(6)100mL容量瓶(7)漏斗(8)吸管2. 试剂(1)原碘液:称取碘11g、碘化钾22g,加少量蒸馏水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存。
(2)稀碘液:吸取原碘液2mL,加碘化钾20g,用蒸馏水溶解,定容至500mL,于棕色瓶保存。
(3)标准“终点色”溶液①准确称取氯化钴40.2439g、重铬酸钾0.4878g,加蒸馏水溶解并定容至500mL。
②准确称取铬黑T 40mg,加蒸馏水溶解并定容至100mL。
取①液80mL与②液10mL混合,即为终点色。
冰箱保存。
(4)2%可溶性淀粉溶液:称取烘干可溶性淀粉2.00g,先以少许蒸馏水混匀,倾入80mL沸水中,继续煮沸至透明,冷却后用蒸馏水定容至100mL。
(需新鲜配制)(5)稀释100倍的唾液用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,然后让唾液流入量筒并稀释100倍,混合备用。
(6)0.02mol/L、pH6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液:称取磷酸氢二钠45.23g和柠檬酸8.07g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL,配好后用酸度计或精密试纸校正pH。
四、操作步骤(1)将“标准色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴内,作为比较终点色的标准。
(2)在50mL的三角瓶中,加入2%可溶性淀粉溶液20mL,加缓冲液5mL在37℃水浴中平衡约10min,加入0.5mL稀释唾液,立即记录时间,充分摇匀。
定时用滴管取出反应液约0.25mL,滴于预先充满此稀碘液(约0.75mL)的调色板空穴内,当空穴颜色由紫色变为棕红色,与标准色相同时,即为反应终点,记录时间T(min)。
酶学实验实验报告唾液

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生物学特性及其在消化过程中的作用。
2. 掌握酶活性测定的基本原理和方法。
3. 通过实验观察和分析唾液淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,负责将食物中的淀粉分解为麦芽糖,为后续消化提供能量。
酶活性是指酶催化反应的能力,受多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度等。
本实验通过测定不同条件下唾液淀粉酶对淀粉的分解速率,观察酶活性变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 新鲜唾液- 淀粉溶液- 碘液- pH试纸- 温度计- 烧杯- 试管- 移液器2. 实验仪器:- 恒温水浴箱- 酶标仪- 移液器四、实验步骤1. 唾液淀粉酶活性测定:(1)取两只试管,分别加入2mL淀粉溶液。
(2)用移液器取1mL唾液,加入第一只试管中,混匀。
(3)将第一只试管放入37℃恒温水浴箱中,观察淀粉分解情况。
(4)每隔5分钟,用移液器取1mL反应液,加入碘液中,观察颜色变化。
(5)记录淀粉分解所需时间。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:(1)设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、65℃)的水浴箱。
(2)重复步骤1,观察不同温度下淀粉分解所需时间。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:(1)用pH试纸测定唾液的pH值。
(2)调整唾液的pH值至不同水平(如4、5、6、7、8、9)。
(3)重复步骤1,观察不同pH值下淀粉分解所需时间。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定:在37℃恒温水浴箱中,淀粉分解所需时间为10分钟。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:随着温度升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随温度升高而增强。
在50℃时,淀粉分解所需时间最短,说明50℃为唾液淀粉酶的最适温度。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:随着pH值升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随pH值升高而增强。
在pH值为7时,淀粉分解所需时间最短,说明pH值为7为唾液淀粉酶的最适pH值。
唾液淀粉酶活性观察实验报告

2 唾液淀粉酶活性观察实验报告一、实验目的1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性;2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。
二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材0.5%淀粉溶液,碘液,PH=3.8,6.8,8.0缓冲液,1%CuSO4溶液,0.9%NaCl 溶液,2%H2O2溶液,铁粉,生马铃薯糜,熟马铃薯糜,玻璃匀浆器,比色板,恒温水浴箱,三用水箱,制冰机。
四、操作步骤1.唾液淀粉酶的制备每人取一个干净的小烧杯,先用自来水漱口,将口腔内的食物残渣清除,干净。
然后取蒸馏水约20ml含入口中,做咀嚼动作了3~4min,以分泌较多的唾液。
将口腔中的蒸馏水吐入干净的小烧杯中,此即为稀释的唾液淀粉酶液。
2.酶的高效性及环境因素对酶活性的影响①PH值对酶活力的影响:取3支试管,编号:编号 1 2 3PH=3.8的缓冲溶液3 --PH=6.8的缓冲溶液- 3 -PH=8.0的缓冲溶液-- 30.5%淀粉溶液 1 1 1唾液淀粉酶液 1 1 1将上述各管溶液混合后在37度水浴中保温5min检查淀粉水解程度每隔1min,从2号试管中取出溶液置于白瓷板上,用碘液检查淀粉水解程度,待溶液不再变色时,从水浴中取出所有试管向各管均加入碘液1~2滴,摇匀观察,记录并解释现象②温度对酶的影响:取3支试管,编号:编号 1 2 3 唾液淀粉酶液0.5 0.5 0.5 PH=6.8的缓冲溶液1 1 1 0.5%淀粉溶液ml 1 1 1反应温度(度,10min)0 37 100取出试管,并将在沸水浴中处理的试管用冷水冷却,然后向各管中滚圆碘液1~3滴。
口腔唾液测定实验报告

一、实验目的1. 了解口腔唾液的基本特性。
2. 掌握唾液淀粉酶活性的测定方法。
3. 分析影响唾液淀粉酶活性的因素。
二、实验原理唾液是一种无色、无味、无臭的黏稠液体,主要由水分、电解质、有机物和酶等组成。
其中,唾液淀粉酶是一种消化酶,主要参与食物的消化过程。
本实验通过测定唾液淀粉酶活性,了解唾液的基本特性,并分析影响唾液淀粉酶活性的因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液样本、淀粉溶液、碘液、酚酞指示剂等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、烧杯、滴定管等。
四、实验方法1. 唾液样本的采集:请实验参与者吐出唾液,收集于无菌试管中,充分混合后备用。
2. 唾液淀粉酶活性的测定:(1)取一定量的唾液样本,加入适量的淀粉溶液,充分混合。
(2)将混合液置于37℃恒温水浴锅中,定时取样。
(3)用碘液滴定剩余的淀粉,直至溶液呈现蓝色。
(4)根据消耗的碘液量,计算唾液淀粉酶活性。
3. 影响唾液淀粉酶活性的因素分析:(1)pH值对唾液淀粉酶活性的影响:设置不同pH值的缓冲液,测定唾液淀粉酶活性。
(2)温度对唾液淀粉酶活性的影响:设置不同温度的恒温水浴锅,测定唾液淀粉酶活性。
(3)激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响:加入适量的激活剂或抑制剂,测定唾液淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定结果:(1)实验参与者A:唾液淀粉酶活性为X U/ml。
(2)实验参与者B:唾液淀粉酶活性为Y U/ml。
2. 影响唾液淀粉酶活性的因素分析结果:(1)pH值对唾液淀粉酶活性的影响:在pH值为X时,唾液淀粉酶活性最高。
(2)温度对唾液淀粉酶活性的影响:在37℃时,唾液淀粉酶活性最高。
(3)激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响:加入激活剂后,唾液淀粉酶活性明显提高;加入抑制剂后,唾液淀粉酶活性明显降低。
六、实验结论1. 唾液淀粉酶是唾液中的重要成分,参与食物的消化过程。
2. pH值、温度、激活剂与抑制剂等因素对唾液淀粉酶活性有显著影响。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告

唾液淀粉酶活性的观察实验报告摘要:唾液淀粉酶是一种能够水解淀粉质的酶,其活性可以被观察到并测量。
本实验对不同浓度淀粉溶液和唾液的淀粉酶活性进行了观察和测量,并将结果图表化。
实验结果表明,唾液对于淀粉的消化具有一定的浓度依赖性。
本实验为淀粉酶活性的研究提供了一定的参考价值。
实验目的:1.观察唾液淀粉酶的活性2.测量不同浓度淀粉溶液中唾液淀粉酶的活性实验原理:唾液中含有淀粉酶,可以将淀粉水解为葡萄糖。
水解反应需要一定的时间,根据反应物的浓度和酶的活性来决定反应的速率。
当反应物浓度大时,酶的饱和度高,反应速率也会增加。
实验步骤:1.准备不同浓度的淀粉溶液,如0.1%,0.5%和1%的淀粉溶液。
2.将淀粉溶液加入至离心管中,注入相应的唾液分别混合,并在室温下保存10分钟。
3.加入2ml的止血液,并室温下放置5分钟后停止反应。
4.将反应液室温下放置1小时,直到淀粉水解反应结束。
5.分别加入2ml的卡球蓝液,并室温下抖动管子,使卡球蓝充分混合后,观察颜色变化。
6.将各离心管中的反应液,吸取至比色皿中,并读取各样品的OD值。
实验结果:样品编号淀粉溶液浓度(%)OD值1 0.1% 0.1272 0.1% 0.1303 0.5% 0.1904 0.5% 0.1925 1% 0.2406 1% 0.241实验分析:通过实验结果可以看出,淀粉溶液浓度越高,唾液淀粉酶的活性也越高,这与理论原理相吻合。
同时,样品1和2以及样品3和4的数据相近,表明了实验具有一定的重复性。
结论:本实验通过测量唾液淀粉酶对于不同浓度淀粉溶液的消化,得出唾液淀粉酶的活性具有一定的浓度依赖性。
这为淀粉酶活性研究提供了参考价值。
唾液淀粉酶实验报告

唾液淀粉酶实验报告唾液淀粉酶实验报告引言:唾液淀粉酶是一种消化酶,能够将淀粉分解成较小的分子,为消化系统提供能量。
本实验旨在探究唾液淀粉酶的活性及其受到的影响因素。
实验材料与方法:实验材料:1. 淀粉溶液2. 唾液样本3. 碘液4. 试管5. 恒温水浴6. 酒精灯7. 显微镜8. 盖玻片实验方法:1. 取一定量的淀粉溶液倒入试管中。
2. 加入一滴碘液,观察试管中溶液颜色的变化,记录下颜色。
3. 将一定量的唾液样本加入另一个试管中。
4. 将两个试管放入恒温水浴中,保持温度恒定。
5. 同时开始计时,每隔一分钟,分别取出两个试管中的溶液滴在盖玻片上。
6. 用显微镜观察滴在盖玻片上的溶液,记录下观察结果。
7. 重复以上步骤,分别在不同温度和不同pH值条件下进行实验。
实验结果及讨论:在初始状态下,淀粉溶液的颜色为深蓝色,加入碘液后,颜色变为紫黑色。
这是因为碘液与淀粉反应生成了淀粉碘复合物,导致颜色变化。
在观察唾液淀粉酶活性的实验中,我们发现随着时间的推移,滴在盖玻片上的溶液逐渐变浅,最终变为无色。
这说明唾液淀粉酶能够将淀粉分解成较小的分子,从而使溶液中的淀粉含量减少。
在不同温度下的实验中,我们发现唾液淀粉酶的活性受到温度的影响。
当温度较低时,唾液淀粉酶的活性较低,反应速率较慢;而当温度较高时,唾液淀粉酶的活性较高,反应速率较快。
这是因为温度能够影响酶的构象和分子振动,从而影响酶的活性。
在不同pH值条件下的实验中,我们发现唾液淀粉酶的活性也受到pH值的影响。
在中性条件下,唾液淀粉酶的活性最高;而在酸性或碱性条件下,唾液淀粉酶的活性较低。
这是因为酶的活性受到pH值的影响,过高或过低的pH值会破坏酶的构象,从而降低酶的活性。
结论:通过本实验,我们得出了以下结论:1. 唾液淀粉酶能够将淀粉分解成较小的分子。
2. 唾液淀粉酶的活性受到温度的影响,温度越高,活性越高。
3. 唾液淀粉酶的活性受到pH值的影响,中性条件下活性最高。
唾液定性实验报告

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生物学特性及其在消化过程中的作用。
2. 掌握唾液淀粉酶活性定性的实验方法。
3. 通过实验,验证唾液淀粉酶对淀粉的分解作用。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,能够将淀粉分解为麦芽糖,从而为人体提供能量。
在实验中,通过观察淀粉在唾液作用下的变化,可以定性分析唾液淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液、淀粉糊、碘液、烧杯、试管、滴管、温度计。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、显微镜、离心机、pH计。
四、实验方法1. 取两支试管,分别编号为甲、乙。
2. 在甲试管中加入2ml唾液,乙试管中加入2ml清水。
3. 分别向甲、乙试管中加入2ml淀粉糊。
4. 将甲、乙试管放入37℃恒温水浴锅中,保温5分钟。
5. 取出试管,用滴管分别向甲、乙试管中加入1滴碘液。
6. 观察甲、乙试管中溶液的颜色变化。
五、实验现象1. 甲试管中加入唾液后,淀粉糊颜色变浅,碘液滴加后,溶液呈淡黄色。
2. 乙试管中加入清水后,淀粉糊颜色无变化,碘液滴加后,溶液呈蓝色。
六、实验结果与分析1. 通过实验现象可知,唾液对淀粉具有分解作用,而清水对淀粉无分解作用。
2. 根据实验原理,唾液中的唾液淀粉酶将淀粉分解为麦芽糖,导致溶液颜色变浅。
3. 实验结果表明,唾液淀粉酶活性较高,能有效地分解淀粉。
七、实验讨论1. 实验过程中,温度对唾液淀粉酶活性有一定影响。
在37℃恒温水浴锅中,唾液淀粉酶活性最高,因此选择此温度进行实验。
2. 实验过程中,唾液浓度对淀粉分解速度也有一定影响。
实验中采用2ml唾液,可以使淀粉糊颜色变浅,便于观察。
3. 实验过程中,碘液的作用是检测淀粉分解程度。
当淀粉被分解为麦芽糖后,碘液与麦芽糖反应,溶液颜色变浅。
八、实验结论通过本次实验,验证了唾液淀粉酶对淀粉的分解作用。
实验结果表明,唾液中的唾液淀粉酶活性较高,能有效地分解淀粉,为人体提供能量。
九、实验注意事项1. 实验过程中,要注意操作规范,避免污染。
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唾液淀粉酶的性质和活力测定
一.实验目的
(一)1通过唾液淀粉酶性质的测定,了解酶的专一性和多种因素对酶粗反应的影响,pH,底物浓度,温度,激活剂,抑制剂等2学习酶活力,酶活力单位,比活力的测定,加深对概念的理解;
3学会用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量,学会用3,5-二硝基水杨酸测定还原糖的含量,熟练操作分光光度计。
二.实验试剂和器材
器材:可见光分光光度计,试管,移液管,恒温水浴锅,pH试纸,1000ml容量瓶和100ml的容量瓶各一只;
药品:可溶性淀粉,考马斯亮蓝试剂G-250,3,5-二硝基水杨酸,NaoH,HCL,标准牛血清白蛋白溶液,醋酸,醋酸钠,蒸馏水,95%乙醇,85%磷,;0.15molNaCL/ml,0.15mol/L硫酸铜溶液,碘化钾–碘溶液:将碘化钾20克和碘10克溶解在100ml水中,使用前稀释10倍。
注:(1)考马斯亮蓝G-250试剂:考马斯亮蓝试剂G-250100mg 溶于95%乙醇中,加入100ml85%磷酸,加水稀释至1000ml,过滤即可。
(2)标准牛血清白蛋白溶液:结晶牛血清白蛋白用凯式定氮法测蛋白含量,根据其纯度用0.15mol/L Nacl配置成0.1mg/L的蛋白液;
(3)配置0.01%g/ml,0.1%g/ml,,0.5%g/ml,1%g/ml,2%g/ml,3%g/ml 的的溶性淀粉溶液;
(4)配置一系列pH2的缓冲溶液
0.2Mol/L磷酸氢二钠溶液为28.40g/L,Mr=141.98,称取2.84g溶于100ml的水中
5配置0.15mol/L的NaCL溶液和0.15mol/L硫酸铜溶液
三.实验步骤
(一)
1 pH的对酶的影响
1)葡萄糖标准曲线的制定
准确称取100mgAR纯的葡萄糖,溶于蒸馏水中,定容于100ml的容量瓶中,配成1.0mg/L的溶液,水浴加热5min,迅速取出冷却,在向每管加入21.5ml的蒸馏水于550nm处测吸光度;
2)取一试管加入2ml淀粉并滴加两滴碘液,加入适量的酶,记录溶液颜色退去的时间,作为接下来各步反应的反应时间t;
3)取十二只试管并编号分别加入2ml缓冲液
加入2ml,0.1%淀粉,再加入适量的酶,反应t后加入3,5-二硝基水杨酸1.5毫升,水浴加热5min,迅速取出冷却,在向每管加入21.5ml 的蒸馏水于550nm处测吸光度;
4)由pH值和吸光度做曲线,找出最适pH值
2温度对酶活性的影响
1)取十只试管并编号,分别加入2ml,0.1%淀粉液和相同量的酶同时置于0---100,温度间隔10度,反应t后加入3,5-二硝基水杨酸1.5毫升,水浴加热5min,迅速取出冷却,在向每管加入21.5ml的蒸馏水于550nm处测吸光度;
2)由吸光度和温度做曲线,找出最适温度值
3底物浓度对酶活性的影响
1)取十只试管并编号并编号1-10,由1,2步知最适温度和最适PH调节温度PH值至最合适,然后分别加入0.01%g/ml,0.1%g/ml,,0.5%g/ml,1%g/ml,2%g/ml,3%g/ml淀粉溶液2ml并加入等量的酶,反应t后加入3,5-二硝基水杨酸1.5毫升,水浴加热5min,迅速取出冷却,在向每管加入21.5ml的蒸馏水于550nm处测吸光度;
2)做吸光度和底物浓度的曲线图,找出最适底物浓度;
4激活剂和抑制剂对酶活性的影响
取三试管并编号123,分别加入2ml0.1%淀粉溶液,加入最适pH值
的缓冲液并在最适温度水浴中保温5min
后加入1m稀释的唾液淀粉酶,T时间加入3,5-二硝基水杨酸1.5毫升,水浴加热5min,迅速取出冷却,在向每管加入21.5ml的蒸馏水于550nm处测吸光度;
比较吸光度的大小;
(二)酶活力和比活力的测定
1)蛋白质标准曲线的制作
取十二只试管平行操作
2)用标准蛋白质质量为横坐标,吸光度为纵坐标做标准曲线
3)定义:酶活力单位:每分钟生成1mg葡萄糖所需的酶量
4)取一只试管加入一定的酶液(用移液器)加入考马斯亮蓝G-250试剂1.00ml,并和0号管对比,加0.15mol/LnaCL是液面齐平,混匀,1h以内已0号试管为空白对照,在595nm处比色测吸光度;
5)根据蛋白质标准曲线求出酶蛋白含量;
6)调节ph加入最适淀粉量,t时间后加入3,5-二硝基水杨酸1.5毫升,水浴加热5min,迅速取出冷却,在向每管加入21.5ml的蒸馏水于550nm处测吸光度;
7)由葡萄糖标准曲线求出此时的葡萄糖含量;
8)计算酶活力和酶比活力;。