生物技术发酵工程实验方案
生物发酵现象实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究酵母菌在不同条件下发酵作用的原理。
2. 观察并记录酵母菌在无氧和有氧条件下的发酵现象。
3. 分析酵母菌发酵过程中产生的气体成分，并验证其产物。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，具有无氧和有氧两种呼吸方式。
在无氧条件下，酵母菌通过发酵作用将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳；在有氧条件下，酵母菌则将葡萄糖分解为水和二氧化碳。
三、实验材料1. 实验仪器：锥形瓶、胶塞、胶管、小气球、澄清石灰水、重铬酸钾溶液、温度计、试管、比色板、小烧杯、玻璃棒。
2. 实验用品：白糖（100g）、干酵母（约30g）、橙色的重铬酸钾溶液（0.5ml的浓硫酸溶有0.1g重铬酸钾，体积分数为95％—97％）、澄清石灰水。
四、实验步骤1. 准备两组实验装置，一组为有氧条件，另一组为无氧条件。
2. 将100ml 40℃温水倒入锥形瓶，加入一大勺白糖，搅拌均匀。
3. 在有氧条件下，将锥形瓶放置在烧杯中，用温度计控制温度在30-40℃之间，并通入空气。
4. 在无氧条件下，将锥形瓶放置在烧杯中，用温度计控制温度在30-40℃之间，并密封锥形瓶。
5. 分别向两组锥形瓶中加入一小包干酵母，搅拌均匀。
6. 观察两组锥形瓶中的气泡产生情况，记录气泡产生的速度和数量。
7. 将两组锥形瓶中的气体分别导入装有澄清石灰水的试管中，观察石灰水的变化，记录是否产生浑浊。
8. 将两组锥形瓶中的气体分别导入装有重铬酸钾溶液的试管中，观察溶液的颜色变化，记录是否由橙色变为灰绿色。
五、实验结果与分析1. 有氧条件下，锥形瓶中的气泡产生速度较慢，数量较少；无氧条件下，锥形瓶中的气泡产生速度较快，数量较多。
2. 在有氧条件下，澄清石灰水没有变浑浊；在无氧条件下，澄清石灰水变浑浊，说明产生了二氧化碳。
3. 在有氧条件下，重铬酸钾溶液没有变颜色；在无氧条件下，重铬酸钾溶液由橙色变为灰绿色，说明产生了酒精。
六、实验结论1. 酵母菌在无氧条件下通过发酵作用产生酒精和二氧化碳，而在有氧条件下则通过有氧呼吸作用产生水和二氧化碳。
发酵工程方案
发酵工程方案一、概述发酵工程是利用微生物、酵母或酶等生物催化剂对有机物进行生物转化，制备食品、饲料、化工产品等的过程。
发酵工程技术是现代生物技术的一个重要组成部分，广泛应用于食品工业、医药工业、农业和环保等领域。
本文将以食品工业中的发酵工程为例，介绍发酵工程的方案设计。
二、发酵工程的原理发酵工程利用微生物或酵母等生物催化剂将有机物质中的糖类、蛋白质、脂肪等有机化合物转化为其他有用的有机化合物。
在发酵过程中，微生物代谢产物中的发酵物质和能源，因而能够将有机物质转化为生物大分子（如蛋白质、多糖）和生物活性物质（如抗生素、酸类化合物、酒精）等。
在发酵工程中，需要考虑的主要因素包括发酵菌株的选择、发酵基质的选择和预处理、发酵过程的调控、发酵设备的选择和运行等。
三、方案设计的目标发酵工程的方案设计主要目标是实现以下几个方面的要求：1. 高效利用原料：充分利用原料资源，提高产品产率和产品品质。
2. 保证生产质量：保证产品的稳定质量和卫生安全。
3. 提高经济效益：降低生产成本，提高产值利润。
4. 符合环保要求：减少废水、废气排放，保护环境。
四、方案设计的基本内容1. 发酵菌株的选择发酵菌株的选择是发酵工程中最关键的一环。
在选择发酵菌株时，需要考虑到其在发酵过程中的生长速度、产物生成速率、产物种类及产物纯度等因素。
同时，还需要考虑到菌株的稳定性、安全性和易于培养的特点。
除此之外，还需要对不同菌株进行筛选和评价，选取适合生产要求的优良菌株。
2. 发酵基质的选择和预处理发酵基质是指供给微生物生长之所需的有机物质，其种类和质量的选择将直接影响到发酵产物的质量和产率。
在发酵基质的选择上，需要考虑原料的可获得性、价格、含糖量、含氮量、水分含量等因素。
同时，对于一些难降解的废弃物或副产物，还需要进行适当的预处理，如进行粉碎、去除杂质、改变PH值等操作，以提高其利用率。
3. 发酵过程的调控发酵过程的调控是保证产品品质和产量的关键环节。
发酵工程综合实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解发酵工程的基本原理和操作方法；2. 掌握微生物的培养、分离、鉴定及发酵条件优化等实验技术；3. 提高实验操作能力和数据分析能力。
二、实验原理发酵工程是一门研究微生物发酵过程及其应用的科学。
通过发酵工程，可以利用微生物的代谢活动生产出各种有用的产品，如食品、医药、化工产品等。
本实验主要涉及微生物的培养、分离、鉴定及发酵条件优化等实验技术。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖、酵母提取物、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等；2. 仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、电子天平、pH计、发酵罐、酒精灯、试管、培养皿等。
四、实验方法1. 微生物分离与纯化（1）土壤样品的采集与处理：在校园内采集土壤样品，将土壤样品过筛，去除杂质，备用；（2）牛肉膏蛋白胨培养基的制备：按照实验要求，称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂，加入适量的水，搅拌均匀，煮沸10分钟，待冷却后加入琼脂，搅拌均匀，倒入培养皿中，待凝固；（3）土壤样品的接种：将处理好的土壤样品稀释，取适量涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上，置于恒温培养箱中培养；（4）分离纯化：观察菌落特征，挑选单菌落进行纯化，重复以上步骤，直至获得纯化菌株。
2. 微生物鉴定（1）观察菌落特征：观察纯化菌株在牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘等；（2）显微镜观察：将纯化菌株进行涂片、染色，在显微镜下观察菌体形态、染色特性等；（3）生化试验：进行糖发酵试验、氧化酶试验、淀粉酶试验等，鉴定菌株的生理生化特性。
3. 发酵条件优化（1）发酵培养基的制备：根据实验要求，称取葡萄糖、酵母提取物、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂，加入适量的水，搅拌均匀，煮沸10分钟，待冷却后加入琼脂，搅拌均匀，倒入发酵罐中；（2）发酵条件优化：通过改变发酵温度、pH值、接种量、发酵时间等条件，观察发酵产物的产量和品质，确定最佳发酵条件。
生物工程发酵实验课程设计
生物工程发酵实验课程设计（仅供参考）生物工程发酵实验是一门非常重要的课程，涉及到的知识面广、内容丰富，是培养学生综合能力的一项重要手段。
本文将从实验目的、实验设计、实验器材、实验步骤、实验结果、实验分析和结论等方面，详细介绍生物工程发酵实验课程的设计及其重要性。
一、实验目的生物工程发酵实验旨在通过实验操作及数据分析，使学生深入理解发酵反应的基本原理和方法，掌握基本的实验技能和操作技巧，了解发酵过程中微生物生长和代谢特点，展示工程发酵技术在生产中的应用。
二、实验设计1.实验内容本次实验所做的是生产味噌这一传统发酵食品的工艺流程。
主要包括发酵菌种的筛选、培养，发酵原料的选择和处理，以及生产过程中的监测和控制。
实验以组为单位，每组人数控制在3-5人，分别实验培养菌种，添加不同浓度和不同比例的发酵原料，进行发酵过程的监测和调整。
实验周期为2周。
2.实验器材发酵罐、恒温水浴槽、pH计、磷酸盐缓冲液、菌落计数器、电子天平、无菌培养皿、无菌吸管、移液器、无菌操作台等。
3.实验步骤①发酵菌种培养：根据实验要求，选取合适的菌株，进行微生物的培养。
具体步骤如下：菌种接种：从冰箱里取出菌种，接种到无菌培养皿中，用无菌吸管吸取菌液。
预培养：接种后，严格按照菌株的特点分别在适当的环境下进行预培养。
转移菌种：取出菌株，进行无菌移液到新的培养基中。
②发酵原料的处理：选取合适的发酵原料，进行处理。
主要工作是对原料进行清洗、切割、匀质等处理。
具体步骤如下：材料清洁：将原料放入清水中清洗干净，去掉不良的坏点。
材料处理：将清洗后的原料放在无菌操作台上进行切割、匀质等工作。
③发酵过程的监测：对发酵过程中的PH值、温度、微生物数进行监测和调整。
具体步骤如下：PH测量：将发酵液取出来，加入恒温水浴槽中进行pH值的测量。
温度调节：随时根据温度的要求，调节恒温水浴槽的温度。
微生物数统计：通过菌落计数器等方法，对微生物的数目进行统计和调整。
三、实验结果通过对实验数据的统计和分析，可以得到一些比较有意义的结果。
高中生物发酵工程实验教案
高中生物发酵工程实验教案实验目的：1. 了解发酵工程的基本原理和应用。
2. 掌握发酵工程实验中的操作技能。
3. 熟悉实验室安全操作规范。
实验器材与试剂：1. 发酵罐2. 酵母菌培养基3. 酵母菌4. 厌氧罐5. 恒温槽6. 蒸馏水7. 酵母菌培养皿8. 培养皿针管9. 安全手套、护目镜实验步骤：1. 准备工作：洗手、穿戴实验室用具，准备好实验所需的器材和试剂。
2. 实验前操作：将酵母菌培养基均匀涂抹在培养皿上。
3. 发酵罐操作：将酵母菌埋在发酵罐里，放入恒温槽中，控制温度。
4. 培养皿操作：取一定量的酵母菌培养基，注入培养皿中，用培养皿针管均匀涂抹在培养皿上。
5. 结果观察：观察培养皿和发酵罐中酵母菌的生长情况，记录相关数据。
实验注意事项：1. 操作时注意个人安全，保持实验室清洁整洁。
2. 操作实验器材时要轻拿轻放，避免损坏。
3. 实验结束后，将实验器材清洁干净，妥善归还。
4. 发酵罐操作时要注意控制温度，避免温度过高或过低影响实验结果。
实验总结与讨论：1. 通过观察实验结果，分析酵母菌在不同条件下的生长情况。
2. 总结发酵工程实验中的关键操作技巧和注意事项。
3. 探讨发酵工程在生物工程领域中的应用及意义。
扩展实验：1. 可以尝试不同的酵母菌培养基，比较其对酵母菌生长的影响。
2. 可以调节发酵罐中的温度和湿度，观察其对酵母菌生长的影响。
3. 可以尝试使用其他微生物进行发酵实验，比较它们的生长情况。
以上为发酵工程实验的教案范本，教师可根据实际情况进行适当调整和完善。
初中生物发酵技术教案
初中生物发酵技术教案教学目标：
1. 了解发酵技术的基本原理和应用；
2. 掌握发酵实验的步骤和注意事项；
3. 培养学生观察、实验设计和数据分析的能力。
教学内容：
1. 发酵技术的定义和分类；
2. 酵母的发酵产物与食品加工；
3. 发酵实验的步骤和操作技巧。
教学准备：
1. 实验器材：培养皿、试管、橡胶塞、酒精灯等；
2. 实验原料：酵母、砂糖、麦芽提取液等；
3. 实验记录表。
教学过程：
一、导入（5分钟）
介绍发酵技术的定义和作用，引入发酵实验的话题。
二、研究实验（30分钟）
1. 展示发酵实验的步骤和操作技巧；
2. 学生分组进行发酵实验，记录实验现象和数据。
三、讨论与总结（10分钟）
1. 分享实验结果，讨论不同条件下发酵效果的差异；
2. 总结影响发酵效果的因素。
四、作业布置（5分钟）
完成实验报告，总结本节课的学习内容。
教学反思：
本节课通过实验操作和讨论，激发了学生的兴趣，提高了他们对发酵技术的认识和理解。
在以后的教学中，可以结合更多的实例和案例，让学生更好地掌握和应用发酵技术。
初中生物发酵实验教案
初中生物发酵实验教案
实验目的：通过观察和实验，了解生物发酵过程。
实验材料：
1. 玻璃试管
2. 酵母粉
3. 砂糖
4. 温水
5. 温度计
6. 水洗瓶
7. 培养皿
8. 密封袋
9. 塑料管
实验步骤：
1. 将一定量的酵母粉和砂糖混合在玻璃试管中。
2. 加入适量的温水，并用塑料管轻轻搅拌均匀。
3. 将温度计插入试管中。
4. 将试管放入水洗瓶中，封口，使试管内空气基本不流通。
5. 观察并记录试管中的气泡产生情况，并记录试管内温度的变化。
6. 将培养皿中放置涂有糖水的食物，然后将密封袋套在培养皿上，观察并记录袋内气泡产生情况。
实验原理：酵母在糖水的作用下，进行呼吸作用，产生二氧化碳气体，形成气泡。
这是一种生物发酵的过程。
实验注意事项：
1. 实验中要小心操作，防止试管破裂或烫伤。
2. 注意观察实验过程中的温度变化，以及气泡产生的情况。
3. 完成实验后及时清理实验器材。
实验结果分析：通过实验观察发现，酵母在糖水中产生气泡，说明了发酵过程中产生了二氧化碳气体。
而密封袋中的气泡，也是酵母在糖水中进行发酵作用产生的结果。
实验延伸：可以探究不同温度对发酵过程的影响，或者使用不同种类的酵母进行实验，比较不同酵母对发酵的影响。
讨论与总结：通过这次实验，我们了解了生物发酵的原理，同时也学会了如何通过实验来观察和验证生物现象。
继续探究生物发酵的过程，可以更深入地了解生物的生命活动。
发酵工艺大实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在了解发酵工艺的基本原理，掌握发酵过程中的关键参数和操作方法，提高对发酵产品的质量控制和品质提升能力。
通过实验，使学生掌握以下知识点：1. 发酵的基本原理和分类；2. 发酵过程中的关键参数及其对发酵效果的影响；3. 发酵设备的操作与维护；4. 发酵产品的质量控制和品质提升方法。
二、实验原理发酵是指微生物在一定条件下，利用有机物质进行代谢，产生有用产物的过程。
发酵过程包括微生物的生长、繁殖和代谢等阶段。
发酵工艺主要包括微生物的培养、发酵和后处理等环节。
三、实验内容1. 微生物的培养（1）菌种选择：选择具有良好发酵性能的菌种，如酵母菌、乳酸菌等。
（2）培养基制备：根据菌种需求，制备合适的培养基，包括碳源、氮源、无机盐、维生素等。
（3）菌种活化：将菌种接种于培养基中，在适宜条件下培养，使其恢复活力。
2. 发酵过程（1）发酵条件：根据菌种特性，确定发酵温度、pH、溶氧量等条件。
（2）发酵设备：选择合适的发酵设备，如发酵罐、发酵池等。
（3）发酵操作：将活化后的菌种接种于发酵设备中，控制发酵条件，进行发酵。
3. 发酵产品的后处理（1）分离：将发酵液与固体物质分离，得到发酵液。
（2）精制：对发酵液进行精制，去除杂质，提高产品纯度。
（3）干燥：将发酵液或固体物质进行干燥，得到干燥产品。
四、实验步骤1. 菌种选择与活化（1）选择具有良好发酵性能的菌种，如酵母菌。
（2）制备培养基，将菌种接种于培养基中，在适宜条件下培养。
2. 发酵过程（1）根据菌种特性，确定发酵温度、pH、溶氧量等条件。
（2）将活化后的菌种接种于发酵设备中，控制发酵条件，进行发酵。
3. 发酵产品的后处理（1）分离：将发酵液与固体物质分离。
（2）精制：对发酵液进行精制，去除杂质。
（3）干燥：将发酵液或固体物质进行干燥。
五、实验结果与分析1. 发酵过程（1）发酵温度：控制在25-30℃，有利于菌种生长和发酵。
（2）pH：控制在4.5-5.5，有利于菌种生长和发酵。
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产蛋白酶菌种的分离筛选及发酵一、实验流程二、实验安排1、2班分为2大组，分别进行平行实验。
由各组自行安排实验时间，其中13、14、15三周在指定时间集中实验。
几个重要时间节点为：10周正式进入实验程序；第13周获得目标菌株1株；14周完成种子的摇瓶培养；15周分别完成上罐发酵；16周实验收尾工作。
三、发酵工程实验日程表实验一产蛋白酶微生物菌株的分离【实验材料】1、采样样品食堂泔脚等残存蛋白质丰富的环境周围的土壤或其它蛋白质腐败材料。
2、培养基（1）增殖培养基：蛋白胨10 g/L，牛肉膏3 g/L，氯化钠5 g/L，pH 7.0～7.2，0.1MPa，灭菌20min。
（2）分离纯化培养基：酪蛋白10 g/L，Na2HPO4 6 g/L，KH2PO4 3 g/L，NaCl 0.5 g/L，NH4Cl 1 g/L，FeSO4 0.025 g/L，酵母膏0.2 g/L，MgSO4 0.24 g/L，CaCl2 0.011 g/L，溴百里香酚兰0.05 g/L，琼脂20 g/L，pH 7.0～7.2，0.1MPa，灭菌20min。
（3）菌种保存培养基：蛋白胨10g/L，牛肉膏3 g/L， NaCl 5g/L，琼脂 20g/L，pH 7.0～7.2，0.1MPa, 灭菌20min。
（4）无菌水：90 mL无菌水/250 mL三角瓶; 9 mL无菌水/试管6支。
3、实验器材刮铲、一次性手套、无菌小塑料袋、试管、三角瓶、培养皿、吸管、接种环和涂布棒等。
4、实验设备涡旋振荡器、超净工作台、高压灭菌锅、振荡培养箱、恒温培养箱、（数码）显微镜。
【实验步骤】1、采样分别取食堂泔脚池周边土壤，腐烂基质或其它可能含有蛋白酶生产菌的生物制剂10g 装入无菌小塑料袋，在超净工作台上将样品混合均匀从中称取1g作为待增殖的采样样品。
2、增殖培养1g待增殖的采样样品加入50 mL增殖培养基/250 mL三角瓶中，涡旋振荡器上振荡5min ，可设置3组平行。
混匀的液体置于30℃，180 r/min 振荡培养箱中摇瓶培养36 h 。
增殖后的培养液置于80℃水浴中加热10 min 去除营养体细胞，迅速取出冷却至常温，待用。
平行样可以在加热处理后再合并成一个样作为增殖培养液。
3、增殖液梯度稀释在超净工作台中取增殖培养液10 mL 加入装有90 mL 无菌水的250 mL 三角瓶中，静置5 min 后用涡旋振荡器上振荡5 min ，制成10-1稀释菌液。
用无菌吸管吸取1 mL 10-1稀释菌液加入9 mL 无菌水试管中，涡旋振荡器1 min 制成10-2稀释菌液，再依次用无菌吸管吸取1 mL 稀释菌液加入9 mL 无菌水试管中梯度稀释成10-3、10-4、10-5、10-6、10-7倍稀释菌液。
4、平板涂布分别取0.1mL 10-6、10-7稀释菌液于分离培养基平板上，用无菌涂布棒分别涂布均匀，每一稀释度重复5个平行。
5、培养将涂布好的平板放入30℃微生物恒温培养箱中倒置培养36 h 后，观察培养结果，统计总菌数、菌落种类及各自比例。
6、菌株鉴别及纯化挑取菌落周围培养基变蓝色的典型菌落，在保存培养基平板上划线纯化至单一菌落。
显微观察菌体形态。
纯化后的纯菌落作斜面菌种保藏作为后续实验的备用菌种。
【实验结果】1、菌落总数MM =)/(101.0ml cfu NnN n =⨯⨯ （1.1）2、目标菌株比例PP=(%)100⨯Mm （1.2）式中：n 为平板上菌落数（个），以出现30-300个菌落的平板计数为宜，0.1为涂布稀释液加量（mL ），10为量取的增殖培养液量（mL ）, m 为变色菌落数，N 为所计数平板的稀释倍数。
3、显微观察典型目标菌落及细胞形态。
实验2 蛋白酶生产菌种的筛选【实验材料】1.待选菌种取“实验1”分离出的待选菌株3~5株，或以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ）和地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenifornis )等不同产蛋白酶性状的菌株5~7株。
2.培养基（1）鉴别培养基：酪蛋白10 g/L ，Na 2HPO 4 6 g/L ，KH 2PO 4 3 g/L ，NaCl 0.5 g/L ，NH 4Cl 1 g/L ，FeSO 4 0.025 g/L ，酵母膏0.2 g/L ，MgSO 4 0.24 g/L ，CaCl 2 0.011 g/L ，溴百里酚蓝0.05 g/L ，琼脂20 g/L ，pH 7.0～7.2，0.1MPa ，灭菌20min 。
（2）验证培养基：可溶性淀粉10 g/L ，蛋白胨5 g/L ，酵母膏0.25 g/L ， KH 2PO 4 3 g /L ，NaCl 0.5 g /L ，MgSO 4 0.24 g /L ，pH 7.0～7.2，分装成50mL 培养基/250mL 三角瓶，0.1MPa ，灭菌20min 。
3.实验器材游标卡尺、无菌移液管、无菌培养皿、三角瓶、吸管和涂布棒等。
4.实验设备恒温水浴锅、涡旋振荡器、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、振荡培养箱、紫外可见分光光度计、显微镜等。
【实验步骤】1.倒平板将已经灭菌的鉴别培养基自然冷却至50℃左右（即未凝固之前。
可以将装有融化状态培养基的三角瓶放在50℃恒温水浴锅中保持。
注意倒平板时培养温度过高，培养皿盖上易产生较多的冷凝水，影响菌落形成的自然形态），在超净工作台上无菌操作倒平板，培养基凝固后待用。
2.点种接种无菌操作用接种环从待选菌株斜面上取一环菌苔点种在鉴别培养基平板上，每平板上选取分布合适的三个点以点种接种方式接入菌体，在平板培养皿上标记各菌株代号。
不同菌株分别接种在不同平板上，各菌株分别做3组平行试验。
3.培养接种后的平板置于30～32℃下恒温培养箱中培养36 h。
4.变色圈测量分别在培养12h、24 h和36h时用游标卡尺从平板培养皿背面分别测定各菌的变色圈直径（mm）与菌落直径（mm），计算其直径比值。
5.验证性培养选取变色圈直径与菌落直径比值最大的菌株与最小的菌株用接种环分别接入2环菌体于验证液体培养基中，30~32℃，180r/min振荡培养箱中摇瓶培养48 h，将发酵液过滤或离心，取清夜检测其中的蛋白酶产量(U)。
6.蛋白酶活力测定参照附件Ⅸ“蛋白酶活力测定方法”。
【实验结果】1、蛋白酶生产菌种的筛选表1-1 蛋白酶生产菌种的筛选注：平均变色速率为单位时间内菌落周围蓝色变色圈直径增加的程度，用mm/h表示。
2、筛选菌株产酶活性表1-2 菌株产蛋白酶结果验证注：总酶活（U）=培养液中酶浓度（U/mL）×培养液总体积（mL）。
实验二十一发酵菌种制备【实验材料】1、菌种实验选育产蛋白酶菌株，或枯草芽孢杆菌等其它产蛋白酶菌株。
2、培养基（1）斜面培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（配方参照附录六“常用培养基”）（2）种子培养基：可溶性淀粉5g/L，牛肉膏 5g/L ，蛋白胨 10g/L，NaCl 5g/L，0.1MPa，灭菌20min。
3、实验器材三角瓶、容量瓶、吸管（1mL,5mL,25mL）、烘箱、试管架。
5、实验仪器超净工作台、恒温培养箱、振荡培养箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜、分光光度计等。
【实验步骤】1、菌种活化将实验菌种转接到牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上，37℃倒置培养22~24 h活化。
2、接种培养将活化菌种无菌操作接入装入50mL种子培养基/250mL三角瓶中，每瓶接2环菌苔。
接种后的培养液用蜗旋振荡均匀，32℃，180r/min摇瓶培养18~22 h，作为一级种子。
将一级种子按20%的接种量接入250 mL种子培养基/1000mL三角瓶中，32℃，150r/min 摇瓶培养16~18 h，作为二级种子。
3、种子质量检查培养后的种子培养液无菌操作取样5mL，分别作显微镜涂片染色检验细胞形态，测定培养中的菌体浓度（OD600）和蛋白酶浓度（U/mL）。
4、检测方法菌体浓度和蛋白酶含量检测参照附录九“菌体浓度检测方法”和“蛋白酶含量测定方法”。
【实验结果】1、种子液中菌种细胞形态图。
2、种子质量指标表1 种子质量指标实验二十二发酵罐结构认识及使用操作规程【实验目的】了解发酵系统的基本组成，认识典型机械搅拌通气式发酵罐的基本结构，学习发酵罐工作的一般原理，学会发酵罐使用的操作规程。
【实验内容】1、发酵罐基本结构组成（1）罐体系统：罐体、夹套、搅拌器、挡板、进料口、接种口、放料口、排气管、进气管、取样管、照明灯等。
（2）灭菌系统：蒸汽发生器、蒸汽分配管、夹套加热装置、放料口灭菌装置、通气管取样管灭菌装置、空气过滤系统灭菌装置。
（3）温度控制系统：罐内温度传感器（电极）、水箱温度传感器（电极）、恒温水箱、恒温水循环管路。
（4）无菌空气制备系统：空气压缩机、气液分离器、气体流量计、气流调节器、空气粗过滤器和空气精过滤器等。
（5）控制系统：电源开关、操作显示屏、控制器触摸开关、参数设置转换调节屏。
2、发酵罐操作规程（1）发酵罐工艺操作条件设置温度：10～50℃。
压力：0～0.3MPa(表压)。
灭菌条件；温度120～125℃，压力0～0.3MPa (表压)。
通气量：0.3～2 V/V/M。
功率消耗：0.5～4kW/m3。
发酵热量：5，000～20，000 kcal/m3．h。
（2）清洗工作清洗前应取出pH、DO电极。
清洗罐内可配合进水、进气、电机搅拌、加温一起进行。
清洗后安装要注意罐内密封圈、硅胶垫就位情况。
注意罐与罐座间隙均衡。
（3）试车将电极、电机、电缆、进出气软管、冷凝器进出水接头安装就位；安装完毕后要对罐体内通气（0.2MPa）作密封性试验。
方法如下：关闭阀门；旋紧罐体上每一个接口、堵头、电极紧固帽；打开空压机，调节气阀，使罐压保持0.2MPa左右；对系统进行2~3小时试运行，如有问题作相应处理后，方可正式使用。
（4）发酵罐使用准备如果短期内需再次培养发酵，应对其进行2~3次清水清洗待用。
如准备长期停用，则应对其进行灭菌，然后放去水箱与罐内存水，放松罐盖紧固螺丝，取出电极保养储存好，将罐、各管道余水放净，关闭所有阀门，电源，盖上防尘罩。
发酵罐操作开始前，先关闭所有出料口、取样口和进气口，打开出气阀；打开进料口螺盖加入发酵培养基，装注完成后旋上进料口螺盖，稍留空隙待灭菌升温至100℃前喷出蒸汽对螺盖灭菌处理。
（5）灭菌启动蒸汽发生器，待气压达到0.2~0.3Mpa以上时：a. 开启发酵罐出气阀，开启高压蒸汽阀将高压蒸汽通过进气阀引入夹套，打开夹套排水阀，排除蒸汽冷凝水，控制阀门开量，保持微弱出汽；b. 同时通过蒸汽分配管将蒸汽引入空气过滤系统（注意：蒸汽引入前关闭通向电器控制柜的空气阀门），使蒸汽通过一级和二级空气过滤器并顺利进入取样口出口，保持取样放出口微弱出汽；c. 另一路蒸汽通过蒸汽阀发酵罐放料口，并保持放料口微弱出汽；d.等到罐内培养基温度达到80℃时，开启与罐直接相连的通气阀，将高压蒸汽直接接入罐内加热培养基，并对与罐相连的管道灭菌。