厚荚相思玻璃化苗细胞超微结构的变化

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植物组培中玻璃化现象及其预防措施

植物组培中玻璃化现象及其预防措施在植物组织培养过程中，叶片和嫩梢呈透明或半透明水浸状的培养物称为玻璃化苗，它是组培苗的一种生理失调症状。

玻璃化大大降低了试管苗有效增殖系数，严重影响了试管苗质量，造成人、财、物的极大浪费，必须对玻璃化加以控制。

1、玻璃化苗的特点与发生原因（1）玻璃化苗的特点在形态解剖与生理上，玻璃化苗有如下特点：①玻璃化苗植株矮小肿胀、失绿、叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎②叶表面缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，仅有海绵组织而无栅栏组织③体内含水量高，但干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和木质素含量低④吸收营养与光合功能不全，分化能力大大降低，苗生长缓慢、繁殖系数大为降低，甚至死亡⑤生根困难，移栽成活率低（2）发生原因玻璃化苗是在芽分化启动后的生长过程，碳、氮代谢和水分发生生理性异常所引起。

其实质是植物细胞分裂与体积增大的速度超过了干物质生产和积累的速度，植物只好用水分来充涨体积，从而表现玻璃化。

不同作物种类或品种，玻璃化的发生频率各不相同，在情人草中较少见，香石竹中则较普遍。

2、影响玻璃化苗产生的因素（1）生长调节剂细胞分裂素和生长素的浓度及其比例均影响玻璃化苗产生。

高浓度的细胞分裂素有利于促进芽的分化，也会使玻璃化苗的发生比例提高。

不同的植物发生玻璃化的生长调节剂水平不相同，如香石竹的部分品种在BA 0.5mg/L时就有玻璃化发生。

同一植物的不同阶段对细胞分裂素的要求也不同，在某些特定阶段可忍受较高的浓度，而在其他阶段的培养中，却只需要较低的浓度，如非洲菊只有在BA 2-10mg/L时才能诱导幼花托脱分化形成愈伤组织，并在愈伤组织上诱导不定芽;而在丛生芽增殖过程中，BA 1 mg/L即可满足要求。

细胞分裂素与生长素的比例失调，细胞分裂素的含量显著高于两者之间的适宜比例，使试管苗正常生长所需的生长调节剂水平失衡，也会导致玻璃化的发生。

（2）温度随着培养温度的升高，苗的生长速度明显加快，但高温达到一定限度后，会对正常的生长和代谢产生不良影响，促进玻璃化的产生。

不同相思根瘤菌株接种厚荚相思幼苗效应的比较

不同相思根瘤菌株接种厚荚相思幼苗效应的比较吕成群;黄宝灵;韦原莲;叶建仁;武波【期刊名称】《南京林业大学学报：自然科学版》【年(卷),期】2003(27)4【摘要】从不同立地条件的6种相思林中采集根瘤并分离14株根瘤菌,将其接种到厚荚相思幼苗。

结果表明,从广西本地分离的土著根瘤菌比对照菌株L1(从中国林科院引进的外来优良菌种)有更好的共生效应。

从综合效应看,多数菌株接种的厚荚相思幼苗与对照相比,其苗高生长量增加4.5%～18.6%,地径生长量增加2.5%～46.8%,固氮酶活性提高7.6%～241.8%,叶绿素含量提高11.0%～19.1%,叶片硝酸还原酶活性提高3.3%～34.4%,叶片含氮量提高7.4%～43.8%,叶片含磷量提高9.1%～72.7%,叶片含钾量提高8.3%,叶片含钙量提高7.3%～41.5%,叶片含镁量提高12.5%～25.0%,叶片含铁量提高10%以上。

【总页数】4页(P15-18)【关键词】相思根瘤菌;菌株接种;厚荚相思;幼苗效应【作者】吕成群;黄宝灵;韦原莲;叶建仁;武波【作者单位】南京林业大学;广西大学【正文语种】中文【中图分类】S792.99【相关文献】1.不同根瘤菌接种厚荚相思幼苗的试验效果 [J], 石前;黄宝灵;吕成群;伍荣善;李飞宇;陈李花2.接种根瘤菌对厚荚相思水分胁迫的响应 [J], 马海宾;康丽华;江业根;尚军红3.黑木相思根瘤菌在厚荚相思苗木上的效应 [J], 陈文军;黄宝灵;吕成群;秦武明;朱栗琼;韦原莲4.马占相思、肯氏相思、纹荚相思、厚荚相思造林生长比较试验 [J], 蔡伟烈;周纪刚;徐平5.厚荚相思树根瘤菌HJ06菌株的16S rDNA全序列和nifA基因片段分析 [J], 吕成群;黄宝灵;庄培亮;武波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

不同低温处理对3种相思树种叶片细胞超微结构影响的比较研究

不同低温处理对3种相思树种叶片细胞超微结构影响的比较
研究
刘洪波;林思祖;丁国昌;尤华明;马钟丽
【期刊名称】《江西农业大学学报》
【年(卷),期】2005(027)005
【摘要】通过透射电子显微镜观察不同低温处理下纹荚、厚荚、黑木相思的叶片细胞超微结构的变化情况,结果表明:低温对相思类树种叶片细胞超微结构有不同程度的影响.不同相思种的抗寒性存在差异,抗寒性排序为:黑木相思＞纹荚相思＞厚荚相思.
【总页数】5页(P735-739)
【作者】刘洪波;林思祖;丁国昌;尤华明;马钟丽
【作者单位】临沂规划设计院,山东,临沂,276000;福建农林大学,林学院,福建,福州,350002;福建农林大学,林学院,福建,福州,350002;福建农林大学,林学院,福建,福州,350002;临沂市林业局,山东,临沂,276000
【正文语种】中文
【中图分类】S792.119
【相关文献】
1.不同施肥处理对4种相思树种生长的影响 [J], 黄伟强
2.不同浓度钙处理对枇杷小苗叶片细胞超微结构及叶绿体色素含量的影响 [J], 廖汝玉;尹兰香;金光;潘少林;陈志峰;熊德中
3.低温处理对不同苹果砧木叶片生理指标的影响 [J], 冯章丽;刘畅;赵德英;刘延杰;顾广军;程显敏;卜海东
4.不同处理方式对新银合欢、台湾相思两树种种子发芽率及发芽势的影响 [J], 丁娜;马焕成
5.不同抗冷级别的棉苗在低温处理后叶片细胞超微结构的变化 [J], 李生泉;侯燕平;范月仙
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植物组培过程中的玻璃化问题

植物组培过程中的玻璃化问题在进行植物组织培养时，经常会发现试管苗生长异常，表现为试管苗叶、嫩梢呈水晶透明或半透时，水浸状；整株矮小肿胀、失绿；叶片皱缩成纵向卷曲、脆弱易碎；叶表缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具有栅栏组织，仅有海绵组织。

这种试管苗生长异常现象就是P.Debergh （1981 ）首先命名的’玻璃化"（Vitrification ）。

是植物组织培养过程中所特有的一种生理失调或生理病变玻璃苗中因其体内含水量高，干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和森质素含量低、角质层、栅栏组织等发育不全，表现为光合能力和酶活性降低，组织畸形，器官功能不全，分化能力降低，所以很难继续用作继代培养和扩大繁殖的材；生根困难，移栽后也很难成活植物微体快速繁殖时玻璃苗的出现已成为一种很普遍的现象，该苗有时多达50%以上，严重影响繁殖率的提高，已成为茎尖脱毒、工厂化育苗和材料保存等方面的严重障碍，造成人、财、物的极大浪费，所以试管苗下班化现象对植物组织培养的危害是相当严重的，也是亟待解决的问题。

一）玻璃苗发生的因素琼脂和蔗糖浓度与玻璃化成负相关，琼脂或蔗糖浓度越高，玻璃苗的比率越低。

Daniel G. W. Brown 认为玻璃化可能是培养基渗透势不当所致。

碳源不仅为芽的形成提供能量，而且也起渗透调节作用，主要影响培养基的渗势（Salisbury 等）。

随琼脂浓度及纯度的增加，培养基硬度增加，从而影响其衬质势和水分状况。

Debergh 等研究表明，液体培养基的水势影响玻璃苗的形成，Ziv 等认为只要降低培养容器中的相对湿度，就可以降低玻璃苗的比例。

刘思颖等（1988）测得丝石竹玻璃苗叶片的水势约为正常苗的 1.9 倍，含水量为正常苗的2.09 倍—2.21 倍。

自由水和高湿度可能与肉质嫩梢的形成有关。

Davis 等研究表明，液体培养是导致玻璃化的主要原因。

可以断定，试管苗玻璃化可能是培养基内水分状态不适应的一种生理变态。

园艺植物细胞的超微结构研究

植物学通报　2003,20(6):688～695Chinese Bulletin of Botany园艺植物细胞的超微结构研究①1,3吴国良　2孙建平　1冀爱青　1张　燕1(山西农业大学园艺学院　太谷　030801)2(西北农林科技大学园艺学院　杨陵　712100)3(中国农业大学园艺学院　北京　100094)摘要　细胞是生物体最基本的结构和功能单位。

综述了园艺植物的器官生长发育过程中细胞的超微结构研究,果实发育过程中的组织及细胞超微结构研究,逆境下不同器官细胞超微结构变化的研究。

指出了当前研究中的不足及今后的发展方向。

关键词　园艺植物,细胞,逆境,果实,超微结构The Studies on the U ltrastructure of Cells in H orticulture Plants 1,3W U G uo2Liang　2S UN Jian2Ping　1J I Ai2Qing　1ZH ANG Y an1(The College o f Horticulture Science,Shanxi Agriculture Univer sity,T aigu030801)2(The College o f Horticulture Science,Northwest Sci-tech Univer sity o f Agriculture and Forestry,Y angling712100)3(The College o f Horticulture Science,China Agriculture Univer sity,Beijing100094)Abstract　The cell was a basic unite in structures and function.The main contents in this review include as follows:the cell ultrastructure study in organ’s growth and development,during fruit de2 velopment and under the stress conditions in horticultural plants.K ey w ords　H orticulture plant,Cell,Stress,Fruit,Ultrastructure被恩格斯誉为19世纪自然科学三大发现之一的细胞学说的提出(1839),为现代生命科学的发展奠定了坚实基础,而DNA双螺旋结构模型的确立(1953)则为现代生命科学的飞跃开辟了坦荡通途,开创了分子生物学的崭新时代(陈竺等,1998)。

相思树悬浮细胞培养及其细胞形态学观察

相思树悬浮细胞培养及其细胞形态学观察林秀莲;叶玲娟;林玉玲;徐小萍;张梓浩;赖钟雄【摘要】试验分析了基因型、愈伤组织类型、2,4-D浓度、蔗糖浓度,起始接种量等各因素对相思树悬浮细胞培养的影响.结果表明:选择淡黄色,质地鲜嫩松脆的愈伤组织作为相思树悬浮培养的材料,能较快地建立起悬浮细胞系.黑木相思细胞小,胚性强,分散性好,最容易建立起悬浮细胞系.当蔗糖浓度为30 g/L,2,4-D浓度为0.5 mg/L时,适宜于悬浮细胞的保持.起始接种量对相思悬浮细胞系生长也有很大影响,从保持悬浮细胞系的角度看,每瓶25 mL培养基中适宜的接种量为0.5～1.0 g.台湾相思悬浮细胞培养周期以7 d继代1次,卷荚相思悬浮细胞培养周期以8～10 d为宜.同时,通过对悬浮细胞培养的显微观察可以看出不同基因型的相思树悬浮细胞,其细胞生长状态各不相同.【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2018(039)009【总页数】8页(P1786-1793)【关键词】相思树;悬浮细胞;细胞学观察【作者】林秀莲;叶玲娟;林玉玲;徐小萍;张梓浩;赖钟雄【作者单位】福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州 350002;惠州工程职业学院,广东惠州 516023;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州350002;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州 350002;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州 350002;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州 350002;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州 350002【正文语种】中文【中图分类】S687;Q813.1相思树是中国引种的重要速生树种，在中国南方短周期工业原料林发展、水土保持和丰富林木种质资源等方面具有重要作用和地位[1]。

植物细胞悬浮培养是植物细胞生长的微生物化，由于其分散性好，细胞形状及细胞团大小大致相同，而且生长迅速，重复性好，易于控制等有利因素[2]，因此被广泛用于细胞学、生物化学、生理学、发育生物学、遗传学、分子生物学的研究。

植物材料组培玻璃化

植物材料玻璃化玻璃化苗外形与正常苗有显著差异。

其叶、嫩梢呈水晶透明或半透明，植株矮小肿胀，失绿，叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎；叶表皮缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具有栅栏组织，仅有海绵组织；体内含水量高，但干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和木质素含量低。

由于其组织畸形，吸收养料与光合器官功能不全；分化能力大大降低，因而很难继续用作继代培养和扩大繁殖的材料；加上生根困难，很难移栽成活。

玻璃化的起因是细胞生长过程中的环境变化。

试管苗为了适应变化了的环境而呈玻璃状。

产生玻璃化苗的因素主要有激素浓度、琼脂用量、温度、离子水平、光照时间、通风条件等。

1.激素浓度激素浓度增加尤其是细胞分裂素浓度提高(或细胞分裂素与生长素比例高)，易导致玻璃化苗的产生。

产生玻璃化苗的细胞分裂素浓度因植物种类的不同而异。

细胞分裂素的主要作用是促进芽的分化，打破顶端优势，促进腋芽发生，因而玻璃化苗也表现为茎节较短、分枝较多的特点。

使细胞分裂素增多的原因有以下几种：一是培养基中一次性加入过多细胞分裂素，比如6—BA、ZT等；二是细胞分裂素与生长素比例失调，细胞分裂素含量远远高于生长素，而使植物过多吸收细胞分裂素，体内激素比例严重失调，试管苗无法正常生长，而导致玻璃化；三是在多次继代培养时愈伤组织和试管苗体内累积过量的细胞分裂素。

在初级培养相同的培养基，最初的几代玻璃化现象很少，多次继代培养后，便开始出现玻璃化现象，通常是继代次数越多玻璃化苗的比例越大。

2.琼脂浓度培养基中琼脂浓度低时玻璃化苗比例增加，水浸状严重，苗向上长。

随着琼脂浓度的增加，玻璃化苗比例减少，但由于硬化的培养基影响了养分的吸收，试管苗生长减慢，分蘖亦减少。

因此，琼脂的浓度一定要适当。

3.温度适宜的温度可以使试管苗生长良好，当温度低时，容易形成玻璃化苗，温度越低玻璃化苗的比例越高。

温度高时玻璃化苗减少，且发生的时间较晚。

4.光照时间不同的植物对光照的要求不同，满足植物的光照时间，试管苗才能生长正常。

鹅掌楸油细胞发育过程中超微结构的变化与挥发油产生的关系

鹅掌楸油细胞发育过程中超微结构的变化与挥发油产生的关系蔡霞;胡正海;何一【期刊名称】《西北植物学报》【年(卷),期】2002(022)002【摘要】鹅掌楸[Liriodendronchinense(Hemsl.)Sargent.]油细胞的发育过程可依据细胞壁的结构变化依次划分为3个阶段,即仅具初生纤维素壁层阶段、木栓质化壁层形成阶段和内纤维素壁层形成阶段.在发育早期,仅具初生纤维素壁层时,油细胞因其体积大,核仁显著,含极少淀粉粒和质体几乎无类囊体而与周围的组织细胞不同.对其3个发育阶段中内部结构变化分析表明,挥发油合成于细胞质和质体中.细胞质中,挥发油就以小滴形式产生,然后逐渐与油囊融合直接贮入油囊,与此同时,在各种细胞器中,质体的变化最为明显,质体中合成的嗜锇物质,随质体解体进入细胞质中,再经转化通过杯形构造积累入油囊.油囊中积累的油经OsO4染色后呈灰色,且分为2层,外层较内层深,推测与油的2种来源有关.【总页数】6页(P327-332)【作者】蔡霞;胡正海;何一【作者单位】西北大学植物研究所,西安 710069;中国科学院西安光机研究所瞬态光学技术国家重点实验室,西安 710068;西北大学植物研究所,西安 710069;西北大学植物研究所,西安 710069【正文语种】中文【中图分类】Q944.683【相关文献】1.烤烟叶片发育过程中栅栏细胞超微结构的变化 [J], 时向东;焦枫;范豪杰;韩永镜;刘国顺2.蟠桃果实发育成熟过程中果肉细胞超微结构的变化 [J], 李银;张辉;骆建敏;袁海英;薛珊珊;张茜3.玉兰油细胞发育和挥发油产生的超微结构 [J], 蔡霞;何一;胡正海4.杂种鹅掌楸花粉发育过程中细胞游离Ca2+的动态变化 [J], 尹增芳;宁代锋;李玉春;席梦利;施季森5.猫屎瓜乳汁道形成过程中显微和超微结构变化以及与橡胶产生的关系 [J], 胡正海;赵桂仿;田兰馨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

植物试管苗玻璃化现象的发生及防治

植物试管苗玻璃化现象的发生及防治刘柏林甘肃农业大学生命科学技术学院，兰州（730070 ）E-mail：liubl926@摘要：植物试管苗玻璃化现象在不同的植物器官、组织、细胞以及原生质体的组织培养中普遍存在。

玻璃化苗的形态解剖学特征、生理生化特点与正常的试管苗有显著不同。

微环境、基因型、内源激素、植株自身的生理状态等一系列因素影响玻璃化的发生。

本文通过研究玻璃化的发生机制，提出具体的防治措施。

关键词：试管苗；玻璃化现象；发生机制；防治措施1. 引言在植物组织的离体培养中，我们常发现有外观形态异常、呈半透明状的试管苗出现，我们把这种现象称为植物试管苗的玻璃化现象，其出现的概率可高达100%[1～3]在组织培养中丝2．玻璃化苗的形态解剖学特征2.1 形态学特征与正常苗相比,玻璃苗在形态学上发生了显著变化,其共同特点是:植株矮小肿胀,呈半透明状;茎短而粗,几乎无节间;叶片厚而狭长,皱缩或卷曲,脆弱易破碎;叶表无角质层,无功能性气孔器,叶仅有海绵组织,没有栅栏组织[7]。

Debergh 等[8]描述了洋蓟（Cynara scolymus）玻璃化苗的形成过程：叶片和小叶柄逐渐显示出多水，尤其是丛生叶中央的幼叶逐渐肿胀，然后肿胀的小叶突然明显地生长，长度约为正常叶片的5～6 倍；绿色叶片变成半透明,最终坏死。

2.2 解剖学特征茎皮层及髓部的薄壁组织过度生长，细胞间隙大，输导组织发育不良或畸形，导管和管胞木质化不完全。

叶片的栅栏组织细胞层数减少，或仅有海绵组织。

叶肉细胞间隙大，表皮组织发育不良，包括叶表角质层变薄或缺少角质层蜡质，有的是蜡质发育不完全，或蜡质结晶的结构发生变化。

果胶及纤维素等也发育不良。

在有些植物玻璃化苗的叶表发现有大量的排水孔。

气孔器数量或多或少，但功能不正常，其原因可能是保卫细胞中胼胝质含量增加，而纤维素含量减少。

叶绿体中基粒和基质的组织结构异常，叶绿素含量低。

根茎之间维管组织联系有缺陷[13]。

厚荚相思半同胞子代早期生长差异的研究

２１年第０期０２３（第２５）总６期
吉林农业
ＪＬＩＡＧＲＩＩＮＣＵＬＴＵＲＥ
ＮＯ．３．２２００１
（ｕｌｔｅｙＣｍｕａｉｔＮＯ．６）ｖ２５
厚荚相思半同胞子代早期生长差异的研究
樊东函 ’ 韦大勇，梁乃鹏梁，，
５５０）３００
机，何贵整 ’
（．钦州市林业科学研究所，广西钦州５５０；２１３００．广西国有维都林场，广西来宾５６０；３广西大学林学院，广西南宁４１０．
摘要：本研究对钦州钦廉林场厚荚相思实生种子园母树的半同胞子代进行了遗传测定，主要研究结果如下：试验点的子代林测定表明，厚荚相思子代生长差异极显著，而这些差异主要由遗传因素控制；子代树高与地径在表型、遗传和环境上呈显著相关。关键词：厚英相思；子代测定；生长差异中图分类号：￥９．９７２３文献标识码：Ａ文章编号：１７ —４２（０２０— ０９２６４０３２１）一３０５ —
湿冬干，呈显著的季节性变化。
１４
１５１６１７ｌ８１９
１７８８．
２４２２．２．２１９１６７．７１７０９．２２３４
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中国分类号：Ｑ４．９３１文献标识码：Ａ文章编号：１０ —３９２０）１— ００— ４０１８Ｘ（０７Ｏ０４０
Ｕｌｒｓｒｃｕｅｄｖｒｉｃｔｏｆｔａｔｕｔｒｉｅｓｆａｉｎｏｉ
Ａｃｃａｃａｓｃｒｉｒｆｒｅｄｉｓａｉｒｓｉａｐａｖｔｉｏｍｓｅｌｎｇ
图１正常叶片细胞超微结构
ＦｇｒＴｅｕｔａｒｃｕｅｏｏｍａｅｆｃｌｉｕｅ１ｈｌｒｓｕｔｒｆｎｒｌｌａｅｌ
与正常苗相比，玻璃化苗多数叶细胞内含物稀少，整个细胞体积是正常苗的１５— ．．３０倍，明显较正常苗的偏大。叶绿体数量较少，一个细胞内部有１４个叶绿体，有些细胞甚至不含有叶绿体。叶绿 — 体的形态变化较大，多数叶绿体成带状（２）图Ａ，极少数为正常形态。电镜观察可见部分叶绿体外膜已经发生解体（）图２。少数叶绿体呈部分解体状态，可看到叶绿体被膜部分缺失，基粒片层模糊、消失Ｂ
Ｋｅｒｓｙｗｏｄ：Ａｃｃａｃａｓａｐ；ｖｔｉｃｔｎｕｒｓｒｃｕｅａｉｒｓｉｒａｃｉｆａｉ；ｈａｔｔｒｒｉｏｕ
厚荚相思（ｃｃａｉｒ）Ａａｉｃｓｃｐ是含羞草科金合欢属常绿乔木，由于其适应性强，生长迅速，系具ａｒｓａａ根有根瘤，木材用途广泛，现在华南沿海各地广为种植…。目前，营林生产上所用的厚荚相思苗木主要是通过播种繁殖和枝条扦插繁殖２种方式获得。用实生苗造林的厚荚相思，其树形、生长量、逆性等抗受种源的影响较大。即使是同一种源，苗木质量和营林表现也出现较大的差异Ｊ。直接采用优良的厚荚相思林木枝条进行扦插繁殖的苗木能较好地保持其母株优良的性状，但由于优株数量较少，而插枝的生根率较低¨ ，同样制约了营林生产的实际需要。利用优良单株的嫩茎或萌芽枝条，进行组织培养］快速繁殖优质苗木，已成为近代无性系育种和无性系林业的一个关键环节。据研究表明，在厚荚相思的组培过程，如大白菜试管苗一样Ｊ，玻璃化现象成为制约繁殖系数的最重要因素。玻璃化苗外观形态异常，矮小肿胀，呈半透明水渍状，含水量增加，有时发育出大量短茎，但无节间。叶片厚而狭长，皱缩或卷曲，脆弱易破碎。玻璃化苗增殖困难，几乎不能生根，一旦出现，很难逆转。目，对影响玻璃化现象因素的机理研究还处在探索阶段。许多学者已经注意到，玻璃化现象产生前后，玻璃化苗和正常苗在形态和微观结构上的显著差异引；但是很少从超微结构方面进行探讨，更没卜有关于２种苗在细胞器形态结构方面差异的研究。本试验以厚荚相思组培过程中产生的正常苗和玻璃化苗为材料，从分子显微水平，研究了玻璃化苗超微结构的变化情况，初步阐明玻璃化的机理，为研究玻璃化现象提供一定的理论依据。
Ａ
注：ｃ．叶绿体；ｃ细胞壁；ｍ线粒体；ｖ－液泡；ｓ．淀粉粒。ｇ
Ａ正常叶片细胞质膜及细胞内膜系统清晰完整（１００；Ｂ． × ５０）．正常叶片细胞线粒体数量较多，呈规则的椭圆形，嵴突呈管状，双层
膜清晰完整（２０。ｘ００）０
ｏｏＴｅｖｃｏｅｗａｒｘａｅ，ｈｙｏｌｓｗａｏｅｗａｈｆｌｗ．ｈａｕｌｓｍｏｅｅｐｄｄｔｅｃｔｐａｍｓｍｒｓｙ，ｔｅｎｍｂｒｏｈｏｏｌｓｅｒａｅｎｈｕｅｆｃｌｒｐａｔｄｃｅｓｄ，ｍｏｔｆｔｅｗｒｓｓｍｅｏｈｅｄｇａｉｄｇｅｔｅｒｄｅｒａｙ，ｔｅｎｍｂｒｏｔｃｏｄｏｅｒａｅｌｈｕｅｆｍｉｈｎｒｎｄｃｅｓｄ，ａｄｉｔｃｕｅｃａｇｄｇｅｔｏｉｎｔｓｒｔｒｈｅｒａｌｔｅｉｔｒｅｌａｐｃａｒｓｕｎｙ，ｈｎｅｃｌｕｒｓａｅｗｓｍｏｅｌｂｏｄｒｒａｅ．
Ｃｍｐｒｄｗｔｅｎｒｌ．ｃｏａｅｉｔｏｍａＡ阳口ｈｈ口ｔｓｅｃｌｕｅｓｅｉｇｔｅｔｓｅｏｉｆｄＡｃａｓｃｒａｓｅｌｇｈｄｂｅｈｎｅｓｉｕｕｔｒｅｄｎ，ｈｉｕｆｔｉ．ｒｓｉａｐｅｄｉａｅｎｃａｇｄａｓｌｓｖｒｅｉｎ
维普资讯
福建林学院学报２０，７１：０－３０７２（）４４
ＪｕｎｌｆｕｉｏｅｅｆｏｓｙｏｒａｏＦｊｎＣｌｇｒｔａｌｏＦｅｒ
第２７卷第１期２００７年１月
厚荚相思玻璃化苗细胞超微结构的变化
２结果
电镜下观察结果表明，正常苗叶细胞内含物丰富。叶绿体数量较多，一个叶细胞内有４— ７个叶绿体，大多呈椭圆形，叶绿体结构完整，内部片层丰富整齐，基质片层及基粒片层清晰可见，并贮藏有淀粉粒。液泡较小，细胞内含物充实。细胞壁结构完整。细胞间结合紧密，细胞间隙较小。质膜及其它细胞内膜系统清晰完整（１）图Ａ。线粒体数量较多，呈规则的椭圆形，嵴突呈管状，而且比较密集，双层膜清晰完整（１）图Ｂ。
表性的正常苗和玻璃化苗作为研究对象。
Ｉ２试验方法．
供试材料采用木本植物超薄切片的制备方法】，于室温下分别取它们的叶片（大小为０５ｍ × ．ｍ２ｍｌ，ｉ立即投入用０１ｔｌ－１）．ｏ・１ｏＬ磷酸缓冲液配制的０２ｏ・的戊二醛溶液中，并用真空抽气机使之．５ｔｌｏＬ下沉。在４℃下固定１，经０１ｏ・磷酸缓冲液（Ｈ＝．）６ｈ．ｌｍＬｐ７２冲洗３，每次１ｒｎ次５ａ。然后置于０１ｉ．ｏ・ｔｌ的磷酸缓冲液配制的１ｏＬ％的锇酸中，４℃下固定４ｈ，然后用蒸馏水冲洗３次，每次１ｉ５ｒｎａ。接着再用乙醇逐级脱水，乙醇各级体积分数分别为３％、５％、７％、８％、９％、１０，每级１００００００％５ａ。环氧丙烷过度２，再用环氧丙烷与包埋剂１１透２ｈ：ｒｎｉ次：浸，１３浸透４ｈ０％包埋剂浸透１，１０２ｈ后，用６８１环氧树脂进行包埋，用ＬＢＮｖ型超薄切片机进行切片，经醋酸铀染色３ｉＫ —ｏａ０ｒｎ和柠檬酸铅ａ染色１ｉ，在ＪＭ１０Ｘ型透射电镜下观察并拍照。５ｒｎａ后Ｓ－ＣＩ０
泡空泡化严重，内含物减少。细胞间结合不紧密，细胞间隙较大，质膜及其它细胞内膜系统有部分破碎现象（２、２）图ＥＦ。
取其茎段进行２次增殖继代培养后得到供试组培苗（中Ｂ其Ａ为２ｍ・～，ＫｇＬＴ为２ｍ－～，蔗糖为ｇＬ２ｍ・～，ｇＬ活性碳为２ｍ・～，每天光照１，光照强度为１０）０５年ｌ，挑选其中具有代ｇＬ６ｈ０Ｉ。２０５ｘ２月
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院
学
报
第２７卷
（Ｃ。线粒体数目明显变少，膨胀成圆球状，嵴突肿胀、排列紊乱，明显不如正常苗中的线粒体嵴图２）
突密集，并伴有空泡化现象，被膜模糊（Ｄ。液泡体积明显变大，是正常苗细胞的体积２— 图２）４倍。液
丁国昌，马钟丽，林思祖，尤华明，姬明，赖钟雄
（．福建农林大学林学院，福建福州３００；２福建农林大学园艺学院，福建福州３００）１５０２．５０２
摘要：通过透射电子显微镜观察厚荚相思正常组培苗和玻璃化组培苗叶片细胞超微结构的变化
基金项目：福建省相思类树种科技产业化攻关项目（闽林综［０３２２０］７号）。作者简介：丁国昌（９０，男，福建长汀人，讲师，从事森林培育研究。１一）７通讯作者：林恩祖（９３）１５一，男，福建福清人。教授，博士生导师，从事森林培育研究。
ＡｂｔａｔＡｔｎｍｉｓｎｅｅｔｎｍｉｒｓｏｅＷｓｄｆｒｏｓｒｉｇｔｅｌａｅｌｕｔａｒｅｕｅｏｉｉｃｔｎａｄｎｒｌａｉｓｒｃ：ｒｓｓｉｌｃｒｃｃｐａｕｅｏｂｅｖｎｈｅｆｃｌｌｒｓｕｔｒｆｖｔｆａｉｎｏｍａｃａａｏｏｏｓｒｉｏＡｃｅｍｓ￣ａｔｓｅｅｈｒｅｄｉｇ，ａｄｉｗｓｆｕｄｔａｈｒｒｉｔｃｉｅｅｃｓｂｔｅｎｔｅｖｔｆｄａｄｔｅｎｒ１．ｒ＆ａｉｕｕｕｓｅｌｓｎｔａｏｎｈｔｔｅｗｅｅｄｓｎｔｄｆｒｎｅｅｗｅｈｉｉｎｈｏｍａｓｅｎｅｉｆｉｒｅ
情况。结果表明：在超微结构上玻璃化苗与正常苗叶细胞具有明显差异。与正常组培苗相比，玻璃化苗的液泡膨大，空泡化严重，内含物稀薄；叶绿体数量较少，且形态变化较大，多数呈
部分解体状态；线粒体数目，膨胀变形，嵴突少、排列紊乱，伴有空泡化；细胞间隙变大，少胞间联系稀疏。
关键词：厚英柯思；玻璃化；超微结构
收稿Ｅ期：２０ｔ０６一ｏ２６— ０；修回日期：２００３。０６— ９— ０
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第１期