多酚提取步骤和含量计算
多酚沉淀法提取
多酚沉淀法提取
多酚沉淀法提取植物多酚的过程主要包括以下几个步骤：
1. 用水溶液将植物多酚成分溶解出来。
2. 在一定的pH条件下，使多酚类物质与Al3+、Zn2+、Hg2+、Ca2+、Mg2+、Fe3+等金属离子产生络合沉淀。
3. 将沉淀离心分离出来后，加酸转溶。
4. 最后用有机溶剂抽提出多酚物质。
大量的实验结果均证明，沉淀法萃取植物多酚提取率可达到10-15%，有效成分含量在90%之上。
相比与溶剂萃取法，沉淀法所使用的溶剂含量少，所需提取设备、工艺简单，生产操作安全，并且可以得到纯度很高的植物多酚产品，因此应用较广。
但值得注意的是，在沉淀法提取过程中，由于提取过程耗费时间较长，植物多酚易被氧化遭受破坏，并且沉淀过程中残留的一些重金属离子对产品的安全也是一个巨大的隐患。
此外，关于超声波提取植物多酚的方法，是利用超声波的空化效应、热效应和机械作用，在一定的提取温度和时间控制下，选用合适的超声波功率，对植物多酚类成分进行提取。
福林酚法测多酚含量的原理
福林酚法测多酚含量的原理多酚是一种重要的天然物质，具有多种生物活性和药理作用。
因此，测定多酚含量对于食品、药品、化妆品等领域具有重要意义。
福林酚法是一种常用的测定多酚含量的方法，本文将介绍福林酚法测多酚含量的原理。
一、福林酚法的基本原理福林酚法是以福林酚为试剂，测定多酚含量的方法。
福林酚是一种酚类化合物，可以和多酚发生氧化反应，生成深褐色的产物，其吸光度与多酚的含量成正比。
因此，通过测定深褐色产物的吸光度，可以计算出多酚的含量。
二、福林酚法的步骤福林酚法的具体步骤如下：1.制备福林酚试剂：将福林酚和氢氧化钠混合，加入水中搅拌至完全溶解。
2.制备标准曲线：取一定浓度的多酚标准品，加入福林酚试剂，混合均匀后，测定吸光度。
根据吸光度和多酚标准品的浓度，绘制标准曲线。
3.测定样品：取一定量的样品，加入福林酚试剂，混合均匀后，测定吸光度。
根据标准曲线，计算出样品中多酚的含量。
三、福林酚法的优缺点福林酚法测多酚含量具有以下优点：1.简单易行：福林酚法的操作简单，不需要复杂的仪器和技术。
2.灵敏度高：福林酚法对多酚的检测灵敏度高，可以检测到微量的多酚。
3.稳定性好：福林酚试剂具有较好的稳定性，可以长期保存。
但福林酚法也存在一些缺点：1.受干扰：福林酚法对一些物质具有交叉反应，如还原糖、蛋白质等，会对多酚含量的测定造成干扰。
2.适用性有限：福林酚法只适用于测定含有酚羟基的多酚，对于不含酚羟基的多酚无法测定。
四、福林酚法的应用举例福林酚法广泛应用于食品、药品、化妆品等领域的多酚含量测定。
以下是一些应用举例：1.测定茶叶中多酚含量：茶叶中含有大量的多酚，可以通过福林酚法测定其含量，从而评估茶叶的品质和功效。
2.测定葡萄酒中多酚含量：葡萄酒中含有丰富的多酚，可以通过福林酚法测定其含量，从而评估葡萄酒的品质和营养价值。
3.测定化妆品中多酚含量：化妆品中含有多种多酚，可以通过福林酚法测定其含量，从而评估化妆品的功效和安全性。
提取物中多酚类化合物的鉴定
提取物中多酚类化合物的鉴定一、前言多酚类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对于提取物中多酚类化合物的鉴定具有重要意义。
本文将从样品制备、实验方法和数据分析三个方面介绍提取物中多酚类化合物的鉴定方法。
二、样品制备1. 样品来源样品可以来源于植物组织、食品或者药材等。
在选择样品时需要考虑样品的质量和含量，以及是否符合实验要求。
2. 样品制备（1）植物组织：将新鲜或干燥的植物组织粉碎成粉末，过筛筛选出适当大小的颗粒。
（2）食品：将食品切碎或者磨成粉末，过筛筛选出适当大小的颗粒。
（3）药材：将药材切碎或者磨成粉末，过筛筛选出适当大小的颗粒。
3. 样品储存为了保证实验结果的准确性，在制备好样品后需要储存好样品。
对于植物组织和食品，可以将其放置在密闭的塑料袋中，避免受潮、氧化和污染。
对于药材，可以将其放置在干燥、阴凉、通风的地方。
三、实验方法1. 总多酚含量测定总多酚含量是指样品中所有多酚类化合物的总量。
常用的测定方法有菲林-苏丹法和Folin-Ciocalteu法。
（1）菲林-苏丹法：该方法基于菲林试剂与多酚类化合物反应产生的蓝色色素和苏丹红试剂与蛋白质反应产生的红色色素之间的差异。
步骤如下：① 取适量样品加入盛有5ml水的离心管中。
② 加入2ml 95%乙醇，振荡混匀。
③ 离心10分钟，取上清液加入新离心管中。
④ 加入1ml 0.5%菲林试剂和1ml 10%Na2CO3溶液，振荡混匀后放置30分钟。
⑤ 加入2ml 1%苏丹红试剂，振荡混匀后放置5分钟。
⑥ 用紫外可见分光光度计在760nm处测定吸光度。
（2）Folin-Ciocalteu法：该方法基于Folin-Ciocalteu试剂和多酚类化合物反应产生的蓝色色素之间的关系。
步骤如下：① 取适量样品加入盛有5ml水的离心管中。
② 加入2ml Folin-Ciocalteu试剂，振荡混匀后放置5分钟。
实验报告
提取茶叶中的茶多酚
徐成郡
经济管理学院12-1班
实验名称：提取茶叶中的茶多酚
实验目的：计算茶叶中的茶多酚含量
实验器材：试管、烧杯、量筒、加热器、加压过滤器、胶头滴管、 移液管、比色皿
实验药品：磷酸氢二钾溶液、磷酸二氢钾、茶叶、酒石酸亚铁溶 液
实验原理：茶叶中含有很多的酚类，酚类会与酒石酸亚铁发生反 应生成紫蓝色络合物，通过测量器吸光度计算其含量
计算公式为：茶多酚（%）=
100**1*10002*957.1*m
V A % 实验步骤：
1.取磷酸二氢钾溶液15ml 和磷酸氢二钾溶液85ml
于
烧杯中混合均匀。
2.称取5g 茶叶，加入200ml 水煮沸，静止20分钟， 加压过滤，量取滤液体积，记为V=150ml.
3.准确吸取上述试液1ml ，注入25ml 容量瓶中，加 水4ml 和酒石酸亚铁溶液5ml ，充分混匀后，再 加PH7.5的缓冲溶液至刻度线。
然后取一个干净
的25ml 容量瓶，加入4ml 水和酒石酸亚铁溶液
5ml ，充分混匀后再加PH 7.5的缓冲溶液至刻度
线制得空白溶液。
4.用两个10mm 比色皿分别取上述两种溶液，测定
吸光度（A ）=1.315
实验结果：
茶叶中茶多酚的含量 =100**1*10002*957.1*m
V A =100*5*1150*10002*957.1*315.1%= 15.44% 实验总结：在这次的实验中感受到团队合作的重要性，因为我是 一个人做的，当有些东西不懂的时候也没有人可以 问，可以的话下次找个同学搭档，另外就是自己的动
手能力还有些不行，必须加强才行。
紫外分光光度法测定绿茶提取物中茶多酚含量的操作规程
绿茶提取物中茶多酚含量测定方法（UV）
一、仪器与试剂
仪器：移液管（1ml）；容量瓶（100、25ml）；分析天平（1/10000）；紫外分光光度计
试剂：超纯水；硫酸亚铁（AR）；酒石酸钾钠（AR）；磷酸氢二钠（AR）；磷酸二氢钾（AR）
二、试剂的配制
酒石酸亚铁溶液：称取1g（精确至0.0001g）硫酸亚铁和5g酒石酸
钾钠（精确至0.0001g）用水溶解并定容至
1000ml。
PH7.5磷酸盐缓冲液：称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解并定容至
1000ml；称取9.078g磷酸二氢钾（磷酸二氢
钾在110℃干燥2h）加水溶解柄定容至1000ml;
二溶液按85：15（V/V）混合均匀。
三、样品处理
称取本品40-45mg，置于50ml容量瓶中，加水，振摇使溶解，定容至刻度，摇匀，取5ml至25ml置容量瓶中，加水4ml，酒石酸铁溶液5ml，用PH7.5磷酸盐缓冲液定容至刻度，摇匀，即得。
四、紫外条件
检测波长：540nm
以试剂空白溶液对照
五、含量计算
茶多酚的含量按下式计算 X(%)=%1001000
50.0957.121⨯⨯⨯⨯⨯⨯M V V A A ：供试液吸光度；
1V ：供试品提取液；
2V ：测定时的取用量；
M ：供试品的称样量（g ）；
1.957:当吸光度等于0.50时，1ml 供试品溶液中含茶多酚相当于
1.957mg 。
多酚含量测定方法
多酚提取方法：多酚含量的提取按照Chiou等（2007）年的方法进行，取1g果肉，0-4℃冰浴研磨，加入10ml 75%甲醇，然后放入离心管中，超声波处理15min，然后摇床摇动12h，10, 500g离心10min，取上清液，然后残渣加入10ml 75%甲醇重复提取2次，合并上清液，用50ml蒸馏烧瓶30℃低压蒸馏2h，然后用蒸馏水溶解定溶到10ml，用于多酚含量的测定。
多酚检测方法：色谱条件：C18柱（(250×4.6 mm）；波长：280；流速：1 mL min-1流动相：A：乙酸/水(1:50, v:v)B：乙腈/甲醇(10:15, v:v)设置梯度洗脱：0 min：90% A and 10% B10 min：80% A and 20% B15 min：70% A and 30% B25 min：60% A and 40% B30 min：50% A and 50% B40 min：50% A and 50% B.标样图谱：（自己做的数据）标准样品重量g 定容体积ml 稀释倍数浓度g/ml ug/ml 出峰时间gallic acid 0.0061 25 100 0.00000244 2.44 4.914546 (+)catechin 0.0067 25 40 0.0000067 6.7 12.91146 ferulic acid 0.0059 25 40 0.0000059 5.9 21.38777 chlerogenic 0.0063 25 100 0.00000252 2.52 11.72349 caffeic acid 0.0097 25 100 0.00000388 3.88 15.92295 香豆酸0.0048 25 100 0.00000192 1.92 22.75522 phlorizin 0.005 25 100 0.000002 2 27.58096。
多酚提取步骤和含量计算
多酚类化合物介绍：多酚类化合物是指同一苯环上有若干个酚性羟基的一类化合物。
植物多酚具有抗菌、消炎、抗血栓、抗病毒、抗癌和扩张血管等生理作用。
一些多酚类化合物及其衍生物具有较好的清除自由基的作用，因此是一类良好的天然抗氧化剂。
自然界植物中发现的具有抗氧化性的酚酸化合物主要有原儿茶酸、沒食子酸(山茱萸)、3-羟基苯乙酸、如绿原酸(金银花)、阿魏酸(当归)、咖啡酸、迷迭香酸(紫苏)、介子酸(蜂胶)等。
绿茶中所含多酚类的儿茶酚具有抗氧化作用，其活性优于相同浓度的а-生育酚，是人工合成抗氧化剂BHT(二丁基羟基甲苯)、BHA(丁基羟基茴香醚)的4～6倍，若与维生素C和维生素E配合还具有增效作用。
白藜芦醇以及沒食子酸和从葡萄籽及松树皮提取物中发现的原花青素等多酚物质也被证实有很强的抗氧化性，且已被证实强于某些抗氧化维生素。
清热解毒类中草药中总多酚的测定——Folin-Ciocalteu比色法[1.1 实验材料栀子、龙胆草和板蓝根购于贵阳三桥药材批发市场；射干产自贵州施秉牛大场GAP药材基地；黄柏、头花蓼分别产自习水和雷山。
1.2 试剂亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，乙醇(均为分析纯)1.3仪器101-1A型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；A200S型电子天平（Made in Germany）；循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；KDM型控温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司)；UV2300分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；FZ102型微型植物粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。
1.4实验原理Folin-Ciocalteu比色法原理是基于Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化，自身被还原生成蓝色的化合物，颜色的深浅跟多酚的含量呈正相关。
2.分析步骤⑴多酚的提取购买药材，清洗后晾干，将其放入微型植物粉碎机中粉碎，即得到相应的中药材粉末。
精密称取粉碎均匀的试样2.5g于250ml圆底烧瓶中，加溶剂（95%乙醇/水）100ml加热回流1小时，抽滤，滤渣再加溶剂（95%乙醇/水）100ml 再回流1小时，抽滤。
测多酚实验报告
一、实验目的1. 学习和掌握多酚的提取和分离方法。
2. 掌握多酚含量的测定方法。
3. 了解多酚在食品、医药等领域的应用。
二、实验原理多酚是一类含有多个酚羟基的有机化合物，广泛存在于植物、茶叶、果实等天然产物中。
多酚具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，对人体健康具有重要意义。
本实验采用水提法提取多酚，采用福林-酚法测定多酚含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：茶叶、乙醇、氢氧化钠、硫酸铜、无水乙醇、碳酸钠、硫酸亚铁、福林-酚试剂等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温干燥箱、微波炉、分光光度计、移液器、容量瓶、烧杯、试管等。
四、实验步骤1. 茶叶提取（1）称取一定量的茶叶，加入适量的乙醇，置于微波炉中加热提取。
（2）提取结束后，将提取液过滤，得到多酚提取液。
2. 标准曲线绘制（1）准确移取一定量的福林-酚试剂，加入容量瓶中，用无水乙醇定容至100mL，得到福林-酚储备液。
（2）准确移取一定量的硫酸铜溶液，加入容量瓶中，用无水乙醇定容至100mL，得到硫酸铜溶液。
（3）准确移取一定量的碳酸钠溶液，加入容量瓶中，用无水乙醇定容至100mL，得到碳酸钠溶液。
（4）准确移取一定量的硫酸亚铁溶液，加入容量瓶中，用无水乙醇定容至100mL，得到硫酸亚铁溶液。
（5）取一系列的多酚标准溶液，分别加入适量的福林-酚储备液、硫酸铜溶液、碳酸钠溶液、硫酸亚铁溶液，混匀，静置5min。
（6）在510nm波长下，用分光光度计测定吸光度。
（7）以多酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 多酚含量测定（1）准确移取一定量的多酚提取液，加入适量的福林-酚储备液、硫酸铜溶液、碳酸钠溶液、硫酸亚铁溶液，混匀，静置5min。
（2）在510nm波长下，用分光光度计测定吸光度。
（3）根据标准曲线，计算多酚含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验结果，绘制标准曲线，线性方程为：y=0.0158x+0.0132，R²=0.9988。
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多酚类化合物介绍：
多酚类化合物是指同一苯环上有若干个酚性羟基的一类化合物。
植物多酚具有抗菌、消炎、抗血栓、抗病毒、抗癌和扩张血管等生理作用。
一些多酚类化合物及其衍生物具有较好的清除自由基的作用，因此是一类良好的天然抗氧化剂。
自然界植物中发现的具有抗氧化性的酚酸化合物主要有原儿茶酸、沒食子酸(山茱萸)、3-羟基苯乙酸、如绿原酸(金银花)、阿魏酸(当归)、咖啡酸、迷迭香酸(紫苏)、介子酸(蜂胶)等。
绿茶中所含多酚类的儿茶酚具有抗氧化作用，其活性优于相同浓度的а-生育酚，是人工合成抗氧化剂BHT(二丁基羟基甲苯)、BHA(丁基羟基茴香醚)的4～6倍，若与维生素C和维生素E配合还具有增效作用。
白藜芦醇以及沒食子酸和从葡萄籽及松树皮提取物中发现的原花青素等多酚物质也被证实有很强的抗氧化性，且已被证实强于某些抗氧化维生素。
清热解毒类中草药中总多酚的测定——Folin-Ciocalteu比色法[
1.1 实验材料
栀子、龙胆草和板蓝根购于贵阳三桥药材批发市场；射干产自贵州施秉牛大场GAP药材基地；黄柏、头花蓼分别产自习水和雷山。
1.2 试剂
亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，乙醇(均为分析纯)
1.3仪器
101-1A型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；A200S型电子天平
（Made in Germany）；循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；KDM型控温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司)；UV2300分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；FZ102型微型植物粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。
1.4实验原理
Folin-Ciocalteu比色法原理是基于Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化，自身被还原生成蓝色的化合物，颜色的深浅跟多酚的含量呈正相关。
2.分析步骤
⑴多酚的提取
购买药材，清洗后晾干，将其放入微型植物粉碎机中粉碎，即得到相应的中药材粉末。
精密称取粉碎均匀的试样2.5g于250ml圆底烧瓶中，加溶剂（95%乙醇/水）100ml加热回流1小时，抽滤，滤渣再加溶剂（95%乙醇/水）100ml 再回流1小时，抽滤。
将两次滤液合并之后定容至250ml即得待测试样。
⑵供试液的制备
取稀释液0.5mL至25mL棕色容量瓶中，加Folin-Ciocalteu试剂1.0ml；再加5%碳酸钠溶液15.0ml，摇匀，加水稀释至刻度，静置2h，在波长760nm处测定吸光度。
⑶标准曲线的绘制
配制没食子酸标准品0.05mg/ml，分别准确吸取没食子溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml置于一系列25ml棕色容量瓶中，加Folin-Ciocalteu试剂1.0ml；再加5%碳酸钠溶液15.0ml，摇匀，加水稀释至刻度，静置2h，在波长760nm处测定标准系列及试样的吸光度并绘制标准曲线，试样吸光度与标准曲线比较定量或代
入标准回归方程求出含量。
Fig2-3.Stangard cure of Gallic acid 12
3c v v x M v ⨯⨯=⨯
式中：
X ——样品中总多酚含量mg/g ；
C ——校准曲线总多酚的浓度mg/ml ； V 1——-稀释体积ml ；
V 2——样品溶液的体积ml ； V 3——取样体积ml ；
M ——样品质量g 。
计算结果保留三位有效数字。