聚维酮K25检测标准操作规程

一、目的：规范聚维酮K25检验操作，确保检品质量。

二、范围：聚维酮K25的全项检验。

三、责任者：质量检验员。

四、内容：
1. 性状
1.1 本品为白色或乳白色粉末或片状固体，有吸湿性。

1.2 本品在水，甲醇或乙醇中易溶，在丙酮中微溶。

2. 鉴别
2.1 取本品水溶液（1→50）2ml，加1mol/L盐酸溶液2ml与重铬酸钾试液数滴，即生成橙黄色沉淀。

2.2 取本品水溶液（1→50）3ml，加硝酸钴约15mg与硫氰酸铵约75mg，搅拌后，滴加稀盐酸使呈酸性，即生成浅蓝色沉淀。

2.3 取本品水溶液（1→50）3ml，加碘试液1-2滴，即生成棕红色沉淀，搅拌，溶解成棕红色溶液。

2.4 取本品取细粉适量，加已干燥处理过的光谱溴化钾适量，混匀，研磨，压片，照《红外光谱检测标准操作规程》检验，本品的红外光吸收图谱应与对照品图谱一致。

3. 检查
3.1 K值取本品1.00g（按无水物计算），精密称定，置100ml量瓶中，加水适量使溶解，在25℃±0.05℃恒温水浴中放置1小时后，加水稀释至刻度，照《黏度检测标准操作规程》第二法检测，测得相对黏度ηr，计算K值，应为22.5-26.7。

（W为供试品的重量(按无水物计算)，g）
3.2 pH值取本品1.0g，加水20ml溶解后，照《pH值检测标准操作规程》检查，pH值应为3.0-5.0。

3.3溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加新沸过的冷水溶解并稀释至20ml，溶液应澄清无色，如显色，与B6、BY6或R7号标准比色液比较，不得更深。

3.4醛取本品约200mg-500mg，精密称定，置10ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢
钾1.74g ，加水80ml 使溶解，用1mol/L 氢氧化钾溶液调节pH 至9.0，再加水稀释至100ml ，即得）溶解并稀释至刻度，摇匀，密塞，置60℃恒温水浴中保温60分钟，放冷，作为供试品溶液。

取供试品溶液3ml ，置1cm 比色池中，加β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸溶液（取β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸40mg ，加水10ml 使溶解，摇匀）0.2ml ，混匀，照《紫外分光光度法检测标准操作规程》检测，以水为空白，在340nm 的波长处测定吸收度（A 0S ），加7单位/ml 乙醛脱氢酶溶液0.05ml,混匀，放置5分钟，以水为空白，在340nm 的波长处测定吸收度（A 1S ）；另取磷酸盐缓冲液3ml ，同上操作，分别测定吸收度（A 0B 和A 1B ）,按下式计算。

（按无水物计算），每1g 含乙醛不得过500ug 。

式中 P 为每1g 聚维酮K25中含乙醛的两（ug)。

75750为转换常数。

W 为供试品的量（按无水物计）（mg ）。

3.5 N －乙烯基吡咯烷酮 照《高效液相色谱法检测标准操作规程》检测。

色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（10:90）为流动相；检测波长为235nm 。

N －乙烯基吡咯烷酮峰的保留时间约为10分钟，理论板数按N －乙烯基吡咯烷酮峰计算应不低于3000。

测定法 取本品约0.25g ，精密称定，置10ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取50ul 注入液相色谱仪，记录色谱图。

另精密量取N －乙烯基吡咯烷酮对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml 中约含2.5ug 的溶液，精密量取5ml ，置100ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算。

含N －乙烯基吡咯烷酮不得过0.001%。

（试验后，应采用强溶剂乙腈-水（1:1）充分冲洗色谱柱）
3.6 水分 取本品，照《水分测定检测标准操作规程》第一法测定，含水分不得过5.0％。

3.7 炽灼残渣 取本品1.0g ，照《炽灼残渣检测标准操作规程》检测，遗留残渣不得过0.1%。

3.8 重金属 取本品2.0g ，加氯化镁0.5g ，缓慢炽灼至完全灰化，在800℃炽灼1小时，放冷，自“加盐酸2ml ”起，照《重金属检测标准操作规程》第二法检测，含重金属不得过百万分之十。

3.9过氧化氢 取本品2.0g ，加水50ml 使溶解，溶液分成2份，每份25ml ，1份加三氯化钛-硫酸溶液（取三氯化钛，加10%盐酸溶液溶解制成每1ml 中含150mg 的溶液，取此溶液20ml ，加硫酸13ml ，加过氧化氢溶液至溶液变黄，加热至白烟逸出，冷却，加水适量，加热，重复加水、加热蒸发过程至溶液无色，用水稀释至100ml ，摇匀）2ml ，静置30分钟，另1份加13%硫酸溶液2ml ，混匀，作为空白溶液。

照《紫外分光光度法检测标准操作规程》检测，在405nm 波长处测定吸收度。

不得过0.35（0.04%以H 2O 2计）。

3.10肼 取本品2.5g ，加水25ml 使溶解，加5%水杨醛的甲醇溶液0.5ml ，混匀，60℃
()()[]B B S S A A A A W
P 010175750---⨯=
水溶液加热15分钟，放冷，加甲苯2ml ，振摇2分钟，离心，取上清液作为供试品溶液；另取水杨醛吖嗪对照品适量，加甲苯溶解并定量稀释制成每1ml 中约含9ug 的溶液，作为对照品溶液。

照《薄层色谱法检测标准操作规程》检测，吸取上述两种溶液各10ul ，分别点于同一硅胶H 薄层板上，加甲醇-水（2:1）为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯（365nm ）下检视。

供试品溶液如出现与对照品溶液相应的水杨醛吖嗪斑点，与对照品溶液的主斑点比较，不得更深（0.0001%）。

3.11甲酸 取本品0.75g 置25ml 量瓶中，加水20ml 去离子水溶解样品并稀释至刻度。

取该溶液0.1ml ，加入1.0ml 的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸溶液（取烟酰胺腺嘌呤二核苷酸420mg 溶于22ml 磷酸钾缓冲液中（pH7.5），搅拌使溶解，即得）和1.9ml 的去离子水，静置20分钟后，作为供试品溶液。

取1.0ml 的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸溶液和2.0ml 的去离子水混合均匀，静置20分钟后，作为空白对照品溶液。

取供试品溶液和空白对照品溶液，照《紫外分光光度法检测标准操作规程》检测，在340nm 波长处测定吸光度（A 0）。

再向该溶液中加入0.05ml 的甲酸脱氢酶溶液（取80各单位的甲酸脱氢酶溶于1.2ml 去离子水中，即得）充分混匀后静置5分钟，在340nm 波长处测定吸光度（A 1），按下式计算。

应不得过0.5%。

()()[]()W V V A A A A C ⨯⨯⨯⨯⨯=溶液样品空白样品3.6/05.303.46---0101
式中：C 为样品中甲酸浓度（mg/kg ），
V 样品：为样品溶液的总体及，此处为25ml ，
V 溶液：为用作含量分析的样品溶液的体积，此处为0.1ml ，
W ：为样品重量（g ）。

3.12 微生物限度：照《微生物限度检测标准操作规程》检查。

每1g 检出细菌数、霉菌及酵母菌总数被德国100个；每1g 检出检出大肠菌群数不得过10个；且不得检出大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。

3.13 含氮量：取本品0.1g ，精密称定，置凯氏定氮瓶中，依次加入硫酸钾10g 和硫酸铜0.5g ，沿瓶壁缓缓加硫酸20ml ，在凯氏定氮瓶口放一小漏斗，用直火缓缓加热，俟溶液成澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷。

转移置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

精密吸取10ml ，取2%硼酸溶液10ml ，置100ml 锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端插入液面下。

然后，将凯氏烧瓶中内容物经由漏斗转入蒸馏瓶中，用水少量淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10ml ，用少量水再洗漏斗数次，关橡皮管夹1，加热圆底烧瓶进行蒸气蒸馏，至硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸馏约10分钟后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。

馏出液用硫酸滴定液（0.05mol/L ）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白试验（空白和供试品所得馏出液的容积应基本相同，约70～75ml ）校正。

每1ml 硫酸滴定液（0.05mol/L ）相当于0.1401mg 的N 。

按无水物计算，含氮量应为12.0%～12.8%。

3.14、关联记录：
《聚维酮K25检验记录》QC-SOR- 000
《微生物限度检验记录》QC-SOR-000 五、变更历史：。