检验项目标准操作规程-HCV Ab

检验项目标准操作规程LIAISON 丙型肝炎病毒抗体

（HCV Ab）

(化学发光法，CLIA)

类别信息

用途LIAISON® XL murex丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（化学发光法）采用化学发光免疫检测（CLIA）技术，定性检测人血清或血浆样本中的丙型肝炎病毒特异性抗体

（anti-HCV）。

临床意义丙型肝炎病毒（HCV）于1988年被发现，是非甲非乙（NANB）肝炎的主要病因，占输血后肝炎的80-90%。HCV是一种单股正链RNA病毒，分布于全球。

感染HCV的患者可能最初会经历轻微症状或无症状的急性期，但是，超过80%的感

染者都会发展成慢性肝炎，长期会发展成肝硬化并增加肝细胞癌的患病风险。

HCV主要通过非肠道传播，比如输血、血液透析和静脉注射毒品。HCV抗体不仅存

在于急性或慢性丙型肝炎患者体内，许多无症状的献血者中血清转换后也存在。

HCV抗体筛查可以防止丙型肝炎感染的传播，虽然存在HCV抗体并不能诊断丙型肝

炎。

此免疫试剂盒使用HCV多肽，可以识别HCV抗体。多肽含HCV结构区和非结构区的

抗原决定簇。

样本信息样本类型样本管/抗凝剂最小样本量

血清25 µL 标本+ 150 µL 死体积

血浆∙柠檬酸盐

∙EDTA

∙肝素

∙草酸钾

∙ACD

∙CPDA

标本保存样本在收集后7天内检测，可保存在2-8°C 条件下; 否则，标本需要分包装冷冻保存(–20°C 或更低)。如果标本冷冻保存，使用前需要解冻并混匀。

标本的特定要求∙含有颗粒物质、浑浊、脂血或红细胞残片的样本使用前需要过滤或离心。

∙严重溶血或脂血样本以及含有。颗粒物质或明显微生物污染的样本不能用于检

测。

∙检测前检查并去除泡沫。

方法学丙型肝炎病毒（HCV）IgG抗体定性检测试剂盒采用间接化学发光免疫分析法（CLIA）。

试剂 1. LIAISON® 丙型肝炎病毒抗体测定试剂盒

2. 1.1 磁微粒：(2.5mL) 包被有HCV核心和NS4重组抗原（分别来源于杆状病毒

和大肠杆菌），链霉亲和素包被的磁微粒，BSA，PBS缓冲液，EDTA，防腐剂。

3. 1.2 校准品：(3.9 mL ) 含有低水平抗HCV抗体的稀释的抗血清，BSA，PBS缓

冲液，EDTA，0.2%ProClin®300，一种黄色惰性染料。校准品的浓度溯源至一内部

参考品。

4. 1.3 样本稀释液：(18.5 mL ) BSA，酪蛋白，非特异性重组蛋白（来源于大肠杆

菌），磷酸盐缓冲液，EDTA，防腐剂，一种蓝色惰性染料。

5. 1.4 结合物:(13 mL ) 抗人IgG小鼠单克隆抗体与异鲁米诺衍生物的结合物，胎

小牛血清，磷酸盐缓冲液，0.2%ProClin® 300，防腐剂，一种红色惰性染料。

6. 试剂盒储存条件

2.1试剂盒必须竖直放置以利于磁微粒的重新悬浮。不能冷冻保存。过效期的试剂盒

不能再使用。

2.2 当试剂盒处于密封和竖直放置的储藏条件下，能够在2-8°C 条件下稳定至效期。

2.3 打开密封膜后，试剂盒可在2-8°C 条件下或仪器试剂区中稳定储藏4周。

2.4 使用与LIAISON® XL分析仪同时提供的储存架来储存试剂盒，使其竖直向上放

置。

7. 试剂有效期

试剂盒的有效期为15 个月。

定标 1. 试剂盒中校准品可使分析仪设定本项目的阈值。

2. 如果出现以下的情况需要重新定标，每次定标需要做3份重复测试:

∙使用新批号的试剂盒或启动试剂。

∙分析仪经过维护。

∙每次使用新的试剂盒。

∙质控结果超出期望范围值。

质量控制监测试剂性能时，应对LIAISON® XL质控品各检测一次。必须通过检测LIAISON® XL murex丙型肝炎病毒抗体质控品来进行质量控制。

（a）使用当天在检测前至少运行一次，

（b）使用新的试剂盒时，

（c）对试剂盒进行校准后，

（d）使用新批号的启动试剂时，

（e）使用新的NS3试剂时，或根据当地法规或公认组织的指导或要求进行时。

质控值必须在预期范围内：当一个质控品或两个质控品检测值都超出预期范围时，

需要重新进行校准并对质控品重新进行检测。如果校准成功后，质控值仍然超出规

定范围，则应使用未开封的质控品重新检测。如果质控值超出规定范围，则不能报

告患者结果。

使用其他质控品前，应先评估质控品与本试剂盒的兼容性。然后建立合适的质控范

围。

检测程序 1. 试剂盒的准备

1.1 装载试剂盒至试剂区:在打开试剂盒中各组分的封口膜前，水平轻摇试剂

盒，避免产生泡沫。打开各组分的封口膜并转动磁微粒组分底部的齿轮直到悬浮液变

为褐色。该步骤可使磁微粒重新悬浮。然后，使试剂盒上的条形码面向左侧将试剂盒

滑入分析仪中的试剂区，使用前需在分析仪中放置30分钟。分析仪可自动搅动使磁

微粒充分悬浮。根据分析仪操作手册的规定装载标本并开始检测。

1.2 HCV NS3 抗原:丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（化学发光法）提供的NS3 抗

原为冻干粉。此试剂具有批特异性，必须与批号相匹配的试剂盒一起使用。

LIAISON® XL 分析仪会自动检查试剂盒与NS3 之间批号的匹配性。此试剂可以进行

100 次检测。即使属于相同批号，不能混合不同试剂瓶中的NS3 抗原。

–用3.5 mL 缓冲液K 复溶。

–盖上瓶盖，轻轻混匀。避免产生泡沫。

–将试剂瓶在18-25°C 静置10-15 分钟，使其完全溶解。

–使用前，将复溶后的抗原溶液装载到仪器的辅助试剂区域。使用后，盖上瓶盖并

于2-8°C 储存。

–开瓶并复溶后，储存于2-8°C 试剂可在4 周内保持稳定。

2. 必要时申请定标

3. 加载样本

4. 申请检测

5. 按下START检测