牛奶中抗生素残留的危害及对策
牛奶中抗生素残留及其三种检测方法的比较分析研究
般 认 为 ，对 奶 牛用 药不 当或 不注 意 安全 时 间是 牛奶 中抗 生素 残 留 的重要 因素 ，奶 牛饲 养环
一
最全 面 、 消化 率 最 高 的有 机 食 品之 一 ，其质 量 及
其 安全 性 倍受 关注 。自 １４ ９ ９年美 国首次 发现 抗 生 素对 畜 禽 有促 生 长 作用 ，此 后 ，许 多 国家将 抗 生 素广泛 应 用于 畜牧 业 ，我 国在 ２ ０世 纪 ５ ０年 代 开 始将 抗 生 素作 为 饲料 添 加 剂 ，其 在 防治 动物 疾 病
Ｔｈｒ ｅ ｋ ｎ ｆＤ ｅ ｅ ｔｏ ｅ ｈｏ ｅ ｉ ｄｓｏ ｔ ｃ ｉ ｎ Ｍ ｔ ｄｓ
Ｃｈ ｑ ｕ Ｌｉｕｎ
Ｓｈａ ｈａ ｉ ｈｔ ｉｙ Ｈ ｏ ｓａ ｎｇ ｉＢｒｇ ｄａｒ ｌｔ ｎ Ｃｏ．Ｌｔ ，Ｓｈ ｎｇ ａ ００ ３， ， ｄ． ａ Ｈ ｉ２ ４４ Ｃｈｉ ｎａ
ｗａ ｙ．
Ｋｅ ｒ ｓ ｍｉ ， ｎ ｉ ｉ ｔ ｅ ｉ ｕ ｓ Ｔ ｙ ｗｏ ｄ ： ｌ ａ ｔ ｏ ｉ ｒ ｓｄ ｅ ， ＴＣ， ＮＡＰ ＥＣＬＩ Ｓ ５ ｋ ｂ ｃ Ｓ ， Ｐ Ｅ ０
近 年来 畜 牧业 在迅 速 发展 ， “ 绿色 ” “ 保 ” 环 “ 机 ”食 品倍 受老 百姓 的欢迎 。牛 奶 作 为营 养 有
乳 业 学与 技术
２１ ０ ０年第 ４期
（ 第 １３ ） 总 ４期
１３ ９
牛奶 中抗生素残 留及其三种检测方 法 的 比较分析研 究
褚 立 群
光 明荷斯 坦牧 业有 限公 司，上 海 ２ ０４ ０４ ３ 摘 要 ：抗 生素 残 留不仅 危 害人 类健 康 ，同时也 影 响牛奶 的品质 ，造 成经 济损 失 。本文讨 论 了牛奶 中抗
液相液质联用让β-内酰胺酶抑制剂无处逃
液相液质联用让β-内酰胺酶抑制剂无处逃牛奶中抗生素的残留是涉及人类健康的公共卫生问题，也是全世界奶牛业普遍存在的问题。
抗生素会产生一定的毒素，部分人会出现过敏反应，提高病原菌的抗药性，破坏人体肠胃，威胁人的健康。
它还能严重干扰发酵乳制品的生产，影响生产效果，长期服用含低剂量抗生素残留的乳制品，日积月累会危害人体健康。
一些不法分子为逃避相关部门监管，在含有抗生素的牛奶中加入β-内酰胺酶来分解抗生素，用β-内酰胺酶的抑制剂来掩盖β-内酰胺酶的存在。
针对这种问题，根据乳品中多种抗生素残留的检测新方法，高效液相色谱和液质联用的检测方法测定乳品中氯霉素类、四环素类、β-内酰胺类、磺胺类抗生素残留。
这种检测方法能同时检测乳制品中β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦、他唑巴坦和克拉维酸钾残留量。
具有创新性的方法可进行定性定量检测，且前处理操作简单，净化效果好。
国外对乳制品中抗生素残留检测方法也由各种分析技术联用代替单一的色谱技术。
该检测方法准确、快速，误差小，能有效打击乳制品的违法添加行为，从而保障消费者的合法权益。
北京清析技术研究院在华北、华南、华中、华东、西北等地区，建立12大分院及配套实验室，秉承母校校训，以严谨、求实的工作态度，为数千家企业客户提供产品研发、成分分析、材料检测、工业诊断、模拟测试、大型仪器测试、可靠性验证等专业技术服务，还为全国范围内的公安局、法院、检察院、律师事务所、司法鉴定中心、医院、高等院校、中国科学院提供专业技术服务。
经过几十年的团队技术积累，北京清析技术研究院下设环境检测事业部、食品保健品检测事业部、药品化妆品检测事业部、失效分析事业部、公检法服务事业部、高校科研服务事业部、成分分析/配方分析事业部、生物医药事业部等10大部门。
生鲜牛乳中违禁添加物和抗生素残留及其检测方法论述
青海 畜牧 兽 医杂志
４ ０卷 ６期
Ｖｏ ． ０， ． １４ Ｎｏ ６
ｌ ／ ０１ ２２ ０
Ｃ ｉｅｅＱ ｎｈ ｉ ｏ ｒａ ｏ ｎｍ ｌ ｎ ｅｅｉ ｒ ｃ ｎｅ ｈｎ ｓ ｉｇ ａ Ｊｕｎ ｌ ｆ ｉ ａ ａ ｄＶ ｔ ｎ ｙＳｉ ｃｓ Ａ ｒａ ｅ
专
论 与
高 的检 测 方 法 以满 足 日趋 严 格 的 残 留 限 量 要 求 ， 障人 们 饮 用 保 生 鲜牛 乳 的卫 生 和 安 全 十 分 必 要 。 １ 生 鲜 牛 乳 中 抗 生 紊 残 留及 违 禁 添 加 物 的 来 源 般 认 为 ， 泌 乳 牛 用 药 不 当或 不 注 意 安 全 时 间 是 牛 乳 中 对
细菌 的发 酵 ， 产 量 和 质 量 降 低 ， 时 也 造 成 生 鲜 牛 乳 生 产 者 使 同 的经 济 损 失 。
２ ２ 生 鲜 牛 乳 中违 禁 添 加 物 的 危 害 “ 白精 ” 产 品就 是 以 ． 蛋 类 三 聚氰 胺 为 主 要 成 分 的 一 种 添 加 剂 ， 三 聚 氰 胺 是 一 种 以尿 素 而
一
性 致病 菌 易 产生 耐 药性 ， 一旦 患 病 再 用 同 种抗 生 素 治 疗 很 难 奏 效。抗 生素是奶 牛场治疗乳房炎 的常规药物 ， 由于长期 大量使
用， 使耐药菌株增加 ， 一些乳 房炎 病例变 得难 以用 常规方 法治 愈。这 种情况又 促使临诊兽 医在 治疗过 程 中加 大抗 生 素的用 量。此外 ， 生鲜牛乳 中抗 生素残 留会影 响奶 制 品品质 ， 如果 用 含抗生 素的奶做酸奶或乳酪等 ， 则残 留在其 中的抗 生素会抑 制
抗生素残 留的重 要 因素 ， 尤其 是使 用乳 房灌 注 法治 疗 乳腺 炎 时 ， 造成 牛乳 中抗 生 素残 留 ； 牛 饲 料 中 添 加 饲 料 添 加 剂 己 易 在 十分普遍 ， 中含有 一定 比例 的抗 生素 ， 其 主要 作用 是预防疾病 ， 这是生鲜牛乳抗生素残留的另外一个重要 原因 ； 生索残 留 的 抗 其他来源还有 ： 一些 交 奶 户 在 高 温 季 节 为 防 止 乳 的 酸 败 ， 往 往 向牛乳 中掺杂各种抗生素； 用经抗生素 治疗 的乳牛 用过 的挤 乳 器 给 正 常 乳 牛挤 乳 ， 使 正 常 牛 的 乳 中 残 留抗 生 素 ， 等 等 ， 可 … 所 以牛 乳 中抗 生 素 残 留 的来 源 较 多 、 径 复 杂 。 针 对 违 禁 添 加 物 途 来说 ， 农户为 了提高蛋 白质的表现含 量， 将三 聚氰胺掺 入饲料 、 牛 奶 或 奶 制 品 中 。前 几 年 在 我 国 ， 聚 氰 胺 没 有 进 入 饲 料 添 加 三 剂 名 录 ， 也 没 有 法 律 法 规 明 令 禁 止 。在 美 国 ， Ｄ 此 前 也 未 但 ＦＡ 对该物质有特别的规定 。由于人们经 常以“ 氮含 量来推测蛋 白 质 含量 ” 在 动 物 饲 料 中 添 加 三 聚 氰 胺 ， 提 高 饲 料 的 氮 含 量 ， ， 可 让 人们 误 以为 该 饲 料 的蛋 白质 含 量 丰 富 ． 此 来 提 高 产 品 的 竞 籍 争 力 ， 以用 三 聚 氰 胺 来 冒 充 蛋 白 质 ； 革 水 解 物 （ ： 革 水 所 皮 如 皮 解 蛋 白 ） 皮革 “ 革 ” 艺 中产 生 的 下 脚 料 ， 是 鞣 工 ： 种 廉 价 的 工 是一 业 原料 ， 最常见的皮革 水解物是 皮革 粉 ， 其掺 人牛 奶或 奶粉 将 中 可提 高 蛋 白质 的 含 量 ， 加 到 牛 奶 里 可 以 增 加 蛋 白 质 含 量 ； 添 奶牛在治疗 中常用的抗 生素有 ￥ 内酰胺类 、 一 氯霉 素类 、 四环素 类、 氨基 糖 甙 类 以 及 大 环 内 酯 类 。 Ｂ 内 酰 胺 酶 是 一 种 黄 色 液 ． 体 ， 主要成分 是青霉 素酶 ， 法分 子添加 该类 物质 是 为了用 其 不 些生物制剂去降解牛乳中残 留的抗 生索。其解抗 的原理 是 ： 对 ｐ内酰胺 类抗 生素 耐药 的细菌分泌的一种胞外 酶 ， 酶可特 － 该 异 性 分 解 和 掩 蔽 牛 奶 中 残 留 的 Ｂ内 酰 胺 类 抗 生 素 ， 了 冒 充 一 为 “ 抗 奶 ” 添 加 解 抗 剂 ， 来 掩 蔽 抗 生 素 ； 氰 酸 钠 则 用 于 保 无 ， 用 硫 鲜 ， 延 长 牛 奶 保 质 期 ， 硫 氰 酸 钠 （ ａＣ 是 白 色 斜 方 晶 或 可 但 Ｎ Ｓ Ｎ） 白色 粉 末 ， 害 品 。 实 际 工 作 中 ． 发 现 有 一 些 不 法 分 子 在 牛 毒 还 奶 中 加 入 碱 或 碱类 物质 （ 见 的 碱 性 物 质 有 苏 打 、 苏 打 、 业 常 小 工 火碱等） 来掩盖牛奶 的酸 败现象 ｕ ， ， 降低 牛奶酸 度 ， 碱类物 质 也是国家明令 禁止 的一 种添加物 。 ２ 生 鲜 牛 乳 中 抗 生 素 残 留 及违 禁 添 加 物 的 危 害 ２ １ 生鲜牛乳 中抗生素残 留的危 害 牛奶 是老少 皆宜的营养 ． 品 ， 中若 含 有 抗 生 素 ， 长 期 饮 用 者 来 说 无 疑 是 等 于 长 期 服 其 对 用小剂量 的抗生素 ， 对抗生素有过 敏体质 的人 服用残 留抗生 素 的 乳 后会 发生 过 敏 反 应 ， 使 是 正 常 饮 用 者 ， 内 的 某 些 条 件 即 体
鲜牛奶中抗生素残留的原因及常用检测方法
鲜牛奶中抗生素残留的原因及常用检测方法作者：张丽茹，黄新红，张东丽，李治玲，谢春胜来源：《现代畜牧科技》 2018年第1期摘要：抗生素是一种高效的兽药，在奶牛养殖业中经常用于治疗乳房炎等疾病，但如果使用不当就会导致牛奶中残留过多。
鲜牛奶中残留抗生素可能会引起多种不良反应，其会造成对抗生素类药物的敏感性降低，提高病原菌的耐药性。
现主要概述鲜牛奶中抗生素残留的原因以及常用检测方法，给大家提供一定参考。
关键词：鲜牛奶；抗生素残留；原因分析；氯化三苯基四氮唑法；免疫受体试验方法中图分类号：S858文献标识码：B文章编号：2095-9737(2018)01-0109-011 原因分析新陈代谢和药物代谢动力学。
药物能够经由不同的被动或者主动的化学过程而转运到动物体内，在机体新陈代谢过程中，部分药物能够表现出治疗学或者产生毒性影响，但其他的却没有。
只要开始药物治疗，在其通过不同途径代谢结束前，会持续向组织间隔扩散。
因此抗生素采取一般给药途径都会经由不同途径在一定程度上被消除，如奶液、粪便、尿液以及唾液（反刍动物中多次被利用的胃液）。
另外，药物的制剂形式在很大程度上影响奶牛体内分子的排出，如某些“长期效应”药物能够在很长一段时间保留在注射部位和器官处，同时也会长时间对微生物有效。
哺乳期乳房处理及残留物的持续。
奶牛哺乳期发生乳房炎后主要通过两种不同的处理机制进行治疗，即物理机制，是指每次挤奶中机械的排除；生物机制，即经由空隙进入血液中。
少数抗生素本身就具有非常高的扩散性，能够快速越过如细胞壁、血管壁等不同的物理障碍，从而进入血液循环，再通过新陈代谢以不同的渠道消除掉，但其还能够在乳腺组织中积聚，并在葡萄腺、乳房池以及乳头内存留，就会在挤奶时经由奶液排到体外。
通常情况下，牛奶中残留的抗生素浓度需要2-5天才会降低到MRL水平。
干乳期乳房处理。
奶牛干乳期需要采取非常特殊的处理方式，这是由于该阶段机体停止产奶，而在最初哺乳期的生理恢复过程中，药物制剂的形式以及自身特性都会明显影响干乳期处理。
嗜热脂肪芽孢杆菌检测牛乳中抗生素残留_廖玲
重干扰发酵乳制品的生产， 造成很多原料奶的浪费，
［ J&/ ］ 致使企业经 济 受 到 很 大 损 失 。微 生 物 法 检 测 是
目前抗生素检测最常用的方法， 主要有氯化三苯基 四氮唑 法 （ ::* 法） 、 牛 乳 发 酵 活 性 实 验 法、 纸片法 （ -M） 、 管碟法、 试剂盒检测法等， 不同微生物检测法 所用的微生物种类不同， 反应的灵敏度、 特异性、 检
雀石绿染液、 番红染液 % 北京陆桥技术有限责任公 司； 青霉素 P、 头孢噻呋、 阿西莫林、 卡那霉素 % 瑞士 Q=HR6 公司； 土霉素、 四 环 素、 磺 胺、 磺胺嘧啶% 德国
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!"# $%"&’()*"+&" 公 司；牛 奶 抗 生 素 检 测 试 剂 盒 （ $,-./0$12 ） 3 西 班 牙 4$5 6 .78579:$, 公 司； ;< 孔微孔板 （ 可分拆） 3 加拿大 =$: >.9?.- 公司。 086@A 高压蒸汽灭菌锅、 .0<22 恒温培养箱 3 日 @DE1 高 速 低 温 离 心 机 3 本 BC89:9 公 司； 德国 0.F8C 公司； >G6A 生物显微镜 3 日本 9-B8/50 公 司； 80E 涡旋震荡器 3 德国 .HC 公司； G=6 @ 恒温磁 力搅拌器3 金坛市科兴仪器厂。
蒸馏水配制成 E22LU Q DU 的标准 储 备 液， JI 贮 存 备 用。无抗牛 奶， 用 无 抗 全 脂 乳 粉 复 原 而 成， 浓度为 EAV 。使 用 时， 将各抗生素储备液与无抗牛奶 E22L- 混合， 以欧盟制定的牛奶中 抗 生 素 最 大 残 留 量 （ 8W-） 为中间值， 上下各浮动一定范围值， 配制成 表 E 中的各种浓度。文中涉及到的各抗生素的 8W是： 青霉素 F、 阿 莫 西 林 均 为 J !U Q DU ， 头 孢 噻 呋、 磺 胺、 磺 胺 嘧 啶、 土 霉 素、 四环素和庆大霉素均为 E22 !U Q DU ， 链霉素、 卡那霉素均为 A22 !U Q DU 。
牛奶中兽药残留的原因分析及控制措施
疾病防治1牛奶中兽药残留和残留超标的原因1.1防治奶牛疾病过程中使用兽药控制病情牛奶中的兽药残留主要来自于奶牛疾病预防和治疗过程中所使用的药物。
特别是泌乳期的奶牛患有乳房炎、子宫内膜炎等疾病，抗生素和化学药物使用频繁，常以一种或两、三种联合的形式给药。
药物进入血液后，会经血液分布到乳腺组织，并随乳腺的分泌进入乳汁中，造成乳汁中药物的残留。
1.2药物的滥用乳房炎是奶牛的常见病，在我国治疗此病的常规方法是采用抗生素直接注入患牛乳房，从而造成抗生素在牛奶中残留。
反复使用抗生素，会使耐药菌株增加，这又促使临床兽医在治疗过程中加大抗生素的用量，使用剂量较10年前增加了1倍，从而造成牛奶中抗生素严重超标。
1.3不按规定执行兽药规定的休药期兽医临床使用的药物一般都有休药期，奶牛泌乳期允许使用的药物也都有相应的弃奶期（各种药物的弃奶期见《中华人民共和国农业部公告278号》）。
一些养殖户在使用兽药治疗奶牛疾病时不执行药物的休药期，往往导致牛奶中兽药残留超标。
例如：恩诺沙星注射液的休药期为14天，即奶牛在应用恩诺沙星注射液以后14天内的牛奶是不能销售的，需要进行无害化处理。
1.4不规范使用抗菌药物引起的残留抗菌药物只能用于动物疾病的治疗和预防，但是，有一些不法的奶牛养殖户为了保证原奶的质量或者满足原奶收购中的某些指标（如细菌总数），非法在原奶中添加抗生素，例如在牛奶中非法添加青霉素和链霉素来抑制牛奶的酸败和细菌的大量繁殖，从而导致牛奶中抗菌药物残留超标。
1.5使用违禁或淘汰药物造成残留超标违禁药物在兽医临床上是禁止使用的，人用药也禁止在兽医临床上使用。
一些养殖户在治疗动物疾病时，另辟蹊径，使用违禁药物（金刚烷胺）、人用药（青霉素）和淘汰药物（氯霉素）来治疗动物疾病，由于这些药物国家未做相应的休药期规定，在常规药物品种残留检测时又不易检出，很容易造成药物残留。
2控制牛奶中药物残留的对策牛奶中药物残留的有效控制是关系到人们身体健康的大事，是一项系统工程，需要从政策法规的执行、饲养管理水平的提高、技术监测体系建设与完善等多层次、多环节入手，严格把关，才能收到良好的成效。
抗生素残留的危害和防范措施
９ ％都 主要 是 为 了提 高转 化 率 而用 的 。 ０ 对抗 生 素 的 使用 ， 国家 虽 颁 布 了 一 系 列 的 法 规 ， 实 际 生 产 中 但
非 法 和滥 用抗 生 素 的 问题仍 很 严 重 。 要 表现 在 以 主
全性 问题 。 强 政府 的 引 导 和监 管力 度 ， 进 我 国 加 促
用 的抗 生 素 。 在使 用 后 必须 要 严 格遵 守 休 药期 。抗
生 素类 药 物 在 停 止 用 药 后 一 段 时 间 可 以 在体 内 降
解 ， 般 而言 ， 一 多数 抗生 素 的 降解 时 间为 ３ ６ ， ～ ｄ 因此 在使 用 含 抗 生 素 的饲 料 和 药 物 后 必 须 严 格 执 行 休
我 国是 畜禽 产 品生产 大 国 。加 入 ＷＴ Ｏ使 我 国
的畜禽 产 品在 国际 贸易 中面 临更 加激 烈 的竞争 ， 而
动 物 源性 食 品 中药 物 残 留特 别 是 抗 生 素 残 留 问题 已成 为我 国 畜禽 产 品 出 口面 临 的 主要 贸 易 技 术 壁 垒 之一 。畜禽 产 品 中抗 生 素残 留超标 问题 ， 仅 给 不 我 国造 成 了 巨大 的 经济 损失 。 响 了人 民 的身 体 健 影 康， 而且 降低 了消费 者对 国产 畜禽 产 品的 消费 信 誉 度 。 因此 ， 必须 坚 持 和强 调 抗 生素 的正确 使 用 和安
超 标可 引 起 致命 的“ 婴 综合 症 ” 应 。 重 时 还会 灰 反 严
国每 年 的抗 生 素 生 产 量 约 为 ２ ｌ万 ｔ 。其 中约 占年
总 产 量 的 ４ ．％被 用 于 畜 牧 业 （ ９７万 ｔ ； 家 ６１ 约 ． ）国
造 成人 的再 生 障碍 性 贫血 ； 庆大 霉 素 长期 使 用会 造
实训指导材料-牛乳中抗生素的检测
冷却至37℃以下
加菌液，36±1℃水浴2h
加TTC指示剂，36±1℃水浴30min
不显色
红色
显色者 抗生素阴性
36±1℃水浴30min
不显色者 抗生素阳性
抗生素阴性
报告
报告
（四）操作步骤
1.菌液制备
将菌种移种脱脂乳，经(36±1)℃培养15h后，
以灭菌脱脂乳1：1稀释待用。
2.加检样 取检样9mL，置15×150mm试管内，80℃水 浴加热5min冷却37℃以下，加菌液lmL。 (36±1)℃水浴中培养2h，加TTC 0.3mL，
乳中有抗生素存在，则检样中虽加入菌
液培养物，但因细菌的繁殖受到抑制，因此指示剂
TTC不还原，不显色。
与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即
行增殖，TTC被还原而显红色。也就是说检样呈乳的
原色时为阳性，呈红色为阴性。
表12-1显色状态判断标准
显色状态 未显色者 微红色者 桃红色 红色
判断 阳性 可疑 阴性
（二）菌种、培养基和试剂
1. 菌种：嗜热乳酸链球菌。
2. 脱脂乳：经113℃灭菌20min。
3.4％2，3，5—氯化三苯四氮唑水溶液：称取1gTTC，溶 于5mL灭菌蒸馏水中，装褐色瓶内于7℃冰箱保存，临 用时用灭菌蒸馏水稀释至5倍。如遇溶液变为玉色或淡
褐色，则不能再用。
（三）检验程序
检样
80℃，加热5min
氢可以和加在乳中的氧化型TTC结合而成为还原型TTC，
氧化型TTC是无色，还原型TTC是红色，所以可使乳变红色。 相反，如乳中存在抗生素，嗜热链球菌就不能生长繁殖， 没有氢释放，TTC也不被还原，仍为无色，乳汁也无色。
（一）设备和材料