布氏杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查
布氏杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查
杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查
布氏杆菌病对人体的健康损害是特别大的，因此我们在出现布氏杆菌病的症状后一定要及时就医检查，切莫道听途说的乱用治疗药物，而因此耽误治疗让身体健康遭受更严重的伤害。那么布氏杆菌病的确诊需要做怎样的检查呢？其实只需要做血象检查、细菌学检查、免疫学检查这三种检查就可以了。
一般布氏杆菌病在通过血象、细菌学检查以及免疫学检查之后就可以对此病进行准确的确诊了，而具体检查方法介绍如下：
★1、血象检查，有百分之六十患有布氏杆菌患者在进行这
项检查之后就可以发现白细胞有轻度减少的现象，而淋巴细胞却有相对增多的现象发生，并且在这种现象发生的同时大多数的患者血沉还会有增速的现象，而病程比较久的患者还会有轻度和重度贫血的症状发生。
★2、细菌学检查，一般采用血液、鬼祟。乳汁以及子宫分
泌物都可以进行细菌培养，但由于要求严格的环境，因此在采集标本的时候最好是采用两份，一份用于含肝浸液的肉汤做培基之后在CO2孵箱中培养;而另外一份则放在一般的环境中进行孵育，一般培养的时间要超过两周才可以有比较准确的结果出现。
★3、免疫学检查，这项检查主要包括的有血清凝集试验、
补体结合试验、抗人球蛋白试验、酶联免疫吸附试验和皮肤试验等，一般在通过这几项检查所得出的具体表现，就可以基本对此病进行确诊了。
上述就是针对确诊布氏杆菌病检查方法所作的介绍，上述内容可以供给大家参考，如果有人怀疑自己感染了布氏杆菌，就该及时的去正规的医院进行诊断，这样在确诊了疾病之后才可以作
出针对性的治疗，从而给才可以避免疾病加重之后会有危及生命的危害发生。
布病诊断标准
布鲁氏菌病诊断标准及处理原则 1 主题内容与适用范围 本标准规定了人群布鲁氏菌病(简称布病)的诊断和疫区处理原则。 本标准适用于各类医疗、卫生防疫机构。 2 术语 皮肤过敏试验： 受布氏菌感染后，再受到布氏菌过敏原刺激，皮肤出现的迟发型过敏反应。 布病疫区： 4 确诊病例：疑似病例加3.4或3.5中任何一种方法阳性者。 4 疫区处理原则 4.1 核实诊断：对确诊的病人应依据流行病学资料，临床表现和实验室检查结果进行核实诊断。 4.2 检疫和淘汰处理疫畜：对疫区内全部羊，牛和猪用血清学方法进行检疫，检疫后1个月再检一次。凡检出的阳性家畜均应立即屠宰(或隔离饲养)。至少在一年内停止向外调运牛、羊、猪。畜产品均应在原地存放和消毒，暂不外运。 4.3 消毒：被病畜的流产物污染的场地、用具、圈舍及尚未食用的奶制品均应进行消毒处理。
4.4 免疫：经两次检疫呈阴性反应的家畜，以及疫区周围村受威害的畜群，应连续3年以畜用菌苗进行免疫，每年免疫覆盖率不应低于90％。 4.5 临床监测及治疗：对疫区内接触家畜及畜产品的人员进行血清学及皮肤过敏试验，查明人群感染情况，凡确诊的病人均应进行系统治疗。 4.6 宣传教育：对疫区的居民及职业人群进行布病的危害、临床表现及防治知识的宣传教育。 4.7 疫区处理效果验证：在疫区处理后的第二年始，连续三年对疫区及疫区周围地区进行验证，验证方法按照农业部和卫生部共同制定的《布病疫区控制考核标准》的要求进行。 3 液中加入1％～3％的高价布鲁氏菌免疫血清，混合后，置37℃温箱2h，高速离心沉淀，取沉淀物0.5mL接种在选择性培基上培养，或注射豚鼠，用生物学法分离布鲁氏菌。 A1.3 其他病原材料培养 由乳，脑脊液，关节液和滑囊液分离布鲁氏菌，将液体标本无菌地接种到琼脂斜面上，或培养平板上，涂布于培基表面，参照血培养法观察结果，15天仍无可疑菌生长，定为阴性。 A1.4 生物学分离布鲁氏菌法
牛羊布氏杆菌病的防治
牛羊布氏杆菌病的防治 布氏杆菌病简称布病，是由布鲁氏菌属细菌引起的急性或慢性的人兽共患传染病。动物发病的特征是流产，不育，睾丸炎及各种组织的局部病灶。 [病因病机] 由于易感牛、羊直接或间接接触本病疫邪，病从口人或通过皮肤、粘膜和交配进入体内潜伏，当机体遇到不良刺激而正气虚弱时，疫邪乘虚大量繁殖进入易感脏器引起发病。本病主要侵害生殖系统故见妊娠母畜流产和公畜睾丸发炎。 [主证] 1、牛：潜状期2周至6个月。缺乏明显的全身症状，母牛最明显的症状是流产，通常发生于妊娠后的5～7个月。流产前阴道粘膜潮红肿胀，有粟粒大红色的结节，阴唇及乳房肿胀，不久即发生流产。流产胎儿多为死胎，有时产下弱犊，往往存活不久。大多数母牛流产后伴发胎衣停滞和子宫内膜炎，从阴道内流出污秽不洁的红褐色恶臭的分泌物，可持续2～3周，有的病例长期不愈，不能妊娠。非妊娠牛，常常发生关节炎和局部肿胀，多见于膝关节。病公牛往往发生睾丸炎或附睾肿胀、关节炎及局部肿胀，配种能力降低。牛布鲁氏菌病的病程为慢性经过，可延续数年之久。在明显症状消失后，如不伴发慢性子宫炎，常可以自愈。否则长期不妊而淘汰。病种公牛，一般均应淘汰。 2、羊：妊娠病母羊的主要临床症状是流产，多发于妊娠后的3～4个月，流产前的症状一般不明显；部分病羊在流产前2～3天，呈现胃肠弛缓，精神沉郁。常喜伏卧，食欲减退，饮欲增加，体温升高，阴道流出粘液性或粘性血样分泌物。其他症状可能还有乳房炎、关节炎、滑膜炎及支气管炎。病公羊经常发生睾丸炎、附睾炎及多发性关节炎。绵羊布鲁氏菌可引起绵羊附睾炎和不育。 [治疗] 治则本病尚无特效疗法，可试用下法治疗。 1、胎儿尚活，仅有流产先兆，但还没有发生明显的流产症状的可试行保胎法。 ⑴、孕酮牛50～100mg，羊10～30mg，一次肌肉注射。⑵、炒白术30g，当归30g，砂仁20g，川芎20g，白芍20g，熟地20g，炒阿胶25g，党参20g，陈皮25g，苏叶25g，黄芩25g，甘草10g，生姜15g为引。共为末，开水冲调，候温一次灌服(为牛的用量，羊酌减)，每天一剂。 2、胎儿已死或已发生明显的流产症状，应让其将胎儿产出，必要时可用药物催产坠胎。 ⑴、催产素牛25～100单位，羊30～50单位，一次肌肉注射。⑵、桃仁25g，红花20g，当归60g，川芎20g，白芍20g，熟地30g，益母草45g，炙甘草15g，党参30g，牛膝25g。共为末开水冲调，候温一次灌服(为牛的用量，羊酌减)。 3、已流产母畜应采取活血祛瘀，解毒治疗。 益母草50g，黄芩30g，川芎、当归、熟地、白术、双花、连翘、白芍各25g。共为细末开水冲服，一天一剂，连用3～5天。
凝聚胺介质交叉配血试验操作规程
凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(SOP文件) 1目的 作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。 2检验原理 红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。 凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。 其后，加入凝聚胺（Polybrene)溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。 3储存条件及有效期
未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。 4样本要求 4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。 4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。5检验方法 辅助交叉配血试验 5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。 5.2各加LIM0.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。 5.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。 5.4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重做。 5.5最后加入Resuspending 2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如果在60秒内凝集散开，代表是由Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为
人间布病诊断方法和判定标准
人间布病诊断方法和判定标准 1．人的布病诊断是综合性的，主要依据：（1）流行病学接触史：密切接触家畜、野生动物（包括观赏动物）、畜产品、布鲁氏菌培养物等或生活在疫区的居民。（2）临床症状和体征应排除其他疑似疾病。 （3）实验检查：病原分离、试管凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白试验。（虎红平板凝集试验，皮内变态反应试验仅供初诊用）。凡具备（1）、（2）项和第（3）项中的任何一项检查阳性即可确定为布病病人。对已确诊的慢性布病病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效价高低，皮内变态反应强弱仅供参考。2．实验检查阳性判定标准（1）病源分离：检出布鲁氏菌（2）试管凝集试验：1：100（＋＋）及以上，即100国际单位／毫升及以上。（3）补体结合试...... ...... 布病诊断标准 (一) 流行病学：发病前病人与家畜或畜产品，布氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区的居民，或与菌苗生产、使用和研究密切联系者。 (二) 临床表现：出现数日乃至数周发热，多汗，肌肉和关节酸痛，乏力兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征。 (三) 实验室检查：布病玻片或虎红平板凝集反应阳性或可疑，或皮肤过敏试验后24、48小时分别观察一次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上（或4.0cm2以上） (四) 分离细菌：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物中分离到布氏菌。 (五) 血清学检查：标准试管凝集试验（SAT）滴度为1：100及以上，对半年内有布氏菌苗接触史者，SAT 滴度虽达1：100及以上，过2～4周后应再检查，滴度升高4倍及以上，或用补体结合试验（CFT）检查，CFT滴度1：10及以上；抗人免疫球蛋白试验（Coomb'S）滴度1：400及以上。 诊断疑似病例：具备(一)、（二）、（三）者。 诊断确诊病例：疑似病例加（四）或（五）中任何一项者。
布氏杆菌病与乳制品生产
布氏杆菌属（Brucella）是一类革兰氏阴性的短小杆菌，牛、羊、猪等动物最易感染，引起母畜传染性流产。人类接触带菌动物或食用病畜及其乳制品，均可被感染。布氏杆菌病广泛分布世界各地。我国部分地区曾有流行，现已基本控制。布氏杆菌也是帝国主义者列为失能性生物战剂之一。布氏杆菌属分为羊、牛、猪、鼠、绵羊及犬布氏杆菌6个种，20个生物型。中国流行的主要是羊（Br.melitensis）、牛(Br.Bovis)、猪(Br.suis)三种布氏杆菌，其中以羊布氏杆菌病最为多见。 病理 布氏杆菌感染 布氏杆菌首先感染家畜。家畜临床表现不明显。但怀孕的母畜则极易引起流产或死胎，所排出的羊水、胎盘、分泌物中含大量布氏杆菌，特别有传染力。而其皮毛，尿粪，奶液中均有此菌。排菌可长达三个月以上。人通过与家畜的接触，服用了污染的奶及畜肉，吸入了含菌的尘土或菌进入眼结合膜等途径，皆可遭受感染。发病年龄大多在30岁以上。 该菌自损伤的皮肤及粘膜或消化道，呼吸道进入人体后，首先被吞噬细胞吞噬，进入淋巴结，有时可在其中存活并生长繁殖形成感染灶，约2～3周后可进入血液循环产生菌血症。继之在网状内皮系统如肝，脾，骨髓内生长形成新的感染病灶，并可多次反复冲破细胞进入血循中，则再一次引起菌血症和临床急性症状，表现为平均2～3周的发烧期，每间隔约3天至两周，发烧又反复，产生波浪状的热型，故称为波浪热。 同时，布氏杆菌含有内毒素及菌体本身皆可引起人体的过敏，出现各种的变态反应性病变。骨关节病变，多发生在半年左右，少数病例更早些。布氏杆菌骨髓炎是血源性布氏杆菌感染在骨关节的局部表现。任何骨均可受累，但以脊椎炎最为
多见。关节的病变常侵犯大关节，以髋关节炎最为常见。 生物学性状 本菌属初次分离培养时多呈小球杆状，毒力菌株有菲薄的微荚膜，经传代培养渐呈杆状，革兰氏染色阴性。 本菌为严格需氧菌。牛布氏杆菌在初次分离时，需在5～10%CO2环境中才能生长，最适温度37℃，最适的pH6.6～7.1,营养要求高，生长时需硫胺素，烟草酸和生物素，泛酸钙等，实验室常用肝浸液培养基或改良厚氏培养基。此菌生缓慢，培养48小时后才出现透明的小菌落，鸡胚培养也能生长。 在自然界中抵抗力较强，在病畜的脏器和分泌物中，一般能存活4个月左右，在食品中约能生存2个月。对低温的抵抗力也强，对热和消毒剂抵抗力弱。对链霉素、氯霉素和四环素等均敏感。 布氏杆菌具有二种抗原成份：A（牛布氏杆菌主要抗原成份）和M（羊布氏杆菌主要抗原成份）。二种抗原在各种菌中含量不同，牛布氏杆菌（Am）含a 抗原多，含M抗原少。羊布氏杆菌(aM)含M抗原多，而含A抗原少。可利用凝集吸收试验制备出单因子血清～～单价A或M血清，供菌种鉴定之用。 牛布氏杆菌病 一、临床症状 潜伏期2周至6个月。母牛流产是本病的主要症状，常发生于怀孕第5～8个月，产出死胎或软弱犊牛。流产时除表现分娩征象外，常有生殖道发炎症状，阴道粘膜发生粟粒大小的红色结节，流出灰白色粘性分泌物。胎衣往往滞留，流产后持续排出恶露，呈污灰色或棕红色，可持续2～3周。常发生子宫内膜炎、乳房炎。大多数母牛只流产1次。公牛常发生睾丸炎或关节炎、滑膜囊炎，有时可见阴茎红肿，睾丸和附睾肿大。 二、病理变化 常见的病变是妊娠母牛的子宫与胎膜病变变化较突出。子宫绒毛膜间隙有污灰色或黄色无气味的胶样渗出物。绒毛膜因充血呈紫红色，表面覆以黄色坏死物或污灰色脓液。胎膜因水肿而肥厚，呈胶样浸润，表面覆以纤维素和浓汁。流产胎儿主要呈败血症变化，脾与淋巴结肿大，肝脏中有坏死灶，肺常见支气管肺炎，胃肠膀胱的浆膜下可见有点状或线状出血。公牛主要发生化脓坏死性睾丸炎或附睾炎。睾丸显著肿大，被膜与浆膜层粘连，切面可见到坏死灶或化浓灶。阴茎红肿，其粘膜上有时可见小而硬的结节。 三、实验室检验 用平板凝集试验和试管凝集试验相结合的方法检验。虎红平板凝集试验的方法：将被检血清与布鲁氏菌虎红平板抗原各0.03毫升滴于玻璃板上混匀，在室温下4～10分钟呈现结果，出现凝集现象为阳性反应，完全不凝集的为阴性。受检血
布氏杆菌病的检测
布氏杆菌病的检测
牛布氏杆菌病的检测 1 传统的检测方法 1.1 细菌学检测 布氏杆菌需在实验室里进行。初步分离时, 须在5%~10%二氧化碳环境中方能生长, 而且标本中必须存在大量活菌才能分离到该菌, 培养细菌的周期长,需要花费大量的时间才能得出结果。因此在布病的检测中已经逐渐被淘汰。 1.2 血清学检测 该法同样要在实验室才能操作, 虽然凝集试验(agglutination test)操作简便, 且所需时间短, 但由于IgM 在pH 为中性或弱酸性时凝集最活跃, 所以凝集试验会因为抗体交叉反应而易出现假阳性反应。判断结果有很大的误差, 在2000 年被OIE 取消了其作为布氏杆菌病的检测方法[2]。沉淀试验(Precipitationtests)是可溶性抗原与相应抗体结合, 在适量电解质存在下, 形成肉眼可见的白色沉淀, 由于是人为的观察结果, 因此存在很大的主观性, 有时会因出现交叉反应而 误判结果, 且有很大的局限性, 不是一种理想的检测布病的方法。补体结合试验( complement
fixation test,CFT) 主要用于检测牛、绵羊、山羊和猪的布氏杆菌病,在操作过程中对温度和滴加试剂的量有很高的要求,需要很多控制条件, 结果也无法避免假阳性的影响。放射免疫试验是1977 年Parratt[3]建立起来的, 由于在该实验中要用大量的放射性元素会对人体和环境造成很大的威胁, 因此该法一直没有得到广泛运用。 1.3 变态反应检测 临床上可用布氏杆菌水解素0.2ml 注射于动物根皱褶处, 24h 及48h 各观察一次, 若注射部位发红肿胀即判为阳性反应。此法对慢性病例检出率较高, 并且注射水解素后无抗体产生, 不妨碍以后的血清学检查。此法主要用于山羊和绵羊检疫, 但山羊的变态反应试验不如绵羊变态反应试验那样易读取结果, 对中、后期病山羊的诊断意义较大, 适用于山羊布氏杆菌病的筛检, 不作个体山羊的诊断依据。 2 酶联免疫吸附试验 ELISA 是免疫技术中应用最广的一种, 在适合的载体上, 酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原- 抗体免疫复合物, 在一定的底物参与下, 复合物上的酶催化底物, 使
布氏杆菌病的检测
牛布氏杆菌病的检测 传统的检测方法 细菌学检测 布氏杆菌需在实验室里进行。初步分离时, 须在二氧化碳环境中方能生长, 而且标本中必须存在大量活菌才能分离到该菌, 培养细菌的周期长,需要花费大量的时间才能得出结果。因此在布病的检测中已经逐渐被淘汰。 血清学检测 该法同样要在实验室才能操作, 虽然凝集试验( )操作简便, 且所需时间短, 但由于在为中性或弱酸性时凝集最活跃, 所以凝集试验会因为抗体交叉反应而易出现假阳性反应。判断结果有很大的误差, 在年被取消了其作为布氏杆菌病的检测方法[]。沉淀试验()是可溶性抗原与相应抗体结合, 在适量电解质存在下, 形成肉眼可见的白色沉淀, 由于是人为的观察结果, 因此存在很大的主观性, 有时会因出现交叉反应而 误判结果, 且有很大的局限性, 不是一种理想的检测布病的方法。补体结合试验( ) 主要用于检测牛、绵羊、山羊和猪的布氏杆菌病,在操作过程中对温度和滴加试剂的量有很高的要求,需要很多控制条件, 结果也无法避免假阳性的影响。放射免疫试验是年[]建立起来的, 由于在该实验中要用大量的放射性元素会对人体和环境造成很大的威胁, 因此该法一直没有得到广泛运用。 变态反应检测 临床上可用布氏杆菌水解素注射于动物根皱褶处, 及各观察一次, 若注射部位发红肿胀即判为阳性反应。此法对慢性病例检出率较高, 并且注射水解素后无抗体产生, 不妨碍以后的血清学检查。此法主要用于山羊和绵羊检疫, 但山羊的变态反应试验不如绵羊变态反应试验那样易读取结果, 对中、后期病山羊的诊断意义较大, 适用于山羊布氏杆菌病的筛检, 不作个体山羊的诊断依据。 酶联免疫吸附试验 是免疫技术中应用最广的一种, 在适合的载体上, 酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原抗体免疫复合物, 在一定的底物参与下, 复合物上的酶催化底物, 使其水解、氧化或还原成另外一种带色物质。由于在一定条件下, 酶的降解底物和呈现色泽是成正比的, 因此, 可以应用酶测定仪进行测定, 从而计算出参与反应的抗原和抗体的种类和含量。自从年等和等分别报道酶联免疫吸附试验( , ) 以来, 得到了很大的发展, 到目前其类型也很多, 在此对常用的两种介绍如下。 间接酶联免疫吸附试验 年第一次建立间接( , ) 法检测人布氏杆菌病, 之后在多种动物上用该法检测布氏杆菌病。年等用间接从羊奶中检测布氏杆菌病, 其特异性和敏感性都特别高; 年等人用抗的单克隆酶轭合物间接诊断牛布氏杆菌病, 检测了三组血清, 第一组是没有注射疫苗的阴性血清, 第二组是注射了疫苗的阴性血清,第三组是来自阳性牛的血清。间接检测的特异性前两组分别是和, 间接检测阳性血清的敏感性是; 得出的敏感性和特异性都很高; 年. 等评价了间接在阿根廷奶牛中用奶和血清检测诊断布氏杆菌病的效果, 在来自相同奶牛的奶和血清中间接检测的特异性和敏感性分别为: 奶样敏感性为特异性为; 血清的敏感性为特异性。奶和血清的敏感性相同而奶的特异性比血清的高[]。说明可以在检测奶牛布氏杆菌病的时候可以用奶代替血样, 排除了采血带来的麻烦, 大大地提高了检测效率。赵云玲等人分别通过琥红凝集试验( ) 、试管凝集试验( ) 、和酶联吸附( )试验检测某牛厂送检份血清和份乳清, 所得的实验结果说明乳清完全可以代替血清用于牛布氏杆菌病的血清学检测; 年. []等人比较了在大量奶样中用间接和用乳汁环状试验检 测流产性布氏杆菌抗体的差异, 最后得出间接的敏感性( ) 高于乳汁环状试验( ) , 而间接的
输血技能操作规程
ABO血型鉴定操作规程 1 方法：试管法。 2 原理：根据红细胞上有或无A抗原和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型 及O型4种。利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。正定型就是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞A抗原或/和B抗原；反定型就是用已知A红细胞和B红细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。 3标本种类：EDTA抗凝全血。 4试剂及器材：抗-A、抗-B标准血清；2-5%A、B、O试剂标准红细胞盐水悬液； 受检者血清；受检者2-5%红细胞盐水悬液；生理盐水。试管架；清洁干燥试管；清洁干燥吸管；清洁干燥载玻片；生物显微镜；离心机（或血库专用离心机）。 5操作步骤： 5.1 检查所用试剂的批号、外观、有效期及相应的器材。……（20分） 5.2 检查标本的状态。……( 5分) 5.3 标本离心：1000×g 离心3分钟。……( 5分) 5.4 加样：……( 20分) 正定型：取洁净小试管2支，分别标明抗-A、抗-B。分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者3-5%红细胞悬液 1滴，混和。 反定型：另取洁净小试管3支，分别标明A、B、O细胞。用滴管分别加入受检者血浆2滴于试管底部，再分别加入3-5%A、B、O试剂红细胞1滴。 5.5 离心：立即以1000×g离心15秒。……( 15分) 5.6 观察结果：检查是否有溶血，再将试管轻轻摇动，使沉于试管底的红细胞浮 起，先以肉眼观察有无凝集。如肉眼未见凝集或溶血，应再以低倍镜观察有无凝集。……( 15分) 5.7 ABO血型结果判读。……（结果错误一票否决） ABO血型正反定型结果 正定型反定型 分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞 抗-A 抗-B A细胞B细胞O细胞
肉牛羊布氏杆菌流行病学调查报告
国畜禽业 中种2019.10 附表布氏杆菌病流行病学相关情况调查情况表 作者简介:康玲慧(1975.3-),女,宁夏同心县人,大学本科,兽医师,主要从事动物疫病防控工作。 肉牛羊布氏杆菌流行病学调查报告 康玲慧 (宁夏同心县动物疾病预防控制中心751300) 摘要:为有效防止肉牛、肉羊布氏杆菌病的发生,通过问卷调查方式对宁夏多个地区肉牛和肉羊养殖情况及出现的布氏杆菌病流行情况调查分析。根据此次调查结果进一步提出有效的防控措施。关键词:肉牛;肉羊;布氏杆菌;流行病学;同心县 布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人畜共患传染病,在通常情况下家畜会对布氏杆菌存在易感性存在种属差异,而且羊和牛的易感性较强,在临床上主要表现为生殖器官和胎盘炎,导致羊出现流产、不育、后肢麻痹等症状。在传染过程中不具有季节规律性,有多种传播途径可通过皮肤、呼吸道等传播。因此,我们采用问卷调查及血清检测对该地区肉牛和肉羊养殖情况进行流行病学统计。 1调查问卷 调查针对肉牛羊布氏杆菌病流行病学情况进行调查问卷,通过问卷调查填写以及与养殖人员交谈等多种方式向该地区共发放136份问卷调查,在调查对象选取过程中,以过去发生母牛羊流产,育肥牛羊关节炎等的牛羊场作为研究对象,对该地区的肉牛羊养殖场进行全方面排查,然后抽取血样进行血清检测。 1.1流行病学调查人员 由当地畜牧兽医学部中心抽取技术骨干和3名技术人员共同构成调查小组,以镇为单位,每周小组选一名成员进行调查对象宣传,组织开展各种流行病学调查,其内容涉及品种,免疫程序,市场销售,引种来源等,同时还需要通过对小组人员进行分工,两人完成采样,一人负责信息登记,将样品保存送到上级动物疾病预防控制中心完成相应的检测。 1.2流行病学调查方法 由当地畜牧兽医技术服务中心发放调查表,其内容包括肉羊肉牛总存栏数,公羊公牛数,能繁母羊和母牛数,出栏数,从业养殖人员的年限,文化,健康情况等作为基本数据,重点调查免疫程序,种类,临床症状,发病率等。在现场调查过程中需要根据调查情况由专家深入养殖现场对养殖人员进行巡查调查,针对肉羊和奶牛群体个体进行检测,对肉羊和奶牛发病情况进行快速诊断,对调查表所反映存在问题的牛羊场进行调查,主要针对品种选定,经营方式,生产免疫等综合分析探 讨,以帮助养殖者解除困难,提高养殖效益。 1.3血清检测 对当地肉牛羊养殖场进行百分百血样采集,按照动物疫病监测要求,对空腹肉牛羊采取真空采血管,由颈动脉采血5ml,室温静止后分离血清,并送到相应的实验室检测。专用的检测试剂为布鲁氏菌病琥红平板凝集抗原及ELISA 试剂盒 [1] 。按照 布鲁氏菌病的监测标准,利用抗原监测血清的抗体,一旦出现凝集反应表明血清中含有布鲁氏杆菌产生的抗体,说明该牲畜受到布鲁氏杆菌的感染。由于存在假阳性问题,可先进行琥红 平板凝集实验筛选,对出现阳性反应的再利用ELISA 检测,最后结合临床症状判断是带毒阳性还是属于临床病例。 2调查结果分析 通过与牧户访问结合现场调查的方式,在发放的136份调查问卷中表明有50户肉牛30户绵羊 ,20户山羊,10户牛羊混养,10户绵羊和山羊混养,养殖方法主要是圈养和散养。其中有30%的养殖户对于布鲁氏菌病有一定了解,而70%的养殖户对该疾病不了解,有45户是由外地购买,全部具有检疫证,有58%的养殖户对养殖场进行定期消毒,屡配不孕的共有30户,其流产率为22.6%,参见附表。 从血清学结果上来看,随机抽选两万份血清样品中,利用琥红平板凝集实验初步筛选出56份阳性血清,经过ELISA 确定有55份阳性血清,结合临床症状确定有18只发病羊,17只带毒羊,有10只发病牛,有10只带毒牛。 3讨论 牛羊养殖是畜牧业发展的支柱产业,近年来由于很多地区出现牛羊流产问题,通过检测发现,导致牲畜流产主要是由于感染了布鲁氏菌病。在本研究中通过调查问卷和血清学检测,通过调查肉牛和肉羊养殖情况以及布鲁氏菌病的流行发展情况进行调查发现,部分养殖户没有充分认识布鲁氏菌病的危害, 动态 30
布氏杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查
布氏杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查 杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查 布氏杆菌病对人体的健康损害是特别大的，因此我们在出现布氏杆菌病的症状后一定要及时就医检查，切莫道听途说的乱用治疗药物，而因此耽误治疗让身体健康遭受更严重的伤害。那么布氏杆菌病的确诊需要做怎样的检查呢？其实只需要做血象检查、细菌学检查、免疫学检查这三种检查就可以了。 一般布氏杆菌病在通过血象、细菌学检查以及免疫学检查之后就可以对此病进行准确的确诊了，而具体检查方法介绍如下： ★1、血象检查，有百分之六十患有布氏杆菌患者在进行这
项检查之后就可以发现白细胞有轻度减少的现象，而淋巴细胞却有相对增多的现象发生，并且在这种现象发生的同时大多数的患者血沉还会有增速的现象，而病程比较久的患者还会有轻度和重度贫血的症状发生。 ★2、细菌学检查，一般采用血液、鬼祟。乳汁以及子宫分 泌物都可以进行细菌培养，但由于要求严格的环境，因此在采集标本的时候最好是采用两份，一份用于含肝浸液的肉汤做培基之后在CO2孵箱中培养;而另外一份则放在一般的环境中进行孵育，一般培养的时间要超过两周才可以有比较准确的结果出现。 ★3、免疫学检查，这项检查主要包括的有血清凝集试验、 补体结合试验、抗人球蛋白试验、酶联免疫吸附试验和皮肤试验等，一般在通过这几项检查所得出的具体表现，就可以基本对此病进行确诊了。 上述就是针对确诊布氏杆菌病检查方法所作的介绍，上述内容可以供给大家参考，如果有人怀疑自己感染了布氏杆菌，就该及时的去正规的医院进行诊断，这样在确诊了疾病之后才可以作
出针对性的治疗，从而给才可以避免疾病加重之后会有危及生命的危害发生。
输血科操作规程
目录 1、输血前检测实验程序 ２、改良低离子聚凝胺法实验操作规程 ３、ABO 血型鉴定 4、Ｒｈ(D）血型鉴定 ５、抗体筛选与鉴定试验 输血前检测实验程序 1、实验要求 血清与血浆都可以用于交叉实验与抗体检测，最好就是血清标本，标本使用限制在３天内,含有肝素等抗凝标本可以用凝血酶或硫酸鱼精蛋白处理使其凝集析出血清。允许通过静脉输液口采集标本,但必须丢弃受残留静脉输液影响得 5ml 标本。一般不允许使用溶血标本,对急性溶血性贫血与烧伤病人得溶血标本,在实验前后必须做溶血程度得比较。标本与输血申请单上得所有资料必须填写清楚并完全符合,否则应重抽标本。对所有用过得献血员与受血者标本必须在１-6℃冰箱至少保存 7 天,所有实验都必须保证观察与记录同时进行,且记录与资料都必须至少保存５年。 2、血型检测 要求完成病人ABO 正反定型、Rh（Ｄ)。 ３、交叉试验 3、1 受血者交叉配血时所用得标本必须就是输血前 3 天之内得。 ３、２配血时要逐项核对输血申请单、受血者与供血者血样,复查受血者与供血者ABO 血型(正、反定型),并常规检查患者 Rh(D)血型(急诊抢救患者紧急输血时Rh（D)检查除外）,正确无误时可进行交叉配血。 3、３凡就是输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩红细胞、手工分离浓缩血小板等患者,应该进行交叉配血试验。机器单采浓缩血小板、冷沉淀、新鲜血浆应与 ABＯ血型同型输注。 3、4 按《全国临床检验操作规程》要求完成凝聚胺交叉试验与检测不完全抗体得交叉试验（聚凝胺法、抗人球蛋白法) 。除紧急输血与自身输血外,所有输入红细胞得其她制品均要求做血交叉试验。 3、５另外必须开展得试验有抗人球蛋白试验，抗体筛选实验。
羊布氏杆菌病怎么预防
羊布氏杆菌的防治措施 病原 病原为布氏杆菌。它存在于病畜的生殖器官、内脏和血液。该菌对外界的抵抗力很强，在干燥的土壤中可存活37天，在冷暗处和胎儿体内可存活6个月。1%来苏尔，2%的福尔马林，5%的生石灰水15分钟可杀死病菌 传播途径 布氏杆菌首先感染家畜。家畜临床表现不明显。但怀孕的母畜则极易引起流产或死胎，所排出的羊水、胎盘、分泌物中含大量布氏杆菌，特别有传染力。而其皮毛，尿粪，奶液中均有此菌。排菌可长达三个月以上。人通过与家畜的接触，服用了污染的奶及畜肉，吸入了含菌的尘土或菌进入眼结合膜等途径，皆可遭受感染。 布氏杆菌可经消化道、呼吸道、生殖系统黏膜及损伤甚至未损伤的皮肤等多种途径传播，通过接触或食入感染动物的分泌物、体液、尸体及污染的肉、奶等而感染；蜱叮咬也可传播本病。如牛羊群共同放牧，可发生牛种和羊种布氏杆菌的交叉感染。动物布氏杆菌可传给人类，但人传人的现象较为少见。 发病特点 该病的传染源主要是病畜及带菌动物，最危险的是受感染的妊娠母畜，在流产和分娩时，将大量病原随胎儿、胎水和胎衣排出。本病主要通过采食被污染的饲料、饮水，经消化道感染。经皮肤、粘膜、呼吸道以及生殖道(交配)也能感染。与病羊接触、加工病羊肉而不注意消毒的人也易感本病。本病不分性别年龄，一年四季均可发生。 母羊较公羊易感性高，性成熟极为易感，消化道是主要感染途径，也可经配种感染。羊群一旦感染此病，首先表现孕羊流产。开始仅为少数，以后逐渐增多，严重时可达半数以上，多数病羊流产一次。 因布氏杆菌病导致的羊流产 感染症状 多数病例为隐性感染。怀孕羊主要症状是发生流产，但不是必有的症状。流产发生在怀孕后的3-4个月。有时患病羊发生关节炎和滑液囊炎而致跛行；公羊发生睾丸炎；少部分病羊发生角膜炎和支气管炎。 本病常不表现症状，而首先被注意到的症状是流产。流产前食欲减退、口渴、萎顿、阴道流出黄色粘液。流产多发生于怀孕后的第三个月、第四个月。流产母羊多数胎衣不下，继
治疗布氏杆菌病需要做哪些化验检查
治疗布氏杆菌病需要做哪些化验检查又称波浪热，由布氏杆菌引起，临床上以长期低热、关节酸痛、肝脾肿大和慢性化为特征的传染病。 (1)白细胞(WBC)计数及分类(DC)检查:WBC正常或减少，其中淋巴细胞(L)或单核细胞增多。 (2)血清学检查:用凝集试验、ELISA等法，特异性抗体测定可为阳性。 (3)皮内试验:以布氏杆菌做皮内试验，如阳性，表示曾感染或正在感染本病。 (4)布氏杆菌脱氧核糖核酸(DNA)测定:如为阳性，有确定诊断意义。 (5)病原学检查:血、骨髓、淋巴组织、脓性物或脑膜炎患者的脑脊液培养，均可为阳性，其中以骨髓培养阳性率最高。 布氏杆菌病检查项: 1、白细胞(WBC或LEU) 2、白细胞分类(DC) 3、脑脊液涂片检查及细菌培养 4、T淋巴细胞 5、外斐反应(变形杆菌凝集试验,WFR) 6、布氏杆菌凝集试验(BAT) 7、腺病毒酶联免疫吸附试验(ELISA) 8、呼吸道合胞病毒酶联免疫吸附试验(ELISA) 白细胞(WBC或LEU)(正常值及其临床意义) 【单位】 个/升(个/L) 【正常值】 成人白细胞数为(4.0～10.0)×109/升。儿童随年龄而异，新生儿为(15.0～20.0)×109/升;6个月～2岁为(11.0～12.0)×109/升;4～14岁为8.0×109/升左右。 【临床意义】 (1)增多:常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。 (2)减少:常见于某些病毒感染、血液病、物理及化学损伤、自身免疫性疾病和脾功能亢进等。 白细胞分类(DC)(正常值及其临床意义)
【单位】 百分比(常用1.0表示100%) 【正常值】 (1)嗜中性粒细胞(N):成人0.40～0.75(40%～75％)，儿童0.30～0.65(30%～65%)。 (2)嗜酸性粒细胞(E):0.005～0.05(0.5%～5%)。 (3)嗜碱性粒细胞(B):0～0.01(0～1%)。 (4)淋巴细胞(L):成人0.20～0.45(20%～45%)，儿童0.3～0.56(30%～56%)。 (5)单核细胞(M):成人0.02～0.06(2%～6%)，儿童0.02～0.08(2%～8%)。 【临床意义】 (1)嗜中性粒细胞(N):增多或减少，同白细胞(WBC)。 (2)嗜酸性粒细胞(E):①增多。常见于过敏性疾病，寄生蚓病，某些皮肤病(如湿疹、牛皮癣等)，慢性粒细胞性白血病，淋巴肉瘤，鼻咽癌，肺癌等。②减少。常见于伤寒、副伤寒早期、大手术、烧伤等应激状态及长期应用肾上腺糖皮质激素后。 (3)嗜碱性粒细胞(B):①增多。常见于白血病、某些转移癌、骨髓纤维化、脾切除后及铅、锌中毒等。②减少。无临床意义。 (4)淋巴细胞(L):①增多。见于某些病毒或细菌所致的传染病、急慢性血液病、药物反应、变态反应、溶血性贫血等。②减少。见于淋巴细胞破坏过多(如x线照射、化疗、应用肾上腺糖皮质激j素或淋巴细胞毒素等)，免疫缺陷病，霍奇金病及尿毒症等。 (5)单核细胞(M):①增高。常见于感染、血液病、胶原性疾病等。②减少。无临床意义。 脑脊液涂片检查及细菌培养(正常值及其临床意义) 【正常值】 阴性，但有时可见到一些污染菌，如枯草杆菌、葡萄球菌和类白喉杆菌等。 【临床意义】 如从脑脊液中查出细菌，而又非污染或误入，均应视为病原菌，对神经系统的细菌或真菌感染有诊断意义，而对中枢神经系统的病毒性疾患无诊断意义。 病理性脑脊液标本中可能出现的细菌如下:革兰阳性菌有肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、消化链球菌、四联球菌、结核分枝杆菌、炭疽杆菌和单核细胞增多性李氏杆菌；革兰阴性菌有脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌、流感杆菌、沙门菌、大肠杆菌、产气肠杆菌。其他还有新生(型)隐球菌、白色念珠菌和钩端螺旋体。 T淋巴细胞(正常值及其临床意义)
放散试验操作规程
放散试验操作规程 1.目的 常用于ABO亚型的鉴定、全凝集或多凝集红细胞的定型、类B的鉴定以及新生儿溶血病的诊断等。 2.适用范围 ABO亚型的鉴定及新生儿溶血病的诊断。 3. 职责 3.1检测者职责：负责血液标本的处理、交叉配血试验操作及相关记录； 3.2复核者职责：负责对血液标本的检测过程以及关键控制点进行审核，校对试验结果和检测报告。 4. 原理 红细胞上的抗原与血清中的抗体在适合条件下发生凝集或致敏。这种结合是可逆的，如果改变某些物理条件，抗体又可从结合的红细胞上放散出，再以相应的红细胞鉴定放散液内抗体的种类并测定其强度，用以判定原来红细胞上抗原的型别。这种方法常用于ABO亚型的鉴定、全凝集或多凝集红细胞的定型、类B的鉴定以及新生儿溶血病的诊断等。 放散试验的方法很多,ABO血型，IgM抗体以热放散法为常用。Rh血型，IgG抗体以乙醚放散法为常用。 5. 设备、材料和试剂 5.1 设备 细胞洗涤离心机编号/型号：132/KA-2200、台式离心机编号/型号：287-1/TD4、显微镜编号/型号：77/IM、数显恒温水浴锅编号/型号：264/HH-2、循环恒温水浴箱编号/型号：283/HH-6。 5.2 材料 5.2.1 送检标本要求静脉采集至少为抗凝血5ml； 5.2.2 标本处理：标本的验收、标识、存放、贮存、销毁等处理按《标本采集、接收及处理操作规程》进行。 5.3 试剂 相应的血清抗体、A型和B型试剂红细胞（3-5%）盐水悬液、乙醚(分析试剂) 6. 检测环境 试剂与标本贮存环境：4℃冰箱 检测环境：室温、37℃、56℃ 7. 步骤与方法 7.1加热放散法 7.1.1 将受检红细胞以大量生理盐水洗涤3次，末次洗涤后，将盐水除尽，取压积红细胞一份，分别与2份抗A和抗B型分型血清混合，置4℃冰箱1小时，每隔10分钟将试管振摇1次，使充分混合； 7.1.2 离心去除上清液，以4℃冷盐水洗涤红细胞3-4次，倾去洗涤液，留取压积红细胞。加1/2容积的生理盐水(如放散液不立刻进行检查，应以AB型血清代替生理盐水)。置56℃水浴中10分钟，每隔1分钟振摇1次，使吸附在红细胞上的抗体充分放散出；
[杆菌,牛布氏]牛布氏杆菌病的诊断与防治
[摘要] 在牛养殖过程中，会出现很多种疾病，其中牛布鲁士杆菌疾病的发生将会给养殖户造成巨大的经济损失，同时，还会严重影响到人体的生命健康安全。牛布鲁士杆菌疾病又称为布病，是一种人畜共患的疾病，其主要会危害到牛的生殖系统，母牛感染该种疾病之后会，在妊娠期会出现流产现象，即使犊牛能够正常的生产下来，其体质虚弱，多半会在半途夭折，公牛感染该种疾病之后，会引发出现睾丸炎、附睾炎等生殖系统疾病。最近几年，随着牛养殖产业不断发展，布病的发病呈现高发的趋势，因此，在牛养殖过程中，做好牛布病的诊断和防治工作就显得十分重要了。本文主要就牛布鲁士杆菌的疾病的临床症状和诊断方法进行了分析和研究，并提出了相应的防治对策，希望通过本次研对更好的促进该种疾病的预防和治疗有一定的帮助。 [关键词] 牛养殖产业布鲁士杆菌病诊断方法防治对策 牛的布鲁士杆菌疾病是由布鲁士杆菌引起的一种人畜共患的疾病，其主要会对牛的生殖器产生严重危害，会造成母牛出现不孕或者流产和公牛睾丸炎和附睾炎的发生。该种疾病的分布十分广泛，其中对性成熟的公牛和母牛的危害最为严重。因此，在日常饲养过程中，应该切实做好该种疾病的预防和诊断工作，及时发现及时治疗，杜绝传染源，切断疾病的传播途径。 1 病原学分析 布鲁士杆菌为形态不规则的革兰氏阴性微小杆菌，其呈现无鞭毛，且不成形的芽孢和加膜。该种细菌对外界的抵抗能力较强，在被污染的水源和土壤中，能够存活20天以上，这就为疾病预防工作带来的严重的阻碍，但是该种病菌对一般的消毒剂和抗生素具有较强的敏感性，可以利用其这一个特性对该种疾病进行预防。 2 流行特点 病牛和带病菌的牛是布鲁氏杆菌病的主要传染源，患病的母牛在妊娠流产和生产过程中，会将大量的布鲁氏杆菌排出体外，其中在母牛的生殖器分泌物和母乳中含量最高。该种疾病传播的主要途径是消化道，同时，也可以借助皮肤、粘膜和吸血的昆虫的叮咬进行传播。其中牛对布鲁氏杆菌病的易感性是随着性器官的逐渐成熟而逐渐升高，犊牛对该种疾病表现为一定的抵抗力。 3 临床症状分析 牛的布鲁氏杆菌病的潜伏期一般为2～6周左右，在潜伏期内缺少明显的全身症状，妊娠母牛最为显著的临床症状就是流产，其可以发生在母牛妊娠的各个时期，通常情况下会发生在妊娠期的6～8个月之间。母牛流产前可以见到在阴道处出现大量的红色结节，同时流出灰白色的粘液，大多数母牛流产后，会从阴道中持续排除污秽物，颜色呈现棕红色或者灰色，持续时间较长，并伴有恶臭气味。布鲁氏杆菌病会严重影响到母牛再次受孕，公牛常见的临床症状为关节肿胀，出现睾丸炎和附睾炎。
布病试管凝集试验
布病试管凝集试验 一、实验前准备 1、试管的准备 ①把试管浸泡于带有洗涤剂的温水中30分钟，浸泡后用试管刷将其刷干净。先 用自来水冲洗10遍，再用去离子水冲洗1遍。 ②试管冲洗干净后倒置于篮子中，等水沥干后置干燥箱中，160℃干燥3个小时 （整个干燥过程需要5~6个小时）。 ③实验前要配置0.5%的石炭酸生理盐水 配置方法：称取0.5克石炭酸，加入100ml的生理盐水中，配置后置高压锅中121℃高压30分钟。 2、试剂的准备 ①标准抗原:按照说明书使用。使用时充分摇匀，用稀释液作1，20(工作浓度)稀释。 ②标准阳性血清冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。 ③标准阴性血清:冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。 3、被检血清 ①按常规方法采血分离血清 血清必须新鲜，无明显蛋白絮凝物、无溶血和无腐败气味。 ②运送和保存血清样品 防止血清冻结和受热，以免影响凝集价。若3d内不能送到实验室，可用冷藏方法运送血清。 二、试验操作过程 1、确定被检血清的稀释度 牛、马、骆驼稀释用1:50,1：100,1：200,1：400(4个稀释度);猪、山羊、绵羊和狗用1：25,1:50,1:100,1:200(4个稀释度)。大规模检疫时也可用2个稀释度，即牛、马、骆驼用1：50,1：100，猪、山羊、绵羊和狗用1:25,1:50,为测定强阳性血清效价，稀释度可以增加。 2、稀释被检血清--猪、山羊、绵羊和狗血清的稀释 ①每份被检血清用4支试管，标记检验编号后第I管加1.15 mL稀释液，第2-4管各加人0.5 m L稀释液。 ②取被检血清0.1 mL，加人第1管，充分混匀后吸弃0.25 mL。 ③从第1管中吸取0.5mL加人到第2管，混合均匀后，再从第2管吸取0.5 m L至第3管，如此倍比稀释至第4管，从第4管弃去0.5 mL，稀释完毕。 ④从第1至第4管的血清稀释度分别为1：12.5,1：25,1：50,1：100。 3、加抗原 将0. 5 m L抗原(1:20)加入已稀释好的各血清管中，并振摇均匀，猪、羊或狗的血清稀释则依次变为1 : 25,1 : 50,1 : 100,1：200，牛、马和骆驼的血清稀释度则依次变为1：50,1：100,1：200,1:400。各反应管反应总量为1 mL。 4、设立对照--每次试验都应设立下列对照。
ABO血型鉴定操作规程
主题内容ABO血型鉴定操作规程生效日期：2010/10/23 第页共5页 1 目的 指导工作人员进行ABO血型实验。 2 适用范围 血型检验岗位工作人员 3 职责 负责送检标本ABO血型的检测工作。 4 【原理】 ABO血型鉴定,是根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或/和抗B。 【标本】 1．静脉抗凝或不抗凝血1.5～2.0ml。 【器材】 载玻片、滴管、小试管、台式离心机或微柱凝胶离心机、玻璃棒、蜡笔或记号笔、显微镜等。 【试剂】 1.1 抗-A、抗-B试剂 1.2 5%和10%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液 1.3 受检者血清 1.4 受检者5%和10%红细胞盐水悬液 1.5 10mm×60mm透明的玻璃试管或塑料试管 【操作步骤】 2.1 试管法 2.1.1查抗原：取洁净小试管2支，分别标明抗-A、抗-B，用滴管加入抗-A 和抗-B分型血清各 2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混匀。 2.1.2查抗体：取洁净小试管3支，分别标明A型、B型和O型细胞。用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B、O型5%试剂红细胞悬液1滴，混匀。 2.1.3立即1000rpm离心(离心时间为离心机校准时间)。 2.1.4轻轻摇动试管,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如肉眼观察不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜下观察有无凝集。
羊布氏杆菌病的防治
羊布氏杆菌病的防治 布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人､畜共患的慢性传染病｡主要侵害生殖系统｡羊感染后,以母羊发生流产和公羊发生睾丸炎为特征｡本病分布很广,不仅感染各种家畜,而且易传染给人｡ 病原 布氏杆菌是革兰氏阴性需氧杆菌｡分类上为布氏杆菌属｡本属细菌为非抗酸性,无芽胞,无荚膜,无鞭毛,呈球杆状｡组织涂片或渗出液中常集结成团,且可见于细胞内,培养物中多单个排列｡布氏杆菌属有6个种,即牛种､羊种､猪种､绵羊种､犬种和沙林鼠种,前5种感染家畜｡布氏杆菌在土壤､水中和皮毛上能存活几个月,一般消毒药能很快将其杀死｡ 诊断要点 由于发生流产的病因很多,而该病的流行特点,临床症状和病理变化均无明显的特征,同时隐性感染较多,因此,确诊要依靠实验诊断｡ 流行特点母羊较公羊易感性高,性成熟后对本病极为易感｡消化道是主要感染途径,也可经配种感染,羊群一旦感染此病,主要表现是孕羊流产,开始仅为少数,以后逐渐增多,严重时可达半数以上,多数病羊流产1次｡ 临床症状多数病例为隐性感染｡怀孕羊发生流产是本病的主要症状,但不是必有的症状｡流产多发生在怀孕后的3~4个月｡有时患病羊发生关节炎和滑液囊炎而致跛行,公羊发生睾丸炎,少部分病羊发生角膜炎和支气管炎｡
病理变化剖检常见的病变是胎衣部分或全部呈黄色胶样浸润,其中有部分覆有纤维蛋白和脓液,胎衣增厚并有出血点｡流产胎儿主要为败血症病变,浆膜与粘膜有出血点与出血斑,皮下和肌肉间发生浆液性浸润,脾脏和淋巴结肿大,肝脏中出现坏死灶｡公羊得病时,可发生化脓性坏死性睾丸炎和附睾炎,睾丸肿大,后期睾丸萎缩｡ 实验诊断主要根据病原学检查､血清学检查和变态反应检查情况作出诊断｡ (1)病原学检查抹片检查取胎盘绒毛叶组织､流产胎儿胃液或阴道分泌物作抹片,用改良的齐尔-尼尔森石炭酸复红原液(碱性复红1克,溶于10毫升纯乙醇中,加入90毫升5%的石炭酸水溶液,混匀即成)的1:10稀释液染色10分钟,用0.5%醋酸溶液脱色20秒,冲洗后,用1%美蓝复染20秒,镜检｡布氏菌染成红色,背景为蓝色｡布氏菌大部分在细胞内,集结成团,少数在细胞外｡衣原体和胎儿弧菌也引起流产,在抹片中也染成红色,但形态与布氏菌不同,可资区别｡ 分离培养鉴定是诊断布氏杆菌病最可靠的方法,只要从病羊体内或排出物中发现病原体即可确诊｡但由于患病动物身体状态､感染时期和发病过程等原因,往往不易检查出病原｡因此,在进行分离培养时,应选择适宜时机(如产后),采取适宜病料(如胎儿和产后排出物及病羊的网状内皮细胞等),用适宜培养基分离培养才能成功｡一般是将被检材料接种于两个同样的选择培养基(每100毫升基础培养基,如血清葡萄糖琼脂､血清马铃薯浸液琼脂､胰酶消化蛋白胨琼脂､血清马丁汤琼脂中加入抑菌药物:放线菌酮10毫克,杆菌肽25单位,多粘菌素B6单位)平板,一个置10%二氧化碳(C02)环境37℃培养,一个置普通温箱37℃培养,逐日观察,通常在3~10天可出现生长,然后移植于血清葡萄糖琼脂纯化｡如符合下述全部条件,可认为是布氏杆菌属的细菌:细小的革兰氏阴性球杆菌,无芽胞､荚膜和鞭毛,不运动,需氧,接触酶阳性,糖发酵,