期末实验 孚尔根染色法和植物染色体标本的制备

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期末实验孚尔根染色法和植物染色体标本的制备207.12.1 6.结果与分析

6.1结果

(1)孚尔根染色结果

图1.洋葱根尖分生区孚尔根DNA染色结果(10×10倍)

图2.洋葱根尖分生区孚尔根DNA染色结果(10×40倍)

①结果描述:在光学显微镜下,洋葱根尖细胞被均匀地压成了单层细胞,细胞分布较为均匀,变形细胞较少。DNA成功被染上紫色,染色较深,视野背景为白色无红色颗粒较为清晰,视野中无气泡。处于分裂时期的细胞约占10%,分裂期的细胞染色体染色较深,而分裂间期的染色较浅,中间有1-3个白斑为核仁。

②结果评价:较成功

③结果分析:在物镜10倍观察下可以清晰反映出压片的结果与染色的情况。在压片前要注意用亚硫酸水把染液冲洗干净,防止背景一片红,不利于观察,压片时先把根尖捣碎,防止细胞堆积;在压片时要固定好盖玻片防止盖玻片与载玻片之间发生摩擦,防止细胞变形,同时也要注意力度的把握和敲击的方向,垂直敲打,且从中间到边缘。染色的时间要足够长,这是我实验时制作的第二张装片,染色时间为18min,第一张为10min,染色较浅,不利于观察。视野中,由于分裂

期的染色质高度螺旋为染色体,DNA浓度较高,所以分裂期的染色体染色较深,而分裂间期的细胞,DNA分裂较为均匀,所以染色较为均匀且相对浅,中间的白斑为核仁,因为核仁中主要为rRNA,所以不被染成紫色。

A B C D

E F G H

I J K L

M N O P

图2.洋葱根尖分生区孚尔根DNA染色有丝分裂过程(10×40倍)

①结果描述:

A间期:DNA均匀分部于细胞核中,核仁明显,为透明发亮圆形,可见1—3个。B-E前期:细胞核膨大,染色质缩短变粗,晚前期(D、E)核仁、核膜消失。

F-G中期:染色体缩短变粗,形成姐妹染色单体,整齐排列与赤道板上。

H-L后期:着丝粒分裂,姐妹染色单体分离,分别移向细胞两极。

M-P末期:染色体解旋为染色质,核仁核膜重新出现,细胞中间形成细胞板。②结果分析:由于细胞的有丝分裂是一个动态变化过程,所以各个时期之间都存在一个过度的过程。间期细胞DNA分布均匀,所以染色均匀,核仁主要为rRNA 所以为透明白色;前期细胞变化较为明显,核纤层被磷酸化,核膜解体,早前期是染色质的状态,晚前期则为染色体状态。晚前期到后期均为染色体状态,所以染色都较深;后期也是一个很明显的动态时期,所以在压片中会有许多不同程度的两套染色体分离情况。末期时,核仁组织区DNA解凝聚,rRNA合成重新开始,所以,核仁重新出现,细胞板最终形成细胞壁。

6.2染色体制备

①结果描述:该染色体制备的结果为其他同学所制备的,视野中染色体没有很好的分散开,有些还处于重叠的状态不能很好地分辨出16条染色体,但总体还算成功,染色较深,背景较清晰,染色体性状多成弧形。

②结果评价:不够理想

③结果分析:由于染色体制备所用的是标准中期的染色体,所以染色体能很好地分离且保持中期时的弧形状态。但制片的结果中并不能完全数到16条染色体,而是多于16条,可能是由于在压片时用力过度把染色体压断了,可以利用铅笔的橡皮头敲打。且制片结果染色体并没有很好分散,可能是因为在制备时装片内的水分过少,导致染色体无法分离,可以在压片时用刀片轻轻掀开盖玻片,滴加1-2滴亚硫酸水后再压片。

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